CROMATOGRAFÍA

SEMINARIO DE TÉCNICAS
PARA SÍNTESIS

L ABORATORIO DE QUÍMICA
ORGÁNICA

PA B L O C O N T R E R A S Y A N A M A R Í A VA L L E J O Esta foto de Autor desconocido está bajo licencia CC BY-SA

1. Cromatografía: Método usado principalmente
para la separación de los componentes de una
muestra, en el cual los componentes son
distribuidos entre dos fases, una de las cuales es
estacionaria, mientras que la otra es móvil.

2. La fase estacionaria: sólido o un líquido

soportado en un sólido o en un gel (matriz),
puede ser empaquetada en una columna,
extendida en una capa, distribuida como una
CONCEPTOS:
película, entre otros.

3. Fase móvil:Viaja a través de una

dirección definida, puede ser líquido, gas e
influye su polaridad.
• La cromatografía puede ser clasificada por su
utilidad y en base al material que se utilice como
eluyente para separar los solutos. De acuerdo a
su utilidad la cromatografía se clasifica en:
1. Analítica: Determinar los químicos presentes
en una mezcla y en que concentración.
2. Preparativa: Purificar grandes cantidades de
químicos.

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La fase móvil. La fase estacionaria.

Migración diferencial entre los

componentes de la mezcla es el
resultado del sistema cromatográfico.
MECANISMO:

El movimiento de dos fuerzas

oponibles.
FUNDAMENTOS TEÓRICOS:
Se han propuesto
muchas teorías con Teoría de las placas teóricas (Martin y
complejos modelos Synge).
matemáticos para
explicar el Teoría cinética (Van Deenter, Zuiderweg,
comportamiento
de los solutos en Klinkenberg y Sjenitzer).
las columnas
cromatográficas.
Las más estudiadas
Teoría desarrollada para columnas capilares
son: (Golay).
Coeficiente
Factor de Relación Tiempo
de Reparto
capacidad (k’) frontal (Rf ) muerto ( tm)
(K)

Volumen de
Retención
retención Resolución Eficacia
relativa (rx:p)
(VR)

CONCEPTOS GENERALIZADOS:
 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCD):

• Se usan como pequeños modelos para

probar eluyentes.
• Utiliza una placa metálica cubierta con la fase
estacionaría.
• La separación se da por capilaridad, mientras
los eluyentes suben por la placa.
• Tras ver la separación se escala a una
columna.
• Alta sensibilidad y rapidez y bajo costo.
• Eluyentes y disolventes pueden perderse por
su alta volatilidad.
 Medir grado de pureza.

Análisis bioquímico.

APLICACIONES: Cosméticos.

Síntesis de compuestos con aplicaciones

farmacéuticas.

Identificación de alguna sustancia

desconocida.
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC):

• Usa el eluyente descubierto en CCD pero a nivel

macroscópico.
• Se llena la columna con la fase estacionaria y en cima
se vierte un poco se muestra y encima el eluyente.
• La separación se da gracias a la gravedad.
• Se recoge en fracciones para minimizar errores.
• Gran estabilidad de fase estacionaria, no hay
deterioro, permite separación en matrices acuosas
• Solo se usa para compuestos coloridos
APLICACIONES:

PURIFICACIÓN DE AISLAR INDUSTRIA MÉTODO

COMPUESTOS. COMPUESTOS FARMACÉUTICA. DIDÁCTICO.
NOVEDOSOS.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA EFICACIA:
FASE NORMAL:
• Líquido (fase móvil) mezclado con un solido
o líquido inmiscible (fase estacionaria).
• Varían de velocidad al moverse con la fase
móvil, depende de su afinidad.
• Proceso rápido y fácil de leer.
• Difícil detectar coelución, procesos de alto
costo y personal especializado.
• La fase estacionaria presenta un a naturaleza
de alta polaridad, como sílice o alúmina.
FASE REVERSA:
• Líquido (fase móvil) mezclado con un
solido o líquido inmiscible (fase
estacionaria).
• Varían de velocidad al moverse con la
fase móvil, depende de su afinidad.
• Proceso rápido y fácil de leer.
• Difícil detectar coelución, procesos de
alto costo y personal especializado.
• Fase estacionaria presenta una
naturaleza de baja polaridad, o
naturaleza apolar, como cadenas
hidrocarbonadas y fenilos.
 Industria farmacéutica: Alcaloides,
esteroides, aminoácidos, proteínas y ácidos
nucleicos.

Análisis de pesticidas y herbicidas.

APLICACIONES:
Separación de Isómeros.

Vitaminas, pigmentos, aceites esenciales,

aditivos no polares en distintos productos
comerciales y formulaciones farmacéuticas.
 REVELADORES:
1. UV
2. Yodo
3. Ácido Sulfúrico
4. Fluorescencia
5. Ninhidrina
6. Reactivo de Brady
7. Verde de bromocresol
8. Paradimetil amino benzaldehído
9. Índice de Refracción
10. Electroquímicos
11. Conductividad
Fluorescencia Electroquímica

Conductividad
SOLVENTES CC - CCD:

Éter de Tetracloruro de Acetato de

Éter dietílico Ciclohexano
petróleo Carbono Etilo

Piridina Cloroformo Diclorometano Benceno Etanol

Metanol Agua Ácido acético.

SOLVENTES ALTA EFICACIA:

ACETONITRILO ACETONA HEXANO TOLUENO CLORURO DE

METILO
 BIBLIOGRAFÍA:
1. Pomilio, A. (s. f.). Metodos Experimentales de Laboratorio en Quimica Orgánica.
2. Furnis, B. S., Hannaford, A. J., Smith, P. W. J., & Tatchell, A. R. (1989). Vogel’s Textbook of Practical Organic Chemistry (5ta
Edición).
3. Pavia, D., Lampman, G., Kris, G., & Engel, R. (2011). A Small Scale Approach to Organic Laboratory Techniques (Third Edition).
4. SENA, S. N. de A. (2016). GUÍA SOBRE PRINCIPIOS BÁSICOS DE CROMATOGRAFÍA Y SUS APLICACIONES. Recuperado de
https://repositorio.sena.edu.co/bitstream/11404/4694/1/guia_cromatografia.pdf
5. Universidad Nacional Autónoma de México. (2019). Técnicas Cromatográficas. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
6. Universidad de Salamanca. (2019). Cromatografía líquida. Recuperado de http://ocw.usal.es/ciencias-
experimentales/analisis-aplicado-a-la-ingenieria-quimica/contenidos/course_files/Tema_12.pdf