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ENZIMAS

CONCEPTO DE ENZIMA
- Las enzimas son catalizadores muy potentes y
eficaces.
- Químicamente casi todas son proteínas.
- Como catalizadores, las enzimas actúan en
pequeña cantidad y se recuperan
indefinidamente.
- No llevan a cabo reacciones que sean
energéticamente desfavorables.
- No modifican el sentido de los equilibrios
químicos, sino que aceleran su consecución.
REACCIÓN CATALIZADA
POR UNA ENZIMA.
CATALIZADOR
- Un catalizador es una sustancia que acelera
una reacción química, hasta hacerla
instantánea o casi instantánea.

- Un catalizador acelera la reacción al


disminuir la energía de activación.
La enzima disminuye la energía de
activación
Sin enzima
Con enzima

• La Ea de la hidrólisis de la urea
baja de 30 a 11 kcal/mol con la
E+S acción de las enzimas, acelerando
la reacción 1014 x
• El aumento de temperatura
necesario para producir la reacción
E+P no catalizada seria de 529ºC
Tiempo de la reacción
Enzima - Catalizador
 Tanto la enzima como el catalizador
aceleran la velocidad de una reacción
química.
 Una enzima puede transformar 1000
moléculas de sustrato/ segundo
 Las enzimas tienen 3 propiedades que los
catalizadores NO tienen
• Especificidad por el sustrato
• Se inactivan por desnaturación
• Pueden ser reguladas
 Las enzimas se unen a los reactivos
(sustratos) reduciendo la energía de
activación

 Cada enzima tiene una forma única


con un sitio o centro activo en el que
se une al sustrato

 Después de la reacción, enzimas y


productos se separan.

 Las moléculas enzimáticas no han


cambiado después de participar en la
reacción
Las enzimas cumplen su papel catalítico gracias a:
• Fijación estereoquímicamente complementaria
del substrato
• Transformación catalítica del mismo

En ambas funciones participan:

• Cadenas laterales de los aminoácidos


• Grupos o moléculas no proteicas:
 Grupos prostéticos
 Iones metálicos
 Cofactores
-En una transformación dada de "A" a "P" , "A"
representa las moléculas reaccionantes, que
constituyen el estado inicial.

-"P" representa los productos o estado final.

-La reacción química de A a P es un proceso


posible si la energía de P es menor que la de A.
-Pero hay una barrera de energía que los separa;
si no es por ella, A no existiría, puesto que no
sería estable y se habría transformado en P.

- Este escollo es una barrera energética, la


energía de activación (EA), corresponde al estado
de transición.
CARACTERÍSTICAS DE LA
ACCIÓN ENZIMÁTICA
La característica más sobresaliente de las
enzimas es su elevada especificidad. Esta es
doble, y explica que no se formen subproductos:

1. Especificidad de sustrato. El sustrato (S) es la


molécula sobre la que el enzima ejerce su
acción catalítica.
2. Especificidad de acción. Cada reacción está
catalizada por una enzima especifica.
La acción enzimática se caracteriza por la
formación de un complejo que representa el
estado de transición.
E+S ES E+P

- El sustrato se une a la enzima a través de


numerosas interacciones débiles como son:
puentes de hidrógeno, electrostáticas, hidrófobas,
etc, en un lugar específico, el centro activo.
- Este centro es una pequeña porción de la
enzima, constituído por una serie de aminoácidos
que interaccionan con el sustrato.
Algunas enzimas actúan con la ayuda de
estructuras no protéicas. En función de su
naturaleza se denominan:

1. Cofactor. Cuando se trata de iones o moléculas


inorgánicas.
2. Coenzima. Cuando es una molécula orgánica.
Aquí se puede señalar, que muchas vitaminas
funcionan como coenzimas; y realmente las
deficiencias producidas por la falta de vitaminas
responde más bien a que no se puede sintetizar
una determinada enzima en el que la vitamina
es el coenzima.
VITAMINAS

Algunas vitaminas son necesarias para la


actuación de determinados enzimas, ya que
funcionan como coenzimas que intervienen en
distintas rutas metabólicas y, por ello, una
deficiencia en una vitamina puede originar
importantes defectos metabólicos, como puede
verse en la tabla adjunta:
Teorías de la acción enzimática, 1
Modelo de Llave y Cerradura (Emil Fischer)

Substrato y enzima se acoplan de forma estereospecífica,


de la misma manera que una llave se ajusta a su
cerradura.

Modelo aceptado durante mucho tiempo; hoy se


considera insuficiente al no explicar algunos fenómenos
de la inhibición enzimática
Teorías de la acción enzimática, 2
Modelo de Ajuste Inducido (Koshland)

Tanto la enzima como el substrato sufren una alteración


en su estructura por el hecho físico de la unión.

Está mucho más de acuerdo con todos los datos


experimentales conocidos hasta el momento.
Teorías de la acción enzimática, 3
Estabilización del Estado de Transición

La teoría del Ajuste Inducido se amplía en la actualidad


definiendo la acción enzimática como

Según lo cual, el Centro Activo enzimático es en realidad


complementario no al substrato o al producto, sino al
estado de transición entre ambos.
La unión del sustrato es muy
específica

 Complementariedad geométrica
 Complementariedad de cargas, uniones
iónicas
 Modelos:
 Encaje inducido
 Llave – cerradura.
 Estado de transición
Una enzima puede unir dos sustratos
en su sitio activo
EFECTO DEL pH Y TEMPERATURA
1. Efecto del pH. Al comprobar experimentalmente la influencia del pH
en la velocidad de las reacciones enzimáticas se obtienen curvas
que indican que las enzimas presentan un pH óptimo de actividad. El
pH puede afectarse de varias maneras:
o El centro activo puede contener aminoácidos con grupos ionizados
que pueden variar con el pH.
o La ionización de aminoácidos que no están en el centro activo puede
provocar modificaciones en la conformación de la enzima.
o El sustrato puede verse afectado por las variaciones del pH.
Algunas enzimas presentan variaciones peculiares. La pepsina
del estómago, presenta un óptimo a pH=2, y la fosfatasa alcalina
del intestino a un pH= 12
2. La temperatura. Influye en la actividad. El punto
óptimo representa el máximo de actividad. A
temperaturas bajas, las enzimas se hallan "muy rígidas"
y cuando se supera un valor considerable (mayor de 50
oC) la actividad cae bruscamente porque, como

proteína, la enzima se desnaturaliza.


EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUBSTRATO
SOBRE LA CATALISIS ENZIMATICA
Si se mantiene la concentración de la enzima constante y se varia la concentración de
substrato se obtiene una curva hiperbólica como la de la figura .
Al principio un aumento de la concentración de substrato produce un aumento rápido de
la velocidad de reacción, pero si se sigue aumentando la concentración de substrato, la
velocidad de reacción comienza a disminuir y a muy altas concentraciones de substrato se
observa que no cambia la velocidad de reacción, se dice que los centros activos de la
enzima se encuentran saturados.
EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUBSTRATO
SOBRE LA CATALISIS ENZIMATICA

La velocidad de reacción que se obtiene a esa alta concentración de


substrato se define como la velocidad máxima (V) de la reacción
enzimática bajo las condiciones especificadas.
La concentración de substrato (S), a la velocidad media (V/2) se puede
determinar en la figura y representa la constante de Michaelis o Km, la
cual es una característica para cada enzima.
La inversa de Km, o 1/Km, mide aproximadamente la afinidad de la
enzima por el substrato. Mientras más pequeño sea el valor de Km,
mayor será la afinidad de la enzima por el substrato.
Si varias enzimas compiten en el metabolismo por el mismo substrato,
éste será transformado preferentemente por la enzima con mayor
afinidad.
CLASIFICACIÓN DE ENZIMAS
1. Óxido-reductasas
Si una molécula se reduce, tiene
(Reacciones de
que haber otra que se oxide
oxido-reducción).

2. Transferasas · grupos aldehídos


(Transferencia de · grupos acilos
grupos funcionales) · grupos glucósidos
· grupos fosfatos (kinasas)
Transforman polímeros en
monómeros.
3. Hidrolasas Actúan sobre:
(Reacciones de · enlace Ester
hidrólisis) · enlace glucosídico
· enlace peptídico
· enlace C-N

4. Liasas · Entre C y C
(Adición a los dobles · Entre C y O
enlaces) · Entre C y N
5. Isomerasas
(Reacciones de isomerización)

6. Ligasas · Entre C y O
(Formación de enlaces, con aporte de · Entre C y S
· Entre C y N
ATP)
· Entre C y C
Cinética Enzimática
Cinética Enzimática
 La cinética enzimática es el análisis cuantitativo del efecto
de cada uno de los factores que intervienen en la actividad
enzimática, que se evalúa a través de la velocidad de la
reacción catalizada.
 Las variables más importantes son:
• Concentración de enzima, sustratos y productos
(incluyendo inhibidores y/o activadores)
• pH
• Temperatura
Baja
concentración
de sustrato

ALTA
concentración
de sustrato
SATURACION
INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Inhibidores: Sustancias que disminuyen la


velocidad de la reacción enzimática

Hay dos tipos de inhibidores enzimáticos:


• Reversibles : competitivos y no competitivos
• Irreversibles
Inhibidores irreversibles
* Unión enzima-inhibidor covalente.
* Se modifica permanente algún grupo
funcional indispensable para la catálisis.
* La inhibición no revierte al retirar el
inhibidor de la mezcla de reacción.
* La inhibición progresa con el tiempo y
puede llegar a ser completa.

Inhibidores reversibles
* Unión enzima y (o) complejo ES - inhibidor
no covalente.
* La inhibición revierte por diálisis o dilución.
* Altamente específica.
INHIBIDORES REVERSIBLES COMPETITIVOS
Unión del Inhibidor al centro activo, el inhibidor compite con el S

“Bioquímica” Mathews, van Holde y Ahern. Addison Wesley 2002


INHIBIDORES REVERSIBLES NO COMPETITIVOS

Unión del Inhibidor a


un segundo lugar (no
al centro activo), el
inhibidor no compite
con el S:

“Bioquímica” Mathews, van Holde y Ahern. Addison Wesley 2002