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La diferencia entre la
radioactividad en el
control y la muestra
desconocida es
proporcional a la
cantidad de antígeno no
marcado en la muestra
desconocida
Cantidad conocida de El antígeno no marcado Es la suma de anti-
antígeno marcado compite con el antígeno inmunoglobulina precipita al
mezclado con una marcado por el anticuerpo complejo anticuerpo-antígeno
cantidad desconocida de que contiene el antígeno
antígenos. marcado y no marcado
RIA COMPETITIVO O DIRECTO
FINALIDAD: detectar Ag en
la muestra empleando RIA EN FASE LÍQUIDA.
isótopos radiactivos. Ensayos fundamentales:
FUNDAMENTO: Uso de Ag* Titulación del antisuero: incubar diferentes
que competirá con Ag por concentraciones de Ac con el Ag* marcado y valorado
unirse a Ab Tanto el reactivo para seleccionar la concentración de Ac óptima (para el
del antígeno marcado (Ag*) desarrollo posterior de la prueba.
como la muestra sin marcar Ensayo de desplazamiento: incubación conjunta del Ag*
compiten por una cantidad marcado y valorado, el antisuero previamente titulado (Ac
limitada de anticuerpo. Si la valorado) y la muestra problema que contiene el Ag a
muestra contiene más determinar.
antígeno frío (no marcado), A mayor concentración de Ag en el suero problema,
éste competirá con el mayor concentración de Ag* libre. Para medir el Ag* libre,
marcado para unirse al se elimina el Ag* unido mediante precipitación de los IC.
anticuerpo, y se observará un
descenso en la medida de la
radioactividad
RIA NO COMPETITIVO O INDIRECTO
Etapa1:Fijar el
antígeno (reactivo) a
la superficie
Etapa2: lavar
Etapa3: Añadir el
suero sospechoso
que contenga el
anticuerpo
Etapa4: Lavar para eliminar el exceso de suero
Etapa5: Añadir el
anti- anticuerpo
(reactivo2) marcado
radiactivamente
Etapa 7: recuento,
detección de
radioactividad
electroforesis en el
papel o acetato de cromatografía,
celulosa, difusión en gel
Insulina
HORMONAS Secretina
Cortisol (hormona esteroidea)
Testosterona (hormona esteroidea)
• Antisépticos
MEDICAMENTOS • Antibióticos
• Antidepresivos
• Tranquilizantes
• Esteroides anabólicos