micosis, cuando haya datos sugestivos de una micosis que afecte el sistema nervioso central (criptococosis), o por diseminación (blastomicosis e histoplasmosis), o bien que afecte las estructuras sinoviales y otros órganos (candidosis y prototecosis). El volumen de muestra requerido debe ser por lo menos de 0.5 ml, ya que una cantidad inferior es insufi ciente para realizar exámenes directos, tinciones y cultivos. La muestra debe procesarse el mismo día, de preferencia dentro de las dos primeras horas, para obtener óptimos resultados en la identifi cación y recuperación de agentes etiológicos. EXUDADOS Se deben recolectar con asa micológica estéril o cucharillas, o si son abundantes, mediante aspiración con una jeringa estéril desechable; en el caso de abscesos o nódulos, se debe realizar asepsia y antisepsia de la superficie de la lesión con una torunda impregnada con etanol o isopropanol; posteriormente se levantan las costras, si las hay, y se colecta el material; éste se puede procesar de inmediato o bien transportarlo en la misma jeringa o en un tubo con SSI estéril o algún medio de transporte como el de Stuart. ORINA Se debe considerar en el caso de micosis, como candidosis y otras infecciones por levaduras. La recolección debe realizarse en recipientes adecuados, por ejemplo, en bolsas de recolección urinaria (pacientes pediátricos), por punción suprapúbica, previa asepsia y antisepsia de la piel, o de los catéteres urinarios con jeringas estériles. Al igual que los fluidos anteriores, la muestra debe procesarse el mismo día, de preferencia en el transcurso de las dos primeras horas posteriores a su emisión. SANGRE En el caso de sospecha de fungemia, es necesaria la recolección de sangre en condiciones especiales. El uso de anticoagulantes es importante para obtener una muestra útil, y realizar con ella exámenes directos, tinciones y cultivos en medios bifásicos o bien agar. Si la muestra se encuentra coagulada, los hongos que generan invasión intracelular pueden no ser visualizados ni recuperados en cultivos, con lo cual la sensibilidad de los estudios baja. MEDULA ÓSEA Muy útil para micosis diseminadas (histoplasmosis, blastomicosis, paracoccidioidomicosis), en especial las que afectan el sistema reticuloendotelial, y que por lo regular se presentan en pacientes severamente inmunosuprimidos. El cultivo es de alta sensibilidad y, por tanto, establece el diagnóstico. La muestra solicitada deberá ser recolectada en tubos con anticoagulante, para después realizar exámenes directos, tinciones y cultivos; las muestras coaguladas no deberán procesarse, pues pierden su valor diagnóstico. METENAMINA DE PLATA (GROMORI- GROCOT) Al igual que la tinción de PAS, se considera una tinción de rutina para la identificación de la mayoría de las micosis. Las estructuras micóticas tienden a tomar una tonalidad negra por la oxidación de la plata, permitiendo una visión más clara y su fácil localización en los materiales biológicos teñidos. sin embargo, puede tener limitaciones sobre estructuras intracelulares. Esta tinción se considera la de elección para el diagnóstico de la neumocistosis; se hace a partir de LBA y también es muy útil en los casos de paracoccidioidomicosis y mucormicosis.