• ENRIQUE FERNEY YELA

• YINA GABRIELA URBANO

La proteína debe aislarse en un estado
relativamente puro antes de poder obtener
información de la estructura o la función de
una proteína particular.

Actividad específica: total de proteína en la

muestra
prueba: que tanta proteína hay en la muestra.
 Figura 1.

PURIFICACIÓN DE FRACCIONES SUBCELULARES POR

CENTRIFUGACIÓN DE EQUILIBRIO CON GRADIENTE DE
DENSIDAD.
Figura 2.

LA PARTÍCULA DE 20 000 G SE OBTIENE

COMO SE MUESTRA EN LA FIGURA 2.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA EN COLUMNA

En los tipos de cromatografía

líquida existen 2 fases
alternativas; una fase inmóvil y
una fase móvil.

Como las diferentes proteínas que

se encuentra en la matriz, tienen
distintas afinidades por esta, se
retrasan en diferente medida.

En el H.P.L.C se utilizan columnas largas y delgadas, la fase movil pasa

por una matriz apretada la cual se encuentra a alta presion
CROMATOGRAFÍA POR INTERCAMBIO
IÓNICO
La carga iónica es una base para
este método, se utilizan 2 resinas
de intercambio iónico la D.E.A.E la
cual tiene cargas positivas gracias
a esto se une a las cargas
negativas (intercambiador de
aniones ) y C.M el cual tiene
cargas negativas (intercambiador
de cationes)

Las proteínas se extraen en orden de unión de la

menos fuerte a la más fuerte.
 CROMATOGRAFÍA DE FILTRACIÓN
EN GEL
Este método separa proteínas
con base a su tamaño efectivo,
en esta técnica se utilizan los
oligosacáridos con enlaces
cruzados de distinta porosidad.

Las proteínas más pequeñas se retrasan más que las grandes, de

esta forma se puede extraer la proteína purificada deseada.
 CROMATOGRAFÍA POR AFINIDAD

Este método aprovecha las

propiedades únicas de una
proteína, provocando que solo
una especie de proteína se
retire de manera específica de
la solución

Este procedimiento purifica casi toda la molécula en un solo paso

DETERMINACIÓN DE LAS INTERACCIONES
PROTEÍNA-PROTEÍNA
ELECTROFORESIS EN EL GEL POLIACRILAMIDA

Es un procedimiento por el cual se puede

separar una mezcla de varios tipos de
proteínas diferentes de acuerdo a su peso
molecular el cual esta relacionado con la
longitud de su secuencia de aminoácidos
ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
EN GEL

Este método es ideal para

detectar cambios en las
proteínas presentes en una
célula en distintas
condiciones, etapas de
desarrollo o ciclo celular

.
para identificar la cantidad de proteínas o de ácidos nucleicos presentes
en una solución se mide la cantidad de luz de una longitud de onda
específica que absorbe esta solución, para esto se emplea el
espectrómetro
PRINCIPIOS DE OPERACIÓN DE UN
ESPECTRÓMETRO DE MASA
los espectros de masa son
instrumentos analiticos que sirven
para medir las masas de moléculas,
determinar fórmulas químicas,
estructuras moleculares e
identificar sustancias desconocidas
 REFERENCIAS
● Karp,G.(2008). biología celular y molecular, conceptos y
experimentos, quinta edición. México, McGraw Hill.

● Jimenez,G.I.F y Merchant, L.H Biología celular y molecular. Pearson

education. México 2003.

● Luque, J y Herrera, A. (2001). texto ilustrado de biología molecular.

España. Ed. Harcourt
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POR LOS BELLOS
MOMENTOS