SEMINAR ARTIKEL

Antiooxidant, Anti-diabetic and renal protective

properties of Stevia rebaudiana

Oleh Lilik Sulastri

5419230002

PROGRAM DOKTOR FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PANCASILA
JAKARTA
2019
 Stevia
Asli Amerika selatan

Aglikon dan Stevioside

Daun manis, Glikosida Rebaudioside A
daun madu, Non kalori Dulkoside A
daun gula Flavonoid Steviol
Vitamin C Steviol glikosida

Asteraceae
 KLASIFIKASI

Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiosperma
Kelas : Dicothyledone
Ordo : Asterales
Famili : Composite
Genus : Stevia
Spesies : Stevia rebaudiana
Bertonii M

3
 Antibakteri
Antioksidan
Khasiat
Antidiabetes
Antikanker
Stevia Alkaloid
Steroid
Kandungan Saponin
Tanin
Flavonoid 4
 Latar Belakang

Stevia Antidiabetes dan Belum terbukti

komplikasinya secara jelas

Aman dan efektif

Sumber potensial
stress oksidatif
Streptozotocin
Induksi
genotoksisitas

Suplemen ekstrak Turunkan diabetes

Hipotesis polifenol dan komplikasinya

5
 Stevia extracts
glucose O glucose
O glucose
O glucose
Rebaudioside A Stevioside
glucose O

O CH2
CH3
CH2
CH3
H
H
H
O CH3
H
O CH3 glucose O
glucose O

Ekstrak air Stevia  steviol glikosida (persen tertinggi) dibanding

stevioside and rebaudioside A

6
7
8
Metabolisme steviol glikosida

9
11
 Analisis Proksimat
Stevia

Kadar air Serbuk stevia

Kadar abu Kadar bahan organik

Lemak kasar
Karoten
Protein kasar
Klorofil Gula
Asam amino Serat kasar
Vitamin C Pati
Vitamin A glikogen
Flavonoid
fenol 12
 Adaptasi

Serbuk Polifenil Ekstrak

kontrol
stevia stevia sstevia

Hari ke-31 STZ 60 mg/kg BB

Antio Anti Renal Hepato

oksidan diabetes protektif protektif

SOD, Kadar Fungsi

Fungsi
MDA, glukosa hati
ginjal
GSH 13
 Parameters studied: (Liver / Heart / Kidney)
Antioxidant enzymes:
Lipid peroxidation:
 SOD
 MDA
 GST
 Hydroperoxides
 Catalase
 Conjugated dienes
 GSHPx
Antioxidant metabolites or
 GSSGR
molecules:
 G-6-PDH
 GSH
Serum / Plasma
 Vitamin C
 Glucose
Liver
 Lipid profile
 1. Glycogen
 SGOT
 SGPT

14
15
Komposisi Proksimat

16
 Phenolic compounds identification in Stevia leaves
DAD1 - A: Signal A DFRL Sample-S_001-r001.d
x10 2

7.552
2

1.8

1.6

1.4

7.165
1.2

8.975
0.8 7.655

0.6

11.233
9.405
8.904

11.350
8.621

0.4
9.110
8.325
1.124

1.548

10.190
3.216

10.289

11.447
9.166
8.577
8.793

9.230
7.369

9.621

11.048

12.258
3.092
2.964

4.750

14.026

16.886
6.821

9.902
6.134
0.952
1.014
1.066
1.191
1.227
1.452

0.2

-0.2
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5 9 9.5 10 10.5 11 11.5 12 12.5 13 13.5 14 14.5 15 15.5 16 16.5 17 17.5 18
Response Units vs. Acquisition Time (min) 17
 -ESI Product Ion:4 (2.866 min) Frag=80.0V CID@8.0 (353.0 -> **) DFRL Sample-S_MSMS_001.d
x10 5

1.5
1.25 191.0

1 1-O-Caffeoylquinic acid or 1-Chlorogenic acid

0.75
0.5
0.25
135.1 179.0 352.9
0
-ESI Product Ion:4 (3.210 min) Frag=80.0V CID@8.0 (353.0 -> **) DFRL Sample-S_MSMS_001.d
x10 5

1.5
191.1
1.25
1
0.75
3-O-Caffeoylquinic acid or 3-Chlorogenic acid
0.5
0.25
0 160.9 178.8 353.0
-ESI Product Ion:4 (4.658 min) Frag=80.0V CID@8.0 (353.0 -> **) DFRL Sample-S_MSMS_001.d
x10 4

4
173.0

3 4-O-Caffeoylquinic acid or 4-Chlorogenic acid

2 191.0
135.0
1 353.1

111.0 155.0
0
100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360
Counts vs. Mass-to-Charge (m/z) 18
 Antioxidant activity (in-vitro) of Stevia leaves (n=3)

EC50 (mg)
Antioxidant properties of Stevia
Stevia BHA* BHT* TBHQ*

1. Lipid per-oxidation inhibition property 2.6 + 0.05 2.9 + 0.04 2.2 + 0.02 3.8 + 0.02

2. Free radical scavenging property

10.6 + 1.91 13.0 + 1.72 43.2 + 2.84 8.6 + 0.11
(DPPH scavenging)

*Synthetic antioxidants such as butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT) and Tertiary
butyl hydroquinone (TBHQ). 19
Effect of Stevia on lipid peroxidation in liver in treated rats (n=8)

TBARS Hydroperoxides Conjugated dienes

(x 10-10 moles / g) (x 10-4 moles / (x 10-4 moles /
g) g)
Control 0.06 + 0.01a 0.07 + 0.02a 0.12 + 0.02a
Streptozotocin 0.16 + 0.03* 0.17 + 0.03* 0.24 + 0.06*
Stevia leaves Powder 0.08 + 0.02a 0.11 + 0.03 0.09 + 0.02a
+ Stevia leaves Powder 0.12 + 0.03* 0.10 + 0.02a 0.17 + 0.04a
Stevia leaves 0.07 + 0.01a 0.09 + 0.02 0.10 + 0.02a
polyphenols
+ Stevia leaves 0.11 + 0.02* 0.08 + 0.01a 0.14 + 0.03a
polyphenols
Stevia leaves fiber 0.05 + 0.01a 0.08 + 0.02a 0.15 + 0.03a
+ Stevia leaves fiber 0.17 + 0.02* 0.15 + 0.03* 0.25 + 0.05*

20
Effect of stevia on Anti-diabetic action in treated rats (n=8)
 
Control Stevia STZ STZ + Stevia STZ + Stevia STZ +
Stevia polyphe Stevia fiber Stevia
leaves nol polyphen fiber
powder ol
Weight gain
25.8 + 25.7 + 6.8 + 11.7 + 21.5 + 10.3 + 22.5 + 6.0 +
(g/week)
9.70 14.3 1.8*a 1.60*a 11.4 0.95*a 9.12 2.1*a
Food intake
9.4 + 3.7 10.2 + 13 + 1.9 11 + 3.3 9.8 + 10.1 + 9.1 + 2.6 11 + 1.1
(g/day)
3.00 2.50 2.3
Water intake
27.9 + 20.8 + 59.5 + 42.6 + 22.1 + 52.6 + 25.1 + 55.2 +
(ml/day)
16.1 13.3 28.4*a 23.3*a 16.1 25.2*a 14.3 22.1*a
Urine volume
39.0 + 31.1 + 98.4 + 57.2 + 28.3 + 53.1 + 42.2 + 89.9 +
(ml/24hrs)
17.7 14.7 27.9*a 16.8*a 11.6 11.5*a 15.1 17.8*a
Blood glucose
109.2 + 99.8 + 356.3 + 228.2 + 101.4 + 129.2 + 99.3 + 342.0 +
(mg/dl)
29.60 22.0 65.40*a 22.10*a 17.2 12.50*a 10.46 42.50*
21
a
Effect of stevia on kidney functions in treated rats (n=8)
 
Control Stevia STZ + Stevia Stevia + Stevia Stevia + Stevia
leaves polyphe polyphenol fiber fiber
powder nol
Plasma
0.47 + 0.40 + 0.14 0.57 + 0.02 0.53 + 0.12 0.50 + 0.45 + 0.09 0.48 + 0.60 + 0.10
Creatine
0.11 0.22 0.08
Urinary
0.071 + 0.082 + 0.058 + 0.062 + 0.080 + 0.059 + 0.069 + 0.059 +
Creatine
0.003 0.014 0.002*a 0.002*a 0.01 0.008*a 0.01 0.004*a
GFR
5.55 + 6.42 + 4.56 + 4.89 + 0.18a 6.01 + 4.95 + 5.49 + 4.44 +
(ml/min/kg
body wt) 0.24a 0.32* 0.77a 0.12* 0.06a 0.11a 0.20a

22
23
24
25
 Effect of Stevia leaves on hepatic marker enzymes of STZ treated rats (n=8)

80

70 SGOT
SGPT
60

50
IU/dl

40

30

20

10

0
Control Stz Stz + Stevia Stevia Stz + polyphenol Stz + fiber fiber
polyphenol

26
 kesimpulan

Stevia rebaudiana
Turunkan glukosa darah
Kurangi stress oksidatif
Perbaiki kerusakan hati
dan ginjal

27
 Satu tanaman tunggal beragam manfaat
 Mekanisme kerja serbuk stevia
menonaktifkan STZ dalam darah?
 Sumber bahan nutraceutical yang bagik
 Polifenol memiliki peran penting dalam
multi manfaat

28
Terima Kasih

29
 Senyawa kimia Stevia
OH
HO O O
OH OH
H
HO HO OH
O HO OH
O
OH OH
HO
O O O
H H
HO O OH
H
H
HO
O
H O O HO OH

OH
steviolbioside

O OH H
HO
H
O

HO OH HO O O
OH
OH
HO OH
dulcoside rebaudioside 30
 OH
HO OH

OH HO OH
O O O
H H
HO O O HO O OH
OH
H H
HO HO
O HO OH O O HO OH
O
OH

H
H
H
O
H HO O O
O OH
OH
steviolbioside HO OH
rebaudioside A
31
32
• Streptozotocin  ( STZ ) adalah zat antineoplastik
alkilasi yang terjadi secara alami yang sangat beracun
bagi sel beta pankreas penghasil insulin pada
mamalia. 
•  untuk mengobati kanker tertentu dari pulau
Langerhans 
• Untuk penelitian medis  model hewan untuk 
hiperglikemia dalam dosis besar, serta diabetes tipe
2 atau diabetes tipe 1 dengan beberapa dosis
rendah.
33
• Streptozotocin  glukosamin -nitrosourea . Seperti agen
alkylating lain dalam kelas nitrosourea, itu beracun bagi sel
dengan menyebabkan kerusakan pada DNA , meskipun
mekanisme lain juga dapat berkontribusi. Kerusakan DNA
menginduksi aktivasi PARP yang kemungkinan lebih penting
untuk induksi diabetes daripada kerusakan DNA itu sendiri. [3] 
• Streptozotocin cukup mirip dengan glukosa untuk diangkut ke
dalam sel oleh protein transpor glukosa GLUT2 , tetapi tidak
dikenali oleh transporter glukosa lainnya. Ini menjelaskan
toksisitas relatifnya terhadap sel beta, karena sel-sel ini
memiliki tingkat GLUT2 yang relatif tinggi

34
• Streptozotocin awalnya diidentifikasi pada akhir 1950-an sebagai antibiotik . [6]
 Obat ini ditemukan dalam strain mikroba tanah Streptomyces achromogenes
 oleh para ilmuwan di perusahaan obat Upjohn (sekarang bagian dari Pfizer ) di 
Kalamazoo, Michigan . Sampel tanah di mana mikroba muncul telah diambil dari 
Blue Rapids, Kansas , yang karenanya dapat dianggap sebagai tempat kelahiran
streptozotocin. Upjohn mengajukan perlindungan paten untuk obat tersebut
pada Agustus 1958 dan US Patent 3.027.300 diberikan pada Maret 1962.
Kemajuan terbaru dalam memahami biosintesis produk alami ini telah dibuat
oleh Balskus et al. [7] Singkatnya, penulis menemukan gugus gen yang
 bertanggung jawab untuk produksi Streptozotocin di Streptomyces
achromogenes dan mengidentifikasi fungsi baru dari enzim besi non-heme, SznF,
yang membentuk ikatan NN dalam farmakofor N-nitrosourea oleh penataan
kembali oksidatif.
• Pada pertengahan 1960-an, streptozotocin ditemukan bersifat toksik selektif
terhadap sel beta pulau pankreas, sel-sel yang biasanya mengatur kadar glukosa
darah dengan memproduksi hormon insulin. Ini menyarankan penggunaan obat
sebagai model hewan diabetes, [8] [9] dan sebagai perawatan medis untuk kanker
sel beta. [10] Pada 1960-an dan 1970-an, National Cancer Institute menyelidiki
penggunaan streptozotocin dalam kemoterapi kanker. Upjohn mengajukan
persetujuan FDA untuk streptozotocin sebagai pengobatan untuk kanker sel
pulau pankreas pada November 1976, dan persetujuan diberikan pada Juli 1982.
Obat itu kemudian dipasarkan sebagai Zanosar. 35
Kelas Mekanisme aksi
Biguanide ( metformin )  Meningkatkan efek insulin
Sulfonilurea (mis., Glikburida , glimepiride )  Meningkatkan sekresi insulin dari sel 
-sel β pankreas
Meglitinides ( nateglinide , repaglinide )  Meningkatkan sekresi insulin dari sel 
-sel β pankreas 
Inhibitor DPP-4 ( saxagliptin , sitagliptin )  Menghambat degradasi GLP-1  →
mempromosikan sekresi insulin yang
 bergantung pada glukosa
Agonis GLP-1 ( obat peniru incretin :   Stimulasi langsung dari reseptor GLP-1
exenatide , liraglutide , albiglutide )
Inhibitor SGLT-2 ( canagliflozin ,   Peningkatan glukosuria melalui
dapagliflozin , empagliflozin ) penghambatan SGLT-2 di ginjal
Inhibitor alfa-glukosidase ( acarbose )  Mengurangi penyerapan glukosa usus
Thiazolidinediones ( pioglitazone )  Mengurangi resistensi
insulin melalui stimulasi PPAR ( 
reseptor yang diaktifkan proliferasi 
peroksisom )
 Tingkatkan transkripsi adipokin
Amylin analogs ( pramlintide )  Kurangi pelepasan glukagon
 Kurangi pengosongan lambung 36