Staphylococcus aureus

Laboratorio de Microbiología de
Alimentos
Staphylococcus aureus
Dos Métodos
 Sólido
 > 100 S. aureus/g
 Líquido
 < 100 S. aureus/g
Baird-Parker Agar
 Cloruro de Litio – Selectivo
 S. aureus can tolerate
 Glicina – Selectivo
 S. aureus puede tolerarlo
 Tellurite – Selectivo and Diferencial
 Reducción a telurio (negro)
 Yema de huevo – Diferencial
 S. aureus Rompe la yema de huevo y deja zona clara
Método Sólido - Placas
 Debe utilizarse la técnica de esparcido
 NO puede ponerse 1 ml en la placa
 No se absorverá en el medio
 DEBE distribuirse 1 ml en 3 placas

0.3 0.3 0.4

Método Sólido
 Incube Invertido a 35 C por 45-48 h
 Cuente las placas con 20-200 colonias
 Colonias Grandes
 Colonia típica
 Gris/Negra, suave, circular, convéxa y
húmeda
 2-3 mm díametro
 Zona clara alrededor de la colonia
Método Líquido - MPN
 Medio
 10% NaCl Trypticase Soy Broth
 Utilice 3 Tubos MPN
 Incube a 35 C por 48 h
 Transfiera los positivos (loop) a Baird-
Parker Agar
 Positivos – TSA Agar y Prueba de Catalasa
Prueba de Coagulasa
 Determina si Staph aglutina plasma
 SIEMPRE
 UILICE UN CONTROL POSITIVO
 Coagulasa es una enzima producida por S.
aureus
 Si 4+ - Probablemente sea S. aureus
 1+ to 3+ - Requiere más pruebas
Otras Pruebas
 Fermentación Anaeróbica de Mannitol y Glucosa
 Fermentación de carbohidratos con media
conteniendo 0.5% mannitol/glucosa (dos tubos
separados)
 Producción de ácid, NO gas – Positivo para S. aureus
 Prueba de Catalasa
 Tome de “slant” de medio no-selectivo (TSA)
 Ponga el cultivo en laminilla
 Producción de burbújas - Positivo
Otras Pruebas
 Sensitividad Lisostafin
 Lisostafin es una enzima producida por
OTRAS Staph que causa lisis de S. aureus
 Lysostafin se anade a amortiguador de fosfato
salina
 Incubar 2 horas a 35 C
 Positivo – Tubo claro (lisis)
 Negativo - Turbio
Otras Pruebas
 Prueba de termostabilidad Nucleasaa Test
 Enzima Producida por S. aureus
 Estable al calor
 Degrada DNA
 Hierva un cultivo en BHI por 10 min
 Estriado en Toluinine Blue – Deoxynucleic Acid
Agar
 Incube por 24 h a 35 C
 DNA +Dye – Azul (negativo)
 No DNA – Rosado (positivo)