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Los aminocidos son molculas nitrogenadas simples con cadenas hidrocarbonadas de bajo peso molecular.

Todos los aminocidos, a excepcin de la glicina, tienen dos formas estructurales o estereoismeros: L y D. En las protenas animales todos los aminocidos presentes pertenecen a la serie L. Sin embargo, en ciertos casos el animal dispone de la capacidad enzimtica precisa para aprovechar la forma D, previa transformacin a la forma L correspondiente.

Los aminocidos son las estructuras bsicas de las protenas. Un alfa AA consta de un grupo amino ,un grupo carboxlico ,un tomo de hidrogeno y un grupo distintivo R . Todos ellos unidos al tomo de carbono alfa. El grupo R se menciona como cadena lateral.

Propiedades de los AA
Son solubles en agua y poco en solventes orgnicos. Son compuestos slidos, incoloros , cristalizables; de elevado punto de fusin (por encima de los 200C), Son excelentes amortiguadores ,gracias a la capacidad de disociacin del grupo carboxilo, el grupo amino y otros grupos ionizables de sus cadenas laterales. Los grupos alfa-R determinan las propiedades de los AA son molculas anfteras Presentan actividad ptica. Presentan Carbono asimtrico. Presentan punto isoelctrico. Forman enlaces peptdicos. Los grupos funcionales determinan las reacciones qumicas de los AA

Los aminocidos a pH bajo (cido) se encuentran mayoritariamente en su forma catinica (con carga positiva), y a pH alto (bsico) se encuentran en su forma aninica(con carga negativa). Sin embargo, existe un pH especfico para cada aminocido, donde la carga positiva y la carga negativa son de la misma magnitud y el conjunto de la molcula es elctricamente neutro. En este estado se dice que el aminocido se encuentra en su forma de ion dipolar o zwitterin.

Comportamiento anfotrico

Segn las propiedades de su cadena Neutros polares, polares o hidrfilos : Serina (Ser, S), Treonina (Thr, T), Cistena (Cys, C), Asparagina (Asn, N), Glutamina (Gln, Q) y Tirosina (Tyr, Y). Neutros no polares, apolares o hidrfobos: Glicina (Gly, G), Alanina (Ala, A), Valina (Val, V), Leucina (Leu, L), Isoleucina (Ile, I), Metionina (Met, M), Prolina (Pro, P), Fenilalanina (Phe, F) y Triptfano (Trp, W). Con carga positiva, o bsicos: Lisina (Lys, K), Arginina (Arg, R) e Histidina (His, H). Con carga negativa, o cidos: cido asprtico (Asp, D) y cido glutmico (Glu, E). Aromticos: Fenilalanina (Phe, F), Tirosina (Tyr, Y) y Triptfano (Trp, W) (ya incluidos en los grupos neutros polares y neutros no polares).

en

E S E N C I A L E S NO E S E N C I A L E S

Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Treonina, Triptofano Valina Arginina Fenilalanina

en

Alanina, Asparragina Aspartico Cisteina, Glutamico Glutamina, Glicina, Prolina Tirosina Serina

LISINA La forma comercial ms frecuente es el monoclorhidrato de L-lisina, que se obtiene mediante fermentacin oxidativa utilizando una fuente de carbono (azcar, almidn, melazas, etc) y una fuente de nitrgeno (sales amnicas, amonaco, hidrolizados proteicos, etc) como sustrato de los microorganismos Tambin puede obtenerse mediante procesos qumicos enzimticos a partir del a-amino-e-caprolactama. Los productos comerciales actuales tienen una pureza mnima del 98% que se corresponde con un valor en lisina del 78% y un contenido en cloro cercano al 19-20%

La metionina se comercializa actualmente en dos formas: DL-metionina y DL-metionina hidroxianlogo (DL-2 hidroxi-4 metiltiobutanoico o HMB). La DLmetionina se obtiene por sntesis qumica a partir del propileno, metiltiol, metano y amonaco.

La L-treonina se obtiene preferentemente mediante un proceso fermentativo por microorganismos. Tambin puede obtenerse por aislamiento a partir de hidrolizados de protena para uso farmacutico. El producto comercial en fabricacin de piensos tiene una riqueza mnima del 98% y un equivalente en protena bruta en torno al 73-74%.

El L-triptfano se obtiene mediante fermentacin a partir de la glucosa u otras productos carbonados como el indol. El producto comercial tiene un mnimo del 98% de riqueza y un equivalente en protena bruta del 85-86%

Pptidos
los pptidos son estructuras intermedias entre los aa y las protenas . sus propiedades fsicas y qumicas suelen reflejar en mayor o menor medida las de los AA que la componen. Los pptidos presentan a menudo ciertas peculiaridad es estructurales que no aparecen en las proteinas.los grupos amino y carboxilo pueden encontrarse bloqueados.

Enlace peptdico
El enlace peptdico es un enlace covalente y estable entre el grupo carboxilo (-COOH) de un AA Y el grupo amino( -NH2) del AA contiguo inmediato, con el consiguiente desprendimiento de una molcula de agua.

HORMONAS

Ej

VASOPRECINA SOMATOSTATINA INSULINA GLUCAGON

AGENTES VASOACTIVOS

Ej

ANGIOTENSINA BRADIQUININA

ANTIBIOTICO S

Ej GENTAMICINA VALINOMICINA Ej ENCEFALINA ENDORFINAS SUSTANCIA P

NEURO TRANSMISORE S

ANTI OXIDANTES

Ej

GLUTATION

ANTES DE PROCEDER A LA EXTRACCION O RECOCOCIMIENTO DE LOS aa PRESENTES EN UNA MUESTRA (ANIMAL O VEGETAL) PRIMERO SE OBTYIENE EL ESTRACTO CRUDO DE PROTEINAS.

Al momento de elegir el protocolo a seguir para obtener el extracto crudo, es importante tener en cuenta tanto el material de partida como su posterior utilizacin: Material biolgico de partida-tipo de organismo: En el caso de rganos u otros tejidos animales, es necesario disgregarlos antes de proceder a la lisis celular, ya que las clulas se encuentran rodeadas de tejido conectivo. En general estas tcnicas involucran la utilizacin de enzimas (como por ejemplo colagenasa) y/o una ruptura mecnica grosera. Para esto pueden utilizarse morteros, homogeneizadores elctricos, tijeras o tamices metlicos (mesh), entre otros. Cuando el material es un cultivo celular, la extraccin puede realizarse adicionando un detergente, realizando un shock osmtico, o por sonicacin.

Finalidad del extracto proteico: esto determinar el buffer de extraccin que se utilizar dependiendo se desea o no que las protenas conserven su actividad biolgica, su conformacin nativa, su interaccin con otras protenas u otras molculas. Algunos protocolos son tan violentos que involucran la ruptura de todas las membranas; otros en cambio permiten fraccionar y obtener, distintos componentes subcelulares (ncleos, mitocondrias, etc).

La extraccin de protenas celulares comienza siempre con una ruptura celular o lisis. Los mtodos ms utilizados se basan esencialmente en la homogenizacin de los tejidos y la destruccin de los lmites celulares por medio de diferentes procedimientos fsicos y/o qumicos. Obtenindose lo que se denomina extracto crudo. Los objetivos a lograr en esta etapa son maximizar la liberacin de las protenas de inters, evitando la degradacin trmica o las alteraciones secundarias por oxidacin, protelisis, etc.

El mejor estudio de las protenas en plantas se realizan por diferentes mtodos para examinar sus unidades estructurales : los aminocidos Los aminocidos se obtienen de la hidrlisis de las protenas que los contienen. La mayora de los preparados comerciales de aminocidos provienen de la hidrlisis qumica, ya sea cida o bsica, de las protenas. Estos procesos fuertemente agresivos degradan las protenas rompindolassin sentido, dando como resultado una baja proporcin de aminocidos libres respecto del total de protena original, adems de sales y cloruros, potencialmente nocivos para los vegetales.

La calidad nutricional de los aminocidos conseguidos, depende en gran Medida del tipo de hidrlisis, siendo la enzimtica la que proporciona las mejores

Caractersticas al producto final Elevada cantidad de L1 1aminocidos(biolgicamen te activos) Elevada proporcin de aminocidos libres Ausencia de productos potencialmente nocivos para las plantas Conservacin de las bases pricas y pirimidnicas del ADN celular,que son precursoras de hormonas vegetales

La hidrlisis significa la ruptura de las protenas en las unidades que las forman, es decir, los aminocidos. Tras el proceso de hidrlisis se obtiene una mezcla compuesta mayoritariamente por aminocidos libres, aunque tambin contiene en menor proporcin pequeas cadenas de aminocidos (pptido de cadena corta). Dentro del mtodo de hidrlisis existen varias formas: - hidrlisis cida - hidrlisis cida controlada - hidrlisis enzimtica

Hidrolisis cida : Se basa en la ebullicin prolongada de la protena con soluciones cida fuertes (HCl y H2SO4). Este mtodo destruye completamente el triptfano, parte de la serina y la treonina.

Hidrolisis bsica : Respeta los aminocidos que se destruyen por la hidrolisis anterior, pero con gran facilidad, forma racematos. Normalmente se utiliza (NaOH e BaOH).

Hidrolisis enzimtica : Se utilizan enzimas proteolticas cuya actividad es lenta y a menudo incompleta, sin embargo no se produce racemizacin y no se destruyen los aminocidos; por lo tanto es muy especfica. La hidrlisis enzimtica se realiza en condiciones suaves (aproximadamente de 60 C de temperatura)

PARTE EXPERIMENTAL: HIDRLISIS ACIDA


MP: Triturar 2 g. de la droga

+ 20 mL de HCl 10%

Hervir

+ bicarbonato de sodio evaporar

filtrar

MACERACIN ETANOLICA

A macerar X 7 das

Pesar 20g de hojas de alfalfa

Botella de vidrio

Etanol 70%

filtrar y evaporar el solvente a 40C en la estufa

DISCUSIN DE RESULTADOS
La obtencin del extracto crudo es el primer paso limitante para los subsiguientes procedimientos a saber: Liberacin y obtencin de protenas, carbohidratos, flavonoides, alcaloides. Los objetivos a lograr en esta etapa son maximizar la liberacin de las protenas de inters, evitando la degradacin trmica o las alteraciones secundarias por oxidacin, protelisis, etc.

DISCUSIN DE RESULTADOS

No debemos olvidar que el proposito final es purificar una proteina u obtener una actividad enzimatica especifica, por que en todo momento debemos procurar trabajar en condiciones que preserven las proteinas .durante todo el proceso deberemos trabajar con las muestras en hielo para conservarlas y a la vez inhibir proteasas

CONCLUSIN

En conclusin despus de obtener el extracto crudo de la planta en estudio, para extraer los aa presentes se tienen tres mtodos generales: Hidrolisis cida, hidrolisis bsica e hidrolisis enzimtica