Metabolismo

Respiracin celular: Conceptos unificadores



Desde el punto de vista qumico, la respiracin se expresa como la oxidacin de la gucosa:

C6H12O6 + 6 O2 +6 H20 --> 6 CO2 + 12 H2O

El cambio de energa libre es de 686 kcal por mol (180 gr.) de glucosa. A fin de evitar el dao celular (la incineracin por la cantidad de calor generado), la energa es liberada en varios pasos:

En el proceso de obtener energa a partir de la glucosa hay tres procesos metablicos:



GLUCLISIS: ocurre en el citosol, donde cada molcula de glucosa, con sus 6 tomos de Carbono, se oxida parcialmente dando lugar a dos molculas de piruvato (de 3 tomos de Carbono). Se invierten dos ATP pero se generan cuatro. RESPIRACIN CELULAR: cuando el ambiente es aerobio (contiene O2) y el piruvato se oxida totalmente a dixido de Carbono (CO2), liberando la energa almacenada en los enlaces piruvato y atrapndola en el ATP. Se subdivide en etapas: Ciclo de los c. tricarboxlicos (o del c. ctrico): ocurre en la matriz de la mitocondria Cadena respiratoria: se lleva a cabo en las membranas mitocondriales. FERMENTACIN: cuando el O2 est ausente (ambiente anaerobio), el piruvato no produce CO2, sin que se forman otras molculas como el c. lctico o el etanol.

Gluclisis


Del griego glycos: azcar y lysis: ruptura. Es el primer paso de la respiracin, es una secuencia compleja de reacciones que se realizan en el citosol de la clula y por el cual la molcula de glucosa se desdobla en dos molculas de c. pirvico. Es el ciclo metablico ms difundido en la naturaleza, tambin se lo conoce como ciclo de Embden-Meyerhof . Se lo encuentra en los cinco reinos. Muchos organismos obtienen su energa nicamente por la utilizacin de este ciclo. El mismo esta catalizado por 11 enzimas que se encuentran en el citoplasma de la clula pero no en las mitocondrias. Recuerde que es el inicio de un proceso que puede continuar con la respiracin celular (si existe oxgeno) o con la fermentacin (en ausencia del oxgeno)

 

Gluclisis


El ciclo se puede dividir en dos etapas: 1. Fase de inversin de energa: en esta etapa de preparacin (fase de 6-carbonos) se activa la glucosa con el agregado de dos grupos fosfatos provenientes del ATP , gasto neto = 2 ~Pi (o sea dos uniones de alta energa). La molcula de glucosa se divide en dos molculas de tres carbonos: el gliceraldehido-3-fosfato (G3P) y la dihidroxiacetona fosfato, sta ltima luego se transforma en G3P. 2. Fase de "cosecha" de energa: las dos molculas de G3P se convierten finalmente a 2 molculas de cido pirvico o piruvato

Gluclisis


Fase de oxidacin (produccin de energa): cada gliceraldehido-3-fosfato se oxida, liberando ~ 100 kcal. Parte de la energa producida es temporariamente guardada como NADH (reducido). Parte es usada para agregar un fosfato inorgnico a la molcula de 3 carbonos para dar origen al cido 1-3 difosfoglicrico. El resto de la energa se libera como calor. En las reacciones que siguen los grupos fosfato de 1-3 difosfoglicrico son cedidos (uno por vez) al ADP (adenosn difosfato) para formar ATP. Esto se conoce como fosforilacin a nivel de sustrato.

 

Gluclisis
 
 

Balance neto: glucosa + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+---> 2 piruvatos + 2 ATP + 2 (NADH + H+)

La energa total que se puede obtener de la glucosa por oxidacin aerbica es = 688 kcal/mol. La energa total acumulada en 2 ATP = 2 x 7.3 = 14.6 kcal/mol

Esto es un ~ 2% de rendimiento, si se tiene en cuenta la posibilidad de oxidar completamente la glucosa, es decir que el 98% de la energa potencialmente disponible no es usada por la clula. Los dos NADH + H+ pasan a la cadena de transporte de electrones en ambiente aerobios y pueden dar mas ATP, recuperndose el NAD en su forma oxidada.

Fermentacin


 

El trmino fermentacin, en su acepcin estricta, se refiere a la obtencin de energa en ausencia de oxgeno y generalmente lleva agregado el nombre del producto final de la reaccin. Pasteur la denomin "la vie sans l'air" o "la vida sin aire". El piruvato (o molculas derivadas del piruvato) se encuentra disponible luego del proceso de gliclisis Muchas clulas los usan como aceptor terminal, creando productos de desecho que se excretan de la clula. Estos residuos todava contienen energa aprovechable. Si bien este sistema no es tan eficiente como la respiracin, permite que el catabolismo contine, y esto es mejor que nada.

Fermentacin Lctica
piruvato + NADH + H+-------> cido lctico + NAD+


Se produce en muchas bacterias (bacterias lcticas), tambin en algunos protozoos y en el msculo esqueltico humano. Es responsable de la produccin de productos lcteos acidificados ---> yoghurt, quesos, cuajada, crema cida, etc. El cido lctico tiene excelentes propiedades conservantes de los alimentos.

Fermentacin alcohlica
Dos reacciones sucesivas:
 

piruvato --------> acetaldehido + CO2 acetaldehido + NADH +H+ -------> etanol + NAD+

Se lo encuentra en levaduras , otros hongos y algunas bacterias. La fermentacin alcohlica es la base de las siguientes aplicaciones en la alimentacin humana: pan, cerveza, vino y otras.

El "problema" con la fermentacin es que, al usar molculas orgnicas como aceptores terminales de electrones y tener que eliminar como residuo al producto resultante (c. lctico / etanol), se pierde la energa potencial de esos compuestos. La solucin alternativa es usar alguna molcula no orgnica que pueda aceptar electrones y convertirse as en una molcula reducida. El oxgeno es perfecto para esto, porque luego de recibir los electrones se combina con dos protones convirtindose as en el residuo lquido perfecto para el ambiente: H2O. Nota: la respiracin depende de la disponibilidad de receptor externo de los electrones. Tan pronto como el mismo desaparece, la respiracin cesa. A diferencia, la fermentacin, donde el aceptor es interno (por ej. piruvato) y es un producto del desdoblamiento de la glucosa, el aceptor estar disponible en tanto exista alimento para oxidar.

Respiracin celular


 

Es el conjunto de reacciones en las cuales el c. pirvico producido por la gluclisis es desdobla a CO2 y H2O y se producen 36 ATP. En las clulas eucariotas la respiracin se realiza en la mitocondria. Se da en dos etapas: OXIDACIN DEL PIRUVATO CICLO DEL C. TRICARBOXLICO

La Mitocondria y el Sistema transportador de electrones



Las reacciones se llevan a cabo dentro de la mitocondria. Recuerde que este orgnulo de doble membrana presenta una matriz fluida rodeada por una membrana con crestas y un espacio nter membrana limitado por la memb. interna y otra externa.

Paso 1: Oxidacin del piruvato

Es el lazo entre la gluclisis y la respiracin celular Es un complejo de reacciones catalizado por un sistema de enzimas localizado en la membrana mitocondrial interna.
Resumen de los eventos: El piruvato difunde hasta la matriz de la mitocondria, cruzando ambas membranas.

Cada c. pirvico reacciona con la coenzima-A, desdoblndose en CO2 y un grupo acetilo de dos carbonos que se une inmediatamente a la coenzima-A formndo acetil coenzima-A (acetilCoA) que entrar al ciclo de los c. tricarboxlicos. En esta reaccin se forma un NAD + H2

La Acetil-CoA puede tambin producirse a partir de lpidos ( por beta oxidacin) o del metabolismo de ciertos aminocidos. Su formacin es un nodo importante del metabolismo central.

Paso 2: Ciclo de los cidos tricarboxlicos



Este ciclo, tambin conocido como Ciclo de Krebs o Ciclo del c. ctrico tiene esencialmente la funcin de completar el metabolismo del piruvato derivado de la gliclisis. Las enzimas del ciclo de los cidos tricarboxlicos (Krebs) estn localizadas en la matriz de la mitocondria (unas pocas de estas enzimas estn la membrana interna de la mitocondria). Su punto de partida es el Acetil-CoA, obtenindose CO2 y transportadores de electrones reducidos.

Isomerizacin del citrato a isocitrato (6-C, tres grupos cidos )

Para empezar el ciclo: Acetil-CoA (2-C) + oxalacetato (4-C) ------> + cido ctrico (6-C, tres grupos cidos )




Etapas siguientes:
Isomerizacin del citrato a isocitrato (6-C, tres grupos cidos ) Oxidacin -------> alfa-cetoglutrico (5-C) + CO2 + NADH Oxidacin -------> succinil-CoA (4-C) + CO2 + NADH Fosforilacin a nivel de sustrato succinil-CoA (4-C) + GDP ------> succinato (4-C) + GTP (Note: GTP con ADP se puede interconvertir en ATP) La oxidacin -------> fumarato (4-C) + FADH2 convierte el fumarato en maleato, una nueva oxidacin ------> oxalacetato (4-C) + NADH

  

 

Balance de un ciclo: Acetil-CoA (2-C) + 3 NAD+ + FAD ------> 2 CO2 + 3NADH + FADH2 + ATP


Balance para una molcula de glucosa que se convierte en 2 piruvatos, luego en 2 Acetil-CoA y luego a CO2 en la va el ciclo de los cidos tricarboxlicos , con todo el NADH y el FADH convertidos en ATP por la respiracin: glucosa + 38 ADP + 38 Pi -------> 6 CO2 + 38 ATP

2 de los NADH son formados en el citoplasma durante la gliclisis. Para ser transportados a la matriz mitocondrial para ser posteriormente oxidado por la cadena transportadora de electrones, tienen que pasar por medio de transporte activo al interior de la mitocondria , Esto "cuesta" 1 ATP por NADH. Por lo tanto el balance final resulta en 36 ATP por glucosa y no 38 ATP.

Balance del Ciclo de los cidos Tricarboxlicos



El ciclo de los cidos tricarboxlicos completa la oxidacin del carbono del piruvato a su forma ms oxidada (CO2); los electrones originalmente en los enlaces C-H pasan por los portadores NADH y FADH para ser usados en la respiracin. La eficiencia de la respiracin llega casi al 40%. de la energa presente inicialmente en la molcula de glucosa, y es conservada en forma de ATP; el resto se libera como calor Si bien las clulas pueden transferir electrones directamente desde el NADH al oxgeno, esto producira directamente la liberacin de la energa como calor.

 

Go' = - 52 kcal/mol Si el NADH tiene ~52 kcal de energa, y solo son necesarias 7,3 kcal para hacer un ATP, se puede calcular en 52/7,3 = ~ 7 ATP por NADH si la conversin de energa fuese de un 100% de eficiencia. En la prctica las clulas han desarrollado sistemas que le permiten obtener hasta un 40% de eficiencia (~3 ATP/NADH) bajo condiciones ptimas.
Continuacin: cadena respiratoria--> En este punto la clula ha ganado solo 4 ATP, 2 en la gluclisis y dos en el ciclo de Krebs, sin embargo ha capturado electrones energticos en 10 NADH2 y 2 FADH2. estos transportadores depositan sus electrones en el sistema de transporte de electrones localizado en la membrana interna de la mitocondria.

Cadena transportadora de electrones (CTE)



 

Es un sistema multienzimtico ligado a membrana que transfiere electrones desde molculas orgnicas al oxgeno. La CTE comprende dos procesos: Los electrones son transportados a lo largo de la membrana, de un complejo de protenas transportador ("carrier") a otro. Los protones son translocados a travs de la membrana, estos significa que son pasados desde el interior o matriz hacia el espacio intermembrana. Esto construye un gradiente de protones. El oxgeno es el aceptor terminal del electrn, combinndose con electrones e iones H+para producir agua.

Los tres componentes de la cadena respiratoria son: 3 grandes complejos proteicos con molculas transportadoras y sus enzimas correspondientes, un componente no proteico: UBIQUINONA (Q) que estn embebidos en la membrana y una pequea protena llamada citocromo c que es perifrica y se ubica en el espacio intermembrana, pero adosado laxamente a la memb. interna.

La secuencia de eventos: Pasa los electrones a travs de el 1 complejo (NADHQ reductasa) hasta la ubiquinona, los iones H+ traspasan la membrana hacia el espacio intermembrana. el 2 complejo (citocromo c reductasa) trasnsfiere electrones desde la Q a el citocromo c, generando un nuevo bombeo de protones al exterior. el 3 complejo es una citocromo c oxidasa, pasa los edel citocromo c al oxgeno, el oxgeno reducido (1/2 O2-) toma dos iones H+ y forma H2O. Balance neto: los electrones entran a la CTE desde portadores tales como el NADH o el FADH, llegan a la "oxidasa terminal" (una oxgeno-reductasa) y se "pegan" al oxgeno.

Gradiente de protones y fosforilacin oxidativa



Hiptesis Quimiosmtica (Peter Mitchell, 1961). A medida que los electrones fluyen por la CTE, a ciertas etapas los protones (H+) son transferidos desde el interior al exterior de la membrana. Esto construye un gradiente de protones , dado que las cargas + son retiradas del interior mientras que las -, permanecen en el interior (en gran parte como iones OH- ), el pH en la cara externa de la membrana puede llegar a un pH 5,5, mientras que el pH justo en la cara interna de la misma puede llegar a 8,5 ---> la diferencia es de 3 unidades de pH, recuerde que el pH es igual a - log. de [H] y por lo tanto 3 unidades de pH significan una diferencia de concentracin de H+ estimada en 1000 x entre ambas caras de la membrana.

Gradiente de protones y fosforilacin oxidativa



Esto representa energa potencial acumulada como: Gradiente de protones= fuerza mvil de protones y dado que la membrana es bsicamente impermeable a los protones, por lo tanto el gradiente no se desarma por una constante re-entrada de los mismos, y teniendo en cuenta que la ATP sintetasa complejo proteico (conocido tambin como complejo F1, ATPasa mitocondrial) contiene el nico canal para la entrada del protn, por lo tanto a medida que los protones pasan por el canal, se produce la siguiente reaccin: ADP + Pi ---> ATP. Este proceso puede llamarse: fosforilacin quimiosmtica (asumiendo que la hiptesis quimiosmtica sea la correcta), o fosforilacin oxidativa

Los Protones (indicados por +) entran nuevamente en la matriz mitocondrial a travs de los canales que forma el complejo enzimtico de la ATP sintetasa. Esta entrada se acopla a la sntesis de ATP a partir de ADP y Fosfato (Pi)

El esquema en la parte superior muestra una mitocondria. En la animacin, se observa como los iones H+ se acumulan en el compartimiento mitocondrial externo (espacio intermembrana). En la imagen de lado, se esquematiza lo que le sucede el hidrgeno cedido por el NADH a la cadena de transporte: los electrones son transferidos a lo largo de las proteinas de la cadena, y el protn al espacio intermembrana,donde genera un gradiente. Los protones re-entran pasando por el complejo ATPsintetasa, generando ATP.

 

Puntos claves: Los protones son transferidos a travs de la membrana, desde la matriz al espacio intermembrana, como resultado del transporte de electrones que se originan cuando el NADH cede un hidrgeno. La continuada produccin de esos protones crea un gradiente de protones. La ATP sintetasa es un gran complejo proteico con canales para protones que permiten la re-entrada de los mismos. La sntesis de ATP se produce como resultado de la corriente de protones fluyendo a travs de la membrana: ADP + Pi ---> ATP

Inhibidores de la Fosforilacin oxidativa



Numerosos productos qumicos pueden bloquear la transferencia de electrones en la cadena respiratoria, o la transferencia de electrones al oxgeno. Todos ellos son potentes venenos, entre ellos Monxido de Carbono -- se combina directamente con la citocromo oxidasa terminal, y bloque la entrada de oxgeno a la misma. Cianuro (CN-) se pega al hierro del citocromo e impide la transferencia de electrones.

Produccin directa de calor Si bien las clulas utilizan el ATP para almacenar la energa derivada de ellos, en ciertos tejidos la fosforilacin oxidativa se desacopla de la formacin de ATP y la energa se transforma directamente en calor. En mamferos "la grasa parda" (un tejido que, amn de las gotitas de lpidos, contiene una inusual cantidad de mitocondrias) es el encargado de la produccin del calor en esta forma. Curiosamente, un tejido similar con el mismo mecanismo de produccin de calor, se encuentra en las flores de Philodendrum selloum.

Rendimiento en ATP de la Metabolizacin de la Glucosa

Balance de la oxidacin de la glucosa La eficiencia de la respiracin llega casi al 40%. de la energa presente inicialmente en la molcula de glucosa, y es conservada en forma de ATP; el resto se libera como calor. Resumen de reactivos y productos: C6H12O6 + 6 O2 -->> 6 CO2 + 6 H2O + 36 ATP

Gluclisis: glucosa + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+-> 2 piruvatos + 2 NADH 1. cada 2 c. pirvico + coenzima-A, --> 2 CO2 y un grupo acetilo que se une inmediatamente a la coenzima-A formando 2 acetil coenzima-A + 2 NADH 2. Ciclo de ac. ctrico: 2 Acetil-CoA + 6 NAD+ + 3 FAD ----> 4 CO2 + 6 NADH + 2 FADH2 3. Cadena respiratoria: los 10 NADH+ 2 FADH2 de los pasos anteriores dan ---> Nota: 1 NADH --> 3 ATP= 30 ATP 1 FADH2 --> 2 ATP=4 ATP - 2 ATP usados en el reingreso de 2NADH producidos en la gluclisis:

+ 2 ATP

+ 2 ATP

= 34 ATP

-2 ATP

total= 36 ATP