BIOFISICA DE MEMBRANAS

Membranas biolgicas
CARACTERISTICAS GENERALES
Liposolubilidad
Estructura trilaminar
Compuestas por lpidos, protenas y
glcidos
Son fluidas
Presentan asimetra estructural y funcional
Son estructuras dinmicas
FUNCIONES
PERMEABILIDAD SELECTIVA
ACTIVIDAD ENZIMATICA
INTERCAMBIO DE INFORMACION
RECONOCIMIENTO

Permeabilidad difusional
1 2
NaCl g/100mL 0,9 0,45
Membrana permeable al agua e
impermeable al soluto
( ) 0 2 1 . .
2 1
= =

C C A Pd J
( ) 0 2 1 . .
1 2
= =

C C A Pd J
Para el soluto:
Para el solvente:
Gradiente de concentracin
Diferencia de osmolaridad
Clculo de la osmolaridad
NaCl g/100mL 0,9 0,45
La osmolaridad es:
g v L mmol Kg mOsm d Osmolarida . . / / = =
Donde:
v = nmero de partculas en que se disocia
g = coeficiente osmtico
Para el ejemplo: v= 2 y g=0,93
Calcular la osmolaridad de cada comparimento
PM
NaCl
= 58.44
1 2
Molaridad mmol/L 154 77
Osmolaridad mOsm/L 286.4 144.4
| | | |
1
2
2
2
2 1 O H O H en Osm en Osm ) )
FLUJO OSMTICO
1 3
.

= s cm Jv
Flujo de volumen
Flujo de molculas de agua
1
.

= = s mol J
V
Jv
agua
Relacin con gradiente
osmtico
( )
2 1
. . Osm Osm A P Jv
osm
=
Coeficiente de
permeabilidad osmtica
Despejando:
Osm s cm
cm Osm cm
s cm
d Osmolarida A
Jv
P
Osm
. .
. .
.
.
1 4
3 2
1 3

= = =
Para el agua::
( ) ( )
VELOCIDAD s cm
cm mol cm mol cm
s cm
d Osmolarida A v
Jv
P
agua
= = = =

1
3 2 1 3
1 3
.
. .
.
. .
Ejemplos:
Tubulo proximal (rata) 0,231
Tubulo colector (rata) 0,038
Mucosa gstrica (perro) 0,069
Intestino (rata) 0,011
Piel (sapo) 0,002
PRESIN OSMTICA
Presin para contrarrestar el paso de
agua

Diferencia de presin hidrosttica entre
compartimentos
Jv = 0 P =

Medicin de la presin osmtica
Agua
Agua + azcar
Membrana
semipermeable
Medicin de la presin osmtica
Agua
Agua + azcar
Medicin de la presin osmtica
Agua
Agua + azcar
Estado estacionario
(steady state)
Entrada H20 = salida
H2O
P
atm
h
azcar atm
O H O H
O H azcar O H atm
P P
P P
P P P P
in out
in out
=
=
+ = +
2 2
2 2
En este momento las presiones a ambos lados estn igualadas, por lo
tanto:
pero
Es decir, la presin del agua a
cada lado de la membrana es
la misma.
Puede calcularse la presin osmtica (cuando cesa el flujo neto) de la
solucin con:
Ley de Vant Hoff
La presin osmtica de una solucin, su temperatura, el nmero de moles
del soluto y su volmen estn ligados por la misma relacin que existe entre
magnitudes anlogas de un gas ideal
nRT V = t
Frmula de Vant Hoff
Donde:
t = presin osmtica
n = nmero de moles del soluto
V= volumen de la solucin
R = constante universal de los gases
T = temperatura absoluta
d Osmolarida T R . . = t
T R
V
n
. .
1
= t
Cumplida esta condicin, dos o ms soluciones tendrn la misma presin osmtica
si su temperatura es la misma.
Dos soluciones que tienen igual presin osmtica se denomina isosmticas o
isotnicas.
Si una solucin A tiene menor presin osmtica que otra B, A ser
hipotnica respecto a B; y B ser hipertnica respecto a A.
La determinacin experimental de la presin osmtica permite calcular el peso
molecular de una sustancia. En efecto, si:

t= n / V . R.T

Y siendo n = m/M
Donde m = masa (g); M = peso molecular

Sustituyendo resulta: t = m.RT
M. V

Conclusiones:
1. La presin osmtica es proporcional a la concentracin del soluto
a temperatura constante.
2. La presin osmtica es proporcional a la temperatura del medio si
la concentracin de soluto no vara
3. Para diferentes solutos, cuyas concentraciones y temperatura sean
iguales, la presin osmtica es inversamente proporcional al peso
molecular.
La presin osmtica en vegetales es del orden de 5 20
atmsferas!!!!!!
En la sangre, la presin osmtica es de 7.6 7.9 atmsferas.
Ejemplos:
Coeficiente de reflexin de
Staverman ()
Si est presente alguna permeabilidad a
soluto
Desviacin del valor de
Corregida por
Coeficiente de reflexin
Entonces se calcula

ef
= PRESIN OSMTICA EFECTIVA
d Osmolarida T R
ef
. . . o t =
1 0
Impermeable Permeable
calculada
real
t
t
o =
Presin osmtica:
Medida de forma prctica

Estimada con ecc. Vant Hoff
Por extensin:
En relacin al Flujo
osmtico:
calculada
real
d Osmolarida
d Osmolarida
= o
d Osmolarida T R A Jv A = . . . . . o t
Glucosa 0,5
Urea 0,2
NaCl 1,0
Consecuencias del Flujo Osmtico
1. Compartimentos con volmenes similares
Var. Del volmen
Llega a
Igualdad de Osmolaridad, [H
2
O],
Concentracin de equilibrio

2. Volumen de un compartimento infinito con
respecto al otro
Flujo de agua hasta equilibrio de osmolaridad
Variacin del volumen final
Existencia de un volmen osmticamente inactivo (b)
f f i i
V C V C . . =
Biofsica de Membrana
Transporte pasivo
Transporte a travs de las Membranas Biolgicas

Debido a la naturaleza no polar de la bicapa, las membranas de fosfolpidos puros son
altamente impermeables a iones y molculas orgnicas polares.
TRANSPORTE PASIVO
CARTACTERISTICAS GENERALES:
Ocurre:
Sin gasto de energa
A favor de un gradiente
Es equilibrante
por diferencias de potencial
electroqumico de la especie
transportada


Protenas de membrana transportadoras de solutos

Lodish et al. 2004
Flujo difucional
Flujo



Densidad de flujo



Difusin
Cantidad de sustancia que atraviesa una determinada seccin
perpendicular, movindose de un punto a otro en la unidad de tiempo
Flujo que atraviesa la seccin de una membrana
por unidad de rea
Movimiento de soluto o de solvente, donde la agitacin trmica y la
diferencia de concentracin son las fuerzas impulsoras. Su flujo se
denomina:
FLUJO DIFUSIONAL
Tipos de flujo difucional
FLUJO UNIDIRECCIONAL: flujo en una
direccin determinada a travs de una
membrana


FLUJO NETO: Es la cantidad de sustancia
que se mueve de un lado a otro del recipiente,
por unidad de tiempo.

J = J
12
J
21




El flujo (J) es un vector cuyo mdulo mide la
cantidad de partculas que atraviesan la unidad
de rea en la unidad de tiempo (moles/cm
2
.
seg).

Su direccin y sentido es desde la regin de
mayor concentracin hacia la de menor
concentracin.



C1 = C2

J12 = J21

Jneto = 0
C1 C2

J12 J21

Jneto 0
100 100 Glucosa mmol/L 200 100
LEY DE FICK
El flujo neto de molculas por unidad de
rea de membrana es proporcional al
gradiente de concentracin.

Coeficiente de difusin
Cantidad de soluto que pasa por unidad de tiempo a travs de una
separacin perpendicular de 1 cm
2
, cuando el gradiente de
concentracin es 1
La ley de Fick puede expresarse como :
Donde J = vector flujo ; y D = coeficiente de Difusin
(moles s
-1
cm
-2
)
La constante de proporcionalidad en la
expresin de la ley de Fick es el coeficiente de
difusin D (cm
2
/seg), que depende, en general,
de:
la temperatura (aumenta con la temperatura),
del soluto (tamao de las partculas a difundir) y
del medio a travs del cual difunde (membrana).

Esta ley es vlida slo cuando el pasaje es
debido exclusivamente a una diferencia de
concentraciones que se mantiene en rgimen
estacionario (no vara con el tiempo).

DIFUSIN SIMPLE
Factores de la Ley de FicK
Temperatura
A mayor agitacin trmica, mayor el nmero de
molculas que en la unidad de tiempo atraviesen la
membrana
Concentracin
A una misma T, cuanto mayor sea el nmero de
partculas por unidad de volumen, mayor ser el
numero de estas en condiciones de atravesar la
membrana
Distancia
Cuanto mayor sea la distancia que separa los puntos
en los que se ha tomado la concentracin, habr un
mayor efecto de friccin entre el medio material y las
partculas

Gradiente de concentracin





rea de membrana
A mayor rea, mayor flujo

Coeficiente de difusin
A mayor D, mayor flujo. Su valor depende de la
solucin de que se trate y de la temperatura
C1
C2
X
C
Gradiente no es diferencia, los cocientes son
gradientes y las diferencias solo numeradores
Cuando el flujo difusional se da a travs de una
membrana, los valores de C1 y C2 estn
determinador por:
Concentracin a ambos lados de la membrana
Coeficiente de particin e la interfase
Espesor de la
membrana

Consecuencias del flujo difucional
Se llega a una concentracin de equilibrio




Hay un gradiente de concentracin en funcin
del tiempo. Al llegar al equilibrio Jneto se torna
CERO, pero habrn flujos unidireccionales

Hay una relacin entre flujo difucional neto y
diferencia de concentracin
a mayor diferencia de concentracin, mayor flujo
C equilibrio
C
t
DIFUSION FACILITADA
Se produce cuando un in o molculas
hidrosolubles cruza la membrana a
favor de su gradiente electroqumico o
de concentracin, hasta que se obtiene el
equilibrio.
No hay gasto energtico
Es facilitado por la presencia de canales o
de transportadores de naturaleza proteica
Sitios de unin
Cambio de conformacin
Bsicamente el mecanismo de transporte
tiene cuatro etapas que son:
a) unin reversible del soluto a transportar
a sitios especficos del transportador
(receptores)
b) desplazamiento del par receptor-ligando
hacia la superficie opuesta de la
membrana
c) liberacin del soluto
d) vuelta del sistema al estado inicial


Brom. Maria del Pilar Cornejo
La cantidad de sustancia que atraviesa la membrana depende
de:

a) La diferencia de concentracin del soluto a
transportar entre ambos lados de la membrana
b) La cantidad de transportador disponible.
Cuando se saturan los transportadores se
alcanza un flujo mximo (Cintica de
saturacin)
c) La velocidad con que tiene lugar la unin y la
separacin entre el soluto y el transportador.

Brom. Maria del Pilar Cornejo
A medida que aumenta la diferencia de
concentraciones, aumenta el flujo.

A partir de una AC determinada, los
transportadores se saturan y el flujo alcanza un
valor constante, llamado flujo mximo.

Cualquier aumento de concentracin a partir de
ese punto no traer aparejado cambio alguno en
el flujo.

Este tipo de comportamiento obedece a la
ecuacin de Michaelis - Menten

Canales de iones

Son protenas integrales de membrana plegadas
formando un poro a travs del que se transportan
iones.

El tamao del poro y la densidad de cargas en su
interior determinan su selectividad a los diferentes
iones.

Pueden estar en un estado conformacional no
conductor (cerrado) o conductor (abierto).

Su apertura o cierre puede estar regulada por
factores fsicos (voltaje, tensin mecnica) o
qumicos (iones, neurotransmisores, hormonas,
fosforilacin, etc.).

Pueden estar constituidos por una o varias cadenas
polipeptdicas.

En el estado abierto, transportan 10
7
a 10
8
iones/s,
Estn involucrados en procesos fisiolgicos como
conduccin del impulso nervioso, secrecin celular,
regulacin del volumen celular, apertura de
estomas, quimiotaxis, etc.
Modelo de la difusin facilitada de glucosa mediada por el transportador GLUT-1
1
2
3
4
Forma A = transportador con sitio activo hacia el exterior
Forma S = sustancia a transportar
Forma B = transportador con sitio activo hacia el interior
TR = transportador
AS
BS
Pudiendo darse dos situaciones:
A. Cuando la concentracin de la sustancia
es alta



B. Cuando la concentracin de la sustancia
es baja
Biofsica de Membranas
Transporte activo
CARACTERISTICAS
SATURACION
COMPETITIVIDAD
ESPECIFICIDAD
INHIBICION
ES UNIDIRECCIONAL
FUNCIONES DEL TRANSPORTE ACTIVO

Intercambio de material celular
Mantenimiento del pH y equilibrio inico
intracelular
Eliminacin de sustancias toxicas

Estructura qumica de la bomba
de sodio o Na
+
-K
+
-ATPasa

Est compuesta de dos subunidades :
o (110 kDa) y
| (55 kDa).

Las funciones catalticas estn en la
subunidad o, que contiene el residuo
fosforilable por el ATP. La cadena o
(1000 AAs) posee 10 segmentos de
transmembrana unidos por 5 cortas asas
extracelulares .

La subunidad | un glicopptido ( 370
AAs) tiene un solo segmento
transmembrana y expone la mayor parte
de su estructura muy plegada al exterior.
Se postula que se requiere para el
adecuado plegamiento de la protena y
su destinacin a la MP.
citosol
extracelular
|
o
SitiodefosforilacinAs369
Caractersticas de su transporte
Sufre cambio conformacional
E1= forma que fija ATP y se le une Na
E2= se forma al liberarse PO4 que
afinidad por K
afinidad por Na
Sitios de unin
3 Na+
2 K+
Hidroliza 1 ATP
Es electrognica
Genera corriente elctrica hacia afuera de la clula
Su velocidad de funcionamiento depende de:
Campo elctrico a travs de la membrana
Concentracin interior de Na y exterior de K
Es saturable
Cl
Por antiportador: Modelo
Dos configuraciones
A = sitio activo expuesto hacia el lado externo de
la MC
B = sitio activo expuesto hacia el lado interno de
la MC


El cambio de conformacin implica
Variacin de la energa libre

Na+ / Ca2+
Na+ / H+
R = 0,008314 = 8,314 x 10
-3
J/mo.K = 1,98 cal/ml.K

T = K
C2 = concentracin en el destino
C1 = concentracin en el origen