ESTRUCTURAS DE ADN DE ORDEN SUPERIOR

ESTRUCTURA DE LOS ACIDOS NUCLEICOS

- IDENTIFCACION DE LA ESTRUCTURA DE DOBLE HELICE DEL ADN

 TOPOLOGIA DEL ADN

- El ADN circular se encuentra restringido topológicamente

 TOPOLOGIA DEL ADN

- Los eventos de superenrollamiento tienden a una conformación de mínima energía

 TOPOLOGIA DEL ADN

Lk = número de enlace

El DNA en células eucariontes presente un superenrollamiento negativo

 EL NUMERO DE ENLACE SE COMPONE DE GIRO Y SUPERENROLLAMIENTO
Lk = Tw + Wr

Lk = número de enlace (número de veces que pasa una cadena sobre otra)
Tw= giro (cantidad de veces que una cadena se enrosca sobre la otra)
Wr= superenrollamiento (torsión sobre la doble hélice)
LOS TOPOISOMEROS DE DNA PUEDEN SER DENTIFICADOS POR
CENTRIFUGACION DIFERENCIAL Y ELECTROFORESIS
 TOPOISOMERASAS

Topoisomerasa I Topoisomerasa II

- Los nucleosomas inducen superenrollamientos negativos en eucariontes

-Las topoisomerasas pueden relajar el ADN superenrollado
-Los procariontes tienen una topoisomerasa especial que induce el
superenrollamiento (ADN girasa)
Las topoisomerasas también desanudan y desenredan las moléculas de ADN
Las topoisomerasas utilizan una unión covalente proteína-ADN para cortar
y volver a unir las cadenas de ADN

- Utilizan un intermediario covalente tirosina-ADN

- La unión fosfotirosínica mantiene la energía del enlace fosfodiéster
- La topoisomerasa II utiliza ATP para producir cambios
conformacionales que favorezcan el proceso enzimático
EMPAQUETAMENTO DEL ADN
 NUCLEOSOMAS
- Unidad básica de la cromatina y los cromosomas.
- Cada nucleosoma está formado por 9 moléculas de
Histonas (H1,2H2a,2H2b,2H3,2H4) y una molécula de
ADN de aprox. 200 pb.
NUCLEOSOMAS
 ESTRUCTURA CROMATINICA DE ORDEN SUPERIOR

- La histona H1 se une a dos regiones del ADN: el

ADN ligador y un segmento dúplex de ADN.
-La histona H1 estabiliza la estructura del nucleosoma
permitiendo la formación de estructuras cromatínicas
de orden superior: la fibra de 30 nm.
 ESTRUCTURA CROMATINICA DE ORDEN SUPERIOR

- Las colas N-terminales de las histonas son necesarias para la formación de las fibras de 30 nm
- La compactación adicional de ADN comprende bucles grandes de ADN nucleosómico
REGULACION DE LA ESTRUCTURA CROMATINICA
Complejos remodeladores y modificadores nucleosómicos

Complejo Subunidades Deslizamiento Transferencia Restructuración

SWI/SNF 8­11 SI SI SI
ISWI 2­4 SI NO NO
Mi2/NuRD 8­10 SI NO NO
La modificación de las colas N-terminales de las
histonas altera la accesibilidad de la cromatina

- Se cree que las colas histónicas no modificadas y metiladas

se asocian en mayor medida con el ADN nucleosómico que
las colas de histonas acetiladas.
- La modificación de las colas de histona crea sitios de unión
para enzimas modificadoras de la cromatina.
LA MODIFICACION DE HISTONAS Y LA
REMODELACION NUCLEOSOMICA ACTUAN
EN CONJUNTO PARA AUMENTAR LA
ACCESIBILIDAD DEL ADN
TOPOLOGIA DEL ADN (animación)
ACTIVIDAD DE LA TOPOISOMERASA(animación)
ESTRUCURA ADN (estructural)
ENSAMBLE DE NUCLEOSOMA (animación)
ESTRUCTURA NUCLEOSOMA (estructural)