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Cultivos fecales para patgenos aerbicos de gastroenteritis

Principio
Gastroenteritis causada por,
Bacterias Parsitos Virus

Conocer la epidemiologa local


Mtodos de cultivo de rutina

Rutina, deteccin
Salmonella spp., Shigella spp. y Campylobacter spp.

Principio
Otros patgenos,
E. coli O157, E. coli enterohemorrgica (EHEC)
Heces sanguinolentas, primavera e inicios del otoo, zonas endmica

Aeromonas spp. y Vibrio spp., comunidades costeras

Principio
Salmonella y Shigella,
Plaqueo directo, medios selectivos y diferenciales
Fermentacin de lactosa y produccin de H2S

Campylobacter jejuni
Metodologa diferente

Yersinia enterocolitica, Aeromonas spp., Plesiomonas shigelloides, Vibrio cholerae y otros Vibrio (V. parahemolyticus),
Medios de rutina, adems de sospecha clnica

Principio
Pactes. con tto. antimicrobianos de amplio espectro, no se cultivan
Antimicrobiano, causa la diarrea
Pseudomonas aeruginosa y Candida spp.

Pctes. con mas de 3 das de hospitalizado, se rechazan cultivo de heces

Coleccin

Coleccin, transporte y manipulacin

recipiente limpio y seco 5 ml de heces acuosas, 1 g o tamao de una nuez Salina glicerol bufferado (Shigella spp., inhibe a Campylobacter) Cary-Blair modificado (1 en vez de 5 g de agar/L)
QC, viabilidad con Shigella y Campylobacter Caldo de enriquecimiento, no usual Tubo de transporte anaerbico, cultivo de C. difficile, solo estudio epidemiolgico o

Coleccin, transporte y manipulacin


Hisopados rectales
Introducir ~ 2.5 cm del esfnter anal Cuidadosamente rotar para muestrear cripta anal Retirar hisopo y colocar en medio de transporte

Contenido duodenal, colostoma o ileostoma


En frascos tapa rosca o medio de transporte

Momento y envo

Coleccin, transporte y manipulacin

Fase aguda de infeccin (5 a 7 das)


Patgenos disminuyen en nmero con el tiempo

Sin medio de transporte


Procesarlo dentro de las 2 h de coleccin

Con medio de transporte


24 h a 4C

En adultos y peditricos, cultivo de 1 muestra


Sensibilidad >95%, bacterias entricas patgenas
Cultivos negativos, muestras seriadas

Rotular, N HC, localizacin, datos demogrficos de pcte., fecha, hora y sitio de coleccin

Coleccin, transporte y manipulacin


Criterios de rechazo
Sin medio de trasporte con mas de 2 h de coleccin, Shigella spp. Con medio de transporte con mas de 48 h a 4C mas de 24 h a 25C
Falsos negativo

Mltiples muestras del mismo paciente en el mismo da Hospitalizados por mas de 3 das
VIH positivo Brote

Notificar si el medio de transporte fue

Criterios de rechazo

Coleccin, transporte y manipulacin

Si medio de transporte vir al amarillo Heces duras o slidas Hisopos secos Heces con bario

Medios de cultivo
Rutina
Agar sangre Agar MacConkey XLD y/o SS Caldo de enriquecimiento, Selenito-F GN
Incrementa 10%, Salmonella y Shigella

Otros medios
Indicacin Prevalencia

Control de Calidad
Verificar fecha expiracion y parametros de QC CLSI

Procedimiento
Montaje hmedo, leucocitos fecales
Factor sugestivo de infeccin invasiva No ayuda en pacientes hospitalizados Se destruyen en medios de transporte

Procedimiento
Mtodos de Cultivo
Inoculacin
Inocular las placas, hisopo humedecido Rodar en rea pequea: AS y AMC
Estriar en cuadrantes

Usar gran inoculo para XLD y SS Inocular caldo Selenito-F o GN

Incubar todos los agares, 35-37C por 24 h, aerbicamente


Caldo Selenito-F, 18-24 h, 35-37C, aerbico
Subcultivar sobre MAC y XLD

GN, 6-8 h
Subcultivar sobre MAC y XLD

Procedimiento
Examen de los cultivos
AS
Investigar todas las colonias oxidasa positivo
Subcultivar sobre AS y TSI

Identificar P. aeruginosa y S. aureus numerosos, sin ATB Identificar B. cereus, BGP esporulados, catalasa positivo, mvil, resistente a penicilina Notar la ausencia de BGN entricos

Procedimiento
Examen de los cultivos
XLD, SS y MAC
Identificar colonias lactosa negativo y/o H2S positivo MAC y SS, picar cada colonia incolora XLD, picar colonia roja o rojo-naranja y cualquiera con centro negro

Identificar las colonias subcultivadas en AS y TSI


Serologa para Salmonella y Shigella

Realizar ATB a todos los patgenos entrico, excepto a E. coli O157


Los resultados no deben ser rutinariamente reportados, salvo
A solicitud del mdico Infeccin diseminada (orina, sangre u otro fluido estril) S. typhi, sin importar edad Shigella spp. Salmonella en <de 1 ao y >de 65 aos

Cultivo negativo Comentarios adicionales


Microbiota entrica ausente
BGN entricos anormales

Reporte de resultados

cultivo negativo a Salmonella, Shigella y Campylobacter, rutinariamente testados

Si predomina o cultivo puro de P. aeruginosa o S. aureus Predominante o cultivo puro de (nombre del organismo) Reportar levaduras si predominan o cultivo puro, sin identificacin de gnero y especie Cultivo puro de microbiota inusual, Klebsiella spp.