FACULTAD DE MEDICINA HUMANA DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS CELULAR BIOLOGIA MDICAS Y MOLECULAR

Organelas Bioenergticas: Mitocondrias y cloroplastos Blga. Milagros Quintana

Cceda, MSc.
Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

Septiembre 2011

BCM: Clase 7

11

Semana 6

Organelas bioenergticas: Mitocondria y cloroplasto. Morfologa y funciones.

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

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Organelas bioenergticas
son

Mitocondrias
formadas por Matriz Membrana Mitocondrial externa posee

presentes en

Animal es Vegetal es

es en present

Cloroplastos
formados por

Membrana Mitocondria interna presenta Crestas mitocondriale s contienen

realizan

ADN mitocondri al Mitorribosom as Enzima s

Protenas transmembran a Como la Porina

com o

realizan la

Proceso s metabl icos

Transportador es de electrones se encuentran en la liberan

ATPEnerga sintetasa luminos donde se base para a sintetiza realizar la ATP mediante Clorofil a

como Carotenoid es 33

Ciclo de ATC

Biosntes Carlos Marco Santa Mg. Cadena Quimismos is respirato is Carpio ria protenas

Cruz Fotosntesis

BCM: Clase 7

realizan la

absorben la

inte rvie n ne en l a

contiene Tilacoid Estroma Membrana Membrana es Plastidial Plastidial los interna externa pequeos posee forman la ADN plastidi Gra al na Protenas Plastorriboso translocadoras mas Pigmentos Enzima fotosinttic s os posee n contien e

contien e

Mitocondrias
Blefaroplasto, condrioplastos, condriosomas, grnulos fucsinoflicos, mitogel, cuerpos parabasales, vermculas, sarcosomas, cuerpos intersticiales, plasmosomas, plastocondrios, bioblastos, etc. Encargados de suministrar la mayor parte de la energa necesaria para la actividad celular. En organismos eucariota (hongos, animales y plantas). Estructuras mviles y muy plsticas que se deforman, se dividen y fusionan. Normalmente se las representa como Cilindros alargados. Ocupan el 25% del volumen celular Desplazamiento asociado a los microtbulos Pueden formar largos filamentos o cadenas mviles. Posee un sistema gentico propio.
Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio BCM: Clase 7 44

Mitocondria: Estructura y Composicin

Tamao: Longitud: 0.5 10 m Dimetro: 0.5 1 m N/clula: 1 1000 Condrioma celular: conjunto de mitocondrias en la clula.
Ejm. Hepatocito de 1000 2000 mitocondrias (1/5 del volumen celular).

Estructura: Membrana interna (Crestas) Membrana externa Espacio Intermembranoso Matriz

Composicin Molecular: Protenas y fosfolpidos de las membranas son muy diferentes. Mg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7
Carpio

55

ATP CresSintasa ta (F0F1)

Membrana Externa (bicapa lipidica) 50% de protenas, 50% lpidos Permeable a iones, molculas 5Kd (metabolitos, polipptidos) Contiene enzimas implicados en sntesis de lpidos. Membrana Interna (altamente selectiva) Impermeable a molculas 5 Kd y iones, incluido H+

Contiene:

80% protenas, 20% lpidos de los cuales 10% es cardiolipina Transportadores de la cadena de electrones (Complejo I-IV) Otros Transportadores de membrana. Traslocasa ADP-ATP Difosfatidilglicerol (DPG) ATP Sintasa (F0F1)

Riboso mas Canales VDA Porina C

Espacio Intermembranoso
Contiene Citocromo c Enzimas dependientes Santa Cruz Mg. Carlos Marcode ATP para fosforilar Carpio otros nucletidos.

Matriz Cardiolipina Contiene: Complejo Piruvato DH Enzimas del Ciclo cidos Tricarboxilicos Enzimas - oxidacin Enzimas de oxidacin de Aminocidos Ribosoma, ADN Muchas otras enzimas ATP, ADP, Mg+2, Ca+2, K+ Muchos intermediarios metablicos solubles 66 BCM: Clase 7

Mitocondria: Funciones
Integracin del metabolismo de los azcares Oxidacin del piruvato Ciclo de los cidos tricarboxilicos (ATC) Metabolismo de los aminocidos Metabolismo de los cidos grasos y esteroides Respiracin celular Produccin de la Energa Termognesis

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

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Vas Metablicas en la Mitocondria

ANT= Translocador

adenina nucletido CACT= Translocasa carnitina acilcarnitina CPT= Carnitina palmitoil transferasa DIC= Transportador de Dicarboxilatos ETF= Flavoprotena transportadora de electrones ETF-DH= deshidrogenasa transportadora de electrones PDHC= Complejo Piruvato deshidrogenasa TCA= cidos Tricarboxlicos (Ciclo Krebs)

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

88

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

99

Complejos Multiprotecos del Transporte de electrones en la Cadena Respiratoria

NADH y NADH deshidrogenasa

COENZIM A Q:
10 unidades de isoprenos en mamferos y 6 unidades en bacterias. Acepta electrones del NADH y del Succinato

Citrocomo Oxidasa (Complejo IV)

Fo-F1 ATP sintasa (Complejo V)

Succinato Deshidrogenasa (Complejo II)

Coenzima Q Oxidoreductasa y Citocromo c reductasa (Complejo III)

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

10 10

Complejos Multiprotecos en el ensamblaje respiratorio

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

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Determinacin del Transporte de Electrones de la Cadena Respiratoria

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

12 12

Translocacin de protones a travs del gradiente de la membrana interna mitocondrial

NAD +

NAD +

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

13 13

Membrana externa

Quimiosmosis
Es el termino dado al proceso donde los protones atraviesan una membrana a travs de una gradiente electroqumico de protones. El protn usa un complejo proteico integral de membrana llamado Complejo FoF1. Este complejo contiene una enzima que liga ADP a Pi y sintetiza ATP. La energa necesaria para esta reaccin es obtenida de la difusin de protones a travs de la gradiente de concentracin, desde que este es un proceso exergnico
BCM: Clase 7 14 14

Membrana interna

Matriz Quimiosmosis

AT P

H +

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

ATP

Los enlaces fosfoanhidridos del ATP representan el Potencial Qumico de Energa. Los dos enlaces fosfoanhidridos terminales, son conocidos como enlaces de alta energa, por que cuando se hidrolizan ellos liberan una gran cantidad de energa. La energa liberada se utiliza para: transporte activo, contraccin muscular, movimiento celular, movimiento intracelular de organelas y cromosomas.

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

15 15

Sntesis de ATP
Hay muchas vas metablicas por la cul clulas de organismos heterotrficos pueden sintetizar ATP.

MECANISMO: Fosforilacin a nivel de sustrato (Gluclisis y Creatina fosfato) Quimiosmosis

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio BCM: Clase 7 16 16

Termognesi Capacidad de generar calor en el organismo debido a reacciones metablicas. s

La disipacin de calor equilibra esta generacin de energa interna dando lugar a una homeostasis trmica (equilibrio trmico) en las clulas (37C en el hombre) La termognesis puede ser inducida por dieta (alimentos con capacidad termognica) Si la energa contenida (como grasa, protena y glucgeno) no se ve alteradaMg. Carlos Marco Santa de Calor=0) la energa entrante es (Almacenamiento Cruz 17 BCM: Clase 7 igual a la que sale, y por lo tanto se produce un equilibrio energtico.17 Si Carpio

Flagelo

Rotacin del flagelo bacteriano Gradiente de protones a travs de la membrana plasmtica es utilizada para: Impulsar la sntesis de ATP. Transporte de metabolitos. Rotacin del flagelo para desplazarse.

Espacio Extracelular
Membrana bacteriana externa Membrana bacteriana interna (Membrana plasmtica)

Estativo Proteico

Rotor Proteico

Bomba de protones

Motor flagelar girando a ms de 100 revoluciones por segundo

Citoplas ma

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

18 18

ADN Mitocondrial
ADN es circular, bicatenario, cerrado, sin extremos. En los seres humanos tiene un tamao de 16569 pares de bases, conteniendo un pequeo nmero de genes (que codifican para13 protenas mitocondriales y algunos ARN) distribuidos entre la cadena H y la cadena L. Cadena H: Composicin en bases (total bases: 16569): 4096 A ; 2171 C ; 5180 G ; 5122 T. Peso molecular: 5168.726 daltons Cadena L: Composicin en bases (total bases: 16569): 5122 A ; 5180 C ; 2171 G ; 4096 T. Peso molecular: 5060.609 daltons. Cada mitocondria contiene entre 2 y 10 copias de la molcula de ADN.

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

19 19

Caractersticas Especficas de la Gentica Mitocondrial

Localizado en un organelo citoplasmtico Herencia materna Segregacin mittica Alta velocidad de mutacin No presenta intrones Poliplasmia (alto nmero de copias

16,569 pb

Mapa gentico del DNA mitocondrial humano. se representa las dos hebras del DNA con los genes que codifican: rRNA (12s y 16s), tRNA, sealados con la abreviatura del aminocido que transportan, y secuencias codificadoras de protenas (CO: subunidades citocromo c oxidasa; cyt b: citocromo b y ND: subunidades de NADH deshidrogenasa). H1, H2 y L indican los lugares de iniciacin de la transcripcin de las hebras pesada y ligera, 20 Mg. Carlos orgenes de replicacin BCM: Clase 7 respectivamente. OH y OL simbolizan los Marco Santa Cruz de la cadena pesada y ligera

Carpio

20

En el ADN mitocondrial humano estn codificados 37 genes (frente a los 20,000 25,000 genes ADN cromosmico nuclear): 2 ARNr ribosmicos, 22 ARNt de transferencia y 13 ARNm para protenas que participan en la fosforilacin oxidativa
genes que codifican el complejo I de NADH deshidrogenasa genes que codifican el complejo IV de citocromo oxidasa genes que codifican el complejo V (ATP-sintasa) genes que codifican el complejo III (ubiquinona-citocromo b oxidoMg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7 reductasa)

Carpio

21 21

rganos afectados por las patologas mitocondriales

La funcin de los complejos de la fosforilacin oxidativa pueden sufrir alteraciones por defectos en el ADNn o/y en el ADNmt; lo cual afecta la produccin de ATP que traer como consecuencia el dao a diferentes rganos.
Adapted from Johns, DR: Mitochondrial DNA and Disease. The New England Journal of Medicine; 333: 638-644, 22 Mg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7 1995.

Carpio

22

rganos afectados por las patologas mitocondriales

ORGANO

AFECTACIN
Retraso en el desarrollo, retardo mental, demencia, convulsiones, desrdenes neuropsiquitricos, parlisis cerebral atpica, migraas, infartos. Debilidad, dolor nueroptico, ausencia de reflejos, problemas gastrointestinales (reflujo gastroesofgeo, vaciado gstrico retrasado, constipacin, pseudo obstruccin), desmayos, ausencia o exceso de sudor relacionados con problemas de regulacin de la temperatura. Desgasta proximal renal tubular que provoca prdida de protenas, magnesio, fsforo, calcio y otros electrolitos. Defectos en los conductos cardiacos (bloqueos del corazn), cardiomiopata. Hipoglicemia (niveles de azcar bajos en la sangre), falla del hgado. Prdida de visin y ceguera. Prdida auditiva y sordera. Diabetes y falla pancreattica exocrina (incapacidad para generar encimas digestivas). Incapacidad para subir de peso, corta estatura, fatiga, problemas respiratorios Mg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7 incluyendo sofocamientos intermitentes. Carpio 23 23

Cerebro

Nervios

Msculos Debilidad, hipotona, calambres, dolor muscular. Riones Corazn Hgado Ojos Odos Pncreas Sistmico

Pueden ser causadas por mutaciones puntuales: sustitucin, insercin o deleccin En la base de secuencias codificadoras.
Factores: Naturaleza de la mutacin Grado de heteroplasmia Requerimientos energticos del tejido Capacidad del tejido para reparar el dao.

Enfermedades Mitocondriales

Carpio

Las mutaciones que ocasionan enfermedades se indican con el nmero de la pareja de bases (p.e. 24 Mg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7 MELAS 3243)

24

Grupo

Nombre de Enfermedad
Neuropata ptica hereditaria de Leber (LHON) Sndrome de Neuropata, ataxia y retinoplasta pigmentaria (NARP)

Caracterstica de la Mutacin en Gen enfermedad ADNmt Afectado

G3460 A G11778 A T14484 C T8993 G ND1 ND4 ND6 ATPasa 6
Perdida visin central. Neuropata perifrica Ataxia cerebral Debilidad muscular neurognica Ataxia Retinitis pigmentosa Demencia Retraso desarrollo Degeneracin multisistmica Ataxia Convulsiones Neuropata perifrica. Epilepsia mioclnica. Convulsiones Miopata Demencia Sordera Neuropata Convulsiones generalizadas. Dolor de cabeza. Sordera Demencia

Sndrome de Leigh de herencia materna (MILS)

T8993 G T8993 C

ATPasa 6 ATPasa 6

Mutaciones Puntuales en ADNmt

Sndrome de Epilepsia mioclnica A8344 G con fibras rojo-rasgadas (MERRF) T8356 C

tRNALis tRNALis

Sndrome de encefalomiopata mitocondrial con cidosis lctica y episodios de accidentes cerebrovasculares (MELAS) Diabetes de herencia Materna con sordera.

A3243 G C3256 T T3271 C T3291 C T9957 C A3243 G

tRNALeu tRNALeu tRNALeu tRNALeu CO III tRNALeu

Sordera

Anemia macroctica Reorganizaciones en el Sndrome de mdula sea-pncreas Deleccin nica Muerte de Pearson ADNmt 25 Mg. Carlos Marco Santa Cruz BCM: Clase 7 Deplesiones ADNmt Relacionada con el nmero de copias del ADNmt por mutaciones en genes del ADNn. 25 Carpio

Organelas bioenergticas
son

Mitocondrias
formadas por Matriz Membrana Mitocondrial externa posee

presentes en

Animal es Vegetal es

es en present

Cloroplastos
formados por

Membrana Mitocondria interna presenta Crestas mitocondriale s contienen

realizan

ADN mitocondri al Mitorribosom as Enzima s

Protenas transmembran a Como la Porina

com o

realizan la

Proceso s metabl icos

Transportador es de electrones se encuentran en la liberan

ATPEnerga sintetasa luminos donde se base para a sintetiza realizar la ATP mediante Clorofil a

como Carotenoid es 2626

Ciclo de ATC

Biosntes Carlos Marco Santa Mg. Cadena Quimismos is respirato is Carpio ria protenas

Cruz Fotosntesis

BCM: Clase 7

realizan la

absorben la

inte rvie n ne en l a

contiene Tilacoid Estroma Membrana Membrana es Plastidial Plastidial los interna externa pequeos posee forman la ADN plastidi Gra al na Protenas Plastorriboso translocadoras mas Pigmentos Enzima fotosinttic s os posee n contien e

contien e

PLASTOS

Estructuras membranosas de composicin qumica lipoproteica, que en su interior pueden contener pigmentos, enzimas y/o iones. Se encuentran en el citoplasma de las clulas tanto de algas como de plantas. Sirven como almacn de protenas, lpidos o almidn (leucoplastos) , o bien de pigmentos (cromoplastos).
Los plastos se clasifican en: Leucoplastos, formados por una membrana; Cromoplastos, que almacenan pigmentos rojo, amarillo y anaranjado; Cloroplastos, que en su interior encontramos la grana, intergrana y los tilacoides, dentro de los cuales esta contenida la molcula de clorofila
Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio BCM: Clase 7 27 27

Cloroplasto

Realizan fotosntesis en horas de luz. Son descendientes de bacterias fotosintticas productoras O2 Miembro ms destacado de la familia de los plastidos . Todos los plastidos de una misma especie contienen mltiples copias del mismo genoma. Rodeado por envoltura de membranas. Realizan sus interconversiones energticas mediante mecanismos quimiosmticos.
BCM: Clase 7 28 28

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

Cloroplasto: Estructura
Hoja Epidermis superior (haz) Cloroplasto Estro ma

Contiene: Enzimas metablicas; RNA, ADN, ribosomas; Lpidos, grnulos de almidn y otras sustancias

Grana

Gra na Membra Epidermis inferior na Espacio (envs) Membra Membrana tilacoida tilacoida Altamente na l externa Espacio l permeable interna (Porinas) Menos permeable Intermembrana Cadena de transporte de 29 Mg. Carlos Marco Santa Cruz Contiene protenas de e- BCM: Clase 7 29 Carpio transporte.

Cloroplasto: Funciones
Realizar la fotosntesis que comprende: Reacciones fotosintticas de transferencia de electrones Fase luminosa: Se realiza en la membrana de los tilacoides, donde se halla la cadena de transporte de e- y la ATP-sintasa responsables de la conversin de la energa lumnica en energa qumica (ATP) y de la generacin del poder reductor (NADPH). Reacciones de fijacin de Carbono Fase oscura: Se produce en el estroma, donde se halla el enzima Ribulosa-1,5-difosfato carboxilasa oxidasa (RuBisCO), responsable de la fijacin del CO2 mediante el Ciclo de Calvin.
Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio
Cloroplasto
Reacciones fotosintticas de transferencia de e- en la Membrana Tilacoidal

Reacciones de fijacin de C en el estroma

Azcares, Aminocidos, cidos grasos

BCM: Clase 7

30 30

Reacciones Fotosintticas de transferencia de eEn los cloroplastos, los pigmentos fotosintticos (clorofila a, clorofila b y carotenoides) son encerrados en estructuras de membranas llamadas Fotosistema I (PSI) y Fotosistema II (PSII). Los e- son transportados de PSII a PSI va la cadena de transporte de e-.

Espacio Tilacoide

ADP + Pi ATP Estroma

Estro ma

Fotosistema Fotosistem aI Los fotones inciden sobre II excitando y liberando 2 e-, que pasan al primer PSII,
aceptor de e-, la feofitina. Los e- los repone el primer dador de e-, el dador Z, con los e- procedentes de la fotlisis del agua en el interior del tilacoide . Los protones de la fotlisis se acumulan enMarco Santa del tilacoide, BCM: Clase 7 y el O2 es liberado. 31 Mg. Carlos el interior Cruz
Carpio 31

Variaciones de Potencial redox durante la fotosntesis

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

32 32

Reacciones de Fijacin de Carbono

3 Molculas de CO2 se fijan y dan una produccin neta de 1 molcula de 3-fosfato y un costo neto de 9 molculas de ATP y 6 molculas de NADPH

Ribulosa 1,5 diP compuesto rico en energa favorece la fijacin del CO2. Se requiere 2 NADPH y 3 ATP Se produce gliceraldehdo 3-P que puede transformar en Fructosa 6-P y glucosa. Se forma Sacarosa que luego se transporta desde las hojas a toda la planta. El gliceraldehdo que se queda en el cloroplasto es transformado en almidn.
BCM: Clase 7 33 33

Azcares, Aminocidos y cidos grasos

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

La fijacin del CO2 ocurre en tres estados

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio BCM: Clase 7 34 34

Reduccin del 3PG

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

35 35

Otras funciones de los cloroplastos

Sntesis de cidos grasos y aminocidos en el estroma El poder reductor impulsa la reduccin de nitritos (NO2- a amoniaco (NH3), necesario para sntesis de aminocidos y de nucletidos.

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

36 36

rbol filogentico de la probable evolucin de los cloroplastos y mitocondrias

Mg. Carlos Marco Santa Cruz Carpio

BCM: Clase 7

37 37