Interaes Antgeno Anticorpo -na fisiologia e fisiopatologia -nos testes laboratoriais

ANTGENO - conceito ?

Antibody generator

Origens da Imunologia - microbiologia

Interao Antgeno - Anticorpo

Interao Epitopo - Idiotipo

Epitopo Idiotipo

Anticorpos

Anticorpos
Fab = fragmento antigen binding

Fc = fragmento cristalizvel

Clulas normais
Auto-antgeno Anti-idiotipo

Clulas Tumorais
Antgenos Tumorais Anti-imuno globulina

Infeco
Antgenos Microbianos

Auto-imune

Anti-idiotipo

Anti-tumor

Anti-imuno globulina

Antipatgenos

Resposta imunolgica

Auto -anticorpos Naturais

Protenas do citoesqueleto DNA Protenas de membrana Protenas sricas: IgG, linfocinas, hormnios (ex. insulina)

Interao Ag- Ac = formao de complexos

Relao ideal entre a quantidade de Acs e Ags Excesso de um deles Reao negativa ou fraca

Curva de precipitao
importante levar-se em conta como ocorre a ligao Ag-Ac em diferentes concentraes dos mesmos. Observe abaixo:
Anticorpo livre Antgeno livre 100%-Percentual de complexo imune precipitado

+ -

Zona de excesso de anticorpo

Zona de equivalncia

Zona de excesso de antgeno

Quantidade de antgeno adicionado

 medida que concentraes crescentes de Ag so adicionados a uma quantidade constante de Ac, a quantidade de complexos imunes precipitados inicialmente aumenta, caindo a seguir. De modo sequenciado, observa-se a:
* zona de excesso de Ac: quantidade de Ag insuficiente para reagir com e precipitar todo o Ac presente. O Ac livre pode ser detectado no sobrenadante. * zona de equivalncia: o Ag adicionado suficiente para se combinar com e precipitar todo o Ac presente. Nem Ag nem Ac livre podem ser detectados no sobrenadante. * zona de excesso do Ag: a quantidade de Ag excede aquela necessria para ligar todo o Ac, havendo reduo da quantidade de Ac precipitado. Esta diminuio resultante da solubilizao dos complexos Ag-Ac pelo excesso de Ag.

PROZONA

Como definir a concentrao ideal ???

PROZONA = quando ocorre excesso de Anticorpos e pode causar Erro = falso negativo
Titulao e diluio do anticorpo para resolver.

Para testes sorolgicos (Ex: ELISA) e teciduais (Ex: IHQ)

Deteco de Acs

Deteco de Ags

Problemas na interao Ag-Ac

-Afinidade -Especificidade -Reaes Falso + e Falso

DETECO DE ANTGENOS E ANTICORPOS

AG

AC

SISTEMA REVELADOR

Fixao do C`

Fluorocromo Radioistopo

Precipitao Aglutinao

Enzima

Fundamentos da Imunologia Laboratorial

Ag - Ac Atrao fsico-qumica

Fundamentos da Imunologia Laboratorial

A visualizao destas interaes (Ag-Ac) poder ser feita a partir de Ac

conjugados a fluorocromos (IMUNOFLUORESCNCIA), ou a enzimas

(imunoenzimaticas) como a peroxidase (IMUNOPEROXIDASE) ou substancias radioativas (radioimunoensaio) ou fixao de C.