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Segn
Carga Neta Alta sensibilidad, poder de resolucin Peso Molecular Estructura Tridimensional y versatilidad
Una mezcla de molculas cargadas se coloca en un campo elctrico Atraccin hacia el electrodo que posee su carga opuesta
Movilidad electrofortica
Fuerzas Adicionales
Migracin no Homognea
VOLTAJE ALTO Genera un excesivo calor, y si el calor se acumula, se puede hacer hervir a la solucin e incluso descomponer el gel y/o los solutos
VOLTAJE BAJO pobre separacin, por causa de la difusin por tiempo muy prolongado de la corrida electrofortica
Voltaje
Contracationes libres hidratados migran hacia el ctodo Grupos cargados del soporte se ionizan en soluciones tampn
Movimiento relativo del solvente respecto al soporte slido Transporte de las molculas NEUTRAS hacia el ctodo
La movilidad de las partculas cargadas es inversamente proporcional a la raz cuadrada de la fuerza inica
FUERZA INICA BAJA La velocidad de migracin aumenta reducindose la difusin. La zona de separacin es ms ancha y se aumenta la resolucin.
Alto poder resolutivo Son los ms usuales y tiles para separar mezclas complejas
Solucin Electroltica
Gel
Muestra
Fuente de poder
Ctodo
Cubeta nodo
Geles:
Transparentes Insolubles en agua No inicos
Variando la concentracin de polmeros, se puede modificar de manera controlada en el tamao del poro
Gradiente Creciente de Concentracin Gradiente Decreciente en el Tamao del Poro Criterios de Separacin :
Carga Neta y Tamao Molecular
Matriz de fibras polimricas en un medio lquido Retarda el paso de molculas grandes (20000 nuclotidos)
Se pueden separar cationes, aniones, protenas, macromolculas y sustancias no cargadas en forma simultnea Permite obtener espectros caractersticos de la separacin
Fuente de poder de alto voltaje (20 a 30 KV) Capilar de slica fundida de 75 100 cm de largo, 25 75 m de dimetro interno y 100 200 m de dimetro externo refrigerado por aire Electrodos de platino Carrousel de muestras/buffers
Direccin 1: Isoelectroenfoque