CIDOS NUCLICOS

Propriedades Gerais Estrutura do DNA e RNA Funes dos cidos Nuclicos Biossntese dos cidos Nuclicos (Replicao e Transcrio)

Profa. Darcielle Dias

Creio no DNA todo poderoso Criador de todos os seres vivos, Creio no RNA, seu nico filho, que foi concebido por ordem a graa do DNA polimerase. Nasceu como transcrito primrio padeceu sobre o poder das nucleases, metilases e poliadenilases. Foi processado, modificado e transportado. Desceu do citoplasma e em poucos segundos foi traduzido protena. Subiu pelo retculo endoplasmtico e o complexo de Golgi E est ancorado direita de uma protena G Na membrana plasmtica De onde h de vir a controlar a transduo de sinais Em clulas normais e apoptticas Creio na Biologia Molecular Na terapia gnica e na biotecnologia No seqenciamento do genoma humano Na correo de mutaes Na clonagem da Dolly Na vida eterna. 2 Amm

ORAO DO DNA

OS CIDOS NUCLICOS DNA e RNA

CIDO DESOXIRRIBONUCLICO E CIDO RIBONUCLICO 5 4 3 FOSFATO 1 2 BASE NITROGENADA ADENINA GUANINA CITOSINA TIMINA PIRIMDICAS

PRICAS

PENTOSE Desexirribose

James Watson e Francis Crick FUNES DO DNA - o principal constituinte dos cromossomos; - Constituem os genes; NUCLEOTDEOS 3 3 5 3 NUCLEOTDEOS 5 3 3 NUCLEOTDEOS 3 5 5

3 5 3 5

- Responsveis pelas caractersticas dos indivduos FUNES DO RNA - Participa da sntese das protenas. - Formado a partir do DNA; NUCLEOTDEOS

O Dogma Central da Biologia Molecular:

Consideraes gerais
Os nucleotdeos participam do metabolismo celular cidos Nuclicos fornecem roteiro para todos os eventos realizados numa clula. So as molculas com funo de armazenamento e expresso da informao gentica. Existem 2 tipos de cidos nuclicos:  O cido Desoxirribonuclico - DNA  O cido Ribonuclico - RNA Ac. Nuclicos so macromolculas formadas pela ligao tipo fosfodister entre cinco nucleotdeos diferentes.

NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Nucleotdeos

So as unidades fundamentais dos cidos nuclicos. Ligam-se uns aos outros atravs de ligaes fosfodister, formando cadeias longas com milhes de resduos de comprimento. Participam da estrutura dos cidos nuclicos. Atuam como componentes na estrutura de coenzimas importantes no metabolismo oxidativo da clula. Agem como forma de energia qumica - ATP. Funcionam ainda como ativadores e inibidores importantes em vrias vias do metabolismo intermedirio da clula.
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Estrutura dos Nucleotdeos Os nucleotdeos so molculas formadas por: y Uma pentose y Uma base nitrogenada y Um ou mais radicais fosfato

NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Estrutura dos Nucleotdeos As bases nitrogenadas

Pertencem a 2 famlias

Pricas: Adenina e Guanina Pirimdicas: Citosina, Timina Uracila

Tanto DNA como RNA possuem = bases pricas, e a citosina. A timina existe apenas no DNA, e no RNA, uracila. Em alguns tipos de DNA virais e no RNAt podem aparecer bases incomuns. As propriedades das bases afetam a estrutura dos cidos nuclicos.
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Estrutura dos Nucleotdeos As pentoses

A adio de uma pentose a uma base nitrogenada produz um nucleosdeo. Os nucleosdeos de A, C, G, T e U so respectivamente Adenosina, Citosina, Guanosina, Timidina e Uridina. Se o acar em questo a RIBOSE: ribonucleosdeo, caracterstico do RNA. Se o acar a desoxirribose: desoxirribonucleosdeo, caracterstico do DNA. A ligao com a base nitrogenada ocorre sempre atravs da hidroxila do carbono anomrico da pentose.
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Estrutura dos Nucleotdeos O Fosfato

A adio de um ou mais radicais fosfatos pentose Ligao tipo ster OH do C 5 P cargas negativas Nucleotdios

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA

Presente no ncleo das cl. eucariticas, nas mitocndrias e nos cloroplastos, e no citosol das clulas procariticas. A sequncia de aminocidos de cada protena e a sequncia de nucleotdeos de cada molcula de RNA numa cl. so especificadas pela sequncia de DNA. Nas clulas germinativas e no ovo fertilizado, dirige todo o desenvolvimento do organismo, a partir da informao contida em sua estrutura. duplicado cada vez que a clula somtica se divide.

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA Estrutura

O DNA um polidesoxirribonucleotdeo formado por milhares de nucleotdeos ligados entre si por ligaes 3, 5-fosfodister. Sua molcula formada por uma fita dupla antiparalela, enrolada sobre si mesma formando uma dupla hlice. As ligaes fosfodister podem ser quebradas enzimaticamente por enzimas chamadas NUCLEASES, que se dividem em: -Endonucleases -Exonucleases
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA Estrutura

A Dupla Hlice:
y Na dupla hlice do DNA, descrita pela primeira vez por Watson e Crick (1953), as cadeias da molcula se dobram em torno de um eixo comum e de modo antiparalelo - a extremidade 5 de uma cadeia pareado com a extremidade 3 da outra cadeia. y No tipo mais comum de hlice - "B" - o esqueleto hidroflico de fosfatos e pentoses fica na parte externa, enquanto que as bases hidrofbicas, fixadas este esqueleto, ficam no lado de dentro da estrutura. y A estrutura lembra uma escada em caracol.
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A Dupla Hlice
A dupla hlice apresenta dois tipos de sulcos aos quais se ligam as protenas da cromatina
Sulco menor

Sulco maior

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA Estrutura

A Dupla Hlice: H um pareamento de bases entre as fitas da molcula do DNA. Assim,
temos sempre pareadas: - Adenina com Timina A-T - Citosina com Guanina C-G y As bases se mantm pareadas por pontes de hidrognio, 2 entre "A" e "T" e 3 entre "C" e "G". y As fitas do DNA podem ser separadas sob certas condies experimentais, s/ rompimento das ligaes fosfodister, e a dupla hlice pode ser desnaturada em um processo controlado e dependente de temperatura.
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA

A Dupla Hlice:
y Existem 3 formas estruturais de DNA:

- A forma "B" descrita por Watson e Crick em 1953 e j citada acima, a forma mais comum; a hlice voltada para a direita e com 10 resduos por volta, com planos de bases perpendiculares ao eixo helical. - A forma "A" Obtida pela desidratao moderada da forma "B", tambm voltada para a direita, mas possui 11 resduos por volta e as bases esto em um ngulo de 20 graus em relao ao eixo helical.

- A forma "Z" A hlice nesta forma voltada para a esquerda e contm cerca de 12 resduos por volta.
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A Dupla Hlice

28 O B-DNA o predominante em condies fisiolgicas

A Dupla Hlice
A forma predominante de toro da espiral do DNA para a direita ou sentido horrio

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS DNA

A Dupla Hlice:

Certas sequncias de DNA adotam estruturas no usuais: curvaturas vrios

resduos de A, palndromo repeties invertidas da sequncia de bases com simetria dupla ocorrendo nas 2 fitas do DNA.

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

RNA
Atua como uma espcie de "cpia de trabalho", criada a partir do molde de DNA e utilizada na expresso da informao gentica. A sntese de uma molcula de RNA a partir de um molde de DNA chama-se "TRANSCRIO. Nesta transcrio, modificaes podem ocorrer sobre a molcula de RNA transcrita, convertendo-a de uma cpia fiel em uma cpia funcional do DNA.

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS RNA Estrutura

Em relao ao DNA, 4 diferenas so importantes: y O RNA possui uracila no lugar da timina na seqncia de bases. y A pentose do RNA a ribose.

y O RNA formado por uma fita nica, c/ eventual pareamento de bases intracadeia. y A molcula do RNA muito menor que a do DNA.
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RNA - Molcula Tipos:

mRNAs (RNAs mensageiros): veculo pelo qual a informao gentica transferida do DNA aos ribossomos para a sntese de cadeias polipeptdicas. rRNAs (RNAs ribossmicos): componentes estruturais dos ribossomos - catalisam a traduo de um mRNA em uma cadeia polipeptdica. tRNAs (RNA transportador ou de transferncia): molculas adaptadoras que traduzem a informao presente no mRNA em uma seqncia especfica de aminocidos.
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Replicao Transcrio
Transcrio Reversa

- Processo para sntese de todos os RNAs da clula - Reflete o estado fisiolgico da clula - O conjunto de genes expressos em uma dada situao varivel - Processo catalisado pelas RNAs polimerases

Replicao de RNA

Traduo

Protena

Principais Tipos de RNA

RNA mensageiro (mRNA): contm a informao gentica para
a sequncia de aminocidos das protenas. formado no ncleo e contm a mensagem - o cdigo transcrito a partir do DNA - para a sntese das protenas. Cada conjunto de trs nucleotdeos no RNAm chamado de CDON.

RNA transportador (tRNA): Est presente no citoplasma e

responsvel pelo transporte dos aminocidos at os ribossomos para a sntese protica. No RNAt existe uma seqncia de nucleotdeos correspondente ao cdon chamada de ANTI-CDON.

RNA ribossmico (rRNA): Faz parte da estrutura dos

ribossomos e participa do processo de traduo dos cdons para construo das protenas.

RNA transportador (RNAt)

produzido nos cromossomos a partir de DNA especiais. uma molcula cadeia curta, ( o menor RNA) que transporta os aminocidos que esto dispersos no citoplasma at os ribossomos. O RNAt tem formato de folhas de trevo e contm outros tipos de bases, alm das comumente encontradas nos outros RNA. Cada RNAt capaz de reconhecer um determinado aminocido (cdon), no RNAm. Todo RNAt tem um filamento livre de sua molcula composta pela seguinte seqncia de bases: ACC. nesse local que ocorre a associao com o aminocido. Em cada regio da molcula existe uma seqncia de 3 bases denominadas anticdon, que reconhece a posio do aminocido no RNAm.

RNA Ribossmico (RNAr)

o RNA que ocorre em maior quantidade nas clulas. Esse RNA encontrado no nuclolo, onde produzido, e no citoplasma, associado s protenas, formando os ribossomos.

tRNA
-Estrutura secundria com grampos e alas formando um trevo -Alto nmero de bases modificadas depois da sua transcrio

Ribossomo bacteriano 70S (2,7 x 106)

Ribossomo Eucaritico 80S (4,6 x 106)

rRNAs:

NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Organizao do Material Gentico Eucaritico

O DNA total de uma clula mede em mdia 1 metro de comprimento!! Para que volume to grande de material gentico caiba dentro do ncleo da clula, o DNA interage com um grande nmero de protenas. Estas protenas exercem funes importantes na organizao e mobilizao deste material gentico.

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Organizao do Material Gentico Eucaritico As Histonas: y As histonas so pequenas protenas bsicas, ricas em lisina e
arginina, e carregadas positivamente em pH fisiolgico, s quais se associa a molcula do DNA; y Suas cargas positivas, em associao com o ction Mg++, facilitam esta ligao com o esqueleto negativo do DNA e estabilizam o conjunto. y Existem 5 classes de histonas: H1, H2, H2B, H3 e H4.
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS Organizao do Material Gentico Eucaritico

Os Nucleossomos:
y So considerados as unidades estruturais para o empacotamento da cromatina; consiste de uma fita de DNA enrolada ao redor de um centro de histonas. y So formados por 8 molculas de histonas: 2 H2, 2 H2B, 2 H3 e 2 H4, formando um octmero regular sobre o qual se enrola a fita dupla do DNA, a quase 2 voltas por nucleossomo. y Os nucleossomos so ligados entre si por segmentos de DNA "ligante" de aproximadamente 50 nucleotdeos de comprimento, formando os polinucleossomos, ou nucleofilamentos. y Aps vrios nveis de organizao espacial, ancorados por vrios tipos de protenas, chegamos estrutura final dos cromossomos. y A histona H1 no participa da estrutura dos nucleossomos, mas sim liga-se ao DNA "ligante" e participa do processo de compactao das estruturas.
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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

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NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS A Qumica do cido Nuclico

DNA e o RNA podem ser desnaturados; cidos nuclicos de { espcies podem formar hbridos; c. nuclicos e nucleotdeos sofrem transformaes no enzimticas; Longas sequncias de DNA podem ser determinadas; A sntese qumica do DNA foi automatizada.

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A temperatura na qual 50% do DNA se apresenta na forma desnaturada recebe a denominao de Tm Quando o DNA desnaturado pelo calor resfriado lentamente ele costuma readquirir sua configurao nativa, i.e., dupla hlice com pareamento intermolecular Se o resfriamento for brusco, o pareamento imperfeito, parte intermolecular e parte intramolecular

O desnaturamento do DNA implica na perda da estrutura da dupla hlice e na separao das cadeias que adquirem uma configurao randmica Este processo similar ao que ocorre com as protenas O desnaturamento do DNA ou RNA pelo calor costuma ser chamado de "fuso"
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Utilizado para medir espectrofotometricamente a "fuso" do DNA H uma relao linear entre o valor de Tm e o teor em guanina + citosina no DNA

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A citosina no DNA desamina espontaneamente originando uracila

Esta reao potencialmente mutagnica porque a citosina pareia com a guanina, mas a uracila com a adenina Na hora da replicao ou transcrio, ocorreria um erro! Para evitar o erro, existe um sistema de reparo, que substitui a uracila por uma citosina (uracil DNA-glicosidase) O grupo metila que distingue a timina da uracila um sinal de reconhecimento; sem este sinal seria impossvel distinguir a uracila corretamente presente da uracila resultante da desaminao da citosina.

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A hidrlise bsica depende de uma desprotonizao do grupo 2'-OH da ribose, com formao de um composto cclico intermedirio A falta da hidroxila 2' na deoxirribose torna o DNA muito mais resistente hidrlise em meio aquoso Este o provvel motivo pelo qual o DNA e no o RNA evoluiu como arquivo gentico celular

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A modificao mais comum a metilao

Tambm o RNA tem muitas bases modificadas

As bases modificadas pareiam da mesma forma que as 51 bases originais

NUCLEOTDIOS E AC. NUCLICOS

MUTAO

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