Cintica Microbiana

Departamento de Engenharia Qumica e

Engenharia de Alimentos
Engenharia Bioqumica
Maio/2006
Paulo Duarte Filho
Hidrlise
Glicose
Piruvato
8 ATP
Ciclo de Krebs
30 ATP
CO
2

O
2

Produtos de Fermentao
( lactato, lcoois, cidos, etc.)
6 ATP
Respirao Aerbia
Respirao Anaerbia
(CO
2
, SO
4
2-
, NO
3
-
)
Figura 1: Esquema simplificado de processos aerbios e anaerbios
Processos aerbios: oxignio como aceptor
final de eltrons;
Processos anaerbios:
Fermentativos: Utilizam produtos da degradao
do substrato.
Anxicos: Utilizam compostos inorgnicos.
Rendimento Energtico
Processos aerbios > Processos anaerbios
Estudo Cintico
Processo obedece ao princpio de conservao da matria
O GH FCO N O H EC OH DNH BO O H AC
c b a 2 2 4 2
+ + + +
o | o
Substrato
Sntese Manuteno
Fonte de Nitrognio
Elementos minerais:
Fsforo, enxofre,
cobre, ccio, etc.
Mtodos para avaliao de
crescimento de microrganismos
Fisiologia do microrganismo!
Mtodos Diretos
Determinao da concentrao celular
Contagem no microscpio;
Contagens com cultura;
Contagem eletrnica.
No se aplicam a
m.o. filamentosos
Figura 2: Contagem em Cmara de Neubauer
Figura 3: Contagem de Clulas Viveis em placas
Determinao da biomassa microbiana
Matria seca;
Medidas ticas.
Figura 4: Separao de clulas por filtrao
Mtodos Indiretos
Constituintes celulares (ATP, DNA, NADH);
Dosagem de elementos do meio de cultura
(substrato, consumo de O
2
, propriedades
reolgicas do meio de cultura, entre outros.
Processo Fermentativo
Fermentador
Microrganismo
Preparo do
inculo
Nutrientes
Preparo do meio
Esterilizao do meio
Controles
Esterilizao
do ar
Recuperao
do produto
Ar
Tratamento de
efluente
Produto
Resduo
Figura 5: Etapas de um processo fermentativo
Obteno de uma curva de crescimento para
um M.O.
Figura 6: Processo para obteno de uma curva de crescimento
Curva de crescimento
Condies favorveis ao microrganismo
Figura 7: Curva tpica de crescimento bacteriano
Fase lag
Rearranjo do sistema enzimtico (sntese de enzimas);
Traumas fsicos (choque trmico, radiao, entre outros);
Traumas qumicos (produtos txicos, meio de cultura).
No h variao da concentrao de biomassa no
tempo, portanto:
Xo cte X = =
Xo = concentrao celular no tempo t =0
Fase intermediria
Aumento gradativo da concentrao celular
Fase log ou exponencial
Clulas plenamente adaptadas;
Velocidades de crescimento elevadas;
Consumo de substrato;
Interesse prtico.
Fase de reduo de velocidade
Diminuio da concentrao de substrato limitante;
Acmulo de produto(s) no meio
Fase estacionria
Trmino do substrato limitante;
Acmulo de produtos txicos;
Concentrao celular constante em seu valor mximo.
Fase de declnio
Reduo do crescimento celular;
Consumo de material intracelular (lise).
No s para a concentrao celular se
dispe de grficos, mas tambm para o
consumo de substrato e formao de
produto.
C
o
n
c
e
n
t
r
a

o

(
g
/
L
)

Tempo de Cultivo (h)
Biomassa
Produto
Substrato
Figura 8: Curvas de biomassa, substrato e produto
Dispondo de um conjunto de dados
experimentais de X, S e P em funo do
tempo tem-se:
dt
dp
dt
ds
dt
dx
p s x
= = = ; ;
Crescimento
Consumo Formao
No so os melhores parmetros para se
avaliar o estado em que se encontram o sistema.
Velocidades especficas:
Crescimento:
dt
dX
X
1
=
Consumo de substrato:
dt
dS
X
s
1
=
Formao de produto:
dt
dP
X
p
1
=
Distribuindo os dados da fase exponencial
em coordenadas semilogartmicas, tem-se:
= =
dt
dX
X dt
X d 1 ) ln(
Como essa fase tem a distribuio de uma
reta a velocidade especfica de crescimento
constante e mxima.
) ( log log
0 i m i
t t X X =
X
0i
= Concentrao celular no instante de incio da fase
exponencial
Rearranjando a equao anterior:
) (
0
ti t
i
m
e X X

=

Ou, re-escrevendo de outra forma, tem-se:
t X X
m i
+ =
0
ln ln
Assim, pode-se obter o tempo de
duplicao da biomassa, onde X=2X
0i
:
m
Tdup

2 ln
=
Fator de converso de
substrato a clulas
S S
X X
Y
S X

=
0
0
/
X
0
= Concentrao celular inicial
X= Concentrao celular no instante t
S
0
= Concentrao inicial do substrato
S= Concentrao residual do substrato no instante t.
Este parmetro importante para a
determinao de X em cultivo de fungos
filamentosos e em processos de tratamento
de efluentes.
O fator de converso pode ser obtido
tambm atravs de:
S
S X
Y

=
/
Coeficiente de Manuteno
S X
S S
Y
m
/ '

+ =
Velocidade especfica de consumo de substrato
para manuteno da viabilidade celular
Produtividade
F
F
T
X X
P
0

=
X
0
= Biomassa inicial;
X
F
= Biomassa final;
T
F
= Tempo total de cultivo.
Exerccios
1. Candida utilis cresce em glicerol com
velocidade especfica de crescimento
mxima de 0,095 h
-1
. Qual o tempo
necessrio para esse microrganismo
duplicar a sua massa na fase exponencial
de crescimento de um processo batelada?
2. Qual a diferena entre respirao e
fermentao?
3. Quais os principais elementos qumicos
de que composta a clula?
4. Cite exemplos prticos de aplicao
industrial de leveduras, bactrias e mofos.
5. Quais os principais substratos utilizados
na indstria para processos fermentativos?
6. Em uma fermentao batelada a volume
constante foram obtidos os seguintes dados
experimentais:
T(h)
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
X(g/L)
1 1.1 1.6 2.5 3.8 5.9 7 7.9 8.5 8.5 9.3 9.6 9.3 9.5
Pede-se:
Identificar as diversas fases de crescimento do
microrganismo;
O tempo que o microrganismo leva para
duplicar a sua massa na fase exponencial de
crescimento;
A produtividade mxima em clulas que pode
ser obtida desse processo