Totalsynthese, Konfiguration und biologische Evaluierung von Anguinomycin C

Beispielbild
S. Bonazzi, S. Gttinger, I. Zemp, U. Kutay, K. Gademann, Angew. Chem. 2007, 119, 8862-8865.

OH

Seminarvortrag

Struktur und Eigenschaften

O O H O OH O Leptomycin B OH

Leptomycine Polyketide auerordentlich starke antitumorale Wirkungauf Krebszellinien Leptomycin B oder Callystatin zu toxisch gegenber normalen Zellen Nur minimale strukturelle Unterschiede zu Anguinomycin C + D
R

O Anguinomycin C Anguinomycin D

OH R = Me R = Et

in pikomolaren Konzentrationen toxisch fr pRB-inaktivierte, immortalisierte Zellen pRB: Tumorsuppressor (Retinoblastomprotein) aber: nur Wachstumsstop bei normalen Zellen
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Retrosynthese
H

OH

Pd-katalysierte Kreuzkupplung Hydrozirconierung/ Negishi-Kupplung O O H OMe BBN Li+ asymmetrische Hetero-Diels-AlderReaktion I OH OTBS TakaiOlefinierung Aldol bzw. Alkylierung unter Verwendung des DIOZ-Auxiliars

Synthese des DHP-Fragments

OMe + H TES 86%, 96% ee TIPSO A a) TBAF, THF, 99% b) PPh3, Imidazol, I2, Toluol/Et2O, 75% O I 68% O Br Br Schwartz Reagenz i) [Cp2ZrHCl], THF ii) ZnCl2, THF iii) [Pd(PPh3)4] (5 mol%) DIBAH, (10 mol%), A Br OTIPS O Cr-Kat Molsieb MeO O H TES a) PTSA, iPrOH, 86% b)TBAF, THF, 95% O O H H

[Pd(PPh3)4], Me3Zn THF OTIPS Inversion O O

81%, d.r. > 97:3

Beteiligung von -Pd-Allenylspezies?

Negishi et al JACS 2003

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Synthese des zweiten Fragmentes

O O Ph Ph DIOZ-Auxiliar nach Seebach a) MeONHMe, AlMe3 DCM, 86% b) TBSOTf, 2,6-Lutidin 99% c) DIBAH, quant. d) D, TBSOTf, Et3N, DCM, Ph dann Aldehyd, 61%, Ph d. r. > 97:3 N O O OH O O N O OH OTBS N O LDA, THF, dann Tigloylbromid 92%, d.r. > 97:3 O O Ph Ph N O a) LAH, Et2O, quant. b) Swern-Oxidation, 99% O H C

Ph Ph O N O D O

BuBOTf, Et3N, DCM, dann C, 77%, d.r. = 87:13

Ph Ph O

I OH OTBS

CrCl2, CHI3, THF, quant. d.r. > 97:3 O OH OTBS

a) (Carbethoxyethyliden)triphenylphosphoran, Toluol, 99% b) DIBAH, THF, 93% c) MnO2, DCM, 86% O

LAH, Toluol, 83%

OH OTBS

Kupplung der Fragmente

9-Methoxy-BBN tBuLi, Et2O, THF I

OMe BBN Li+ B, [Pd(dppf))Cl2] (5 mol%) AsPh3 (15 mol%), Cs2CO3, DMF/H2O, 80%

I OH OTBS B

OH OTBS a) PTSA, Aceton/H2O, 95% b) i. DMP, DCM; ii. MnO2, DCM, 47% c) HF-Pyridin, Pyridin, THF, 86% H

O Anguinomycin C

OH

Wirkung von Leptomycin C

H O OH O Leptomycin B OH

- spezifischer Inhibitor des Proteins CRM1 (Familie der Karyopherine) - CRM1 essentiell fr den Proteintransport zwischen Zellkern und Cytoplasma - Inhibierung durch Leptomycin C mit hoher Selektivitt durch kovalente Anheftung an ein Cystein in der Substratbindungsstelle von CRM1

Biologische Aktivitt und Wirkmechanismus

Untersuchung der intrazellulren Lokalisierung eines bestimmten Proteins (Rio2, im Cytoplasma lokalisierte Proteinkinase, die CRM1-abhngig aus dem Zellkern exportiert wird) bei Inhibierung von CRM1-Akkumulation von Rio2 im Zellkern Inkubation von HeLa-Zellen mit Anguinomycin C Detektion von Rio2 mit speziellen Antikrpern ber Immunofluoreszenz Anguinomycin bewirkt Akkumulation im Zellkern Wirkung geringfgig schwcher als Leptomycin C
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Zusammenfassung
erste Totalsynthese Aquinomycin C Schlsselschritte:

1) Cr-katalysierte enantioselektive Hetero-Diels-Alder-Reaktion 2) Negishi-Kupplung unter Stereoinversion zur Synthese der trisubstituierten Doppelbindung 3) Verwendung des DIOZ-Auxiliars fr Aldol bzw. Alkylierungssdchritte Biologische Aktivitt: Anguinomycin C inhibiert wie das strukturverwandte Leptomycin B den CRM1-vermittelten Export von Proteinen aus dem Zellkern.