THEMENGEBIET: KOHLENHYDRATE

20.10.2009

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Glycogen (Synthese und Abbau); Pentosephosphatweg

Einfhrung
Def. Glykogen ist die Speicherform von Glucose. Der menschliche Krper kann ca. 400g Glucose in Form von Glycogen speichern, einzelne Glycose-Molekle lassen sich nicht speichern, da diese osmotisch aktiv sind, somit zu viel Wasser in die Zelle ziehen). Alle Zellen mir Ausnahme der Erythrozyten sind in der Lage Glykogen auf,- und abzubauen. Die wichtigsten Speicherorte sind jedoch die Leber und Muskulatur. Leber: 100 mg Glycogen pro g Leber; Gesamt ca. 150g speichert Glycogen, um den restlichen Organismus zu versorgen (obligate Verwerter Gehrin, Erythrozyten, pro Tag ca. 160g) Muskulatur: 10 mg Glycogen pro g Leber; Gesamt ca. 250g Glycogen dient in erster Linie dem Eigenbedarf

Glycogenstruktur:
- wichtigstes Polysaccharid, bis zu 50 000 Glucose Molekle - jedes Glycogen- Molekl besitzt im Inneren ein Startermolekl (Primer = Glycogenin) - Glucose-Molekle durch 1,4- glykosidisch miteinander verbunden - nach etwa allen 10 Glycose Moleklen kommt eine 1,6- glykosidische Bindung vor. (Vorteil: Glycogenmolekl kann an vielen Stellen gleichzeitig ab, bzw. aufgebaut werden)

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Glycogensynthese
Bei der Synthese besteht in der Regel keine Neubildung, sondern eine Vergrerung von bereits vorhandenen Glygogenmoleklen. Das freie Glycosemolekl muss zunchst phosphoryliert und aktiviert werden, bevor es in ein Glykogenmolekl eingebaut wird.
1.

Phosphorylierung der Glucose zu Glucose - 6 - Phosphat. meist von Hexokinase katalysiert (in der Leber von Glucokinase).

Glucose wird unter Verwendung von ATP zu Glucose - 6 - Phosphat, diese Reaktion wird

* -G = exergone Reaktion

2.

Isomerisierung zu Glucose - 1 - Phosphat berfhrt.

Glucose - 6 - Phosphat wird durch das Enzym Phosphoglucomutase in Glucose - 1- Phosphat

* -G = exergone Reaktion

3.

Aktivierung der Glucose durch Reaktion mit Uridinphosphat UDP: Unter Verbrauch von Uridinphosphat wird eine energiereiche Sureanhydridbindung zwischen UDP und Glucose geknpft. -Phosphat - UTP- Transferase od. Glucose - 1 -Phosphat - UTP- Transferase katalysiert, es entsteht Uridindiphosphat - Glucose (UDP-Glucose). Phosphat der Glucose und dem - Phosphat des UTP, - und -Phosphate werden als Pyrophosphat abgespalten. Pyrophosphat wird sofort in organisches Phosphat gespalten.

Glucose - 1- Phosphat reagiert mit Uridintriphosphat UTP, diese Reaktion wird von Glucose -1

Das Enzym katalysiert die Verbindung einer Phosphorsureanhydridbindung zwischen dem 1-

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* G = O = energieaufwendig
4.

bertragung von Glucose auf das Glykogenmolekl unter Bildung von einer -1,4 glykosidischen Bindung. C-Atom 1 der aktiven Glucose und der 4OH-Gruppe einer Glucose am Starter Glykogen (Primer). Diese Reaktion wird durch Glykogen - Synthase katalysiert. (UDP+ATP--> UTP+ADP)

Die Glucose wird vom UDP abgetrennt, es entsteht eine glykosidische Bindung zwischen dem

UDP wird frei und rephosphoryliert in einer ATP- abhngigen Reaktion zum UTP.

Wenn die Kette ca. 6-11 Glucosereste erreicht, so tritt ein weiteres Enzym : branching enzyme ( Glykogen - Verzweigungsenzym) oder die Amilo- 1,4 --> 1,6 - Transglucosylase in Kraft. Das Enzym bertrgt einen Teil der 1,4 - glycosidischen Bindung auf eine benachbarte Kette oder einen Glycoserest, dabei entsteht eine 1,6 - glycosidische Bindung. Bei diesem Vorgang kommt es zu der typische verzweigten Struktur des Glycogens. Wird ein komplett neues Glykogenmolekl aufgebaut, dann ist das Protein Glycogenin ntig. Es bildet den Kern jedes Glykogenmolekls und weist eine Glycosyltransferase - Aktivitt auf. Dank dieser Aktivitt ist es im Stande selbst bis zu 8 Glukose Molekle aufzunehmen, dann bernimmt die Glykogen-Synthase und synthetisiert die Kette.

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Abbau von Glykogen

Die Glucose wird phosphorolytisch aus Glykogen freigesetz, diese Reaktion wird von GlykogenPhosphorylase katalysiert, dabei setzt es sich an das freie (nichtreduzierende Ende) der Glykosekette an und bertrgt einzelne Glucosemonomere auf anorganisches Phosphat.

Unter Verbrauch von anorganischen Phosphat wird Glucose-1-Phosphat gebildet. Das Glucose -1-Phosphat wird zu Glucose-6-Phosphat isomerisiert, dieses wiederum wird in die Glykolyse eingeschleust. Der Glykogen Abbau verbraucht kein ATP! Abbau an Verzweigungsstellen: Der Abbau wird von sog. Debranching Enzyme bernommen. Das Debranching Enzyme hat unterschiedliche Aufgaben: * PALP = Pyridoxalphosphat (Coenzym) 1. Transferaseaktivitt a. Trennung von drei der vier brig gebliebenen Glucosemonomere als Trisaccharid und bertragung auf eine freie Glucosekette unter Bildung von -1-->4 glykosidischen Bindung. Die Glykogen-Phosphorylase kann weiter an der benachbarten Kette Glykogen abbauen. 2. Glucositaseaktivitt b. das brig gebliebene Glucosemonomer mit der -1-->6 glykosidischen Bundung wird vom Debranching Enzyme abgetrennt, es wird hydrolytisch freigesetzt, dabei wird nicht Glucose-1-Phosphat sondern Glucose gebildet.

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Regulation des Glykogenstowechsels

Die wichtigsten Enzyme des Auf und Abbaus sind Glykogen-Synthase und Glykogen Phosphorylase, sie unterliegen einer hormonellen und allosterischen Kontrolle. Glukagon und Adreanlin leiten eine Phosphorylierung = Inaktivierung der Glykogen - Synthase Insulin leitet eine Dephosphorylierung = Aktivierung der Glykogen- Syntahse.

Steigender Bedarf an Glucose

allosterische Regulation: das wichtigste Enzym fr den Abbau liegt normalerweise in der inaktiven Phosphorylase b vor, es wird durch Phosphorylierung in eine aktive Phosphorylase a umgewandelt. Diese Reaktion wird von der Phosphorylase-Kinase katalysiert. Im Muskel kann die inaktive b Form auch durch Bindung von AMP aktiviert werden, dieser Reaktion wirken ATP und Glucose-6-Phosphat entgegen. Die aktive a Form wird in der Leber von Glucose gehemmt.

hormonelle Regulation:
Sinkt der Blutglucosespiegel, werden die Hormone Adrenalin und Glukagon ausgeschttet, sie lsen in den Zellen eine Aktivierung der Adenylatzyklase aus. Es folgt eine Zunahme des Hungersignals cAMP. Das cAMP aktiviert die cAMP - abhngige Proteinkinase A (PKA). PKA katalysiert die Phosphorylierung der Glykogen-Synthase an mehreren Serinresten, das Enzym wird inaktiv, dadurch wird die Glykogensynthese gestoppt. PKA phosphoryliert auerdem die Phosphorylase - Kinase, diese phosphoryliert und aktiviert durch Glykogen-Phosphorylase , welche den Glykogenabbau katalysiert. Neben PKA gibt es weitere Enzyme, die an der Regulation beteiligt sind: - Glykogen- Synthase - Kinase 3 (GSK-3) : beteiligt sich parallel zu PKA an der Phosphorylierung und Inaktivierung der Glykogen - Synthase.

Regualtion bei berangebot an Glucose

Wenn gengend Glucose im Blut vorhanden ist, wird Insulin ausgeschttet, es bewirkt eine Dephosphorylierung, d.h Aktivierung der Glykogen-Synthase.

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Wirkungsmechanismus:
1. Insulin bewirkt eine erhhte Aktivitt der Phosphodiesterase, welches das cAMP in den Zellen hydrolysiert (zerlegt), dadurch nimmt die Konzentration des Hungersignals cAMP ab. Die PKA wird inaktiv und die Phosphorylierung der Glykogen - Synthase wird gestoppt. 2. Auerdem aktiviert Insulin die Proteinkinase B, dieses phosphoryliert und inaktiviert die GKS-3. 3. Die Aktivierung der Glykogen-Synthase wird von der Phosphoprotein - Phosphatase 1 (PP -1) katalysiert. 4.PP - 1 dephosphoryliert die Glykogen - Phosphorylase und hemmt sie dadurch. 5. Ein indirektor Aktivator der Glykogen-Synthase ist Glucose-6-Phosphat, es aktiviert allosterisch PP -1.

Glykogenspeicherkrankheiten
Typ Enzymdefekt betroffenes Organ
Leber und Niere

Glykogen im betroffenen Organ

Menge Erhht, Struktur normal

klinische Erscheinungen
starke Vergrerung der Leber, Entwicklungsstrungen, schwer Hypoglykmie, Ketose, Hyperurikmie, Hyperlipidmie Herzinsuzienz; ruft den Tod hervor, gewhnlich vor dem 2. Lebensjahr wie bei Typ 1, aber milderer Verlauf progressive Leberzirrhose; Leberschden rufen den Tod hervor, gewhnlich vor dem 2. Lebensjahr begrenzte Fhigkeit, schwere krperliche Arbeit zu leisten (infolge schmerzhafter Muskelkrmpfe); Patient ansonsten normal und gut entwickelt wie bei Typ 1, aber milderer Verlauf wie bei Typ 1 schwache Lebervergrerung, schwache Hypoglykmie

1 von - Gierke Krankheit

Glucose - 6 Phosphatase oder Transportsystem

2 Pompe Krankheit 3 Cori - Krankheit 4 Anderson Krankheit

-1,4- Glucosidase

alle Organe

Menge stark erhht, Struktur normal menge erhht, kurze uere Zweige Menge leicht erhht, Struktur normal

Amylo-1,6-Glucosidase (debranching enzyme) Verzweigungsenzym ( -1,4 --> -1,6)

Muskel und Leber Leber und Milz

5 Mc ArdleKrankheit

Phosphorylase

Muskulatur

Menge leicht erhht, Struktur normal

6 Hers-Krankheit 7 8

Phosphorylase Phosphofructokinase Phosphorylase-Kinase

Leber Muskulatur Leber

Menge erhht Menge Erhht, Struktur normal Menge Erhht, Struktur normal

Anmerkung: Die Krankheitstypen 1 bis 7 werden autosomal rezessiv vererbt, Typ 8 ist geschlechtsgebunden.

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Pentosephosphatweg
Synonym: Hexosemonophosphatweg Der Pentosephosphatweg ist ein allternativer Abbau von Glucose. Im Unterschied zur Glykolyse, gehrt der Pentosephosphatweg zum anabolen Stowechsel. Er hat zwei unterschiedliche Funktionen: anabol= aufbauend 1. Produktion von NADPH fr Reduktionsschritte in verschiedenen Biosynthesen (Fettsuren, Cholesterin, Steroide), Biotransformation (Leber), Entgiftung von Peroxiden (Erythrozyten). 2. Bereitstellung von Ribose-5-Phosphat, eine Pentose, die der Grundbaustein aller Nukleotiden ist. Der Pentosephosphatweg luft in jeder Zelle im Zytoplasma ab. Er wird in zwei Abschnitte unterteilt:

1. irreversibler oxidativer Teil, Herstellung von NADPH/H+ und Ribose - 5- Phosphat

Glucose-6-Phosphat + 2 NADP+ + H2O --> Ribose - 5 - Phosphat + 2 NADPH + 2 H+ + CO2

1.

erste Oxidation: Glucose-6.Phosphat wird durch Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase zu 6-Phosphat-Gluconolakton katalysiert, dabei wird NADPH/ H+ gebildet. Es folgt ein eine Spaltung des Glucoserings unter Einbau von Wasser mithilfe der Glukonolaktonase. Dabei entsteht 6-Phosphat-Glikonat, es besitzt eine freie Carboxylgruppe. zweite Oxidation: Die OH-Gruppe am 3 wird zu einer Ketogruppe oxidiert (Enzym: 6Phosphat- Glukonat-Dehydrogenase; es bertrgt den Wassersto auf NADP+, welches zu NADPH/ H+ wird. Das Zwischenprodukt 3-Keto-6-Phospo-Glukonat spaltet spontan CO2 ab (= Decarboxylierung) und wird zu Rubulose-5-Phosphat. Bildung von Ribose-5-Phosphat: Ribulose-5-Phosphat wird durch Ribulose-5Phosphat- Isomerase zu Ribose-5-Phosphat umgewandelt.

2.

3.

Zellen, die Ribose-5-Phosphat zur Nukleotifbiosynthese bentigen ist der Pentosephosphatweg zu Ende. Wenn mehr NADPH/H+ gebraucht wird, oder ATP entstehen soll, erfolgt der zweite Teil des Pentosephosphatwegs. NADPH entsteht ausschlielich im oxidativen Teil des Pentosephosphatweges. Der erste Teil ist irreversibel, da der menschliche Krper nicht in der Lage ist ber CO2 Aufnahme aus Pentosen Hexosen zu synthetisieren.

2. nicht oxidativer reversible Teil, Ribose-5-Phosphat wird in die Glykolyse eingespeist.

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der Zweite Teil luft ab, wenn z.B. in einer Muskelzelle bermig ATP synthetisiert werden muss, da zur Synthese das Ribose-6-Phosphat bentigt wird, jedoch kein NADPH.

Im zweiten Teil ndet eine Reihe von Umlagerungen statt, die als Zwischenprodukte Zucker mir verschiedenen Lngen liefern. Bei der Reaktionsfolge herrscht ein stndiges hin und her von C2 und C3 Bausteinen. Generell sind nur zwei Enzyme daran beteiligt: Transketolase, bertrgt C2 Bausteine und eine Transaldolase, bertrgt C3-Bausteine. Das abgebende Molekl ist immer eine Ketose, der Empfnger eine Aldose. 1. 2. 3. 4. Ribulose-5-Phosphat wird durch Epimerisierung in Xylulose-5-Phosphat bzw. durch Isomerisierung zu Ribose-5-Phosphat umgewandelt. Durch die Transketolase werden die C-Atome 1 und 2 des Xylose-5-Phosphats auf Ribose-5Phosphat bertragen; dabei entsteht 3-Phosphoglycerinaldehyd und Sedoheptulose-7Phosphat. Die Transaldolase bertgt die drei ersten C-Atome des Sedoheptulose-7-Phosphates auf 3Phosphoglycerinaldehyd, es entsteht Fructose-6-Phosphat und aus der 4-C-Atomen bestehenden Aldosa das Erythrose-4-Phosphat. Die Transketolase kann aus einem weiteren Xylulose-5-Phosphat ein C2-Bruchstck auf Erythrose-4-Phosphat bertragen, dabei entsteht Fructose-6-Phosphat und 3Phosphoglycerinaldehyd.

Das Coenzym Transketolase ist Thiaminpyrphosphat TPP (Vit. B1). Bei Thiaminmangel steigt die Konzentration von Phenthosephosphat im Gewebe an. NADPH / H* wird fr folgende Organe zur Biosynthesen bentigt: 1. In der Leber, hauptschlich fr die Synthese von Cholesterin und Fettsuren 2. Im Fettgewebe, fr die Fettsuresynthese 3. In der laktierenden mamma, ebenfalls zur Biosynthese von Fettsuren. 4.In der Nebennierenrinde fr die Synthese von Steroiden (Glukokortikoide, Aldosteron, Geschlechtshormone) aus Cholesterin 5. Im den Hoden und Ovarien zur Herstellung von Geschlechtshormonen

Pathologie:
Eine der weltweit hugste Erbkrankheit (Favismus = Bohnenkrankheit), hat direkt was mit dem Pentosephosphatweg zu tun. Es handelt sich dabei um ein Defekt des Schrittmacherenzyms Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase. Hier liegt ein Schaden auf dem X-Chromosom. Der genetische Defekt wird X-chromosomal vererbt, so dass fast ausschlielich Mnner erkranken. Die Erythrozyten sind am anflligsten fr diese Strung,sie sind durch den Sauersto einer groen Reaktionsfreudigkeit ausgesetzt. In der Regel ist die Zellmembran durch das Tripeptid Glutathion vor Oxidation geschtzt. Glutathion wird beim Bekmpfen von freien Radikalen und Peroxiden zu Glutathiondisulfat oxidiert und kann nur mit Hilfe von NADPH /H+ in sein Ausgangszustand gebracht werden. Die Erythrozyten bentigen daher stndig NADPH/H+. Beim Enzymdefekt luft der Pentosephosphatweg nicht ordnungsgem ab, somit fehlt den Erythrozyten das NADPH/H+. Peroxide und freie Radikale sammeln sich an und schdigen die Zellmembran. Es

kommt zur Ausung der Membran und Zerstrung der roten Blutkrperchen. Folge kann eine schwere hmolytische Anmie sein. hnlich wie die Sichelzellanmie, bietet der Enzymdefekt einen geringfgigen, aber oenbar signikanten Schutz gegen Plasmodium falciparum, den Erreger der Malaria tropica. Dieser Malariaerreger ist noch empndlicher gegenber der freien Radikale und Peroxide, somit fhrt der G6PD-Mangel zu einer erhhten Konzentration dieser abwehrenden Stoe und der Malariaerreger kann am Anfang einer Infektion erfolgreich bekmpft werden.

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Quellen: Ler / Petrides/ Heinrich: Biochemie & Pathobiochemie; 8. Auage, Springer Verlag Ler: Basiswissen Biochemie mit Pathobiochemie; 5. Auage, Springer Verlag F. Horn u.a. : Biochemie des Menschen, 2. korr. Auage J. Rassow u.a. Duale Reihe: Biochemie, Thieme Verlag J. M. Berg u.a: Stryer - Biochemie; 6. Auage; Spektrum Verlag http://www.favismus.de/Fachlich_00_G6PD-Mangel2.html