25

25 Kommunikation zwischen Zellen:

Extrazelluläre Signalmoleküle,
Rezeptoren und Signaltransduktion
Peter C. Heinrich, Serge Haan, Heike M. Hermanns, Georg Löffler,
Gerhard Müller-Newen, Fred Schaper

25.1 Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation

zwischen Zellen – 757
25.1.1 Kommunikation zwischen Zellen – 757
25.1.2 Kommunikation und ihre Entsprechung in biologischen Systemen – 758
25.1.3 Glanduläre Hormone und Gewebshormone – 758

25.2 Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen – 760

25.2.1 Biosynthese und Sekretion – 760
25.2.2 Transport im Blut – 760
25.2.3 Abbau und Ausscheidung – 761
25.2.4 Methoden zur Konzentrationsbestimmung – 761

25.3 Rezeptoren für Hormone und Cytokine – 763

25.3.1 Nucleäre Rezeptoren – 763
25.3.2 Liganden-regulierte Ionenkanäle als Rezeptoren – 765
25.3.3 Membranrezeptoren – 767

25.4 Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren – 769

25.4.1 Rezeptoraktivierung – 770
25.4.2 Rekrutierung cytoplasmatischer Effektorproteine an die Plasma-
membran – 770
25.4.3 Organisierte Kinasekaskaden – 772
25.4.4 G-Proteine – 773
25.4.5 Second messenger – 773

25.5 Einteilung der Cytokine – 777

25.5.1 Wachstumsfaktoren – 778
25.5.2 Interleukine – 778
25.5.3 Interferone – 778
25.5.4 Chemokine – 779

25.6 Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren – 779

25.6.1 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren signalisieren über
heterotrimere G-Proteine – 779
25.6.2 Rezeptoren, die an das Adenylatcyclase-System gekoppelt sind – 780
25.6.3 Rezeptoren, die an die Phospholipase Cβ gekoppelt sind und
zur Ca2+-Freisetzung führen – 783
25.6.4 Die GPCR-vermittelte Signaltransduktion am Beispiel
von Interleukin-8 – 783

25.7 Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen

und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen – 785
25.7.1 Rezeptor-Tyrosinkinasen – 785
25.7.2 Rezeptor-Serin/Threoninkinasen – 790

25.8 Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten

Kinasen – 791
25.8.1 Interleukin-1-Signaltransduktion – 791
25.8.2 TNF-Signaltransduktion – 792
25.8.3 Interleukin-6-Signaltransduktion – 794
25.8.4 Interferon-Signaltransduktion – 796
25.8.5 Pathobiochemie: Septischer Schock und multiples Organversagen – 798

25.9 Besondere Aktivierungsmechanismen – 801

25.9.1 Stickstoffmonoxid (NO) und lösliche Guanylatcyclasen – 801
25.9.2 Membrangebundene Guanylatcyclasen – 802
25.9.3 cGMP-Effektormoleküle – 803

25.10 Regulation der Signaltransduktion – 804

25.10.1 Rezeptorexpression – 804
25.10.2 Rückkopplungsmechanismen – 805

Literatur – 807
25.1 · Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen
757 25

> > Einleitung

Extrazelluläre Signalmoleküle spielen eine entscheidende Rolle für die Kommunikation zwischen Organen und Zellen. Die
innerhalb des Organismus synthetisierten und sezernierten Botenstoffe lassen sich in die Gruppen der Hormone und Cytokine
einteilen. Sie werden von bestimmten Zellen auf definierte Reize hin freigesetzt und wirken auf Zellen, die den passenden
Rezeptor tragen. Die Zielzellen antworten nach Initiation einer Signalkaskade mit Änderungen einer Vielzahl von biochemi-
schen und biologischen Prozessen.
Störungen der Kommunikation zwischen Zellen und Organen führen, soweit es Hormone betrifft, zu klinisch gut definier-
ten Krankheitsbildern. In verstärktem Maße werden vor allem akut und chronisch entzündliche Erkrankungen auch als Kon-
sequenzen einer gestörten Regulation durch Cytokine verstanden, sodass speziell dieser Gruppe von Signalmolekülen eine
zunehmende klinische Bedeutung zukommt. Daher werden im folgenden Kapitel die verschiedenen Unterfamilien der Cyto-
kine (Interleukine, Interferone, Wachstumsfaktoren und Chemokine), deren Rezeptoren und die intrazelluläre Signaltransduk-
tion besprochen.

25.1 Extrazelluläre Signalmoleküle mittlung von Zelle zu Zelle bzw. von Organ zu Organ. In
und die Kommunikation . Abb. 25.1 sind die verschiedenen realisierten Mechanis-
zwischen Zellen men der interzellulären Kommunikation zusammenge-
stellt. Die Signale werden auf humoralem Weg (lat. humor,
25.1.1 Kommunikation zwischen Zellen Flüssigkeit) in Form chemischer Verbindungen als Signal-
vermittler übertragen. Die Signalmoleküle wirken nur auf
! Extrazelluläre Signalmoleküle erreichen ihre Zielzellen
solche Zellen, die einen passenden Rezeptor tragen. Die
auf unterschiedlichen Wegen.
spezifische Bindung des Signalmoleküls (Ligand) an den
Die Entwicklung vielzelliger, arbeitsteilig organisierter Le- Rezeptor löst eine zelluläre Reaktion aus.
bewesen aus dem Zusammenschluss von Einzelzellen stellt Erfolgt die Signalübermittlung durch Diffusion von der
einen gewaltigen Fortschritt in der Evolution dar. Eine sezernierenden direkt auf eine benachbarte Zelle, so spricht
seiner wesentlichen Voraussetzungen ist die Signalüber- man von parakriner Signaltransduktion (. Abb. 25.1a).

. Abb. 25.1. Mechanismen der interzellulären Signalübermittlung. (a) parakrine, (b) juxtakrine, (c) endokrine, (d) autokrine,
(e) neuronale Signalübertragung. (Einzelheiten 7 Text)
 758 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Einen Sonderfall stellt die juxtakrine Signalübermitt- Signalverarbeitung biologische Antworten

lung (. Abb. 25.1b) dar, bei der das Signalmolekül in der ’ ’
Plasmamembran der produzierenden Zelle verankert ist Signalabschaltung Hemmung durch Rückkopplung
und für die Wechselwirkung mit dem entsprechenden Re- (feedback inhibition)
zeptor auf der Zielzelle ein direkter Zell-Zell-Kontakt not-
wendig ist. Es gibt eine sehr große Zahl exogener und endogener Si-
Wird dagegen das Signalmolekül von einer spezifi- gnale auf die Zellen ansprechen. Hierzu zählen z.B.
schen, sezernierenden Zelle in die Blutbahn abgegeben, um 4 Licht
seine Wirkung an einer oft weit entfernten Zielzelle auszu- 4 Wärme
üben, so handelt es sich um eine endokrine Signalübertra- 4 akustische Reize
gung (. Abb. 25.1c). 4 mechanische Reize
Von parakriner und endokriner Signaltransduktion ab- 4 Geruchsstoffe
25 zugrenzen ist schließlich die autokrine Signalweiterleitung 4 Geschmacksstoffe
(. Abb. 25.1d). Sie beruht darauf, dass von einer sezernie- 4 Pheromone (Sexuallockstoffe)
renden Zelle gebildete Signalmoleküle auf diese Zelle selbst 4 Komponenten der extrazellulären Matrix
bzw. auf Nachbarzellen vom gleichen Zelltyp einwirken. So 4 Zelloberflächen-Glycoproteine und -Glycolipide
wirkt beispielsweise das von einer stimulierten T-Zelle se- 4 Antigene
zernierte Interleukin-2 autokrin und führt zur Proliferation 4 Hormone
der T-Zelle. 4 Cytokine
Die autokrine Sekretion von Wachstumsfaktoren spielt
auch bei manchen Tumoren eine wichtige Rolle. So konnte Von den genannten Signalmolekülen spielen für die Kom-
gezeigt werden, dass bestimmte Mammakarzinomzellen munikation zwischen Zellen Hormone und Cytokine eine
in großer Menge den insulinähnlichen Wachstumsfaktor-1 sehr wichtige Rolle.
(IGF-1, 7 Kap. 27.7.2) abgeben, der auf die Tumorzellen als
Proliferationsfaktor wirkt.
Einen weiteren Sonderfall der interzellulären Kommu- 25.1.3 Glanduläre Hormone
nikation stellt die neuronale Signalübertragung dar (. Abb. und Gewebshormone
25.1e und 7 Kap. 31.3.1).
Endogen synthetisierte extrazelluläre Signalmoleküle kön-
nen in
25.1.2 Kommunikation und ihre Entspre- 4 glanduläre Hormone und
chung in biologischen Systemen 4 aglanduläre Hormone = Gewebshormone

Kommunikation ist durch eine Abfolge von Ereignissen eingeteilt werden.

charakterisiert, die auch in biologischen Systemen zu finden
ist. Hier beginnt die Signalweiterleitung mit der Stimulation Glanduläre Hormone werden in endokrinen Drüsen ge-
einer Zelle gefolgt von Signalrezeption, Signaltransduktion, bildet, von diesen sezerniert und auf dem Blutweg zu den
biologischer Antwort, z.B. Expression von Zielgenen, Pro- jeweiligen Zielzellen transportiert, an denen sie spezifische
liferation, Apoptose, Migration und schließlich Signalab- Wirkungen entfalten. Endokrine Drüsen sind:
schaltung. Dementsprechend können die einzelnen Kom- 4 der Hypothalamus und die Hypophyse (Vorder- und
munikationsschritte wie folgt gegliedert werden: Hinterlappen)
4 die Langerhans’schen Inseln des Pankreas
Kommunikation 4 die Schilddrüse
Allgemein in biologischen Systemen 4 die Nebenschilddrüsen (Epithelkörperchen)
Signalentstehung Freisetzung eines Botenstoffs 4 die Nebennieren (Nebennierenmark und -rinde)
’ ’ 4 die männlichen und weiblichen Keimdrüsen
Signalaufnahme Bindung des Botenstoffs an seinen 4 die Placenta
’ Rezeptor
’ Bis auf wenige Ausnahmen sind glanduläre Hormone
Signalweiterleitung Umwandlung des extrazellulären 4 Polypeptide (z.B. Insulin, Glucagon, adrenocortico-
’ Signals in ein intrazelluläres Signal tropes Hormon)
’ 4 Aminosäure-Derivate (z.B. Schilddrüsenhormone:
Signalent- Aktivierung von intrazellulären Thyroxin, T4 und Trijodthyronin, T3; Katecholamine:
schlüsselung Signalkaskaden Adrenalin, Noradrenalin oder Neurotransmitter: Sero-
’ ’ tonin)
25.1 · Extrazelluläre Signalmoleküle und die Kommunikation zwischen Zellen
759 25

. Tabelle 25.1. Einteilung der Cytokine (Auswahl) und ihre biologischen Funktionen
Wachstumsfaktoren
Signaltransduktion über
Rezeptor-Tyrosinkinasen
5 brain-derived nerve growth
factor (BDNF)
5 colony stimulating factor (CSF)
5 epidermal growth factor (EGF)
5 fibroblast growth factor (FGF)
5 insulin-like growth factor (IGF)
5 keratinocyte growth factor
(KGF)
5 macrophage colony stimula-
ting factor (MCSF)
5 nerve growth factor (NGF)
5 platelet derived growth factor
(PDGF)
5 stem cell factor (SCF)
5 vascular endothelial growth
factor (VEGF)
Signaltransduktion über
Rezeptor-Serin/Threonin-
kinasen
5 transforming growth factor β
(TGFE)
5 bone morphogenetic protein
(BMP)
5 Aktivine
Biologische Funktion:
Proliferation, Differenzierung
Interleukine
pro-inflammatorische Cytokine
5 Interleukin-1 (IL-1)
5 Tumor-Nekrose-Faktor (TNF)
Signaltransduktion über die
common β Kette
5 Interleukin-3 (IL-3)
5 Interleukin-5 (IL-5)
5 granulocyte macrophage colony Typ-2-Interferon
stimulating factor (GM-CSF) 5 Interferon-γ (IFNγ)
Signaltransduktion über die
common γ Kette
5 Interleukin-2 (IL-2)
5 Interleukin-4 (IL-4)
5 Interleukin-7 (IL-7)
5 Interleukin-9 (IL-9)
5 Interleukin-15 (IL-15)
5 Interleukin-21 (IL-21)
IL-6-Typ-Cytokine
(pro- und anti-inflammatorisch)
5 Interleukin-6 (IL-6)
5 Interleukin-11 (IL-11)
5 Interleukin-27 (IL-27)
5 Oncostatin M (OSM)
5 leukemia inhibitory factor (LIF)
5 ciliary neurotrophic factor
(CNTF)
5 cardiotrophin-1 (CT-1)
5 cardiotrophin-like cytokine (CLC)
5 Neuropoetin (NP)
Signaltransduktion über
homodimere Rezeptoren
5 Erythropoetin (EPO)
5 growth hormone (GH)
5 granulocyte colony stimulating
factor (GCSF)
5 Leptin
5 Thrombopoetin (TPO)
Immunabwehr, Entzündung,
Hämatopoese, Apoptose
Interferone Chemokine
Typ-1-Interferone CC-Chemokine (CCL1 bis CCL28)
5 Interferon-α (IFNα1,-2,-4,-5,-6,- 5 Eotaxine
7,-8,-10,-13,-14,-16,-17,-21) – Eotaxin 1 (CCL11)
5 Interferon-β (IFNβ) – Eotaxin 2 (CCL24)
5 Interferon-ε (IFNε) – Eotaxin 3 (CCL26)
5 Interferon-κ (IFNκ) 5 macrophage inflammatory
5 Interferon-ω (IFNω1, IFNω2) proteins
– MIP1α (CCL3)
– MIP1β (CCL4)
– MIP1δ (CCL15)
– MIP3α (CCL20)
Interferon-ähnliche Cytokine – MIP3β (CCL19)
5 Interleukin-10 (IL-10) 5 regulated on activation, normal
5 Interleukin-19 (IL-19) T-cell expressed and secreted
5 Interleukin-20 (IL-20) (RANTES) (CCL5)
5 Interleukin-22 (IL-22) 5 monocyte chemoattractant
5 Interleukin-24 (IL-24) proteins
5 Interleukin-28 (IL-28) – MCP1 (CLC2)
5 Interleukin-29 (IL-29) – MCP2 (CLC8)
– MCP3 (CLC7)
– MCP4 (CLC13)
CXC-Chemokine (CXCL1 bis
CXCL15)
5 Interleukin-8 (IL-8, CXCL8)
5 stromal derived factor 1 (SDF1,
CXCL12)
5 growth related oncogenes
– GROα (CXCL1)
– GROβ (CXCL2)
– GROγ (CXCL3)
XC-Chemokine
5 Lymphotactin (XCL1)
5 SCM-1β (XCL2)
CX3C-Chemokine
5 Fractalkin (CX3CL1)
Virusabwehr, Proliferations- Migration, Chemotaxis
hemmung, Apoptose

4 Steroide (z.B. Glucocorticoide: Cortisol; Mineralocor-
ticoide: Aldosteron; männliche Sexualhormone: Testos-
teron; weibliche Sexualhormone: Östradiol)
Die Funktionen der glandulären Hormone sind im Ein-
zelnen in den Kapiteln 26 und 27 besprochen.
Aglanduläre Hormone = Gewebshormone. Im Ge-
gensatz zu den glandulären Hormonen werden die Ge-
webshormone oder aglandulären Hormone von in den
verschiedensten Geweben verstreuten Zellen synthetisiert.
Gewebshormone, die keine Polypeptide sind, werden
von der großen Gruppe der Cytokine, die alle zu den Poly-
peptiden zählen, abgegrenzt.
Zur Gruppe der Gewebshormone, die keine Polypeptide
sind, zählen
4 biogene Amine (Histamin, Serotonin)
4 Eikosanoide (Prostaglandine, Leukotriene)
4 Gase (Stickstoffmonoxid (NO))
4 Neurotransmitter (Acetylcholin, J-Aminobuttersäure
(GABA), Glutamat, Glycin)
 760 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
Zu den Cytokinen gehören (. Tab. 25.1)
4 Wachstumsfaktoren
4 Interleukine
4 Interferone
4 Chemokine
In Kürze
Die Kommunikation zwischen verschiedenen Geweben
und Organen im vielzelligen Organismus erfolgt mit Hilfe
endogener Signalmoleküle. Diese können dabei als endo-
krine Faktoren von den Drüsen, in denen sie produziert
25 werden, über den Blutweg an ihre Zielzellen gelangen, als
parakrine Faktoren auf benachbarte Zellen einwirken
25.2 Stoffwechsel und Analyse von
Hormonen und Cytokinen
25.2.1 Biosynthese und Sekretion
Cytokine sind immer Polypeptide und werden meist de
novo synthetisiert. Glanduläre Hormone gehören dagegen
chemisch zu den unterschiedlichsten Verbindungen. Sie
können Derivate von Aminosäuren, Abkömmlinge des
Cholesterins aber auch Peptide und Proteine sein. Dement-
sprechend unterschiedlich sind natürlich auch die Mecha-
nismen ihrer Biosynthese. Besonders die Peptid- und Pro-
teohormone (z.B. Insulin, Glucagon, Parathormon) werden
wie andere sekretorische Proteine in Form höhermoleku-
larer Vorstufen synthetisiert. Gelegentlich tragen derartige
Vorläufer (precursors) sogar mehrere unterschiedliche Hor-
mone, die durch entsprechende proteolytische Spaltung
freigesetzt werden (z.B. Proopiomelanocortin, 7 Kap. 32.3.8,
Glicentin, 7 Kap. 26.2.2).
Bei vielen Peptid- und Proteohormonen, aber auch bei
Aminosäurederivaten wie den Katecholaminen erfolgt eine
Speicherung in Form intrazellulärer Sekretvesikel. Einen
besonderen Fall stellen die Schilddrüsenhormone dar, die
als Teil des Thyreoglobulin extrazellulär in großen Mengen
in der Schilddrüse gespeichert werden (Kolloid). Andere
Hormone, z.B. Steroidhormone oder das Parathormon
(PTH) werden nur in geringem Umfang gespeichert. Daher
muss in diesen Fällen die Biosynthese sehr genau reguliert
werden.
Die Sekretion der in Vesikeln gespeicherten Signal-
moleküle erfolgt entsprechend den zellbiologischen Vor-
gängen beim regulierten vesikulären Transport (7 Kap.
6.2.4). Ein wichtiger Auslöser ist meist die Erhöhung der
cytosolischen Calciumkonzentration. Bei einer Reihe von
endokrinen Zellen ist experimentell nachgewiesen worden,
dass ein intaktes mikrotubuläres System für den Transport
der sekretorischen Vesikel vom Golgi-Apparat zur Plasma-
membran notwendig ist. Dieser Transport ist ATP-abhängig
Im Einzelfall kann die Zuordnung eines extrazellulären
Signalmoleküls zu einer der oben genannten Gruppen
schwierig sein.
Die aglandulären nicht-peptidischen Hormone werden
weiter unten und in den Kapiteln 13, 26, 27, 31, 34 be-
handelt.
oder aber als autokrine Faktoren auf die Zellen zurückwir-
ken, von denen sie produziert werden.
Neben den in den endokrinen Drüsen gebildeten Hor-
monen kommt im Organismus eine große Zahl von Ge-
webshormonen vor, welche durch endokrin aktive, in den
Geweben verstreute, einzelne Zellen gebildet werden.
und man nimmt an, dass Kinesin (7 Kap. 6.3.1) den für den
Transport notwendigen Motor darstellt.
Während die meisten Cytokine für ihre Sekretion mit
einem N-terminalen Signalpeptid synthetisiert werden,
gibt es Ausnahmen. Ohne dass eine klassische Signal-
sequenz vorliegt, werden die Cytokine Interleukin-1 (IL-1),
tumor necrosis factor (TNF), ciliary neurotrophic factor
(CNTF) und macrophage migration inhibitory factor (MIF)
über einen im Detail noch unbekannten Mechanismus se-
zerniert.
25.2.2 Transport im Blut
Die glandulären Hormone gelangen über den Blutkreislauf
an ihren Wirkungsort. Im Allgemeinen sind die Serumkon-
zentrationen von Hormonen äußerst gering. Für Peptid-
und Proteohormone liegen sie bei etwa 10–12–10–10 mol/l,
für Schilddrüsen- und Steroidhormone zwischen 10–9 und
10–6 mol/l.
Die vom Cholesterin abgeleiteten Steroidhormone so-
wie die Hormone der Schilddrüse sind besonders hydro-
phob. Aus diesem Grund können sie nur durch Bindung an
spezifische Transportproteine im Serum transportiert
werden. Aufgrund der hohen Affinität dieser Hormone zu
ihren Transportproteinen liegen immer nur sehr geringe
Mengen der betreffenden Hormone in freier und damit
biologisch aktiver Form vor. Daher ist nicht nur die Kon-
zentration des Hormons, sondern auch die seines Binde-
proteins für die biologische Aktivität von Bedeutung.
Im Unterschied zu den Hormonen, die in der Regel im
Blut transportiert werden, wirken die meisten Cytokine
eher lokal. Bei akuten und chronischen Entzündungen las-
sen sich jedoch Cytokine wie IL-1, TNF, IL-6 und IL-8 im
Blut nachweisen. Die Bioaktivität dieser Cytokine im Blut
wird häufig durch lösliche Rezeptoren moduliert.
25.2 · Stoffwechsel und Analyse von Hormonen und Cytokinen
25.2.3 Abbau und Ausscheidung
Besonders unter pathologischen Bedingungen kann die
Geschwindigkeit des Abbaus und der Ausscheidung von
Hormonen für ihre Serumkonzentration und damit für ihre
biologische Aktivität wichtig werden. Cytokine, Peptid-
und Proteohormone werden durch Endozytose von den
Zielzellen aufgenommen und durch anschließende Pro-
teolyse abgebaut. Die hierfür wichtigen Organe sind v.a. die
Leber, daneben aber auch die Nieren.
Für den Abbau und die Ausscheidung von Steroid- bzw.
Schilddrüsenhormonen oder Katecholaminen sind wesent-
lich spezifischere Mechanismen notwendig. Auch hierfür
ist das wichtigste Organ die Leber. Die Metabolisierungs-
reaktionen für die genannten Hormone finden nach den
Mechanismen der Phase I und II des Biotransformations-
systems (7 Kap. 33.3.1) statt.
Bei Funktionsstörungen des Leberzellparenchyms sind
naturgemäß auch diese Reaktionen betroffen, sodass es
dann zu entsprechenden Störungen im Stoffwechsel dieser
Hormone kommt.
25.2.4 Methoden zur Konzentrations-
bestimmung
! Biologische Nachweisverfahren beruhen auf der Quan-
tifizierung zellulärer Effekte von Signalmolekülen.
Grundlage der biologischen Nachweisverfahren für Hor-
mone und Cytokine ist deren biologische Aktivität am in-
takten Tier, in Gewebspräparaten oder an isolierten Zellen.
. Abb. 25.2. Prinzip des Radioimmuno-
assays (RIA). (Einzelheiten 7 Text)
761 25
Dieser Nachweis ist der für die biologische Funktion wich-
tigste Test, da in ihm inaktive Vorstufen oder Abbaupro-
dukte des Hormons oder Cytokins nicht wirksam sind. V.a.
zur Aufdeckung neuer hormonell aktiver Verbindungen
sind biologische Nachweisverfahren unerlässlich, da bis zur
endgültigen Strukturaufklärung des Signalmoleküls andere
Methoden (7 u.) nicht anwendbar sind.
Ein Nachteil biologischer Testverfahren liegt in der
Komplexität und Störanfälligkeit der Bestimmungsme-
thode. Es ist außerordentlich schwierig, die für derartige
Tests benötigten Gewebe oder Zellpräparationen in gut
reproduzierbarer Form herzustellen. Darüber hinaus
werden gelegentlich auch von anderen Signalmolekü-
len ähnliche zelluläre Antworten ausgelöst, sodass häu-
fig auch die Spezifität solcher Analysen nicht sehr groß
ist.
! Für alle Hormone und Cytokine stehen spezifische und
sensitive immunologische Nachweisverfahren zur Ver-
fügung.
Die Entdeckung des Prinzips der immunologischen Kon-
zentrationsbestimmungen durch Solomon Berson und
Rosalyn Yalow Anfang der 60er Jahre hat die Endokrino-
logie in ihrer heutigen Form erst möglich gemacht, da nur
diese Verfahren die notwendige Spezifität und Empfind-
lichkeit für die Konzentrationsbestimmung von Hormonen
und Cytokinen in Körperflüssigkeiten liefern. Die Methode
beruht auf der Reaktion mit spezifischen Antikörpern, die
inzwischen gegen jedes bekannte Hormon oder Cytokin
in ausreichender Spezifität und Menge gewonnen werden
können. Der Vorteil der immunologischen Konzentrations-
bestimmungen liegt in der Einfachheit ihrer Durchführung
 762 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

und in der hohen Empfindlichkeit des Nachweises. Ihr

Nachteil ist, dass auch Vorstufen oder Abbauprodukte vom
Antikörper gebunden werden, wenn sie nur das für die Anti-
körperbindung notwendige Epitop enthalten. Daher ist es
manchmal zur Lösung bestimmter Fragestellungen not-
wendig, neben der immunologischen Bestimmung auch
die biologische Aktivität eines Hormons oder Cytokins zu
messen.

Radioimmunoassay (RIA)
Es wird eine konstante Menge Hormon- bzw. Cytokin-
spezifischer Antikörper mit einer im Überschuss vorhan-
25 denen Menge radioaktiv markierten Hormons/Cytokins
(in . Abb. 25.2 als Ligand (rot) bezeichnet) inkubiert. Alle
Antikörper binden radioaktiv (meist 125J) markierten Li-
ganden (maximal gebundene Radioaktivität = 100%). Über-
schüssige 125J-Liganden werden von Antikörper-gebun-
denen abgetrennt und die Antikörper-gebundene Radio-
aktivität wird gemessen (. Abb. 25.2a). Ist neben dem
radioaktiv markierten Liganden auch noch nicht markier-
ter Ligand (blau), dessen Konzentration bestimmt werden
soll, vorhanden, tritt dieser mit dem radioaktiv markierten
Liganden in Konkurrenz um die Bindung an den Antikör-
per (. Abb. 25.2b). Wenn die Zahl der nicht markierten
Liganden gleich groß wie die 125J-Liganden ist, wird nach
Bindung an die Antikörper und Trennung von freien und
gebundenen Liganden nur die Hälfte der Radioaktivität
für die Zahl der 125J-Ligand/Antikörper-Komplexe gemes-
sen. Durch Zugabe verschiedener Mengen eines bekannten
unmarkierten Standardpräparats, lässt sich eine Eichkurve
erstellen. Die Messung der Ligandenkonzentration in un-
bekannten Proben erfolgt dann durch Vergleich mit dem
Standard.

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)

Der ELISA vermeidet die Gefahren der Radioaktivität und
wird deshalb heute bevorzugt.
Wie in . Abb. 25.3 gezeigt wird ein erster Antikörper
(blau) an eine Festphase (Mikrotiterplatte) gebunden. Der
im Überschuss vorliegende Festphasen-gebundene Anti-
körper bindet das in der zu messenden Probe vorliegende
Hormon/Cytokin (rot). Durch einen mit einem Enzym ge-
koppelten zweiten Antikörper (gelb) gegen weitere Epitope
auf dem zu messenden Hormon/Cytokin erfolgt nun das
eigentliche Nachweisverfahren. Das an den Zweitantikör-
per gekoppelte Enzym setzt ein zugegebenes Substrat zu
einem farbigen oder fluoreszierenden Produkt um, dessen
Konzentration hoch empfindlich gemessen werden kann.
Eine Variante des in . Abb. 25.3 dargestellten immuno-
metrischen Testverfahrens ist die Bestimmung von Anti-
körperkonzentrationen in Gewebeproben oder Körperflüs-
sigkeiten mit Hilfe von an Mikrotiterplatten immobilisier-
tem Hormon/Cytokin.
. Abb. 25.3. Enzym-gekoppelter Immunoadsorptionstest (ELISA,
enzyme-linked immunosorbent assay). (Einzelheiten 7 Text)
In Kürze
Die Konzentrationen von Hormonen und Cytokinen in
der extrazellulären Flüssigkeit liegen in einem Bereich
zwischen 10–6 und 10–10 mol/l. Die Entwicklung immu-
nologischer Bestimmungsverfahren für diese Verbin-
dungen stellt einen Meilenstein in der Endokrinologie
dar, da nur durch sie derartig geringe Konzentrationen
in spezifischer und gut reproduzierbarer Weise ermit-
telt werden können.
25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine
25.3 Rezeptoren für Hormone
und Cytokine
Unabhängig von Wirkort und Wirkungsspektrum muss
man für alle extrazellulären Signalmoleküle (Liganden) an-
nehmen, dass sie primär mit einem Rezeptor interagieren
und dass der dabei entstehende Ligand-Rezeptor-Komplex
für die Ausbildung der intrazellulären Signale verantwort-
lich ist:
Extrazelluläres Signalmolekül + Rezeptor
o Ligand-Rezeptor-Komplex o intrazelluläre Signale
Rezeptoren sind immer Proteine und die Kinetik der Bin-
dung des Signalmoleküls an seinen Rezeptor verläuft ana-
log zur Bindung eines Substrats an das aktive Zentrum
eines Enzyms (7 Kap. 4.2.1). Da die Anzahl der Rezeptoren
einer Zelle begrenzt ist, erreicht die Ligandenbindung
mit steigender Ligandenkonzentration eine Sättigung.
Man kann eine Bindungskonstante bestimmen, die Infor-
mationen über die Affinität des Liganden zum Rezeptor
liefert.
Die meisten Rezeptoren durchspannen die Plasmamem-
bran. Einige liegen jedoch im Zellinnern vor und binden
ihre lipophilen Liganden nach deren Transport durch die
Plasmamembran. Man unterscheidet die drei Klassen der
4 Nucleären Rezeptoren
4 Liganden-regulierte Ionenkanäle
4 Membranrezeptoren
Die intrazellulär vorliegenden nucleären Rezeptoren kön-
nen selbst als mobile Signalweiterleiter angesehen werden,
die nach Ligandenbindung die Information bis in den Zell-
kern und an die DNA tragen können. Dies ist verständ-
licherweise für die Ionenkanäle und die membranveran-
kerten Rezeptormoleküle nicht möglich. Im Fall der Ionen-
kanäle führt die Ligandenbindung zur Änderung der
Durchlässigkeit für bestimmte Ionen, meist Na+, K+, Ca2+
oder Cl– Ionen. An die Aktivierung membranverankerter
Rezeptoren schließen sich auf deren cytoplasmatischer
Seite Signaltransduktionskaskaden an, bei denen auf-
einander folgend verschiedene Proteine aktiviert werden.
Diese Aktivierungen sind häufig mit Phosphorylierungen
(dem Anhängen eines Phosphatrests an die Seitenketten
von Aminosäuren wie Serin, Threonin oder Tyrosin) ver-
bunden oder durch den Austausch von an G-Proteinen ge-
bundenem GDP durch GTP gekennzeichnet. In selteneren
Fällen kann die Aktivierung auch über eine Dephosphory-
lierung der Proteine erfolgen.
Sowohl für nucleäre als auch für membranverankerte
Rezeptoren führt die Signaltransduktion zu gesteigerter
oder verminderter Transkription von Zielgenen und der
entsprechenden Proteinexpression, zu Stoffwechselände-
rungen, Differenzierung, Proliferation, Apoptose oder Mi-
gration.
763 25
25.3.1 Nucleäre Rezeptoren
Einige extrazelluläre Signalmoleküle wie die Steroid- oder
Schilddrüsenhormone (7 Kap. 8.5.2, 27.2), aber auch Re-
tinsäure (7 Kap. 23.2.1) oder die D-Vitamine (7 Kap. 23.2.2)
können aufgrund ihrer lipophilen Eigenschaften durch die
Plasmamembran gelangen. Nach ihrer Aufnahme in die
Zelle binden sie an intrazellulär vorliegende spezifische
Rezeptorproteine. Durch die Interaktion des Hormons/
Vitamins mit seinem Rezeptor entsteht ein Komplex, der
durch Bindung an spezifische Promotorregionen respon-
siver Gene (enhancer/silencer) deren Transkription positiv
(. Abb. 25.4a) oder negativ beeinflussen kann.
! Durch die Bindung des Signalmoleküls an intrazelluläre
Rezeptoren entsteht ein Komplex, der als Transkriptions-
faktor wirkt.
Die Mitglieder der Superfamilie der nucleären Rezeptoren
weisen untereinander eine große Ähnlichkeit auf. Ihre
Struktur ist modular, d.h. aus verschiedenen Domänen
aufgebaut. Beginnend vom N-Terminus besitzen nucleäre
Rezeptoren eine variable Region, die essentielle Bereiche
zur Regulation der Genexpression enthält, eine DNA-Bin-
dungsdomäne, eine Kern-Lokalisationssequenz und die
Ligandenbindungsdomäne, die immer C-terminal zu fin-
den ist (. Abb. 25.4b). Die Homologie der Rezeptoren ist
besonders im Bereich der DNA-Bindungsdomäne sehr
hoch.
Soweit bisher bekannt binden alle nucleären Rezeptoren
die DNA als Dimere. Sie erkennen zwei konservierte DNA-
Sequenzen aus je sechs Basen, die entweder auf dem glei-
chen DNA-Strang als sogenannte direct repeats oder auf
entgegengesetzten Strängen, d.h. als inverted repeats vorlie-
gen (. Abb. 25.5). Während die in homodimerer Form
bindenden Steroidhormonrezeptoren, z.B. Glucocorticoid-
rezeptor und Östrogenrezeptor, an inverted repeats binden,
erkennen die in heterodimerer Form bindenden Rezepto-
ren für Vitamin D3, Retinsäure und Schilddrüsenhormone
direct repeats. Inzwischen gibt es gute Vorstellungen über
die Raumstruktur der DNA-Bindungsdomäne der Hormon-
rezeptoren. Sie enthalten häufig Cystein-reiche Sequenzen,
die Zink-Ionen koordinativ binden und werden daher
»Zinkfingermotive« genannt (7 Kap. 8.5.2).
Die Spezifität der Bindung wird im Fall der Steroid-
hormonrezeptoren über feine Unterschiede in der DNA-
Erkennungssequenz (z.B. AGAACA (Glucocorticoid) im
Vergleich zu AGGTCA (Östrogen)) oder im Fall der
heterodimeren nucleären Rezeptoren durch den Abstand
der beiden Sequenzen zueinander, der zwischen einem
und fünf Basenpaaren variieren kann, bestimmt
(. Abb. 25.5).
Der Aktivierungsmechanismus der nucleären Rezep-
toren unterscheidet die in homodimerer Form an die DNA
bindenden Steroidhormonrezeptoren von den in hete-
rodimerer Form bindenden Rezeptoren für Vitamin D3,
 764 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.4. Signaltransduktion nucleärer Rezeptoren. (a) Akti-
vierung intrazellulärer Rezeptoren durch Liganden. Die Abbildung
zeigt den bei Glucocorticoiden aufgeklärten Mechanismus. Glucocor-
ticoide diffundieren durch die Zellmembran und binden an den intra-
zellulären Glucocorticoidrezeptor. Das zuvor an diesen gebundene
Retinsäure (7 Kap. 23.2.2) und Schilddrüsenhormone
(7 Kap. 27.2). Die Rezeptoren für die D-Vitamine, Retin-
säure und Schilddrüsenhormone sind ausschließlich
nucleär lokalisiert. In Abwesenheit der Hormone (= Ligan-
den) reprimieren sie als Monomere die Transkription
bestimmter Gene. Nach Ligandenbindung erfolgt eine
drastische Konformationsänderung und nach Rekrutie-
rung des zweiten Rezeptors die Aktivierung der Gentrans-
kription.
Im Gegensatz dazu sind die Rezeptoren für Steroid-
hormone in Abwesenheit ihrer Liganden cytoplasmatisch
lokalisiert, meist gebunden an Proteine, die ihre DNA-
Hitzeschockprotein Hsp90 löst sich ab und gibt die Kernlokalisations-
sequenz des Rezeptors frei. Dieser wird in dimerer Form in den Zell-
kern transportiert, bindet dort an enhancer-Sequenzen responsiver
Gene und führt zur Aktivierung des basalen Transkriptionsapparats.
(b) Domänenstruktur einiger nucleärer Rezeptoren. AS = Aminosäuren
Bindungsdomäne blockieren. Als solches ist u.a. das Hitze-
schockprotein (7 Kap. 9.2.1) Hsp90 identifiziert worden.
Die Bindung des Hormons an den Rezeptor führt zur
Dissoziation der Hitzeschockproteine und anschließend
zur Bildung von homodimeren Formen der jeweiligen
Hormonrezeptoren. . Abb. 25.4a gibt die heutigen Vor-
stellungen über die Aktivierung derartiger intrazellulä-
rer Hormonrezeptoren durch ihre jeweiligen Liganden
wieder.
25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine
765 25

gulationsmechanismus hier darauf, dass die Bindung spe-

zifischer Liganden den Öffnungszustand des Kanals be-
einflusst. Liganden-aktivierte Ionenkanäle kommen in der
Plasmamembran sowie in intrazellulären Membranen vor
(. Tabelle 25.2).
Extrazelluläre Liganden sind beispielsweise die Neuro-
transmitter
4 J-Aminobutyrat (GABA)
4 Acetylcholin
4 Glutamat
4 Serotonin

Intrazellulär aktivierte Ionenkanäle spielen u.a. bei der

. Abb. 25.5. Enhancer-Sequenzen, die durch aktivierte, dimere
Hormonrezeptor-Komplexe erkannt werden. GRE = glucocorticoid
response element; ERE = estrogen response element; VDRE = vitamine D
response element; TRE = thyroid hormone response element; RARE =
retinoic acid response element; N: beliebige Base (A, G, C oder T) (die
Sequenzen können in einzelnen Genen leicht von den oben darge-
stellten enhancer-Sequenzen abweichen)
25.3.2 Liganden-regulierte Ionenkanäle
als Rezeptoren
Im Gegensatz zu den intrazellulären Rezeptoren für Signal-
moleküle sind die Liganden-regulierten Ionenkanäle ihrer
Natur nach immer Membranproteine. Wie für Ionenkanäle
üblich (7 Kap. 6.1.3, 6.1.4, 32.2.2), sind sie für den nicht-
ATP-abhängigen Transport verschiedener Ionen durch die
Membran verantwortlich. Viele Ionenkanäle zeichnen sich
dadurch aus, dass ihr Öffnungszustand und damit ihr Sub-
stratfluss regulierbar ist. Anders als bei den spannungsge-
steuerten Ionenkanälen, die sich in Abhängigkeit vom
Membranpotential öffnen oder schließen, beruht der Re-
Regulation der intrazellulären Calciumkonzentration
z.B. durch Inositolphosphate eine wichtige Rolle (7 Kap.
25.6.3).
Liganden-regulierte Ionenkanäle vermitteln die
schnellsten bekannten zellulären Reaktionen auf Signal-
stoffe, da die Bindung des Liganden unmittelbar mit der
spezifischen Antwort, nämlich dem Öffnen oder Schlie-
ßen eines Ionenkanals verknüpft ist. Im Unterschied
zu den anderen Rezeptortypen (7 u.) ist die Erzeugung
eines intrazellulären Boten- oder zweiten Signalstoffs
(second messenger) für die Signaltransduktion nicht not-
wendig.
Die durch extrazelluläre Liganden aktivierten Ionen-
kanäle haben eine gemeinsame Grundstruktur. Sie sind
jeweils aus fünf Proteinuntereinheiten zusammengesetzt.
So hat z.B. der nikotinische Acetylcholinrezeptor die
Struktur DEJG (. Abb. 25.6) Jede der Untereinheiten
besteht aus einem integralen Membranprotein mit vier
Transmembrandomänen. Der N- sowie der C-Terminus
liegen extrazellulär, außerdem findet sich eine relativ
große cytoplasmatische Schleife. Die durch intrazelluläre
Liganden regulierten Ionenkanäle zeigen einen etwas an-
deren Aufbau und sind im Einzelnen im 7 Kap. 25.3.2 be-
sprochen.

. Tabelle 25.2. Liganden-regulierte Ionenkanäle (Beispiele)

Rezeptor (Kanal) Ligand Ionenselektivität Besprochen in Kapitel
Extrazellulär aktivierte Ionenkanäle
Nikotinischer Acetylcholinrezeptor Acetylcholin Na+, K+, Ca+ 31.3.2, 31.3.3
GABAA-Rezeptor GABA Cl–, HCO3– 31.3.4
–
Glycinrezeptor Glycin Cl , HCO3– 31.3.4
Intrazellulär aktivierte Ionenkanäle
IP3-abhängiger Calciumkanal Inositol-(1,4,5)-trisphosphat Ca2+ 31.3, 25.4.5
2+
Ryanodinrezeptor cyclo-ADP-Ribose Ca 30.3.2
Na+-Kanal der Stäbchen in der Retina cyclo-GMP Na+
 766 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.6. Nikotinischer Acetylcholinrezeptor. Der nikotinische
Acetylcholinrezeptor besteht aus fünf Untereinheiten (D, D, E, J, G),
die jeweils vier Transmembranhelices besitzen (M1–M4). Die M2-Trans-
membranhelices (rot) der fünf Untereinheiten bilden eine Pore. Zwei
Acetylcholin-Moleküle (blau) binden zwischen den D und J bzw. den
D und G Untereinheiten des Rezeptors
Infobox
Myasthenia gravis (myo: Muskel; asthenia: Schwäche;
gravis: schwer) ist eine relativ seltene neurologische Er-
krankung, die mit einem Verlust der nikotinischen Acetyl-
cholin-Rezeptoren auf der postsynaptischen Membran
einhergeht. Dies resultiert in einer Schwäche und Erschöp-
fung der quer gestreiften Muskulatur, die lebensbedroh-
lich enden kann. Es handelt sich um eine Antikörper-
vermittelte Autoimmunerkrankung, deren Entstehung bis
heute nicht vollständig geklärt ist.
Der erste Patient wurde vermutlich schon 1672 von
Thomas Willis in De Anima Brutorum (wörtlich: Von der
Seele der Tiere) beschrieben, wo er von einer Frau berich-
tet, die lang-anhaltende Paralysen der Extremitäten und
der Zunge aufwies. Zwei Jahrhunderte später beschrie-
ben Erb und Goldflam die genauen klinischen Symptome
von Myasthenia gravis. Der Name selbst wurde aber erst
von Jolly 1895 geprägt.
Infobox
Curare und Neurotoxine
Das Pflanzengift Curare (»ourari« aus der Sprache der
Tupi-Indianer bedeutet so viel wie »Flüssigkeit, die einen
Vogel töten kann«) wird aus Curarea bzw. Strychnos toxi-
fera oder Chondrodendron tomentosum gewonnen und
Im Serum von etwa 85% der Myasthenia gravis-Patien-
ten konnten erhöhte Spiegel von Acetylcholin-Rezeptor-
spezifischen Antikörpern (hauptsächlich IgG1 und IgG3)
nachgewiesen werden. Die Wirkungsweise der Autoantikör-
per ist vielfältig. So aktivieren einige das Komplement-
System und führen damit zur Lyse der Muskelmembran,
andere verbrücken zwei Acetylcholin-Rezeptoren in der
Membran und beschleunigen so deren Degradation.
Etwa 75% der Myasthenia gravis-Patienten weisen
Thymus-Abnormalitäten auf (z.B. Hyperplasie der Keim-
zentren oder Thyome) und eine Thymektomie führte bei
einigen Patienten zur Linderung der Symptome. Nachdem
erkannt wurde, dass es sich um eine Autoimmunerkran-
kung handelt, hat sich der Langzeiteinsatz von Steroiden
oder Azathioprinen (Imuran£) zur Immunsuppression als
erfolgreich herausgestellt.
wurde von den südamerikanischen Indianern als Pfeilgift
genutzt. Seine todbringende Wirkung entfaltet es haupt-
sächlich über die Lähmung der Atemmuskulatur. Es ver-
hindert das Öffnen der Kanäle im nikotinischen Acetyl-
cholin-Rezeptor der motorischen Endplatte, indem es die
6
25.3 · Rezeptoren für Hormone und Cytokine
Bindungsorte für Acetylcholin kompetitiv blockiert. Somit
wirken bei Curare-Vergiftungen alle Stoffe, die die Acetyl-
cholin-Menge im synaptischen Spalt erhöhen können
(z.B. die Acetylcholinesterase-Hemmer Neostigmin oder
Physostigmin), als Gegenmittel.
Mitte des 20. Jahrhunderts wurde Curare als Relaxans
bei chirurgischen Eingriffen verwendet. Dies war nicht
ohne Risiko, da die lähmende Wirkung erst im Laufe
der Zeit gut kontrolliert werden konnte. Zu Beginn des
20. Jahrhunderts wurde das Gift auch therapeutisch ge-
25.3.3 Membranrezeptoren
! Die Stimulierbarkeit eines Zelltyps durch hydrophile
Signalmoleküle ist davon abhängig, ob auf der Zell-
oberfläche Rezeptoren für diese Moleküle vorhanden
sind.
Die extrazelluläre Bindung eines Liganden an seinen Re-
zeptor löst intrazelluläre Reaktionskaskaden aus. Häufig
werden hierbei intrazelluläre Botenstoffe gebildet, die auch
als second messenger und dementsprechend die primären
Signalstoffe als first messenger bezeichnet werden. In Ab-
hängigkeit von ihrer Struktur und den Mechanismen der
Signalweiterleitung im Cytoplasma unterscheidet man drei
Arten von Membranrezeptoren (. Abb. 25.7a,b,c)
4 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren
4 Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threo-
ninkinasen
4 Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
Bei den Membranrezeptoren kann es sich um ein einzel-
nes Protein, um Multimere eines Proteins (homooligo-
mere Rezeptoren) oder Multimere aus mehreren unter-
schiedlichen Proteinen (heterooligomere Rezeptoren)
handeln.
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (G-protein-coupled recep-
tors, GPCR) durchspannen die Plasmamembran siebenmal
und werden daher auch als heptahelicale, 7-Transmem-
brandomänen- oder Serpentin-Rezeptoren bezeichnet. Sie
bilden die größte Familie der Membranrezeptoren. Ihr
Aufbau ist in . Abb. 25.7a dargestellt. Es handelt sich um
Proteine aus 350–800 Aminosäuren und Molekularmassen
zwischen 40 und 90 kDa. Der N-Terminus liegt extrazel-
lulär, der C-Terminus intrazellulär. Auffallend ist bei vie-
len GPCR eine große intrazelluläre Schleife zwischen der
5. und 6. Transmembrandomäne. Teile von ihr sind für
den Signaltransduktionsmechanismus verantwortlich, bei
dem immer heterotrimere (D,E,J) G-Proteine beteiligt sind
(7 Kap. 25.4.4 und 25.6) (. Abb. 25.7a). Diese sind mittels
767 25
gen Tollwut, Epilepsie, Tetanus und Morbus Parkinson ein-
gesetzt.
Neurotoxine sind Substanzen, die eine normale Neu-
rotransmission stören. Hierbei handelt es sich interessan-
terweise oft um Schlangen- oder Spinnengifte, wie z.B. das
D-Bungarotoxin der Bungarus-Schlangen, das D-Dendro-
toxin der schwarzen Mamba, das D-Latrotoxin der schwar-
zen Witwe oder die Agatoxine der Trichterspinnen. Diese
Substanzen hemmen entweder den nikotinischen Acetyl-
cholin-Rezeptor oder andere Ionenkanäle.
covalenter Verknüpfung mit einem hydrophoben Molekül
(Myristoylierung, Palmitoylierung, Prenylierung) in der
Zellmembran verankert (7 Kap. 9.2.4).
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren werden von den un-
terschiedlichsten Signalmolekülen als Signalvermittler ge-
nutzt. Zu ihnen gehören glanduläre Hormone, Cytokine
(v.a. die Gruppe der Chemokine), Neurotransmitter, aber
auch Geschmacks- und Geruchsstoffe sowie divalente
Kationen und sogar Lichtquanten.
Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/
Threoninkinasen
Die Rezeptoren für eine Vielzahl von Wachstumsfaktoren
gehören zur Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen. Hierbei
handelt es sich um integrale Membranproteine mit einer
Transmembranhelix (. Abb. 25.7b). Der N-Terminus des
Proteins befindet sich auf der Außenseite der Zelle, wäh-
rend der C-Terminus im Zellinnern lokalisiert ist (Typ-I-
Transmembranproteine). Rezeptor-Tyrosinkinasen sind
Glycoproteine, die aus meist Immunglobulin-ähnlichen
Domänen modular aufgebaut sind.
Die Bindung des Liganden erfolgt auf der extrazellu-
lären Seite des Rezeptors und wird über spezifische, nicht-
covalente Wechselwirkungen zwischen definierten Re-
gionen des Liganden und entsprechenden Bereichen des
Rezeptors vermittelt (7 Kap. 25.7).
Der Name Rezeptor-Tyrosinkinase leitet sich von einer
Domäne mit Enzymaktivität in der cytoplasmatischen Re-
gion des Proteins ab, die nach Stimulation unter ATP-Ver-
brauch Proteine an Tyrosinseitenketten phosphorylieren
kann.
Insulin (7 Kap. 26.1.7) und eine Reihe von Wachstums-
faktoren sind Liganden von Rezeptor-Tyrosinkinasen. Ein-
zelheiten zum Aufbau dieser Membranrezeptoren finden
sich in 7 Kap. 25.7.1.
Eine Besonderheit stellt der Rezeptor für TGF-E dar.
Hier werden nicht Tyrosin-, sondern Serin-Seitenketten
phosphoryliert. Solche Rezeptoren werden als Rezeptor-
Serin/Threoninkinasen bezeichnet.
 768 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.7. Membranständige Rezeptoren. Aktivierungsmechanismen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (a), Rezeptoren mit intrin-
sischer Kinaseaktivität (b) und assoziierter Kinaseaktivität (c). KD = Kinase-Domäne; P = Phosphat

Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
Die meisten Kinase-assoziierten Rezeptoren haben prin-
zipielle Ähnlichkeit mit den Rezeptor-Tyrosinkinasen mit
dem Unterschied, dass die enzymatische Aktivität nicht auf
dem selben Polypeptid vorliegt, sondern als separates Pro-
tein konstitutiv an den Membranrezeptor gebunden ist
(. Abb. 25.7c).
Auch die Kinase-assoziierten Rezeptoren gehören zur
Familie der Typ-I-Transmembranproteine. Der Großteil
der Interleukine und die Interferone, aber auch einige
Wachstumsfaktoren (z.B. Wachstumshormon, Erythro-
poetin und Prolactin) signalisieren über Rezeptoren dieser
Familie.
Die Bindung des Liganden erfolgt extrazellulär an spe-
zifische Bereiche (7 Kap. 25.4.1). Viele Rezeptoren dieser
Gruppe weisen in diesem Bereich mindestens ein Cytokin-
rezeptor-Homologiemodul auf. Die Interferonrezeptoren
enthalten dieses Modul nicht.
Die intrazellulären Regionen dieser Rezeptoren sind
in weiten Teilen wenig homolog und strukturell noch
nicht näher charakterisiert. Im Unterschied zu den Re-
zeptor-Tyrosinkinasen besitzen sie keine Enzymaktivität.
Sie enthalten aber zwei membrannah liegende konser-
vierte Regionen, die der dauerhaften Assoziation mit
cytoplasmatischen Tyrosinkinasen dienen. Nach Ausbil-
dung eines signaltransduzierenden Rezeptorkomplexes
25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren
kommt es zur Aktivierung dieser assoziierten Tyrosinki-
nasen.
Wichtige Ausnahmen bilden z.B. die Rezeptoren der
Cytokine Interleukin-1 und Tumor-Nekrose-Faktor, die
in 7 Kap. 25.8.1 und 25.8.2 ausführlich besprochen sind,
sowie die Toll-like Rezeptoren, die eine zentrale Rolle
bei der angeborenen Immunität spielen (7 Kap. 25.8.5 und
7 Kap. 34.1).
In Kürze
Die Interaktion mit einem spezifischen Rezeptor ist der
erste Schritt in der Wirkung von Hormonen und Cyto-
kinen. Intrazellulär lokalisierte Hormonrezeptoren
gehören i. Allg. zur Gruppe der ligandenaktivierten
Transkriptionsfaktoren. Diese treten mit enhancer-
Sequenzen der entsprechenden Gene in Wechselwir-
kung und kontrollieren so die Genexpression. Ein
großer Teil von Rezeptoren ist in zellulären Membra-
nen, i. Allg. in die Plasmamembran, integriert. Nach
ihrem Aufbau können Rezeptoren in ligandenaktivierte
Ionenkanäle, G-Protein-gekoppelte Rezeptoren oder
Rezeptoren mit intrinsischer oder assoziierter Kinase-
aktivität unterteilt werden.
25.4 Prinzipien der Signal-
transduktion von
Membranrezeptoren
Die Plasmamembran einer Zelle stellt in vielerlei Hinsicht
eine Barriere dar, nicht zuletzt auch für die meisten Hor-
mone und alle Cytokine. Nur die lipophilen Hormone kön-
nen die Membran passieren und an Rezeptoren im Zell-
inneren binden (7 Kap. 25.3.1). Für die übrigen hydrophilen
Mediatoren erfolgt die Signaltransduktion an integralen
Membranproteinen der Plasmamembran. Im Falle der Li-
ganden-gesteuerten Ionenkanäle ist diese Umwandlung
sehr direkt. Nach Ligandenbindung wird die Membran
augenblicklich für bestimmte Ionen passierbar. Im Ver-
gleich dazu erfolgt die Signaltransduktion anderer Mem-
branrezeptoren eher indirekt. Die Ligandenbindung an
der extrazellulären Region der Rezeptoren muss über die
Transmembranhelices in ein cytoplasmatisches Signal
übersetzt werden. Auf der cytoplasmatischen Seite sind
unterschiedliche Signalproteine in die Signalweiterleitung
eingebunden. Dieser komplexe Mechanismus bietet aber
auch eine Reihe von Möglichkeiten. So kann ein einzelner
aktivierter Membranrezeptor eine Vielzahl von nachge-
schalteten Signalproteinen aktivieren und damit zu einer
Signalamplifikation (. Abb. 25.8) beitragen. Durch die
Rekrutierung verschiedener Signalproteine an einen Rezep-
tor entsteht eine regelrechte Signalplattform auf der cyto-
plasmatischen Seite der Plasmamembran, die durch Adap-
terproteine und scaffold (Gerüst)-Proteine weiter ausgebaut
769 25
. Abb. 25.8. Signalamplifikation bei der Signalweiterleitung
werden kann (. Abb. 25.11b). Es gibt Hinweise, dass be-
stimmte Bereiche der Plasmamembran mit veränderter
Lipidkomposition (lipid rafts, 7 Kap. 2.2.6) für die Ausbil-
dung solcher Plattformen prädestiniert sind. Verschiedene
Signalwege können sich wechselseitig beeinflussen (cross-
talk), wodurch die Komplexität der Signaltransduktion wei-
ter gesteigert wird. Letztlich ist die Zelle gefordert, aus der
Vielzahl der auf sie einwirkenden Mediatoren mit Hilfe der
Signalintegration die vom Gesamtorganismus gewünschte
biologische Antwort hervorzurufen. Die Untersuchung
dieser komplexen Signaltransduktionsvorgänge ist ein hoch-
aktuelles Forschungsgebiet.
! Bei allen Membranrezeptoren muss das extrazelluläre
Signal in eine intrazelluläre Reaktion umgewandelt
werden.
Der allgemeine Mechanismus der Umwandlung des extra-
zellulären Signals beruht auf folgenden Schritten:
4 Zuerst erfolgt die spezifische Bindung des Liganden
(first messenger) an den Membranrezeptor
4 Die Ligandenbindung führt zu einer Konformations-
änderung des Rezeptors, die mit einer Oligomerisie-
rung einhergehen kann
4 Die Konformationsänderung initiiert eine intrazelluläre
Signalkaskade
Aktivierte Membranrezeptoren lösen verschiedene intra-
zelluläre Reaktionen aus, wie z.B.:
4 die Rekrutierung von Signalproteinen an den Rezeptor
4 die Aktivierung oder Inaktivierung von Enzymen durch
covalente Modifikation (häufig Phosphorylierung) und
4 die Bildung von second messengern (z.B. cAMP oder
Ca2+)
Die daraus resultierenden zellulären Antworten äußern
sich in Veränderungen
4 der Genexpression
4 des Stoffwechsels
 770 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

4 des Cytoskeletts und der Migration Infobox

4 der Proliferation und der Apoptose Bindung von Cytokinen an Rezeptoren
4 der Differenzierung der Zelle Für eine Reihe von Cytokinen konnten die Bereiche, mit
denen sie in Kontakt zu ihren Rezeptoren treten, defi-
niert werden. Ebenso ließen sich die an der Bindung
25.4.1 Rezeptoraktivierung beteiligten Bereiche auf den entsprechenden Rezepto-
ren identifizieren. Beispielhaft lässt sich diese Wechsel-
Die Bindung des Liganden an den Membranrezeptor ist der wirkung am Komplex aus Wachstumshormon (growth
erste Schritt einer jeden Signaltransduktionskaskade. Die hormone, GH, welches auf Grund struktureller Merkma-
Ligand-Rezeptor-Wechselwirkung ist durch Spezifität und le der Familie der helicalen Cytokine zugeordnet wird)
hohe Affinität charakterisiert. und seinem Rezeptor in . Abb. 25.9 veranschaulichen.
Dargestellt ist ein Komplex aus zwei Wachstumshor-
! Die Bindung eines Liganden an den Extrazellulärteil
25 eines Rezeptormoleküls wird über mehrere nichtco-
mon-Rezeptoruntereinheiten (rot und grün) und dem
gebundenen Wachstumshormon (blau). Von den bei-
valente Wechselwirkungen vermittelt.
den Rezeptoren sind nur die Extrazellulärdomänen
Die Rezeptorkinasen (7 Kap. 25.7) und die Rezeptoren gezeigt. Hierbei handelt es sich um zwei je etwa 100
mit assoziierten Tyrosinkinasen (7 Kap. 25.8) werden erst Aminosäuren lange Fibronektin-Typ-III-Domänen. Jede
nach ihrer Dimerisierung oder Oligomerisierung aktiviert. Fibronektin-Typ-III-Domäne ist aus sieben E-Strängen
Eine einzelne, starre Transmembranhelix könnte extra- aufgebaut.
zelluläre Konformationsänderungen nur schlecht ins Zell- Die Interaktionsflächen zwischen Ligand und Re-
innere weitergeben. Die Oligomerisierung wird durch zeptoren bestehen aus einem hydrophoben Zentrum
multivalente Liganden erreicht, die mit mehreren Rezep- (gelb), das von einem Rand aus polaren Aminosäuren
torproteinen gleichzeitig interagieren. Bei der Bindung von umgeben ist. Die Spezifität der Wechselwirkung wird
Cytokinen an Rezeptorkomplexe, die aus mehr als einer dabei durch die polaren Interaktionen vermittelt, wäh-
Proteinspezies aufgebaut sind (Heterooligomere), kann rend die van-der-Waals-Wechselwirkungen im Zentrum
häufig eine definierte Reihenfolge der Bindungsereignisse der Interaktionsflächen den entscheidenden Beitrag
festgestellt werden. Das Cytokin bindet zunächst an eine zur Bindungsenergie liefern.
der beteiligten Rezeptoruntereinheiten. Erst nach Bindung
einer weiteren Rezeptoruntereinheit entsteht ein signalisie-
render Komplex auf der Zellmembran.
In diesem Zusammenhang werden auch vorgeformte
Komplexe aus Rezeptoruntereinheiten auf der Zellmem-
bran diskutiert, die durch Ligandenbindung nur noch in
eine aktivierte, signaltransduzierende Konformation ge-
bracht werden müssen. Es ist jedoch nicht genau verstan-
den, wie die Bindung des Liganden zur Aktivierung der
Kinasen führt.
Im Fall von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (7 Kap.
25.6) scheint die Liganden-induzierte Rezeptor-Oligome-
risierung eher von untergeordneter Bedeutung. Hier kann
die Bindung des Liganden auf der extrazellulären Seite die
Orientierung der an sich starren Transmembranhelices
zueinander verändern. Diese Konformationsänderung des
Rezeptors wird auf der cytoplasmatischen Seite von den
assoziierten trimeren G-Proteinen erkannt und führt zur
Auslösung der Signalkaskaden.

25.4.2 Rekrutierung cytoplasmatischer

Effektorproteine an die Plasma-
membran
Nach Aktivierung von Membranrezeptoren gehen alle wei-
teren Signaltransduktionsvorgänge von der zellinneren Sei-
te der Plasmamembran aus. Hierzu werden cytoplasma-
. Abb. 25.9. Erkennung eines Liganden durch seinen Rezeptor.
Kristallstruktur des Komplexes aus Wachstumshormon (blau) und
den extrazellulären Regionen zweier Wachstumshormon-Rezeptoren
(grün und rot) (DeVos, Ultsch, Kossiakoff 1992). Das Prinzip der Erken-
nung des Liganden durch den Rezeptor ist vergrößert dargestellt.
(Einzelheiten 7 Infobox)
25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren
771 25

tische Signalproteine an die Plasmamembran rekrutiert.

Die Lokalisierung an die Membran wird erreicht durch
4 Protein-Protein-Wechselwirkungen
4 Protein-Membranlipid-Wechselwirkungen
4 Lipidanker

Protein-Protein-Wechselwirkungen
Diese spielen in der Signaltransduktion eine wichtige Rolle.
An den aktivierten Rezeptor werden weitere Signalmole-
küle rekrutiert, die wiederum in Wechselwirkung mitein-
ander treten. Die Ausbildung dieser Komplexe wird über
spezifische Interaktionsdomänen ermöglicht, welche zum
Beispiel an phosphorylierte Aminosäureseitenketten oder
an Proteinabschnitte mit definierten Aminosäuresequen-
zen binden. Es handelt sich hierbei um eine 1:1 Signalüber-
tragung, im Unterschied zur häufig beobachteten Signal-
verstärkung über second messenger (. Abb. 25.8).
! SH2-Domänen und PTB-Domänen binden spezifisch an
Phosphotyrosin-Motive (. Abb. 25.10).

Die Phosphotyrosin-Seitenketten im cytoplasmatischen

Teil eines aktivierten Cytokinrezeptors oder einer akti-
vierten Rezeptortyrosinkinase dienen als Rekrutierungs-
stellen für weitere Signalmoleküle. Proteine mit SH2-Do-
mänen- (src-homology 2 domains) oder PTB-Domänen
(phosphotyrosine binding domains) binden spezifisch an
Phosphotyrosin-Motive. Die spezifische Interaktion zwi-
schen Proteinen ist ein grundlegendes Prinzip der Signal-
transduktion. Die Erkennung von Phosphotyrosin-Motiven
durch SH2-Domänen ist in . Abb. 25.10 verdeutlicht. Ob-
wohl Proteine mit SH2-Domänen prinzipiell Phosphotyro-
sin-Motive erkennen, ist es von grundlegender Bedeutung
für eine gerichtete, spezifische Signaltransduktion, dass nur
bestimmte SH2-Domänen enthaltende Proteine (z.B. Pro-
tein 1 in . Abb. 25.10) mit bestimmten phosphorylierten
Proteinen (Protein 3) interagieren. Aus diesem Grund ent-
halten SH2-Domänen eine konservierte Region, die die
Erkennung von Phosphotyrosinen gewährleistet (rot) so-
wie eine variable Region (blau), die für die spezifische Er-
kennung der C-terminal zum Phosphotyrosin liegenden
Aminosäuren (orange bzw. grün) zuständig ist. Diese duale
Erkennung gewährleistet, dass nur bestimmte Proteine mit
einer festgelegten Aminosäure-Sequenz in phosphory-
lierter Form gebunden werden.
Auf diese Weise können z.B. Transkriptionsfaktoren
wie die STAT-Faktoren (7 Kap. 25.8.3) an den Rezeptor ge-
bunden und dort aktiviert werden. Die STAT-Proteine wer-
den am Rezeptor phosphoryliert, dimerisieren und wan-
dern daraufhin in den Zellkern um Zielgene zu induzieren.
Ähnlich funktioniert die Aktivierung der Smad-Proteine
im Rahmen der TGF-E Signaltransduktion (7 Kap. 25.7.2).
Nur ist hier eine Serin-Phosphorylierung des Rezeptors
der Auslöser. Entsprechend verfügen Smad-Proteine über
MH–Domänen (MAD homology domains), die spezifisch
mit Phosphoserin-Motiven interagieren.
. Abb. 25.10. Prinzip der spezifischen Erkennung von Phospho-
tyrosin-Motiven durch SH2-Domänen enthaltende Proteine.
Dargestellt sind zwei Proteine mit SH2-Domänen, die jeweils nur
spezifische Tyrosin-Motive in der phosphorylierten Form erkennen.
Diese spezifische Erkennung ist die Grundlage für die Spezifität der
Signalweiterleitung
Nicht alle Interaktionsdomänen binden an aktivierte
Strukturen. Häufig existieren auch konstitutive Protein-
Protein-Interaktionen. So ermöglichen SH3-Domänen (src
homology 3 domains) die Interaktion mit Prolin-reichen
Peptidabschnitten anderer Signalmoleküle.
Interaktionen zwischen den Todes-Domänen (DD,
death domains) der Signalmoleküle aus den TNF- und
Fas-Signalkaskaden ermöglichen die Zusammensetzung
großer Signalmolekülkomplexe, die Apoptose induzieren
(7 Kap. 7.1.5). Um eine permanente Interaktion von death-
Domänen enthaltenden Proteinen zu verhindern, werden
sie durch die Bindung an SODD (silencer of death domains)-
Proteine blockiert.
Proteine, die in der Signaltransduktion als Adapter fun-
gieren, besitzen mehrere Interaktionsdomänen und kön-
nen so unterschiedliche Signalproteine zusammenführen.
Protein-Membranlipid-Wechselwirkungen
Eine Rekrutierung von Signalmolekülen an die Zellmem-
bran kann auch durch die Modifizierung von Membran-
lipiden erreicht werden. Bestimmte Lipidkinasen wie die
 772 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.11. MAP-Kinase-Kaskaden. (a) Die drei Familien der
MAP-Kinasen. MEK = mitogen-activated/extracellular signal-activated
kinase kinase; MKK = mitogen-activated protein kinase kinase; ERK =
extracellular signal-regulated kinase; MEKK = mitogen-activated/extra-
cellular signal-activated kinase kinase kinase; MLK = mixed-lineage
kinase; ASK = apoptosis signalling kinase; TAK = TGFE-activated kinase;
JNK = c-Jun N-terminal kinase (b) Aktivierung der MAP-Kinasen am
scaffold-Protein
Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K) phosphorylieren
Phosphatidylinositolphosphate. Proteine mit PH-Domä-
nen (pleckstrin-homology domains) binden spezifisch an
die so erzeugten Phosphatidylinositolphosphate. Dieser Me-
chanismus spielt eine wichtige Rolle bei dem anti-apopto-
tischen PI3K/PKB-Signalweg (7 Kap. 25.7.1).
Lipidanker
Proteine können auch über einen Lipidanker an die
Innenseite der Plasmamembran gebunden sein. Wird
die Myristinsäure (eine gesättigte Fettsäure aus 14 C-Ato-
men) an den N-Terminus eines Proteins gebunden, so
spricht man von Myristoylierung. Bei der Palmitoylie-
rung wird die Palmitinsäure über eine Thioesterbin-
dung an eine Cysteinseitenkette des Proteins gebunden.
Auch Isopren-Derivate können an Cysteine gebunden
werden wie z.B. bei der Farnesylierung von Proteinen
(7 Kap. 9.2.4).
25.4.3 Organisierte Kinasekaskaden
Ein weit verbreiteter Signalweg, der sowohl von G-Protein-
gekoppelten Rezeptoren als auch von Rezeptorkinasen
und Rezeptoren mit assoziierten Kinasen genutzt wird,
ist die so genannte Mitogen-aktivierte Proteinkinase
(MAPK)-Kaskade. Seit der Entdeckung der ersten Kinase
dieser Familie im Jahre 1987 wurden große Fortschritte in
der Entschlüsselung ihrer Aktivierungs- und Wirkungs-
weise gemacht. Heute weiß man, dass es drei Familien von
MAP-Kinasen gibt (. Abb. 25.11a), die aufgrund ihrer
aktivierenden Faktoren in zwei Gruppen eingeteilt werden
können:
4 die hauptsächlich bei wachstumsfördernden Prozes-
sen aktivierten Kinasen ERK1 und ERK2 (extracellular
signal regulated kinases)
4 die durch extrazellulären Stress (wie z.B. UV-Licht,
oxidativen Stress, Hungersignale, osmotische Verände-
rungen) und pro-inflammatorische Cytokine aktivierte
Familie der p38-Kinasen (p38D, β, γ, G; benannt nach
ihrer Molekülmasse von 38 kDa) und die JNK-Familie
(c-Jun N-terminale Kinase) (JNK1, -2 und -3).
Die erwähnten Kinasen können nicht direkt von den Mem-
branrezeptoren aktiviert werden, sondern stehen als aus-
führende (executive) Kinasen am Ende einer wohl organi-
sierten Kinasen-Kaskade aus drei einzelnen Kinasen mit
unterschiedlichen Kinaseaktivitäten:
4 MAP-Kinase Kinase Kinase (MAP3K)
4 MAP-Kinase Kinase (MAP2K)
4 MAP-Kinase (MAPK)
Dieses Modul ist für alle drei MAPK-Familien ähnlich or-
ganisiert (. Abb. 25.11a). Die MAP3K ist immer eine Serin/
Threoninkinase, d.h. sie aktiviert die unter ihr stehende
MAP2K über eine Phosphorylierung spezifischer Seryl-
und/oder Threonylreste. Die MAP2K hingegen ist eine
dual-spezifische Kinase, d.h. sie besitzt sowohl eine Serin/
Threoninkinase- als auch eine Tyrosinkinase-Aktivität,
eine Fähigkeit, die sehr wenige Kinasen aufweisen. Diese
duale Kinaseaktivität ist erforderlich, da die unter ihr
stehende MAPK durch die Phosphorylierung eines, in allen
MAPK konservierten, Tyrosin-X-Threonin Motivs akti-
viert wird (wobei »X« im Fall der ERKs Glutamat, im Fall
der JNKs Prolin und im Fall der p38 Glycin ist). Die MAPK
selbst sind wieder reine Serin-/Threoninkinasen, d.h. sie
aktivieren ihre Substrate über eine Phosphorylierung von
Seryl- und/oder Threonylresten (. Abb. 25.11b).
Es ist leicht einzusehen, dass eine solche Abfolge von
Phosphorylierungsreaktionen eine räumliche Nähe der
drei MAPK zueinander erfordert. In der Tat ist in den letz-
ten Jahren klar geworden, dass es so genannte Gerüst- (scaf-
fold) Proteine gibt, die alle drei Kinasen gleichzeitig binden
können und somit in unmittelbare räumliche Nähe zuein-
ander bringen (. Abb. 25.11b).
25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren
Während die Anzahl der MAPK und der MAP2K re-
lativ gering zu sein scheint, werden immer wieder neue
Kinasen beschrieben, die den MAP3K zuzuordnen sind. Sie
stellen mit Sicherheit die sowohl strukturell als auch funk-
tionell variabelste Gruppe dar.
Zusätzlich erlaubt ein solcher kaskadenartiger Ablauf
einer Aktivierung eine enorme Signalamplifikation. So
besitzt eine normale Säugerzelle ca. 10.000 Moleküle der
MAP3K Raf-1, aber schon 36–80.000 Moleküle der MAP2K
MEK1 und ca. 1.000.000 Moleküle der MAPK ERK1 und
ERK2.
Bevor die MAP3K die Kaskade auslösen kann, muss
sie ihrerseits aktiviert werden. Hierzu sind die kleinen
G-Proteine der Ras- und der Rho-Familie notwendig
(7 Kap. 25.4.4).
Infobox
Ras – ein Protoonkogen
Das kleine G-Protein Ras liegt in 30% aller menschlichen
Krebsformen in einer mutierten, konstitutiv aktiven
Form vor. Im Fall des Prostatakarzinoms liegt die Muta-
tionsrate sogar bei nahezu 100%, bei Colonkarzinomen
bei 50%. Es ist hauptsächlich involviert in Zellwachstum
und verhindert die Einleitung apoptotischer Prozesse.
Hauptaktivatoren von Ras sind Wachstumsfaktoren.
Ras kommt in drei Isoformen vor (H-Ras, N-Ras, K-Ras),
die alle C-terminal über einen Lipidanker membran-
lokalisiert vorliegen (7 Kap. 9.2.4).
25.4.4 G-Proteine
Häufig sind an der Signaltransduktion Guaninnucleotid-
bindende Proteine (G-Proteine) beteiligt.
! G-Proteine dienen als molekulare Schalter bei der Signal-
transduktion.
G-Proteine sind nicht nur für hormonelle, sondern auch
für nichthormonelle Signaltransduktions-Mechanismen
. Abb. 25.12. Der Aktivierungszyklus der G-
Proteine. G-Proteine werden durch den Austausch
von GDP durch GTP aktiviert und wirken als »mole-
kulare Schalter«. (Einzelheiten 7 Text) GEF = guanine
nucleotide-exchange factor; GAP = GTPase aktivieren-
des Protein
773 25
als molekulare Schalter von großer Bedeutung. Wie aus
. Abb. 25.12 hervorgeht, kommen G-Proteine in zwei
unterschiedlichen Zuständen vor, die sich nur durch das
jeweils gebundene Guaninnucleotid unterscheiden. In ak-
tiver Form sind sie mit GTP beladen und imstande, eine
Reihe unterschiedlicher Proteine zu aktivieren (7 u.). Für
die Überführung der aktiven in die inaktive Form des
G-Proteins wird die intrinsische GTPase-Aktivität des
G-Proteins genutzt. Diese wird oft durch einen Hilfsfaktor,
ein sog. GTPase-aktivierendes Protein (GAP) induziert.
Soll das inaktive, GDP-beladene G-Protein wieder in die
aktive Form überführt werden, so ist zunächst die Disso-
ziation des GDP notwendig. Hierfür werden Proteine un-
terschiedlichster Art benötigt, die allgemein als guanine
nucleotide-exchange factors (GEF) bezeichnet werden. Das
Guaninnucleotid-freie G-Protein hat eine hohe Affinität
für GTP und nimmt dieses rasch auf, womit es wieder in
den aktiven Zustand überführt wird.
Bis heute sind mehr als 50 unterschiedliche Isofor-
men von G-Proteinen isoliert und charakterisiert wor-
den. Sie lassen sich in drei Untergruppen einteilen (. Ta-
belle 25.3):
4 heterotrimere G-Proteine, die durch G-Protein-gekop-
pelte Rezeptoren (7 Kap. 25.6) aktiviert werden
4 kleine G-Proteine, die als Schalter bei der Regulation
von Wachstum und Differenzierung, beim Vesikeltrans-
port und bei vielen anderen Vorgängen benötigt wer-
den sowie
4 Translationsfaktoren mit ubiquitärem Vorkommen
25.4.5 Second messenger
Einige Signalwege führen zur Synthese oder Freisetzung
eines niedermolekularen zweiten Botenstoffs (second mes-
senger), der sich im Cytoplasma verteilt. So aktivieren be-
stimmte G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) über
trimere G-Proteine die membranständige Adenylatcyclase
(. Abb. 25.13a). Diese synthetisiert zyklisches AMP
(cAMP) aus ATP. Ein aktiviertes Adenylatcyclase-Enzym
 774 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
. Tabelle 25.3. Die Großfamilie der G-Proteine
Familie Bezeichnung
heterotrimere G-Proteine Gs
Golf
Gi
Go
Gt
Gg
Gq
G13
25 kleine G-Proteine Ras-Proteine
Rho/Rac/Cdc42-Proteine
Rab-Proteine
Sar1/Arf-Proteine
Ran-Proteine
Translationsfaktoren eIF-2
eEF-Tu; eEF-1; eEF-2
kann viele tausend cAMP-Moleküle synthetisieren. Auf
diese Weise trägt der second messenger zur effizienten Ampli-
fikation des Signals bei und verteilt die Information von
der Plasmamembran ausgehend über die gesamte Zelle
(. Abb. 25.8). cAMP aktiviert die Proteinkinase-A (PKA)
und nimmt damit unter anderem Einfluss auf den Glyco-
genmetabolismus (7 Kap. 11.2). Über diese amplifizierende
Signalkaskade führt die Aktivierung von wenigen Mem-
branrezeptoren zur Freisetzung von Glucose-Molekülen
wie sie z.B. für die Aufrechterhaltung des Blutzuckerspie-
gels durch die Leber notwendig ist. Durch das Enzym Phos-
phodiesterase wird 3c,5c-cAMP in 5c-AMP umgewandelt
und damit das Signal abgeschaltet.
Der second messenger zyklisches GMP (cGMP) ent-
steht analog zu cAMP durch die Umsetzung von GTP
durch Guanylatcyclasen. Die Stimulation der löslichen
Guanylatcyclasen erfolgt über Stickstoffmonoxid (NO)
(7 Kap. 25.9.1).
Weitere second messenger sind Inositoltrisphosphat
(IP3), Diacylglycerin (DAG) und Calcium (Ca2+). Das
Enzym Phospholipase C (PLC), von dem mehrere Iso-
formen existieren, spaltet Phosphatidylinositol-4,5-bis-
phosphat (PIP2) in IP3 und DAG. . Abb. 25.13b zeigt die
Aktivierung verschiedener PLC-Isoformen durch Rezep-
tor-Tyrosinkinasen (PLCγ) oder G-Protein-gekoppelte
Rezeptoren (PLCβ). Über IP3 wird anschließend Ca2+ aus
dem endoplasmatischen Retikulum freigesetzt. DAG und
Ca2+ aktivieren unter anderem die Proteinkinase C (PKC)
(. Abb. 25.23c und . Abb. 25.24) und induzieren so die
zelluläre Antwort.
! Eine Vielzahl zellulärer Prozesse wird über die cytosoli-
sche Calciumionen-Konzentration gesteuert.
Funktion
Aktivierung der Adenylatcyclase
Aktivierung der Adenylatcyclase
Hemmung der Adenylatcyclase
Aktivierung der PLC-E
Aktivierung der cGMP-Phosphodiesterase
unbekannt
Aktivierung der PLC-E
Aktivierung der Rho-Kinase
Wachstum, Differenzierung, Genexpression
Organisation des Zytoskeletts, Genexpression
Vesikulärer Transport (vesicle trafficking)
Vesikel-Knospung (vesicle budding)
nukleozytoplasmatischer Transport, Organisation von Mikrotubuli
Initiation der Translation
Elongation
Jede Erhöhung der cytosolischen Calciumkonzentration
führt zu markanten Änderungen des Zellstoffwechsels. So
kommt es u.a. zu einer Stimulierung des Glycogenabbaus
in Leber und Muskulatur, zu einer Stimulierung sekreto-
rischer Prozesse (7 Kap. 6.2), sowie zur Verstärkung einer
Reihe von cAMP-vermittelten Effekten.
Die cytosolische Calciumkonzentration wird durch
verschiedene Transportsysteme sehr genau reguliert (. Abb.
25.14).
4 Mechanismen für die schnelle Bereitstellung von Ca2+
im Cytoplasma:
5 Calciumeinstrom aus intrazellulären Calcium-
speichern durch die IP3-aktivierten Calciumka-
näle (①) des endoplasmatischen Retikulums. In
vielen Geweben, besonders in der Skelettmuskula-
tur, finden sich zusätzlich als Liganden-aktivierte
Calciumkanäle des sarkoplasmatischen Retikulums
sog. Ryanodinrezeptoren. Sie werden durch Span-
nungs- oder Liganden-regulierte Calciumkanäle
in der Plasmamembran aktiviert. Möglicherweise
ist das aus NAD+ gebildete cyclo-ADP-Ribosemole-
kül der natürliche Ligand dieses Rezeptors
5 Calciumeinstrom aus dem extrazellulären Raum
durch spannungsregulierte Calciumkanäle (②). Die
Öffnung derartiger Kanäle, die in einer Reihe unter-
schiedlicher Isoformen vorkommen, erfolgt nach De-
polarisierung von Zellen. Interessanterweise kann die
Öffnungswahrscheinlichkeit des spannungsregulier-
ten Calciumkanals, z.B. im Herzmuskel dadurch ver-
größert werden, dass das Kanalprotein durch die
cAMP-abhängige Proteinkinase A phosphoryliert
wird. Dies ist eine der Möglichkeiten, die intrazelluläre
Calciumkonzentration durch Hormone zu regulieren
25.4 · Prinzipien der Signaltransduktion von Membranrezeptoren
. Abb. 25.13. Synthese der second messenger Moleküle cAMP
und IP3. (a) Generierung von cAMP aus ATP nach Stimulation der
Adenylatcyclase durch trimere G-Proteine. (b) Entstehung der second
messenger Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3) und Diacylglycerin (DAG)
durch Phospholipase C-vermittelte Spaltung von Phosphatidylinosi-
775 25
tol-4,5-bisphosphat (PIP2). Während G-Protein-gekoppelte Rezeptoren
(GPCR) über trimere G-Proteine die Phospholipase CE (PLCE) aktivie-
ren, können Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTK) Phospholipase CJ (PLCJ)
rekrutieren und aktivieren. Die Bildung von DAG und IP3 führt zur
Aktivierung der Proteinkinase C bzw. zur Ca2+-Freisetzung
 776 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.14. Regulation des zellulären Calciumstoffwechsels.
AC = Adenylatcyclase; CaM = Calmodulin; ER = endoplasmatisches
5 Calciumeinstrom aus dem extrazellulären Raum
durch Liganden-regulierte Calciumkanäle (③).
Derartige Kanäle öffnen sich dann, wenn entspre-
chende Liganden, meist Hormone, gebunden wer-
den. Hierzu gehören Vasopressin, Leukotriene oder
extrazelluläres ATP (Purinrezeptoren)
4 Mechanismen für den Export von Ca2+ aus dem Cyto-
plasma:
5 eine in der Plasmamembran aller Zellen nachweis-
bare Ca2+-ATPase (④)
5 ein Ca2+/Na+-Antiport (⑤), ein System welches den
mit Hilfe der Na+/K+-ATPase erzeugten Natrium-
Gradienten über der Zellmembran sekundär zum
aktiven Calciumexport benutzt
5 eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte
Ca2+-ATPase (⑥), die die Sequestrierung von Cal-
cium in diesen Organellen ermöglicht sowie
5 ein nur bei Calciumüberladung von Zellen be-
nutztes System, das die Akkumulierung von Cal-
cium als Calciumphosphat in den Mitochondrien
ermöglicht (in . Abb. 25.14 nicht dargestellt)
Die genannten Exportsysteme sind dafür verantwortlich,
dass im Ruhezustand im Cytoplasma eine niedrige Cal-
cium-Konzentration aufrechterhalten wird.
! Calcium-bindende Proteine vermitteln die Calciumwir-
kung auf zelluläre Systeme.
Retikulum; G = trimeres G-Protein; L = Ligand; MLCK = myosin light
chain kinase; PKA = Proteinkinase A; PLC = Phospholipase C
Die cytosolische Ca2+-Konzentration tierischer Zellen
liegt im Ruhezustand bei etwa 10–7 mol/l und kann nach
voller hormoneller Aktivierung auf etwa 10–5 mol/l an-
steigen. Jede Wechselwirkung enzymatischer Systeme
mit intrazellulärem Ca2+ kann aufgrund dieser Tatsache
nur dann erfolgen, wenn sie über hochaffine Bindungs-
stellen für Calcium verfügen. Darüber hinaus müssen
solche Bindungsstellen sehr spezifisch für Calcium sein,
da intrazellulär andere zweiwertige Kationen, v.a. Magne-
sium, in einer Konzentration von etwa 10–3 mol/l vorkom-
men.
Calcium wirkt meist nicht direkt, sondern über Cal-
cium-bindende Proteine auf die enzymatischen Systeme
ein. Das Vorkommen calciumbindender Proteine war
schon aus Untersuchungen über die Skelettmuskel-Kon-
traktion bekannt. Hier ist Troponin das Calcium-bin-
dende Protein (7 Kap. 30.2.2). Weiterhin wurde als Cal-
cium-bindendes Protein das Calmodulin nachgewiesen,
ein aus einer einzelnen Peptidkette aus 148 Aminosäuren
bestehendes Protein, das große Ähnlichkeit mit Troponin
C hat (7 Kap. 30.3.2). Nach Bindung von Calcium ändert
Calmodulin seine Konformation und kann dann an wei-
tere Effektorproteine wie z.B. Calmodulin-abhängige
Kinasen oder Phosphatasen binden. So spielt beispiels-
weise die Calcium-regulierte Phosphatase Calcineurin
bei der T-Zell-Rezeptor Signaltransduktion eine wichtige
Rolle.
25.5 · Einteilung der Cytokine
777 25

. Tabelle 25.4. Beispiele Calmodulin-bindende Proteine

Calmodulin bindendes Protein
CaM-Kinase III
CaM-Kinase II
Myosin light-chain kinase (MLCK)
Phosphorylasekinase
Anthrax Adenylatcyclase
Ca2+-aktivierter K+-Kanal
Effekt der Calmodulin-Bindung Funktion des Proteins Vgl. Kapitel
? Rolle bei der Proteinbiosynthese 9.1.4
Freigabe der autoinhibierenden pleiotrope Funktionen; wichtig für 31.2
Domäne (AID) die synaptische Plastizität
Freigabe der AID beeinflusst den Kontraktionszyklus 30.3.2
der glatten Muskulatur
? Bedeutung für die Glycogenolyse 11.5
Konformationsänderung im Ödemischer Faktor beim Milzbrand 25.4.5
aktiven Zentrum
Dimerisierung von Regulation der neuronalen Erregung 31.2.2
Kanal-Untereinheiten

Infobox
Calmodulin
Viele der zellulären Funktionen von Calcium werden
durch mit Ca2+ beladenem Calmodulin vermittelt. Etwa
1% des gesamten zellulären Proteins tierischer Zellen
besteht aus Calmodulin, welches nicht nur im Cytosol
vorkommt, sondern auch an verschiedene zelluläre Struk-
turen wie Mitosespindeln, Aktinfilamente und Interme-
diärfilamente assoziiert ist.
Calmodulin verfügt über vier hochaffine Bindungs-
stellen für Calcium. Diese zeichnen sich dadurch aus,
dass das Calcium über eine Reihe von Carboxylaten sowie
Carbonyl-Gruppen der Peptidbindung fixiert wird
(7 Kap. 3.1.2). Das mit Ca2+ beladene Calmodulin kann
unterschiedliche Konformationen annehmen und auf
diese Weise mit vielen Proteinen interagieren. In 7 Tabel-
le 25.4 sind einige durch Calmodulin regulierte Proteine
aufgeführt.
Pathobiochemie:
Aktivierung der Anthrax Adenylatcyclase durch Calmodulin:
Das Milzbrand (Anthrax) auslösende Bakterium Bacillus
anthracis, das selbst kein Calmodulin exprimiert, nutzt
Calmodulin, um auf die Zellen eines infizierten Organismus
zu wirken. Hierbei wird die Aktivität eines der bakteriellen
Toxine, einer löslichen Adenylatcyclase, durch die Bindung
von Calmodulin bis zu 1000-fach verstärkt. Als Konsequenz
werden 20% bis 50% des zellulären ATPs zu cAMP umge-
setzt, die Membranpermeabilität verändert sich und es
kommt zu einem Flüssigkeitsverlust im infizierten Gewebe.
Die Adenylatcyclase ist somit die Ödem-auslösende Kom-
ponente von Anthrax. Die Nutzung des Calmodulins ist für
das Bakterium sinnvoll, da es ubiquitär exprimiert wird und
die Aminosäuresequenz des Calmodulins in allen Verte-
braten hoch konserviert ist.

In Kürze
Aktivierung von Membranrezeptoren durch ihre 4 Rekrutierung von Effektorproteinen an die Plasma-
Liganden können folgende Mechanismen der Signal- membran und deren Aktivierung
transduktion auslösen: 4 Überführung von G-Proteinen in die aktive, mit GTP
4 Konformationsänderung der Rezeptoren beladene Form
4 Aktivierung von Kinasen 4 Bildung von second messengern

25.5 Einteilung der Cytokine Cytokine

Cytokine entfalten im Unterschied zu den Hormonen, die
endokrin über den Blutstrom weit entfernte Zielgewebe/
-zellen erreichen, ihre Wirkung über sehr viel kürzere
Distanzen (wenige Micrometer) entweder parakrin oder
autokrin.
Merkmale, die auf Cytokine zutreffen, sind im Folgen-
den zusammengestellt.
4 sind Polypeptide mit Molekulargewichten von ca. 15–
25 kDa
4 werden nach auslösenden Reizen/Noxen, schnell syn-
thetisiert und sezerniert
4 werden selten als präformierte Moleküle gespeichert
4 werden von verschiedenen Zelltypen produziert
4 wirken im pico- bis nanomolaren Bereich
4 wirken auf unterschiedliche Zelltypen (Pleiotropis-
mus), aber auch autokrin
 778 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
4 wirken über spezifische Rezeptoren auf der Oberfläche
von Zielzellen
4 unterschiedlicher Art können auf ihren Zielzellen Glei-
ches bewirken (Redundanz)
4 beeinflussen die Synthese anderer Cytokine
4 beeinflussen die Wirkung anderer Cytokine additiv,
synergistisch oder antagonistisch
4 spielen eine wichtige Rolle für die Regulation der Gen-
expression in den Zielzellen
4 können Differenzierung, Proliferation, Migration oder
Apoptose der Zielzellen induzieren
25 Eine Dysregulation der Cytokin-Signaltransduktion kann
zu schwerwiegenden akuten und chronischen Entzün-
dungen, Autoimmunerkrankungen und Neoplasien füh-
ren. Daher ist das Verständnis der molekularen Mechanis-
men der Cytokin-Signaltransduktionskaskaden für thera-
peutische Ansätze von großer Bedeutung.
Infobox
Lösliche Rezeptoren als Cytokin-Inhibitoren
Im Blutplasma, häufig auch im Urin, kann man lösliche
Formen von Cytokinrezeptoren nachweisen. Die lösli-
chen Rezeptoren bestehen aus der Extrazellulärregion
des Rezeptors, die Transmembrandomäne und der cyto-
plasmatische Teil fehlen. Lösliche Rezeptoren entstehen
durch Translation einer alternativ gespleißten mRNA
oder durch limitierte proteolytische Spaltung membran-
ständiger Rezeptoren (shedding). Sie binden ihren Li-
ganden mit vergleichbarer Affinität und Spezifität wie
der membranständige Rezeptor. Cytokine, die an den
löslichen Rezeptor gebunden sind, können nicht mehr
an den membranständigen Rezeptor binden und sind
daher unwirksam. Lösliche Rezeptoren wirken deswe-
gen mit wenigen Ausnahmen als Cytokin-Inhibitoren.
Man nimmt an, dass sie bei der Modulation von Cyto-
kinsignalen eine wichtige Rolle spielen (7 Kap. 25.10.1).
Chronische Entzündungen werden durch eine
Überproduktion von pro-inflammatorischen Cytokinen
wie Interleukin-1 (IL-1), Tumor-Nekrose-Faktor (TNF)
und Interleukin-6 (IL-6) aufrechterhalten. Daher ist die
gezielte Hemmun pro-inflammatorischer Cytokine ein
vielversprechender Therapieansatz. Der lösliche TNF-
Rezeptor wird in dimerer Form in großen Mengen
biotechnologisch produziert und als TNF-Inhibitor mit
Erfolg zur Behandlung von Morbus Crohn sowie rheu-
matischer Erkrankungen eingesetzt (Etanercept/En-
brel®). Weitere Cytokin-Inhibitoren auf der Basis lösli-
cher Rezeptoren befinden sich im Entwicklungs-
stadium.
Cytokine lassen sich nach verschiedenen Gesichtspunkten
klassifizieren: Im Hinblick auf ihre Funktionen kann eine
Einteilung nach den biologischen Antworten erfolgen.
Weiterhin sind Einteilungen nach strukturellen Gesichts-
punkten möglich, z.B. nach der dreidimensionalen Struktur
der Cytokine oder nach gemeinsam genutzten Rezeptor-
komponenten.
In . Tabelle 25.1 findet sich ein Überblick über die ver-
schiedenen Cytokine, die sich nach ihren biologischen
Funktionen und der Natur ihrer Rezeptoren in Wachstums-
faktoren, Interleukine, Interferone und Chemokine ein-
teilen lassen.
25.5.1 Wachstumsfaktoren
! Wachstumsfaktoren regulieren die Entwicklung von
Vorläuferzellen zu differenzierten Zelltypen und stimu-
lieren die Zellproliferation.
Innerhalb der Wachstumsfaktoren ist eine Einteilung nach
funktionellen Eigenschaften schwierig. Die meisten Wachs-
tumsfaktoren signalisieren über Rezeptoren mit intrin-
sischer Kinaseaktivität (Rezeptor-Tyrosinkinasen oder
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen). Ein gemeinsamer, zen-
traler Mechanismus in den Signalwegen aller Wachstums-
faktoren besteht in der Aktivierung der Ras/Raf/MAPK-
Kaskade (7 Kap. 25.4.3).
25.5.2 Interleukine
! Interleukine besitzen vielfältige Aufgaben in der Regu-
lation der Immunabwehr, der Entzündungsreaktion,
der Hämatopoese und der Apoptose.
Bisher sind 33 Interleukine bekannt. Andere Cytokine wie
z.B. Tumor-Nekrose-Faktor (TNF), Leptin, Erythropoetin
(EPO), Thrombopoetin (TPO) werden auch zur Gruppe
der Interleukine gerechnet. Die meisten Interleukine signa-
lisieren über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen und nut-
zen als gemeinsamen zentralen Signalweg die Janus Kinase/
signal transducer and activator of transcription (JAK/STAT)-
Kaskade (7 Kap. 25.8.3). TNF und IL-1 nehmen innerhalb
der Interleukin-Familie im Hinblick auf ihre Rezeptoren
und Effektorproteine (NF-NB) eine Sonderstellung ein
(7 Kap. 25.8.1, 25.8.2).
25.5.3 Interferone
! Die mit den Interleukinen nahe verwandten Interferone
spielen eine wesentliche Rolle bei Immunabwehr (be-
sonders nach Virusinfektionen) und Apoptose, sie wir-
ken stark wachstumshemmend.
Von den Interleukinen werden die sehr nahe verwandten
Interferone abgegrenzt. Auch die Interferone signalisieren
25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren
über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen und nutzen die
JAK/STAT-Signalkaskade (7 Kap. 25.8.4).
Die Interferone selbst werden in zwei Klassen eingeteilt.
Alpha-Interferone (IFN-D), E-Interferon (IFN-E), H-Inter-
feron (IFN-H), N-Interferon (IFN-N) und Z-Interferone
(IFN-Z) gehören zu den Typ-1-Interferonen. Sie signali-
sieren über die gleichen Rezeptorheterodimere. Von den
D-Interferonen sind derzeit 13, von den ω-Interferonen zwei
Subtypen und von den E-, H-, N-Interferonen nur jeweils
eine Form bekannt. IFN-J ist das einzige derzeit bekannte
Typ-2-Interferon. Es bindet als Dimer an IFN-J-spezifische
Rezeptor-Heterodimere. Die Cytokine der Interleukin-10-
Familie gehören trotz ihrer anders lautenden Bezeichnung
strukturell gesehen zu den Typ-2-Interferonen.
25.5.4 Chemokine
! Chemokinrezeptoren gehören zur Klasse der G-Protein-
gekoppelten Rezeptoren und vermitteln Chemotaxis.
Der Name Chemokine (chemotactic cytokine) stellt die
Funktion dieser Cytokine als Migration-auslösende Fak-
toren heraus. Chemokine sind für die Immunantwort von
Bedeutung. Im Unterschied zu den Wachstumsfaktoren,
Interleukinen und Interferonen signalisieren die Chemo-
kine über G-Protein-gekoppelte Rezeptoren. Die Liganden-
bindung an den Rezeptor führt zur Aktivierung trimerer
G-Proteine, die mit den cytoplasmatischen Schleifen der
Rezeptoren assoziiert sind.
Chemokine werden in zwei Haupt-Klassen unterteilt:
CC- und CXC-Chemokine. CXC-Chemokine enthalten
zwischen zwei konservierten, N-terminal lokalisierten
Cysteinen (C) eine weitere Aminosäure, während bei CC-
Chemokinen diese Cysteine direkt benachbart sind. Ent-
sprechend ihrer Liganden werden auch die Chemokin-
rezeptoren in CXC- und CC-Rezeptoren unterteilt. Einzelne
Chemokine sind in der Lage, verschiedene Rezeptoren
der gleichen Klasse zu binden. Interleukin-8 ist trotz seines
Namens bei den CXC-Chemokinen einzuordnen.
In Kürze
Cytokine werden nach ihrer biologischen Funktion
eingeteilt in:
4 Wachstumsfaktoren
4 Interleukine
4 Interferone
4 Chemokine
Die meisten Wachstumsfaktoren signalisieren über
Rezeptor-Tyrosinkinasen. Interleukine und Interferone
signalisieren über Rezeptoren mit assoziierten Tyrosin-
kinasen. Chemokine benutzen G-Protein gekoppelte
Rezeptoren.
779 25
25.6 Signaltransduktion G-Protein-
gekoppelter Rezeptoren
Mit etwa 950 identifizierten Genen stellen die G-Protein-
gekoppelten Rezeptoren (G-protein-coupled receptors;
GPCR) die größte Rezeptorklasse dar. Die Rezeptoren die-
ser Familie weisen typischerweise sieben Transmembran-
domänen auf. Sie vermitteln die Effekte vieler unterschied-
licher Liganden (von Aminosäurederivaten wie Adrenalin
bis zu den Chemokinen wie Interleukin-8). Die Struktur
von GPCRs ist in . Abb. 25.15 am Beispiel des α1B-adren-
ergen Rezeptors verdeutlicht. Während die extrazellulären
Schleifen des Rezeptors für die Ligandenbindung verant-
wortlich sind, vermitteln die intrazellulären Schleifen die
Rekrutierung der trimeren G-Proteine. . Tabelle 25.5 zeigt
die Einteilung der trimeren G-Proteine.
Infobox
Medizin-Nobelpreis 2004
Für ihre Arbeiten zur Funktionsweise des Geruchssinns
erhielten Linda Buck und Richard Axel im Jahr 2004 den
Medizin-Nobelpreis. Die Forscher zeigten, dass etwa
zwei Prozent der menschlichen Gene für Geruchsrezep-
toren codieren. Bei diesen Rezeptoren handelt es sich
um GPCRs, die durch Aktivierung der Adenylatcyclase
zur Bildung von zyklischem AMP führen und über die-
ses Ionenkanäle aktivieren (7 Kap. 25.6.2). Beim Men-
schen scheinen viele der etwa 600 Geruchsrezeptoren
degeneriert zu sein. Über die etwa 350 funktionellen
Rezeptoren können jedoch rund 10.000 verschiedene
Gerüche wahrgenommen werden.
25.6.1 G-Protein-gekoppelte Rezeptoren
signalisieren über heterotrimere
G-Proteine
In . Abb. 25.16 ist das Prinzip der Signaltransduktion von
G-Protein-gekoppelten Rezeptoren dargestellt. Ihnen allen
ist gemeinsam, dass sie über heterotrimere G-Proteine si-
gnalisieren, deren Aktivierungs-/Inaktivierungszyklus sich
in folgende Schritte einteilen lässt:
4 Das inaktive, an den Rezeptor gebundene hetero-
trimere G-Protein besteht aus den drei Untereinhei-
ten D, E und J, wobei die D-Untereinheit mit GDP
beladen ist
4 Der durch den entsprechenden Liganden aktivierte
Rezeptor dient als GEF (guanine nucleotide exchange
factor) und bewirkt den Austausch des an die D-Unter-
einheit gebundenen GDP durch GTP
4 Das aktivierte G-Protein zerfällt in seine D- und EJ-
Untereinheiten und löst sich vom Rezeptor
4 Die mit GTP beladene D-Untereinheit oder die EJ-
Untereinheiten des G-Proteins assoziieren mit den für
 780 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25

. Abb. 25.15. Aufbau von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren. aus 350–800 Aminosäuren. Der N-Terminus ist extrazellulär, der C-
Der für heptahelicale Membranrezeptoren typische Aufbau mit sieben terminale Bereich intrazellulär lokalisiert. Der extrazelluläre Bereich
Transmembrandomänen ist am Beispiel des D1B-adrenergen Rezep- des Rezeptors enthält Kohlenhydrat-Ketten (durch Rauten dargestellt)
tors dargestellt. G-Protein-gekoppelte Rezeptoren bestehen i. Allg.

. Tabelle 25.5. Einteilung der trimeren G-Proteine

G-Protein Familie Unter- Liganden, die zur Aktivierung Effekt auf Schlüsselenzyme weitere Effekte
gruppen des G-Proteins führen (Beispiele) (Auswahl) (Auswahl)
(Auswahl)
Gs-Familie Gs Katecholamine, Histamin, Glucagon, LSH, Aktivierung der Adenylatcyclase cAMP n
FSH, TSH, Vasopressin, Prostaglandin E2
Golf Geruchsstoffe Aktivierung der Adenylatcyclase cAMP n
Gi-Familie Gi Angiotensin, Somatostatin, Glutamat, Opiate, Hemmung der Adenylatcyclase cAMPp
Chemokine, Histamin, Katecholamine
Gt Photonen, Opsin, Rhodopsin Aktivierung der cGMP-Phospho- cGMP p
diesterase
Ggust Geschmacksstoffe Aktivierung der cGMP-Phospho- cGMP p
diesterase
Gq-Familie Gq Bradykinin, Bombesin, Angiotensin, Aktivierung der PLCβ IP3n, DAG n
Katecholamine Ca2+-Influx
G12/13-Familie G13 Bradykinin, Bombesin, TSH Aktivierung der Rho-Kinase Wirkung auf das
Cytoskelett

die biologische Antwort verantwortlichen Effektorpro-
teinen. Diese werden dadurch aktiviert oder inaktiviert
4 Eine intrinsische GTPase-Aktivität der D-Untereinheit
sorgt für die Spaltung des gebundenen GTP zu GDP
und anorganischem Phosphat (Pi). Diese Hydrolyse
wird durch GTPase-aktivierende Proteine (GAP) be-
schleunigt. Damit ist die D-Untereinheit inaktiviert und
das Signal abgeschaltet
4 Die GDP-beladene D-Untereinheit assoziiert mit den
EJ-Untereinheiten und dem Rezeptor, womit der Aus-
gangszustand wieder hergestellt ist
25.6.2 Rezeptoren, die an das Adenylat-
cyclase-System gekoppelt sind
! Das Adenylatcyclase-System besteht aus Rezeptoren,
heterotrimeren G-Proteinen und Adenylatcyclasen.
Eine große Zahl von Signalstoffen bedient sich des Adenyl-
atcyclase-Systems zur Signaltransduktion. Wichtige Bei-
spiele sind neben Geruchsstoffen die Botenstoffe Glucagon,
Adrenalin und Serotonin. Der extrazelluläre Ligand wird
auch als erster Botenstoff oder first messenger bezeichnet. Er
25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren
. Abb. 25.16. Prinzip der Signaltransduktion von trimeren
G-Proteinen. Nach der Aktivierung des trimeren G-Proteins zerfällt
. Abb. 25.17. Das Adenylatcyclase-System. Die katalytische
Domäne der Adenylatcyclase kann durch stimulierende GsD-Unter-
einheiten oder inhibierende GiD-Untereinheiten reguliert werden.
Auf die Darstellung der Regulation der Adenylatcyclasen durch die
bindet an seinen spezifischen GPCR und aktiviert über ein
heterotrimeres G-Protein die auf der Innenseite der Zell-
membran lokalisierte katalytische Domäne der Adenylat-
cyclase (7 Infobox). Diese katalysiert die Reaktion:
ATP o 3c,5c-cyclo-AMP + Pyrophosphat
Der amerikanische Biochemiker Earl Sutherland entdeckte
als Erster, dass das Nucleotid 3c,5c-cyclo-AMP (cAMP,
. Abb. 25.13a, 7 Kap. 5.1.2) als intrazellulärer Vermittler der
Wirkung vieler Hormone eine einzigartige Rolle spielt. Aus
diesem Grund wird für diese Verbindung auch die Bezeich-
nung zweiter Botenstoff (second messenger) verwendet.
In . Abb. 25.17 ist das in die Plasmamembran integrier-
te Adenylatcyclase-System dargestellt. Zu diesem System
gehören die Rezeptoren für Adenylatcyclase stimulierende
781 25
dieses in eine D- und eine EJ-Untereinheit, die dann auf verschiedene
Effektorproteine wirken. GPCR = G-Protein-gekoppelter Rezeptor
EJ-Untereinheiten wurde verzichtet. Rs = stimulierender Rezeptor;
Ri = inhibierender Rezeptor; Gs = stimulierendes G-Protein; Gi = inhi-
bierendes G-Protein; PPi = Pyrophosphat
bzw. hemmende Hormone oder Substanzen (Rs bzw. Ri),
über die die zelluläre cAMP Konzentration gesteigert oder
gesenkt werden kann. Durch die Bindung des Liganden an
den Rezeptor wird das entsprechende heterotrimere G-Pro-
tein aktiviert. Während die stimulatorischen G-Proteine
(Gs-Proteine) über ihre α-Untereinheit Gsα die Adenylat-
cyclase aktivieren können, führen die inhibitorischen G-
Proteine (Gi-Proteine) zu einer Hemmung der Adenylat-
cyclase durch die Giα-Untereinheit.
Die Rolle der βγ-Untereinheiten trimerer G-Pro-
teine:
In den vergangenen Jahren wurde gezeigt, dass die
EJ-Untereinheiten der trimeren G-Proteine ebenfalls eine
Rolle bei der Regulation der GPCR-vermittelten Signale
spielen (z.B. Chemotaxis/Migration). Folgende Funktionen
können durch die EJ-Untereinheiten ausgeübt werden:
 782 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
4 Die EJ-Untereinheiten sind von Bedeutung für die
Interaktion des trimeren G-Proteins mit dem GPCR
4 Sie inhibieren die spontane Dissoziation des an die
D-Untereinheit gebundenen GDPs und erfüllen so die
Funktion eines guanine nucleotide dissociation inhibitors
(GDI)
4 Sie aktivieren bzw. hemmen verschiedene Isoformen
der Adenylatcyclase
Infobox
Adenylatcyclasen
Alle Mitglieder der Adenylatcyclase-Familie zeichnen sich
25 durch einen ähnlichen Aufbau aus insgesamt 12 Trans-
membrandomänen aus. Zwischen der 6. und 7. Trans-
membran-Helix sowie am C-terminalen Ende existiert
jeweils ein großer cytoplasmatischer Bereich (. Abb.
25.18). Beide Regionen besitzen eine Tertiärstruktur und
bilden zusammen die katalytische Domäne der Adenylat-
cyclase, die in ihrer Struktur der DNA-Polymerase ähnelt.
Dies ist verständlich, da beide Enzyme eine ähnliche
Reaktion katalysieren: Während die Adenylatcyclase die
Bildung einer intramolekularen 3c,5c-Diester-Bindung
vermittelt, katalysiert die DNA-Polymerase die Bildung
einer intermolekularen 3c,5c-Diester-Bindung.
Bis heute sind neun Isoformen der membrangebun-
denen Adenylatcyclase nachgewiesen worden, die eine
unterschiedliche Gewebsverteilung aufweisen. So werden
Adenylatcyclasen des Typs IV und IX in vielen Geweben
exprimiert und solche des Typs I, II und VIII kommen vor-
wiegend in neuronalem Gewebe vor. Adenylatcyclasen
des Typs III finden sich in olfaktorischem Gewebe und die
des Typs V und VI werden verstärkt in Leber, Lunge, Nieren
und Herzmuskel exprimiert. Unterschiede zwischen den
einzelnen Subtypen liegen in ihrer Aktivierung und Inakti-
vierung durch die verschiedenen D- und EJ-Untereinhei-
! cAMP aktiviert die Proteinkinase A und löst damit spe-
zifische Phosphorylierungskaskaden aus.
cAMP übt mehrere intrazelluläre Funktionen aus; es akti-
viert:
4 die Proteinkinase A (PKA)
4 einige cyclic nucleotide gated (CNG) Kationenkanäle
4 bestimmte guanine nucleotide exchange factors (GEF),
die kleine G-Proteine aktivieren
Eine Hauptfunktion von cAMP ist die Aktivierung der Pro-
teinkinase A. . Abb. 25.19 stellt den Aufbau der PKA dar.
Es handelt sich um ein tetrameres Enzym, welches aus zwei
regulatorischen (regulatory) R-Untereinheiten sowie
zwei katalytischen (catalytic) C-Untereinheiten besteht.
In Abwesenheit von cAMP werden durch die R-Unterein-
heiten die Substratbindungsstellen der C-Untereinheiten
blockiert. Die Bindung von jeweils zwei cAMP-Molekülen
4 Sie aktivieren weitere Effektorenzyme wie z.B. die
Phospholipase CE(PLCE; 7 Kap. 25.6.3) oder die Phos-
phatidylinositid-3 Kinase-J (PI3K-J)
4 Sie steuern die Aktivität von Ionenkanälen
4 Sie regulieren die an der Signalabschaltung beteiligten
G-Protein-gekoppelten Rezeptorkinasen (GRK)
ten der trimeren G-Proteine, aber auch z.B. in der unter-
schiedlichen Regulation durch second messenger-aktivierte
Kinasen wie PKC und PKA.
Pathobiochemie:
Wegen der Vielzahl an G-Protein-gekoppelten Rezeptoren
und ihrer großen Bedeutung bei nahezu allen physiologi-
schen Prozessen wurde diese Rezeptorklasse zum wichtig-
sten Ziel für therapeutische Interventionen. Über die Hälfte
der verschreibungspflichtigen Medikamente beeinflussen
GPCR-vermittelte Signale.
Es ist von besonderem medizinischen Interesse, dass die
Effekte einiger Bakterientoxine offensichtlich über Wechsel-
wirkungen mit den G-Proteinen vermittelt werden. So führt
beispielsweise das Choleratoxin des Cholera-Erregers Vibrio
cholerae zu einer ADP-Ribosylierung (7 Kap. 23.3.4) der GsD
Untereinheit, wodurch diese irreversibel aktiviert wird und
das Adenylatcyclase-System in einen permanent aktiven
Zustand überführt (über die Bedeutung dieses Effekts für
die intestinale Symptomatik bei der Cholera 7 Kap. 32.2.4).
Das Toxin des Keuchhusten-Erregers Bordetella pertussis
ADP-ribosyliert dagegen die GiD-Untereinheit und hält diese
in einer inaktiven Form. Wie beim Choleratoxin wird also die
Adenylatcyclase in einen permanent aktiven Zustand über-
führt, allerdings über einen anderen Mechanismus.
an jede R-Untereinheit führt zu einer Konformations-
änderung, die eine Dissoziation der beiden katalytischen
C-Untereinheiten auslöst. Dadurch werden die Substrat-
bindungsstellen der PKA freigelegt und diese somit in die
Lage versetzt, ihre Substrate an Serylresten zu phosphory-
lieren.
Erhöhte zelluläre cAMP-Spiegel aktivieren bzw. inak-
tivieren nicht nur Stoffwechselenzyme, sondern lösen auch
die Transkription spezifischer Gene aus. Derartige cAMP-
abhängige Gene enthalten in ihrer Promotorregion eine
spezifische Sequenz,
5c-TGACGTCA-3c
die als cAMP-response-element oder CRE bezeichnet wird.
Die Aktivierung von Genen, die CRE als enhancer-Element
enthalten, erfolgt nach Bindung eines spezifischen Trans-
kriptionsfaktors, des CREB (cAMP response-element bind-
25.6 · Signaltransduktion G-Protein-gekoppelter Rezeptoren
. Abb. 25.18. Schematische Darstellung der Adenylatcylase. Die
meisten Adenylatcyclasen sind integrale Membranproteine mit 12
Transmembrandomänen. Sie enthalten eine große cytoplasmatische
Schleife zwischen den 6. und 7. Membran-durchspannenden Helices
sowie einen längeren cytoplasmatischen C-terminalen Bereich. Diese
beiden Bereiche bilden zusammen die katalytische Domäne der
Adenylatcyclase. In ihrem katalytischen Zentrum binden Mg2+-Ionen
und das Substrat ATP
. Abb. 25.19. Mechanismus der PKA-Aktivierung. Die Bindung
von cAMP an die regulatorischen Untereinheiten der PKA führt zur
Freisetzung der enzymatisch aktiven C-Untereinheiten
ing protein). CREB ist ein dimeres Protein, mit einer Leucin-
Zipper-Struktur, die für die Dimerisierung verantwortlich
ist. Das dimere CREB wird durch die in den Zellkern trans-
lozierte PKA phosphoryliert und kann danach mit dem
Transkriptionsfaktor TF II D sowie der RNA-Polymerase
II assoziieren und die Transkription von Zielgenen indu-
zieren. Beispiele für CRE-Elemente enthaltende Gene sind
diejenigen für Somatostatin, Parathormon, für die Schlüs-
selenzyme der Gluconeogenese (7 Kap. 11.3) und das vaso-
aktive intestinale Peptid (VIP).
25.6.3 Rezeptoren, die an die Phospho-
lipase Cβ gekoppelt sind und zur
Ca2+-Freisetzung führen
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren wie die Rezeptoren für
Katecholamine (7 Kap. 26.3.4), Acetylcholin, Histamin,
Angiotensin, Vasopressin, Pankreozymin, Serotonin, thy-
783 25
reotropin releasing hormone (TRH) sowie für Chemokine
und Geruchsstoffe führen nach Bindung des jeweiligen
Liganden über ein heterotrimeres G-Protein nach Aus-
tausch von GDP mit GTP zur Aktivierung der Phospho-
lipase Cβ, welche in mehreren Isoformen vorkommt. Inte-
ressanterweise binden Rezeptor-Tyrosinkinasen (7 Kap.
25.7.1) nach Aktivierung die Phospholipase Cγ, was eben-
falls zur Hydrolyse von PIP2 führt (. Abb. 25.13b).
Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) wird
durch zweimalige, ATP-abhängige Phosphorylierung von
Phosphatidylinositol (7 Kap. 2.2.3) gebildet (. Abb. 25.20).
Die genannten Phospholipasen spalten PIP2 in Inositol-
(1,4,5)-trisphosphat (IP3) und Diacylglycerin (DAG). IP3
löst einen Anstieg der intrazellulären Ca2+-Konzentration
aus, was zu Änderungen des Stoffwechsels der Zielzellen
führt. Das in der Membran zurück bleibende Diacylgly-
cerin erfüllt ebenfalls eine wichtige Funktion bei der Sig-
nalweiterleitung. Es aktiviert zusammen mit Ca2+ spezifi-
sche Kinasen, die Proteinkinasen C (PKC) (7 Kap. 25.7.1,
Infobox Proteinkinase C)
! IP3 vermittelt die calciumabhängige Zellaktivierung.
IP3 ist imstande, die cytoplasmatische Calciumkonzentrati-
on zu erhöhen. Die Calciummobilisierung erfolgt hierbei im
Wesentlichen aus intrazellulären Calciumspeichern, welche
im endoplasmatischen Retikulum lokalisiert sind. Dort fin-
den sich die IP3-Rezeptoren, von denen 3 Subtypen bekannt
sind. Es handelt sich um ligandenaktivierte Ionenkanäle mit
zwei Membrandomänen und einer großen cytoplasmati-
schen N-terminalen Schleife. Man nimmt an, dass hier die
Bindungsstelle für IP3 liegt. Insgesamt bilden vier derartige
Rezeptormoleküle ein Homotetramer, das einen durch den
Liganden IP3 aktivierten Calciumkanal darstellt.
25.6.4 Die GPCR-vermittelte Signal-
transduktion am Beispiel von
Interleukin-8
Interleukin-8 (auch CXCL-8 genannt) ist ein pro-inflamm-
atorisches, chemotaktisch wirkendes Cytokin, das zur
Gruppe der CXC-Chemokine gehört. Es wird im Zuge ei-
ner Cytokinkaskade produziert: So stimuliert z.B. Tumor-
Nekrose-Faktor (TNF) die Freisetzung von Interleukin-1E
(IL-1E), das seinerseits die Bildung von Interleukin-8 in-
duziert. IL-8 ist einer der potentesten chemotaktischen Fak-
toren für neutrophile Granulozyten, spielt aber auch eine
Rolle bei Angiogenese und Zellteilung.
! Die Produktion von Interleukin-8 im Entzündungsherd
ist von zentraler Bedeutung für die Rekrutierung von
neutrophilen Granulozyten.
Das sezernierte IL-8 bildet im Gewebe einen Konzentra-
tionsgradienten aus und wird an der Innenseite der Blut-
gefäßwand präsentiert. Zusätzlich bewirken die ebenfalls
 784 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.20. Biosynthese und Spaltung von Phosphatidyl-4,5-bisphosphat (PIP2). ER = endoplasmatisches Retikulum; PKC = Pro-
teinkinase C; PLC = Phospholipase C
ausgeschütteten Cytokine TNF und IL-1 die Bildung von
Adhäsionsmolekülen durch Endothelzellen. Die im Blut
zirkulierenden Neutrophilen heften sich an die Endothel-
zellen an und rollen durch wiederholtes Binden und Lösen
an diesen entlang. Das präsentierte IL-8 aktiviert die heran-
rollenden Leukozyten, bewirkt eine vermehrte Integrin-
Expression an deren Oberfläche und führt somit zu einer
stabilen Anheftung an die Endothelzellen und zur Passage
durch die Gefäßwand in das Gewebe (Diapedese). Im Ge-
webe bewegen sich die Neutrophilen entlang des IL-8-Kon-
zentrationsgradienten zum Entzündungsherd. Die Be-
kämpfung der Pathogene erfolgt durch reaktive Sauerstoff-
spezies und freigesetzte Proteasen (u.a. Kathepsin G).
Auf molekularer Ebene werden die beschriebenen Pro-
zesse folgendermaßen vermittelt:
Die Interleukin-8-Rezeptoren – CXCR1 und CXCR2 –
sind G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (. Abb. 25.21).
Während CXCR1 vorwiegend durch IL-8 aktiviert wird,
bindet CXCR2 in erster Linie GroD, einen Mitose-aktivie-
renden Faktor, und MIP2, das Monozyten aktiviert.
Nach IL-8-Stimulus werden G-Protein-vermittelt PI3-
Kinase, Phospholipase CE2 und Rho A aktiviert. Rho A
gehört zur Gruppe der kleinen G-Proteine (. Abb. 25.11a).
Es beeinflusst die Aktin-Polymerisation und damit die
Organisation des Cytoskeletts und die Zellmigration. Die
PI3-Kinase katalysiert einerseits die Phosphorylierung
verschiedener Phosphatidylinositole an Position 3 des Ino-
sitolringes. Wie unter 25.6.3 besprochen, führt die Phos-
pholipase CE2 zur Freisetzung der second messenger IP3,
DAG und Ca2+.
25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen
. Abb. 25.21. Interleukin-8 Signaltransduktion. IL-8 bindet an die
G-Protein-gekoppelten Rezeptoren CXCR1 oder CXCR2. Diese aktivie-
ren ein heterotrimeres G-Protein, welches neben dem MAPK-Weg und
der Erhöhung des cytoplasmatischen Ca2+-Spiegels die Aktivierung
In Kürze
G-Protein-gekoppelte Rezeptoren sind mit sieben Trans-
membrandomänen in der Plasmamembran verankert. Sie
können durch eine Vielzahl von extrazellulären Signalen
aktiviert werden und signalisieren über heterotrimere
G-Proteine.
Die Adenylatcyclase ist ein Membranenzym, das
durch verschiedene G-Proteine aktiviert (Gs-Proteine)
bzw. inhibiert (Gi-Proteine) wird. Sie ist für die Synthese
des intrazellulären second messengers cAMP verant-
25.7 Signaltransduktion von
Rezeptor-Tyrosinkinasen und
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen
Alle Rezeptorkinasen bestehen aus einer Liganden-binden-
den Extrazellulärregion, einer einzelnen Transmembran-
domäne und einem cytoplasmatischen Teil, der die Kinase-
domäne enthält. Die Rezeptorkinasen lassen sich in die
großen Familien der Rezeptor-Tyrosinkinasen und der Re-
zeptor-Serin/Threoninkinasen unterteilen. In beiden Fällen
führt die Ligandenbindung am extrazellulären Teil des Rezep-
tors zur Aktivierung der cytoplasmatischen Kinasedomäne.
25.7.1 Rezeptor-Tyrosinkinasen
Seit der vollständigen Sequenzierung des menschlichen
Genoms weiß man, dass der Mensch Gene für 58 verschie-
785 25
des membrangebundenen kleinen G-Proteins RhoA induziert. ER =
endoplasmatisches Retikulum; PI3 K = Phosphatidylinositid-3-Kinase;
TF = Transkriptionsfaktor
wortlich, das unter anderem die Proteinkinase A aktiviert
und dadurch in den Stoffwechsel vieler Gewebe ein-
greift.
Ein weiteres durch G-Proteine reguliertes Enzym ist die
Phospholipase CE. Sie spaltet das Membranphospholipid
PIP2, wobei Diacylglycerin und IP3 gebildet werden. IP3 löst
eine Calciumfreisetzung aus dem endoplasmatischen Reti-
kulum aus, die zur Zellaktivierung und zusammen mit Dia-
cylglycerin zur Aktivierung der Proteinkinase C führt.
dene Rezeptor-Tyrosinkinasen besitzt. Rezeptor-Tyrosin-
kinasen sind modulartig aufgebaut. Sie enthalten alle eine
cytoplasmatische Tyrosinkinase-Domäne, während sich
die extrazellulären Bereiche von Rezeptor zu Rezeptor be-
trächtlich unterscheiden können (. Abb. 25.22). Die Fami-
lie der Rezeptor-Tyrosinkinasen umfasst eine Reihe medi-
zinisch relevanter Proteine (siehe Info-Box: ErbB2 und
Brustkrebs), die fundamentale biologische Prozesse steuern.
So ist der Rezeptor für den vascular endothelial growth
factor (VEGFR) für die Bildung neuer Blutgefäße von
Bedeutung (Angiogenese). Durch Inhibition der VEGFR-
Signaltransduktion versucht man die Vaskularisierung von
Tumoren zu verhindern und dadurch ihr Wachstum zu
bremsen. Auch der Insulinrezeptor ist eine Rezeptortyro-
sinkinase. Wegen der herausragenden Bedeutung der In-
sulinrezeptor Signaltransduktion für die Glucose-Homö-
ostase und den Diabetes mellitus ist ihm ein gesondertes
Kapitel gewidmet (7 Kap. 26.1.7).
 786 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.22. Aufbau von Rezeptor-Tyrosinkinasen. Während
sich die extrazellulären Bereiche der verschiedenen Rezeptor-Tyrosin-
kinase-Familien unterscheiden, sind alle Rezeptoren durch eine
konservierte intrazelluläre Tyrosinkinase-Domäne charakterisiert.
EGFR = epidermal growth factor Rezeptor; PDGFR = platelet-derived
growth factor Rezeptor; INSR = Insulinrezeptor; FGFR = fibroblast
growth factor receptorr
Die Bindung des Liganden an eine Rezeptortyrosinki-
nase führt zur Aktivierung der cytoplasmatischen Tyrosinki-
nasedomäne mit der Konsequenz der Phosphorylierung
cytoplasmatischer Tyrosylreste des Rezeptors. Die resultie-
renden Phosphotyrosinmotive sind spezifische Bindungs-
stellen für Proteine mit SH2-Domänen (. Abb. 25.10) oder
PTB-Domänen (7 Kap. 25.4.2). Die auf diese Weise an den
Rezeptor rekrutierten Proteine lösen die weiteren Signal-
kaskaden aus. Interessanterweise treten Vernetzungen der
Signaltransduktion dieser Rezeptoren mit anderen, insbe-
sondere den G-Protein-gekoppelten Rezeptoren auf, die
auch als »receptor crosstalk« bezeichnet werden. Die Grund-
züge der Rezeptortyrosinkinase-Signaltransduktion sollen
im Folgenden am Beispiel der PDGF-Rezeptoren erläutert
werden.
! Die wichtigsten durch Rezeptor-Tyrosinkinasen akti-
vierten Signalwege sind der Ras/Raf/MAPK-Weg, der
Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K)-Weg und der
Phospholipase CJ (PLCJ)-Weg.
Infobox
ErbB2 und Brustkrebs
Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivieren häufig mitogene
und anti-apoptotische Signalwege, die gemeinsam zur
Zellproliferation führen. Eine Dysregulation solcher Si-
gnalwege trägt zur Krebsentstehung bei. In der Tat ist
in einer Vielzahl von Brustkrebstumoren die Rezeptor-
Tyrosinkinase ErbB2 (auch Her2 genannt), die zur Fa-
milie der epidermal growth factor Rezeptoren (EGFR)
gehört, vermehrt auf der Zelloberfläche zu finden.
Zudem ist der Rezeptor in diesen Krebszellen dauerhaft
aktiviert und trägt damit zum unkontrollierten Zell-
wachstum bei.
Die Blockierung von ErbB2 ist eine vielversprechen-
de Strategie bei der Brustkrebstherapie. Man hat daher
gegen die extrazelluläre Domäne des humanen Rezep-
tors eine Reihe von monoklonalen Antikörpern in Mäu-
sen produziert und in Zellkulturexperimenten ihr inhi-
bitorisches Potential analysiert. Dabei wurde ein beson-
ders wirksamer neutralisierender Antikörper identifi-
ziert. In humanisierter Form wird dieser Antikörper
®
(Herceptin ) nun mit Erfolg in der Brustkrebstherapie
eingesetzt, wobei etwa 30% der Patientinnen auf diese
Behandlung ansprechen.
Platelet-derived growth factor (PDGF) (. Abb. 25.23) ist ein
Wachstumsfaktor, der auch chemotaktische Aktivitäten
besitzt. PDGF liegt in seiner biologisch aktiven Form als
Homo- oder Heterodimer vor. Die beiden PDGF-A- und
PDGF-B-Polypeptide sind im Dimer über Disulfid-
Brücken verknüpft. Die Zusammensetzung des Dimers aus
zwei A-Polypeptiden, zwei B-Polypeptiden oder jeweils
eines A- und eines B-Polypeptids ist für die Rezeptorbin-
dung von Bedeutung. PDGF-C entsteht im Unterschied zu
PDGF-A und PDGF-B nach proteolytischer Spaltung aus
einer Prä-PDGF-C-Form. PDGF-C enthaltende Hetero-
dimere sind noch nicht beschrieben. Ebenfalls durch limi-
tierte Proteolyse entsteht aus dem vor kurzem identifi-
zierten Prä-PDGF-D das aktive PDGF-D. Bisher ist nur das
PDGF-D-Homodimer bekannt.
PDGF/PDGF-Rezeptor-Interaktion. Die Bindung von PDGF
an seinen Rezeptor führt zur Dimerisierung zweier PDGF-
Rezeptor-Tyrosinkinasen. Der entstehende PDGF-Rezep-
tor-Komplex kann dabei aus zwei D-Rezeptoren, zwei E-Re-
zeptoren oder aus je einem D- und E-Rezeptor zusammen-
gesetzt sein. Die PDGF-Typen AA, AB, BB und CC binden
D-Rezeptor-Dimere (. Abb. 25.23a). PDGF-Dimere, die
PDGF-B enthalten, sowie das PDGF-C-Homodimer bin-
den D/E-Rezeptor-Heterodimere. PDGF-B- und PDGF-D-
Homodimere binden E/E-Rezeptor-Homodimere.
PDGF-A und -B haben eine unterschiedliche Bedeu-
tung in der Embryonalentwicklung. In Knockout-Mäusen
wurde gezeigt, dass PDGF-B bzw. der PDGF-E-Rezeptor
25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen
787 25

. Abb. 25.23. PDGF-Signaltransduktion. (a) Aktivierung der PDGF-
Rezeptoren durch die verschiedenen PDGF-Isoformen A, B, C und D.
PDGF-Isoformen binden als Dimere an den PDGF-Rezeptor. Der ge-
strichelte Pfeil verdeutlicht eine niedrig-affine Bindung. (b) Vom
aktivierten Rezeptor können verschiedene Signaltransduktionswege
ausgehen: Grb2/SOS-Assoziation löst die Aktivierung der MAPK-
Kaskade aus (rechts); Bindung der PI3-Kinase resultiert in der PKB-
Aktivierung (links). (c) Assoziation der PLCJ führt zur Erhöhung der
cytoplasmatischen Ca2+-Konzentration und zur Aktivierung der Pro-
teinkinase C (PKC). ER = endoplasmatisches Retikulum; KD = Kinase-
Domäne; PDK = phospholipid-dependent kinase; PI3 K = Phosphatidyli-
nositid-3-Kinase; PKB = Proteinkinase B; PLC = Phospholipase C
 788 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
. Tabelle 25.6. Signaltransduktionsmoleküle, die an den PDGF-Rezeptor binden
Signaltransduktionsmolekül Funktion
Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K) Lipidkinase
Phospholipase CJ (PLCJ) Lipase
Src Tyrosinkinase
SH2-containing tyrosine phosphatase (SHP2) Tyrosinphosphatase, Adapterprotein
Signal transducer and activator of transcription Transkriptionsfaktor
(STAT1, 3 und 5)
Shc Adapterprotein
Grb2 Adapterprotein
25 Grb7 Adapterprotein
Nck Adapterprotein
Crk Adapterprotein
* SH2- und PTB-Domänen binden Phosphotyrosin-Motive; SH3-Domänen binden Prolin-reiche Sequenzen; PH-Domänen binden Phosphat-
idylinositolphosphate
essentiell für die Nierenentwicklung, PDGF-A jedoch wich-
tig für die Lungenentwicklung ist. Der Verlust des D-Rezep-
tors führt zu weiterreichenden Fehlentwicklungen als der
Verlust des PDGF-A-Gens; dies lässt sich dadurch erklären,
dass über den PDGF-D-Rezeptor sowohl PDGF-A als auch
PDGF-B und PDGF-C signalisieren. Die hier für das
PDGF-System exemplarisch beschriebenen Kombinations-
möglichkeiten bei der Zusammensetzung der Liganden
und der Rezeptorkomplexe ermöglichen verschiedenen
Zellen – bedingt durch eine Zelltyp-spezifische Expression
der Liganden- und Rezeptoruntereinheiten – jeweils indi-
viduell zu reagieren. Dieses Prinzip ist von genereller Be-
deutung innerhalb der Familie der Rezeptor-Tyrosinkina-
sen, aber auch für die Wirkung anderer Cytokine und wird
in 7 Kap. 25.8.3 im Zusammenhang mit der Signaltrans-
duktion von Interleukin-6 skizziert.
PDGF-induzierte Rezeptoraktivierung. Die Liganden-
induzierte Rezeptordimerisierung führt zur Autophos-
phorylierung und damit zur Aktivierung der Rezeptor-
Tyrosinkinasen. Die aktivierten Kinasen phosphorylieren
daraufhin Tyrosylreste im cytoplasmatischen Teil der Re-
zeptorkette. Diese Phosphotyrosinreste dienen weiteren
Signalmolekülen als Rekrutierungsstellen. Für die spezifi-
sche Bindung dieser Moleküle ist die Aminosäuresequenz
in unmittelbarer Nähe zum Phosphotyrosin entscheidend.
Die rekrutierten Proteine besitzen SH2- oder PTB-Domä-
nen, um mit den Phosphotyrosin-Motiven des Rezeptors
interagieren zu können. Für die in . Tabelle 25.6 beschrie-
benen Proteine sind die Interaktionsstellen am PDGF-Re-
zeptor bekannt.
Häufig besitzen die an den Rezeptor rekrutierten Pro-
teine mehrere Interaktionsdomänen und können darüber
mit weiteren Proteinen assoziieren. Viele dieser Proteine
Interaktionsdomänen*
SH2, SH3
SH2, SH3, PH
SH2, SH3
SH2
SH2
SH2, PTB
SH2, SH3,
SH2, SH3
SH2, SH3
SH2, SH3
dienen ausschließlich als Adaptermoleküle, andere stellen
Enzyme oder Transkriptionsfaktoren dar.
PDGF-induzierte Signalkaskaden. Im Wesentlichen wer-
den nach PDGF-Stimulation drei Signalkaskaden aktiviert
(. Abb. 25.23b,c):
4 die Mitogen-aktivierte-Proteinkinase-(MAPK)-Kaskade
4 die Phosphatidylinositid-3-Kinase-(PI3K)-Kaskade
4 die Phospholipase CJ (PLCJ)-Kaskade
Die Mitogen-aktivierte-Proteinkinase (MAPK)-Kaskade
(7 Kap. 25.4.3) beginnt mit der Rekrutierung eines Grb2/
SOS-Proteinkomplexes an den Rezeptor (. Abb. 25.23b).
Hierbei kann Grb2/SOS entweder direkt oder über die Ad-
apter Shc oder SHP2 an den PDGF-Rezeptor gebunden
werden. SOS gelangt hierdurch in die Nähe des in der
Membran verankerten G-Proteins Ras und bewirkt dessen
Übergang in die aktivierte, GTP-bindende Form. Die nun
mögliche Interaktion von Ras-GTP mit der Serin/Threo-
ninkinase Raf-1 führt zur Raf-1-Aktivierung. Raf-1 ist
wiederum der Aktivator der MAP-Kinase-Kinase (MEK).
Diese dualspezifische Threonin/Tyrosin-Kinase phospho-
ryliert schließlich die Mitogen-aktivierten-Proteinkinasen
ERK1 und ERK2, deren Substrate unter anderem Trans-
kriptionsfaktoren sind.
Die Phosphatidylinositid-3-Kinase (PI3K), die aus
einer regulatorischen und einer katalytischen Untereinheit
besteht, bindet über die regulatorische Untereinheit eben-
falls an den aktivierten PDGF-Rezeptor (. Abb. 25.23b).
Dies führt zur Aktivierung der katalytischen Untereinheit
der PI3K und somit zur Phosphorylierung von Phosphatidyl-
inositol-4,5-bisphosphat (PIP2). Das entstehende Phos-
phatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3) wird von der
Pleckstrin-Homologie-Domäne (PH-Domäne) der Pro-
25.7 · Signaltransduktion von Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/Threoninkinasen
789 25

teinkinase B (PKB, auch Akt-Kinase genannt) gebunden.
Die Rekrutierung der PKB an die Zellmembran ist ein essen-
tieller Schritt für die Phosphorylierung und Aktivierung
der PKB durch die Threonin-Kinase-PDK1 (phospholipid-
dependent kinase), die ebenfalls über ihre PH-Domäne an
PIP3 gebunden wird. Über weitere Phosphorylierungen
spezifischer Serin- und Threoninseitenketten von bestimm-
ten Apoptose-regulierenden Proteinen wirkt die aktivierte
PKB anti-apoptotisch. Aktivierte PKB kann auch in den
Zellkern translozieren und reguliert dort Transkriptions-
faktoren, die für die Zellproliferation wichtig sind und trägt
somit zur proliferationsfördernden Wirkung des Wachs-
tumsfaktors bei. Im Rahmen der Insulin-Signaltransduk-
tion sorgt der PI3K/PKB-Signalweg für eine verstärkte
Glycogensynthese (7 Kap. 11.2.1).
Phospholipase CJ (PLCJ) wird ebenfalls am PDGF-
Rezeptor durch Tyrosinphosphorylierung aktiviert (. Abb.
25.23c). PIP2 ist sowohl Substrat der PI3K als auch der
PLCJ. Nach Aktivierung am PDGF-Rezeptor bindet PLCJ
mit ihrer PH-Domäne an das durch die PI3K-generierte
PIP3. Sie hydrolysiert PIP2 zu Inositol-(1,4,5)-trisphosphat
(IP3) und Diacylglycerin (DAG). Cytoplasmatisches IP3
führt zur Freisetzung des second messengers Ca2+ aus dem
endoplasmatischen Retikulum. Der zweite second messen-
ger Diacylglycerin aktiviert zusammen mit dem freige-
setzten Ca2+ die Serin/Threonin-Proteinkinase-C (PKC)
(7 u.). Diese ist wiederum ein Regulator für Transkriptions-
faktoren und beeinflusst somit auch die Genexpression.
Auch der JAK/STAT-Signalweg kann durch Rezeptor-
Tyrosinkinasen aktiviert werden. Mitglieder der Familie
der signal transducers and activators of transcription (STAT1,
STAT3 und STAT5) werden an den PDGF-Rezeptor re-
krutiert und durch Tyrosin-Phosphorylierung aktiviert (in
. Abb. 25.23 nicht dargestellt). Der JAK/STAT-Signalweg
spielt bei der Signaltransduktion der meisten Interleukine
und der Interferone eine zentrale Rolle und wird in den
7 Kapiteln 25.8.3 und 25.8.4 genauer beschrieben.

Infobox
Proteinkinase-C
Die Proteinkinasen-C (PKC) wurden ursprünglich als
eine Familie von durch Calcium-Ionen aktivierbaren
Kinasen beschrieben (daher PKC). Heute versteht man
darunter eine aus mindestens 12 Mitgliedern beste-
hende Familie von Proteinkinasen, die in konventio-
nelle PKC (cPKC), neue PKC (nPKC) und atypische PKC
(aPKC) unterteilt wird. Nur die cPKC zeigen die cha-
rakteristische Aktivierbarkeit durch Diacylglycerin
(DAG) und Calcium-Ionen. Die PKC spielen eine wich-
tige Rolle bei der Signaltransduktion, der Regulation
von Wachstum und Differenzierung sowie der Krebs-
entstehung.
. Abb. 25.24 stellt den Aufbau von Enzymen der
PKC-Familie dar. Die PKC-Proteine lassen sich in eine
durch eine Art Scharnierregion verbundene N-termina-
le regulatorische und C-terminale katalytische Region
unterteilen. In der N-terminalen Region finden sich
zwei Domänen, die die Regulierbarkeit des Enzyms
durch Diacylglycerin bzw. Calcium vermitteln. Am
weitesten N-terminal liegt eine Pseudosubstrat-Region
(PSR), die für die Regulation des Enzyms von großer
Bedeutung ist. Die katalytische Domäne enthält eine
gut konservierte ATP-Bindungsregion sowie eine
Substratbindungsstelle mit relativ breiter Substrat-
spezifität. . Abb. 25.24. Schematische Darstellung des Aufbaus der Prote-
Die Aktivierung der verschiedenen PKC-Isoformen inkinase C. (a) Aktivierung der Proteinkinase C durch Diacylglycerin
(DAG), Phosphatidylserin (PS) und Calcium-Ionen. PSR = Pseudosub-
erfordert ein komplexes Zusammenspiel von Membran-
strat-Region (b) Aufbau verschiedener Isoformen der Proteinkinase C.
lipiden und Proteinkinasen. So genannte pflanzliche (Einzelheiten 7 Infobox)
Phorbolester können die aktivierende Rolle von DAG
nachahmen. Da sie nur langsam abgebaut werden,
können sie die PKC über längere Zeit aktivieren und
wirken daher als Tumorpromotoren.
 790 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

25.7.2 Rezeptor-Serin/Threoninkinasen

Im Unterschied zu Rezeptor-Tyrosinkinasen folgt nach Li-

gandenbindung an eine Rezeptor-Serin/Threoninkinase
die Phosphorylierung von Serin- und Threonin-Seiten-
ketten von Signalproteinen.
Alle Cytokine, die über Rezeptor-Serin/Threoninkina-
sen signalisieren, gehören zur transforming growth factor
β-Familie (TGFE), die sich in drei Gruppen einteilen
lässt:
4 TGFE-Isoformen TGFE1 bis TGFE3
4 die Gruppe der bone morphogenetic proteins (BMP)
25 4 Aktivine
! Die Moleküle der TGFE-Familie spielen eine wichtige
Rolle in der Regulation der Gewebehomöostase und
bei der Entwicklung vielzelliger Organismen.

Entsprechend ihrer Heterogenität vermitteln die Mitglieder

der TGFE-Familie vielfältige biologische Antworten: Die
TGFE-Isoformen kontrollieren die Proliferation epithelia-
ler und mesenchymaler Zellen (wachstumsinhibierende
Wirkung), stimulieren die Bildung der extrazellulären
Matrix (profibrotische Wirkung) und können Immunant-
worten unterdrücken (anti-inflammatorische Wirkung).
Diese Eigenschaften sind mit Hilfe von knockout-Mäusen
belegt worden, bei denen das Fehlen der jeweiligen TGFE-
Isoformen gravierende Fehlentwicklungen in verschiedenen
Organen und Geweben zur Folge hat. Darüber hinaus wei-
sen TGFE1-knockout-Mäuse multifokale Entzündungs-
herde auf und sterben infolge unkontrollierter Lympho-
zyten-Infiltration. TGFE1 spielt daher zusätzlich eine be-
deutende Rolle in der Modulation von Immunantworten.
! Die BMP induzieren die Bildung von Knochen- und
Knorpelgewebe. Aktivine beeinflussen die Erythro-
poese und die Neuralentwicklung im Stadium der
Gastrulation.
Die Signaltransduktion dieser Cytokine wird im Folgenden
am Beispiel von TGFE-Rezeptoren dargestellt.
TGFE-Moleküle binden als Dimere an ihre Rezeptoren
(. Abb. 25.25). Die Bindung des Ligandendimers an den
dimeren TGFβ-Typ-II-Rezeptor ist Voraussetzung dafür,
dass ein Dimer aus TGFβ-Typ-I-Rezeptoren rekrutiert
wird. Bei beiden Rezeptortypen handelt es sich um Serin/
Threonin-Kinasen. Der Typ-II-Rezeptor ist konstitutiv ak-
tiv und phosphoryliert nach Assoziation den Typ-I-Rezep-
tor. Das Typ-I-Rezeptordimer leitet das Signal des Liganden
an cytoplasmatische Effektorproteine weiter, die als Smad-
Proteine bezeichnet werden. Die R-Smad-Proteine (recep-
tor activated Smads) Smad 2 und Smad 3 werden über das
membranverankerte Hilfsprotein SARA (Smad anchor for
receptor activation) an den Typ-I-Rezeptor rekrutiert. SARA
interagiert dabei sowohl mit dem Rezeptor als auch mit
dem R-Smad-Protein. Die Kinase-Domäne des Typ-I-Re-
zeptors phosphoryliert das R-Smad-Protein an bestimmten
. Abb. 25.25. TGFβ Signaltransduktion. TGFE-Isoformen binden
als Dimere an TGFE-Rezeptoren vom Typ II. Nachfolgend werden Typ-I-
TGFE-Rezeptoren rekrutiert, welche das Signal an R-Smad-Proteine
weitergeben. Aktivierte R-Smad-Proteine müssen ein Co-Smad-Pro-
tein binden, um in den Zellkern zu gelangen. Die Aktivierung von
R-Smads wird durch I-Smad-Proteine inhibiert. SARA = (Smad anchor
for receptor activation); Smad = Kunstwort aus Sma (ein Protein des
Fadenwurms Caenorhabditis elegans) und dem verwandten Protein
Mad (mothers against decapentaplegic) aus der Fruchtfliege Drosophila
melanogaster
Serinresten. Dies führt zur Dimerisierung und zur nach-
folgenden Assoziation mit einem Co-Smad (common part-
ner Smad), dem Smad 4. Die Anlagerung des Co-Smad-
Proteins ist für die Translokation des entstehenden Hetero-
trimers in den Zellkern notwendig. Dort assoziieren weitere
Transkriptionsfaktoren oder Cofaktoren und die Trans-
kription von TGFE-Zielgenen wird induziert.
Eine feedback-Inhibition der TGFE-Signaltransduktion
erfolgt unter anderem über das TGFE-induzierte I-Smad-
Protein (Inhibitory Smad) Smad 7, das die Phosphorylie-
rung und Dimerisierung der R-Smad-Moleküle blockiert.
An der BMP-Signaltransduktion sind die R-Smad-
Proteine Smad 1, Smad 5 und Smad 8 und die I-Smad-Pro-
teine Smad 6 und Smad 7 beteiligt.
In Kürze
Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivieren nach liganden-
induzierter Phosphorylierung von Tyrosylresten eine
Reihe von Signalproteinen. Zu diesen gehören die
MAP-Kinasen, die Phospholipase CJ und die PI3-Kinase.
Rezeptor-Serin/Threoninkinasen signalisieren über
den Smad-Signalweg.
25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
791 25
25.8 Signaltransduktion über
Rezeptoren mit assoziierten
Kinasen

Neben Rezeptor-Tyrosinkinasen und Rezeptor-Serin/

Threoninkinasen existieren Rezeptoren ohne intrinsische
Kinasedomänen. Diese Rezeptoren binden Tyrosin- oder
Serin/Threoninkinasen entweder direkt oder über Adapter-
proteine. Hierzu gehören die Rezeptoren für die pro-in-
flammatorischen Cytokine IL-1 und TNF, die Rezeptoren
für IL-6-Typ-Cytokine sowie die Interferon-Rezeptoren;
letztere vermitteln anti-virale Wirkungen.

25.8.1 Interleukin-1-Signaltransduktion

Interleukin-1 wird als 31 kDa Präkursor ohne Signalpeptid

synthetisiert und zunächst im Cytoplasma zurückgehalten.
Erst durch Aktivierung der Cysteinprotease ICE (interleu-
kin-1 converting enzyme = Caspase 1) entsteht durch limi-
tierte Proteolyse das reife 17,5 kDa IL-1, welches über einen
nicht-klassischen Sekretionsweg die Zelle verlässt. Der Me-
chanismus dieser Sekretion ist noch nicht aufgeklärt.
Das pro-inflammatorische Cytokin Interleukin-1
kommt in zwei Isoformen (IL-1D und IL-1E) vor, die sich
in ihren biologischen Wirkungen kaum unterscheiden. Sie
signalisieren über einen Rezeptorkomplex, der aus zwei
Polypeptid-Ketten besteht: dem Interleukin-1-Rezeptor-I
(IL-1RI) und dem Interleukin-1-receptor accessory protein
(IL-1RAcP) (. Abb. 25.26).
Nach Ligandenbindung und Oligomerisierung des
Rezeptors werden verschiedene Signalmoleküle rekrutiert.
Zunächst bindet MyD88 (myeloid-differentiation) über
seine TIR (Toll/IL-1 receptor)-Domäne an die TIR-Domäne
des IL-1-Rezeptors I. MyD88 verfügt neben seiner TIR-
Domäne noch über eine death-domain (DD), die zur Rekru-
tierung der IL-1 Rezeptor-assoziierten Kinasen (IRAK) 1
und 4 dient. Death domains wurden ursprünglich im Rah-
men apoptotischer Signalwege beschrieben (7 Kap. 7.1.5,
25.8.2), finden aber auch als Proteininteraktionsdomänen . Abb. 25.26. Interleukin1-Signaltransduktion. Nach Bindung
in anderen Signalwegen Verwendung. Nach Phosphorylie- des IL-1 an den IL-1-Rezeptorkomplex wird der NF-NB-Signaltransduk-
rung von IRAK1 wird der TNF-receptor-associating factor tionsweg aktiviert. Dies resultiert in der Induktion pro-inflammatori-
TRAF6 an den Rezeptorkomplex rekrutiert und aktiviert. scher Zielgene. (Abkürzungen 7 Text)
Nach Ubiquitinylierung dissoziiert TRAF6 vom Rezeptor-
komplex und bindet an einen Komplex aus der Serin/Threo- p50 und p65 – transloziert in den Zellkern und bindet hier
ninkinase TAK1 (TGF-E activated kinase) und den TAB an enhancer-Elemente von Zielgenen. Wichtige Zielgene,
(TAK-binding protein)-Proteinen TAB1 und TAB2. In die- die in der pro-inflammatorischen Phase von Entzündungs-
sem Komplex wird TAK1 durch Phosphorylierung akti- reaktionen durch NF-NB induziert werden, sind die für die
viert. In der Folge wird der INB (inhibitor of NF-NB)- Chemokine Interleukin-8 und RANTES. Diese Cytokine
Kinase(IKK)-Komplex, der aus den drei Untereinheiten wirken chemotaktisch auf Granulozyten. Auch Interferon-J
IKKD, IKKE und IKKJ aufgebaut ist, durch Phosphorylie- und IL-6 werden nach IL-1-Stimulation verstärkt expri-
rung aktiviert. Nach Phosphorylierung von INB, welches im miert. Über die ebenfalls beobachtete Induktion der Cyclo-
Komplex mit NF-NB vorliegt, wird dieses an Lysin-Resten oxygenase 2 (COX2) werden andere Entzündungsmedia-
ubiquitinyliert und über das Proteasom abgebaut. Das frei- toren, wie die fieberauslösenden Prostaglandine generiert
gesetzte NF-NB – bestehend aus den beiden Untereinheiten (7 Kap. 12.4.2).
 792 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

Neben dem Interleukin-1-Rezeptor IL-1RI existiert Rezeptoren und untereinander zu interagieren. Der für die
auch eine cytoplasmatisch verkürzte Form des Rezeptors, Apoptose wichtige Signaltransduktionsprozess ist die Re-
der IL-1-Rezeptor-II. Dieser Rezeptor bindet die Liganden krutierung der Pro-Caspasen 8 und 2, die am Anfang einer
IL-1D/E, transduziert aber kein Signal und wirkt deshalb Caspase-Kaskade stehen (initiator-caspases). Caspasen
antagonistisch. gehören zur Familie der Cystein-Proteasen, die ihre Subs-
trate C-terminal von Aspartat spalten. Die Pro-Caspase 8
In Kürze wird durch Abspaltung eines Pro-Peptids autokataly-
Interleukin-1 führt über verschiedene, an den Rezeptor tisch aktiviert und vermag ihrerseits verschiedene cyto-
assoziierte Proteine zur Translokation von NF-NB in den plasmatisch lokalisierte Pro-Caspasen (3, 6 und 7) durch
Zellkern. Nach Bindung an die enhancer-Elemente ver- limitierte Proteolyse zu aktivieren. Die aktivierten Cas-
schiedener Zielgene wird unter anderem die Expres- pasen (executive-caspases) leiten den Zelltod auf ver-
sion von Chemokinen, Interferon-J und IL-6 induziert. schiedenen Ebenen ein: Sie zerstören wichtige Struktur-
25 proteine der Zelle wie z.B. Proteine der Kernmembran
und das Aktincytoskelett oder sie aktivieren eine DNAase
und lösen damit die Zerstörung der nucleären DNA aus.
25.8.2 TNF-Signaltransduktion Auch DNA-Reparatur und Zellzyklus werden außer Kraft
gesetzt.
Der Name Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) geht auf Ex- Zur TNF-Rezeptor Superfamilie wird auch der Rezep-
perimente zurück, in denen Tumore in Mäusen nach Be- tor Fas (CD95) gezählt. Nach Bindung des Fas-Liganden
handlung mit TNF absterben. In der Tat kann über den (FasL) wird FADD an den Rezeptor rekrutiert und über die
TNF-Rezeptor eine Apoptose ausgelöst werden. Für die Aktivierung der Caspasen 8 und 3 Apoptose ausgelöst.
Behandlung humaner Tumore spielt TNF bisher noch
keine Rolle. TNF ist ein sehr wirksames pro-inflamma-
torisches Cytokin, welches wie Interleukin-1 und Inter-
leukin-6 Fieber hervorruft (Pyrogene). Es wird nach
Endotoxinwirkung von Monozyten/Makrophagen in be-
trächtlichen Mengen freigesetzt und kann so zum sep-
tischen Schock führen. TNF ist darüber hinaus ein bedeu-
tender Mediator chronisch entzündlicher Erkrankungen
(7 Kap. 25.8.5).
Der Tumor-Nekrose-Faktor existiert in einer Mem-
bran-gebundenen sowie in einer löslichen Form (. Abb.
25.27a). Das Enzym TNF-alpha converting enzyme (TACE)
überführt den Membran-gebundenen Tumor-Nekrose-
Faktor in die lösliche Form. Beide liegen in oligomerisierter
Form – bevorzugt als Trimere – vor. Es existieren zwei
TNF-Rezeptoren, die ebenfalls als trimere Komplexe signa-
lisieren: TNF-Rezeptor-1 und TNF-Rezeptor-2. Während
löslicher TNF ausschließlich über den TNF-Rezeptor-1
wirkt, kann Membran-gebundener TNF über beide Rezep-
torkomplexe signalisieren.
! Eine Besonderheit des TNFR1 ist die death-domain (DD)
im intrazellulären Teil des Rezeptors.

Der TNFR1 ist in der Lage, sowohl NF-NB zu aktivieren
(. Abb. 25.27b) – ähnlich der IL-1-Signaltransduktion –
und damit pro-inflammatorische Prozesse zu induzieren
als auch den programmierten Zelltod (Apoptose) hervor-
zurufen.
Die Auslösung der Apoptose erfolgt nach Liganden-
bindung und Aktivierung des TNFR1-Rezeptorkomple-
xes durch Rekrutierung verschiedener cytoplasmatischer
Effektorproteine (TRADD, FADD, RIP und RAIDD)
(. Abb. 25.27c). Diese Effektormoleküle enthalten eben-
falls death-domains, die sie in die Lage versetzen, mit den
. Abb. 25.27. TNFα-Signaltransduktion. (a) Lösliches TNF entsteht
aus membrangebundenem TNF durch Einwirkung des Enzyms TACE.
Sowohl lösliches als auch membrangebundenes TNF kann den TNFR1
aktivieren. Der TNFR2 kann nur durch membrangebundenes TNF
aktiviert werden. (b) Die Aktivierung des NF-NB-Signaltransduktions-
weges durch TNF erfolgt über ähnliche Mechanismen wie beim
IL-1-Rezeptor (c) Der TNFR1 ist im Gegensatz zum TNFR2 in der Lage,
Caspasen zu aktivieren. Diese leiten den programmierten Zelltod
(Apoptose) ein. FADD = Fas associated protein with a death domain;
RIP = receptor interacting protein; RAIDD = RIP-associated ICH-1/CED-3
homologous protein with a death domain; TAK1 = TGF-E activated
kinase 1; TRADD = TNF-receptor associated protein with a death domain;
Ub = Ubiquitin
25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
793 25

. Abb. 25.27b,c.
 794 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
In Kürze
TNF führt sowohl zur NF-NB-Aktivierung als auch zur
Apoptose. Hierfür sind Effektormoleküle mit so ge-
nannten death-domains verantwortlich. Die Apoptose
wird durch Caspasen ausgelöst.
25.8.3 Interleukin-6-Signaltransduktion
Eine Besonderheit der Cytokinwirkung ist ihre Redundanz,
d.h. verschiedene Cytokine können gleiche zelluläre Ant-
25 worten hervorrufen. Dieses Phänomen beruht auf der
Tatsache, dass verschiedene Cytokine über gemeinsame
Rezeptoruntereinheiten signalisieren (. Abb. 25.28).
Die wichtigsten gemeinsam genutzten Rezeptorunter-
einheiten sind
4 die common E (Ec)-Kette für die Cytokine IL-3, IL-5
und den granulocyte macrophage-colony stimulating
factor (GM-CSF)
4 die common J (Jc)-Kette für die Cytokine IL-2, IL-4,
IL-7, IL-9, IL-15 und IL-21
4 das Glycoprotein 130 (gp130) für die Mitglieder
der Interleukin-6-Typ Cytokinfamilie (. Abb. 25.28,
. Tab. 25.1)
Die Mechanismen der Signaltransduktion über gemein-
sam genutzte Rezeptoruntereinheiten sind ähnlich und
sollen hier am Beispiel der IL-6-Typ-Cytokine erläutert
werden.
Die Mitglieder dieser Familie, der neben IL-6 auch IL-
11, IL-27, leukemia inhibitory factor (LIF), oncostatin M
. Abb. 25.28. Cytokin-Familien
nutzen gemeinsame Rezeptorketten.
Die Cytokinrezeptoren common E-Kette
(Ec), common J-Kette (Jc) und gp130
dienen unterschiedlichen Cytokin-
Familien als gemeinsame signaltrans-
duzierende Rezeptor-Untereinheit.
Die Cytokine können nur dann ihre
Wirkung entfalten, wenn neben der
gemeinsamen Rezeptorkette auch
eine Cytokin-spezifische Rezeptorkette
exprimiert wird. (Abkürzungen 7 Text)
(OSM), ciliary neurotrophic factor (CNTF), cardiotrophin-1
(CT-1), cardiotrophin-like cytokine (CLC) und Neuro-
poetin (NP) angehören, weisen eine gemeinsame dreidi-
mensionale Struktur auf: sie gehören zu den so genann-
ten langkettigen 4-D-Helix-Bündel-Cytokinen und üben
vielfältige physiologische Funktionen aus. Die IL-6-Typ-
Cytokine sind an der Akutphase-Reaktion des Körpers,
an der Hämatopoese, der Differenzierung und dem
Wachstum von B- und T-Zellen sowie an der neuronalen
Differenzierung beteiligt. Die Familie ist durch die
Nutzung einer gemeinsamen Rezeptoruntereinheit, dem
Glycoprotein 130 (gp130), charakterisiert (. Abb. 25.28,
25.29a).
Als zweite Signal-weiterleitende Untereinheit kann je
nach Cytokin ein LIF-Rezeptor, ein OSM-Rezeptor oder ein
zweites gp130 beteiligt sein.
IL-6 und IL-11 führen zu einer Homodimerisierung
von gp130. CNTF, LIF und CT-1 signalisieren über ein
gp130/LIFR-Heterodimer. OSM ist das einzige Cytokin, das
über zwei Rezeptorkomplexe, nämlich gp130/LIFR und
gp130/OSMR, signalisieren kann.
Während LIF und OSM direkt an die signaltransdu-
zierenden Rezeptor-Untereinheiten binden können – LIF
an den LIFR und OSM an gp130 – benötigen IL-6, IL-11
und CNTF spezifische, nicht signalisierende D-Rezeptoren.
Die D-Rezeptoren für IL-6, IL-11 und CNTF kommen au-
ßer in Membran-ständiger auch in löslicher Form vor. Im
Gegensatz zu vielen anderen löslichen Rezeptoren, die
eine antagonistische Wirkung zeigen, können die löslichen
α-Rezeptoren für IL-6, IL-11 und CNTF nach Bindung
ihrer Liganden die signaltransduzierenden Ketten dimeri-
sieren und somit agonistisch wirken.
25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
. Abb. 25.29. Interleukin-6 Signaltransduktion. (a) Schematische
Darstellung (links) und Kristallstruktur (rechts) des signalkompetenten
IL-6-Rezeptorkomplexes bestehend aus zwei IL-6-Molekülen (grün),
zwei IL-6RD (orange) und zwei gp130 Signaltransduktor-Unterein-
heiten (blau). Die extrazellulären Domänen D1, D2 und D3 von gp130
und IL-6RD sind gekennzeichnet. (b) Ablauf der IL-6-induzierten
795 25
Jak/STAT-Signaltransduktion. (Einzelheiten 7 Text) (c) Neben dem
Jak/STAT-Weg kann ausgehend von aktiviertem gp130 auch die
MAPK-Kaskade initiiert werden. Die Protein-Tyrosin-Phosphatase SHP2
fungiert hierbei als Adapterprotein. APRE = Akutphase responsives
Element; Jak = Janus-Kinase; STAT = signal transducer and activator
of transcription
 796 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
25
. Abb. 25.29c
! Ligandenbindung führt zur Dimerisierung/Multimeri-
sierung der Rezeptorketten und zur Aktivierung von
konstitutiv assoziierten Tyrosin-Kinasen der Janus-
Familie.
Bei der IL-6-Typ-Cytokin-Signaltransduktion (. Abb.
25.29b) spielen die konstitutiv assoziierten Janus-Kinasen
Jak1, Jak2 und Tyk2 eine Rolle. Nach Ligandenbindung
aktivieren sich die Janus-Kinasen durch Tyrosin-Phos-
phorylierung ① und phosphorylieren anschließend Tyro-
sin-Reste im cytoplasmatischen Bereich der Cytokin-Re-
zeptoren ②. Diese Phosphotyrosin-Reste fungieren dann
als Rekrutierungsstellen für Proteine mit SH2 (src homology
2)-Domänen wie STAT (signal transducer and activator of
transcription) Transkriptionsfaktoren, die Tyrosinphospha-
tase SHP2, oder feed-back-inhibitor-Proteine der SOCS-
Familie (suppressors of cytokine signaling) (7 Kap. 25.10).
Im Fall der IL-6-Signaltransduktion assoziieren STAT3 und
STAT1 an Rezeptoruntereinheiten ③ und werden ihrerseits
Tyrosin-phosphoryliert ④, verlassen den Rezeptorkom-
plex, homo- bzw. heterodimerisieren ⑤, werden Serin-
phosphoryliert ⑥ und translozieren in den Zellkern. Hier
binden die STAT-Dimere an enhancer-Elemente verschie-
dener Zielgene ⑦ und beeinflussen deren Transkription
(. Abb. 25.29b). Der aktivierte Signaltransduktor gp130
bindet die Phosphatase SHP2, (. Abb. 25.29c) und aktiviert
wie für PDGF (7 Kap. 25.7.1) beschrieben die Ras/Raf/
MAP-Kinase-Kaskade.
Infobox
Janus-Kinasen
Janus – Römischer Gott mit einem Kopf und zwei Ge-
sichtern. Janus-Tyrosinkinasen besitzen zwei Kinase-
Domänen, von denen nur eine enzymatische Aktivität
besitzt.
In Kürze
Mitglieder der Familie der IL-6-Typ-Cytokine führen
zur Aktivierung assoziierter Tyrosinkinasen der Janus-
Familie. Diese aktivieren Transkriptionsfaktoren der
STAT-Familie, sowie die MAP-Kinasen.
25.8.4 Interferon-Signaltransduktion
! Interferone sind Cytokine, die die Virusvermehrung
hemmen.
Die Biosynthese von Interferonen wird durch Viren, Bak-
terien, Antigene und Cytokine wie Interleukin-1, Interleu-
kin-2 und Tumor-Nekrose-Faktor stimuliert. Zu den Typ-1-
Interferonen werden die Interferon-α-Mitglieder (IFND)
und das Interferon-β (IFNE) gezählt. IFND wird haupt-
sächlich von Lymphozyten, Monozyten und Makrophagen,
IFNE von nahezu allen differenzierten Zellen produziert.
Das Typ-2-Interferon IFNJ wird von T-Zellen und natür-
lichen Killerzellen sezerniert.
Die antivirale Wirkung der Interferone greift auf allen
Ebenen der Virusreplikation: Virus-Aufnahme, Transkrip-
tion, Translation, Reifung und Freisetzung. Zellzyklus-
Komponenten wie c-myc, Retinoblastom-Protein (Rb), oder
Cyclin D3 (7 Kap. 7.1.3) sind Ziele der antiproliferativen und
apoptotischen Wirkung der Interferone. Die immunoregu-
latorische Wirkung insbesondere von Interferon-J besteht
in der Induktion der Expression von Antigen-präsentieren-
den MHC-Proteinen der Klasse I und II sowie der Modula-
tion der Antigen-Prozessierung durch das Proteasom.
Typ-1- und Typ-2-Interferone signalisieren über unter-
schiedliche Oberflächen-Rezeptoren. Der Rezeptor für In-
terferon-D/E besteht aus zwei Untereinheiten: Interferon-
D/E-Rezeptor-1 (IFNAR1) und Interferon-D/E-Rezeptor-2
25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
. Abb. 25.30. Interferon-α/β Signaltransduktion. IFND/E bindet
an einen Rezeptorkomplex aus IFNAR1 und IFNAR2. Nach Tyrosin-
Phosphorylierung des IFNAR1 durch assoziierte Janus-Kinasen werden
STAT1/STAT2-Komplexe phosphoryliert. Diese induzieren nach Bin-
dung eines weiteren Proteins (IRF9 = interferon regulatory factor 9) die
Transkription spezifischer Gene. Die STAT-Faktoren liegen möglicher-
weise in prä-assoziierter Form an den IFNAR2 gebunden vor (gestri-
chelter Doppelpfeil). IFNAR = Interferon-D/E-Rezeptor; ISGF = inter-
feron-D-stimulated gene factor; ISRE = interferon-stimulated response
element
(IFNAR2) (. Abb. 25.30). IFNAR1 bindet die Janus-Kinase
Tyk2, IFNAR2 die Janus-Kinase Jak1. Nach Liganden-
bindung dimerisieren die Rezeptoren, die Janus-Kinasen
werden durch Tyrosin-Phosphorylierung aktiviert und
phosphorylieren Tyrosin-Reste im cytoplasmatischen Teil
des IFNAR1. Die am IFNAR2 präassoziierten dimerisier-
ten STAT-Faktoren STAT1 und STAT2 werden anschlie-
ßend über einen noch unverstandenen Mechanismus am
IFNAR1 rekrutiert und Tyrosin-phosphoryliert. Die akti-
vierten STAT1/STAT2-Heterodimere binden nach Ablö-
sung vom Rezeptor den Transkriptionsfaktor IRF9, der
zur interferon regulatory factor (IRF)-Familie gehört. Der
Komplex aus STAT1, STAT2 und IRF9 wird auch als inter-
feron-stimulated gene factor-3 (ISGF3) bezeichnet. Dieser
797 25
. Abb. 25.31. Antivirale Wirkung von IFNα/β durch Blockade der
Proteinsynthese. Die Signaltransduktion von IFND/E führt zur Expres-
sion von inaktiver Protein-Kinase R (PKR). Nach Bindung doppelsträn-
giger RNA (dsRNA) während der Virusreplikation wird das Enzym
aktiviert. Dies führt zur Hemmung der Initiation der Proteinsynthese
Komplex transloziert in den Zellkern und bindet hier an
interferon stimulated regulatory elements (ISRE) von Inter-
feron-D/E-Zielgenen. IFN-D/E-induziert die Expression
von Protein-Kinase R (PKR). Dieses Enzym liegt zunächst
in inaktiver Form vor, wird aber durch Bindung an doppel-
strängige RNA, die nach Virusreplikation gebildet wird,
durch Autophosphorylierung an Serin-Threonin-Resten
aktiviert (. Abb. 25.31). Die aktivierte PKR phosphoryliert
den eukaryotischen Protein-Synthese-Initiationsfaktor 2D
(eIF2D, 7 Kap. 9.1.5). Der modifizierte eIF2D kann nicht
mehr die Proteinsynthese initiieren und hemmt somit auch
die Bildung viraler Proteine.
Neben der Hemmung der Proteinbiosynthese induziert
Interferon D/E auch die 2c-5c-Oligo-A-Synthetase-Expres-
sion (2c-5c-OASE) (. Abb. 25.32). Die 2c-5c-OASE wird
über doppelsträngige RNA aktiviert. Die aktive 2c-5c-OASE
homopolymerisiert ATP zu 2c-5c-Oligoadenylat. Im Unter-
schied zu den üblichen 3c-5c-Phosphodiesterbindungen
handelt es sich hier um eine 2c-5c-Phosphodiesterbindung.
2c-5c-Oligo-A bindet inaktive RNAseL und aktiviert dieses
Enzym, welches virale mRNA zu Nucleotiden abbaut.
Im Unterschied zu Interferon-D/E wirkt Interferon-J
(IFNJ) als Dimer (. Abb. 25.33). Es bindet an einen Re-
zeptorkomplex, der aus zwei D- und zwei E-Ketten besteht.
An die D-Ketten bindet konstitutiv Jak1, an die E-Ketten
die Janus-Kinase Jak2. Nach Ligandenbindung und Re-
zeptoraktivierung werden die Janus-Kinasen durch Trans-
 798 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

phosphorylierung aktiviert und können Tyrosin-Reste im

cytoplasmatischen Teil der D-Rezeptor-Untereinheit phos-
phorylieren. Nach Rekrutierung von STAT1 an die Phos-
photyrosin-Reste der D-Rezeptorketten sowie dessen fol-
gender Tyrosin-Phosphorylierung löst sich der Transkrip-
tionsfaktor STAT1 vom Rezeptor, homodimerisiert und
transloziert in den Zellkern. Das Dimer bindet hier an so
genannte interferon-J activated sequences (GAS Elemente)
von IFN-J-Zielgenen, wie die für die Antigen-Präsentation
wichtigen MHC-I und MHC-II Gene, deren Expression
hierdurch stimuliert wird.

25
. Abb. 25.32. Antivirale Wirkung von IFNα/β durch mRNA-Abbau
nach Aktivierung von RNaseL. Die Signaltransduktion von IFND/E
führt zur Expression inaktiver 2c-5c-Oligo-A-Synthetase (OASE). Nach
Bindung doppelsträngiger RNA während der Virusreplikation wird das
Enzym aktiviert. Es synthetisiert daraufhin 2c-5c-Oligo A, welches nach
Bindung die RNaseL aktiviert. Diese hydrolysiert mRNA, weshalb keine
Proteinsynthese in der Zelle mehr stattfinden kann. PDE = Phospho-
diesterase
25.8.5
In Kürze
Interferone hemmen die Virusvermehrung in nahezu
allen Zellen. Über Änderung der Bildung von Zellzyklus-
komponenten, Induktion der Antigenpräsentation
sowie durch Hemmung der Translation und Abbau der
mRNA wird die Virusreplikation inhibiert. Interferone
signalisieren über den Jak/STAT-Weg.
Pathobiochemie: Septischer
Schock und multiples Organ-
versagen

Für die Abwehr lokaler bakterieller Infekte ist die unspezi-

fische Immunantwort von großer Bedeutung (7 Kap. 34.1).
Ihre frühen Ereignisse sind die Freisetzung pro-inflamma-
torischer Cytokine (TNFD, IL-1, IL-6, IL-12 und IL-18)
sowie die Bildung von chemotaktischen Faktoren (Chemo-
kine, Komplementfaktoren C3a, C5a), Prostaglandinen,
Thromboxanen und Prostazyklinen, die auf die Gefäße im
Sinne einer Vasodilatation und Permeabilitätszunahme
wirken. Diese Vorgänge sind lokal und leiten die spezifische
Immunantwort u.a. durch Bildung von IL-12 und IL-18
sowie IL-4 und IL-10 ein.
! Der Übertritt bakterieller Infektionen in die Zirkulation
führt zu einer systemischen generalisierten Entzün-
dungsreaktion.

Die Reaktionen der unspezifischen Immunantwort sind

. Abb. 25.33. Interferon-γ-Signaltransduktion. IFNJ bindet als
Dimer an einen Komplex aus zwei D- und zwei E-Rezeptorketten.
Der aktivierte Rezeptor löst die Jak/STAT-Signaltransduktionskaskade
aus. Dies führt zur Bildung von STAT1-Homodimeren (GAF = J inter-
feron activated factor), die nach Translokation in den Zellkern an GAS-
Elemente binden (GAS = J interferon activated site)
normalerweise streng lokalisiert und haben den Sinn, die
bakterielle Infektion auf den Ort ihrer Entstehung zu be-
schränken und zu beenden (7 Kap. 34.5).
Kommt es jedoch zu einem Übertritt von Bakterien,
z.B. Gram-negative Pathogene und bakteriellen Endotoxi-
nen in die Blutbahn, so entwickelt sich eine Sepsis. Diese
verläuft unter einer Symptomatik, die auch nach schweren
Traumen oder Verbrennungen vorkommt und als systemi-
sche Entzündungsreaktion oder SIRS (systemic inflamm-
atory response syndrome) bezeichnet wird. Unter dem Be-
griff Sepsis versteht man heute ein durch bakterielle Infek-
tion ausgelöstes SIRS. Es handelt sich hierbei um eine akut
25.8 · Signaltransduktion über Rezeptoren mit assoziierten Kinasen
. Abb. 25.34. Aktivierung von Zellen durch das bakterielle Lipo-
polysaccharid. LPS = bakterielles Lipopolysaccharid; LBP = LPS-
Bindeprotein; TLR-4 = toll like receptor-4; IL = Interleukin; IFN = Inter-
feron; TRAF = TNF-receptor associated factor; MyD88 = myeloid differen-
lebensbedrohliche Situation. Man schätzt, dass z.B. in den
USA jährlich 300.000–500.000 Sepsisfälle vorkommen, wo-
bei die Mortalität zwischen 20 und 40% liegt. In den frühen
Stadien der Sepsis ist ein nicht beherrschbares Absinken des
Blutdrucks, ein septischer Schock, die häufigste Todesur-
sache. In späteren Stadien der Sepsis kommt es zum Multi-
organversagen oder MOF (multi organ failure). Dieser Zu-
stand ist mit einer Mortalität von 60–70% verknüpft.
Die bakteriellen Toxine haben eine direkte toxische
Wirkung. Daneben ist die generalisierte Aktivierung von
Mediatorzellen wie Makrophagen und Granulozyten durch
die bakteriellen Toxine eine Hauptursache für den lebens-
bedrohlichen Verlauf des SIRS. Besonders gut ist dies für
das so genannte Lipopolysaccharid (LPS) gezeigt, einem
wichtigen Bestandteil der Zellwand Gram-negativer Bak-
terien. In . Abb. 25.34 sind wichtige Schritte beim Zustan-
dekommen des SIRS zusammengestellt. Die einzelnen Stu-
fen sind:
799 25
tiation (88 kDa), Mal = MYD88 adapter-like; IRAK = IL-1 receptor asso-
ciated kinase; TAK = TGFE-activated kinase; TAB = TAK binding protein;
NF-NB = nuclear factor NB; INB = inhibitor of NF-NB; IKK = INB Kinase,
PLA2 = Phospholipase A2, ACT = Acetyltransferase
4 Von Gram-negativen Bakterien erzeugtes LPS wird
im Blut gebunden an das LPS-Bindeprotein trans-
portiert. Dieser Komplex ist ein Ligand für einen als
CD14 bezeichneten Rezeptor auf Makrophagen/
Monozyten und neutrophilen Granulozyten. Darüber
hinaus bestehen Anhaltspunkte dafür, dass LPS
auch direkt Endothelzellen der Blutgefäße aktivieren
kann
4 CD14 ist ein GPI-verankertes Protein (7 Kap. 9.2.4)
ohne cytoplasmatische Domäne, kann also keine Signal-
weiterleitung ins Cytosol auslösen
4 Der LPS/CD14-Komplex bindet an den TLR-4 (toll like
receptor 4). Dieser gehört zu einer aus 10 Mitgliedern
bestehenden Familie von Rezeptoren, die wegen ihrer
Ähnlichkeit mit dem bei Drosophila vorkommenden
Membranrezeptor Toll als toll like bezeichnet werden
und für die Erkennung von bakteriellen Strukturen ver-
antwortlich sind
 800 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

. Tabelle 25.7. Symptomatik der generalisierten Freisetzung pro-

inflammatorischer Zytokine (die Angaben basieren auf Versuchen,
bei denen Versuchspersonen die angegebenen Zytokine intra-
venös in relativ hohen Konzentrationen erhalten haben; vgl. auch
Abb. 25.35). (Nach Slifka, Whitton (2000) J Mol Med 78(2): 74–80)
Symptome Ausgelöst durch
Akute respiratorische Insuffizienz TNFα, IL-2, IL-12
(respiratory distress syndrom)
Hypotension TNFα, IL-2, IL-12
Schädigung des Gastrointestinaltraktes TNFα, IL-2, IL-12
(Nekrose, Durchfälle, Hämorrhagie)
Arrhythmie TNFα, IL-2, IL-12
25 Mikrothrombosen TNFα, IL-2, IL-12
Thrombocytopenie TNFα, IL-2, IL-12
Gesteigerte Kapillarpermeabilität TNFα, IL-2,
Fieber TNFα, IL-1, IL-6, IL-12,
IL-18, IFNJ
. Abb. 25.35. Serumspiegel von TNFα, IL-6, IL-8 und IL-10 nach
Renale Tubulusnekrose TNFα intravenöser Gabe von LPS-Endotoxin. Gesunde Versuchspersonen
erhielten LPS-Endotoxin in einer Menge von 2 ng/kg Körpergewicht.
Veränderte Serum-Akutphase-Protein IL-6, IL-1
Die Serumkonzentrationen der Cytokine wurden zu den angegebenen
Spiegel (z. B. CRP)
Zeitpunkten bestimmt (nach Lin et al. (2000) Surgery 127: 117–126)

4 Die durch LPS induzierte Aktivierung von TLR-4 führt
über sehr komplexe, im Einzelnen noch nicht aufge-
klärte Signalwege zur Freisetzung pro-inflammatori-
scher Cytokine. Zu diesen gehören TNFD, IL-1E, IL-6,
IL-8 sowie Interferon-J
4 Diese lösen über verschiedene Mechanismen die mas-
sive und generalisierte Freisetzung von reaktiven Sauer-
stoffspezies (ROS, reactive oxigen species) aus, z.B. Super-
oxidanion (O2–), Stickstoffmonoxid (NO), sowie von
Prostaglandinen, Hypochlorit und dem Plättchenakti-
vierungsfaktor (PAF, 7 Kap. 18.1.1)
! Die überschießende Produktion von pro-inflammato-
rischen Cytokinen und niedermolekularen Mediatoren
löst Hypotension und multiples Organversagen aus.
Beim SIRS kommt es zu einer generalisierten Freisetzung
von inflammatorischen Cytokinen (. Abb. 25.35) sowie der
oben genannten Mediatoren, die in den verschiedensten
Zellen Cytokin-vermittelt gebildet werden. Die . Tab. 25.7
zeigt eine Auswahl klinischer Symptome, die nach intra-
venöser Gabe hoher Konzentrationen pro-inflammato-
rischer Cytokine beobachtet wurden. Wird eine Freisetzung
dieser Cytokine durch LPS ausgelöst, ergibt sich ein kom-
pliziertes Netzwerk von Reaktionen, die für den Abfall des
Blutdrucks, die Verminderung der Herzleistung, das Auf-
treten von Mikrothrombosen, die Hypoperfusion von Ge-
weben, die Gewebszerstörung und schließlich das Multi-
organversagen verantwortlich sind. Einen Überblick über
die dabei auftretenden Zusammenhänge gibt . Abbil-
dung 25.36.

. Abb. 25.36. Multiorganversagen als

Folge einer bakteriell verursachten
Sepsis. (Einzelheiten 7 Text)
25.9 · Besondere Aktivierungsmechanismen
801 25

Obwohl man also einigermaßen klare Vorstellungen
über das Zustandekommen des SIRS hat, ist die Umsetzung
dieser Erkenntnisse in therapeutische Maßnahmen bisher
enttäuschend verlaufen. Antikörper gegen TNFα, Gabe von
IL-1-Rezeptorantagonisten sowie Hemmstoffe der Prosta-
glandin- oder NO-Biosynthese vermögen die Mortalitäts-
rate bestenfalls um 10% zu verringern.
! Beim SIRS ist das Gleichgewicht zwischen pro-inflamma-
torischen und anti-inflammatorischen Cytokinen gestört.
Bei der Immunantwort besteht in der Regel ein Gleichge-
wicht zwischen pro- und anti-inflammatorischen Cytokinen.
SIRS ist dadurch gekennzeichnet, dass dieses Gleichgewicht
zugunsten der pro-inflammatorischen Cytokine gestört ist.
Überwiegen dagegen die anti-inflammatorischen Cytokine,
kommt es zu einer Hemmung der Immunantwort. Nur
wenn das Gleichgewicht erhalten bleibt, haben die Patien-
ten eine einigermaßen gute Prognose.

In Kürze
Die dramatische Symptomatik der Sepsis – des septischen
Schocks und des multiplen Organversagens – wird da-
durch verursacht, dass die Vorgänge, die bei der lokalisier-
ten, unspezifischen Immunantwort auftreten, durch den
Übertritt von bakteriellen Pathogenen ins Blut in genera-
lisierter Form ablaufen und dabei die verschiedensten
Organsysteme und Gewebe schwer schädigen. Im Einzel-
nen beruht dies darauf, dass die Sepsis eine systemische
Entzündungsreaktion oder SIRS (systemic inflammatory
response syndrome) auslöst. Diese führt zunächst zu:
4 einer gesteigerten und generalisierten Freisetzung
pro-inflammatorischer Cytokine durch Makrophagen/
Monozyten und Granulozyten sowie Endothelzellen
und
4 einer dadurch ausgelösten Freisetzung von Mediatoren
wie reaktiven Sauerstoffspezies (ROS), NO, Prostaglan-
dinen sowie dem Plättchenaggregationsfaktor (PAF)
Die gesteigerte NO-Bildung löst eine allgemeine Gefäßre-
laxation mit Blutdruckabfall, am Myokard darüber hinaus
eine Verminderung der Kontraktilität und der Herzleistung
aus.
Am Zustandekommen des sich anschließenden Organ-
versagens sind außer den genannten Mediatoren u.a. eine
Verminderung der Organperfusion sowie Mikrothromben
verantwortlich, weil die Fibrinbildung die Fibrinolyse über-
wiegt.

25.9 Besondere Aktivierungs- Drei Isoformen dieser Enzyme sind gut charakterisiert:
mechanismen die endotheliale (eNOS), die neuronale (nNOS) und die
induzierbare (iNOS) NO-Synthase. Die konstitutiv expri-
25.9.1 Stickstoffmonoxid (NO) und mierten eNOS und nNOS werden durch eine Erhöhung der
lösliche Guanylatcyclasen Ca2+/Calmodulin-Konzentration aktiviert. Im Gegensatz
dazu wird die iNOS, die hauptsächlich in Makrophagen
Stickstoffmonoxid (NO) kann als Gas frei durch die Zell-
membran diffundieren und ist daher ein wichtiges intra-
und interzelluläres Signalmolekül (. Abb. 25.37). Aufgrund
seiner extrem kurzen Halblebenszeit (2–30 Sekunden) kann
es vom Ort seiner Synthese nur in die umliegenden Gewebe
und Zellen einwandern. Zu seinen wichtigsten physio-
logischen Funktionen gehören die Relaxation der glatten
Gefäßmuskulatur (. Abb. 25.37) und die Hemmung der
Thrombozytenaggregation. Die NO-Synthasen (NOS) kata-
lysieren die Bildung von NO aus Arginin (. Abb. 25.37).

Infobox
Nobelpreis für biologische Funktion von NO
Die Amerikaner Robert Furchgott, Ferid Murad und
Louis Ignarro wurden 1998 für die Entdeckung der
großen Bedeutung von NO für die Blutversorgung von
. Abb. 25.37. Wirkungsweise des Stickstoffmonoxids (NO). Das
Organen sowie der biologischen Funktion als Boten-
in Endothelzellen aus Arginin unter Sauerstoffeinwirkung erzeugte
stoff im Organismus mit dem Nobelpreis für Physiolo- Stickstoffmonoxid (NO-Synthase-Reaktion 7 Kap. 13.6.3) diffundiert
gie und Medizin ausgezeichnet. in die umliegenden glatten Muskelzellen. Dort aktiviert es die lösliche
Guanylatcyclase und führt somit zur Vasodilatation
 802 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion

meinsame Expression beider Untereinheiten führt zu einer

katalytisch aktiven GC. In den C-Termini beider Untereinhei-
ten befinden sich die Cyclase-Homologiedomänen, die die
katalytische Aktivität besitzen und stark den entsprechenden
Domänen der Adenylatcyclasen ähneln. Die Aktivität dieser
Enzyme verhält sich proportional zur vorhandenen NO-
Konzentration. Im N-terminalen Bereich ist an konservierte
Histidinreste eine prosthetische Hämgruppe gebunden, die
essentiell für die Bindung von NO an die GC ist.
Die Guanylatcyclase katalysiert die folgende Reaktion:

GTP o 3c,5c-cyclo-GMP + Pyrophosphat

25
cGMP ist eine dem cAMP analoge Verbindung.
Außer seiner Funktion als Stimulator der löslichen
Guanylatcyclase dient NO im Nervensystem als Neuro-
transmitter (nitrinerge Neuronen) bzw. im Immunsystem
als Bestandteil des Verteidigungssystems gegen Bakterien.

25.9.2 Membrangebundene
Guanylatcyclasen

! Membrangebundene Guanylatcyclasen sind Rezep-

toren für natriuretische Peptide und Guanyline.

Membranständige Guanylatcyclasen unterscheiden sich

von den Adenylatcyclasen dadurch, dass sie nur eine einzige
Transmembran-Domäne enthalten und durch extrazellu-
läre Liganden-Bindung aktiviert werden (. Abb. 25.38b).
Im Gegensatz zu den heterodimer vorliegenden lösli-
chen Guanylatcyclasen bilden die membrangebundenen
Guanylatcyclasen Homodimere.
Membranständige Guanylatcyclasen kommen in sieben
Isoformen vor: GC-A bis GC-G. Bislang sind nur die phy-
siologischen Liganden für GC-A, GC-B und GC-C be-
kannt:
b
4 GC-A und GC-B binden das atriale natriuretische
. Abb. 25.38. Guanylatcyclasen. (a) Lösliche Guanylatcyclasen. Peptid (ANP), sowie die natriuretischen Peptide B
Diese bestehen aus zwei verschiedenen Untereinheiten (D und E), die und C (7 Kap. 28.4.2)
im N-terminalen Bereich ein als prosthetische Gruppe gebundenes
4 GC-C bindet die Guanyline, eine aus drei Typen be-
Häm enthalten, welches die Bindung mit NO eingeht. Im C-terminalen
Bereich befinden sich die Guanylatcyclase-Domänen. (b) Membran- stehende Klasse von Peptiden, die im Intestinaltrakt,
gebundene Guanylatcyclasen. Diese bilden Homodimere und binden den Nieren sowie im lymphatischen Gewebe gebildet
über die extrazelluläre Region ihre Liganden. Intrazellulär findet sich werden
die Kinase-Homologiedomäne, die Gelenkregion und im C-Terminus
die Guanylatcyclase-Domäne
Infobox
Reise-Diarrhöe
und anderen Zellen des Immunsystems vorkommt, nicht Das hitzestabile Enterotoxin von Enterobakterien bindet
Ca2+-abhängig reguliert, sondern durch eine Reihe von ebenfalls an die membranständige GC-C Isoform und
Cytokinen induziert. kann diese aktivieren. Der Anstieg der intrazellulären
Seine physiologische Wirkung entfaltet NO haupt- cGMP-Spiegel führt in der Folge zu einer Verschiebung
sächlich über die Aktivierung der NO-sensitiven, löslichen des Elektrolyt-Gleichgewichts. Pathophysiologische
Guanylatcyclasen (GC) (. Abb. 25.38a). Diese werden in Folge dieser Veränderung der Elektrolyt-Homöostase
nahezu allen Säugetierzellen exprimiert und bestehen aus ist die bekannte Durchfallerkrankung.
zwei verschiedenen Untereinheiten (D und E). Nur die ge-
25.9 · Besondere Aktivierungsmechanismen
Die membranständige Guanylatcyclase besteht aus einer
extrazellulären Ligandenbindungsregion, einer Transmem-
bran-Domäne und einer Intrazellulärregion. Der cytoplas-
matische Bereich enthält eine Kinase-Homologiedomäne,
eine amphipathische Gelenkregion und die Cyclase-Homo-
logiedomäne (. Abb. 25.38b). Es wird angenommen, dass
die Kinase-Homologiedomäne ihre katalytische Aktivität
verloren hat, da katalytisch wichtige Aminosäuren mutiert
sind. Sie scheint jedoch einen negativ-regulatorischen Ein-
fluss auf die Cyclaseaktivität zu haben. Die Gelenkregion
vermittelt bei der Dimerisierung den Kontakt der beiden
Untereinheiten.
Infobox
Sildenafil (Viagra )®
Sowohl die Dauer als auch das Ausmaß einer Erektion
hängt vom Blutfluss in das Corpus cavernosum penis ab.
Dieses ist ein arterieller Schwellkörper, der im nicht eri-
gierten Zustand aufgrund der angespannten ringförmigen
Muskulatur in der Arterienwand blutleer gehalten wird. Im
Verlauf der Erektion wird Stickstoffmonoxid (NO) produ-
ziert, welches in den betreffenden Muskelzellen die Bil-
dung von cGMP induziert. Die Muskeln entspannen sich
und arterielles Blut kann in den Schwellkörper fließen und
damit die Erektion auslösen.
®
Viagra wird zur Behandlung erektiler Dysfunk-
tionen eingesetzt und stellt einen potenten selektiven
Inhibitor der cGMP-spezifischen PDE5 dar, die das im
Corpus cavernosum gebildete cGMP wieder zu GMP ab-
25.9.3 cGMP-Effektormoleküle
! cGMP aktiviert cGMP-abhängige Kinasen und cGMP-
regulierte Ionenkanäle.
Wie für cAMP sind eine Reihe von intrazellulären cGMP-
bindenden Proteinen beschrieben worden (. Tabelle 25.8).
cGMP-abhängige Proteinkinasen. Diese zur Familie der
Serin-/Threoninkinasen gehörenden Enzyme finden sich
in besonders hoher Konzentration in glatten Muskelzellen,
Thrombozyten und im Kleinhirn. Die wichtigste Funktion
. Tabelle 25.8. Intrazelluläre cGMP-Bindungsproteine
Bindungsprotein Vorkommen
cGMP-abhängige Proteinkinasen glatte Muskulatur
Thrombocyten
cGMP-abhängige Na+-Kanäle Retina (Zapfen und Stäbchen)
olfaktorisches Epithel
renales Sammelrohr
cGMP-abhängige Phosphodiesterasen viele Zellen
803 25
Nach Bindung des Liganden kommt es zur Phosphory-
lierung des intrazellulären Teils des Rezeptors, zur Aktivie-
rung des Enzyms und somit zur Bildung des second messen-
gers cGMP.
cGMP-abbauende Phosphodiesterasen hydrolysieren
cGMP zu GMP und sind in Säugergeweben weit verbreitet.
Sowohl die Dauer als auch die Intensität eines cGMP-ver-
mittelten Signals werden durch Phosphodiesterasen (PDE)
reguliert. Bislang sind elf PDE-Isoformen bekannt, wobei
PDE5, PDE6 und PDE9 eine hohe Spezifität für cGMP auf-
weisen.
®
baut. Somit kommt es beim Einsatz von Viagra im Verlaufe
einer normalen sexuellen Stimulation durch Verhinderung
des Abbaus von cGMP zu einem erhöhten intrazellulären
Spiegel und damit zu einer verstärkten Erektion. Ohne die
®
sexuelle Erregung löst Viagra keine Erektion aus.
®
Fatale Folgen können eintreten, wenn Viagra gleich-
zeitig mit Nitrat-/Nitrithaltigen Medikamenten oder NO-
Donatoren eingenommen wird. Zu diesen gehören auch
die als Rauschmittel verwendeten und unter dem slang-
Namen Poppers bekannten Drogen. Sie bestehen aus den
leicht flüchtigen Substanzen Amylnitrit, Butylnitrit oder
Isobutylnitrit und werden direkt aus Glasampullen inhaliert.
Durch die kombinierte Wirkung von NO-Donatoren und
®
Viagra , welches die Wirkung von NO verlängert, droht ein
akuter lebensbedrohlicher Blutdruckabfall.
der cGMP-abhängigen Proteinkinase der glatten Muskula-
tur beruht auf ihrer relaxierenden Wirkung. Dies ist übri-
gens auch das therapeutische Prinzip aller NO-freisetzen-
den Vasodilatatoren wie Nitroprussit oder dem zur Be-
handlung der akuten koronaren Herzkrankheit eingesetzten
Nitroglycerin. Ähnlich der Proteinkinase C (. Abb. 25.24)
enthält der N-terminale Bereich der cGMP-abhängigen
Proteinkinasen eine autoinhibitorisch wirksame Pseudo-
substrat-Region. Durch die Bindung von cGMP an die Ki-
nase wird die negativ-regulatorische Wirkung der Pseudo-
substrat-Region aufgehoben.
Effekt
Relaxation
Hemmung der Aggregation
Photorezeption
olfaktorische Rezeption
Natriurese
cGMP-Abbau
 804 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
Substrate der cGMP-abhängigen Proteinkinasen sind
z.B. Proteine, die an der Regulation der intrazellulären Cal-
cium-Konzentration beteiligt sind wie die IP3-Rezeptoren
(7 Kap. 25.4.3).
cGMP-abhängige Ionenkanäle. Sie finden sich in den
Photorezeptorzellen, einzelnen olfaktorischen sensori-
schen Neuronen sowie dem Epithel der renalen Sammel-
rohre (. Tabelle 25.8). In den ersten beiden Systemen
spielt der cGMP-abhängige Natriumkanal eine wichtige
Rolle bei der Aufrechterhaltung des im unstimulierten
In Kürze
25
Stickstoffmonoxid (NO) ist ein wichtiger intra- bzw. inter-
zellulär wirkender Signalmetabolit. Es aktiviert lösliche
Guanylatcyclasen. Das dabei entstehende cGMP wirkt
relaxierend auf glatte Muskelzellen und ist ein Ligand für
Ionenkanäle und aktiviert Phosphodiesterasen. Außer
25.10 Regulation der Signal-
transduktion
Die Termination einer Signalkaskade muss ebenso genau
kontrolliert werden wie ihre Initiation. Rückkopplungs-
mechanismen sind daher von großer pathophysiologischer
Bedeutung. Ein Ausfall dieser Mechanismen innerhalb
einer Signaltransduktionskaskade führt zu ähnlichen Er-
scheinungen wie eine Hyperstimulation. So verursacht z.B.
die Dysregulation der Signaltransduktion eines pro-inflam-
matorischen Cytokins den Übergang von akuter zu chroni-
scher Entzündung, die im Falle der Leber zur Cirrhose
führen und schließlich in der Manifestation eines hepato-
zellulären Karzinoms enden kann.
Infobox
Messung der Rezeptorexpression
Neben den bereits erwähnten Methoden der Liganden-
bestimmung (RIA, ELISA, 7 Kap. 25.2.4) existieren ver-
schiedene Verfahren, um die Anzahl der Rezeptoren für
extrazelluläre Signalmoleküle auf Zellmembranen zu
bestimmen.
Die Anzahl der Cytokinrezeptoren auf Zelloberflächen
ist im Unterschied zu nutritiven Rezeptoren (z.B. dem LDL-
Rezeptor) sehr gering. Man findet zwischen 100 und 5.000
Cytokinrezeptoren im Vergleich zu 500.000 LDL-Rezepto-
ren pro Zelle. Dennoch lassen sich diese relativ niedrigen
Rezeptorzahlen mit Hilfe der so genannten FACS-(fluores-
cence activated cell sorting)-Analyse im Durchflusszyto-
Zustands niedrigen Membranpotentials dieser Zelle. Erst
durch Aktivierung einer cGMP-spezifischen Phosphodi-
esterase kommt es zur Hyperpolarisierung dieser Sinnes-
zellen und damit zur Reizweiterleitung (7 Kap. 23.2.1). In
den Sammelrohrepithelien ist der cGMP-abhängige Na-
triumkanal möglicherweise verantwortlich für die Stimu-
lierung der Natriurese durch das atriale natriuretische
Peptid (7 Kap. 28.4.2).
cGMP-abhängige Proteinkinasen und Ionenkanäle ent-
halten ein so genanntes cNMP (cyclic nucleotide monophos-
phate)-Motiv als cGMP-bindende Sequenz.
durch lösliche Guanylatcyclasen kann cGMP auch durch
membrangebundene Guanylatcyclasen gebildet werden.
Diese stellen Rezeptoren für die natriuretischen Peptide
und Guanyline dar.
25.10.1 Rezeptorexpression
Die primäre Voraussetzung, damit eine Zelle auf Cytokine
reagieren kann, ist das Vorhandensein von spezifischen
Rezeptoren auf der Zelloberfläche. Zusätzlich ist die Zu-
gänglichkeit des Rezeptors für das Hormon/Cytokin von
Bedeutung: Eine polarisierte Epithelzelle, die auf endokrine
Botenstoffe reagieren soll, muss die notwendigen Rezepto-
ren auf ihrer basolateralen, dem Blut zugewandten Seite
exprimieren. In den cytoplasmatischen Bereichen einer
Reihe von Transmembranrezeptoren sind Signalsequen-
zen für die polare Expression identifiziert worden, die
den Transport des Rezeptors an die basolaterale oder api-
kale Seite einer polaren Zelle vermitteln. Somit ist nicht
nur die Anzahl der Rezeptoren, sondern auch ihre Lokali-
sation von zentraler Bedeutung für die Stimulierbarkeit
einer Zelle.
meter bestimmen. Die Rezeptoren werden auf der Zell-
oberfläche über die spezifische Bindung eines Fluoreszenz-
markierten Antikörpers nachgewiesen. Diese Methode
ermöglicht auch die Sortierung lebender Zellen nach der
Ober flächenexpression bestimmter Proteine. Alternativ
lässt sich die Zahl der Oberflächenrezeptoren auch mit Hilfe
von Bindungsstudien mit radioaktiv markierten Liganden
ermitteln. Hierbei wird die spezifische radioaktive Bindung
als Differenz der gesamten Bindung und der unspezifischen
Bindung errechnet. Durch die Wahl geeigneter Auswer-
tungsverfahren (Scatchard-plots) kann die Anzahl der Bin-
dungsstellen (Rezeptoren) und deren Bindungsaffinitäten
zum Liganden (Cytokin) ermittelt werden.
25.10 · Regulation der Signaltransduktion
. Abb. 25.39. Biosynthese löslicher Rezeptoren. Differentielles
Spleißen (links) einer Rezeptor-prä-mRNA resultiert in der Expression
unterschiedlicher Proteine. Während der Membran-gebundene
Rezeptor transmembranäre und cytoplasmatische Bereiche enthält
(D, E), besteht der lösliche Rezeptor nur aus den extrazellulären
Einige Cytokine signalisieren über Rezeptorkomplexe,
in denen Liganden-bindende Untereinheiten mit Signal-
transduzierenden Untereinheiten assoziiert sind. Häufig
ist die Stimulierbarkeit einzelner Zellen über die Expres-
sion der Liganden-bindenden Rezeptoruntereinheit re-
guliert. Das Fehlen dieser Untereinheit kann in einigen
wenigen Fällen durch das Vorhandensein ihrer löslichen
Form kompensiert werden. Dabei assoziieren Ligand und
lösliche Rezeptoruntereinheit, binden an die Signal-trans-
duzierenden Rezeptorketten und lösen dort die Signalkas-
kade aus.
In der Regel hemmen aber lösliche Rezeptoren die
Signaltransduktion, indem sie den Liganden binden und
so seine Assoziation mit Membran-ständigen Rezeptoren
verhindern.
805 25
Domänen und einem alternativen Carboxy-Terminus (C). Bei der
limitierten proteolytischen Spaltung (rechts) im Extrazellulärteil eines
membranständigen Rezeptors durch eine spezifische Protease
(shedding) entsteht ein löslicher Rezeptor, der keinen alternativen
Carboxy-Terminus enthält
Lösliche Rezeptoren entstehen entweder durch alterna-
tives Spleißen der Prä-mRNA des Transmembranrezeptors
oder werden durch eine Protease-vermittelte Abspaltung
des extrazellulären Teils des Membran-ständigen Rezeptors
(receptor-shedding) generiert (. Abb. 25.39).
25.10.2 Rückkopplungsmechanismen
Zellen reagieren häufig nur transient auf eine Cytokin-
Stimulation. Es existieren mehrere Rückkopplungsme-
chanismen, um die Signaltransduktion bei andauernder
Cytokin-Präsenz zu dämpfen oder sogar ganz zu hemmen.
Eine Überstimulation – besonders an Orten der Cytokin-
freisetzung – wird somit verhindert.
 806 Kapitel 25 · Kommunikation zwischen Zellen: Extrazelluläre Signalmoleküle, Rezeptoren und Signaltransduktion
. Abb. 25.40. Negative Regulation
der Signaltransduktion. Die Modula-
tion und Termination eines Cytokin-
induzierten Signals kann auf verschie-
denen Ebenen der Signaltransduktion
erfolgen: neben der Verfügbarkeit von
Rezeptorkomponenten entscheidet das
Vorhandensein von cytoplasmatischen
Inhibitoren über die Signalintensität.
(Einzelheiten 7 Text)
25
Rezeptoren können Liganden-abhängig durch Endo-
zytose internalisiert werden (. Abb. 25.40) ①. Sie stehen
dann für eine weitere Stimulation nicht mehr zur Verfü-
gung. Die Zelle ist desensitisiert. Internalisierte Rezeptor-
komplexe können nach Ablösung des Liganden zurück
zur Zellmembran transportiert (recycling) oder abgebaut
werden. Degradierte Rezeptoren werden durch Neusyn-
these ersetzt.
Die Desensitisierung durch Phosphorylierung und
Internalisierung von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren ist
in weiten Teilen verstanden. Die Phosphorylierung der
Rezeptoren erfolgt an Serin- oder Threonin-Seitenketten
und kann durch second messenger-aktivierte Kinasen (z.B.
PKA oder PKC) oder über die so genannten G-Protein-
gekoppelten Rezeptorkinasen (GRK) erfolgen. Ein Bei-
spiel hierfür ist die Kinase für den E-adrenergen Rezeptor
(E-ARK bzw. GRK2). Die Phosphorylierung des Rezeptors
erlaubt die Rekrutierung von Proteinen der Arrestin-
Familie. Eine Funktion der Arrestine besteht in der Verhin-
derung der erneuten Bindung von trimeren G-Proteinen
und führt somit zu einer Desensitisierung des Rezeptors.
Sie bewirken zudem die Internalisierung des Rezeptors.
Beide Mechanismen resultieren in einer länger anhalten-
den Desensitisierung. Die Internalisierung der phosphory-
lierten Rezeptoren ist oft Voraussetzung für deren Dephos-
phorylierung und die erneute Präsentation an der Plasma-
membran.
Prinzipiell können alle Signalmoleküle durch Abbau
eliminiert werden: So werden nach Cytokin-Stimulation
Proteasen sezerniert, die das stimulierende Cytokin ab-
bauen. Häufig werden Transkriptionsfaktoren durch das
Proteasom abgebaut ② (. Abb. 25.40). Im Unterschied
dazu dient die Degradation von Inhibitoren der Signal-
weiterleitung (INB-Degradation, . Abb. 25.26). Die Bin-
dung inhibitorischer Proteine an aktivierte Signalmole-
küle ist auf allen Ebenen der Signaltransduktion zu finden:
Liganden können durch lösliche Rezeptoren abgefangen ③,
Kinasen durch spezifische Inhibitoren gehemmt ④, Trans-
kriptionsfaktoren durch Bindung an Inhibitor-Proteine an
der Kerntranslokation und/oder DNA-Bindung gehindert
werden ⑤.
! Die reversible Phosphorylierung von Signalmolekülen
ist bei der Modulation der Cytokin-Signaltransduktions-
wege von zentraler Bedeutung.
Stimulation mit Wachstumsfaktoren, Interleukinen oder
Interferonen löst Phosphorylierungskaskaden aus. Aktivier-
te Kinasen können durch Kinase-Inhibitoren in ihrer en-
zymatischen Aktivität gehemmt und so an der Signalwei-
terleitung gehindert werden. Der Phosphorylierungsstatus
der Signalmoleküle wird durch Serin/Threoninkinasen
oder Tyrosinkinasen und deren Gegenspielern, den Phos-
phatasen bestimmt ⑥ ⑦ (. Abb. 25.40). Für viele Wachs-
tumsfaktor-, Interleukin- und Interferon-Rezeptoren ist
bekannt, dass sich neben Kinasen auch Phosphatasen im
aktivierten Rezeptorkomplex befinden ⑥. Andere Phos-
phatasen wirken im Zellkern ⑦. Für einige Cytokine ist
beschrieben, dass die Inaktivierung basal aktiver Phos-
phatasen einen initialen und essentiellen Schritt für die Si-
gnalweiterleitung darstellt. Erst nach Inhibierung der Phos-
phatasen kommt es zu einer effizienten Phosphorylierung
weiterer Signalproteine durch die Kinasen.
Literatur
Die bei der Signaltransduktion über G-Protein-gekop-
pelte Rezeptoren aktivierten trimeren G-Proteine werden
durch eine intrinsische GTPase Aktivität nach Interaktion
mit GTPase aktivierenden Proteinen (GAP) inaktiviert. Bei-
spiele für GAP sind die regulators of G-protein signalling (RGS)
und die Gα-interacting proteins (GAIP). Auch die second mes-
senger können abgebaut werden. So werden z.B. cAMP und
cGMP durch Phosphodiesterasen hydrolysiert, IP3 zu Inosi-
tol dephosphoryliert, DAG nach Phosphorylierung wieder
zu Phospholipiden umgebaut oder die Ca2+-Konzenteration
in der Zelle durch aktiven Export aus dem Cytosol reduziert.
Interleukine induzieren so genannte suppressors of
cytokine signalling (SOCS)-Proteine. Diese sehr früh nach
Cytokin-Stimulation nachweisbaren Proteine binden und
hemmen aktivierte Janus-Kinasen oder kompetieren mit
STAT-Faktoren um die Bindung am Rezeptor. SOCS-Pro-
teine selbst werden sehr schnell durch das Proteasom abge-
baut und können daher nur kurzfristig in die Signalweiter-
leitung eingreifen. Ähnlich wie die SOCS-Proteine werden
auch an Rezeptor-Tyrosinkinasen inhibitorische Proteine
rekrutiert: APS (adapter-containing PH and SH2 domains)
bindet an den aktivierten PDGF-Rezeptor und inhibiert die
Expression PDGF-induzierbarer Gene. Slap (src-like adap-
tor protein) kompetiert mit der Src-Kinase um die Assozia-
tion am aktivierten PDGF-Rezeptor. Schließlich wird die
In Kürze
Die Cytokin-Signaltransduktion wird reguliert durch:
4 die Anzahl und Lokalisation von Rezeptoren auf der
Plasmamembran
4 lösliche Rezeptoren
4 Phosphorylierung/Dephosphorylierung von Signal-
molekülen
4 Bindung inhibitorischer Proteine an aktivierte Signal-
moleküle
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Ubiquitinylierung und anschließende Degradation des
PDGF-R durch die Bindung des Cbl-Proteins an den akti-
vierten PDGF-R initiiert.
! Die Kerntranslokation von Transkriptionsfaktoren ist ein
entscheidender Schritt der Signaltransduktion.
Häufig werden Transkriptionsfaktoren im Cytoplasma zu-
rückgehalten und translozieren erst nach Stimulation der
Zelle in den Zellkern (. Abb. 25.40). Zum Beispiel bindet
INB an NF-NB und deckt dabei dessen Kernlokalisie-
rungssequenz ab. Erst der Abbau von INB ermöglicht die
Kerntranslokation von NF-NB (7 Kap. 28.4.3). Eine Hor-
mon-induzierte erhöhte Expression von INB kann einer
NF-NB-Aktivierung somit entgegenwirken. STAT-Faktoren
translozieren als phosphorylierte Dimere in den Zellkern
und binden dort an enhancer-Sequenzen Cytokin-indu-
zierter Gene. Protein inhibitors of activated STATs (PIAS)-
Proteine assoziieren spezifisch mit STAT-Dimeren und ver-
hindern so die Promotoraktivierung. Ähnlich wirken Smad
6 und Smad 7 in der TGF-E-Signalkaskade (7 Kap. 25.6.2).
Schließlich findet man in den enhancer-Sequenzen von
Promotoren meist Bindungsstellen für verschiedene Trans-
kriptionsfaktoren. Diese Transkriptionsfaktoren kompe-
tieren um DNA-Bindungsstellen, wenn diese überlappen
(cross-talk).
4 Blockierung der Kerntranslokation von Transkrip-
tionsfaktoren sowie
eine Reihe von Inhibitionsmechanismen wie Internalisie-
rung von Rezeptoren durch Endozytose, proteolytischer
Abbau von Cytokinen, Rezeptoren und Transkriptionsfak-
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