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Naturstoffchemie

RAINER SCHOBERT
GERHARD SPITELLER
OTTO VOSTROWSKY

HO

O
N
HO

Inhaltsverzeichnis
1

Fettsuren
Vorkommen, Struktur und Eigenschaften
Biosynthese und oxidativer Abbau
Mehrfach ungesttigte, essentielle Fettsuren
Synthese von Fettsuren

1
5
9
10

Komplexe Lipide

16

Klassifizierung der Lipide


Acylglycerine, Fette und le
Phospholipide
Etherlipide
Phosphono-, Sphingolipide
Glycolipide
Wachse

16
16
20
26
27
30
31

Lipoproteine und Membranen

34

Mycellen, Monolayer, Vesikel, Liposomen


Lipoproteine und biologische Membranen

34
36

Zucker

40

Einteilung
Monosaccharide
Reaktionen der Monosaccharaide
Monosaccharide mit ungewhnlicher Struktur
Di- und Oligosaccharide
Polysaccharide
Zuckersynthesen: Auf- und Abbau von Kohlehydraten
Physikalisch-chemische Eigenschaften der Monosaccharide
Biochemie der Zucker

Terpene
Struktur und Biogenese terpenoider Verbindungen
Monoterpene
Sesquiterpene
Diterpene
Sesterpene
Triterpene
Tetraterpene, Carotinoide
Polyterpene
Mikrobielle Gewinnung von Terpenen
Vitamine mit Terpenstruktur

Steroide
Struktur, Vorkommen und Nomenklatur
Cholesterin
Zoosterine
Phytosterine
Vitamin D, Calciferol und Cholecalciferol
Gallensuren
Steroid-Sapogenine
Herzwirksame Glykoside, Cardenolide
Bufadienolide
Sexualhormone

40
41
51
70
78
82
94
100
101

107
107
109
121
129
137
138
143
146
148
148

153
153
155
157
158
159
160
162
164
168
171

Corticoide
Ecdysone: Hormone in Insekten und Krebsen
Brassinolide: Pflanzenhormone mit Steroidstruktur
Synthesen und mikrobiologische Umwandlungen

Eicosanoide
Der Arachidonsure-Metabolismus
Der Cyclooxygenase-Weg
Der Lipoxygenase-Weg
Prostanoide aus marinen Organismen
Synthesen von Prostaglandinen und Leukotrienen

Juvenilhormone
Struktur, Vorkommen und Bedeutung
Synthesen
Biologische Wirksamkeit und Verwendung im Pflanzenschutz
Prostanoide aus marinen Organismen

Pheromone
Pheromone Intraspezifische Signalstoffe
Chemische Strukturen von Insekten-Pheromonen
Arachniden- und Algen-Pheromone
Sugetier-Pheromone
Emission, Perzeption und biologische Wirksamkeit
Synthese von Insekten-Pheromonen
Insekten-Pheromone im Pflanzenschutz

10

Aminosuren
Amphoteres Verhalten und isoelektrischer Punkt
Kreislauf des Stickstoffs
Einteilung und Nomenklatur der Aminosuren
Analyse von Aminosuren
Synthesen
Reaktionen von Aminosuren
zur Biochemie der Aminosuren

11

Peptide, Proteine, Eiweistoffe


Peptidbindung, Bauprinzip und Nomenklatur
Einteilung
Strukturen der Proteine
Denaturierung, Spaltung der Peptidbindung
Strukturaufklrung
Biologisch aktive Peptide und Proteine
Skleroproteine
Konjugierte proteine Proteide
Polypeptidsynthesen

12

Vitamine
Fettlsliche Vitamin E
Vitamin K
Vitamin Q
Wasserlsliche Vitamin B1
Vitamin B2
Folsure
Nicotinamid (Vitamin B3)

177
179
180
180

194
194
194
198
199
200

211
211
212
215
199

217
217
218
225
226
226
229
235

238
238
238
240
249
252
260
264

268
268
270
272
283
285
294
310
314
318

348
349
352
354
355
358
361
363

Vitamin B6
Biotin (Vitamin B7)
Pantothensure
Vitamin B12
Vitamib C

13

14

Antibiotika und Cytostatika

364
367
370
372
375

378

Antibiotika, die den Aufbau der Zellwand stren


Penicilline
Cephallosporine
Tetracycline

379
384
385

Antibiotika, die die Zellwand zerstren


Polyenmacrolide
Griseofulvin
Polypeptidantibiotika

386
387
388

Antibiotika, die in die Proteinsynthese eingreifen


Tetracycline
Aminoglykosid-Antibiotika: Streptomycin, Lincomycin
Chloramphenicol
Macrolidantibiotika: Erythromycin, Oleandomycin, Nifimycin
Steroidantibiotika: Fusidinsure

390
390
391
393
393

Antibiotika, die in die Nucleinsuresynthese eingreifen: Rifampicin

393

Antibiotika, die die oxidative Phosphorylierung hemmen: Gramicidin

394

Antibiotika, die imikrobielle Wuchsstoffe inhibieren: Sideramine

394

Cytostatische Antibiotika: Adriamycin, Actinomycin, Calicheamycin

394

Alkaloide

399

Klassifizierung und Biogenese

Alkaloide abgeleitet von Phenylalanin / Tyrosin


Offenkettig-aliphatische: Biogene Amine, Mescalin, Ephedrin, Muscarin
(Benzyl-) Isochinolin-Alkaloide
Papaverin
Morphin
Amaryllis- und Narzissenalkaloide
Bisbenzyl-Isochinolin-Alkaloide: Bambus-Curare

403
405
405
408
408
408

Alkaloide abgeleitet von Tryptophan Indolalkaloide


Einfache Tryptamine: Psilocybin
-Carbolenine und Indolenine
Corynanth-Alkaloide: Yohimbin, Chinin, Strychnin, Toxiferin
Vinca-Alkaloide: Schlssel zu Iboga- und Aspidosperma-Alkaloiden
Mutterkorn-Alkaloide: Lysergsure, Ergotamin

412
412
413
415
416

Alkaloide abgeleitet von Ornithin


Pyrrolidin-Alkaloide: Hygrin, Cuskhygrin
Tropan-Alkaloide: Atropin, Cocain
Pyrrolizidin-Alkaloide: Retronecin, Nitropolyzonamin

417
418
419

Alkaloide abgeleitet von Lysin


Piperidin-Alkaloide: Coniin, Lobelin, Casin, Carpain
Granatapfelbaum-Alkaloide: Pseudopelletierin
Chinolizidin-Alkaloide: Lupinin, Cytisin, Spartein
Pyridin-Alkaloide: Nicotin, Anabasin
Chinolin-Alkaloide: Chinin, Galipin

420
421
421
422
423

Isolierung und Strukturaufklrung von Naturstoffen

424

Definition, Historie und Klassifizierung


Naturstoffe im weiteren Sinne sind alle organischen Stoffe, die die Natur produziert. Nach dieser
Definition umfat das Gebiet der Naturstoffe ein sehr breites Spektrum von Verbindungen. Ein
Naturstoff wre demnach auch CO2, das in der Atemluft den Krper verlt und als Endabbauprodukt
des Stoffwechsels anzusehen ist. Naturstoffe sind so von einfachsten Moleklen angefangen bis zu
komplexen Proteinen und Nukleinsuren alle Stoffe, die Organismen produzieren. Obgleich die
Anzahl und strukturelle Vielfalt der aus lebendem Material isolierten Verbindungen enorm ist,
berrascht es, da sich einige wenige Verbindungsklassen immer wieder in allen uns bekannten
Lebensformen finden. Sie sind offensichtlich essentiell fr das Leben an sich.
Ursprnglich waren die Chemiker ausschlielich mit der Isolierung und Strukturaufklrung
von Naturstoffen beschftigt. Letztere wurde fast immer zunchst durch Abbau- und Derivatisierungsreaktionen und durch Totalsynthese der vermuteten Struktur durchgefhrt. Dieses heroische
Zeitalter der Organischen Chemie dauerte von Whlers Synthese des Harnstoffs 1828 bis in die 70er
Jahre des 20. Jahrhunderts, und die moderne Organische Chemie ist noch immer zu einem Groteil
geprgt von dieser Denk- und Vorgehensweise. Auch dort, wo Methodenentwicklung im Vordergrund
der Forschung steht, dient sie letztlich der eleganten Anwendung auf die Synthese hochkomplexer
Naturstoffe. Nischen ohne jeglichen Bezug zur Naturstoffchemie sind noch immer selten (e.g.
Chemie der Fullerene).
Fr die meisten Organischen Chemiker, die sich heutzutage mit Naturstoffen beschftigen,
stehen entweder deren physiologische und pharmakologische Eigenschaften im Mittelpunkt (Wirkstoffund Arzneimittelsuche und -optimierung), oder aber mechanistische Fragen zu ihrer Rolle im
Stoffwechselgeschehen, an der immer diffuser werdenden Grenzlinie zwischen Organischer Chemie,
Biochemie und Biologie. Das Studium der Biosynthese von Naturstoffen, d.h. der Art und Weise, wie
lebende Organismen zum Teil hochkomplexe Molekle aus simplen Ausgangsverbindungen aufbauen,
hat unser Verstndnis der Chemie der Naturstoffe wesentlich verndert. Es erlaubt nun auch eine
gegenber der frher blichen struktur-/wirkungsorientierten Klassifizierung dieser Substanzen
bei weitem bersichtlichere Einteilung nach biogenetischer Herkunft. Dies hat sich insbesondere bei
so heterogen erscheinenden Verbindungsklassen wie den Alkaloiden und den Antibiotika bewhrt.
Das vorliegende Skript hlt sich wo immer mglich ebenfalls an dieses Schema, obwohl die alten
Klassennamen, die sich teils nach der Struktur (Zucker, Steroide, Terpene), teils nach der
physiologischen Wirkung (Vitamine, Antibiotika) richten, noch beibehalten werden. Oft genug deckt
sich diese biosynthetische Klassifikation auch mit der alten Einteilung nach chemischer Konstitution,
fgt aber eine neue Dimension des Verstndnisses hinzu.

1. Fettsuren
1.1 Vorkommen, Struktur und Eigenschaften von Fettsuren

Fettsuren sind langkettige, gesttigte oder ungesttigte aliphatische Monocarbonsuren, die hufigen
natrlich vorkommenden sind unverzweigt und besitzen eine gerade Anzahl von Kohlenstoffatomen. Bis
heute sind weit ber 100 verschiedene Fettsuren, vor allem als Bausteine von Lipiden von Tieren, Pflanzen
und Mikroorganismen identifiziert worden, in unveresterter, freier Form kommen sie jedoch nur in sehr
geringer Konzentration im Gewebe und in der Zelle vor. In Bakterien findet man weniger und einfachere
Fettsuren als in hheren Organismen und sie sind hufig verzweigt. Suren mit ungerader C-Anzahl sind
selten in landbewohnenden, hufiger jedoch in marinen Organismen anzutreffen, mehrfach ungesttigte
Fettsuren sind reich in Fischleberlen zu finden.

Unter den gesttigten Fettsuren findet man hufig Kettenlngen mit 12 bis 24 C-Atomen, wobei
Palmitinsure

[Hexadecansure,

CH3(CH2)14COOH]

und

Stearinsure

[Octadecansure,

CH3(CH2)16COOH] in allen tierischen Fetten und in Lipiden berwiegen. Kurzkettige Fettsuren sind u.a.
im Palml, im Kokosfett und in Milchfetten enthalten, langkettige mit mehr als 24 C-Atomen kommen vor
allem in Wachsen vor. Die meisten ungesttigten Fettsuren sind monoungesttigt, die hufigste ist die cis9-ungesttigte lsure [(Z)-9-Octadecensure, CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH], die besonders hufig in
hheren Pflanzen und in Tieren, die bei niedrigen Temperaturen leben, gefunden wird.

In der Fettsurechemie hat sich eine Kurzschreibweise eingebrgert, die die Kohlenstoffzahl sowie die
Anzahl, Position und Konfiguration der Doppelbindungen symbolisiert. 16:0 steht z.B. fr die gesttigte
Palmitinsure, 18:19 fr die in 9-Position einfach cis-ungesttigte lsure, usw. (Die trans-Geometrie mu
gesondert angegeben werden, vergl. Tab. 1-1).

Tabelle 1-1. Einige natrlich vorkommende a) gesttigte und b) ungesttigte Fettsuren

Krzel

Nomenklatur

Trivialnamen

4:0
6:0
8:0
10:0
12:0
14:0
16:0
18:0
20:0
22:0
24:0
16:19

Butansure
Hexansure
Octansure
Decansure
Dodecansure
Tetradecansure
Hexadecansure
Octadecansure
Eicosansure
Docosansure
Tetracosansure
(Z)-9-Hexadecensure

Buttersure
Capronsure
Caprylsure
Caprinsure
Laurinsure
Myristinsure
Pylmitinsure
Stearinsure
Arachinsure
Behensure
Lignocerinsure
Palmitlsure

2
18:19
18:19trans
18:111
18:29,12
18:39,12,15
18:36,9,12
20:38,11,14
20:45,8,11,14
22:113
24:115

(Z)-9-Octadecensure
(E)-9-Octadecensure
(Z)-11-Octadecensure
(9Z,12Z)-9,12-Octadecadiensure
(9Z,12Z,15Z)-9,12,15-Octadecatriensure
(6Z,9Z,12Z)-6,9,12-Octadecatriensure
(8Z,11Z,14Z)-8,11,14-Eicosatriensure
(5Z,8Z,11Z,14Z)-5,8,11,14Eicosatetraensure
(Z)-13-Docosensure
(Z)-15-Tetracosensure

lsure
Elaidinsure
cis-Vaccensure
Linolsure
-Linolensure
-Linolensure
Di-homo--Linolensure
Arachidonsure
Erucasure
Nervonsure

a Gesttigte, b ungesttigte Fettsuren

Neben diesen Strukturen gibt es in der Natur eine Reihe ungewhnlicher Fettsuren bzw. Fettkomponenten,
wie methylverzweigte Fettsuren, Hydroxysuren, methoxy- und acetoxysubstituierte Fettsuren, Cyclopropancarbonsuren, acetylenische Carbonsuren u.a.m. (vergl. Formel 1-1). Tuberculostearinsure [10Methyloctadecansure] wird in bakteriellen Lipiden [Mycobacterium tuberculosis] gefunden, bei der
Verseifung der Lipopolysaccharide von M. tuberculosis wird u.a. Phthiensure [2,4,6-Trimethyltetracos-2ensure] erhalten, die nach Injektion bei Tieren Tuberkulosekntchen hervorruft. Mycolsuren, gesttigte
und ungesttigte -verzweigte -Hydroxyfettsuren, sind in dem Lipidpolysaccharid-Komplex der
Zellwnde von Mycobakterien enthalten. Die Zusammensetzung membrangebundener Fettsuren aus
Bakterien und Hefen ist so spezifisch, da sie zur gaschromatographischen Identifikation dieser
Mikroorganismen herangezogen wird. Cerebronsure kommt zusammen mit anderen Hydroxyfettsuren
in Lipiden des Gehirns und der Nerven vor, Ricinolsure als Glycerid im Ricinusl (aus Samen von
Rhicinus communis), Mycomycin besitzt antibiotische Eigenschaften und wurde aus Schimmelpilzen
isoliert. Glycerinester der Hydnocarpussure und der Chaulmoograsure, Cyclopentenylalkansuren, sind
im Chaulmoogra-l, Samenl von Hydnocarpus-Arten, enthalten und werden zur Leprabehandlung eingesetzt. Vor allem in Asteraceen sind Fettsuren mit Dreifachbindungen enthalten. Whrend C14- bis C22Fettsuren typisch in hheren Tieren gefunden werden, sind marine Schwmme reichhaltige Quellen fr
C24- bis C30-Analoge.

In den letzten Jahren wurden etwa 40 verschiedene Hydroxyfettsuren mit OH-Gruppen in 3'-, 4- und 5'Position als Bausteine bakterieller Polyester, der Polyhydroxyfettsuren [PHF, PHA], entdeckt, die als
Reserve- oder Speicherstoffe dienen. Die Fhigkeit zur PHF-Synthese ist ausschlielich in Bakterien
verbreitet.

n = 1,
n = 2,
n = 3,
n > 3,

R
O
O CH (CH2)n C
100 - 300.000

R = H, CH3, C2H5, C3H7, .....


R = H, CH3
R=H
nicht nachgewiesen

Poly--hydroxybuttersure
Poly--hydroxyoctansure

Die PHFs besitzen thermoplastische Eigenschaften, sie sind biologisch abbaubar und aus nachwachsenden
Rohstoffen

herstellbar.

Durch

Auswahl

geeigneter

Bakterienstmme

und

verschiedener

Wachstumssubstrate gelangt man biotechnologisch zu Polyestern, die zur Herstellung von Folien- und
Verpackungsmaterial und Anwendung in der Medizin herangezogen werden knnen.
Tuberkulostearinsure
COOH
OH

Cerebronsure
COOH
OH

Ricinolsure
COOH

COOH
COOH

Lactobazillsure

Sterculsure
COOH

COOH

Malvalinsure

Stearolsure

H
C

COOH
C

COOH

CH

Mycomycin

Matricarisure

CH2CH2COOH

HO

Nemotinsure

Formel 1-1. Beispiele ungewhnlicher Fettsuren.

F-Suren, Furanfettsuren, wurden im Leberfett von Fischen, in Krebsen, Hornkorallen, in der Rinder- und
Rattenleber und im Humanblut in freier Form oder als Cholesterin- und/oder Glycerinester gefunden und
sind besonders nach Hunger perioden im Leberfett von Fischen angereichert. Im Humanblut sind die
Furanfettsuren mit einer Pentylseitenkette hufiger als die Propylderivate. Carboxylsubstituierte F-Suren
werden als Urofuransuren bezeichnet.
R

CH3-(CH2)n

CH3

(CH2)m -COOH

R = H, CH3; n = 2, 4; m = 6, 8, 10, 12
Furanfettsuren, F-Suren

COOH

CH3-(CH2)n

(CH2)2-COOH

n = 2, 4 Urofettsuren

Furanfettsuren mit langkettigen mehrfach-ungesttigten Alkylseitenketten (Formel 1-2) wurden als


Sterylester in Extrakten der Mittelmeerschwmme Dictyonella incisa nachgewiesen und besitzen starke
inflammatorische Eigenschaften.
COO-Steryl
O
COO-Steryl
O
COO-Steryl
O

Formel 1-2. Mehrfach-ungesttigte Furanfettsuren aus Schwmmen.

Die sich wiederholende Folge von Methylengruppen gesttigter Fettsuren bedingt die energiermsten antiund gauche-Konformationen, wobei die gauche-Form, die in Lsung wahrscheinlich ist, um etwa 2.6 kJ
mol-1 energiereicher ist und in langen Fettsuren eine Verdrehung der Ketten bewirkt (Abb. 1-1).
Rntgenstrukturanalysen gesttigter Fettsuren ergeben eine gestaffelte all-anti-Konformation in Form
einer langgestreckten Kette im Kristallgitter.

Abbildung 1-1. Anti- und gauche-Konformationen der CH2-Ketten von Fettsuren.

Wichtigstes Strukturelement natrlicher ungesttigter Fettsuren ist die cis-Konfiguration der


Doppelbindungen und die Methylenunterbrechung der Doppelbindungen [Divinylmethantyp -CH=CH-CH2CH=CH-] bei den mehrfach ungesttigten. Die Rntgenstrukturanalyse der einfach ungesttigten lsure
zeigt eine gewinkelte U-frmige Konformation. Durch die Einfhrung einer gauche-Anordnung in einer der
Doppelbindung benachbarten Ethylengruppen erhlt man eine nur geringfgig energiereichere gestreckte
Form. Die Linolsure mit zwei cis-Doppelbindungen zeigt in der Kristallstruktur eine starre Winkelung,
jedoch keine U-Form.

Der Schmelzpunkt der Fettsuren hngt von deren Kettenlnge, der Anzahl sowie Position und Konfigu
ration der Doppelbindungen ab. Ungesttigte Fettsuren haben niedrigere Schmelzpunkte als die
entsprechenden gesttigten, trans-Fettsuren besitzen hhere Schmelzpunkte als die mit cis-konfigurierten
Doppelbindungen. Man kann Fettsuregemische durch Abkhlen in eine feste Phase, die einen hohen Anteil
an gesttigten besitzt, und in ein l, das reich an ungesttigten Fettsuren ist, berfhren und trennen.
Ebenso ist eine fraktionierte Kristallisation aus Methanol und Aceton mglich, ungesttigte Fettsuren sind
meist besser lslich als gesttigte. Die Unterschiede im Schmelzverhalten einzelner Fettsuren spiegelt sich
in den Phasenumwandlungstemperaturen der Lipide (vergl. 2.2) wider.

Homologe Fettsuren mit geradzahliger C-Anzahl haben Siedepunktsdifferenzen von 15-20 C und lassen
sich mittels fraktionierter Destillation im Hochvakuum aus Gemischen mit +99 % Reinheit abtrennen.

cis-Einfach ungesttigte Fettsuren lassen sich durch UV-Licht, mit Nitrit [Elaidinprobe] oder Behandlung
mit nitrosen Gasen in die stabileren trans-Formen umlagern (Gleichgewichtsgemisch mit 85 % transAnteil). Im Alkalischen isomerisieren mehrfach ungesttigte, methylenunterbrochene Fettsuren zu solchen
mit konjugierten Doppelbindungen.

Whrend gesttigte Fettsuren gegenber Sauerstoff relativ stabil sind, erleiden ungesttigte und vor allem
mehrfach ungesttigte Fettsuren leicht Autoxidation (Formel 1-3). Es entstehen allylische Hydroperoxide,
die wiederum zu Radikalen zerfallen und durch Vernetzung zur Ausbildung fester Oligomeren fhren. Die
Reaktion wird durch Radikalbildner und paramagnetische Metall-Ionen katalysiert und ist auto katalytisch.
Das intermedir gebildete allylische PeroxidRadikal -CH=CH-CH- und vielmehr noch eines mit mehreren
Doppelbindungen wie -CH=CH-CH-CH=CH- ist resonanzstabilisiert, wo durch die Radikalbildung
begnstigt wird.

+ R1-CH2-CH=CH-R2

- RH

R1-CH=CH-CH -R2

OO

OO

O2

R1-CH -CH=CH-R2

R1-CH-CH=CH-R2

R1-CH=CH-CH-R2

.
OO
1

OOH
2

R -CH-CH=CH-R

R1-CH2-CH=CH-R2

R -CH-CH=CH-R2

R1-CH -CH=CH-R2

Formel 1-3. Autoxidation ungesttigter Fettsuren.

Bei Verletzung tierischer oder pflanzlicher Zellen werden besonders groe Konzentrationen von
Hydroperoxiden und Folgeprodukten nachgewiesen, was auf Zellverletzung als Gemeinsamkeit chronischer
Erkrankungen hinweisen knnte. Phenole wirken als Radikalfnger und werden daher Fetten als
Antioxidantien zugesetzt. Von Bedeutung sind natrliche Tocopherole, die Nordihydroguajaretsure sowie
die synthetischen tert-Butylhydroxyanisol BHA, tert-Butylhydroxytoluol und Di-tert-butyl-p-cresol [Ditert-butylhydroxytoluol, BHT].

1.2 Biosynthese und oxidativer Abbau von Fettsuren

1.2.1 Biosynthese von Fettsuren

Die Biosynthese der Fettsuren luft in allen Organismen ab, besonders typisch jedoch in der Leber, im
Fettgewebe und in den Milchdrsen hherer Tiere. Der Aufbau erfolgt jeweils durch die C2-Einheit der
Essigsure und findet im Cytosol statt, als Folge werden vorwiegend unverzweigte Fettsuren mit
geradzahliger Kohlenstoffkette in der Natur gefunden. Die Katalyse der Fettsurebiosynthese ist ein

klassisches Beispiel fr einen Multienzymkomplex. Bei der Fettsurebiosynthese wird zuerst Acetyl-CoA
durch HCO3- zu Malonyl-CoA carboxyliert, die weitere Kettenverlngerung erfolgt durch sukzessive
Kondensation von Malonyl-CoA und Acetyl-CoA. Dabei wird Acetyl-CoA in einer Startreaktion als
Thioester auf die Fettsuresynthetase zum Acetyl-Acylcarrierprotein [Acetyl-ACP] transferiert, dann erfolgt
Malonyltransfer zum Acetyl-malonylcarrierprotein [Acetyl-Malonyl-ACP]. Anschlieend erfolgt die
bertragung zum Acetoacetyl-Acylcarrierprotein [Acetoacetyl-ACP]. Durch NADPH-Reduktion entsteht 3Hydroxybutyryl-ACP, Wasserabspaltung fhrt zu Crotonyl-ACP und eine zweite Reduktion zu ButyrylACP. Nach Acyltransfer wird neuerlich Malonat angelagert und wie zuerst mit der entstandenen Buttersure
acyliert (Formel 1-4). Als Abschlu wird der Palmitin- oder Stearinrest auf Coenzym A bertragen [F.
LYNEN, S.J. WAKIL, P.R. VAGELOS]. 1951 hatten F. LIPMANN und F. LYNEN das Acetyl-Coenzym A, einen
Thioester der Essigsure, als Trger der aktiven C2-Gruppe beim Auf- und Abbau der Fettsuren im
Organismus isoliert und untersucht.
HS

H2
C

O
H2 H
C N C

Cysteamin

H2
C

H2 H
C N

-Alanin

CH3

O
C

H
C

C O P O P O
H2
CH
OH HO
OH
3

Pantoesure
Pantothensure
Pantothein

CH2 Ade
O

O
HO

Coenzym A
O OH

OH

1.2.2 Der Multienzymkomplex der Fettsure-Synthetase

Die Fettsure-Synthetase der Hefe ist ein Multienzymkomplex, der aus einem den Surerest tragenden AcylCarrier-Protein ACP und sechs Enzymen besteht. Prosthetische Gruppe des ACP ist ein beweglicher
Pantotheinarm als Trger der zentralen SH-Gruppe, der ber eine Diphosphorsureestergruppe an die
Hydroxygruppe eines Serinrestes gebunden ist. Der Fettsure-Synthetase-Komplex, der zuerst aus E. coli
isoliert wurde und ein Teilchengewicht von 2.3 Millionen Da besitzt, wurde vor allem in der Hefe studiert
[F. LYNEN]. Von den Kristallen (20-30 nm/Molekl) existieren elektronenmikroskopische Aufnahmen,
jeder Kristall enthlt 5-6 Molekle des Enzyms. In den Mitochondrien, Zellorganellen zur Oxidation und
Energie-ATP-Umwandlung, verluft die Fettsuresynthese ausschlielich durch Umkehr der -Oxidation
des Fettsureabbaus (Fettsurespirale) und ist Malonyl-CoA-unabhngig (Formel 2-4). Endpunkt der
Fettsuresynthese ist bei Tieren hauptschlich die 16:0-Palmitinsure, die ungesttigten Fettsuren
entstehen durch Dehydrierung [Desaturasen] bzw. durch enzymatische Kettenverlngerung [Elongasen]. Im
tierischen Organismus wird eine weitere Doppelbindung nur zwischen einer bereits vorhandenen und der
Carboxylgruppe, im pflanzlichen Organismus hingegen zwischen der Doppelbindung und der terminalen
Methylgruppe eingefhrt. Der Aufbau ungeradzahliger Fettsuren wird durch Propionyl-S-ACP als
Startmolekl in Gang gebracht, Hydroxyfettsuren entstehen durch direkte Hydroxylierung der Fettsuren.

CH3CO-SCoA

Acetyl-CoA-

HCO3-

OOCCH2CO-SCoA
Carboxylase

Malonyl-CoA

Acetyl-CoA

SH

SH
CH3CO-SCoA

Enzym

Enzym
SH

Acetyl-CoA

CH3CO

HSCoA

Acetyl-ACP
-

-Ketoacyl+

Malonyl-CoA

Acetyl-ACP
ACP-Synthetase

S COCH2COO
Enzym
CH3CO S

irreversibel

Acetyl-Malonyl-ACP

- CO2

OH
S COCH2COCH3
Enzym
SH

NADPH + H+

Acetoacetyl-ACP

NADPH + H+

-KetoacetylACP-Reduktase

COCH2CH2CH3

Enzym
SH

S
Enzym

CO CH2 CH CH3

H
C

H
C

C3H

Enzym
Hydratase

SH

Acylransfer

3-Hydroxybutyryl-ACP

SH

Crotonyl-ACP

SH
Enzym

Butyryl-ACP

Enoyl-ACP-

u.s.w.

CH3CH2CH2CO S

Formel 1-4. Fettsurebiosynthese.

1.2.3 Fettsureabbau, -Oxidation

Der Fettsureabbau, bereits wenige Jahre nach der Jahrhundertwende von F. KNOOP und H.D. DAKIN
begrndet und von F. LYNEN [1955] besttigt, ist als Umkehr des Aufbaus zu sehen, luft jedoch
ausschlielich in der Mitochondrien-Matrix ab. Die Fettsure wird zunchst durch berfhrung in das
Acyl-CoA aktiviert und dieses anschlieend mittels einer FAD-abhngigen Acyl-CoA-Dehydrogenase zum
2-trans-Enoyl-CoA dehydriert. Danach wird stereospezifisch zum L-Isomeren des 3-Hydroxyacyl-CoA
hydratisiert, es erfolgt NAD+-Oxidation zur 3-Keto verbindung, und Acetyl-CoA-Abspaltung gibt das um
zwei C-Atome krzere Acyl-CoA, welches als Substrat in die nchste Reaktionsrunde eingeht (Formel 2-5).
Bei jedem Durchgang ensteht ein Acetyl-CoA, das im Tricarbonsurecyclus weiter abgebaut wird. Aus 1
Molekl Palmitinsure werden insgesamt 129 Molekle ATP gebildet (entspricht etwa 40 % der
Verbrennungsenergie der Fettsure). Die bei der Dehydrierung entstandenen zwei Paar Wasserstoffe gehen
in die Atmungskette (ATP-Synthese) ein.

R(CH2)n(CH2)2CO-SCoA

R(CH2)n(CH2)2CO-SCoA

+ AMP + P2O74-

+ HSCoA + ATP

FAD
Acyl-CoA-Dehydrogenase
FADH2
R(CH2)nCH=CHCO-CoA

9-trans-Enoyl-CoA

H2O

Acetyl-CoA
+
R(CH2)nCO-SCoA

Enoyl-CoA-Hydratase

Acyl-CoA
OH
R(CH2)nCHCH 2CO-SCoA
Hydroxyacyldehydrogenase

Thiolase

L-3-Hydroxyacyl-CoA
NAD+

O
R(CH2)nCHCH 2CO-SCoA

NADH + H+

3-Ketoacyl-CoA

HSCoA

Formel 1-5. Oxidativer Fettsureabbau, Fettsurespirale.

Beim Abbau (Z)-ungesttigter Fettsuren wie der lsure mit ihrer Doppelbindung in 9-Position entsteht in
einem spteren Zyklusdurchlauf ein Enoyl-CoA mit 3-cis-Konfiguration statt der notwendigen 2-transGeometrie. Die reversible Umwandlung wird durch eine Enoyl-CoA-Isomerase katalysiert, bevor es wieder
in die normale Sequenz des Fettsureabbaus aufgenommen wird.

1.2.4 Acetogenine, Polyketide

Acetogenine sind eine groe Familie von strukturell komplex aufgebauten wichtigen Moleklen. Sie sind
aus C2-Essigsure-Bruchstcken aufgebaut und wichtige Zwischenprodukte der Biogenese vieler
Naturstoffe, deren Biosynthese durch Kondensationen von Acetyl- und Malonyl-Coenzym A erfolgt. Sie
werden auch als Polyketide bezeichnet, weil die biosynthetisch gebildeten Verbindungen im allgemeinen
zahlreiche, meist durch Methylengruppen getrennte und enolisierbare Ketogruppen enthalten. Sie werden
mit n = 2 als Diketid, mit n = 3 als Triketid, als Tetraketid, etc. bezeichnet. Viele Polyketide sind wichtige
therapeutische

Agenzien

wie

z.B.

Antibiotika,

Immunosuppressoren,

Antikrebsmittel

und

veterinrmedizinische Produkte. Formel 2-6 zeigt die mgliche Kondensation von C2-Synthons zu C16Polyketiden durch eine Polyketidsynthase [PKS]. Typische Acetogenin-Derivate sind Mykotoxine wie das
Semiquadratsurederivat Moniliformin (Diketid), das Patulin (Tetraketid) aus Penicillium patulum, das
Mykotoxin Ochratoxin aus Aspergillus-Arten (Pentaketid), die Cytochalasane (Nonaketide), Aflatoxine und
Tetracyclin (Dekaketide).

O
O

O
H

CH2

OR

+
O

Polyketid

O-

HO
OH

S
OH

E
O
OH

O
OH
S

E
O

Formel 1-6. Synthese von 3,8-Dihydroxy-1-methyl-anthrachinon-2-carbonsure aus acht Essigsure- (bzw.


Malonsure)-Bruchstcken.

1.3 Mehrfach ungesttigte, essentielle Fettsuren

Von Sugetieren knnen mehrfach ungesttigte Fettsuren mit weiteren Doppelbindungen zwischen der 9Position und der terminalen Methylgruppe nicht biosynthetisiert werden. Sie sind aber in der Lage, aus
pflanzlicher Linolsure [(9Z,12Z)-9,12-Octadecadiensure] und -Linolensure [(9Z,12Z,15Z)-9,12,15Octadecatriensure] mehrfach ungesttigte Fettsuren herzustellen. So entsteht z.B. aus Linolsure ber Linolensure [6,9,12-18:3] und Homo--linolensure [8,11,13-20:3] die fr viele Biofunktionen wichtige
Arachidonsure [(5Z,8Z,11Z,14Z)-5,8,11,14-Eicosatetraensure]. Mehrfach (Z)-ungesttigte Fettsuren
sind daher fr Tier und Mensch essentielle Nahrungsbestandteile und werden manchmal als Vitamin F
(17.3) bezeichnet. Mangel an essentiellen Fettsuren fhrt bei Ratten zu pathologischen Vernderungen der
Haut und zu Wachstumsstrungen, beim Menschen sind jedoch echte Vitamin-F-Mangelzustnde nicht
bekannt. Arachidonsure, die wie oben gezeigt aus Linolsure durch Kettenverlngerung und Dehydrierung
gebildet wird, ist Biosynthesevorstufe zu Eicosanoiden, hormonhnliche C20-Substanzen mit wichtigen
physiologischen Aktivitten, Nahrungsmittel mit hohem Anteil mehrfach ungesttigter Fettsuren sind
daher physiologisch wertvoll. Essentielle Fettsuren werden vor allem zum Aufbau von Zellmembranen
bentigt, bei Mangel an essentiellen Fettsuren kommt der aktive Stoffwechsel zum Erliegen. 5,8,11,14,17Eicosapentaensure [EPA, 5,8,11,14,17-Icosapentaensure] wird vorwiegend als Glycerid im Fischl und
in Meereswirbeltieren gefunden. Sie ist Vorlufer der Prostaglandin-3- [PG3] und Thromboxan-3-Gruppe
[TBX3]

und

wirkt

gegen

Thrombosen,

Arthritis,

Schuppen

flechte,

Diabetes

mellitus

u.a.

Docosahexaensure [DHA] senkt Blutdruck und Cholesterinspiegel und kommt als Lebensmittel- und
Tierfutterzusatz in den Handel. Als DHA-reichste Quelle (30 - 40 %) wurde erst vor wenigen Jahren das
Fett aus den Augenhhlen des Thunfisch erkannt.
COOH

Linolsure

COOH

-Linolensure

COOH

Arachidonsure

10

Bei den mehrfach ungesttigten Fettsuren ist die im Saft der Vogelbeere [Sorbus aucuparia] vorkommende
kurzkettige Sorbinsure [(2E,4E)-2,4-Hexadiensure] zu nennen, die das Wachstum von Bakterien, Hefen
und Pilzen hemmt und daher als Konservierungsmittel verwendet wird.

2.1.4 Analyse von Fettsuren

Die Analyse komplexer Fettsuregemische gelingt meist mit hilfe der Gaschromatographie, wobei die
Fettsuren blicherweise als Methylester [FAME] chromatographisch aufgetrennt und nachgewiesen
werden. Heute wird in der Fettanalyse blicherweise ein Massenspektrometer als GC-Detektor verwendet
[GCMS], wodurch sich viele zustzliche analytische Mglichkeiten ergeben. Die Derivatisierung von
Fettsuren mit 2-Amino-2-methylpropanol fhrt zu 4,4-Dimethyloxazolinen [DMOX], die sich ebenso
mittels GCMS analysieren lassen. Diese "remote site"-Derivate von einfach oder mehrfach-ungesttigten
Fettsuren fragmentieren im Massenspektrum so charakteristisch, da aus den Spektren die Lage der
Doppelbindungen angegeben werden kann.

Zur Bestimmung der Positionen von Doppelbindungen in ungesttigten Fettsurederivaten dient hufig die
Ozonspaltung, die Epoxidierung mit m-Chlorperbenzoesure [m-CPBA], Glycolbildung und Derivatisierung
oder die Addition von Dimethyldisulfid mit anschlieender GC- und/oder GCMS-Charakterisierung der
Reaktionsprodukte.
1. O3
R-CH=CH-(CH 2)x-COOCH3

R-CH=O

O=CH-(CH 2)x-COOCH3

2. P(C6H5)3
O

m-CPBA
R-CH=CH-(CH 2)x-COOCH3

(CH2)x-COOCH3
OH

R-CH=CH-(CH 2)x-COOCH3

OH

OsO4 oder
R

(CH2)x -COOCH3

HJO4
1. CH3-S-S-CH3
R-CH=CH-(CH 2)x-COOCH3

CH3S
R

2. I2

SCH3
(CH2)x -COOCH3

OH

H2N
R-CH=CH-(CH 2)x-COOCH3

R-CH=CH-(CH 2)X

C
O

Formel 1-7. Doppelbindungsbestimmung in Fettsuren.

1.5 Synthese von Fettsuren

1.5.1 Industrielle Gewinnung von Fettsuren

Fettsuren lassen sich durch hydrolytische Spaltung oder enzymatisch aus Lipiden erhalten. Die Industrielle
Gewinnung gelingt durch Hochdruck-Dampfspaltung von natrlichen Fetten mit Wasser bei 100-250 C in
Gegenwart geeigneter Katalysatoren (Magnesium-, Zinkoxid, Sulfonsuren) mit anschlieender

11

fraktionierter Destillation im Hochvakuum oder fraktionierter Kristallisation. Die klassische "Verseifung"


mit Alkali (Seifenherstellung) ist heute praktisch unbedeutend.

Mittels mikrobieller fettspaltender Enzyme, Lipasen, lassen sich Fette unter technisch relevanten
Bedingungen ebenso spalten. Die Kosten fr den Proze liegen im Vergleich zur Dampfspaltung zur Zeit
noch zu hoch, Verbesserungen dieser Enzymtechnologie knnten jedoch die Konkurrenzfhigkeit der
enzymatischen Fettspaltung erhhen.

1.5.2 Darstellung gesttigter und ungesttigter Fettsuren

Gesttigte Fettsuren beliebiger Kettenlngen erhlt man einfach durch Acetylensynthese und
anschlieende vollstndige Hydrierung der Dreifachbindung oder durch Hydrierung von natrlich
vorkommenden ungesttigten Fettsuren.
1. NaCN
CH3(CH2)n C

CNa + I(CH2)mCl

CH3(CH2)n C

(CH2)mCl
2. H2O

CH3(CH2)n C

(CH2)mCOOH

H2 / Ni-Kontakt

H2 H2
CH3(CH2)n C C (CH2)mCOOH

Zweifache Acylierung von Thiophen und Wolff-Kischner-Reduktion der Ketogruppen fhrt ebenso zu
Alkansuren mit beliebiger Kettenlnge.
O

Wolff-Kischner
Reduktion

CH2CH2COOH

(CH2)3COOH
S

O
O
RCOCl
R

(CH2)3COOH

Wolff-Kischner
Reduktion

R-CH2-(CH2)4-(CH2)3-COOH

Einfach (Z)- und (E)-ungesttigte Fettsuren mit wahlweiser Geometrie der Doppelbindung und variabler
Kettenlnge erhlt man durch partielle Hydrierung von Acetylenen. Die katalytische Hydrierung mittels
Lindlar-Katalysator oder P2-Nickel fhrt zu (Z)-Isomeren mit 98 % cis-Anteil, die homogene Hydrierung
mit Na in NH3 gibt (E)-Isomere in 99 % Reinheit.
NaNH 2, oder
CH3(CH2)n C

I(CH2)m Cl
CH3(CH2)n C

CH

CNa (Li, Mg)

LiNH2, BuLi, PhLi, RMgBr


NaCN
CH3(CH2)n C

(CH2)mCl

H3O+

CH3(CH2)n C

(CH2)mCOOH

Na / NH3
H2
Lindlar-Katalysator

(Z)-Fettsure

(E)-Fettsure

(Z)-Stereoselektive WITTIG-Reaktion durch Umsetzung von aliphatischen Aldehyden mit basischen


Phosphoniumyliden unter Li-salzfreien Bedingungen und tiefer Temperatur fhrt zu (Z)-ungesttigten
Fettsuren in einer sterischen Reinheit von 97 %.

12

H
C O

R O-OOC-(CH2)m
R1

H
C

(C6H5)3P=CH

R -C

R -C

(C6H5)3P=CH-R
(CH2)m -COOR2

R1 = CH3, C2H5, ... R2 = CH3, C2H5, ...

(CH2)m-COOR2
(CH2)m-COOR2
m = 3, 4, 5,...

1.5.3 Mittelkettige Fettsureester durch Olefin-Metathese

Die bergangsmetallkatalysierte Olefin-Metathese ist vom Typ eine Bindungsreorganisationsreaktion, in


deren Verlauf zwei Eduktolefine in zwei Produktolefine umgewandelt werden. Dieser Reaktion unterliegen
auch ungesttigte Fettsureester und erffnen damit Zugang zu mittelkettigen Fettsureestern. Durch
Metathese von lsuremethylester mit n-Hexenen werden ungesttigte C11 C13-Ester erhalten (Formel 1-8),
Linolsuremethylester liefert bei der gleichen Reaktion neben diesen Produkten durch Reaktion der 12Doppelbindung noch zustzlich zweifach-ungesttigte C14 - C16-Ester.
C8

C8

C2

C 7 C O O C H3

C8

C 7 C O O C H3

C3

C 7 C O O C H3

C 7 C O O C H3

C2

+
C

C3

C3

C8

C 7 C O O C H3

C8

C3

C 7 C O O C H3

C8

+
C

C2

C2

Formel 1-8. Kettenverkrzung von lsuremethylester durch Metathese mit n-Hexenen.

Die Metathesis-Reaktion lt sich von reinen Fettsureestern auf technische Fettsureester-Gemische


bertragen, die aus industriellen Fetten erhalten werden, und ist eine Alternative zur bisherigen Gewinnung
kurzkettiger Fettsuren auf nativer Basis. Durch die Wahl der zur metathetischen Kettenverkrzung
eingesetzten Olefine kann die Kettenlnge der Produkte (Abb. 2-2) eingestellt werden.

13

Abbildung 1-2. Mittelkettige Fettsuremethylester durch Olefin-Metathese von C18-Fettsuremethylester aus


Rapsl mit n-Hexenen.

1.6 Seifencharakter der Salze von Fettsuren

Seifen sind Alkalisalze hherer Fettsuren (C10-C18), die durch Neutralisation der Carbonsuren mit Alkalihydroxid oder bei der alkalischen Hydrolyse, Verseifung, von Fetten entstehen. Bereits vor rund 4.500
Jahren vermischten die Sumerer Pflanzenl mit Pottasche und kochten dadurch die ersten Seifen. Seifen
bilden in Wasser Micellen (vergl. 2.3), sind als Tenside, Netzmittel oder Detergentien grenzflchenaktive
Stoffe und vermindern die Oberflchenspannung des Wassers. Sie werden mit H+ oder Erd alkali-Ionen
(hartes Wasser) ausgefllt, danach tritt keine Schaumbildung mehr ein und die Seifenwirkung geht verloren.
Diese Kalkseifen fhren auerdem zu unerwnschten Nebenwirkungen in Textilien und Geweben.
CH3CH2CH2CH2-------------------------------------COO -

Lipophiles Ende

Na +

Hydrophiles Ende

Je nach Art unterscheidet man anionische, kationische, amphotere und nichtionische Detergentien. Seifen
zhlt man zu den anionenaktiven Detergentien, die als hydrophiles Ende negativ geladene Carboxylat-,
Sulfonat- oder Sulfatgruppen tragen. Fettalkoholsulfate [FAS] sind eine bedeutende Gruppe von Tensiden
auf der Basis von Fettalkoholen, die durch Fettsurereduktion entstehen. Kationische Seifen [Invertseifen]
weisen in der Regel eine quartre Ammoniumgruppe als Trger der Tensideigenschaft auf.
Ditalgdimethylammoniumchlorid [DTDMAC] wurde viele Jahre als hauptschliche KationtensidKomponente in Weichsplern verwendet. In den letzten Jahren hat die Bedeutung der Anionentenside zu
Gunsten der nichtionischen Tenside [Niotenside, Neutralseifen] abgenommen. Letztere sind weniger
empfindlich gegen Wasserhrte und besitzen bessere Lslichkeiten. Nichtionische Detergentien werden
neben ihrer ursprnglichen Verwendung in Wasch- und Reinigungsmitteln auch als Netz-, Dispergier- und
Emulgiermittel in Schmier- und Kraftstoffen, zum Frben von Stoffen, in der Lack- und Farbenproduktion,
bei der Produktion von Kunststoffen, bei der Flotation und in anderen technischen Verfahren sowie im
Lebensmittel- und Kosmetikbereich eingesetzt. In hochgereinigter Form werden Detergentien in der
Biochemie und Molekularbiologie als Lsungsvermittler eingesetzt. Zu den nichtionischen Detergentien
zhlen u.a. Derivate hherer Alkohole, Phenole oder Fettsuren mit Ethylenoxid (Formel 1-9). Glucamide
sind von Glucose und Fettsuren abgeleitete Tenside, die seit einiger Zeit in Waschmitteln eingesetzt
werden. Eine wichtige Gruppe sind die Fettalkoholethoxylate. Alkylpolyglykoside [APG] sind nichtionische
Tenside aus Glucose und Fettalkoholen, die aus Strke und Kokos- oder Palmkernl gewonnen werden, und
vollstndig abbaubar sind.

14

Natrliche Tenside spielen in allen Organismen eine wichtige Rolle, weil sie Stoffe untersttzen, wenn sie
natrliche Barrieren berschreiten mssen, z.B. vom Verdauungstrakt zum Blut, von Zelle zu Zelle oder
von der Atemluft zur Lunge.
H3C

Na +

(CH2)n-CO-O -

H3C

(CH2)n-O-SO2-O- Na +

Natriumalkylsulfat

Natriumcarboxylat

CH3

CH3
+

+
CH3-(CH2)1

CH2-C6H5

Cl

CH3-(CH2)11

CH2-C6H5

Br -

CH3

CH3

Benzyldimethyloctadecyl
ammoniumsulfat
N

C16H33

Benzyldodecyldimethyl
ammoniumbromid
CH3-(CH2)16 -CH2-(OCH2CH2)n-OH

Cl -

Polyether (n = 1 - 20)
Cetylpyridiniumchlorid

O
R

N
H

OH
OH 4

Glucamide, R = C11H23

Formel 1-9. Beispiele einiger a) anionischer-, b) kationischer und c) nichtionischer Detergentien.

Abbildung 1-3. Verschiedene Tensidtypen.

1.7 Literatur

L.D. BERGELSON und M.M. SHEMYAKIN, Angew. Chem. 76, 113 (1964).
P.K. STUMPF, Metabolism of Fatty Acids, Ann. Rev. Biochem. 38, 159 (1969).
L.D. BERGELSON und M.M. SHEMYAKIN, in The Chemistry of Carboxylic Acids and Esters, p. 295, Intersc.
Publ., London (1969).
J.J. VOLPE und P.R. VAGELOS, Saturated Fatty Acid Biosynthesis and its Regulation, Annu. Rev. Biochem. 42,
21 (1973).
W.H. KUNAU Chemie und Biochemie ungesttigter Fettsuren, Angew. Chem. 88, 97 (1976).
F.D. GUNSTONE, Some New Chemical Properties of Unsaturated C18-Acids, Accounts of Chem. Res. 9,
34 (1976).
J. ERNST, W.S. SHELDRICK und J.-H. FUHRHOP, Die Struktur der essentiellen Fettsuren, Z. Naturforsch. 34b,
706 (1979).
P. NUHN, M. GUTHEIL und B. DOBNER, Vorkommen, Biosynthese und Bedeutung verzweigter Fettsuren,

15

Fette-Seifen-Anstrichmittel 87, 135 (1985).


A. STEINBCHEL, Polyhydroxyfettsuren - thermoplastisch verformbare Polyester aus Bakterien, Nachr. Chem.
Techn. Lab. 39, 1112 (1991).

16

2. Komplexe, verseifbare Lipide


2.1 Klassifizierung der Lipide

Lipide

sind

lipophile,

mit

organischen

Lsungsmitteln

wie

Chloroform,

Ether,

Benzol

oder

Kohlenwasserstoffen extrahierbare organische Biomolekle. Sie sind essentielle Grundbausteine der Zelle und
haben

als

Bestandteile

von

Membranen,

Speicher-

und

Transportformen,

als

Schutz-

und

Oberflchensubstanzen und als Verbindungen, die bei der Zellerkennung, Artspezifitt und Immunitt eine
Rolle spielen, verschiedenste wichtige biologische Funktionen. Die Lipide werden unterschiedlich und oft auch
widersprchlich eingeteilt, eine befriedigende Klassifizierung aufgrund ihrer chemischen Struktur unterscheidet
a) komplexe Lipide, die Fettsureester darstellen und verseifbar sind, und b) nicht verseifbare einfache Lipide,
die keine Fettsuren enthalten. Zu den im folgenden beschriebenen komplexen Lipiden werden u.a. Fette und
le, Phospholipide, Sphingolipide und Wachse, zu den einfachen Lipiden hingegen z.B. die Terpene, Steroide
und Prostaglandine gerechnet, die gesondert behandelt werden.

2.2.1 Acylglycerine, Fette und le

Die Fettsureester des dreiwertigen Alkohols Glycerin werden Acylglycerine [frher Glyceride oder
Neutralfette]

genannt,

je

nach

Substitutionsgrad

unterscheidet

man

Monoacyl-,

Diacyl- und

Triacylglycerine [Mono-, Di- und Triglyceride]. Die Acylglycerine sind mengenmig die grte
Lipidgruppe, dienen als Energiespeicher des Organismus und stellen vor allem in Form der Triacylglycerine
das Depot- und Speicherfett im pflanzlichen und tierischen Mechanismus dar.

Bei den Triacylglycerinen kann Glycerin entweder mit nur einer Fettsure dreifach oder mit verschiedenen
Fettsuren verestert sein. Bei gemischten Estern mit unterschiedlichen Fettsureresten an C-1 und C-3 ist
das C-2 des Glycerins chiral; natrliche Fette sind aufgrund ihrer Biogenese aus L-Glycerin-3-phosphat
optisch aktiv.
H2C O

Palmitoyl

HC O Palmitoyl
H2C

Tripalmitoylglycerin
[Tripalmitin]
einfaches Triglycerin

H2C O

HC O Palmitoyl
H2C

O Palmitoyl

Stearoyl

1-Stearoyl-1-palmitoyl-3-oleyl-glycerin
gemischtes Triacylglycerin

O Oleoyl

Die bei Raumtemperatur festen Acylglycerine werden als Fette bezeichnet, die flssigen als le. Die
natrlichen Fette sind gemischte Triacylglycerine mit meist fnf oder mehr verschiedenen Fettsuren (zur
Fettsurezusammensetzung einiger Fette und le vgl. Tab. 2-2). Monoacylglycerine und Diacylglycerine
[1,2-Diacyl-sn-glycerine

(sn

stereospezifische

Nummerierung,

vgl.

2.2.4.1)]

kommen

als

Zwischenprodukte des Fettstoffwechsels nur selten in der Natur vor. In der Biochemie sind sie als

17

Bestandteile von Glycerolipiden, die bei der intrazellulren Signalbertragung bei der Bindung an
Rezeptoren als second messengers freigesetzt werden, bekannt.

Die Fettsure-Zusammensetzung der Fette hngt stark von der Herkunft ab (Tab. 2-2). Pflanzliche Fette sind
reicher an ungesttigten Fettsuren als tierische Fette, wobei lsure berwiegt. Zahlreiche Fette aus
Pflanzensamen enthalten oft spezielle Fettsuren in relativ groen Mengen, so z.B. Pflanzen aus der Familie
Lauraceae die Laurinsure, Myristicaceae die Myristinsure, der Sapindaceae Arachidonsure und der
Brassicaceae Erucasure. Charakteristisch ist das Vorkommen von Hydroxyfettsuren im Ricinusl. Die
Zusammensetzung der Fette hngt auerdem vom Klima ab, in dem die Pflanze aufgewachsen ist. Pflanzen
wrmerer Gegenden enthalten meist feste Fette, solche gemigter oder kalter Zonen vorwiegend le. Eine
breite Palette an Rohstoffen auf der Basis natrlicher le und Fette steht der industriellen Chemie (als
Oleochemie bezeichnet) zur Verfgung. Bevorzugt wurde Rindertalg als Basis fr C16/C18-Fettsuren sowie
Kokos- und Palmkernl als Quelle fr C12/C14-Fettsuren genutzt. Daneben finden aber auch Pflanzenle
mit C18-Fettsuren wie Palml, Raps-, Sonnenblumen- und Rizinusl Verwendung. Auf Glycerin,
Fettsuren und Fettsureestern sowie den einfach zugnglichen Fettalkoholen und Fettaminen baut sich ein
weiteres Produkt spektrum auf, das von Tensiden ber Kunststoffadditiva bis hin zu Kosmetika und
Pharmaka reicht.

Tabelle 2-12. Fettsurezusammensetzung einiger le und Fette (Gew. %)

Olivenl
(Olea europea sativa)
Leinl
(Linum usitassimum)
Kokosl
(Cocus nucifera)
Ricinusl
(Ricinus communis)
Chaulmoogral
(Hydnocarpus Kurzi)
Sojal

45
50

15 18

7 - 20

0-3

5-9

4-7

8 - 10

1-4

65 86
13 36
5-8

1-2

1-2

1-7

4 - 15

4 - 15

5 - 15
10 25
1-2

30 - 67 (18:3)

28

53

5 - 10 (10:0),
5 - 9 (8:0)
88 - 95
(Hydroxysuren)
81
(cycl. Suren)
7

Palml

42

41

10

Rapsl

60

20

15

Kokosl

48

17

16

Palmkernl

50

15

15

10

12 16
20 25
8 - 13

41
51
39
42
27
34

Schweineschmalz
Rindertalg

Kuhmilchfett

8 13

25
30
25
30
25
32

3-8

2-4

10
5 - 10 (ges.
Fettsuren C4 - C12)

18

Stark ungesttigte Fette werden auch trocknende le genannt und finden als Firnisse und lfarben
(bestehend aus Leinl und Farbpigmenten wie HgS, Mennige, etc.) Verwendung. Bei Luftzutritt und
Belichtung tritt Autoxidation ein, es bilden sich Peroxide (Ranzigwerden), die stark ungesttigten le (vgl.
Formel 2-3) verharzen an der Luft.

Der Schmelzpunkt der Glyceride wird durch die Surekomponenten bestimmt und steigt mit der Lnge der
Fettsuren. Fette mit cis-ungesttigten Fettsuren schmelzen niedriger als solche, die trans-ungesttigte
enthalten. Je strker der Grad der Ungesttigtheit, desto niedriger ist der Schmelzpunkt des Fetts.
Triacylglycerine als Ester sind in Wasser unlslich und bilden keine Mizellen (vgl. 3.1), nur Monoacyl- und
Diacylglycerine sind aufgrund der freien OH-Gruppen dazu befhigt. Letztere sind zur Herstellung
homogener und gut verdaulicher Fettprodukte fr die Lebensmitteltechnologie von Bedeutung.

Fette sind die Hauptenergiereserven der Organismen. Sie werden im menschlichen Organismus durch
Lipasen, z.B. im Pankreassaft, enzymatisch hydrolysiert. Entstehendes Glycerin und Fettsuren werden
weiter metabolisiert oder durch Acylierung von Glycerinphosphat Depotfett gebildet. Depotfette kommen
vor allem in Pflanzensamen und adipsem Gewebe der Tiere vor, das ber 80% Fett enthalten kann. Die
Zusammensetzung tierischen Depot fetts ist von der Tierart, dem Organ und der Nahrungsquelle der Tiere
abhngig. Bei Landtieren berwiegen dabei Palmitinund Stearinsure, Fette von Meerestieren enthalten viel
ungesttigte Fettsuren mit 16 - 22 C-Atomen. Milchfette besitzen einen greren Anteil an kurzkettigen
Fettsuren (Tab. 2-2).

2.2.1.1 Kennzahlen zur Charakterisierung von Fetten

Da Fette Gemische von Glyceriden sind und in der Regel keine genaue chemische Zusammensetzung
angegeben werden kann, wurden zur Charakterisierung sowie Kennzeichnung und Qualittssicherung in der
Lebensmittelindustrie und Pharmazie sog. Kennzahlen eingefhrt: Die Iodzahl [IZ] gibt an, wieviel g Iod an
100 g Fett addiert werden und dient zur Angabe der Menge an ungesttigten Fettsuren. Die
Verseifungszahl [VZ] gibt an, wieviel mg KOH zur Verseifung von 1 g Fett und zur Neutralisation freier
Fettsuren verbraucht werden. Die Surezahl [SZ] gibt an, wieviel mg KOH zur Neutralisation der freien
Suren in 1 g Fett verbraucht werden. Die Esterzahl [EZ] dient zur Charakterisierung von Fetten und bildet
die Differenz zwischen der Verseifungszahl und der Surezahl. Die Hydroxylzahl [OHZ] bestimmt durch
Acetylierung den Anteil an Hydroxyfettsuren, der in natrlichem Fett stets vorhanden ist. Die Peroxidzahl
[PZ] gibt die Menge an Primrprodukten der Autoxidation durch Oxidation von 2 I- zu I2 und Rcktitration
an.

2.2.1.2 Gewinnung, Darstellung und Verwendung von Fetten

19

Die Gewinnung von Fetten aus natrlichen Quellen erfolgt durch kaltes oder heies Pressen, Ausschmelzen
aus tierischem Gewebe oder Extraktion mit organischen Lsungsmitteln. Als weitere Fettquelle kommt die
Milch von Sugetieren in Frage. Die Oxidation von Paraffinen (Kohlenwasserstoffen) zu Fettsuren und
anschlieende Veresterung mit Glycerin wird nur technisch angewendet. Als Fetthrtung wird die
Hydrierung von ungesttigten Fettsuren aus billigen flssigen pflanzlichen und tierischen Fetten zu
hherschmelzenden, halbfesten bis festen Fetten bezeichnet, sie spielte frher vor allem in der MargarineProduktion eine Rolle. Die Hydrierung macht pflanzliche Fette streichfhig und mindert durch Absttigung
der Doppelbindungen die Anflligkeit gegenber Autoxidation. Gleichzeitig aber werden die essentiellen,
mehrfach ungesttigten Fettsuren entfernt. Modernen Margarinen werden heute Antioxidantien wie
Vitamin A und E oder Citronensure, die Schwermetall-Ionen bindet, zugesetzt, ferner synthetische
Aromagemische, deren Zusammensetzung mit der natrlicher Fette oder Butter identisch ist.

Mithilfe spezifischer Lipasen lassen sich natrliche oder synthetische Triglyceride in hochwertige Fette
umestern. So gelingt die Herstellung von Kakaobutter aus Olivenl und Stearinsure mittels immobilisierter
Rhizopus-Lipase.

Umsetzungen von fettchemischen Rohstoffen zu industriellen Zwischen- und Endprodukten zeigt Formel 210. Da Trennverfahren in der Oleochemie nur bedingt anwendbar sind, werden Gemische, so sie aus
anwendungstechnischen Grnden von Vorteil sind (Wasch- und Reinigungsmittel, Schmiermittel), als
solche umgesetzt.
H2C

CO R

HC

CO R

H2C

CO R

CH3OH Umesterung

NaOH Verseifung

O
R

H2O Hydrolyse

C OCH3

Methylester

CH2

C ONa

O
R

Seife

H2
R

Fett

OH

Fettalkohole

OH

Fettsuren

NH3 / H2
R

CH2 NH2

Fettamine

Formel 2-10. Grundprozesse und Basisprodukte der industriellen Fettchemie.

2.2.1.3 Strukturaufklrung von Fetten

Die Strukturaufklrung von Fetten erfolgt zunchst durch Identifizierung der einzelnen Fettsuren, wobei
die Fette hydrolytisch durch Lipasen oder alkalische Verseifung gespalten werden. Die entstehenden Suren
werden blicherweise in die flchtigeren Methylester berfhrt und anschlieend durch GCMS ihre
Struktur aufgeklrt.

20

Acylglycerine knnen auch mit Hilfe der Dnnschichtchromatographie [DC] getrennt und identifiziert
werden. Zur Abtrennung von Glyceriden, die mit gesttigten Fettsuren substituiert sind, von solchen mit
ungesttigten Fettsuren wird zweckmigerweise die DC-Platte mit Silbernitrat imprgniert. Ag+ geht
Wechselwirkungen mit -Systemen ein, wodurch die ungesttigten Acylglycerine strker zurckgehalten
werden und langsamer mit dem Laufmittel wandern. Andere gngige Analysentechniken zur Fettanalyse
sind die HPLC und vor allem die Gaschromatographie.

2.1.2 Acylglycerine mit Etherbindung

Acylglycerine mit Etherbindung sind (zum Unterschied von Etherlipiden, 2.2.5) seltener vorkommende
Glycerinester, bei denen zwei Hydroxygruppen des Glycerins mit Fettsuren verestert und die dritte mit
einem langkettigen Fettalkohol verethert sind. Diese Lipide lassen sich nur durch leistungsfhige
chromatographische Methoden von den Triacylglycerinen abtrennen und entgingen dadurch lange Zeit ihrer
Entdeckung. Milde alkalische oder enzymatische Hydrolyse fhrt zu den entsprechenden Glycerinethern.
H2C O

CO-R1

HC O CO-R2
H2C

(CH2)15 CH3

1,2-Diacyl-3-hexadecyl-glycerin

2.1.3 Glykosylacylglycerine

Die Glykosylacylglycerine oder Glyceroglykolipide gehren zur Gruppe der Glykolipide und sind Glycerinester,
bei denen die C-3-OH-Gruppe des Glycerins einen glykosidisch gebundenen Zuckerrest trgt. Mono- und
Diglykosyldiacylglycerine wurden ursprnglich aus hheren Pflanzen, spter auch aus tierischem Gewebe und
Mikroorganismen isoliert, auch Trisaccharide als Zuckerkomponenten sind bekannt.
H2C

O COR

HC

O COR

H2C

OH OH
OH

O
H O
CH2OH

In der Chloroplasten-Membran hherer Pflanzen und Algen sind neben Phosphatidylglycerin (2.2.4.1) fast
ausschlielich Monogalactosyl-diacylglycerine sowie Digalactosyl-diacylglycerine enthalten. So bestehen z.B.
ber 70 % der Gesamtlipide von Tabakblttern aus Mono- und Digalactosyl-diacylglycerinen. In grampositiven Bakterien kommen vor allem Glykolipide vor, die neben Galactose auch Glucose und Mannose als
Kohlenhydratkomponenten besitzen.

2.1.4 Phosphoglyceride, Phospholipide

21

2.1.4.1 Struktur und Vorkommen

Phosphoglyceride, auch Glycerophosphatide, Phosphatide oder Phospholipide genannt, sind die zweite groe
Gruppe der verseifbaren Lipide und stellen charakteristische Komponenten zellulrer Membranen dar. Aber
nicht alle phosphatenthaltenden Lipide sind Phosphoglyceride. In den Phosphoglyceriden ist eine primre
Hydroxygruppe des Glycerins mit Phosphorsure oder Phosphorsuremonoestern verestert, die beiden anderen
Hydroxygruppen mit Fettsuren. Das Grundgerst ist das chirale Glycerinphosphat, wobei das natrlich
vorkommende zur L-Reihe gehrt.

Die Konfigurationszuordnung des natrlichen Glycerinphosphats gelang BAER und FISCHER durch Oxidation
der primren OH-Funktion und anschlieender Hydrolyse der Phosphatgruppe zu L-Glycerinaldehyd. Wenn die
sekundre Hydroxygruppe in der FISCHER-Projektion nach links zeigt, wird das darberliegende C-Atom, das
nicht phosphorsubstituiert ist, als C-1 definiert und damit die Verbindung als sn-Glycerin-3-phosphat [sn fr
stereospezifische Nummerierung der IUPAC-IUB-Kommission nach HIRSCHMANN] bezeichnet. Nach den
IUPAC-Regeln mu aber fr die Zuordnung zur optischen Reihe das Atom mit der niedrigeren Positionszahl
herangezogen werden und damit die Verbindung als D-Glycerin-1-phosphat bezeichnet werden.
CH2-OH
HO
H2C

H2C

H O
O P OH
OH

O PO3H2

C OH
H2C

H2C
HO

OH

C
H2C

O PO3H2
H
OH

sn-Glycerin-3-phosphorsure D-Glycerin-1-phosphorsure L-Glycerin-1-phosphorsure


L-Glycerin-3-phosphorsure
IUPAC-Nomenklatur
[sn-Glycerin-3-phosphorsure]

Das einfachste Phosphoglycerid ist die Phosphatidsure, Biosynthesevorstufe fr Triacylglycerine und


Phosphoglyceride. Phosphatidsuren machen bis zu 5 % der Gesamt-Phospholipide der Zellen aus. Sie lassen
sich aus Kohl- und Spinatblttern bzw. aus Kautschukmilch isolieren. Dabei handelt es sich um Artefakte, die
durch Einwirkung von Phospholipase C (S. 78), insbesonders auf Phosphatidylcholine, gebildet werden.
Phosphatidsuren sind in Form ihrer Salze stabil, zersetzen sich jedoch in freier Form unter Abspaltung der
Acylreste und Wanderung der Phosphorsuregruppierung.
CH2-O-CO-R1
2

R -CO-O C

H2C

PO-OH

3-sn-Phosphatidsure
L-Phosphatidsure

OH

Zustzlich zu den beiden Fettsuren R1COOH und R2COOH enthalten die anderen Phosphoglyceride noch
einen Aminoalkohol wie Cholin, Ethanolamin oder Serin bzw. Alkohol wie Glycerin oder Inosit, der mit der
Phosphorsure verestert ist. Die wichtigsten Glycerophospholipide sind in Tab. 2-3 zusammengefat.

Tabelle 2-3. Wichtige Phosphoglyceride und deren Alkoholkomponenten

22

Alkoholkomponente

Phosphoglycerid

Phosphatidsure

Cholin

HO-CH2-CH2-N+(CH3)3

Ethanolamin

HO-CH2-CH2-NH2

Serin

HO CH2 CH COONH2

Phosphatidylcholine
(Lecithine)
Phosphatidylethanolamine
(Colaminkephaline)
Phosphatidylserine
(Serinkephaline)

Glycerin

HO-CH2-CH(OH)-CH2-OH
HO OH

Inosit
HO

Phosphatidylinosite
OH

HO OH

Phosphatidylcholine [Lecithine, neuerdings auch Cholin-Phosphoglyceride als Name empfohlen] werden vor
allem im Herzmuskel, in der Leber, Lunge, Gehirn, in Milch, im Eidotter (Eilecithin) und Sojabohnen
gefunden, in Bakterien kommt es nicht vor. Lecithine, die ber einen weiten pH-Bereich als Zwitterionen
vorliegen, werden in der Lebens mittel-, Kosmetik- und Pharmaindustrie als Emulgatoren eingesetzt. Wegen
des Gehalts an ungesttigten Fettsuren mssen die natrlichen Phospholipide bereits whrend der Extraktion
vor Autoxidation geschtzt werden.
H2C O

COC15 H31

HC O

COC15 H31

H2C O

PO

Lecithin
Dipalmitoyllecithin

CH2CH2N+ (CH3)3

OH

Eilecithin enthlt ca. 75 % Phosphatidylcholin und 15 % Phosphatidylethanolamin, als Fettsurekomponenten


berwiegen Palmitin- (35 - 37 %) und lsure (33 - 37 %). Sojalecithin enthlt neben Phosphatidylcholin (ca.
30 %) grere Mengen an Phosphatidylethanolamin (22 %), Phosphatidylinosit (18 %) und Glykolipiden (14
%). Es berwiegen Linolsure (54 %), Palmitin- und lsure (je 17 %) sowie Linolensure (7 %). Die
oberflchenaktiven

Lipide

[surfactant

lipids]

der

Lungenalveolen

bestehen

berwiegend

aus

Dipalmitoylphosphatidylcholin.
Surekatalysierte oder alkalische Hydrolyse von Phosphatidylcholin gibt -Glycerinphosphat. Enzymatisch
lassen sich Phosphatidylcholine durch Phospholipasen spezifisch spalten (Abb. 2-4), durch Abspaltung der
Fettsurereste in 1- und 2-Stellung durch Phospholipase B entsteht sn-Glycerin-3-phosphocholin, das als
Ausgangsprodukt fr Partialsynthesen von Phospholipiden dient (S. 80). Ferner lassen sich spezifisch die
Phosphorsure-Cholinesterbindung durch Phospholipase D und die Glycerin-Phosphorsurebindung durch
Phospholipase C spalten. Phospholipase C ist in bestimmten Bakterien, Phospholipase D in Bltenpflanzen
enthalten. Durch Einwirkung von Phospholipase D sind Phosphatidsuren partialsynthetisch zugnglich.
Lysophospholipide besitzen eine freie sekundre Hydroxylgruppe, wie sie durch Abspaltung der C-2-Fettsure
durch Phospholipase A2 entstehen, und besitzen die Fhigkeit Erythrozyten zu hmolysieren, der sie ihren
Namen verdanken.

23

H2C O CO R1
R2

CO O CH
H2C O

Phospholipase B (A2)

Phospholipase B (A1)
O
P O

H2 H2 +
C C N(CH3)3

O-

Phospholipase C

Phospholipase D

Abbildung 2-4. Enzymatische Spaltung von Phosphatidylcholin.

Phosphatidylethanolamine [Kephaline, Colaminkephaline, auch Ethanolamin-Phosphoglyceride] kommen


vergesellschaftet mit Phosphatidylcholinen in wesentlich geringeren Konzentrationen nahezu in allen Geweben
vor und sind mit letzteren die Hauptkomponenten der Membranen tierischer Zellen. Als primre Amine sind sie
schwcher basisch als die quartren Lecithine.
H2C O

COC15 H31

HC O

COC15 H31

Kephalin
Dipalmitoylkephalin
+

H2C O

PO

CH2CH2NH3

O-

Im Phosphatidylserin [Serinkephalin] ist die Phosphorsure mit der Hydroxyfunktion der Aminosure L-Serin
verestert. In Abhngigkeit vom pH-Wert knnen die Phosphatidylserine in mehreren ionogenen Formen
existieren. Bei Bakterien ist Serinkephalin der Biosynthese-Precursor von Phosphatidylethanolamin.
H2C O

COC15 H31

HC O

COC15 H31

Serinkephalin
H2C O

PO

CH2 CH COO-

NH2

Phosphatidylinosite sind stickstofffreie Glycerophospholipide, bei denen Phosphatidsure mit dem cyclischen
Zuckeralkohol myo-Inosit (vgl. 5. ) verestert ist. Sie sind etwas wasserlslich und bilden stabile Gele. Aus dem
Herzmuskel konnten Phosphatidyl-myo-inosite isoliert werden, die Fettsure, Glycerin, myo-Inosit und
Phosphorsure im molaren Verhltnis 2:1:1:1 enthielten. Bei alkalischer Hydrolyse dieser Phosphatidylinosite
werden infolge einer Phosphatgruppenwanderung myo-Inosit-1-phosphat und myo-Inosit-2-phosphat gebildet.
Im Gehirn kommen Phosphatidylinosite mit weiteren Phosphorsureresten in 4- oder in 4- und 5-Stellung des
Inosits vor. Pflanzen und Mikroorganismen bilden komplexe Phosphatidylinosite, die noch Kohlenhydrate,
Sphingosin, Amine oder Aminosuren enthalten. So enthalten z.B. die aus M. tuberculosis isolierten
Phosphatidylinosite einen oder mehrere D-Mannosereste in 2-Stellung des myo-Inosits.
H2C O-COR1
HO
5
4

R O

OH
6 O

OR4
3

OH

O
P O
OH

HC O-COR2
CH2

Phosphatidylinosit
R3, R4 = H
R3 = PO3H2, R4 = H
R3, R4 = PO3H2

Im Phosphatidylglycerin ist ein zweites Molekl Glycerin mit der Phosphorsure verestert. Es kommt in
geringen Konzentrationen in den Chloroplasten der Pflanzen, in Bakterien und auch in Sugetieren vor.
Natrliches Phosphatidylglycerin besitzt die Struktur 3-sn-Phosphatidyl-1'-sn-glycerin und ist der Grundkrper

24

weiterer Glycerolipide, wie z.B. der Cardiolipine (oder Diphosphatidylglycerine), bei denen das zentrale
Glycerinmolekl mit einem zweiten Phosphatidsurerest verestert ist. Sie sind in Membranen von Bakterien
enthalten und fr die innere Membran der Mitochondrien von Eukaryoten typisch. Cardiolipin wurde zuerst aus
dem Herzmuskel, in dem es besonders viele Mitochondrien gibt, isoliert.
2

H2C O R1
H2C O
CH
O HO CH
H2C O P O CH2

R3 = H:
Ph osphatidylglycerin
R3 = Phospha tidyl:
Cardi olipin
R3 = -Co-CH(NH2)-(CH2)4-NH2: Lysylphosphati dylglycerin

R3

O-

Phosphatidylglycerin wird am C-3' des zweiten Glycerinrestes mit Aminosuren wie Lysin oder Alanin
verestert als Lipoaminsure [besser O-Aminoacyl-phosphatidylglycerin] hauptschlich in grampositiven
Bakterien gefunden. Auerdem findet man in Lipiden von Bakterien Phosphatidylglycerin-Derivate, bei denen
die 3'-OH-Gruppe des zweiten Glycerins glykosidisch an D-Glucosamin gebunden ist.

2.1.4.2 Biosynthese, Gewinnung und Synthese von Phospholipiden

Die Biosynthese der Phospholipide geht von L-Glycerin-3-phosphat aus. Die zur Anbindung der Fettsuren
erforderliche Aktivierung erfolgt durch CoA und fhrt zur Phosphatidsure. Die Aktivierung der polaren Kopfgruppen erfolgt blicherweise mit Pyrimidindinucleotiden wie Cytidintriphosphat CTP. Durch Reaktion von
CDP-Diacylglycerin mit Serin wird in Bakterien wie z.B. E. coli Phosphatidylserin gebildet. In tierischem
Gewebe und in E. coli kann daraus durch Decarboxylierung Phophatidylethanolamin entstehen, Methylierung
fhrt

zu

Phosphatidylcholin.

CDP-Diacylglycerin

ist

gleichzeitig

die

Biosynthese-Vorstufe

von

Phosphatidylinosit und Phosphatidylglycerin. Das 3-sn-Phosphatidyl-1'-sn-glycerin reagiert mit CDPDiacylglycerin unter CMP-Abspaltung zu Cardiolipin. In Bakterien wird Cardiolipin auch durch Reaktion
zweier Molekle Phosphatidylglycerin unter Glycerinabspaltung gebildet.
sn-L-Glycerin-3-phosphat
2-Acyl-SCoA
Phosphatidsure

Diacylglycerin

Triacylglycerin

CTP
UDP-Zucker
CDP-Diacylglycerin
Serin

Cerebroside

Phosphatidylserin
- CO2

Inosit

Glycerophosphat

Phosphatidylethanolamin
Phosphatidylglycerin
Methylierung
Phosphatidylcholin

CDP-Glycerin
Phosphatidylinosit

Abbildung 2-5. Biosynthese von Phospholipiden.

Cardiolipin

25

Phosphatidylcholine gewinnt man aus natrlichem Material wie Eigelb oder Sojabohnen, die Isolierung anderer
Phospholipide aus natrlichen Quellen ist hingegen auerordentlich schwierig. Phospholipide mit definierter
Zusammensetzung, wie sie zur Darstellung von Modellmembranen bentigt werden, sind nur synthetisch
zugnglich. Als Ausgangsverbindungen zur Totalsynthese von Phospholipiden kommen 1,2-Diacylglycerin,
1,2-Diacyl-3-iodhydrin oder Phosphatidsure in Frage. Zur Phosphorylierung der C-3-Hydroxygruppe des
Diacylglycerins wird hufig 2-Bromoethylphosphorsuredichlorid verwendet, das anschlieend mit
Trimethylamin zu Phosphatidylcholin umgesetzt wird (Formel 2-11).
H2C
HC
H2C

O-COR
+

O-COR

Cl

O
P O

H2C O-COR
H2 H2
C C Br

Et3N, CHCl 3

H2C

Cl

OH

HC

O-COR O
O

H2 H2
C C Br

OH

1,2-Diacylglycerin
H2C O-COR
1. MeN3
2. Ag2CO3

HC O-COR O
H2C

H2 +
C N(CH3)3

H2
C

Phosphatidylcholin

OH

Formel 2-11 Totalsynthese von Phosphatidylcholin (nach HIRT und BERCHTHOLD sowie EIBL).

Ausgehend von 1,2-Diacylglycerin-3-iodhydrin gelangt man nach HAAS und VAN DEENEN zu den Zielverbindungen. Kondensationsmittel wie Carbodiimid [DCC] oder Triisopropylbenzolsulfochlorid [TPS] erlaubt
die Verwendung von Phosphatidsuren als Startsubstanzen fr die Synthese von Glycerophospholipiden
(Formel 2-12). Phosphatidsuren kann man aus sn-Glycerin-3-phosphat mit Fettsureanhydriden gewinnen.
H2C O-COR
+

HC O-COR O
H2C O

P
OH

HO

H2 H2
C C

DCC oder TPS


NH-Schutzgruppe

OH

Phosphatidsure
H2C O-COR

H2C O-COR

Phosphatidylethanolamin

Abspaltung der Schutzgruppe


HC O-COR O

HC O-COR O
H2C O

H2
C

H2
C NH2

H2C O

H2
C

H2
C NH-Schutzgruppe

OH
OH

Formel 2-12. Synthese von Glycerophospholipiden mit Phosphatidsure als Startsubstanz.

Partialsynthesen, die von aus natrlichen Quellen isolierten Phosphatidylcholinen ausgehen, gewinnen an
Bedeutung. Mittels Phospholipasen knnen die einzelnen Fettsureester spezifisch hydrolytisch gespalten und
das entstandene optisch reine sn-Glycerophosphocholin mit entsprechenden Fettsurederivaten wieder definiert
acyliert werden.

2.1.4.3 Eigenschaften der Phospholipide

Reine Phospholipide sind weie, wachsartige Substanzen, die sich wegen des hohen Anteils ungesttigter Fettsuren durch Luftsauerstoff leicht zersetzen. Meist ist die Fettsure in Position 1 des Glycerins gesttigt, die in

26

2-Position ungesttigt. In den meisten unpolaren Lsungsmitteln, die etwas Wasser enthalten, sind
Phosphoglyceride lslich. In Wasser selbst gehen nur sehr geringe Mengen wirklich in Lsung, der Groteil
liegt als Micellen vor (vgl. 3. Lipoproteine und Membranen).

In Abhngigkeit vom pH-Wert liegen Phospholipide je nach Art der funktionellen Gruppen in verschiedenen
ionogenen Formen vor. Bei pH 7 trgt die Phosphatgruppe eine negative Ladung, die polaren Gruppen von
Phosphatidylethanolamin und Phosphatidylcholin eine positive Ladung und stellen deshalb Zwitterionen ohne
berschuladung dar. Phosphatidylserin besitzt aufgrund seiner Carboxylfunktion eine negative berschuladung, O-Lysyl-phosphatidylglycerin hingegen besitzt aufgrund der zweiten Aminogruppe des Lysins eine
positive berschuladung.

2.1.5 Etherlipide

Bei den Etherlipiden ist das C-1 des Glycerins ber eine Etherbindung mit einem Fettalkohol verknpft. Am
lngsten bekannt sind die Plasmalogene, 1-Alk-1-enyl-2-acylglycerophospholipide, bei denen eine hydrophobe
Gruppe der cis-Enolether eines Fettaldehyds (Hexadecanal oder Octadecanal) ist. Plasmalogene kommen
vergesellschaftet mit anderen Glycerophospholipiden in Pflanzen, Tieren und Mikroorganismen vor, besonders
reichlich im Gehirn und Muskeln und werden je nach Struktur als Plasmenylethanolamine oder
Plasmenylserine bezeichnet.
H2C O CH CH (CH2)n CH3
O
ROC-O CH
H
H2C O P O CH2 C COO

CH3
H2C O CH CH (CH2)n
O
ROC-O CH
H2 H2 +
H2C O P O C C NH3

Plasmenylethanolamin

+ NH3

Plasmenylserin

Ein Etherlipid ist der platelet activating factor [PAF], ein 1-O-Hexadecyl- bzw. 1-O-Octadecyl-2-acetyl-snglyceryl-3-phosphorylcholin, der nach Stimulierung von Zellen, die bei Entzndungen eine Rolle spielen,
freigesetzt wird, und der in geringsten Konzentrationen (10-10 bis 10-11 M) Thrombozyten aktiviert. Darber
hinaus besitzt PAF selektive Wirkung gegen Tumorzellen und Einflu auf den Blutdruck.
H2C
CH3CO-O

CH

H2C

(CH2)15 CH3

O
O P O
O

1-O-Hexadecyl-2-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholin
PAF

+
CH2

CH2

N(CH3)3

Ungewhnliche Etherlipide wurden in den methanbildenden Archaebakterien gefunden, die aus CO2 durch
Reduktion CH4 produzieren. Sie enthalten als Hauptbestandteil Di- und Tetraether des Glycerins mit C20isoprenoiden Monoalkoholen (Dihydrophytol) oder
thermoacidophile

Thermoplasma

acidophilum

ein

C40-isoprenoiden
bipolares

Dialkoholen.

Tetraetherlipid

So
mit

enthlt

das

isoprenoiden

,Diolstrukturen, die durch Kopf-Kopf-Kondensation zweier Dihydrophytylreste entstehen. Mit steigender


Wachstumstemperatur werden die C40-Alkohole zustzlich cyclisiert, was zur Erhhung der Schmelztemperatur

27

der Bakterienmembran fhrt. An einigen Stellen sind die beiden Membranseiten ber die hydrophoben
Dialkoholketten kovalent miteinander verbunden, was zu einer Stabilisierung der Membran fhrt.
H2C

HC

H2C

O-R

H2C

HC
H2C

R2-O

CH2

CH

CH2

O
O-R1

R1 = H, Phosphorylglycerin

R2 = Kohlenhydratrest

HO

OH

HO

bis zu vier Ringen


S
OH

2.1.6 Phosphonolipide

In den Phosphonolipiden ist statt der Orthophosphorsure der Phospholipide Phosphonsure mit Glycerin
verestert. Ciliatin ist ein aus Wimperntierchen isoliertes Derivat der 2-Aminoethanphosphonsure.
H2C
R2-CO O

CH

H2C

CO-R1

O
HO P

CH2

CH2

NH2

OH

O
O P
O

Ciliatin
aus Wimperntierchen
+

CH2

CH2

NH3

2-Aminoethanphosphonsure

2.1.7 Sphingolipide, Sphingophospholipide

Sphingolipide oder Sphingophospholipide sind komplexe Lipide mit langkettigen Aminoalkoholen als Grundgerst, die als Sphingosin bezeichnet werden. Alle Sphingolipide enthalten drei Komponenten: ein Molekl
Sphingosin (oder Sphingosin-Derivat), ein Molekl Fettsure, die amidartig an die Aminofunktion des
Sphingosins gebunden ist, und eine polare Gruppe.

2.1.7.1 Sphingosin

4-Sphingenin, Sphingosin, ist einer von etwa 20 verschiedenen natrlich vorkommenden langkettigen Aminoalkoholen. Sie sind Abkmmlinge des Sphinganin [D-erythro-2-Amino-octadecan-1,3-diol, Dihydrosphingosin],
dessen Homologe, Stereoisomere sowie Hydroxy- und ungesttigte Derivate hufig als Sphingoide bezeichnet
werden.

28

HO
H2C

NH2 OH
C

CH CH C13 H27

Sphingosin, 4-Sphingenin (4-Sphingosin)


2-Amino-octadec-4-en-1,3-diol

Sphingosin wurde bereits 1880 durch Hydrolyse aus Lipiden des menschlichen Gehirns erhalten und ist
zusammen mit Sphinganin in Sugetieren die hufigste Aminoalkoholkomponente der Sphingolipide. In
hheren Pflanzen und in Hefen werden Phytosphingosin [4-Hydroxysphinganin], in marinen Evertebraten
doppelt-ungesttigte Basen wie 4,8-Sphingadien als Sphingolipidkomponente gefunden.

2.1.7.2 Sphingomyeline

Die hufigsten Sphingolipide in den Geweben hherer Tiere und im Blutplasma (8 - 15 % der Gesamtlipide)
sind die Sphingomyeline, die mit einer langkettigen Fettsure ein Amid bilden und als polare Gruppe
Phosphorylethanolamin oder Phosphorylcholin enthalten. Die alkalische Hydrolyse fhrt zu Ceramiden, die als
N-Acylreste meist C24-Suren wie Lignocerinsure (24:0) und Nervonsure (24:115) oder die entsprechenden
-Hydroxysuren Cerebronsure oder Oxynervonsure enthalten.
OH
H2C

O PO

O CH2CH2-N(CH 3)3

H2C

OH
1

H C NH CO (CH2)7CH=CH(CH 2)7CH3
H

HC OH

C OH
HC CH-C13 H27

HC NH

Sphingomyelin

R2

CO R

R1 = -C23H47
-C23H45
-CH(OH)-C22H45
-CH(OH)-C22H43

Lignocerinsure
Nervonsure
Cerebronsure
Oxynervonsure

Formel 2-13. Struktur eines reprsentativen Sphinomyelins und eines Ceramids.

2.1.7.3 Glykosphingolipide oder Sphingoglykolipide

Die meisten Sphingolipide gehren zur Gruppe der Glykosphingolipide oder Sphingoglykolipide, die einen an
der primren Hydroxygruppe der Ceramide glykosidisch gebundenen Monosaccharid- oder Oligosaccharidrest
als polare Gruppe enthalten. Dadurch weisen die Glykosphingolipide eine groe strukturelle Mannigfaltigkeit
auf, wobei die Zucker bei den Zoosphingoglykolipiden weniger variiert werden als bei den entsprechenden
Phytosphingoglykolipiden (Tab. 2-4). Sie sind wasserlslich, wobei die Lslichkeit von der Zahl der Monosaccharideinheiten und der Anwesenheit anionischer Surekomponenten abhngt.

Die Glykosphingolipide werden eingeteilt in neutrale Sphingoglykolipide [Mono-, Di- und Oligoglykosylsphingolipide, Mono- und Oligoglycosylceramide] und saure Sphingoglykolipide, zu denen die Sulfoglykosylsphingolipide [Sulfatide] und Sialosylglykosylsphingolipide [Ganglioside] zhlen. Die neutralen Sphingoglykolipide enthalten als polare Gruppe einen oder mehrere Neutralzucker. Die einfachsten Vertreter dieser Gruppe
enthalten nur ein -glykosidisch gebundenes Monosaccharid und werden als 1,-Glykosylceramide oder
Cerebroside bezeichnet. Abspaltung der Fettsure durch alkalische Hydrolyse fhrt zum Glykosphingosin
Psychosin. Die Cerebroside des Gehirns und der Nerven sind meist D-Galactopyranoside [Galactocerebroside],

29

die anderer Organe D-Glucopyranoside oder Glucocerebroside, an die weitere Zucker gebunden sein knnen.
Fucose enthaltende Sphingoglykolipide werden als Fucolipide bezeichnet.

Die ersten Galactocerebroside wurden bereits 1882 aus menschlichem Hirn isoliert und als Phrenosin und
Kerasin bezeichnet. Diese und weitere Galactocerebroside wie Nervon bzw. Oxynervon unterscheiden sich
durch ihre Fettsurereste (Cerebronsure, Lignocerinsure, Nervonsure bzw. Oxynervonsure).

Zu den Oligoglykosylceramiden gehren Bestandteile der Zell membran, die die serologische Spezifitt der
Zellen bedingen, so u.a. die Blutgruppensubstanzen an der Oberflche der Erythrozyten, die L-Fucose als
essentielle Zuckerkomponente enthalten. Die terminalen Oligosaccharideinheiten bestimmen die Zugehrigkeit
zu den Blutgruppen A, B oder 0 und sind in Tab. 2-5 aufgefhrt. Die Oligosaccharide fr die Gruppen A und B
sind verzweigt, fr die Gruppe 0 unverzweigt. Die einzelnen Glykolipide konnten noch in verschiedene Typen
aufgetrennt werden, die sich in R [(Glyc)n-Ceramid] unterscheiden.

Tabelle 2-4. Wichtige Oligoglykosylsphingolipide


Glykosphingolipid

Trivialname des Oligosaccharids

Abkrzung*

GbOse3
GbOse4
iGbOse3
iGbOse4
McOse3
McOse4
LcOse3
LcOse4
nLcOse4
GgOse3
GgOse4
GaOse2
GaOse3
GalNAc(13)
-GaOse3
*(Die ersten zwei bzw. drei (i = Iso, n = Neo) Buchstaben sind die Abkrzungen fr den Trivialnamen des
Oligosaccharids. Osen = Anzahl (n) von Monosaccharid-Einheiten (Ose) im Oligosaccharid).
Gala(14)-Galb(14)-Glc-Cer
GalNAcb(13)-Gala(1 4)-Galb(14)-Glc-Cer
Gala(13)-Galb(14)-Glc-Cer
GalNAcb(13)-Gala(13)-Galb(14)-Glc-Cer
Galb(14)-Galb(14)-Glc-Cer
Galb(13)-Galb(14)-Galb(14)-Glc-Cer
GlcNAcb(13)-Galb(14)-Glc-Cer
Galb(13)-GlcNAcb(13)-Galb(14)-Glc-Cer
Galb(14)-GlcNAcb(13)-Galb(14)-Glc-Cer
GlcNAcb(14)-Galb(14)-Glc-Cer
Galb(13)-GalNAcb(14)-Galb(14)-Glc-Cer
Gala(14)-Glc-Cer
Gal(14)-Gala(14)-Glc-Cer
GalNAc(13)-Gal(14)-Gala(14)-Glc-Cer

Globotriaose
Globotetraose
Isoglobotriaose
Isoglobotetraose
Mucotriaose
Mucotetraose
Lactotriaose
Lactotetraose
Neolactotetraose
Gangliotriaose
Gangliotetraose
Galabiose
Galatriaose
N-Acetylgalactosaminylgalatriaose

Tabelle 2-5. Terminale Oligosaccharidreste von Blutgruppensubstanzen (nach MORGAN und KABAT). R =
(Glyc)n-Ceramid
Blutgruppe

terminale Oligosaccharide

D-GalNAc-(13)
D-Gal-(13)-D-GlcNAc-(13)-R
L-Fuc-(12)

D-Gal-(13)
D-Gal-(13)-D-GlcNAc-(13)-R
L-Fuc-(12)

L-Fuc-(12)

D-Gal-(13)-D-GlcNAc-(13)-R

30

Bei den Sulfoglykosylsphingolipiden, (frher Sulfatide), ist in 3-Stellung der D-Galactose Schwefelsure esterartig gebunden. Eine andere Gruppe der sauren Glykosphingolipide sind die Ganglioside, die durch eine oder
mehrere in ihrem Oligosaccharidteil endstndig gebundene Sialinsuren charakterisiert sind und damit bei pH
7.0 eine negative Ladung tragen. In den Gangliosiden des Menschen ist N-Acetylneuraminsure die hufigste
Sialinsure. ber 20 verschiedene Ganglioside sind bisher identifiziert worden, in der grauen Hirnsubstanz
machen sie etwa 6 % der Gesamtlipide aus. Fast alle haben Glucose in glykosidischer Bindung am Ceramid, DGalactose und N-Acetyl-D-galactosamin kommen jedoch auch vor. Die Ganglioside des Sugetierhirns
variieren im Fettsurerest und im Kohlenhydratanteil, wobei die Zusammensetzung altersabhngig ist.
Ganglioside sind hauptschlich in den Membranen der Nervenzellen lokalisiert, dienen an der Zelloberflche
als Rezeptoren fr biologisch aktive Substanzen und spielen eine wesentliche Rolle bei den Wechselwirkungen
zwischen Zellen (Zellerkennung, Adhsion).

Am

besten

untersucht

ist

das

Rezeptorgangliosid

fr

Serotonin,

das

die

Struktur

NeuAc(24)Galb(14)GlcCer besitzt. Die meisten Ganglioside des ZNS haben jedoch wesentlich
kompliziertere Strukturen, die Molmassen der Ganglioside liegen zwischen 1.500 und 3.000.Ein relativ
hufiges Gangliosid, das u.a. in der Sugetier-Retina, in Rindernieren und im Hirngewebe nachgewiesen und
als melanom-assoziiertes Antigen bekannt ist, ist das Gangliosid GD3.
OH OH COOH
HO
AcHN

Gangliosid GD3

Rxn
O

HO

H O
OH
COOH

OH

OH
HO
AcHN

Rxn
O

Rxn

HO
HO OH

O
HO

Rxn

NHCOC23 H47
O
C13 H27

O
OH
OH

2.1.8 Glykolipide

Zum Unterschied von den oberhalb genannten Glykosiden gibt es eine Reihe von Glykolipiden, bei denen die
OH-Funktionen von Mono- oder Oligosacchariden direkt mit Fettsuren verestert sind. Zu ihnen gehren u.a.
toxische Lipide bestimmter Bakterien, die gesondert bei den Kohlenhydraten (5.7.2 Lipopolysaccharide)
abgehandelt werden. Eine auffllige Struktur besitzt ein aus marinen Bakterien isoliertes Glucoselipid, das man
als natrliches Tensid bezeichnen knnte.

31

Glucoselipid aus
marinen Bakterien spec. MM1

O
O

O
O

O
O

O
O

OH

OH

OH

OH
HO

2.1.9 Wachse

Als Wachse im engeren Sinne werden wasserunlsliche feste Ester hherer Fettsuren mit langkettigen Fettalkoholen oder cyclischen ein- oder zweiwertigen Alkoholen (z.B. Steroiden) bezeichnet. Als Fettsuren treten
in Wachsen hufig Laurin(12:0), Myristin- (14:0) und Palmitinsure (16:0), aber auch langkettige
Carbonsuren wie Cerotinsure (26:0), Montansure (28:0) oder Melissinsure (30:0) auf. Im Gegensatz zu den
anderen Lipiden sind die Surekomponenten fast ausschlielich gesttigt, hufig besitzen Alkohol und
Surekomponente die gleiche Zahl von C-Atomen. Zum Unterschied zu den Fetten sind Wachse aufgrund ihrer
lngerkettigen Alkohol- und Fettsure komponenten schwerer hydrolysierbar.

Natrliche Wachse sind meist Gemische dieser Wachsester mit Paraffinen und freien Alkoholen. Sie stellen
einen Schutz fr Haare, Federn, Haut, Bltter und Frchte gegen Umwelteinflsse und Mikroorganismen dar
und kommen als Cuticularlipide auf der Cuticula vieler Insekten vor. Die Hauptkomponenten von Bienenwachs,
das Strukturbildner fr Waben ist, sind Palmitinsureester von Fettalkoholen mit 26 bis 34 C-Atomen. Die
Hauptmenge ist Myricylpalmitat, wobei als Myricylalkohol ein Gemisch der Alkohole C30H61OH und
C32H65OH bezeichnet wird. Pflanzen wachse regulieren den Wasserhaushalt und schtzen Bltter vor dem
Austrocknen. Bei einigen pflanzlichen Wachsen wie z.B. den Wachsen der Tabak- und Kohlbltter bilden
gesttigte unverzweigte und verzweigte (iso- und anteiso-Reihe) Alkane den Hauptbestandteil, whrend in
tierischen Wachsen Paraffine nur in geringer Menge enthalten sind. Bei Sugetieren sind Ester des
Steroidalkohols Cholesterin hufig verbreitet. In einigen Wachsen kommen langkettige Diole vor, so z.B. 1,2Alkandiole im Wollwachs der Schafe oder ,-Diole im Carnauba-Wachs. Wollwachs wird als salbenartige
Masse durch Extraktion aus den Wollhaaren der Schafe gewonnen und dient zur Bereitung der Emulsionssalbe
Lanolin. Der Hauptbestandteil des sich in bestimmten Hohlrumen des Pottwals ansammelnden Walrats
[Cetaceum] ist Palmitinsurecetylester, C15H31CO-O-C16H33. Whrend die meisten Wachse wahrscheinlich
nicht wieder in den Stoffwechsel einbezogen werden knnen, stellen sie bei bestimmten Meerestieren wichtige
Reservestoffe dar.

32

H3C CH (CH2)n CH2OH

H3C CH2

CH3

CH

(CH2)n CH2OH

CH3

iso-Alkan-1-ol

anteiso-Alkan-1-ol

Die Seide von Spinnen ist von einer Lipidschicht umhllt, die langkettige Methylether enthlt, auerdem
werden Diole und Ethanolamide darin gefunden. In Cuticularextrakten von Schmetterlingen und von
Wanderheuschrecken konnten langkettige 2,5-Dialkylfurane als Lipidbestandteile identifiziert werden.
H3CO

aus der Seide


verschiedener
Baldachinspinnen

H3CO
H3CO
H3CO

aus der Seide


tropischer Radspinnen

HO
O
HO
N
H

Aus Wachsen von


Tagfaltern und
Wanderheuschrecken

O
OH

Wachse von Mycobakterien ergaben bei der Verseifung Phtiocerol, ein langkettiges methoxyliertes Diol. An
die Hydroxygruppen sind in diesen Wachsen Mycocerosinsuren, mehrfach methylierte, optisch aktive
Fettsuren, esterartig gebunden.
CH3

CH3

Phthiocerol: R = CH3-(CH2)4 oder CH3-(CH2)6

R-(CH 2)16
OH

OH

OCH3

Phenol.Phthiocerol: R =

HO

2.2 Literatur
L.D. BERGELSON und M.M. SHEMYAKIN, Angew. Chem. 76, 113 (1964).
H. TRUBLE, Phasenumwandlungen in Lipiden. Mgliche Schaltprozesse in biologischen Membranen,
Naturwissenschaften 58, 277 (1971).
G.B. ANSELL, J.N. HAWTHORNE und R.M.S. DAWSON (Hrsg.), in Form and Function of Phospholipids,
2. Aufl., Elsevier, London (1973).
H. TRUBLE und P. OVERATH, Biochem. Biophys. Acta 307, 491 (1973).
A.L. LEHNINGER, Lipide, Lipoproteine und Membranen; Die Biosynthese der Lipide; Der Oxidative Abbau der
Fettsuren; in Biochemie, 2. Auflage, Verlag Chemie, Weinheim - New York (1977).
O.W. THIELE, Lipide, Isoprenoide und Steroide, Thieme-Verlag, Stuttgart (1979).
J.N. HAWTHORNE und G.B. ANSELL, Phospholipids, Elsevier, Amsterdam (1982).

33

H.K. MANGOLD und F. PALTAUF, Ether Lipids, Academic Press, London (1983).
P.-A. SIEGENTHALER und W. EICHENBERGER, Structure, Function and Metabolism of Plant Lipids, Elsevier,
Amsterdam (1984).
R. PRASAD, Manual on Membrane Lipids, Springer, Heidelberg (1996).

34

3 Lipoproteine und Membranen


3.1 Micellen, Monolayer, Bilayer, Vesikel und Liposomen

Wasser lst oder dispergiert Verbindungen mit sowohl polaren hydrophilen als auch unpolaren lipophilen
Gruppen in Form hochmolekularer Assoziate, die als Micellen bezeichnet werden. Molekle dieser Art heien
amphiphil oder amphipathisch, typische Vertreter sind Seifen, die Salze der Fettsuren.

Seifen-Micellen bestehen aus Hunderten bis Tausenden von Moleklen, die negativen Carboxylatgruppen
orientieren sich in Richtung der wrigen Phase und es bildet sich dadurch eine hydrophile Oberflche aus
[Sternschicht], und die auch einen Teil der Gegenionen enthlt. Das Innere bildet ein hydrophober Innenraum
mit einem hydrophoben Kern (Radius 1 - 3 nm). Den uersten Bereich der Micelle bildet die Gouy-ChapmanDoppelschicht, die sich aus den hydratisierten Gegenionen zusammensetzt. Zur Stabilisierung der Micellendispersion tragen die Ausbildung von Wasserstoffbrcken, die Hydratation und die gegenseitige Abstoung des
negativen Ladungsberschu bei. Innerhalb der Sphre wirken zustzlich hydrophobe Wechselwirkungen van
der Waals'scher Art. Die Lebenszeit eines solchen Gebildes betrgt oft nur einige Millisekunden, d.h. sie
zerfallen stndig und werden wieder neugebildet. Inverse Micellen entstehen durch Lsung von Tensiden im
unpolaren Lsungsmitteln.

Abbildung 2-6. Teilausschnitt einer idealisiert-kugelfrmigen anionischen Micelle mit positiv geladenen
Gegenionen.

hnlich verhlt sich ein polares, amphiphiles Lipid in Wasser. Die Kohlenwasserstoffketten der Fettsuren
bzw. des Sphingosins stellen die lipophilen Strukturteile dar, als hydrophile Gruppierung dienen die
Phosphatgruppen

bzw.

Phosphatester

der

Aminoalkohole

bei

den

Phosphoglyceriden,

bzw.

die

Kohlenhydratteile oder deren Schwefelsureester bei den Glykolipiden. Anfangs geht nur ein sehr geringer
Lipidanteil

in

monomolekularer

Form

in

Lsung.

Beim

berschreiten

einer

Kritischen

-2

Micellbildungskonzentration [KMK, CMC], die bei ionischen Tensiden bei 10 mol/l und bei nichtionischen
bei 10-4 mol/l liegt, assoziiert es zu den micellren Moleklverbnden.

Erhht man die Konzentration einer wrigen Lsung einer amphiphilen Verbindung wesentlich ber ihre
KMK hinaus, so entstehen aus den sphrischen Micellen zylinderfrmige Gebilde, wie durch Rntgen-Kleinwinkelstreuung in Lsung gezeigt wurde. Bei noch hheren Konzentrationen lagern sich diese Zylinder
zusammen und bilden Mesophasen [nematische Phasen, Flssigkeitskristalle], deren Zustand zwischen dem
von isotropen Flssigkeiten und dem von festen Kristallen liegt. Bei optisch aktiven Moleklen, z.B.
Cholesterinderivaten, sind die Vorzugs richtungen der einzelnen nematischen Schichten gegen einander um

35

bestimmte Winkel gleichsinnig verdreht, so da mehrere aufeinanderfolgende Schichten eine helikale


berstruktur ausbilden [cholesterische Flssigkeitskristalle]. Nematische Phasen lassen sich durch
hochfrequente elektrische Felder in Unordnung bringen und die Flssigkristalle werden trb. Durch ein
schwaches Gleichstromfeld ordnen sich die Dipole wieder aus, und der Kristall wird wieder klar
(Flssigkristall-Anzeige, LCD).

Abbildung 2-7: a) Zylindermicelle, b) nematische Mesophase (Flssigkeitskristalle).

An Phasengrenzflchen wie Wasser/Luft tendieren amphiphile Molekle zur Wanderung an die Grenzflche.
Dadurch kommt es zur Ausbildung monomolekularer Schichten [Monolayers] und zur Erniedrigung der Oberflchenspannung des Wassers. Zwischen zwei getrennten wrigen Phasen hingegen bilden sich bimolekulare
Doppelschichten [Bilayers] aus. Solche Bilayersysteme sind Modelle natrlicher Membranen und wurden
eingehendst studiert. Vesikel, die spontan durch Rhren oder Ultrabeschallung von Phosphoglyceriden in
Wasser entstehen, sind in sich geschlossene flssigkeitsgefllte Blschen aus bimolekularen Membranen (Abb.
2-8). Je nach Genese bestehen sie aus mehreren, zwiebelschalenartig ineinander angeordneten bimolekularen
Membranen. Fr die Art dieser berstrukturen ist die Struktur der komplexen Lipide, vor allem das Verhltnis
zwischen apolarem Kohlenwasserstoffteil und den polaren Kopfgruppen verantwortlich. Im Gegensatz zu
Micellen enthalten Vesikel im Inneren Wasser und nicht hydrophobe CH2-Ketten. Sie sind tagelang stabil,
lassen sich chromatographisch fraktionieren und knnen rntgenographisch und elektronenmikroskopisch
untersucht werden. Liposomen sind Lecithin-Vesikel und dienen als Transport- und Applikations systeme fr
Pharmaka and Kosmetika, die sich je nach Zusammensetzung in die wrige Innenphase als auch zwischen die
Fettsureketten inkorporieren lassen.

Abbildung 3-8. Mikrovesikel aus einer Bilayermembran, die innere Flche besteht aus etwa nur halb so vielen
Moleklen wie die uere.

Zur Herstellung von Lipidmembranen wird die Lsung eines Lipids ber ein 1 - 2 mm groes Loch in einer
Platte gestreift und anschlieend in Wasser getaucht. Der Lipidtropfen sammelt sich als ringfrmiger Wulst, im
Zentrum verbleibt eine bimolekulare Schicht, die aufgrund der Dnne (< als Wellenlnge des sichtbaren Lichts)
schwarz erscheint [black lipid membrane, BLM]. (Den chemischen Aufbau einer Lipidmembran zeigt Formel 314).

36

OH
(H3 C)3N

H2
C

H2
C O

CH2

H3N

OH

(CH2)4
NH3

H2
C O

H2
C CH

CH2

H2C

CH

OH

HC

HC

O
O

O OH
OH

HO
OH

HC

H2C

CH2

CH

HO
OH

OH

COO

O
HC

CH2

H2C

H2
C O

CH2

H2C

NH2

H2
C

CH

COO

OH
NH2

OH

HC

O
OH

H2C

O
O

HO

NH2

CH2
CH

H2C O P

OH
O

H2
C CH

O
H2
C

(CH2)4
CH

OH

HO
HO

NH2

OH
O

P O

CH2

O
NH2

HC
H2C

O
O

O
O

CH2
CH

H2C O P
OH

OH
O

H2
C CH

O
H2
C

(CH2)4
CH
NH2

Formel 3-4: Aufbau einer Lipidmembran.

BLMs eignen sich zu Untersuchungen von Stoff- und Ladungstransportphnomenen, wie sie bei der Permeation
durch Lipidschichten auftreten. Die Durchlssigkeit der BLM fr dipolare Molekle wie Harnstoff, Glucose
oder Glycerin ist wesentlich geringer als fr Wasser, besser durchdringen grere nichtgeladene Molekle mit
unpolaren Resten die Membran. Fr kleine Ionen wie K+, Na+, Cl-, PO4H2-, Cholin, usw. stellt eine BLM ein
fast unberwindliches Hindernis dar. Zur Messung der Permeationsgeschwindigkeiten knnen die Leitfhigkeit,
das Membranpotential, der osmotische Druck, Messung der Radioaktivitt bei markierten Moleklen oder
optische Methoden herangezogen werden.

3.2 Lipoproteine und biologische Membranen

Lipide assoziieren mit Proteinen zu Lipoproteinen, die die physikalischen Eigenschaften beider Verbindungsklassen besitzen. Es gibt zwei Typen von Lipoproteinen, die Transport-Lipoproteine und die Membransysteme.
Dabei werden die Lipid- und die Proteinkomponente durch hydrophobe Wechselwirkungen der unpolaren Teile
der beiden zusammengehalten.

Im Serum von Sugetieren kommen komplexe Lipide und Proteine vor, die relativ konstante
Mengenverhltnisse besitzen und die als Transport-Lipoproteine wasserunlsliche Lipide wie Cholesterin,
Cholesterinester und Triacylglycerine zwischen den Organen ber die Blutbahn transportieren. Sie werden nach
Dichte und Partikelgre charakterisiert, man unterscheidet Chylomikronen (Partikelgre 75 - 1.000 nm),
VLDL [very low density lipoprotein, 30 - 50 nm], LDL [low density protein, 20 - 22 nm] und HDL [high density
lipoprotein, 7.5 - 10 nm]. Ein LDL transportiert Cholesterin im Plasma, an der Zielzelle bindet das Partikel an
den LDL-Rezeptor und wird von der Zelle aufgenommen. Wird zuviel Fettsuren aufgenommen oder liegt ein
Defekt am LDL-Rezeptor vor, so kommt es zur Anreicherung von LDL und Cholesterin im Blut. Daraus kann

37

es bei Schdigung der Arterienwnde zur Einlagerung von LDL in die Zellwand fhren und sich ein Thrombus
bilden, der zu Herzinfarkt oder Schlaganfall fhrt. HDL hingegen ist u.a. fr die Entfernung von Cholesterin
aus dem Blut verantwortlich. Man nimmt an, da gesttigte Fettsuren die LDL-Partikel modifizieren und die
Bindung am LDL-Rezeptor negativ beeinflussen. Dagegen scheinen ungesttigte Fettsuren den LDL-Rezeptor
so zu verndern, da eine hhere Affinitt der LDL-Partikel zum Rezeptor resultiert.

Biologische Membranen sind dnne (ca. 8 nm), zweidimensionale Aggregate aus Lipiden, insbesondere
Phospholipiden und Proteinen, die bis zu 80% des Zelltrockengewichtes besitzen knnen. Sie dienen dem
Zweck, den freien Stofftransport zu beschrnken und zu spezialisieren, gleichzeitig grenzen sie verschiedene
wrige Kompartimente voneinander und die Zelle nach auen ab. Sie stellen hochselektive
Permeabilittsschranken dar und ermglichen Stoff- und Informationsaustausch (Zellerregung). Sie besitzen die
Fhigkeit, Strukturdefekte spontan zu reparieren. Zellen eukaryotischer Organismen enthalten auerdem eine
Reihe intrazellulrer Membranen (z.B. das endoplasmatische Reticulum) und Membran-umschlossene
Organellen (Mitochondrien, Zellkerne, Liposomen, usw.), die ihrerseits das Zellinnere in verschiedene
Kompartimente aufteilen.

Whrend die Kapillarmembranen der Blutgefe, der Lungenblschen, etc. einen relativ raschen Stofftransport
erlauben, entsprechen Zellmembranen den bimolekularen Lipidschichten einer BLM. Ihre Leitfhigkeit fr
Ionen ist gering, soda sich die Elektrolytzusammensetzung des Zellinneren von der der Umgebung deutlich
unterscheiden kann. Fr den Transport kleiner Molekle wie Wasser sind Kinken verantwortlich, das sind
Hohlrume zwischen den Fettsureketten in Lipiddoppelschichten, die durch Konformationsbergnge von
antizur gauche-Konformation in den Ketten unter geringem Energieaufwand entstehen und in denen kleine
Molekel Platz finden. Diese Kinken sind entlang der Alkylketten und innerhalb der Lipidschicht beweglich und
wandern mit dem Wassermolekl durch die Membran [TRUBLE].

Die meisten Membranen besitzen etwa 40% Lipid- und 60% Proteinanteil. Membranen, die hauptschlich als
Barrieren wirken, enthalten relativ viel Lipide, whrend hingegen funktionelle Membranen wie z.B. die Mitochondrienmembran als Trger zahlreicher Enzymsysteme mehr Proteinanteil als Lipidanteil besitzen.
Membranlipide

sind

meist

polar

und

hauptschlich

Phospholipide,

ihre

Zusammensetzung

ist

strukturbestimmend und charakteristisch fr das jeweilige Membransystem, fr das Organ und die Art. Das
molare Verhltnis der Lipide in einer Membran scheint genetisch determiniert zu sein und kann durch
"Ftterung" nicht verndert werden. Im Gegensatz dazu knnen die Fettsurekomponenten der Lipide durch
Angebot artfremder Fettsuren durch das Medium variiert werden. Bei den in den Membranen verankerten
Proteinen unterscheidet man periphere Proteine, die nur lose angelagert sind, und die integralen Proteine, die
die Lipid-Doppelschicht durchdringen. Letztere besitzen oft Bedeutung fr den Ionentransport. Biologische
Membranen sind asymmetrisch, d.h. sie unter scheiden sich im Aufbau der zellinneren und der ueren Schicht.

38

Diese asymmetrische Anordnung ist die Grundvoraussetzung fr aktive Transportprozesse, bei denen eine
Substanz entgegen ihrem elektrochemischen Gradienten von der einen zur anderen Seite "gepumpt" wird.

Mit physikalischen Methoden wie z.B. Elektronenmikroskopie, ORD- und CD-Messung kann man die
Anordnung von Lipiden und Proteinen und deren Zusammensetzung bestimmen. Das Innere der BilayerStruktur

representiert

eine

kontinuierliche

Kohlenwasserstoffphase.

Bei

einer

bestimmten

Phasenumwandlungstemperatur Tt [transition temperature], die einem Phasenbergang kristallin flssigkristallin entspricht, gehen die Alkylketten von einer geordneten Struktur in eine beweglichere ber. Die
Temperatur Tt hngt sowohl von der Struktur der polaren Kopfgruppe als auch von den Kettenlngen der
Fettsuren und dem Grad ihrer Ungesttigtheit ab. Unterhalb dieser Temperatur liegen gesttigte Acylreste
gestreckt in der all-trans-Konfiguration vor und bilden ein zweidimensionales, hexagonales Gitter, oberhalb der
Umwandlungstemperatur enthlt jede Kette mehrere gauche-Konformationen, die zu einer lateralen Expansion
des Gitters und zu einem ungeordneten Zustand fhren. Einwertige Kationen (Na+, K+) erniedrigen die
Umwandlungstemperatur und machen die Membran fluider, zweiwertige Ionen (Ca2+, Mg2+) erhhen hingegen
die Umwandlungs temperatur. Ebenso fhrt die Erhhung des pH-Wertes (Vernderung der Ladung der
Kopfgruppe) zu einer Erniedrigung der Umwandlungstemperatur. Diese Eigenschaften werden u.a. durch
Leitfhigkeitsmessungen, Rntgenstreuung, Volumetrie, Mikrokalorimetrie, Markierung der Fettsuren durch
Spin-Markierung und anschlieende ESR-Spektroskopie oder Fluoreszenzspektroskopie (Abb. 3-10) mithilfe
von FLuoreszenzsonden bestimmt.

Beim fluid-mosaic model [S.J. SINGER und G.L. Nicolson, 1972] bilden Phospholipide als Bilayer eine flexible
flssig-kristalline Matrix, in der sich die Kohlenwasserstoffketten lateral frei bewegen. Sie hat einen hohen
Widerstand und ist impermeabel fr polare Molekle. Die funktionellen Proteine "schwimmen" auf der von
integralen Proteinen durchsetzten Doppelschicht und knnen lateral diffundieren. Durch eine Aggregation
spezifischer Membranproteine in der Ebene, d.h. eine Ungleichverteilung, knnten von einer Membran
spezifische, topologische Signale ausgehen.

39

2.3 Literatur

D. CHAPMAN, Biological Membranes, Academic Press, New York (1968).


G.H. BROWN, Flssige Kristalle, Chemie in unserer Zeit 2, 42 (1968).
H. TRUBLE, Phasenumwandlungen in Lipiden. Mgliche Schaltprozesse in biologischen Membranen,
Naturwissenschaften 58, 277 (1971).
W. KREUTZ, Strukturprinzipien in Bio-Membranen, Angew. Chem. 84, 597 (1972).
S.J. SINGER und G.L. NICOLSON, The Fluid Mosaic Model of the Structure of Membranes, Science 175, 720
(1972).
R. STEINSTRSSER und L.POHL, Chemie und Verwendung flssiger Kristalle, Angew. Chem. 85, 706 (1973).
H.-D. DRFLER, Struktur und Funktion natrlicher und artifizieller Membranen, Biol. Rdsch. 11, 1 (1973).
G.B. ANSELL, J.N. HAWTHORNE und R.M.S. DAWSON (Hrsg.), in Form and Function of Phospholipids,
2. Aufl., Elsevier, London (1973).
H. TRUBLE und P. OVERATH, Biochem. Biophys. Acta 307, 491 (1973).
H. TI TIEN, Bilayer Lipid Membranes (BLM), M. Dekker, New York (1974).
E. BAMBERGER, R. BENZ, P. LUGER und G. STARK, Ionentransport durch biologische Membranen, Chemie in
unserer Zeit 8, 33 (1974).
S.J. SINGER, The Molecular Organization of Membranes, Annu. Rev. Biochem. 43, 805 (1974).
M. DAVIES, Funktionen biologischer Membranen, VEB Gustav Fischer Verlag, Jena (1974).
R. HARRISON und G.G. LUNTUNT, Biologische Membranen, Fischer Verlag, Stuttgart (1976).
S. ABRAHAMSSON und I. PASCHER, Structure of Biological Membranes, Plenum Press, New York (1977).
A.L. LEHNINGER, Lipide, Lipoproteine und Membranen; Die Biosynthese der Lipide; Der Oxidative Abbau der
Fettsuren; in Biochemie, 2. Auflage, Verlag Chemie, Weinheim - New York (1977).
H. SANDERMANN, Membranbiochemie. Eine Einfhrung. Springer-Verlag Berlin (1983).
J.H. FENDLER, Membrane mimetic chemistry, Chem. Eng. News 62, 25 (1984).
G. BENGA, Structure and Properties of Cell Membranes. CRC Press, Vol. 1, Boca Raton (1985).
U. PFLLER, Mizellen-Vesikel-Mikroemulsionen, Springer Verlag, Berlin Heidelberg (1987).
R.B. GENNIS, Biomembranes. Molecular Structure and Function. Springer Verlag (1989).
J.A.F. OP DEN KAMP, Biological Membranes; Structure, Biogenesis and Dynamics (Nato ASI Series,
SERS H Vol. 82), Springer Verlag (1994).
W.M. GELBART und A. BEN-SHAUL, Micelles, Membranes, Microemulsions, and Monolayers, Springer Verlag
(1994).

40

4. Kohlenhydrate

4. Kohlenhydrate
4.1 Einteilung der Kohlenhydrate
Kohlenhydrate sind Polyhydroxyaldehyde oder -ketone, die aus der pflanzlichen Photosynthese [CO2 + H2O
CH2O + O2] stammen. Neben Lipiden, Proteinen und Nucleinsuren sind sie eine der vier groen Gruppen
lebenswichtiger Verbindungen und machen den weitaus grten Teil der organischen Materie auf der
Erdoberflche aus. Der Name "Hydrat des Kohlenstoffs" [K. SCHMIDT, 1844] bezog sich ursprnglich auf
Verbindungen der Zusammensetzung Cn(H2O)n, das heute fr viele Kohlenhydrate, wie z.B. Desoxyzucker
(4.4.2), Aminozucker (4.4.3.) und Pseudozucker (4.4.4) jedoch nicht zutrifft.

Die Einteilung der Kohlenhydrate erfolgt nach der Zahl der Bausteine in
-

Monosaccharide [griech. saccharon = Zucker], die aus einer Zuckereinheit bestehen, wie z.B. Glucose,

Fructose, Ribose, etc. Monosaccharide (5.2) kommen in freier Form kaum in der Natur vor, man findet sie
hauptschlich in Form von Oligo- und Polysacchariden und in Verbindung mit anderen Naturstoffen, z.B. als
Glykoside (4.3.9.2), Glykolipide (2.2.8) und Glykoproteine (4.8.5.1).
-

Oligosaccharide (4.5.2) sind Kondensationsprodukte aus 2 bis etwa 9 Monosaccharideinheiten, zu ihnen

zhlen Disaccharide, wie z.B. Saccharose, Maltose, etc., Trisaccharide wie die Raffinose, Tetrasaccharide, usw.
- Polysaccharide (4.6) sind hochmolekulare Stoffe und bestehen aus bis ber 1.000 Monosaccharideinheiten.
Homopolysaccharide sind aus einem einzigen Zuckermonomeren aufgebaut, aus verschiedenen Zuckern
zusammengesetzt sind die Heteropolysaccharide.

4.2 Monosaccharide

Je nach Art der Carbonylfunktion unterscheidet man zwischen Aldosen und Ketosen. Nach der Zahl der CAtome teilt man sie auerdem in Triosen, Tetrosen, Pentosen, Hexosen und Heptosen ein, biologisch relevant
sind vor allem Pentosen und Hexosen. Zusammengezogen werden Aldosen als Aldotetrosen, Aldopentosen,
Aldohexosen, usw., Ketosen als Tetrulosen, Pentulosen, Hexulosen, usw. bezeichnet. ber zweihundert
verschiedene Monosaccharide hat man mittlerweile in der Natur entdeckt. Die einfachsten Vertreter sind die
Aldotriose Glycerinaldehyd [=Glyceraldehyd] und die Ketotriose Dihydroxyaceton, beides Oxidationsprodukte
des dreiwertigen Alkohols Glycerin.
CH=O
CH-OH
CH2-OH

40

Glycerinaldehyd
Glyceraldehyd
2,3-Dihydroxypropanal

CH2-OH
C=O
CH2-OH

Dihydroxyaceton
1,3-Dihydroxypropan-2-on

41

4. Kohlenhydrate

4.2.1 Struktur, relative und absolute Konfiguration, FISCHER-Projektion

Vor allem durch die brillianten Arbeiten des deutschen Chemikers E. FISCHER gelang gegen Ende des 19.
Jahrhunderts die Strukturaufklrung der Glucose und der anderen Monosaccharide. Einige der dazu
verwendeten Reaktionen werden in Formel 4-1 aufgezeigt.
CH=O

n-C6H14

P / HI

n-Hexan

CH2OH
CH2OH

NH2OH

C6H12O6

NOH

Oxim

CH2OH
HCN

CH2OH
CH2OH

OH
Na / Hg
C

Br2 / H2O
CH2OH

CH2OAc

CHOH

CHOAc

Cyanhydrin

COOH
CHOH

CHOAc

Ac2O

Gluconsure
HC

CHOH
CHOH
CH2OH

OH

CHOAc

Sorbit
(Glucit)

CHOAc
CH2OAc

Hexaacetat

Formel 4-1. Reaktionen zur Strukturaufklrung der Glucose.

Mit Ausnahme des Dihydroxyacetons sind alle Monosaccharide chiral und jeweils verschiedene optische
Isomere mglich. Da es ursprnglich keine Mglichkeit gab, die absolute Konfiguration der Kohlenhydrate zu
klren, einigte man sich auf eine Bezugssubstanz, die eine angenommene Konfiguration hatte. Diese
Konfiguration heit relative Konfiguration. Ursprnglich wurde die Glucose als Bezugssubstanz gewhlt, erst
spter [1906] wurde Glycerinaldehyd, der vorteilhaft nur ein asymmetrisches C-Atom besitzt, als
Bezugssubstanz vorgeschlagen. Auf dessen Chiralittszentrum wird das asymmetrische Kohlenstoffatom C-5
der Glucose bezogen. Dem rechtsdrehenden (+)-Enantiomer des Glyceraldehyds wurde die perspektivische
Formel, bei der die OH-Gruppe am Chiralittszentrum auf der rechten Seite der Hauptkette liegt, willkrlich
zugeordnet und als D-Glyceraldehyd [dexter = rechts] bezeichnet. Mit der spter entwickelten (R/S)-Konvention
des CIP-Systems [CAHN, INGOLD, PRELOG] ergibt sich fr D-(+)-Glyceraldehyd die absolute Konfiguration (R)
und fr L-(-)-Glyceraldehyd die (S)-Konfiguration.
CHO

O=HC

CH=O

CH=O
OH

OH
CH2OH

oder

OH

OH

Projektion in die
Tafeleben

H
HOH2C

(R)-(+)-Glyceraldehyd

CH2OH
D-(+)-Glyceraldehyd

CH2OH

FISCHER-Projektion

Diese willkrliche Annahme stellte sich 1951 als zufllig richtig heraus, als durch Rntgenstrukturanalyse die
absolute Konfiguration der Weinsuren bekannt wurde, mit der D-(+)-Glyceraldehyd bereits chemisch korreliert
worden war.

41

42

4. Kohlenhydrate

E. FISCHER konnte alle 16 isomeren Aldohexosen durch chemische Reaktionen konfigurativ zuordnen und auf
den D-(+)-Glyceraldehyd beziehen. In der FISCHER-Projektion, einer von ihm 1891 vorgeschlagenen Formelschreibweise, wird ein Monosaccharid so gezeichnet, da die CC-Bindungen der bereinander angeordneten
C-Atome jeweils hinter die Zeichenebene zeigen, whrend die rechts und links angeordneten Substituenten vor
der Zeichenebene liegen. Das Atom mit der hchsten Oxidationsstufe steht oben. Die Zuordnung zur D-Reihe
oder L-Reihe [laevus = links] richtet sich nach der Stellung der sekundren Hydroxygruppe, die am weitesten
von der Carbonylfunktion (hchste Positionsnummer) entfernt ist. Steht diese in der Projektion nach rechts und
besitzt damit die gleiche Konfiguration wie der D-(+)-Glycerinaldehyd, so zhlt man die Verbindung zur DReihe, steht sie nach links, entspricht sie der L-Reihe. Eine Aldohexose besitzt 4 Asymmetriezentren, es gibt
daher 16 Stereoisomere (24 = 16) und davon 8 Enantiomerenpaare, von denen jeweils das eine Enantiomere der
D-Reihe,

das andere der L-Reihe angehren. Fast alle in der Natur vorkommenden Zucker gehren zur D-Reihe

[(R)-Reihe nach CAHN, INGOLD und PRELOG] an, die natrlich vorkommende Form der Glucose ist die
rechtsdrehende D-(+)-Glucose.
CH=O

CH=O

Merkregel:
H
HO

OH
H

OH

OH
CH2OH

ta rechts
ti links
ta rechts
ta rechts

H
H
H

*
*
*
*

OH
OH
OH
OH

CH2OH

D-(+)-Glucose

4.2.2 Vorkommen der Monosaccharide, Zuckerstammbaum und systematische Bezeichnungen

Mit den unter 5.2.1 und im folgenden angefhrten Reaktionen konnte E. FISCHER die relative Konfiguration der
einzelnen Monosaccharide bestimmen und ihre Strukturformeln in einem Zuckerstammbaum (Formel 5-2 und
5-3) wiedergegeben.

Die beiden Triosen Glyceraldehyd und Dihydroxyaceton spielen in Form ihrer Phosphate beim Kohlenhydratstoffwechsel eine wichtige Rolle.

Die Tetrose Threose [threo-2,3,4-Trihydroxybutanal] kommt sowohl in der D- als auch der L-Form vor.
Zusammen mit der Erythrose [erythro-2,3,4-Trihydroxybutanal] wird sie aufgrund der Stereochemie von C-2
und C-3 durch die Vorsilben threo- und erythro- zur Bezeichnung von Diastereomeren benutzt, die an zwei
benachbarten Chiralittszentren zwei gleiche Substituenten tragen und sich jedoch nur in der Konfiguration
eines Zentrums (Epimere, vgl. 5.3.4) unterscheiden.

42

43

CHO
H

OH

HO

OH

HO

HO

CH2OH
D-(-)-

D-Xylose

CH2OH
L-(+)-Erythrose

CHO

CHO

CHO

OH
H
CH2OH
D-(-)-

4. Kohlenhydrate

HO
H

H
OH
CH2OH

L-(+)-Threose

[Holzzucker, xylos = Holz] ist die in Pflanzen weitverbreitetste Pentose. Sie kommt allerdings nicht in

freier Form, sondern als Komponente in Xylanen (5.6.3.4) und Glykosiden (5.3.9.2) in Laub- und
Nadelhlzern, Stroh, Kleie, Samen, Pflanzengummen, etc. vor. Xylose wird bei der Holzverzuckerung und aus
Abfllen der Celluloseproduktion erhalten, besitzt die Hlfte der Skraft von Saccharose und wirkt abfhrend.
L-Arabinose

ist ebenso in pflanzlichen Gummen und Glykosiden relativ weit verbreitet, D-Arabinose kann aus

Rbenschnitzeln gewonnen werden. D-Ribose ist als Bestandteil der Ribonucleinsuren (17. Nucleinsuren)
besonders wichtig.

D-Glucose

spielt eine zentrale Rolle im Kohlenhydratstoff wechsel der Organismen und ist deren wichtigster

Energielieferant. Im menschlichen Blut sind ca. 0.1 % enthalten (Blutzucker), eine Unterschreitung dieses
Wertes fhrt zum hypoglykmischen Schock; der Gehalt wird durch die Peptidhormone Insulin und Glucagon
reguliert. Wegen des Vorkommens in Weintrauben wird D-(+)-Glucose auch Traubenzucker [Dextrose]
genannt. Technisch wird Glucose durch Hydrolyse von Strke gewonnen und stellt als Monomerenbaustein der
Polysaccharide Strke, Glycogen und Cellulose die hufigste organische Verbindung auf unserem Planeten dar.
Galactose ist Komponente einiger Oligo- und Polysaccharide als auch verschiedener Glykoside und kommt in
der Natur in beiden enantiomeren Formen in greren Mengen vor. D-Galactose ist Bestandteil des
Disaccharids Lactose, des Trisaccharids Raffinose (5.5), verschiedener Polysaccharide (Pektine, Galactane,
5.8.4.4) und Glykoside, L-Galactose ist in Polysacchariden wie Agar und verschiedenen Schleimen enthalten.
Im Polysaccharid Agarose kommen sogar beide Enantiomeren nebeneinander vor. D-Talose ist ein Bestandteil
der Antibiotika Hygromycine (18. ). Von einigen Ausnahmen abgesehen, schemcken die nicht-natrlichen LHexosen hnlich s wie die ubiquitren D-Hexosen, besitzen jedoch keinen Nhrwert.

43

44

4. Kohlenhydrate

CHO
H

D-(+)Glyceraldehyd

OH
CH 2OH

CHO

CHO
H
H

HO

OH
D-(-)Erythrose
CH 2OH
OH

CHO
H

HO

OH

OH

HO

OH

OH

CHO

CHO
HO

OH

OH

HO

OH

OH

OH

OH

CH 2OH
D-(+)Allose

CHO

OH

CH 2OH
D-(+)Altrose

HO

HO

OH

OH

CH2OH
D-(+)Glucose

HO

OH
CH 2OH
D-(-)Lyxose

D-(+)Xylose

CHO

OH

HO

CH 2OH

D-(-)Arabinose

CHO

OH

OH

CH 2OH

D-(-)Ribose

D-(-)Threose

CHO
H

CH 2OH

OH
CH2OH

CHO

OH

H
H

CHO
HO

HO

OH

HO

HO

HO

HO

HO

HO

HO

OH

D-(+)Mannose

CHO

CHO

OH

OH

CH 2OH

CHO

OH
CH 2OH

D-(+)Gulose

OH
CH 2OH
D-(+)-

Idose

OH
CH 2OH

D-(+)Talose

OH

OH
CH 2OH

D-(+)Galactose

Formel 4-2. Stammbaum der D-Aldosen in der FISCHER-Projektion.

D-Fructose

[D-arabino-2-Hexulose, Lvulose, Fruchtzucker] ist der seste bekannte Zucker, kommt in

Frchten und Honig als Invertzucker vor und ist ein Baustein des Disaccharids Saccharose [Rohrzucker] und
des Polysaccharids Inulin. Wirtschaftlich attraktiv ist die Gewinnung von Fructose aus Strke, die enzymatisch
in Glucose-Sirup umgewandelt wird. Unter Einwirkung der Isomerase entsteht in guten Ausbeuten Fructose
("Isoglucose") in Form des sog. Isosirups, der als Sungsmittel Anwendung findet. Im menschlichen
Organismus findet sich D-Fructose in Spuren im Blut, im Sperma und Fruchtwasser. D-Tagatose ist eine seltene
Ketohexose aus Pflanzengummen.

44

45

4. Kohlenhydrate

CH2OH

Dihydroxyaceton
O
CH2OH
CH2OH
O
H

OH

D-Erythrulose

CH2OH

CH2OH

CH2OH

D-Xylulose

D-Ribulose
H

OH

HO

OH

H
CH2OH

CH2OH

CH2OH

OH

HO

OH

OH

HO

OH

OH

CH2OH

D-Psicose

OH
CH2OH

CH2OH
CH2OH

CH2OH

HO

HO

OH
CH2OH

D-Fructose

OH

D-Sorbose

H
H
OH
CH2OH

D-Tagatose

Formel 4-3. Zuckerstammbaum, Strukturformeln der D-Ketosen, die sich von Dihydroxyaceton ableiten.

Zur systematischen Bezeichung der Aldosen wird die C-Zahl in den Stammnamen eingebunden, also Pentose,
Hexose, usw., Ketosen werden mit dem Suffix -ul bezeichnet, z.B. Hexulose. Die Bezeichnung der relativen
Konfiguration der einzelnen Hydroxygruppen leitet sich dann von den Trivialnamen der Monosaccharide ab,
folgende Prfixe werden als Stereodeskriptoren benutzt:
Zahl der chiralen C-Atome

Prfix

glycero-

erythro-, threo-

ribo-, arabino-, xylo-, lyxo-

allo-, altro-, gluco-, manno-, gulo-, ido-, galacto-, talo-

Bei acyclischen Monosacchariden mit mehr als vier stereogenen Zentren werden zwei oder mehr Stereodeskriptoren zur Konfigurationsbezeichnung herangezogen. Das erste stehende Prfix dient zur Bezeichnung
der Restes, der fr die Reihenzugehrigkeit entscheidend ist und am unteren Ende steht (Tab. 5-1 und Formel 54).

Tabelle 4-1. Systematische Namen einiger Monosaccharide


Trivialname

systematsicher Name

Abkrzung

Glyceraldehyd
Ribose
Glucose
Galactose
Mannose
Fructose
Ribulose

glycero-Triose
ribo-Pentose
gluco-Hexose
galacto-Hexose
manno-Hexose
arabino-2-Hexulose
erythro-2-Pentose

Rib
Glc
Gal
Man
Fru

45

46

CHO

CHO
H

4. Kohlenhydrate

CH2OH

CH2OH

OH

HO

HO

OH

D-glycero

C O
HO

D-manno

D-gluco
H

OH

OH

OH

C O

D-glycero

HO

H
H

OH

OH

OH

HO

HO

HO

H
CH2OH

OH
D-altro

OH

OH

OH

D-allo

OH

L-ribo

OH

CH2OH
HO

D-manno-D-gluco-Heptose

D-altro-Heptulose
CH2OH

(Sedoheptulose)

L-ribo-D-manno-Nonose

L-glycero

CH2OH
L-glycero-D-allo-D-glycero-3-Nonulose

Formel 4-4. Beispiele fr die Bildung systematischer Namen bei Monosacchariden.

4.2.3 Halbacetalstruktur der Glucose

4.2.3.1 Furanosen, Pyranosen, anomere Zucker, Struktur und Stereochemie

Monosaccharide zeigen zwar typische Carbonylreaktionen, geben jedoch kein Bisulfitaddukt und keine
Reaktion mit fuchsinschwefliger Sure. Die C=O-Bande im IR-Spektrum besitzt geringe Intensitt, und bei
Behandlung mit CH3OH/HCl entstehen zwei Monomethylderivate. Die Ursache dafr ist der bergang des sp2Carbonylkohlenstoffs in ein sp3-Hybrid und die Ausbildung einer cyclischen Halbacetalform. Dadurch entsteht
ein neues Chiralittszentrum und entsprechend zwei Diastereomere. Die neu gebildete HalbacetalHydroxygruppe wird als anomere oder glykosidische OH-Gruppe, die beiden diastereomeren Formen als
Anomere bezeichnet. Die Verbindung, bei der in der FISCHER-Projektion die anomere OH-Gruppe die gleiche
Konfiguration besitzt wie die fr die Zuordnung zur D- und L-Reihe herangezogene Hydroxygruppe, wird als

Anomer, die andere als Anomer bezeichnet. Sechsring-Halbacetale, die durch intramolekulare
Cyclisierung der C-5-Hydroxygruppe einer Aldose entstehen, werden als Pyranosen bezeichnet, Zucker in der
Fnfring-Halbacetalform werden Furanosen genannt.
H

OH
OH

HO
O

OH
OH

CH2OH

-D-Glucopyranose
-D-Glucose-(1,5)

H
OH
O

OH

OH
OH O

OH

OH

CH2OH

-D-Glucopyranose
-D-Glucose-(1,5)

OH
CH2OH

-D-Glucofuranose
-D-Glucose-(1,4)

Kristallin liegen Zucker ausschlielich als Halbacetale vor, in wriger Lsung stehen die cyclischen Formen
der Monosaccharide ber die offene Form miteinander im Gleichgewicht. D-Glucose kristallisiert aus wrigem
Ethanol als D-Glucopyranose. Von der Fructose ist ausschlielich die D-Fructopyranose-Form isolierbar.
Ein Sonderfall ist die 2-Desoxyribose, die vorwiegend offenkettig vorliegt. Whrend bei der Glucose, Mannose,
Galactose und Gulose fast ausschlielich die Pyranoseform auftritt, findet man bei der Allose, Altrose, Talose
46

47

4. Kohlenhydrate

und Idose auch die und Form der Furanosestruktur. Xylose liegt sowohl in der Pyranose-, in der
Furanose-Form und als freier Aldehyd vor. In Formel 5-5 sind beispielhaft die Gleichgewichtsstrukturen der
Altrose in wriger Lsung aufgefhrt.
HOH2C HO
O
HO

HOH2C HO
O
HO
OH

OH
HO

HO
H

O
C

HO

CH2OH
HO

OH

OH

OH
CH2OH
CH2OH

OH
OH

HO
O

OH
HO OH

HO OH

Formel 4-5. Gleichgewichtsstrukturen der D-Altrose in wriger Lsung.

Zur bildlichen Darstellung der cyclischen Halbacetalformen ist die HAWORTH-Projektion [Sir W.N. HAWORTH,
Chemie-Nobelpreis 1937] besser geeignet als die FISCHER-Projektion. Das Molekl wird als ebener Ring
dargestellt und die Wasserstoffatome vereinfachend weggelassen. blicherweise sind C-1 stlich und das RingO-Atom nordstlich plaziert. Die in der FISCHER-Projektion rechtsliegenden Substituenten zeigen in der
HAWORTH-Projektion nach unten, die links liegenden nach oben. In der Form der D-Zucker steht die OHGruppe am anomeren C-Atom nach unten und in der Form nach oben, bei den L-Zuckern stehen sie
entsprechend in den umgekehrten Positionen (Formel 4-6).
CHO

H
6

OH

CH2OH

CH2OH
OH

HO

H
4

OH

OH

Drehung um

OH

CHO
OH

CHO

Achse C-4/C-5

OH
2

CH2OH

offenkettige
D-Glucose
FISCHER-Projektion

H
OH

OH

OH

OH

gnstige Konformation
fr den Ringschlu

CH2OH

CH2OH

H C OH
O OH

H
OH

OH

bzw.

HO
OH

OH
HO

-Form

OH

D-Glucopyranose
HAWORTH-Projektion

OH

H
HO

-Form

H
OH

-D-Glucopyranose
FISCHERprojektion

H
CH2OH

Formel 5-6. HAWORTH-Darstellung der cyclischen Formen der D-Glucose, Umsetzung von Fischer- in die
Haworth-Projektion.

Die der HAWORTH-Projektion entsprechende Darstellung der "Sesselkonformationen" der Pyranosen gibt am
anschaulichsten die sterischen Gegebenheiten der cyclischen Halbacetale wieder. Die beiden isomeren Sessel47

48

4. Kohlenhydrate

formen werden durch die Deskriptoren 1C4 und 4C1 [1C- bzw. C1-Konformation nach REEVES] spezifiziert, C
steht fr chair (entsprechend B fr boat, S fr skew und H fr half chair), die Ziffern geben an, welches der
beiden Ring-Atome (C-1 bzw. C-4) oberhalb oder unterhalb der die durch die parallelen Seiten gebildeten Ringebene angeordnet ist.
OH

H
HOH2C

CH2OH
HO
HO

OH
O

H
HO

OH
OH

OH

-D-Glucopyranose - 4C1

-D-Glucopyranose - 1C4

C1-Konformation

1C-Konformation

Bei den fnfgliedrigen Furanosen knnen die Substituenten keine perfekte gestaffelte Konformation
einnehmen, es treten jeweils 10 Briefumschlag- [E fr envelope] und 10 Twistformen [T fr twist] auf, deren
Inversionsenergiebarrieren relativ klein sind.

Wichtige Methode zur Konfigurations- und Konformationsbestimmung von Kohlenhydraten in Lsung ist die
NMR-Spektroskopie. Weiters sind natrlich die Rntgenstrukturanalyse von Zuckern und chiroptische
Methoden (4.9.1) von Bedeutung. Die Konformationen der D-Glucose sind mittels Kraftfeld-Rechnungen als
auch semiempirisch berechnet und die lokalen und globalen Minima bestimmt worden. Auch das berechnete
Anomerenverhltnis vieler Aldosen steht in guter bereinsimmung mit experimentellen Daten.

4.2.3.2 Mutarotation

Bei einer frisch zubereiteten wrige Zuckerlsung beobachtet man nach einiger Zeit eine nderung des
Drehwerts. Diese als Mutarotation bezeichnete Gleichgewichtseinstellung erfolgt durch Tautomerie zwischen
offenkettiger Struktur und den ringfrmigen Halbacetalformen, die dadurch eintretende nderung der optischen
Drehung kann polarimetrisch verfolgt werden.
D-Glucose + H2O , -Gleichgewichtsgemisch
D = 112

D = 52.7

-D-Glucose
D = 19

Fr eine Pyranose berwiegt diejenige Sesselform, die die grte Hufung equatorialer Substituenten aufweist
und die energetisch gnstigste Konformation darstellt. Der bei Glucose gefundene Endwert von 52.7 entspricht
einer Gleichgewichtsverteilung von 36 % und 63 % -Form, < 1 % sind offenkettige und furanoside
Formen. In den 63 % Form drckt sich die grere Stabilitt des Anomeren mit der all-equatorialAnordnung der Ringsubstituenten gegenber der Form aus. Der grer als erwartete Anteil (36 %) des
energetisch ungnstigen Anomer mit axialem C-1-Substituenten wird mit dem anomeren Effekt (5.2.3.3)
erklrt.

48

49

4. Kohlenhydrate

4.2.3.3 Anomerer Effekt


Der freie Energieinhalt G der Sesselform von Cyclohexanen wird vor allem durch 1,3-diaxiale Wechselwirkungen bestimmt. Daher werden Hexopyranosen mit Sesselkonformation bevorzugt die Konformation
einnehmen, in der mglichst wenig Substituenten axial stehen, wie an kristalliner Glucose bewiesen wurde. Vor
allem Hydroxymethylgruppe mit ihrer hohen Raumerfllung steht auer in der D-Idopyranose immer
quatorial.
OH

G = 0.9 kcal / mol

HO
e

e HO

H CH2OH
H O

HO

CH2OH

H CH2OH
H O

H
OH

O
e

HO

OH
OH

Ha

He

-D-Glucopyranose

HO

OH e

H
e

OH
Ha

Ha

-D-Glucopyranose

HO

OH
HO
H
H
-D-Idopyranose

Die -Form der D-Glucose ist thermodynamisch stabiler als die Form, da sich alle sekundren Hydroxygruppen als auch die CH2-OH Gruppe in der bevorzugten quatorialen Lage befinden. Dennoch bevorzugen
elektronegative Gruppen wie Alkoxy-, Acyloxygruppen oder Halogen, weniger jedoch Hydroxygruppen, die
axiale Position. Dieser stereoelektronische Effekt wird anomerer Effekt genannt und nimmt mit der Reihe Br >
Cl > OCOPh > OCOCH3 > OCH3 > SR > OH > NH2 > COOCH3 ab.

Erklrt wird der anomere Effekt durch elektrostatische Wechselwirkungen. Eine elektronegative Gruppe in 1Position wird, wahrscheinlich durch elektrostatische Abstoung der freien Elektronen mit dem benachbarten
Ringsauerstoff, in die axiale Position gedrngt. Im Falle des Anomeren addieren sich die Dipoleffekte,
whrend sie sich beim Anomeren durch Subtraktion abschwchen (Abb. 4-1).

O
O

O
H

O
O H

H O

Abbildung 4-1. Dipoleffekte in Pyranosen dargestellt in der NEWMAN-Projektion.

49

50

4. Kohlenhydrate

Whrend der anomere Effekt die axiale Form der D-Glucopyranose begnstigt, stabilisiert die Solvatation
die sterisch weniger gehinderte -Form. Daher verstrkt die Elektronegativitt des C-1-Substituenten den
anomeren Effekt, whrend er mit zunehmender Polaritt des Lsungsmittels abgeschwcht wird. Wegen der
Solvatation in wriger Lsung berwiegt die energetisch gnstigere -Form, bei langsamer Kristallisation
wasserfreier Glucose bildet sich jedoch ausschlielich die Form.

4.2.3.4 Bestimmung der Konfiguration des anomeren C-Atoms

Bei

kristallinen

Derivaten

erfolgt

die

Bestimmung

der

Konfiguration

des

anomeren

C-Atoms

zweckmigerweise durch Rntgenstrukturanalyse. Eine einfache Bestimmung lt sich jedoch durch


Drehwert-Messung erreichen. Nach der 1. Regel von HUDSON stellt in der D-Reihe stets die Form das strker
rechtsdrehende Anomere dar.
Die cis-Orientierung der OH-Gruppe an C-1 und C-2 in Glucose lt sich durch Leitfhigkeitsmessungen
[BOESEKEN, 1921] bestimmen. Bei Behandlung von Glucose mit H3BO3 erfolgt eine schnelle Zunahme der
elektrischen Leitfhigkeit zu einem Maximum. Die entsprechende Umsetzung von Glucose fhrt langsamer
zum selben Gleichgewichtswert. Grund fr die Leitfhigkeitsnderung ist die Ausbildung eines anionischen
Komplexes fr das cis-Diol, die entsprechende trans-Konfiguration erfordert erst eine vorangehende
Anomerisierung. Diese Anomerisierung (5.3.5) lt sich daher aus dem Leitfhigkeitsverhalten einer Lsung
ableiten und wird sowohl durch Suren als auch durch Basen katalysiert.
H

H
OH

+
OH

H
O

HO
B

OH

O
B

HO

O
H

O
H

4.2.3.5 Bestimmung der Ringgre von Zuckern

Zur Bestimmung der Ringgre von Zuckern mu zunchst die Spannweite des Halbacetalrings durch Vollacetalbildung (5.3.9) fixiert werden. Die anschlieende Permethylierung und Rckhydrolyse der Acetalgruppierung gibt teilmethylierte Zuckerderivate, die sich zu Methoxyalkandisuren oxidieren lassen. Aus deren
Kohlenstoffskelett lt sich auf die ursprngliche Ringgre der Zucker schlieen, aus der Glucopyranose
entsteht Trimethoxyglutarsure, im Falle der Glucofuranose entsteht die Dimethoxybernsteinsure.

50

51

OCH3

OH

Dimethylsulfat

4. Kohlenhydrate

OCH3

OCH3

O
HO
H

oder CH3I / Ag2O

H3CO
H

OH

Hydrolyse
O

mit H+ / H2O

OCH3

CH2OCH3

CH2OH

Methyl-2,3,4,6-tetra-O-methyl(a,b)-D-glucopyranosid

(,)-Methylglucosid
H
H
H3CO
H

OCH3

OCH3
H

COOH

CHO

OH

OCH3

Oxidation
O

OCH3

H3CO

CH2OCH3

Halbacetal

mit HNO3
H
H

H3CO

H
OCH3
OH

OCH3

-ar-Sure
Trimethoxyglutarsure
COOH

CH2OCH3

al-Form

Formel 4-7. Ringgrenbestimmung am Beispiel eines Glucopyranosids.

4.3 Reaktionen der Monosaccharide

4.3.1 Reduktion

Die Reduktion der Carbonylgruppe von Monosacchariden mit NaBH4, Natriumamalgam oder durch
katalytische Hydrierung fhrt zu Zuckeralkoholen [Alditole]. Bei Ketosen entstehen dabei durch Ausbildung
eines neuen Chiralittszentrums zwei isomere Alkohole, aus Fructose z.B. entstehen Sorbit und Mannit. Da aus
unterschiedlichen Aldosen sowie Ketosen der gleiche Alkohol entstehen kann, verringert sich gegenber den
Carbonylzuckern die Anzahl der mglichen Stereoisomeren der Alditole. D-Glucit [Glucitol D-Sorbit,
Sorbitol] entsteht sowohl aus D-Glucose wie aus L-Gulose (die "Kopf-Schwanz-vertauschte" D-Glucose) und
wird daher auch als L-Gulit bezeichnet. Auerdem erhlt man ihn neben D-Mannit [Mannitol], dem
Reduktionsprodukt von D-Mannose, durch Reduktion von D-Fructose.

51

52

4. Kohlenhydrate

CHO

CH2OH

CH 2OH

CH2OH

CH 2OH

CHO

CH 2OH

CH2OH

D-Glucit, D-Sorbit

L-Gulose
CHO

D-Glucose

CH2OH
D-Fructose

D-Glucit

CHO
HO
HO

HO
HO

CH2OH

D-Glucose

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

oder L-Gulit

OH

OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH

D-Mannit

D-Mannose

Die Alditole werden nach der Zahl ihrer Kohlenstoffatome eingeteilt in Pentite, Hexite, etc. Sechs
Verbindungen aus der Hexitreihe sind mglich, davon sind Allit und Galactit optisch inaktive
Mesoverbindungen.
meso-Alditole
CH2OH
OH

HO

HO

OH
OH
OH
CH2OH
D-Glucit

CH2OH

CH2OH

HO
OH
CH2OH
D-Idit

CH2OH

CH2OH

CH2OH

OH

OH
OH

HO

OH

OH

OH

HO

OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH

HO
HO

HO

CH2OH
D-Mannit

D-Altrit

Allit

OH

OH
CH2OH

Galactit

Alditole gehen keine typischen Zuckernachweisreaktionen ein, lassen sich jedoch wegen ihrer
Polyhydroxystruktur verethern und verestern. Da Zuckeralkohole s schmecken, finden einige als
Zuckerersatzstoffe Verwendung. Natrlich vorkommende Alditole sind z.B. Sorbit, Mannit, Dulcit, Xylit,
Arabit (frher Lyxit), Ribit, Threit, Erythrit und Glycerin. Sorbit [D-Glucit] ist in den Frchten der Vogelbeere
[Sorbus aucuparia] enthalten, wird technisch durch Reduktion von D-Glucose hergestellt und dient als
Zuckerersatz bei Diabetesdit und als Ausgangsverbindung bei der Vitamin-C-Synthese (vgl. 5.4.5). L-Idit
kommt neben D-Glucit in der Eberesche vor. D-Mannit kommt in Pilzen, Algen und hheren Pflanzen (MannaEsche) vor. Dulcit [Galactit] tritt im Harn von an Galactosmie Erkrankten auf und wird aus MadagaskarManna [Melampyrum nemorosum] gewonnen. Xylit wird durch katalytische Hydrierung von Xylose hergestellt
und kommt in geringer Menge in manchen Pilzen, in Obst und Gemse vor, und wird als Zuckeraustauschstoff
verwendet. Ribit [Adonit] ist Bestandteil der Teichonsuren (5.7.1.5), die in Bakterienzellwnden vorkommen.
Threit [1,2,3,4-Butantetrol] kommt als (2R,3R)-Zuckeralkohol im Hallimasch [Armellaria mellea] und in
einigen Pflanzen vor, Erythrit [meso-1,2,3,4-Butantetrol], die optisch inaktive Form des Threit, ist Inhaltsstoff
einiger Flechten, Algen und Pilze.

52

53

4. Kohlenhydrate

4.3.2 Oxidation

Die wichtigsten Oxidationsprodukte sind die durch Oxidation der Aldehydfunktion aus Aldosen entstehenden
Aldonsuren, die Aldarsuren durch Oxidation sowohl der Aldehydgruppe als auch der terminalen, primren
Hydroxygruppe, sowie die Uronsuren, bei denen nur die terminale, primre Hydroxylgruppe von Aldosen
oxidiert wird.

4.3.2.1 Aldonsuren

Durch Oxidation mit milden Oxidationsmitteln wie Bromwasser, Jod oder verdnnte HNO3 erhlt man die
Aldonsuren, deren Salze in der offenkettigen Form vorliegen. Die Suren gehen leicht in Lactone ber, bei der
Oxidation der Glucose entsteht aus dem Produkt Gluconsure zuerst ein -Lacton, aus dem sich pH-abhngig
das stabilere -Lacton bildet. Gegenber den Halbacetalen und Glykosiden, bei denen die pyranosiden
Sechsring-Formen stabiler sind als die furanosiden Fnfring-Formen, sind bei Lactonen aufgrund der
Winkelaufweitung des sp2-Carbonylkohlenstoffs die Fnfring--Lactone stabiler als die -Lactone
CHO

COOH

OH

OH
O

HO

HO

pH < 3

OH

OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

D-Glucose

D-Gluconsure

D-Glucono--lacton

D-Glucono--lacton

Aldonsuren werden nur selten in der Natur gefunden, manche Pilze und Bakterien enthalten jedoch Oxidasen,
die D-Glucose zu D-Gluconsure oxidieren. D-Gluconsure [Dextronsure] wird zu den sog. Fruchtsuren
gerechnet und findet Verwendung in Textilhilfsmitteln, als Limonadenzusatz und in therapeutischen CalciumPrparaten.

Auf der Oxidation basieren viele qualitative Nachweisreaktionen fr Monosacharide (4.10.2), wie z.B. die
FEHLING-Probe, die TOLLENS-Reaktion, etc. Hierbei werden die Zucker durch CuII bzw. AgI oxidiert, whrend
die reduzierten Metalle (CuI bzw. Ag0) aufgrund farbiger Komplex- bzw. Metallspiegelbildung die eigentlichen
Indikatoren darstellen.

4.3.2.2 Zuckersuren, Aldarsuren

Durch strkere Oxidationsmittel wie halbkonz. HNO3 werden beide funktionellen Endgruppen der Aldosen
unter der Bildung von Zuckersuren [Aldarsuren] oxidiert. Aufgrund der konstitutionellen Symmetrie der
,-Disuren nimmt die Zahl der mglichen Stereoisomere gegenber den Ausgangsaldosen ab. Zu
Kennzeichnung der Zuckersuren bedient man sich der bereits erwhnten Stereodeskriptoren (5.2.2). D53

54

4. Kohlenhydrate

Glucarsure erhlt man durch Oxidation von Glucose, Saccharose oder Strke, die technische Glucarsure wird
meist als Zuckersure, ihre Salze und Ester als Saccharate bezeichnet. Fr den Fall der D-Galactose entsteht die
meso-Galactarsure [Schleimsure], die als optisch inaktive meso-Form vorliegt. Aus D-Threose entsteht DWeinsure [Threarsure, 2,3-Dihydroxybernsteinsure]. Natrliche Weinsure kommt als L-(+)-Form in vielen
Pflanzen und Frchten in freier Form vor, als Kalium-, Calcium- oder Magnesiumsalz und als
Kaliumhydrogentartrat [Weinstein], das sich nach der Grung des Weins abscheidet.
COOH

CHO
OH
HO

HO

CHO
OH

OH
HNO3

OH
OH

OH
OH

HO
HO

COOH
OH
HO
HO

HNO3
OH

OH

CH2OH

COOH

CH2OH

COOH

D-Glucose

D-Glucarsure
D-Zuckersure

D-Galactose

D-Galactarsure
D-Schleimsure

COOH

COOH
HO
H

H
OH

COOH
D-(-)-Weinsure

H
HO

OH
H

COOH
L-(+)-Weinsure

(2R,3R)-Form

Die Oxidation zu Zuckersuren spielte eine wichtige Rolle bei der Konfigurationszuordnung von Zuckern durch
E. FISCHER. Die beiden optisch aktiven D-Aldotetrosen, D-Threose und D-Erythrose, deren Strukturformeln zur
Symmetrie-Punktgruppe C1 gehren, geben bei Behandlung mit HNO3 im ersten Fall eine optisch aktive
Disure (C2-Symmetrie), im zweiten Fall jedoch eine meso-Verbindung (CS-Symmetrie). Daraus kann die
relative Konfiguration der Hydroxygruppen der Tetrosen zugeordnet werden. Liefert die Oxidation einer DAldopentose eine optisch aktive C5-Dicarbonsure (Punktgruppe C1), so mu es sich dabei um D-Lyxose oder
D-Arabinose

gehandelt haben (Formel 5-8). Die Oxidationsprodukte der beiden anderen D-Pentosen sind

optisch inaktive meso-Formen mit CS-Symmetrie. Die gleichen meso-Dicarbonsuren werden auch erhalten,
wenn die Enantiomeren der beiden Aldopentosen, d.h. die entsprechende L-Ribose und L-Xylose, oxidiert
werden. Im Falle der Arabinose und der Lyxose hingegen sind die aus D- und L-Zuckern durch Oxidation
erhaltenen Zuckersuren enantiomer (Abb. 4-2 zeigt FISCHER-Projektionen der C4- bis C7-Aldarsuren mit
Angabe der Symmetrie).
CH=O

CH=O

CH=O

CH=O

CH=O

CHOH
CHOH

mgliche
Konfiguration:

CHOH

CH2OH

CH2OH

D-Ribose

CH2OH
D-Lyxose

CH2OH
D-Arabinose

COOH

COOH

COOH

COOH

COOH

COOH

CH2OH
D-Xylose
COOH

HNO 3

meso

optisch aktiv

COOH

meso

Formel 4-8. Konfigurationsbestimmung einer Aldopentose in der D-Reihe.

54

55

4. Kohlenhydrate

Abbildung 4-2: FISCHER-Projektionen der C4- bis C7-Aldarsuren mit Angabe der Symmetrie.

Bei der Oxidation mglicher Aldohexosen sind vier optisch aktive Stereoisomere und zwei meso-Verbindungen
zu erwarten. Ergeben zwei verschiedene Aldohexosen bei der Oxidation die gleichen Aldarsuren, so mu es
sich entweder um das Paar Altrose/Talose handeln oder eine der Aldosen mu der D-Reihe und eine der LReihe angehrt haben. D-Glucarsure kann sowohl durch Oxidation von D-Glucose als auch L-Gulose
entstehen.

55

56

4. Kohlenhydrate

COOH

CHO

CHO

CHO

CH2OH

Oxidation

Oxidation

COOH

CH2OH
D-(+)-Glucose

CH2OH

Glucarsure

L-(+)-Gulose

Aldarsuren knnen Mono- und Dilactone bilden. Die Monolactonbildung kann zur Unterscheidung zwischen
Glucose und Mannose herangezogen werden. Glucarsure, durch Oxidation von Glucose entstanden, bildet
zwei -Monolactone, die aus Mannose stammende Mannarsure nur eines.
O

COOH
C

COOH

OH

OH O

OH

OH

O
HO

HO

+
OH
OH
COOH

OH
OH

OH
COOH

-Monolactone der Glucarsure

D-Glucose

OH

HO
HO

HO
HO

O
OH
OH

OH
OH
COOH

-Dilacton

COOH
C

COOH

OH
C

OH
COOH

C
O

ein -Monolacton der Mannarsure

D-Mannose

4.3.2.3 Uronsuren

Die Oxidation von Aldosen zu Uronsuren entspricht der alleinigen Oxidation der terminalen primren
Hydroxygruppe und ist nur nach vorangehendem Schutz der Carbonylfunktion bzw. der Halbacetal-OH-Gruppe
mglich. Als Schutzgruppen kommen Glykoside, Acetate, Acetale und Ketale in Frage, zur Oxidation dient
Distickstofftetroxid oder KMnO4.
CH2OH
OH

CHO

COOH

N2O4
OH

OCH3

HO

OCH3

HO
H

HO
OH

H+ / H2O

OH
H
OH

OH
H

OH

D-Methylglucosid

D-Glucuronsure
COOH

Glucuronsuren sind Bestandteile von Polysacchariden, wie Glycuronanen, Pektinsubstanzen, Alginsuren und
Mucopolysacchariden. D-Glucuronsure besitzt im Organismus Schlepperfunktion und dient zur Ausscheidung
krperfremder und krpereigener Stoffe. Mit Uridindiphosphat glykosidisch veresterte UDP-Glucuronsure
(5.11.1) bildet mit Alkoholen, Phenolen, Thiolen und aromatischen Aminen entsprechende Glykoside
[Glucuronide] und durch Veresterung mit aromatischen Carbonsuren Ester. Die saure Gruppierung erleichtert
den Transport durch das Gewebe. Die Ausscheidung der entsprechenden Phenolglucuronsuren, Indoxylglucuronsuren, etc. durch die Nieren dient zur Entgiftung dieser Substanzen als auch zur Entfernung von
56

57

4. Kohlenhydrate

Arzneimitteln. Doch knnen durch Glucuronidierung auch Carcinogene im Organismus gebildet werden
[Giftung]. D-Glucuronsure ist bei den meisten Tieren Ausgangssubstanz der Ascorbinsure-Biosynthese.

Bei den Uronsuren bleiben wegen der Aldehydfunktion Zuckereigenschaften wie z.B. Mutarotation (5.2.3.2)
erhalten. Sie liegen als Pyranosen oder Furanosen vor, neigen zur Epimerisierung an C-5 und bilden Lactone.
D-Glucuronsure

ist als 6,3-Lacton Glucuron [Dicuron] in vielen Pflanzenschleimen und tierischem Faser- und

Bindegewebe enthalten.
O
H COH

HO CH
O

OH
OH

HO

O
O

OH

OH
O

OH

COOH

,-Gemisch der
D-Glucuronsure

OH

Glucuron
H
OH
D-Glucuronsure--lacton
D-Glucono-3,6-lacton

Uronsuren ermglichen die Umwandlung von D-Zuckern in L-Zucker. Wird D-Glucose unter Schutz der
Carbonylfunktion zur D-Glucuronsure oxidiert, so entsteht nach selektiver Reduktion der CHO-Gruppe zur
primren Alkoholgruppe und anschlieender Reduktion der COOH-Gruppe zur Aldehydfunktion die L-Guloset.
Dies ergibt eine "Kopf-Schwanz-Vertauschung" des Zuckers und wurde zur chemischen Korrelation der
Monosaccharide

herangezogen.

Die

physikalischen

und

vor

allem

optischen

Eigenschaften

der

Reaktionsprodukte erlauben Aussagen ber die Konfiguration der Ausgangsverbindung und lassen u.a. die
Unterscheidung zwischen D-Glucose und D-Mannose zu. Aus erster entsteht, wie in Formel 5-9 gezeigt, der
neue Zucker L-Gulose mit unterschiedlichen Eigenschaften, aus letzterer wiederum das Ausgangsprodukt DMannose.
CHO

CH2OH

CHO

CH2OH

CHO

CH2OH

CHO

CH2OH

CHO

Reaktionsprodukt:
identisch mit
Ausgangsverbindung
Enantiomer der
Ausgangsverbindung

CH2OH

CHO

CH2OH

CHO

CH2OH

CHO

vllig neuer
Zucker
CH2OH
D-Glucose

CHO

CH2OH
L-Gulose

Formel 4-9. Kopf-Schwanz-Vertauschung von Aldosen.

4.3.2.4 Oxdation von Ketosen

Die Oxidation der Ketosen erfolgt bevorzugt an der zur Carbonylgruppe benachbarten primren OH-Gruppe.
Aus L-Sorbose z.B. entsteht durch Oxidation Ascorbinsure (4.4.5), das -Lacton der Endiolform der 2Ketogulonsure.
57

58

4. Kohlenhydrate

4.3.2.5 Oxidation sekundrer Hydroxygruppen

Unter geeigneten Bedingungen ist bei verschiedenen Kohlenhydraten die selektive Oxidation sekundrer
Hydroxygruppen mglich. Vorausgesetzt, die Acetalgruppe und die primre Hydroxygruppe wird geschtzt,
kann eine selektive Oxidation einer axialen Hydroxygruppe vor einer quatorialen Gruppe durchgefhrt
werden. Als Beispiel ist die Oxidation von Methyl--L-arabinopyranosid mit O2/Pt angefhrt.
HO
O
O2 / Pt

OCH3

HO

OCH3

HO
OH

OH

Methyl--L-arabinopyranosid

4.3.3 Osazonbildung

Die meisten Monosaccharide bilden bei pH 4 - 5 mit einem quivalent Phenylhydrazin die entsprechenden
Phenylhydrazone. In schwach saurer Lsung reagieren Aldosen und Ketosen jedoch mit 3 Molquivalenten
Phenylhydrazin zu den kristallinen Osazonen, die zur Charakterisierung von Kohlenhydraten herangezogen
wurden. Liefern zwei Aldosen das gleiche Osazon, handelt es sich um C-2-epimere Zucker, liefern eine Aldose
und eine Ketose das gleiche Osazon, so ist C-2 der Ketose der Sitz der Ketonfunktion.
H
+

CHO

HC

NH NH C6H5

OH

NH

NH C6H5

- H2N-C6H5

OH

HC

N NH-C6H5

N NH-C6H5

2 C6H5-NHNH2

C
O

HC

H
H

C
C

NH C6H5

C6H5-NHNH 2

CHOH

- NH3

C O

Besser geeignet zur Charakterisierung von Kohlenhydraten sind jedoch die durch Oxidation mit CuII-sulfat aus
den Osazonen entstehenden Osatriazole.
HC

N NH-C6H5

N NH-C6H5

N
CuII

C6H5

- H2N-C6H5

Osazon

Osatriazol

Osazone lassen sich durch Umsetzung mit Benzaldehyd leicht zu Osonen spalten. Deren Aldehydfunktion ist
leichter reduzierbar als die Ketonfunktion, so da Aldosen ber ihre Osone zu den entsprechenden Ketosen
umgewandelt werden knnen.
H

H
C
C

58

N
N

NHPh
NHPh

2 PhCHO
- 2 Ph-CH=NNHPh

H
C

CH OH
C

59

4. Kohlenhydrate

4.3.4 Einwirkung von Basen, Epimerisierung, Isomerisierung, Retro-Aldol-Spaltung

In wrigem alkalischen Milieu finden bereits bei Raumtemperatur Umlagerungen statt, die auf der Einstellung
eines Tautomerie-Gleichgewichtes beruhen. Die basenkatalysierte Ketose-Aldose-Isomerisierung ist unter dem
Namen LOBRY DE BRUYN-ALBERDA VAN EKENSTEIN-Umlagerung bekannt. Zwischenprodukt ist ein Endiol,
das sowohl die Entstehung von Epimeren als auch Isomeren (Aldose Ketose) bewirkt.
CHO
CHO

CH2OH
H

O
CH2OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH

Dihydroxyaceton

isomer

D-Glycerinaldehyd epimer

L-Glycerinaldehyd

HC OH
C OH
CH2OH

Endiol

Formel 4-10. LOBRY DE BRUYN-ALBERDA VAN EKENSTEIN-Umlagerung.

Bei der Einwirkung von verdnntem Alkali auf D-Glucose stehen durch Epimerisierung 63.5 % Glucose und
2.5 % Mannose im Gleichgewicht, und durch Isomerisierung 31 % Fructose und 3 % andere Zucker wie z.B.
Psicose. Eine gezielte Epimerisierung ist auf diese Weise nicht mglich, da von Fructose aus Umlagerungen
durch das gesamte Molekl mglich sind. Leicht erfolgen hingegen Epimerisierungen der entsprechenden
Aldonsuren

mit

Pyridin.

Enzymatische

Epimerisierungen

und

Isomerisierungen

spielen

im

Kohlenhydratstoffwechsel eine Rolle. Bei den enzymatischen Epimerisierungen handelt es sich meist um einen
Konfigurationswechsel an C-4 (Glucose Galactose), weniger hufig an C-2 und C-5.

Unter Einwirkung von starkem Alkali lagern sich Aldosen in der Hitze zu Saccharinsuren, C-2-Methylaldonsuren, um, D-Glucose gibt neben anderen Produkten -D-Glucosaccharinsure.
CHO
H

COOH

OH
-

HO

OH

OH
CH2OH

OH

H3C

OH

OH

OH
CH2OH

2-Methylaldonsure
-D-Glucosaccharinsure

Starkes Alkali bewirkt bei Ketosen Spaltreaktionen in Form der Retroaldolreaktion, aus Fructose entsteht u.a.
Dihydroxyaceton und Glycerinaldehyd, weitere Fragmentierung von Dihydroxyaceton fhrt zu Glycolaldehyd
und Formaldehyd. Die vergleichbare enzymatische Spaltung tritt bei der alkoholischen Grung und Glykolyse
(4.11) auf.

59

60

CH2OH
CH2OH

4. Kohlenhydrate

CH2OH

OH-

CH=O

O
CH2OH

O
-

Dihydroxyaceton

CH2

OH

HC
CH2OH

Glycolaldehyd

Formaldehyd

CHOH

D-Fructose

CH2OH

Glycerinaldehyd

Formel 4-11. Retroaldolspaltung von D-Fructose.

4.3.5 Einwirkung von Suren, Anomerisierung, Eliminierung

Mit verdnnten Mineralsuren tritt bei Monosacchariden in wriger Lsung Anomerisierung durch
Umwandlung Zucker Zucker ein (vgl. 5.2.3.4). Strkere Suren bewirken Wasserabspaltung unter
Bildung von Furanderivaten. Bei der Umsetzung von Pentosen entsteht Furfural [Furfurylaldehyd],
Aldohexosen und Fructose ergeben 5-Hydroxymethylfurfural, aus 6-Desoxyaldohexosen entsteht 5Methylfurfural. Die Synthese von Furfural durch surekatalysierte Wasserabspaltung aus Pentosen, welche als
Polysaccharide [Pentosane] in Haferspelzen, Mais, Schilf, Reis, Kleie, Erdnuschalen, usw. vorkommen, wird
im technischen Mastab durchgefhrt. Durch Decarbonylierung mit Metalloxiden (400C) wird Furan
gewonnen.
CHO

CHO

CHO

H
CHOH

H+

CHOH

OH

CH2

CH

O
H

OH
- H2O

CHOH
CH2OH

CHOH
CH2OH

CHOH

CHO

CH=O

Metalloxide

Furfural

CH2OH

Furan

4.3.6 Ester anorganischer Suren

Von den Estern anorganischer Suren besitzen vor allem die Phosphorsureester fr viele biochemische
Prozesse Bedeutung. Bei den natrlich vorkommenden Phosphaten sind blicherweise die endstndigen
primren Hydroxygruppen mit Orthophosphorsure verestert, z.B. D-Glucose-6-phosphat, D-Fructose-6phosphat oder D-Fructose-1,6-diphosphat. Von besonderer Bedeutung sind die Phosphorsureester der
Nucleoside,

die

Nucleotide,

als

Bausteine

der

Nucleinsuren.

Dabei

kommen

neben

den

Orthophosphorsureestern auch die reaktionsfhigen und energiereichen Diphosphate und Triphosphate vor.

Schwefelsureester von Kohlenhydraten finden sich verbreitet in der Natur, z.B. in Chondroitinsulfat und
Heparin, den Sulfatiden oder einigen Galactanen der Algen. Diese Ester sind ebenso wie die Phosphatester

60

61

4. Kohlenhydrate

wegen des sauren Charakters gegen Alkali relativ bestndig. Zuckernitrate, Ester der Salpetersure, entstehen
bei der Behandlung von Zuckern mit Nitriersure und besitzen Sprengstoffeigenschaften.

4.3.7 Ester organischer Suren, Schutzgruppen fr Monosaccharide

Monosaccharidester von Carbonsuren kommen in der Natur vor allem als Acetate z.B. in den herzwirksamen
Glykosiden, als Fettsureester in bestimmten Lipopolysacchariden und als Ester von Phenolcarbonsuren in
Gerbstoffen vor.

Ester organischer Suren haben als Ausgangsprodukte und Schutzgruppen fr Zuckersynthesen Bedeutung.
Acetylierung von D-Glucose mit Acetanhydrid gibt die gut kristallisierende 1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl--Dglucopyranose, deren reaktionsfhige C-1-Acetoxygruppe fr Glykosidsynthesen Bedeutung besitzt.
CH2OAc
OAc
O
OAc

CH2OH
O

Ac2O

OH

H,OH
AcO

OH

OAc

OH

Teilacetylierte Zucker neigen zur Wanderung von Acylgruppen an benachbarte freie OH-Gruppen.
O
-

C O C CH3

C O

C O H

CH3

C O C CH3

C
C O
C O H
H

Bei der Hydrolyse der Acetatreste wird die Konfiguration des C-Atoms, an dem die acetylierte OH-Gruppe
steht, im allgemeinen nicht verndert. Die Abspaltung erfolgt zweckmigerweise nach ZEMPLN durch
Umesterung mit Alkoholat.
O

CH3

OCH3

- CH3OH
C

CH3

CH3

OH

CH3

- O

Eine selektive Blockierung der primren OH-Funktion ist vor allem mit raumerfllenden Schutzgruppen z.B.
als Adamantoat, Pivaloat und Benzoat mglich, tiefe Temperaturen erlauben bei verschiedenen
Monosacchariden sogar eine selektive Acylierung von quatorialen Hydroxygruppen vor axialen.
a

OH
CH2OH
O

a
e

Bz2O

HO

- 20 C, Pyridin
e

HO
OCH3

BzO
e

OH
CH2OBz
O
e

BzO
OCH3

Bz = Benzoyl

Methyl-D-galactosid

cis-Vicinale Glycolgruppierungen lassen sich mit Phosgen zu cyclischen Carbonaten umsetzen. Der klassische
Kohlensureester als OH-Schutzgruppe ist der Benzyloxycarbonylrest, wie er durch Veresterung mit Benzyl-

61

62

4. Kohlenhydrate

chloroformiat [Benzyloxycarbonylchlorid] entsteht. Der Vorteil dieser Schutzgruppe liegt vor allem in der
Mglichkeit der schonenden Abspaltung durch katalytische Hydrierung.
O
C

OH

OH

COCl2

OH

OCH2C6H5

Benzylchloroformiat
Benzyloxycarbonylchlorid

cyclisches Carbonat

cis-vic-Glycol

Cl

O
O

OCH2C6H5

Benzyloxycarbonylderivat

Vor allem Tosylate [p-Toluolsulfonsureester, Tos] sowie Mesylate [Methansulfonsureester, Mes] finden
Anwendung als Sulfonsureester [Sulfonate]. Mit Nucleophilen lassen sich Zuckersulfonate zu anderen Zuckerderivaten umsetzen und besitzen fr Synthesen Bedeutung. Im Unterschied zu Carbonsureestern wird bei
einem nucleophilen Angriff die C-O Bindung der Alkoholkomponente des Esters gespalten und bei einem
chiralen C-Atom erfolgt in der Regel Konfigurationsumkehr [WALDEN-Umkehr]. Tosylate erlauben die
selektive Blockierung der primren Hydroxylgruppe nach vorherigem Schutz der Aldehydfunktion.

4.3.8 Ether, Acetale und Ketale von Monosacchariden als Schutzgruppen

Methylether von Monosacchariden, durch Methylierung mit Dimethylsulfat oder Methyliodid, sind in der Regel
flssig, schmecken bitter und lassen sich im Hochvakuum destillieren. Die Ether lassen sich meist nicht mehr
spalten, ohne da das Gesamtgerst verndert wird. Partiell methylierte Zucker kommen in zahlreichen pflanzlichen Glykosiden z.B. in Digitalis- und Strophantus-Arten vor.

Tritylether [Triphenylmethylether] besitzen als Schutzgruppen fr primre Hydroxygruppen Bedeutung, wenn


die Carbonylfunktion bereits blockiert ist. Die Umsetzung mit Trimethylchlorsilan fhrt zur Bildung von
Trimethylsilylethern, die als flchtige Derivate Bedeutung fr die Analytik besitzen. Benzylether zeichnen sich
durch leichte Abspaltung des Benzylrestes durch katalytische Hydrierung aus.

C6H5
HOH2C

C6H5 C

Ac2O
OH

C6H5

OH

OH

(C6H5)3CCl

Pyridin

Pyridin
HO
HO

HO

HO OH

OH

OH

C6H5
C6H5

HO

AcO

H2 / Ni
OAc

OAc

C6H5

Ac2O

OAc

Pyridin
AcO OAc

AcO OAc

AcO OAc

Durch Reaktion mit Aldehyden und Ketonen zu Acetalen bzw. Ketalen gelingt eine selektive Blockierung
einzelner Hydroxygruppen. Ketone liefern im allgemeinen cyclische Fnfring-Ketale, Aldehyde dagegen
bevorzugt Sechsring-Acetale. Grund dafr ist das Auftreten destabilisierunder 1,3-diaxialer Wechselwirkungen
im Dioxanring bei Ketalen, whrend in Acetalen der Aldehyd-Alkylrest quatorial orientiert sein kann und die
Sechsringbildung bevorzugt ist.
62

63

H3C

O
H3C
RO

H3C

1,3-diaxiale OR
Wechselwirkung

O
RO
OR

Hauptprodukt

HO
HO
HO
RO
OR

HO
O
O

H3C

O
O
HO

H3C

4. Kohlenhydrate

O
O
HO

H+/

H+/
H

H
H
H3C

Hauptprodukt

RO
OR

HO
O
O

O
RO
OR

Es wird jeweils die maximale Zahl von Hydroxygruppen acetalisiert, die Umwandlung der in die Form
sowie der Ringwechsel von Pyranose zu Furanose ist zu bercksichtigen. Mit Aceton reagiert D-Glucose aus
der furanosiden Form zum 1,2,5,6-Diacetonid, D-Mannose bildet ein 2,3,5,6-Diacetonid, Galactose hingegen
bildet ein pyranosides 1,2,3,4-Diacetonid. Mit Benzaldehyd reagiert Glucose zur 4,6-Benzylidenglucose.
O
CH2OH
H+/

O
OH

O
O
O
OH

OH

HO

O
HO
CH2OH
O
OH HO

O
O
H+/

O
O

OH

O
O

OH

HO
CH2OH
HO

H+/

O
OH

CH2OH

O
O

OH

O
O

HO
CH2OH

O
H
OH

H2
C

/ Ph-CH=O

O
OH

OH

OH

HO
HO

OH

Formel 4-12. Beispiele fr Ketale und Acetale von Aldohexosen.

4.3.9 Glykosidbildung - gemischte Vollacetale

4.3.9.1 Struktur von Glykosiden - Stabilitt und Hydrolyse

Ersetzt man die glykosidische OH-Gruppe der cyclischen Halbacetalform von Aldosen oder Ketosen durch eine
nucleophile Gruppe, so entstehen als Glykoside bezeichnete gemischte Vollacetale. Die Zuckerkomponente
wird als Glykon bezeichnet, der zuckerfremde Anteil des Acetals ist das Aglykon. Der systematische Name
eines Glykosids enthlt die Bezeichnung des Aglykons, die Konfiguration am anomeren C-Atom, Angaben zur

63

64

4. Kohlenhydrate

Reihe, Name des Glykons und Ringweite. Glykoside, bei denen es sich sowohl beim Glykon als auch beim
Aglykon um ein Saccharid handelt, bezeichnet man als Holoside, bei den Heterosiden ist das Glykon
glykosidisch mit einer Nicht-Kohlenhydrat-Komponente verbunden.
CH2OH

Aglykon

Glykon

CH2OH
O
O
OH

CH2OH
OCH3
O
OH

OH CH O
OH
OCH3
OH

Arbutin

HO

HO

OH

OH

Methyl--D-glucofuranosid Methyl--D-glucopyranosid 4-Hydroxyphenyl--D-glucopyranosid

Bei den Glykosiden sind jeweils zwei Anomere ( und Form) mglich, je nach Art des Bindungsatoms
spricht man von O-Glykosiden, N-Glykosiden oder S-Glykosiden. Verbindungen mit entsprechenden C-CBindungen, die keine echten Acetale darstellen, werden als C-Glykoside bezeichnet.
O

O
OR

O-Glykosid

O
SR

S-Glykosid

N-Glykosid

C-Glykosid

Als Acetale sind Glykoside im allgemeinen gegen Alkali stabil. Ausnahmen bilden Glykoside von Alkoholen,
die in Stellung elektronenziehende Gruppen besitzen und zur Eliminierung neigen, und solche von
Phenolen, aus denen als alkalische Spaltprodukte 1,6-Anhydroverbindungen entstehen. Surekatalysiert und
enzymatisch werden sie hydrolytisch in Glykon und Aglykon gespalten.
HOH2C
HO
HO

H+
O
OR

schnell

HOH2C
HO
HO

OH

-D-Glucopyranosid

O
OH

H
O
+

langsam
R

- ROH

HOH2C
HO
HO

+ H 2O
O +
H
OH

schnell

HOH2C
HO
HO

O
H, OH
OH

D-Glucose

2-Desoxyglykoside sind gegenber den 2-Hydroxyderivaten extrem surehydrolyselabil, surelabil sind auch
gewisse glykosidierte Uronsuren. Die Glykoside von 2-Aminozuckern hingegen sind gegenber Suren stabil.

4.3.9.2 Glykoside in der Natur


Glykoside findet man hufig in der Natur (Tab. 4-2), D-Zucker kommen in der Regel -glykosidisch gebunden
vor, L-Zucker hingegen glykosidisch. Die meisten O-Heteroside sind Stoffwechselprodukte hherer Pflanzen
oder Mikroorganismen und enthalten meist seltene Glyka wie Amino- oder Desoxyzucker. Zu den OGlykosiden von phenolischen Verbindungen zhlen die pflanzlichen Flavone und Isoflavone. Weitverbreitet in
hheren Pflanzen sind die cyanogenen Glykoside, bei denen durch enzymatische Spaltung Cyanhydrine
entstehen, die in Blausure und Carbonylverbindungen zerfallen. Die Cyanhydrine werden in vivo aus
Aminosuren gebildet. Bittermandeln [Semen Amygdalae amarae] enthalten ca. 3 - 5 % Amygdalin, in vielen
Rosaceen kommt Prunasin vor.

64

65

4. Kohlenhydrate

enzymatisch
CH2
H2N

COOH

Phenylalanin

CH2

CH2
HC

NOH

HC

OH

HC

OR

Aldoxim des
Phenylacetonitril
Phenylacetaldehyds

Cyanhydrin

Amygdalin:
R = Gentiobiose
Prunasin:
R = Glucose

Tabelle 4-2. Natrlich vorkommende Glykoside (Heteroside)


Gruppe

glykosidierte Gruppierung

Aglykon

Beispiele

Steroide

Herzwirksame Glykoside (S.

des Aglykons
O-Glykoside

alkoholische
Hydroxygruppe

enolische und phenolische

Steroid-Saponine (S. )
Terpene

Terpen-Saponine (S. )

Hydroxyaminosuren

Glykoproteine (S. )

Hydroxynitrile

Cyanogene Glykoside (S. 208)

Stoffwechselprodukte

Aminoglykosid-Antibiotika (S. )

von Mikroorganismen

Macrolid-Antibiotika (S. )

Diglyceride, Ceramide

Glykolipide (S. )

Phenole

Phenolglykoside (Arbutin, Phlorizin)

Hydroxygruppen

Cumarylalkoholglucosid
o-Cumarsureglucosid
Auronglykoside
Hydroxyanthrachinonglykoside
Flavonoide

Flavonolglykoside (Rutin)
Anthocyane

S-Glykoside

Mercaptogruppe

Thiohydroxamsureester

Senflglykoside (S. 212)

N-Glykoside

Amidgruppe

Asparagin

Glykoproteine

N-Atome von

Purine, Pyrimidine

Nucleoside (S. )

Heteroaromaten

Nucleosid-Antibiotika
Benzimidazol

Vitamin B12

Nicotinsureamid

Pyridinnucleotide

Die Glucosinolate [Senflglykoside] sind eine Gruppe von Glucose-thioglykosiden, die in verschiedenen
Brassicaceen, Capparaceen und Resedaceen vorkommen, zu denen zahlreiche Nutzpflanzen wie alle Kohlarten,
Meerrettich, Rettich, Radieschen, Senf und Raps gehren. Sie werden leicht durch Pflanzenenzyme zu Senflen
[Isothiocyanaten] gespalten und tragen charakteristisch zu den Eigenschaften dieser Pflanzen bei. Rapsschrot
kann erheblichen Gehalt an Glucosinolaten aufweisen und Stoffwechselstrungen bei Tieren verursachen, wenn
ihrem Futter grere Mengen an Rapsschrot beigesetzt werden. Allylsenfl, das aus dem Glykosid Sinigrin
entsteht, bewirkt den scharfen Geschmack des Senfs [Brassigra nigra].
65

66

CH2OH
S
O
OH

HS

H2
C R

H2
C R

enzymatische

4. Kohlenhydrate

N OSO3K

N OSO3K

Umlagerung

H2
C N C

CH2OH

Spaltung

+
OH

O
OH

OH

Senflglykosid aus
1-Thio-D-glucose
Sinigrin: R = -CH=CH2

Isothiocyanat
Senfl
Allylsenfl: R = -CH=CH2

H, OH

HO

,-Glucose

OH

Zu den natrlichen N-Glykosiden gehren vor allem die Nucleoside als Bausteine der Nucleinsuren, bei denen
Purin- und Pyrimidinbasen N-glykosidisch mit D-Ribose oder 2-Desoxy-D-ribose verbunden sind.

Bei den C-Glykosiden ist das C-1 einer Aldose unmittelbar mit einem Kohlenstoffatom des Aglykons
verbunden. In der Natur kommen C-Glykosyl-Verbindungen von Anthracen-Derivaten, Flavonen und
heterocyclischen Ringsystemen vor. Pseudouridin ist ein C-1-C-verknpftes Ribofuranosyluracil, das als
seltener Nucleosidbaustein in t-RNS gefunden wird.

4.3.9.3. Glykosidsynthesen

Zur Synthese von Glykosiden und Sacchariden fhrt im allgemeinen der nucleophile Austausch der
glykosidischen OH-Funktion gegen einen anderen Substituenten. Die anionische Verdrngung der
glykosidischen Hydroxylgruppe eines Monosaccharids gelingt nicht, Direktsubstitution ist erst nach
Protonierung mglich. Das nach Umsetzung mit Alkohol in Gegenwart von HCl [E. FISCHER] nach SN1
entstehende Carbeniumion wird durch den Ringsauerstoff stabilisiert und damit seine Bildung begnstigt. DGlucose und Methanol gibt ein Gemisch der und Anomeren (Diastereomere) von Methyl-Dglucopyranosid

und

Methyl-D-glucofuranosid,

wobei

sich

die

sonst

schwer

zugnglichen

D-

Methylglucopyranoside aus dem Gemisch abtrennen lassen.


CH2OH
O
OH

D-Glucose
OH

HO
OH
H + / H2O

Methyl-- D-glucopyranosid
CH2OH
OCH3
O
OH

Methyl-- D-glucopyranosid
CH2OH

CH2OH
O +

CH3OH
OH

OH
CH3OH

HO

HO

HO
OH

32 %

OH

OCH3
OH

66 %

Eine Variante der FISCHER-Methode ist die FISCHER-HELFERICH-Synthese, bei der die peracetylierte
Verbindung eingesetzt wird, jedoch drastische Reaktionsbedingungen erforderlich sind. hnlich Variante ist
die Reaktion der O-Pentaacetyl-D-glucose in einer Phenolschmelze unter Surekatalyse. Aufgrund des
Nachbargruppeneffekts (S.

) der 2-Acetoxygruppe unter Ausbildung eines Acyloniumions und durch die

quatoriale Stellung des Phenylrings entsteht hierbei vor allem das -Glucosid.
66

67

CH2OAc
O
OAc

- AcO
OAc
O

CH2OAc

CH2OAc

O
OAc +

O
OAc

AcO
O

OAc
O
OAc

C6H5-OH

O
CH3

CH2OAc

Oa

AcO

AcO

4. Kohlenhydrate

CH3

+
CH

AcO
CH3

OC6H5
e

AcO
AcO

H
OAc

O
O
e

AcO
H

In neuerer Zeit gewinnen Glykosylfluoride zunehmend an Bedeutung, unter Lewis-Surekatalyse gelingt die
Darstellung von O-, N-, S- oder C-Glykosiden. Die Herstellung der Fluoride gelingt aus den Bromiden bzw.
Chloriden durch Umhalogenierung mit Silberfluorid. Ausgehend von acetylierten Bromglucosiden entsteht
durch

Stabilisierung

der

positiven

C-1-Ladung

durch

Bildung

des

Acetoxoniumions

aus

der

Nachbaracetatgruppe das 1,2-trans-verknpfte Fluoroglucosid. Im Falle der verluft die Reaktion ber einen
SN2-Mechanismus unter WALDEN-Umkehr ebenso zum Anomeren. Wird das perbenzylierte Chlorid
jedoch mit Kaliumhydrogenfluorid statt mit Silberfluorid umgesetzt, entsteht unter Retention das Fluorid.
Dies spricht fr eine thermodynamisch kontrollierte Reaktion zum thermodynamisch stabileren Fluorid.
OBnz

OBnz
KF . HF

BnzO
BnzO

BnzO
BnzO

O +

OBnz

BnzO

BnzO
Cl

BnzO
BnzO

BnzO
F

Bnz = Benzyl

Beim Versuch der Glykosid-Darstellung aus -Halogenglykosiden treten Schwierigkeiten auf. Halogenglykoside sind instabiler als die Formen und es erfolgt leicht eine Isomerisierung. Zwar resultieren
aus -Halogenglykosiden mit CH3OH Glykoside, mit sperrigen Alkoholen erhlt man jedoch allenfalls
Gemische der und -Formen. Grund dafr sind entweder wieder Nachbargruppeneffekte, die den Angriff
von ROH nur aus der nicht abgeschirmten Richtung ermglichen, oder die Bildung stabiler
Oxocarbeniumionen, die den Angriff des ROH aus der weniger behinderten quatorialen Richtung zum
Glykosid zulassen.

O-Glykosyl-trichloracetimidate knnen in einer Vielzahl von Glykosidierungsreaktionen eingesetzt werden.


Die Reaktion von O-Glucosyl-trichloracetimidat mit Carbonsuren fhrt unter Inversion zur entsprechenden
O-Acylverbindung.
OR

OR

Trichloracetimidat
RO
RO

-Anomer

RO
O

NH

CH2Cl2, RT
CCl 3

HOOC-R1
RO
RO

O
O
RO

R1

-Acylanomer

Alkohole werden unter Inversion am anomeren Zentrum in Gegenwart von Lewis-Suren zum Anomer
glykosiliert, vorausgesetzt, da kein nachbargruppenaktiver Substituent an C-2 steht.

67

68

4. Kohlenhydrate

R
OBnz
BF3 - Etherat

BnzO
BnzO

NH
BnzO
O

- 10 C

OBnz

CCl3

-Anomer

H
HO

-Glucosid
Bnz = Benzyl

BnzO
BnzO

O
BnzO

4.3.10 Intramolekulare Ether, Glycale, Anhydrozucker und Zuckeranhydride

Glycale, intramolekulare C-1-Enolether von 2-Desoxyaldosen, entstehen aus Acylglykopyranosylhalogeniden


mit Zink in Essigsure und werden als reaktive Kohlenhydrate fr die Herstellung von 2-Desoxy-O-glykosiden
verwendet.
CH2OAc
O
OAc

O
OAc

Zn

O-Glykosid einer
2-Desoxyaldose

O
OAc

H+
C6H5OH

HOAc

Br
OAc

AcO

CH2OAc

CH2OAc

AcO

AcO

Glycal

Intramolekulare Wasserabspaltung zwischen zwei alkoholischen Hydroxygruppen von Kohlenhydraten fhrt zu


Anhydrozuckern [z.B. 3,6-Anhydro-D-glucose], die intramolekulare Eliminierung aus einer alkoholischen und
der glykosidischen Hydroxygruppe zu Zuckeranhydriden [z.B. 1,6-Anhydro-D-glucose]. Manchmal werden
jedoch beide Typen als Anhydrozucker bezeichnet und als Zuckeranhydride dann Disaccharide, die durch intermolekulare Wasserabspaltung entstehen. Lvoglucosan ist die 1,6-Anhydro-D-glucopyranose und entsteht
durch trockene Destillation von Strke oder Cellulose. Ein einfaches Verfahren besteht in der Umsetzung von
Tetraacetylglucosylbromid zum N-Glykosid-Ammoniumsalz und Behandlung mit Ba(OH)2.
CH=O

H2C

O CH2
H

OH
H
OH
OH

H
H

O
OH
O

O
HO

OH

OH
HO

HO

HO

CH2

OH

OH

3,6-Anhydro-D-glucose
AcOH2C

1,6-Anhydro-D-glucopyranose
Lvoglucosan
AcOH2C
N(CH3)3

Br
OAc

Disaccharid-Zuckeranhydrid
aus D-Furctose

H2C

O
(CH3)3N

OAc
AcO

HO
O

OH

OH

Ba(OH)2

OAc

OH
HO

AcO
OAc

OH

Lvoglucosan
1,6-Anhydro-D-glucopyranose

Anhydrozucker entstehen meist unter Bildung von Oxiranen [Ethylenoxiden] oder Oxolanen [Tetrahydrofuranen], Ausgangsprodukte sind Halogenverbindungen oder besser Tosylate. Bei Vorliegen chiraler
Sulfonsureester erfolgt WALDEN-Umkehr. Chitose ist die 2,5-Anhydro-D-mannose. Die in verschiedenen
Galactanen vorliegenden 3,6-Anhydro-L-galactopyranose-Reste entstehen durch Abspaltung von Schwefelsure
aus den in diesen Polysacchariden vorkommenden sauren Schwefelsureestern.

68

69

O
OTos

HOH2C

4. Kohlenhydrate

H2C
HO

HO

O
HO
O

CHO
OH

OH

2,5-Anhydro-D-mannose

3,6-Anhydro-L-galactose-Rest

4.3.11 Reaktion mit Mercaptanen

Aldosen reagieren mit Mercaptanen unter Bildung von Thioacetalen. Die Thioacetalfunktion blockiert die
Carbonylgruppe und ermglicht so Reaktionen an den Hydroxylgruppen. Die Abspaltung der Thioacetalgruppe
gelingt mit Brom. ber geeignete Mercaptale lassen sich auf diesem Weg nichtglykosidische Vollacetale von
Aldosen herstellen. Die Reduktion der Thioacetalfunktion fhrt zu 1-Desoxyzuckern.
RS

CH=O

SR

RS

Br

RaNi / H2
CH3

CH=O
H2O

Br2

RSH

ROH
RS

OR

Br

RO

OR

Br2

OR

ROH

1-Desoxyzucker
al-Acetal

4.3.12 MAILLARD-Reaktion

Unter der MAILLARD-Reaktion [L.C. MAILLARD, 1912] versteht man ein Konglomerat von Reaktionen
reduzierender Zucker mit Aminosuren, Peptiden oder Proteinen. Damit spielt die Reaktion in der Lebensmittelchemie, bei der Bildung von Aromastoffen und Pigmenten (Melaninoidine) und bei Vernderung von
Nahrungsmitteln durch Lagerung und Verarbeitung eine wichtige Rolle. So gibt z.B. D-Glucose mit Aminen
instabile N-Glykoside 2, die sich zu den stabileren Aminozuckern 3 [AMADORI-Umlagerung, vgl. 5.4.3]
umlagern. Durch Hydrolyse und Wasserabspaltung entsteht ber das 3-Desoxyoson 4 5-Hydroxymethyl-2furfural.
H2C
H

OH
OH

H
O

OH

OH

CH2OH
D-Glucopyranose

H2N-R

HC

Umlagerung
O

OH

NHR

AMADORI-

NHR
OH

OH

O
CH2
HOH2C

OH
OH

CH2OH

OH
OH
CH2OH

OH

CHO

5-Hydroxymethyl-2-furfural

CH2OH

3-Desoxyoson 4

Formel 4-14. MAILLARD-Reaktion von D-Glucose zu 5-Hydroxymethylfurfural.

Weitere Abbauwege fhren zur Spaltung der Zuckerverbindungen und zur Bildung von Dicarbonylen, typische
Reaktionsprodukte sind Acetylfuran, Maltol, Isomaltol, Furaneol [Ananas-Furanon] und 5-Hydroxy-5,6dihydromaltol. ber 120 verschiedene Pyrazine wurden beim Rsten von Saccharose mit Serin und Threonin
69

70

4. Kohlenhydrate

identifiziert. Damit gehren Pyrazine u.a. zu wichtigen Trgern von Rstaromen wie z.B. Kaffee.
Reaktionsprodukte von Zuckern mit schwefelhaltige Aminosuren tragen vor allem zum Aroma von Brot,
Fleisch und Kaffee bei (Abb. 5- zeigt einige Aromastoffe, die durch Maillard-Reaktion gebildet werden).
O

OH

OH
OH
O

COCH 3

Acetylfuran

OH

HO

COCH 3

Maltol

Isomaltol

Furaneol

5-HydroxyTetramethyl5,6-dihydromaltol
pyrazin

N
O

S
S

N
H

Formel 4-15. MAILLARD-Produkte als Aromastoffe in Rstaromen.

4.4 Monosaccharide mit ungewhnlicher Struktur

4.4.1 Verzweigtkettige Zucker

In Mikroorganismen und Pflanzen kommen als Glykosidbestandteile oder Zellwandbestandteile auch


verzweigtkettige Zucker vor. Dazu gehren methylverzweigte Monosaccharide wie z.B. die Mycarose und
Cladinose aus Macrolid-Antibiotika, das Garosamin des Aminoglykosid-Antibiotikums Sisomycin, oder
hydroxymethyl- bzw. formylverzweigte Zucker wie die D-Apiose aus dem Flavonglykosid Apiin der Petersilie
und die L-Streptose aus Streptomycin, sowie Zucker mit Hydroxyethyl- oder Glykoloyl-Verzweigungen.
Verzweigtkettige Zucker sind auch in der Formose (4.8.1) enthalten.
HO

CH3
O

O
CH3
OH

CH3

OH
HO

CH3

HO
OH

O
NHCH3

OH

CH2OH

OH

H3C

H3C
OCH3

O
CHO

OH

OH

OH

OH

OH OH

4.4.2 Desoxyzucker

Desoxyzuckern fehlen eine oder mehrere Hydroxygruppen. Diese Zucker werden selten in freier Form
gefunden, meist handelt es sich bei den natrlich vorkommenden Desoxyzuckern um glykosidisch gebundene
Desoxyaldosen in Oligosacchariden, Antibiotika, Lipopolysacchariden, usw. Weit ber 100 verschiedene
solcher Desoxymonosaccharide oder Derivate sind bekannt, ihnen kann sowohl die primre als auch eine der
sekundren Hydroxyfunktionen fehlen. Der hufigste 6-Desoxyzucker [auch Methylosen oder Methylpentosen],
die L-Rhamnose [6-Desoxy-L-mannose], kommt frei im Giftsumach [Rhus toxicodendron] vor und glykosidisch
[Rhamnosid] gebunden in zahlreichen Heterosiden und Heteropolysacchariden. Die L-Rhamnose dient als
Edukt fr hochwertige Aromastoffe und ist ein vielseitig einsetzbares Zwischenprodukt fr organische
70

71

4. Kohlenhydrate

Synthesen. Sie wird aus verschiedenen pflanzlichen Rohstoffen wie Rutin, Hesperidin und Naringin gewonnen,
ist jedoch auch biotechnisch zugnglich. L-Fucose [6-Desoxy-L-galactose] ist u.a. in den Glykoproteinen der
Blutgruppensubstanzen enthalten sowie als Bestandteil von Polysacchariden mariner Braunalgen. D-Fucose
[Rhodeose] kommt in hheren Pflanzen und Baumharzen vor. Der wohl wichtigste Desoxyzucker ist die 2Desoxy-D-ribose [2-Desoxy-D-erythro-pentose] als Bestandteil der Desoxyribonucleinsuren. 2-Desoxyribose
frbt im Gegensatz zu den brigen Zuckern Fuchsin-Schwefelige Sure und ermglicht dadurch den Nachweis
von DNS. In herzwirksamen Glykosiden (6. Steroide) und Lipopolysacchariden von Mikroorganismen werden
zahlreiche Didesoxyaldosen, denen zwei Hydroxylfunktionen fehlen, gefunden. L-2-Desoxyfucose ist eine 2,6Didesoxyaldohexose, ebenso wie die Methylether D-Digitoxose, D-Cymarose, D-Diginose und L-Oleandrose
aus den genannten Glykosiden. 3,6-Didesoxyaldohexosen wie z.B. D-Tyvelose, D-Abequose, D-Paratose, LColitose und L-Ascarylose wurden als Bestandteil von Lipopolysacchariden gefunden. Aus Streptomyceten
konnte die 2,3,6-Tridesoxyaldose L-Rhodinose erhalten werden (Tab. 5-3). Weitere Beispiele sind L-Amicetose,
L-Aculose, L. Cinerulose, D-Kerriose und L-Angolosamin.
HO

HO
CH3

OH

OH

L-Rhamnose

O
OH

CH3

OH

CH3
HO

OCH3

OH

OH

OH

OH

CH3
HO

HO
HO

O
HO
CH3

L-Fucose L-2-Desoxyfucose L-Oleandrose L-Rhodinose


CH3

HO
O

HO
O

O
CH3

CH3

OH

CH3

OH O

CH3

OH

OH

OH
HO
O

L-Amicetose

L-Aculose

L-Cinerulose

D-Kerriose

N(CH3)2

L-Angolosamin

71

72

4. Kohlenhydrate

Tabelle 4-3. Natrlich vorkommende Desoxyzucker


Trivialname

Stellung der C-Atome


1

2-Desoxyribose

CHO

CH2

H-C-OH

H-C-OH

CH2OH

L-Rhamnose

CHO

H-C-OH

H-C-OH

HO-C-H

HO-C-H

CH3

L-Fucose

CHO

HO-C-H

H-C-OH

HO-C-H

HO-C-H

CH3

D-Quinovose

CHO

H-C-OH

HO-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH3

D-Antiarose

CHO

H-C-OH

H-C-OH

HO-C-H

H-C-OH

CH3

D-Digitalose*

CHO

H-C-OH

CH3O-C-H

HO-C-H

H-C-OH

CH3

L-Thevetose*

CHO

HO-C-H

H-C-OCH3

HO-C-H

HO-C-H

CH3

L-Acotriose

CHO

H-C-OH

H-C-OCH3

HO-C-H

HO-C-H-

CH3

L-Acovenose*

CHO

H-C-OH

H-C-OCH3

H-C-OH

HO-C-H

CH3

D-Digitoxose*

CHO

CH2

H-C-OH

H-C-OH

H-C-OH

CH3

D-Biovenose*

CHO

CH2

H-C-OH

HO-C-H

H-C-OH

CH3

D-Cymarose*

CHO

CH2

H-C-OCH3

H-C-OH

H-C-OH

CH3

D-Diginose*

CHO

CH2

CH3O-C-H

HO-C-H

H-C-OH

CH3

D-Sarmentose*

CHO

CH2

H-C-OCH3

H-C-OH

H-C-OH

CH3

L-Oleandrose*

CHO

CH2

H-C-OCH3

HO-C-H

H-O-CH

CH3

D-Tyvelose

CHO

HO-C-H

CH2

H-C-OH

H-C-OH

CH3

D-Abequose

CHO

H-C-OH

CH2

HO-C-H

H-C-OH

CH3

D-Paratose

CHO

H-C-OH

CH2

H-C-OH

H-C-OH

CH3

L-Colitose

CHO

HO-C-H

CH2

H-C-OH

HO-C-H

CH3

L-Ascarylose

CHO

H-C-OH

CH2

HO-C-H

HO-C-H

CH3

L-Rhodinose

CHO

CH2

CH2

H-C-OH

HO-C-H

CH3

* Bestandteil der herzwirksamen Glykoside

2-Desoxyzucker werden durch Addition von Wasser an Glycale (5.3.10) dargestellt, 6-Desoxyzucker entstehen
durch Tosylierung (5.3.7) der C-6-Hydroxygruppe und anschlieende LiAlH4-Reduktion.
CH2OH

CH2OH

CH2OH
O

H+

+ H2O

OH

OH
HO

HO

HO

Glycal

H+

CH2OH

2-Desoxyaldohexose

CH2OTos

O
OH

OH

O
1. LiAlH4

TosCl
OH

OH

OH

2. H + / H2O
OCH3
OH
Methyl--D-glucose
HO

72

HO

OCH3
OH

HO
OH

6-Desoxy-D-glucose

73

4. Kohlenhydrate

4.4.3 Aminozucker, AMADORI-Umlagerung, Neuraminsure, Sialinsuren

4.4.3.1 Aminozucker, AMADORI-Umlagerung

Aminozucker zeichnen sich durch den Ersatz einer oder mehrerer Hydroxygruppen durch eine Aminofunktion
aus und sind u.a. glykosidische Bestandteile zahlreicher Antibiotika (Tab. 4-4). Sie kommen ferner als NAcetyl- oder N-Sulfuryl -Derivate in Polysacchariden und vor allem in Kohlenhydrat-Protein-Verbindungen
vor, aus denen sie in Form ihrer kristallinen Hydrochloride isoliert werden. Bis heute sind ber 60
Aminozucker bekannt, die verbreitetsten sind D-Glucosamin [2-Amino-2-desoxy-D-glucose], D-Galactosamin
[2-Amino-2-desoxyD-galactose] und D-Mannosamin [2-Amino-2-desoxy-D-mannose]). D-Glucosamin wurde
1878 als erstes tierisches Kohlenhydrat aus Hummerschalen (Chitin) hergestellt und ist Bestandteil von
Aminoglykosid-Antibiotika. N-Methyl-L-glucosamin ist Bestandteil des Antibiotikums Streptomycin. N-AcetylD-glucosamin

[N-Acetyl-2-amino-2-desoxy-D-glucose] ist der Monomerenbaustein des Chitins, dem

Gerstpolysaccharid von Insekten, Schalentieren und zahlreichen Weichtieren. N-Acetyl-D-galactosamin ist als
Baustein der Chondroitinsulfate Bestandteil von Sehnen, Knorpeln und Bindegewebe. Der 3-OHMilchsureether des N-Acetyl-D-glucosamins, N-Acetylmuraminsure [N-Acetylmuramsure, 2-Acetamido-3O-[1-(S)-carboxyethyl]2-desoxy-D-glucose] ist Bestandteil von Zellwnden grampositiver Bakterien. In
hheren Pflanzen werden Aminozucker kaum gefunden. Diaminozucker sind selten, das Bacillosamin wurde
1958 als erster in einem Polysaccharid des Bacillus licheniformis entdeckt.
CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

HO
O

O
OH

OR

OH

OH

OH

O
OH
H2N

OH
HO

HO

HO
HN

D-Glucosamin (R = H)
N-Acetyl-D-glucosamin

NH2

NH2

OH

D-Galactosamin
Muraminsure
(R = CH(COOH)-CH3)

D-Mannosam in

(R = COCH 3)

Tabelle 4-4. In Antibiotika vorkommende Aminozucker


Aminozucker

Antibiotikum

Stellung der C-Atome


2

2-Amino-2-desoxy-D-

Gentamycin A, Paramomycine CHO

H-C-NH2

HO-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH2OH

Streptomycin

CHO

CH3NH-C-H H-C-OH

HO-C-H

Kanamycin, Tobramycin

CHO

H-C-OH

NH2-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH2OH

Kanamycin

CHO

H-C-OH

HO-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH2NH2

HO-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH2NH2

(CH3)2N-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH2OH

glucose (Paromamin)
2-Desoxy-2-methylamino-

CH2OH

L-glucose
3-Amino-3-desoxy-Dglucose (Kanosamin)
6-Amino-6-desoxy-Dglucose
2,6-Diamino-2,6-didesoxy- Neomycin C

CHO

D-glucose (Neosamin C)
3-Desoxy-3-

Paramomycin II, Carbomycin

CHO

H-C-OH

73

74

4. Kohlenhydrate

dimethylaminoD-glucose (Mycaminose)
3-Dimethylamino-3,4,6-tri- Erythromycin, Oleandomycin

CHO

H-C-OH

CH3NH-C-H

CH2

H-C-OH

CH3

CHO

HO-C-H

H2N-C-H

H-C-OH

H-C-OH

CH3

CHO

H-C-NH2

HO-C-H

HO-C-H

HO-C-H

CH2NH2

Anthracyclin-Antibiotika

CHO

CH2

H-C-NH2

H-C-OH

HO-C-H

CH3

Gentamycin C

CHO

H-C-NH2

CH2

CH2

H-C-OH

CH(CH3)NH2 bzw.

desoxy-D-glucose
(Desos
amin, Picrocin)
3-Amino-3,6-didesoxy-D-

Nystatin, Amphothericin

mannose (Mycosamin)
2,6-Diamino-2,6-didesoxy- Neomycin B, Paramomycin I
L-idose

(Paramose,

Neos
amin B)
3-Amino-2,3,6-tridesoxyLgalactose (Daunosamin)
2,6-Diamino-2,3,4,6-tetra
desoxyhexosen

CH(CH3)NHCH3

2,6-Diamino-2,3,4,6-tetra

Sisomycin

CHO

H-C-NH2

CH2

HC = COH

Gentamycin

CHO

H-C-OH

H2N-C-H

H-C-OH

CH2OH

Puromycin

CHO

H-C-OH

H-C-NH2

H-C-OH

CH2OH

desoxy-D-glycero-hex-4enose
3-Desoxy-3-methylaminoD-xylose (Gentosamin)
3-Amino-3-desoxy-Dribose

Die Einfhrung einer Aminofunktion in die 3-Position der Glucose lt sich ber das 1,2,5,6-Diacetonid
erreichen. Oxidation mit RuO4 und Reduktion zu 15 gibt die Konfigurationsumkehr an C-3. Mesylierung und
Substitution durch Azid liefert nach der Reduktion zu 16 die gewnschte 3-Aminogruppe, nach Abspaltung der
Schutzgruppen wird 3-Amino-3-desoxy-D-glucose erhalten.
O

RuO4

O
OH

O
O
NaBH4

NaIO4
O

14 O

1,2,5,6-D-Glucosediacetonid

15 HO O

CH2OH

O
NH2

O
Hydrolyse

O
NH2

1. MesCl
2. NH3 / DMF
3. H2 / Pd

OH

HO

OH

16

3-Amino-3-desoxy-D-glucose

Nojirimycin [5-Amino-5-desoxy-D-glucose] und Desoxynojirimycin sind zwei Aminozucker aus Streptomyces


roseochromogenes, Desoxynojirimycin wird durch Reduktion aus Nojirimycin erhalten.
HOH2C
HO
HO

NaBH4

HO

OH

Nojirimycin

74

HOH2C
HO
HO

HO

Desoxynojirimycin

75

4. Kohlenhydrate

Bei der Umsetzung von aromatischen Aminen mit D-Glucose wurden anstelle der erwarteten N-Glucoside NAryl-Derivate von 1-Amino-1-desoxy-2-ketosen erhalten. Diese als AMADORI-Umlagerung bezeichnete
Isomerisierung von Aldoxylaminen [N-Glykosiden] zu Aminozuckern erfolgt durch Erwrmen bzw. sure- oder
basenkatalysiert und ist irreversibel. Dabei wird die labile Glykosidverbindung zum stabilen Aminozucker
umgewandelt. Die entsprechende berfhrung von Ketosylaminen in 2-Aminoaldosen ist als reversible HEYNSUmlagerung bekannt.
CH2OH

H2C
O
HO

AMADORIO
Umlagerung

OH
HO

NH Ar
OH

H
N

O CH2OH
5

OH

N-Aryl--D-glucopyranosylamin

HO

HO
HO

OH

HO

CH2OH

Ar

HEYNS-

NHR

Umlagerung

O
OH

HO
HO

NHR

N-Aryl-1-amino-1-desoxyD-fructopyranose

4.4.3.2 Neuraminsure, Sialinsuren

Neuraminsure [5-Amino-3,5-didesoxy-D-glycero-D-galacto-2-nonulosonsure] ist die Onsure einer Aminoketononose und stellt den Grundkrper der Sialinsuren dar. Sie kommt in freier Form in der Natur nicht vor,
ist instabil und cyclisiert spontan durch intramolekularen Angriff der 5-Aminofunktion an die Carbonylfunktion
zu 4-Hydroxy-5(1,2,3,4-tetrahydroxybutyl)1-pyrrolin-2-carbonsure.
HOOC

OH

CH2

OH
H2N

H2N

O COOH
CHOH

CH
OH
OH
CH2OH

HOCH 2
HOCH 2

COOH
COOH

HOCH
OH

HO CHOH

H H
H2C C C CH
OH

OH
O

H2N
HO

CH2OH

HO OH OH OH

4-Hydroxy-5(1,2,3,4-tetrahydroxybutyl)1-pyrrolidin-2-carbonsure

Neuraminsure, 5-Amino-3,5-didesoxy-2-nonulosonsure

Die Sialinsuren [Sial(in)suren, griech. sialon = Speichel] sind meist mono- oder diacylierte Neuraminsuren
[Acylneuraminsuren]. Sie zhlen zu den wichtigsten Bestandteilen der Schleimstoffe [Mucine], die von den
Schleimhuten im Atmungs- und Urogenitaltrakt abgesondert werden und auch in der Augenhhle vorkommen.
Sie sind als Bestandteile membranbildender Sphingolipide, insbesondere der Ganglioside, der Blutgruppensubstanzen und vieler Glykoproteine in tierischen Zellen und Krperflssigkeiten und einigen
Mikroorganismen vorhanden, wurden bisher jedoch noch nicht in Pflanzen gefunden.

Heute kennt man ber 20 Sialinsuren, wovon die meisten von R. SCHAUER in den 70er Jahren entdeckt
wurden. Die wichtigste Acylneuraminsure ist die N-Acetylneuraminsure [NANA, Lactaminsure, OSialinsure]. Im allgemeinen bilden die Sialinsuren glykosidisch gebunden das terminale Ende von
Oligosaccharidketten. Whrend die freie N-Acetylneuraminsure in der -Form vorliegt, sind die Sialinsuren
glykosidisch gebunden.
75

76

4. Kohlenhydrate

Den terminal gebundenen Sialinsuren kommt eine zentrale Rolle bei Wechselwirkungen zwischen biologisch
aktiven Moleklen und Zellen sowie bei der Zellerkennung zu, was fr pflanzliche und tierische Zellen, aber
auch fr Bakterien, Viren und andere Krankheitserreger gilt. Zellen werden an ihren Oberflchenkomponenten
erkannt. Darunter sind Glykokonjugate, die aus Proteinen oder Fetten und Zuckern aufgebaut sind. Deren
Oligosaccharidketten bei Menschen und hheren Tieren enden hufig mit an Galactose gebundener Sialinsure.
Diese beiden Struktureinheiten sind fr die Erkennungsmechanismen von Bedeutung. Die Anordnung der
Sialinsure- bzw. Galactose-Reste kann ein zelltypisches Muster auf der Zelloberflche bilden, die von anderen
Zellsystemen, z.B. Makrophagen, unterschieden werden.

4.4.4 Cyclitole und Pseudozucker

4.4.4.1 Cyclitole

Strukturell verwandt mit den acyclischen Alditolen sind die Cyclitole [Cyclite], Cycloalkane mit mindestens
drei Hydroxygruppen. Am verbreitetsten sind die Inosite, Hexahydroxycyclohexane. Auer dem einzigen
Enantiomerenpaar L- und D-chiro-Inosit sind alle anderen Cyclitole meso-Formen. Zur Kennzeichnung werden
die Hydroxy- und andere Gruppen, die ober- oder unterhalb der Ringebene stehen, durch einen Schrgstrich
getrennt. Myo-Inosit kommt sowohl im Tier als auch in Pflanzen frei und gebunden vor und ist fr manche
Mikroorganismen ein Wuchsstoff. In Pflanzen dient der Hexakis-phosphorsureester Phytinsure als Phosphatreserve. (+)-Quercit [(1L-1,3,4/2,5)-Cyclohexan pentol] kommt in Eichen [Quercus spp.] vor. (+)-Pinitol wirkt
als Frahemmstoff und Inhibitor der Larvenentwicklung bei Insekten.
Spiegelebene
OH OH
OH
1

OH OH
2

OH

OH OH
1

OH

CH3O

2
6

OH

OH

HO

HO

OH

HO

OH

OH
OH

HO

OHHO
4

HO

OH

OH

OH

HO

(+)-Quercit
(+)-1D-chiro-Inosit (-)-1L-chiro-Inosit
myo-Inosit
(1,2,3,5/4,6-Inosit) (1,2,4/3,5,6)-Inosit (1,2,4/3,5,6)-Inosit (1,3,4/2,5-Cyclo(+)-Inosit
hexanpentol)
(-)-Inosit

OH
OH

(+)-Pinitol

Von Bedeutung sind die Cyclitolcarbonsuren. D-(-)-Chinasure [1L-1(OH),3,4/5-Tetrahydroxycyclohexancarbonsure] ist neben Chatechin-Gerbstoffen in der Chinarinde salzartig an die China-Alkaloide (15.

gebunden und in Pflanzen weit verbreitet und entsteht aus Erythrose-4-phosphat ber 5-Dehydrochinasure,
einer Zwischenstufe des Shikimisure-Weges zur Biosynthese von Aromaten (vergl. 19. ).
OH
HO

HO

COOH

5-Dehydrochinasure

76

OH

OH
HO

OH

HO

COOH

Chinasure

HO

OH

COOH

Shikimisure
(3,4,5-Trihydroxy-1cyclohexencarbonsure)

77

4. Kohlenhydrate

4.4.4.2 Pseudozucker

Der Name Pseudozucker steht fr eine Klasse von Verbindungen, in welchen der Ringsauerstoff eines Zuckers
durch eine Methylengruppe ersetzt ist und Ring-C-Atome entsprechend der Konfiguration der Saccharide
substituiert sind. Pseudozucker kommen in freier Form in der Kulturbrhe von Mikroorganismen, vor allem
aber als Komponenten von Pseudooligosacchariden als Enzym-Inhibitoren und Antibiotika vor. Zwei Typen
werden unterschieden, Pseudopyranosen und Pseudofuranosen. Aufgrund ihrer hnlichkeit zu echten
Zuckern geben Pseudozucker Anla zu Erwartungen biologischer Aktivitten. Einige biologisch aktive
Pseudozucker werden in der Natur gefunden, Beispiele sind Valiolamin und Valienamin, Bestandteile des
Trisaccharid-Antibiotikums Validamycin A (17. ) bzw. der Acarbose (17. ).
HOH2C
OH

HOH2C
HO
HO
HO HONH
2

HO
HO
OH

Pseudo--Dgalactopyranose

CH2OH

OH
HO
HO
H

Valiolamin

NH2

Valienamin

4.4.5 Ascorbinsure, Vitamin C

L-(+)-Ascorbinsure,

Vitamin C [(S)-Ascorbinsure, (R)-5-[(S)-1,2-Dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-5H-furan-2-

on] wurde erstmals aus Paprika. Kohl und Nebennieren in kristalliner Form gewonnen [A. SZENT-GYRGYI,
1927 "Hexuronsure"], spter aus vielen anderen Frchten, Gemsen usw. Die Strukturaufklrung und erste
Synthese erfolgte 1933 durch E.L. HIRST und W.N. HAWORTH.

Aus Ascorbinsure, 2-Oxo-(S)-gulonsurelacton (bzw. 3-Oxo-), entsteht durch Oxidation, besonders in Gegenwart von Schwermetallen, Dehydroascorbinsure, die in einer Halbketalstruktur vorliegt. Letztere kann im
Krper wieder zu Ascorbinsure reduziert werden. Wegen ihrer leichten Oxidierbarkeit wird Ascorbinsure in
Lebensmitteln als Antioxidans verwendet.
+
HO

HO

OH

OH

HO

HO
O

OH

OH

Ascorbinsure
O

-H
O

OH
-2e-

HO
O

OH

O
O

HO

-H+

O
OH

OH

OH

Dehydroascorbinsure

Ascorbinsure ist eine zweiprotonige Sure, wobei die C-3-OH-Gruppe strker sauer ist als C-2-OH wegen der
Resonanzstabilisierung des Anions.

77

78

L-(+)-Ascorbinsure

4. Kohlenhydrate

wird industriell nach einem Verfahren nach T. REICHSTEIN hergestellt. Der durch

Reduktion von D-Glucose (bzw. L-Sorbose) erhaltene D-Sorbit [D-Glucit, L-Gulit] wird mikrobiologisch mit
Acetobacter suboxidans spezifisch zu L-Sorbose oxidiert. Ketalisierung mit Aceton ergibt die Sorbofuranose,
durch Oxidation, Hydrolyse und Wassserabspaltung wird L-Ascorbinsure erhalten (Formel 4-17).
CH2OH

CH2OH

HO

HO

spontane

+
O / H

OH

OH

OH

D-Glucose

HO

HO

O2

NaBH4

Acetobacter
suboxidans

HO

Cyclisierung

CH2OH

HO
HO

CH2OH

CH2OH

(R)-Glucit
D-Sorbit
L-Gulit

(S)-Sorbose
L-Sorbose
COOH

OH

(S)-Sorbose
Pyranosid
COOCH3

CH2OH

CH-OH
O

O
HO

OO

CH2OH

NaOCl
oder
KMnO4

HO

OO

O
H2O / H +

CH3OH / H +

1. CaCO3

2. H
HO

OH

COOH

O
O

(S)-Sorbose
Furanosid

L-Ascorbinsure
CH2OH
CH2OH
2-Oxo-(S)-gulonsure 2-Oxo-(S)-gulonsuremethylester

Formel 4-17. Synthese von L-(+)-Ascorbinsure nach T. REICHSTEIN.

Die Westindische Kirsche Acerola als Frucht eines in Mittelamerika heimischen Strauches gilt als Vitamin Creichste Frucht. Sowohl Saft als auch ein durch Sprhtrocknung gewonnenes Pulver enthalten bis zu 25%
Ascorbinsure und werden zu Nahrungszwecken verwendet.

4.5 Disaccharide und Oligosaccharide

Disaccharide und Oligosaccharide bestehen aus zwei bzw. bis 9 Monosaccharid-Einheiten, die einzelnen
Strukturen unterscheiden sich durch die Aufbau beteiligten Monosaccharide deren unterschiedliche Art der
Verknpfung.

4.5.1 Disaccharide

Disaccharide sind Glykoside, in denen die Alkoholkomponente ein zweiter Zucker ist [Holoside]. Die
Verknpfung kann entweder zwischen beiden glykosidischen OH-Funktionen oder zwischen einer
glykosidischen OH-Gruppe und einer alkoholischen OH-Gruppe des zweiten Monosaccharids erfolgen kann.
Die 4-Hydroxyfunktion ist am hufigsten an der Glykosidbindung der Oligo- und Polysaccharide beteiligt
(14), weniger hufig findet man (16)-, (13)- oder gar (12)-Verknpfung. Sowohl die glykosidische
Bindung als auch das anomere Hydroxyl der zweiten Zuckerkomponente kann oder konfiguriert sein und
zwei anomere Disaccharide sind mglich. Im Fall der glykosidischen Verknpfung ber beide halbacetalischen
78

79

4. Kohlenhydrate

OH-Gruppen ist das entstandene Disaccharid nicht reduzierend, bleibt die Halbacetalgruppierung des zweiten
Bausteins erhalten, so besitzt es reduzierende Eigenschaften, bildet Osazone und zeigt Mutarotation.
CH2OH
H
O

CH2OH

CH2OH
O

CH2OH

OH

-glykosidische

anomeres
Hydroxyl
OH

-glykosidische

1,4-Verknpfung

Aus zwei Moleklen D-Glucose knnen folgende Bindungstypen und Disaccharide entstehen:
Bindungstyp

systematischer Name

Trivialname

11

-D-Glucopyranosyl--D-glucopyranosid

Trehalose

(14)

4(-D-Glucopyranosyl)-D-glucopyranose

Maltose

(14)

4(-D-Glucopyranosyl)-D-glucopyranose

Cellobiose

(16)

6(-D-Glucopyranosyl)-D-glucopyranose

Isomaltose, Brachiose

(16)

6(-D-Glucopyranosyl)-D-glucopyranose

Gentiobiose

Saccharose [Sukrose, Rohrzucker, Rbenzucker, D-Fructofuranosyl-D-glucopyranosid oder 2-D-Gluco


pyranosyl-D-fructofuranosid] ist ber beide anomeren C-Atome der Zuckerbausteine Glucose und Fructose
(12)-verknpft, der Glucoserest besitzt , der Fructoserest Konfiguration. Die Rntgenstrukturanalyse
zeigt, da die Glucose in der pyranosiden, die Fructose in der furanosiden Form vorliegen. Durch Erhitzen einer
rechtsdrehenden Lsung von Saccharose ([a]D= +66.5) mit Suren oder Behandeln mit Invertase entsteht
Invertzucker, der zu gleichen Mengen die Bausteine Glucose ([a]D= +52.7) und Fructose ([a]D= -92.4)
enthlt, wodurch der Drehwert dieses Gemisches linksgerichtet ist. Invertzucker ist Bestandteil des
Kunsthonigs.
HOH2C 6
1
-D-Fructofuranose
5 O HOH2C O
HO
H 2
2-O-(-D-Glucopyranosyl)--D-fructofuranosid
HO
H HO 5
1
6
-D-Fructofuranosyl--D-glucopyranosid
HO
-D-Glucopyranose
O
CH2OH
D-Glc--(12)-D--Fru
HO H

Saccharose
Rohrzucker

Saccharose ist das am hufigsten vorkommende Disaccharid berhaupt und aus vielen Pflanzen und Frchten
isoliert worden. In geringeren Mengen ist Saccharose in Pflanzen anzutreffen, z.B. im Smais und
Zuckerhirse, in Pflanzensften wie Palmsaft (Palmzucker), in Frchten (Dattelzucker), Samen, Baumsften
(Ahornzucker) und Wurzeln. Den hchsten Saccharosegehalt weisen Zuchtformen des Zuckerrohrs [Saccharum
officinarum, 14 - 20 %] und die Zuckerrbe [Beta vulgaris saccharifera, 16 20 %] auf. Die Entdeckung der
Saccharose in der Zuckerrbe geht auf den Berliner Chemiker MARGGRAF [1747] zurck. Vor der ersten
Gewinnung von Zucker aus Zuckerrohr [300 - 600 n.Chr. in Ostindien] war Honig das einzige Sungsmittel.
Rohrzucker oder Rbenzucker ist der wichtigste Nahrungszucker und wird industriell aus Zuckerrohr bzw.
Zuckerrben ber mehrere Reinigungsschritte (Raffinadezucker) gewonnen.
Maltose [Malzzucker] entsteht durch enzymatische Spaltung von Strke durch Amylase bzw. Diastase bei
der Bierherstellung. Maltose besteht aus zwei a(14)-glykosidisch verknpften Glucoseeinheiten und kann als
79

80

4. Kohlenhydrate

Maltose [4-(D-Glucopyranosyl)-D-glucopyranose] oder Maltose [4-(D-Glucopyranosyl)-Dglucopyranose] auftreten, die sich durch die Konfiguration des anomeren C-Atoms der reduzierenden Hlfte
des Zuckers unterscheiden.
4

HO

-Maltose
4-O-(-D-Glucopyranosyl)--D-glucopyranose

CH2OH
O
H

HO

O 4
HO

HO

-glykosidische Bindung

CH2OH
O

freies Acetal,
reduzierender Zucker

OH

HO

Cellobiose besteht wie Maltose aus zwei Moleklen Glucose, die aber glykosidisch miteinander verknpft
sind. Sie entsteht beim Abbau von Cellulose; die Spaltung zu Glucose wird durch das Enzym Emulsin
[Glucosidase] bewirkt.

HO
HO

CH2OH
O

-D-Glucopyranose

O
HO

HO

Cellobiose
4-O-(-D-glucopyranosyl)--D-glucopyranose
D-Glu--(14)-D--Glu

CH2OH
O
H

HO
OH

Lactose [Milchzucker, Lactobiose, 4-(-D-Galactopyranosyl)-D-glucopyranose], mit 7 % in der Frauenmilch


und mit 4 % in Kuhmilch enthalten, ist ein reduzierendes Disaccharid und kann sowohl in der als auch der
Form auftreten. Sie wird aus Molke gewonnen und findet hufig Verwendung als Sungsmittel von
Kindernahrung. In der menschlichen Milch wurden auer Lactose noch allo-Lactose [6-(D-Glucopyranosyl)D-glucopyranose]

isoliert.

HO
4

CH2OH
O 1

O
HO

HO
HO

OH

CH2OH
O

-Lactose
4-O-(-D-Galgactopyranosyl)--D-glucopyranose
D-Gal-(14)--D-Glu

HO

-D-Glucose

-D-Galactose

Trehalose [D-Glucopyranosyl-D-glucopyranose] kommt auer in Insekten auch in jungen Pilzen,


Schimmelpilzen, sowie in Hefen, Algen, Bakterien und Moosen [Mucose, Mutterkornzucker] vor. Gentiobiose
[Amygdalose, 6-(D-Gluco pyranosyl)-D-glucopyranose] ist glykosidisch gebunden Bestandteil von
Gentianose (5.5.2), Crocin, Amygdalin und anderen Glykosiden. Primverose [6-O-(D-Xylopyranosyl)-Dglucose] kann aus einer Reihe von Glykosiden, z.B. aus Primverin aus Primeln, durch enzy matische Hydrolyse
erhalten werden. Weitere Disaccharide sind Melibiose [6-(D-Galacto pyranosyl)-D-glucopyranose], Turanose
u.a.
CH2OH
HO

OH

HOH2C

OH

CH2

O
O

OH
HOH2C
O

OH

Trehalose

80

OH

OH

OH
HO

OH

O
OH

OH
HO

Melibiose

HO

HO

OH

OH

OH

OH

OH

Primverose
6-O--D-Xylopyranosyl-D-glucose

81

4. Kohlenhydrate

4.5.2 Oligosaccharide

Das verbreitetste Trisaccharid ist die Raffinose [D-Galactopyranosyl-(16)-D-glucopyranosyl-(12)D-fructofuranosid], die in zahlreichen Pflanzen vorkommt und aus Zuckerrbenmelasse gewonnen wird. Die
surekatalysierte Hydrolyse gibt je ein Mol D-Galactose, D-Glucose und D-Fructose, unter schwach-sauren
Bedingungen wird D-Fructose und das Disaccharid Melibiose. Gentianose [O-D-Fructofuranosyl -(21)D-glucopyranosyl-(61)-D-glucopyranosid] ist aus Gentiana-Arten isoliert worden, die Surespaltung
ergibt D-Fructose und Gentiobiose, Spaltung mit Emulsin D-Glucose und Saccharose. Weitere Trisaccharide
sind Kestose, Maltotriose und die Melicitose.
CH2OH

Raffinose

OH

O
OH

CH2
CH2OH
O
HO

O
O
OH

OH

O
OH

CH2OH
OH

HO

Tetrasaccharide bestehen aus vier Monosaccharideinheiten, zu ihnen zhlen die Stachyose [Lupeose, Cicerose,
Galactose-Galactose-Glucose-Fructose] aus den Wurzelknollen von Knollenziest [Stachys tubifera], die
Lychnose (Galactose-Glucose-Fructose-Galactose) und die Secalose (vier Fructose-Einheiten).

Cyclodextrine [CDs] sind cyclische, nicht reduzierende und kristalline Oligosaccharide, die aus Amylose durch
eine Amylase aus Bacillus macerans abgebaut werden [SCHARDINGEr-Dextrine]. Sie entstehen durch
Verknpfung der helikalen Windungen der Amylose (Formel 5-22) in den Formen , und -Cyclodextrin
und bestehen aus 6, 7 bzw. 8 Glucopyranoseeinheiten (Formel 5-18). Alle sekundren OH-Gruppen befinden
sich auf der einen, breiteren Seite, alle primren OH-Gruppen auf der unteren, schmleren Seite eines
konischen, toroidalen offenen Kegelstumpfs. Diese einzigartige Form ermglicht den Moleklen, andere
Substanzen einzuschlieen [molecular encapsulation]. Diese CD-Wirt-Gast-Komplexe sind relativ stabil, so
da modifizierte CDs heute als chirale Selektoren in der Flssig- und Gaschromatographie sowie in der
Kapillarelektrophorese eingesetzt werden.
HOH2C

OH O
HO

-Dextrin

CH2OH
O

1,69 nm
OH

HO

primre
OH-Gruppen
an C-6

O
HO

HOH2C

CH2OH

OH

0,95

hydrophobe
Cavitt

O
OH
HO
OHO

OH
HO
HOH2C O
O

CH2OH

n=1
2
3

-Cyclodextrin
-Cyclodextrin
-Cyclodextrin

sekundre
OH-Gruppen
an C-2 und C-3

Formel 5-18. Struktur und geometrische Dimensionen von Cyclodextrinen.

81

82

4. Kohlenhydrate

4.6 Polysaccharide

4.6.1 Struktur, Vorkommen und Nomenklatur

Polysaccharide bestehen aus einer Vielzahl glykosidisch gebundener Zuckerkomponenten. Sind sie aus nur
einem Zuckermonomeren als Baustein zusammengesetzt, spricht man von Homopolysacchariden (Tab. 4-5), die
aus mehreren Zuckern aufgebauten heien Heteropolysaccharide (Tab. 4-6). In Polysacchariden knnen
mehrere Bindungstypen vorliegen, und ausgehend von einer Hauptkette mit reduzierender Endgruppe knnen
kammartige oder baumartige Verzweigungen auftreten.

Viele Polysaccharide sind Speichersubstanzen von Tieren, Pflanzen und Mikroorganismen und besitzen
Bedeutung als Strukturelemente. Sie bilden die Matrix der Zellwnde sowie das Exogerst verschiedener
niederer Tiere. Bestimmte Polysaccharid-Fragmente stellen immunologische Determinanten dar und sind fr
interzellulre Wechselwirkungen von Bedeutung.

Die wichtigsten Bausteine der Polysaccharide sind die Hexosen D-Glucose, D-Mannose, beide enantiomeren
Formen der Galactose sowie D-Fructose, die Pentosen L-Arabinose und D-Xylose, die 6-Desoxyzucker L-Fucose
und L-Rhamnose, die Aminozucker D-Glucosamin und D-Galactosamin, und die Uronsuren D-Glucuronsure,
D-Galacturonsure, D-Mannuronsure

und L-Iduronsure. Bis auf Fructose und Arabinose liegen in den Poly-

sacchariden alle Zucker als Pyranosen vor, bei einigen sind die Hydroxygruppen methyliert oder verestert,
esterartig vor allem an Schwefelsure gebunden. Polysaccharide mit Aminozuckern kommen meist nur in
Tieren vor, das einzige Homopolysaccharid dieser Art ist das Chitin.

Zahlreiche native und chemisch modifizierte Polysaccharide finden als Zustze zu Pharmaka, Nahrungsmitteln
und Kosmetika und in der Textilindustrie Verwendung. Sie werden meist aus pflanzlichen Materialien isoliert,
einige werden mikrobiologisch aus niedermolekularen Kohlenhydrat-Substraten wie Glucose, Fructose und
Saccharose gewonnen. Auch Alginsuren, die eine groe kommerzielle Bedeutung besitzen, konnten ebenso
mit Hilfe von Bakterien produziert werden.

4.6.2 Physikalisch-chemische Eigenschaften

4.6.2.1 Sekundr- und Tertirstruktur von Polysacchariden

Bei den Polysacchariden werden Strukturen hherer Ordnung gefunden, die auf intermolekulare Wechselwirkungen zurckzufhren sind. Die entscheidenden Krfte sind Wasserstoffbrckenbindungen sowie
Dipolwechselwirkungen und Ionenbeziehungen. Voraussetzung ist, da in den Polysaccharidketten Abschnitte

82

83

4. Kohlenhydrate

mit sich regelmig wiederholenden Sequenzen vorhanden sind, Unterbrechung dieser Regelmigkeit durch
Verzweigung oder Einbau eines anderen Zuckers fhrt zum Abbruch der geordneten Assoziation.

Der hchste Ordnungsgrad wird bei Polysacchariden mit ideal gestreckter Kette und damit der Mglichkeit zur
maximalen Ausbildung von Wasserstoffbrcken erreicht. Solche sind z.B. Cellulose oder Chitin mit D-glucoStruktur, die im festen Aggregatzustand Fasern oder Bnder ausbilden. Die Zucker liegen in diesen fibrillren
Polysacchariden in der Konformation vor, bei der die Substituenten quatorial angeordnet sind.
OH
OH

CH2OH
O

R
OH

O
R HOH2C

CH2OH
O
O
OH
R

Cellulose: R = H
Chitin:
R = NHAc

Zur Ausbildung eines festen "kristallinen" Zustandes sind nur lineare Homopolysaccharide und sequentielle
Heteropolysaccharide bzw. regelmig verzweigte Homopolysaccharide geeignet. Neben bandartigen
Strukturen, wie sie von Cellulose, Chitin und Mannanen ausgebildet werden, werden bei Polysacchariden im
festen Zustand auch Helixstrukturen (siehe Amylose) gefunden.

In Lsung liegen die meisten Polysaccharide wahrscheinlich als ungeordnetes Knuel [random coil] vor, in
einigen Fllen wurden jedoch auch bandartige oder helikale Sekundrstrukturen wahrscheinlich gemacht. Meist
kommt es gleichzeitig zu starken intermolekularen Wechselwirkungen und zur Ausbildung hherer
Ordnungszustnde. So wurden z.B. zweioder mehrstrngige Assoziate von Helices oder Bndern oder von
Helices mit Bndern beschrieben [REES].

4.6.2.2 Lslichkeit

Polysaccharide sind dann in Wasser lslich, wenn die zwischenmolekularen Wechselwirkungen des Polysaccharids durch Hydratation der Hydroxygruppen der Zuckerreste weitgehend unwirksam werden. Hochgeordnete Strukturen wie das D-Glucan Cellulose ist daher in Wasser praktisch unlslich. Durch partielle
Methylierung der Hydroxygruppen wird jedoch die Zahl der intermolekularen Wasserstoffbrcken verringert
und die Lslichkeit nimmt zu. Methylierte Cellulose mit einem Substitutionsgrad von 1 - 2 ist in Wasser lslich.

4.6.2.3 Gelbildung

Viele Polysaccharide bilden in Gegenwart von Wasser Gele. Dabei geht das ursprnglich in Lsung als random
coil vorliegende Polysaccharid [Sol] in eine netzwerkhnliche Struktur [Gel] ber, die durch permanente
Wechselbeziehungen zwischen den Polysaccharidmoleklen hervorgerufen wird. Das Gel besteht aus amorphen
Regionen mit Kettenabschnitten mit random coil-Konformation und Regionen hochgeordneter Strukturen, wie
durch Rntgendiffraktionsmessungen nachgewiesen werden kann.

83

84

Sol

4. Kohlenhydrate

G el

Abbildung 4-4. Schematische Darstellung der Gelierung von Polysacchariden (nach REES).
Der bergang Sol Gel erfolgt bei definierter Temperatur und ist mit den Phasenumwandlungen in Lipidschichten und der Denaturierung von Proteinen vergleichbar. Dabei treten auch Hystereseerscheinungen auf. So
"schmilzt" z.B. ein Agargel beim Erwrmen auf ca. 90 C, erstarrt beim Abkhlen jedoch erst wieder bei ca. 40
C.

Gelbildende Polysaccharide kommen vor allem in der Wand junger Pflanzenzellen, in tierischen Flssigkeiten
und Bindegeweben sowie in der Bakterienkapsel vor. Alginsuren, Pektine und Agar werden in der Lebensmittelindustrie

eingesetzt,

im

Laboratorium

haben

Gelbildner

Bedeutung

als

Kulturbden

von

Mikroorganismen und als Trger fr die Elektrophorese sowie bei der Gelfiltration. Fr letztere werden
insbesondere synthetische Gele eingesetzt wie quer vernetzte Dextrane.

4.6.2.4 Molekulargewichtsbestimmung

Die Molekulargewichtsbestimmung von Polysacchariden kann durch Viskosittsbestimmung, Messung des


osmotischen Druckes, der Lichtstreuung oder des Sedimentationsverhaltens bei der Ultrazentrifugation oder
durch chemische Endgruppenbestimmung erfolgen. Meist sind Polysaccharide Gemische von Moleklen
verschiedener Molmassen, so da ein Durchschnittspolymerisationsgrad [D/P] angegeben wird, definiert als
Quotient der Molmasse des Polymers durch die Molmasse des Monomerenbausteins.

4.6.3 Homopolysaccharide

Homopolysaccharide sind nur aus einem einzigen Monosaccharid aufgebaut (Tab. 5-6) und nach diesem
Grundbaustein bezeichnet.

4.6.3.1 Glucane

84

85

4. Kohlenhydrate

Glucane sind die verbreitetsten Polysaccharide. Zu den D-Glucanen gehrt vor allem die D(14)
verknpfte Cellulose, zu den D-Glucanen zhlen die strkehnlichen Polysaccharide. (13)-, (14)- und
(16)-Bindungen kommen in Glucanen von Algen, Pilzen, Flechten und hheren Pflanzen vor.

Die Cellulose [D(14)-Glucan] besteht aus linear -glykosidisch verknpften Glucoseeinheiten und stellt
das hufigst vorkommende Kohlenhydrat dar. Jhrlich werden von Pflanzen etwa 10 Billionen t Kohlenstoff als
Cellulose gebunden. Baumwolle ist fast reine Cellulose (ca. 98 % des Trockengewichts), einen hohen
Prozentsatz an Cellulose enthalten Flachs, Hanf, Ramie und Jute. Holz besteht neben Hemicellulosen und
Lignin aus 40 - 50 % Cellulose, Grser zu etwa 30 %. Zur Entfernung der Nicht-Celluloseanteile des Holzes
sind industriell der Sulfit-Aufschlu und der alkalische Aufschlu bekannt, die danach anfallende Cellulose
wird als Cellulose bezeichnet und enthlt meist noch Hemicellulosen.

Cellulose besitzt als Zellstoff fr die Papierfabrikation Bedeutung, technisch wichtig sind die Cellulosenitrate,
die flschlicherweise als "Nitrocellulose" bezeichnet werden, und die in hochnitrierter Form unter dem Namen
Schiebaumwolle als rauchloses Schiepulver Verwendung finden. Geringer nitrierte Cellulose ist die
Kollodiumwolle, aus der durch Verkneten mit Campher Zelluloid entsteht. Celluloseacetat dient zur Herstellung
von Acetatseide und Sicherheitsfilm, mikrokristallines Cellulosetriacetat dient als stationre Phase fr
Enantiomerentrennung in der Flssigchromatographie.

Cellulose lt sich surehydrolytisch oder enzymatisch zu D-Glucose abbauen. Bei schonender


surekatalysierter Hydrolyse entstehen Cellobiose und andere Oligosaccharide. Enzyme der Verdauungssfte
von Insekten und Mollusken knnen Cellulose spalten, Sugetiere hingegen besitzen dazu keine Enzyme. Die
Spaltung der Cellulose im Magen-Darm-Trakt von Wiederkuern erfolgt durch Cellulasen der vorkommenden
Darmbakterien.
HOH2C
O
HO

HO
O
OH HOH C
2

OH HOH2C
O
HO
O

Cellulose
O

.... -D(14)-Glc--D(14)-Glc- ....

O
OH

lineares Polymer aus -D-Glucose

Cellulose ist aufgrund ihres hohen Polymerisations- und Ordnungsgrades in Wasser und in allen organischen
Lsungsmitteln praktisch unlslich. Unter Einwirkung von Alkalilauge quillt sie zu Alkalicellulose, deren
mechanische

Bearbeitung

verschiedenste

Verarbeitungsformen

der

Hydratcellulose

wie

Papier,

Pergamentpapier oder Vulkanfiber ergibt.

In ammoniakalischer Kupfer-(II)-salz-Lsung [Cu(NH3)4](OH)2 (SCHWEITZERS Reagenz, Cuproxam) geht


Cellulose als Kupfer-Chelat-Komplex in Lsung, aus dem durch Ausfllen Kupferseide oder Cellophan
erhalten wird. Regenerierte Cellulose gewinnt man durch Verseifen von Celluloseacetat oder Behandeln von
Cellulosexanthogenat mit Suren als Viskoseseide.
85

86

4. Kohlenhydrate

Die Polysaccharidketten der Cellulose lagern sich zu Elementarfibrillen [Protofibrillen] von ca. 3.5 nm Durchmesser zusammen, die aus bis zu 36 Polysaccharidketten gebildet werden. Aus diesen Elementarfibrillen
werden dann Mikrofibrillen von 5 - 10 nm Durchmesser und 50 - 60 nm Lnge gebildet, die sich mit dem
Elektronenmikroskop erkennen lassen.

In nativer Cellulose mit ungefhr 70 % Kristallinitt sind neben greren Bereichen hochgeordneter Abschnitte
auch solche geringerer Ordnung (amorphe Bereiche) anzutreffen (Abb. 4-6). In der sekundren Zellwand der
Pflanzen sind die Cellulosefibrillen in eine Matrix aus anderen Polysacchariden (Hemicellulosen, Pektine) und
Lignin eingebettet.

Abbildung 4-6. Schematischer Aufbau der Cellulose-Mikrofibrillen.

Das Molekulargewicht der Cellulose liegt zwischen 200.000 und 1,000.000 Da, der durchschnittliche
Polymerisationsgrad der nativen Cellulose liegt bei ca. 1.000 (Methode der chemischen Endgruppenbestimmung). Ultrazentrifugation sowie Viskositts- oder Trbungsmessungen ergaben Werte zwischen 5.000
und 10.000.

D(13)-Glucane kommen in Pilzen, Algen und hheren Pflanzen vor. Am besten untersucht ist das
Laminaran der Braunalge Laminaria, das auerdem noch (16)-verzweigt ist. (13)- und (14)-Bindungen
enthlt das Lichenan des Islndischen Mooses [Cetraria islandica], dessen getrocknete Thalli [Lichen
islandicus] als Schleimdroge pharmazeutische Anwendung finden. Ein (12)-Glucan wird als extrazellulres
Polysaccharid vom pflanzenpathogenen Agrobacteria produziert. Das (16)-Glucan Pustulan wird von der
Flechte Umbilicaria pustulata gebildet.
Die wichtigste Gruppe der D-Glucane sind die strkehnlichen Polysaccharide Amylose, Amylopektin, und
Glycogen mit (14)- bzw. (14)- und (16)-Bindungen, ferner gehren dazu verschiedenen Polysaccharide
von Mikroorganismen sowie die Dextrane und das Pullulan. Letzteres wird von Kulturen von Pullularia
pullulans produziert, hefehnlichen Pilzen, die mit Saccharose als C-Quelle wachsen. Es enthlt regulr
verteilte (14)- und (16)-Bindungen mit folgender Teilsequenz:

86

87

4. Kohlenhydrate

---Glc-(16)-Glc-(14)-Glc-(14)-Glc-(16)-Glc-(14)---

Strke ist das Assimilationsprodukt grner Pflanzen und ist als Hauptbestandteil von Kartoffeln, Getreide und
Reis ein wichtiges Nahrungsmittel. Die Vergrung von Strke fhrt ber Maltose und Glucose zu Ethanol. Sie
ist die Glucosespeicherform der meisten hheren Pflanzen und wird in Form kleiner wasserunlslicher Krner
[Granula] in den Chloroplasten abgelagert. In diesen Strkegranula gibt es kristalline und amorphe Regionen,
die gegenber Hydrolyse verschiedene Stabilitten aufweisen.

Tabelle 4-6. Wichtige Homopolysaccharide


Typ

Polysaccharid

Bindung

Vorkommen

-D-Glucane

Cellulose

14

in Pflanzen

Laminaran

13, 16

Phaeyaphyta, insb. Laminaria-Arten (Braunalgen)

Lichenan

13, 14

Cetraria islandica Islndisches Moos

Pustulan

16

Umbilicaria pustula (Flechte)

Amylose

14

in Pflanzen

Amylopektin

14, 16

in Pflanzen

Glycogen

14, 16

in Tieren

Dextran

16, 13

Leuconostoc-Arten, Bakterien

-D-Glucane

14, 12
Pullulan

Pullularia pullulans
14, 16

Nigeran

Aspergillus niger
13, 14

Isolichenan

Cetraria islandica
13, 14

-D-Aminoglucane

Chitin

14

Insekten, Krebse, niedere Pflanzen (Pilze, Grnalgen)

-D-Fructane*

Inulin

21

Asteraceae, Pflanzen

Levan

26

Bakterien, Poaceae

14

Landpflanzen

-L(13)

Rhodophyta (Gracilaria, Gelidium)

-D-Mannane
Galactane

Agarose

-D(14)
Carrageenane
-L-Arabinane*
-D-Xylane

Xylan

-D(13)

Rhodophyta (Chondrus crispus,

-D(14)

Gigartina stellata)

15, 13

in zahlreichen Pflanzen

14

in Hemicellulosefraktionen von Landpflanzen, Zellwandbestandteil von Rhodophyta

* als Furanoside

Strke ist ein Gemisch aus 15 - 25 % Amylose und 75 - 85 % Amylopektin, die sich durch ihre Lslichkeit, ihre
Molmasse und ihre Farbreaktion mit einer Iodlsung unterscheiden. Die Amylose besteht im wesentlichen aus
etwa 100 - 1.400 glykosidisch 1,4-verknpften D-Glucopyranoseeinheiten (15.000 - 220.000 Da) in Form
87

88

4. Kohlenhydrate

linearer Ketten, und zu einem geringen Teil aus glykosidischen Bindungen in Verzweigungen. Amylose lst
sich in heiem Wasser kolloidal ("lsliche Strke") und lt sich mit Alkohol wieder ausfllen.
O
HO

CH2OH
O
HO
O
HO

CH2OH
O
HO
O
HO

Amylose

CH2OH
O
HO
O

Verknpfte Glucane kommen zum Unterschied von den (14)-Glucanen nicht als Fibrillen vor, die
glykosidische Bindung bedingt eine schraubenfrmige Anordnung der Glucosereste. Fr die sog. V-Form der
Amylose, die durch Fllen mit Alkohol erhltlich ist, konnte eine Helix mit 6 (oder weniger hufig mit 7)
Glucoseresten pro Windung wahrscheinlich gemacht werden. Das Innere dieser Helix ist hydrophob und es
knnen sich in die rhrenartigen Strukturen Molekle passender Gre einlagern. Einschluverbindungen
dieser Art bildet z.B. Iod, wobei die Farbe der Iodeinschluverbindung durch Wechselwirkung der
Elektronenhlle des Iods mit den Hydroxygruppen der Amylose zustandekommt. Der Amylose-Iod-Komplex,
der in der Iodometrie als Indikator Anwendung findet, enthlt 19.5 % Iod und ist krftig blau gefrbt (lmax = 660
nm).

Amylopektin, etwa 80 % der Strke, ist stark verzweigt und besitzt eine Molmasse von etwa 400.000 1,000.000 Da. Die einzelnen Ketten sind noch durch 4 - 6 % a(16)-glykosidische Bindungen vernetzt, die
(14)-verknpften Seitenketten bestehen aus jeweils 20 bis 25 Glucoseresten. Amylopektin quillt in heiem
Wasser und bildet viskosen Strkekleister. Es reagiert mit Iod unter Rotfrbung (lmax = 540 nm), der IodKomplex enthlt 0.5 - 0.8 % Iod.

O
HO
CH2OH
O

CH2OH
O

(14)-Seitenkette

CH2OH
Amylopektin
O
O
O
HO
HO
HO
CH2OH
HO
O
O
(16)-Verzweigung
O
HO
H2C
HO
O
O
(14)-Hauptkette
HO
HO
O
HO

Glykogen ist die Reservestrke und Speicherform der D-Glucose der Tiere und wird vor allem in der Leber und
in den Muskeln angereichert, ist aber auch in den Zellen von Invertebraten und Protozoen enthalten. Es besteht
aus hochverzweigten D-Glucose-Ketten; die Moleklmassen schwanken zwischen 4,000.000 und 14,000.000
Da. Der Aufbau des Glykogens entspricht etwa dem des Amylopektins, allerdings ist es strker verzweigt und
die Seitenketten sind krzer (10 - 14 Glucoseeinheiten). Trotz der hohen Moleklmasse ist Glykogen noch gut
wasserlslich. Im Maiskorn ist ein Glucan enthalten, das dem Glykogen hnliche Eigenschaften aufweist
und als Phytoglykogen bezeichnet wird.

88

89

4. Kohlenhydrate

Dextrane sind schleimartige neutrale Polysaccharide und werden von Bakterien, vor allem der Gattung
Leuconostoc mit Saccharose oder Raffinose als Substrat produziert und in die Kulturflssigkeit abgegeben.
Bakterien der Mundhhle bilden mit dem Zucker aus der Nahrung einen Dextranfilm, der eine wesentliche
Rolle bei der Ausbildung von Caries spielt. Dieser Film erleichtert die Kolonisierung cariogener Bakterien und
dient ihnen als Nahrungsquelle. Dextrane werden in Klebstoffen, Leimen, Filmen, Anstrichmitteln, Papier- und
Textilfinishes und Kosmetika eingesetzt. Die Bildung hochmolekularer, unlslicher Dextrane kann
verantwortlich fr das Verstopfen von Filtern, Ventilen und Rohrleitungen in der zuckerverarbeitenden
Industrie sein. Hydrolytisch abgebaute Dextrane dienen als Blutplasmaersatz [Plasmaexpander]

4.6.3.2 Chitin

Chitin ist das einzige Homopolysaccharid, das aus einem Aminozucker (N-Acetyl-D-glucosamin) aufgebaut ist.
Es dient im Pflanzen- und Tierreich als Gerstsubstanz, in Pilzen und Grnalgen ist es Bestandteil der Zellmembran, bei Insekten und Crustaceen Hauptbestandteil des Exogerstes. Analog zur Cellulose sind N-AcetylD-glucosamin-Molekle

in (14)-glykosidischer Bindung zu langen Ketten vereinigt. Chitin lt sich vorteil-

haft aus Hummer- oder Krebsschalen isolieren, eine einzige Krabbenart erzeugt jhrlich schtzungsweise
mehrere Millionen Tonnen Chitin.
HOH2C
O
O
HO
AcHN

AcHN
HO
O
HOH2C

HOH2C
O
HO

Chitin
O
O
AcHN

4.6.4 Heteropolysaccharide

Heteropolysaccharide sind aus mehr als einem Monosaccharid-Baustein aufgebaut und werden entsprechend
der Struktur der Monomeren eingeteilt.

4.6.4.1 Glycane

Die Hauptkomponente der cellulosebegleitenden, alkalilslichen Hemicellulosen der verholzten Zellwand


hherer Pflanzen sind die Glycanoxylane, die weit verbreitetste Gruppe der Glycane. Die Glycanoxylane der
Liliatae enthalten Seitenketten aus L-Arabinofuranose, manchmal auch aus D-Glucuronsure. 20 - 30 % des
Trockengewichtes von Stroh machen diese Arabinoxylane aus. An das Xylangrundgerst der Magnoliatae sind
4-O-Methyl-D-glucuronsurereste gebunden. Gymnospermen-Xylane besitzen einen hheren Gehalt an 4-OMethyl-D-glucuronsure neben L-Arabinofuranoseresten. Sie werden von Glucomannanen begleitet, die in
Liliatae als Reservekohlenhydrate vorkommen. Gallactomannane sind in den Samen von Fabaceen enthalten.
Arabinogalactane wurden aus Sojabohnen und Hlzern von Pinadeen isoliert.

89

90

4. Kohlenhydrate

4.6.4.3 Glycuronane

Glycuronane oder Polyuronide sind Polysaccharide, deren Ketten hauptschlich aus Glycuronsuren. Daneben
gibt

es

zahlreiche

Heteropolysaccharide

[Glycanoglycuronane]

und

komplexe

Polysaccharide

[Mucopolysaccharide], die geringere Mengen an Uronsuren enthalten.

Pektinsubstanzen kommen vor allem in der Zellwand und der Interzellulrschicht sowie in den Sften von
Landpflanzen, aber auch bestimmten Algen vor. Grundbaustein ist eine (14)-verknpfte D-Galactopyranuronsure, in der Kette knnen neutrale Zucker wie L-Rhamnose eingebaut sein. An das Galacturonan sind
Galactane, Arabinonane, Galactoxylane oder Xylofucane gebunden. Bei den Pektinsuren liegen die
Carboxylgruppen der Galacturonsurenreste in freier Form vor, bei den Pektinen sind sie mit Methanol
verestert.
4)-D-GalUA(12)-L-Rha-(14)-D-GalUA-(14)-D-GalUA(1
n
D-Galactan

oder L-Araban

GalUA = Gal-uronsure

D-Galactoxylan oder
D-Xylo-L-fucan

Pektinsuren bilden in Gegenwart von Ca2+- oder Mg2+-Ionen in der Pflanze einen unlslichen Komplex, der als
Protopektin bezeichnet wird. Durch enzymatische Methylierung, wie sie in reifen Frchten stattfindet, entsteht
daraus lsliches Pektin. Diese Pektine bilden in Gegenwart von Zuckern stabile Gele, sind fr die Gelierung
von Fruchtsften verantwortlich und finden z.B. bei der Marmeladenbereitung Verwendung.

Braunalgen [Phaeophyta] enthalten als Zellwand-Polyuronide die Alginsuren. Mit einem MG von etwa
200.000 besteht Alginsure aus homopolymeren Blcken von (14)-verknpfter D-Mannopyranuronsure
bzw. (14)-verknpfter L-Gulopyranuronsure von verschiedener Lnge und Blcken mit alternierender
Sequenz beider Uronsuren.

Sie wird fr kommerzielle Zwecke meist aus Braunalgen der Gattung Laminaria, Macrocystis und Ascophyllum
isoliert, konnten aber auch mit Hilfe der Bakterien Pseudomonas aeruginosa und Azobacter vinelandii
produziert werden. Das lineare Glycuronan liegt in den Algen als Ca-Salz vor, beim Ansuern fllt die Alginsure als gelatinser Niederschlag aus.Das Natriumsalz oder der 2-Hydroxypropylester der Alginsure finden
Verwendung als Verdickungsmittel in der Lebensmittelindustrie (z.B. fr Eiscremes) sowie in der
pharmazeutischen Technologie als Tablettensprengmittel.
COOH
O

O
OH HO

4.6.4.46 Glycanoglycuronane

90

O
COOH
OHHO

Teilsequenz der Alginsure


O

91

4. Kohlenhydrate

Polysaccharide dieser Gruppe sind hinsichtlich ihrer Monomeren-Struktur, der Bindungstypen sowie der Art
der Verzweigungen sehr variabel aufgebaut. Zu den Glycanoglycuronanen gehren die meisten Gummen und
Schleime der Pflanzen. Als Schleime werden Polysaccharide bezeichnet, die meist in der Zellwand der Pflanze
vorkommen und hochviskose, kolloidale Lsungen bilden. Die festen, klebrigen Gummen werden dagegen erst
nach Verletzung gebildet und ausgeschieden. Sie kommen vor allem in Bumen der Fabales vor.

Die Gummen kommen als Ca- oder Mg-Salze vor, einige wie z.B. Gummi arabicum oder Tragacantha werden
als Verdickungsmittel und als Emulsionsstabilisator in der pharmazeutischen in der Lebensmitteltechnologie
verwendet. Am besten bekannt ist Gummi arabicum, das von verschiedenen Acacia-Arten gebildet wird. Die
salzfreie Arabinsure ist ein Glycuronogalactan, das zustzlich noch L-Arabinose und L-Rhamnose enthlt.
Tragant [Tragacantha] wird von verschiedenen Astragalus-Arten [Leguminosae] Kleinasiens gebildet.

4.6. Heparin

Heparin, aus Lungen von Schlachttieren gewonnen, ist ein geradkettiges Heteropolysaccharid, das grtenteils
aus Glucosamin und Glucuronsure besteht und ein Molgewicht von 5.000 - 40.000 Da besitzt. Es bildet salzartige Verbindungen mit Proteinen. Die saure Reaktion kommt durch Schwefelsure zustande, die esterartig an
Hydroxygruppen oder amidartig an die Aminogruppe von Glucosamin gebunden ist. Da Heparin die
Blutgerinnung durch Einwirkung auf Thrombin hemmt, hat es therapeutisch als Antikoagulans Bedeutung.
O
SO3OH
-

O2 C
O

O
OSO 3-

O
HO

H2C

Heparin

OH

Schwefelsureester

OH
HN O
O3SO

O
n

HN

OH

Schwefelsureamid

hnliche sulfatisierte Polysaccharide besitzen Bedeutung als Chemotherapeutika bei der Behandlung von AIDS
[acquired immune deficiency syndrome]. Das HIV-Virus [human immunodeficiency virus] zerstrt irreparabel
das menschliche Immunsystem, soda fr HIV-positive Patienten ein antivirales Therapeutikum mit geringer
Toxizitt verlangt wird, dessen Einnahme bereits vor dem Ausbruch der eigentlichen Symptome erfolgen soll
und das ber einen langen Zeitraum, gegebenenfalls lebenslnglich, eingenommen werden mu. Neben
Nucleosidanalogen werden klinisch antiviral wirkende sulfatisierte Polysaccharide, wie das aus Seealgen und
Pilzen extrahierte Dextransulfat, verwendet.

4.7.1.3 Glykoproteine

Glykoproteine sind N-glykosidisch verknpfte Oligo- und Polysaccharid-Seitenketten von Proteinen und treten
gemeinsam mit den Proteoglykanen in den Blutgruppensubstanzen, Nervenenden und Zellmembranen auf.

91

92

4. Kohlenhydrate

Glykoproteine wurden hauptschlich in hheren Tieren gefunden. Von den ca. 60 Proteinen des menschlichen
Krpers scheinen nur zwei, Albumin und Pralbumin, nicht glykosyliert zu sein. Weit verbreitet sind sialinsurehltige Glykoproteine [Sialoglykoproteine], die vor allem als Bestandteile von Schleimstoffen und des
Glykocalyx der Zelloberflche vorkommen. Natrliche Glykoproteine erfllen bei biologischen Prozessen
vielgestaltige Aufgaben als Glykoenzyme, Proteohormone (Gonadotropine, Thyrotropin, Thyroglobulin),
Milch- und Eiproteine sowie Lectine, Toxine, Transportsysteme, Immunglobuline, Plasmaproteine oder
Strukturproteine.. Der Oligosaccharidanteil dient fr die Zell-Zell-Erkennung, fungiert weiter als Rezeptor fr
Hormone, Proteine und Viren und ist verantwortlich fr die Immunreaktionen. Viele Glykoproteine sind
Polymere von Subeinheiten. Charakteristisch ist, da Glykoproteine weniger empfindlich gegenber
proteolytischen Enzymen und Denaturierung sind als andere Proteine.

Als Kohlenhydratkomponente enthalten Glykoproteine vor allem D-Mannose und 2-Acetamino-2-desoxy-Dglucose. Einige hufig vorkommende Sequenzen sind in Abb. 5-8 zusammengefat.
NaeAc-(22)-Gal-(14)-GlcNac-(12)-Man-(13)
Man-(14)-GlcNac-(14)-GlcNAc-Asn
NeuAc-(26)-Gal-(14)-GlcNac-(12)-Man-(16)
-Amylase, Ribonuclease B (Rind, Schwein)
Ovalbumin, Prothrombin (Rind), Thyroglobulin (Mensch, Kalb,
Schwein), Taka-Amylase
IgE, IgM (Mensch), Ig G (Mensch, Rind)
IgE, IgM (Mensch), Ig G (Rind), Thyroglobulin (Schwein)
Myeloma-IgE (Mensch), menschliches Sero- und Lactotransferrin

Abbildung 4-8. Struktur von Kohlenhydratsequenzen einiger Glykoproteine.

Der Kohlenhydratgehalt der Immunoglobuline kann zwischen 2 - 3 (IgG) und 10 - 12 % (IgM) schwanken. Die
Kohlenhydratkomponenten spielen wahrscheinlich eine Rolle beim Transport der intrazellulr synthetisierten
Immunoglobuline in den Extrazellulrraum.

4.7.1.4 Zellwandpolymere, Strukturelemente der bakteriellen Zellwand

Die Plasmamembran der Bakterien ist von einer elastischen Zellwand umgeben. Aufgrund des
unterschiedlichen Verhaltens dieser ueren Zellwand bei der Gramfrbung, einer im 19. Jahrhundert vom
dnischen Bakteriologen CHRISTIAN GRAM entwickelten Frbemethode, lassen sich Bakterien in zwei Gruppen
einteilen. Bei den gram-positiven Bakterien bleibt der Farbstoff aus Kristallviolett mit Iodiodkalium-Lsung
nach dem Behandeln mit Alkohol bestehen, bei den gram-negativen Bakterien wird er entfrbt. Das
unterschiedliche Verhalten wird auf Unterschiede in der Maschenweite der Zellwandmatrix zurckgefhrt, die
bei gram-positiven Bakterien kleiner ist, so da der sperrige Komplex nicht herausgelst werden kann.
92

93

4. Kohlenhydrate

Den schematischen Aufbau der Zellwand gram-positiver und gram-negativer Bakterien zeigt Abb. 5-9. Die feste
Matrix der bakteriellen Zellwand besteht aus einer Peptidoglykanschicht, dem Murein. Das Netzwerk des
Peptidoglykans wird aus linearen Glykanstrngen gebildet, die durch Peptidketten quervernetzt sind (Abb. 510). Bei gram-negativen Bakterien ist die Zellwand dnner und weniger stark vernetzt als bei gram-positiven
Bakterien. Zustzlich sind gram-negative von einer ueren Membran umhllt, die aus Phospholipiden und
Lipidpolysacchariden besteht.

Abbildung 4-9. Aufbau grampositiver und gramnegativer Zellwnde. Gram-negative Bakterien verfgen
zustzlich ber eine uere Membran.
Das Glykan ist ein Blockpolymer aus (14)-verknpftem N-Acetylglucosamin und N-Acetyl-3-Olactylglucosamin (N-Acetylmuramsure). Jeder Strang enthlt 10 bis 50 derartiger Disaccharideinheiten. An die
Carboxylgruppe der Muramsurereste ist amidartig ein Tetra- oder seltener Pentapeptid gebunden, bei dem Dund L-Aminosuren alternieren.

Abbildung 4-10. Schematische Darstellung des Mureins der Zellwand von Bakterien der Gruppe A.

MurAc-Ala-D-iGln [Muramyldipeptid, MDP] ist die kleinste sich wiederholende Einheit der Zellwand von
grampositiven Mycobakterien. Es bewirkt die Stimulation von Antikrpern und vergrert die Resistenz gegen
verschiedene pathogene Mikroorganismen. Als Nebenwirkung ist vor allem die Fieberreaktion [pyrogen] zu
nennen. Unmittelbar an der Muramsure sitzt meist L-Alanin (Abb. 5-10), am Ende des Oligopeptids D-Alanin.
Nach der Art der Quervernetzung werden zwei Gruppen von Peptidoglycanen unterschieden. Bei der Gruppe A
kommt die Quervernetzung durch eine Diaminosure zustande, deren o-Aminogruppe direkt (bei gramnegativen Bakterien) oder ber eine weitere Peptidkette (bei gram-positiven Bakterien) mit dem D-Alaninrest
der nchsten Einheit verbunden ist.

93

94

HOH2C
HO

4. Kohlenhydrate

O
OH

Muramyldipeptid MDP

NHAc
H

N
H

L-Ala

CO2H
CONH2
D-isoGlu-NH2

4.8 Zuckersynthesen, Aufbau und Abbau von Kohlenhydraten

4.8.1 Totalsynthesen, Formose-Reaktion, Aldolreaktion, Sharpless-Epoxidierung, Pummerer-Reaktion,


Wittig-Olefinierung

Das einfachste Verfahren zur Totalsynthese von Kohlenhydraten basiert auf der basischen Oligomerisierung
von Formaldehyd. Aus Formaldehyd entsteht Glycolaldehyd, der in einer Aldolreaktion Glycerinaldehyd ergibt.
Weitere Aldolkondensationen, gleichzeitig auftretende Isomerisierungen und Epimerisierungen lassen ein
Gemisch gerad- und verzweigtkettiger Monosaccharide verschiedenster Konfiguration [Formose] entstehen.
Diese sog. Formose-Reaktion besitzt prparativ wenig Bedeutungbesitzt; im Rahmen von Untersuchungen
prbiologischer Synthesen ist jedoch interessant, da bei der Formosereaktion vor allem Hexosen und Pentosen
entstehen (Formel 5-26).
H C
H
H C
C

O
CH2OH

Glycolaldehyd

H C

+ HCH=O

Formaldehyd

+ HCH=O
CHOH

C(OH)CH 2OH

CH2OH

CH2OH

Glycerinaldehyd

+ Glycolaldehyd
H C

CHOH

Formose
CHOH

Aldotetrose

CH2OH

Formel 4-26. Formosereaktion, Oligomerisierung von Formaldehyd.

Der Aufbau von Kohlenhydraten ist durch eine Vielzahl von CC-Verknpfungen denkbar. Whlt als
Ausgangsverbindungen fr die Aldolreaktion grere Synthone, so wird die Isomerenzahl eingeschrnkt. Dies
gilt z.B. fr die Kondensation von Dihydroxyaceton und Glycerinaldehyd [FISCHER, 1887], die in Gegenwart
von Ba(OH)2 neben einem verzweigten Zucker zu einem Gemisch von Fructose und Sorbose fhrt. Dabei wird,
wie auch an anderen Beispielen gezeigt, bevorzugt die threo-Konfiguration (trans-stndig) der neugebildeten
asymmetrischen C-Atome C-3 und C-4 beobachtet.

94

95

4. Kohlenhydrate

CH2OH

Dihydroxyaceton
+
CHO

Na2CO3

HC OH

HO CH

CH2OH
Br2

C O

C O

CH2OH
CHOH

CH2OH

CH2OH

C O

Ba(OH)2

HO CH

HC OH

HC OH

HC OH

CH2OH
HC OH

CH2OH
D-Fructose

Glycerol
CH2OH

CH2OH
D-Sorbose

Isomerengemisch, geringe Ausbeute

Glyceraldehyd

Die Entwicklungen von enantioselektiven, stereoselektiven und diastereoselektiven Synthesen und der Einsatz
billiger Monosaccharide und ihrer Derivate als chirale Synthone [Chirone] erweckte in den letzten Jahren
besonders das Interesse an Synthesen in der Kohlenhydratchemie. SHARPLESS-Epoxidierung und PUMMERERReaktion sind die Schlsselreaktionen eines Syntheseprinzips von MASAMUNE, SHARPLESS und Mitarbeitern,
das hier am Beispiel der stereoselektiven Totalsynthese von L-Mannose hier demonstriert wird. Aus einem (E)Allylalkohol 17 entsteht durch Sharpless-Epoxidierung unter Verwendung von (+)-Weinsurediethylester [(+)AE] der optisch aktive Epoxyalkohol 18, welcher im Gleichgewicht mit dem Positionsisomeren 19 [PAYNEUmlagerung]

steht.

Substitution

mit

Thiophenol,

PUMMERER-Reaktion,

reduktive

Spaltung

und

Acetonidbildung fhren zum Derivat 21 der L-Erythrose. In einem zweiten Reaktionszyklus wird durch (E)selektive WITTIG-Olefinierung mit Formylmethylenphosphoran, NaBH4-Reduktion, erneuter asymmetrischer
Epoxidierung mit (-)-Weinsurediethylester das Epoxy-hexosederivat 22 erhalten, das durch PAYNEquilibrierung, Epoxidffnung und Acetonidbildung, erneuter PUMMERER-Reaktion, Umwandlung der
Acetoxysulfid- in die Aldehydgruppe, und Abspaltung der Schutzgruppen zu L-Mannose fhrt.
OH

SHARPLESS-

RO

SC6H5
OH

Oxidation
(+)-AE

HO

C6H5-SH

HO

OH-

HO

RO
RO

17

19

18

OR

CHO
O

1. Ph3P=CH-CH=O
2. NaBH4

3.

SHARPLESSOxidation

1. OH-, C6H5-SH
O

20

SC6H5

SC6H5
O

2. Acetylbildung

CHO

OH

OH
HO

HO

OH

OR

21

22

OR

23

OR

L-Mannose

R = CH(C6H5)2

Die asymmetrische SHARPLESS-Epoxidierung und nachfolgende stereoselektive Reaktionen fhrten zur


Aufstellung eines "Baukasten-Systems" fr alle denkbaren Aldotetrosen, -pentosen und -hexosen ber die
entsprechenden Zuckeralkohole sowie entsprechende 2-Desoxy- und 2-Amino-2-desoxyzucker in enantiomerenreinen Formen. Geschtzte Hydroxyaldehyde 24 werden durch WITTIG-Olefinierung und Reduktion
in

die

entsprechenden

(E)bzw.

(Z)-Allylalkohole

25

berfhrt.

Die

Oxidation

mit

tert-Butyl

hydroperoxid/Tetra(isopropoxy)titan in Gegenwart von D- oder L-Weinsureester ergibt wahlweise (E,2R)- oder


(E,2S)-2,3-Epoxyalkanole 26 bzw. das (Z,2R)- und (Z,2S)-Paar 26. Regioselektive und stereospezifische
ffnung des Epoxidringes, im einfachsten Fall die alkalische Hydrolyse unter Inversion am C-2, liefert die
reinen Triole 27 (Formel 4-27).

95

96

4. Kohlenhydrate

OH
D-AE

OH

OH

R
O

(E,2R)-26

OH

OH

erythro-(2S)-27
OH

(E)-25
L-AE

OH

OH

(E,2S)-26
R-CH=O

OH

erythro-(2R)-27

24
O
D-AE

OH
OH
OH

R
R
OH

OH

(Z,2R)-26

threo-(2S)-27
R

(Z)-25

L-AE

OH

O
OH

OH

R
OH

AE = Weinsureester

(Z,2S)-26
threo-(2R)-27

Formel 4-27. Darstellung von Zuckeralkoholen ber die SHARPLESS-Epoxidierung.

4.8.2 Partialsynthesen

Einige Monosaccharide zhlen zu den billigsten enantiomerenreinen Verbindungen und werden durch gezielte
Manipulation einzelner Hydroxygruppen hufig als Ausgangsstoffe zur Synthese chiraler Molekle
herangezogen. In der Kohlenhydratsynthese sind damit vorrangig Kettenverlngerung bzw. -verkrzung von
Bedeutung.

4.8.2.1 Cyanhydrinsynthese nach KILIANI-FISCHER

Die klassische C5+C1-Verknpfung zum Aufbau von Aldohexosen ist die Cyanhydrinsynthese nach KILIANIFISCHER mit D-Arabinose (Formel 4-28). Addition von HCN an Arabinose gibt ein Cyanhydrin, dessen
neugebildetes Chiralittszentrum C-2 racemisch ist. Durch Hydrolyse werden zwei diastereomere Carbonsuren
bzw. Lactone gebildet, deren anschlieende Reduktion zu einem Gemisch aus D-Glucose und D-Mannose mit
unterschiedlicher Stereochemie an C-2 fhrt.

96

97

COOH

CN
CHO

CHOH

CHOH

HO

4. Kohlenhydrate

HO

HO

H+ / H2O

HCN

- H2O

OH

OH

OH

OH

OH

OH
CH2OH

CH2OH
D-Gluconsurenitril
+
D-Mannonsurenitril

CH2OH
D-Arabinose

D-Gluconsure
+
D-Mannonsure
CHO

CHO

O
C
H
CHOH O

HO

OH

HO

HO

HO

Na / Hg
OH
CH2OH

OH

OH

OH

OH
CH2OH
D-Mannose

CH2OH

-Lactone

D-Glucose

Formel 4-28. KILIANI-FISCHER-Cyanhydrinsynthese zum Zuckeraufbau.

Statt eines 1:1-Gemisches der Diastereomeren wird dabei bevorzugt das Epimere gebildet, bei dem die
Hydroxyle am C-2 und C-3 trans-stndig angeordnet sind (Mannose). Dies ist nach der CRAM'schen Regel nicht
zu erwarten, nach der der CN-Angriff von der sterisch weniger gehinderten Seite erfolgen sollte. Bevorzugtes
Produkt sollte Glucose sein.
H

CN
O

C
HO

HO

HO
HO

H
R

mehr RH weniger
gehindert gehindert

HR

H
CN

HO
H

H
OH
RCN

H
HO

Arabinose

CH=O
OH
H

OH

HO

H
R

Glucose

Formel 4-29. Glucosebildung aus Arabinose nach der CRAM'schen Regel.

hnliche und weitere Reaktionen zur aufbauenden Partialsynthese sind z.B. a) die KUHN-Variante der
Cyanhydrinsynthese zur Darstellung von 2-Amino-2-desoxyzuckern, b) die NEF-Reaktion, c) WITTIG-Reaktion
zur Darstellung von 2-Desoxyaldosen und d) die Umsetzung mit Diazomethan mit anschlieender WOLFFUmlagerung.

97

98

CN
CHO

a)

b)

CH=O

HCN
NH3

CHO

HC NH2

Base

KUHN-Variante der
Cyanhydrinsynthese
2-Amino-2-desoxyaldose

HC NH2

R
HC NO2
CHOH
R'

CH2 NO2

R'

4. Kohlenhydrate

NEF-Reaktion

NEF-Reaktion
R = H Aldose
R = Alkyl Ketose

CHOH

NaOH / H2SO4

R'

Base
NO2

1. Reduktion

2. NEF-Reaktion
NaOH / H2SO4

CH2

CH
R'

HC O

c)

2-Desoxyzucker

R'

CH3OCH

PPh3

Hydrolyse

HC CH OCH3

HC O

R
R

CH2

2-Desoxyzucker

R
CHO
O
O

d)

HC O

HC
CH2N2

C Cl

N2

C O

W OLFFUmlagerung

R
R

H2O

CH

R
R

H2C

OH

C=O

2-Ketose

1. CH3COOH
2. Hydrolyse

R CH2

COOH

Onsure eines
2-Desoxyzuckers

Formel 4-30. Partialsynthesen, Zuckeraufbau.

4.8.2.2 Zuckerabbau, WOHL-, RUFF- und WEHRMANN-Abbau

Beim WOHL-Abbau [WOHL und ZEMPLEN] wird eine Aldose in die um ein C-Atom rmere Aldose berfhrt.
Dabei wird z.B. eine Hexose zunchst in ihr Oxim berfhrt, Acetylierung und Wasserabspaltung gibt ein
Nitril, welches beim Behandeln mit NH3/AgO oder Natriummethanolat Blausure abspaltet. Die Hydrolyse der
Acetate fhrt zum verkrzten Zucker, das C-2-Atom des ursprnglichen Zuckers wird Trger der neuen
Carbonylfunktion (Formel 5-31).
H

CHO

NOH

N
CHO

HO

HO
OH

HO

AcO
OH

NH2OH

Ac2O

HO

OAc

1. CH3ONa / CHCl3

OH
HO

AcO
2. H2O

OH

OH

OAc

OH

CH2OH

CH2OH

CH2OAc

CH2OH

D-Idose

Oxim

Nitril

D-Xylose

Formel 4-34. WOHL-Abbau von D-Idose zu D-Xylose.

Der WOHL-Abbau gibt die Mglichkeit, in Verbindung mit der Oxidation zu Aldarsuren (Formel 5-32) die vier
mglichen Aldopentosen zu unterscheiden. Unterwirft man eine Aldopentose dem Wohlabbau und oxidiert die
resultierende Aldotetrose zur entsprechenden Dicarbonsure, so lt sich aus deren optischer Aktivitt bzw.
Inaktivitt die Konfiguration der ursprnglichen Aldopentose ableiten.
98

99

CHO

CHO
COOH

4. Kohlenhydrate

CHO

CHO
Oxidation

W OHL-

W OHL-

Abbau

Abbau

D-Weinsure

(optisch aktiv)

Oxidation

CH2OH

CH2OH

CH2OH

D-Lyxose

D-Arabinose

CH2OH

COOH

COOH

CH2OH

meso-Weinsure (optisch inaktiv)

Formel 4-32. Unterscheidung zwischen Lyxose und Arabinose durch WOHL-Abbau.

Der RUFF-Abbau einer D-Aldose verluft ber die entsprechende Aldonsure, deren Calciumsalz mit H2O2 in
Gegenwart von Eisen-III-acetat CO2 abspaltet und in die um ein C-Atom kleinere Aldose bergeht.
COOH

COOH

CHO

CHO

OH

OH

OH

OH

1. Ca(OH)2

OH

OH

OH

2. Fe+++ / H2O2

OH

OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

OH
- CO2

OH
OH
CH2OH
D-Ribose

D-Allonsure

D-Allose

Formel 4-33. RUFF-Abbau der D-Allose zu D-Ribose.

Zu einer um ein C-Atom verkrzten Aldose gelangt man hnlich durch Oxidation zur Aldonsure und
anschlieende oxidative Spaltung mit FENTON-Reagens (H2O2/Fe(II)SO4).
CH=O

COOH

CH-OH

NaOBr

CH=O

CH-OH

H2O2

+ CO2 + H2O

R
R

FeSO4

Aldonsure

Aldose

verkrzte
Aldose

Beim WEHRMANN-Abbau wird das Sureamid einer Aldonsure einem HOFMANN-Sureamidabbau unterworfen.
NH2
CH=O

COOH

C=O

CHOH

CHOH

CHOH

NaOBr(Cl)
R

Aldose

Aldonsure

HOFMANNAbbau

H
R C N
OH

+ H2O
R

C O

H
C

O
NH2
R

- CO2

C H

OH

Sureamid

verkrzte
Aldose

Formel 4-34. WEHRMANN-Abbau einer Aldose via HOFMANN'schem Sureamidabbau.

4.8.3 Chemoenzymatische Synthese von Zuckern

Durch Kondensation von 3-Phenylthiopropanal mit Dihydroxyacetonphosphat mittels D-Fructose-1,6diphosphat-Aldolase aus Kaninchenmuskel [RAMA] und saurer Phosphatase [H+-Pase] erhielten WHITESIDES
et al. in einer chemoenzymatischen Synthese das Hydroxyketon 28. Die Ketofunktion lt sich mit Sorbitoldehydrogenase [SDH] diastereoselektiv zu 29 reduzieren, der (S)-Alkohol 29 acetylieren und zum Sulfoxid 30
oxidieren. Durch Eliminierung des PhSO-Gruppe (31) und Ozonspaltung wird L-Xylose erhalten. Die

99

100

4. Kohlenhydrate

PUMMERER-Umlagerung liefert andererseits aus 30 das Hemithioacetal 32, das mit DIBALH in die 2-Desoxy-Lxylo-hexose berfhrt werden kann.
OP

OH

OH

OAc

OH

OAc

HO

1. Ac2O

HO

HO

1. RAMA
2. H - Pase

O
H

OH

OH
H

H
SPh

OAc

SDH

H
SPh

28

2. m-CPBA

OAc
H

H
SPh

SPh

29

30
O

OAc

HC

OAc

O
H

HO
O3

AcO

OH
OAc

HC

O
OAc

OAc

HO
AcO

OH

HO

DIBALH
OH

HO

OAc

31
OH

L-Xylose

2-Desoxy-L-xylo-hexose
32

H
SPh
O

Formel 4-35. Chemoenzymatische Synthese von L-Zuckern.

4.9 Physikalisch-chemische Eigenschaften der Monosaccharide

4.9.1 Optische Aktivitt

Monosaccharide besitzen mehrere Chiralittszentren und sind optisch aktiv, empirisch gefundene
Zusammenhnge zwischen Struktur und Konfiguration werden durch die HUDSONschen Regeln ausgedrckt.
Nach der 1. HUDSONschen Regel ist das Anomere in der D-Reihe immer strker rechtsdrehend als das
entsprechende Amonere, die 2. Regel besagt, da das Drehvermgen durch den bergang von der cyclischen
Halbacetalform des Monosaccharids zum Glykosid kaum beeinflut wird. Diese Regeln basieren auf der
Isorotationsregel, die besagt, da sich das Drehvermgen eines Anomeren aus dem Beitrag des Strukturteils
mit dem C-1-Chiralittszentrum und dem Teil mit den restlichen chiralen Zentren zusammensetzt.

Monosaccharide zeigen ber 200 nm kein Absorptionsmaximum und dementsprechend auch keinen COTTONEffekt. Letzterer tritt erst bei Zuckerderivaten auf, die chromophore Gruppen tragen, und bei zahlreichen
Glykoside wie Pyrimidin- und Purinnucleoside oder Flavonglykoside.

4.9.2 1H-NMR-Spektroskopie

Die 1H-Kernresonanzspektroskopie spielt bei der Ermittlung von Konformation und Konfiguration von Zuckern
eine wesentliche Rolle. Die Kopplungskonstanten miteinander koppelnder Protonen sind abhngig von deren
Diederwinkel [KARPLUS-Gleichung], so da D- und D-Glucopyranoside leicht unterschieden und
100

101

4. Kohlenhydrate

zugeordnet werden knnen. Bei Kohlenhydraten wurde auch erstmals beobachtet, da quatoriale Protonen im
allgemeinen bei tieferem Feld absorbieren als axiale Protonen.
Ha

Ha
Re

He

O
C-2

C-2
OHe

C-3

OHe

C-3

Ha

-D-Glucopyranosyl
H-C-1 / H-C-2 180
Kopplungskonstante J = 7 - 12 Hz

Ra

-D-Glucopyranosyl
H-C-1 / H-C-2 60
Kopplungskonstante J = 2 - 3 Hz

4.11 Biochemie der Zucker

4.11.1 Biosynthese der Monosaccharide

Mittelpunkt des Kohlenhydratstoffwechsels, der im Gesamtstoffwechsel der Zelle eine zentrale Rolle spielt, ist
die D-Glucose, die als Energiespeicher und Ausgangsverbindung fr die Biosynthese einer Vielzahl von
Verbindungen dient. Die Biosynthese der Glucose [Gluconeogenese, Abb. 4.14] geht von Zwischenprodukten
des Citrat-Cyclus aus und stellt in seinen wesentlichen Schritten die Rckreaktion des Kohlenhydratabbaus
[Glykolyse, 4.11.3] dar.
Citrat-Cyclus

Phosphoenolpyruvat
Calvin-Cyclus

3-Phosphoglycerat
Glycerinaldehyd-3-phosphat

Dihydroxyaceton-phosphat

Fructose-1,6-diphosphat F-1,6-P
Fructose-6-phosphat F-6-P

Glucose-6-phosphat G-6-P

Abbildung 4-13. Gluconeogenese, Biosynthese von Glucose.

In grnen Pflanzen und einigen Bakterienfamilien findet die Glucose-Neubildung in der Dunkelreaktion der
Photosynthese durch Reduktion von CO2 entsprechend der Reaktionsgleichung
6 CO2

6 H2

C6H12O6 +

6 O2
101

102

4. Kohlenhydrate

statt, wie CALVIN durch radioaktive Markierungsexperimente zeigen konnte. Substrat fr die CO2-Fixierung
ist D-Ribulose-1,5-diphosphat, das ber den CALVIN-Cyclus gebildet wird und zu 2 Moleklen 3Phosphoglycerat reagiert. Die eigentliche Bildung der Hexose erfolgt durch gemischte Aldolkondensation der
zwei Triosephosphate Glyceraldehyd-3-phosphat und Dihydroxyacetonphosphat. Aus 6 Moleklen Ribulose1,5-diphosphat und 6 Moleklen CO2 entstehen 12 Glycerinaldehyd-3-phosphat-Molekel, wovon zwei zum
Aufbau von Glucose, Saccharose und Strke verwendet werden, und die restlichen 10 wieder zu 6 Moleklen
Ribulosediphosphat regeneriert werden (CALVIN-Cyclus, Abb. 4-14).

O
O
O
C +
O

O
OH

O
O-

P
O

HOOC

H2O

O
OH
O

O
H

O
OH
O
OH
O

O-

P
O-

2
O
P

O P
OH O
COO -

O-

O-

O-

Abbildung 4-14. Schematische Darstellung des CALVIN-Cyclus.

4.11.2 Biosynthese der Oligo-und Polysaccharide

Die Biosynthese der Oligo- und Polysaccharide erfolgt durch bertragung aktivierter Monosaccharidreste auf
die wachsende Saccharidkette als Akzeptor. Der Transfer wird durch Enzyme katalysiert, als aktivierte Formen
der Monosaccharide (Donatoren) dienen Zuckernucleotide, wie z.B. Uridindiphosphoglucose [UDPG] (Abb. 416).
Phosphoglucomutase
Glucose-6-phosphat

UTP, UDP-Pyrophosphorylase
Glucose-1-phosphat

Startpolysaccharid
Uridindiphosphoglucose

Startpolysaccharid-Glucose + UDP

Abbildung 4-16. Biosynthese von Oligo- und Polysacchariden.

102

103

4. Kohlenhydrate

4.11.3 Glykolyse

Die Umkehrung der Gluconeogenese ist die Glykolyse [auch EMBDEN-MEYERHOF-PARNAS-Abbau], der bei
allen Organismen in gleicher Weise verlaufende anaerobe Abbau von Glucose zu Brenztraubensure. In den
Muskeln wird weiter unter anaeroben Bedingungen aus Brenztraubensure Milchsure produziert, unter
aeroben Bedingungen wird Acetat gebildet, das als Acetylcoenzym A zum einen die Biosynthesevorstufe fr
Fettsuren, Terpene und Polyketide ist, zum anderen in den Citrat-Cyclus einmndet. Die rechtsdrehende (S)Milchsure kommt im Muskelgewebe vor, die sog. Grungsmilchsure ist racemisch. Bei der alkoholischen
Grung entsteht durch Decarboxylierung und Reduktion aus Pyruvat Ethanol (Formel 4-31).

OH

OH

Isomerase

ATP
- ADP
HO

OH
OH

OH

Fructose-1,6-diphosphat
F-1,6-P

Dihydroxyacetonphosphat

C=O
CH2-OH

HO

P
+ ADP

CH-OH

CH-OH
H2C

Fructose-6-phosphat
F-6-P
COO -

- ATP
+

Diphosphoglycerat

CH2

HC O

+ ADP

- H2O

C O

COO -

CH2-OH

3-Phosphoglycerat

H2C

Glycerinaldehydphosphat
COO -

Isomerisierung

CH-OH

+ NADH

OH
O

CH=O

OH

HO

Fructose-6-phosphat
F-6-P

H2C

H2C

ATP

HO

Glucose-6-phosphat
G-6-P
O

O
O
HO

- ADP

OH

OH
OH

Glucose

OH

OH
HO

O
HO

2-Phosphoglycerat

- ATP

Phosphoenolpyruvat

CH3

CH3
NADH

CH-OH

C=O
-

Milchsure

COOH

COO

Pyruvat
O

NAD / CoASH

Acetyl-CoA
CH3C
CH3
HC

ScoA

NADH

H3C

CH2OH

Ethanol

Formel 4-31. Glykolyse, Abbau von Glucose zu Brenztraubensure. Bildung von Milchsure, Acetyl-CoA und
alkoholische Grung..

103

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4. Kohlenhydrate

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5. Terpene
.1 Struktur und Biogenese terpenoider Verbindungen

ber 2.000 Pflanzenarten, die sich auf ca. 60 Familien verteilen, enthalten in ihren Blten, Blttern, Nadeln und
Frchten und in ihren Harzen etherische le, die oft in eigenen "lzellen" gesammelt werden. Diese le
enthalten

flchtige

organische

Substanzen

mit

ausgeprgtem

Geruch

und

lassen

sich

durch

Wasserdampfdestillation, Extraktion oder durch Hei- und Kaltpressen gewinnen. Die einzelnen Komponenten
der meist komplexen Gemische etherischer le gehren berwiegend zu den Terpenen. Die Terpene wiederum
zhlt man gemeinsam mit den Steroiden (Kap. 6. Steroide) zu den einfachen Lipiden (Lipoide).

Die Terpene lassen sich formal als Oligomere des Kohlenwasserstoffs Isopren [2-Methyl-1.3-butadien]
auffassen und aus C5-Einheiten, Isopentylen- oder Isoprenein heiten [Isoprenoide] zusammensetzen. Je nach
Zahl dieser Basiseinheiten teilt man sie in Monoterpene (C10, 2 Isopreneinheiten), Sesquiterpene (C15, 3
Isopreneinheiten), Diterpene (C20, 4 Isopreneinheiten), Sesterpene (C25), Triterpene (C30) und Tetraterpene (C40)
ein. Die Steroide leiten sich von den Triterpenen ab, Carotinoide besitzen meist Tetraterpen-Struktur. Die
Isopentylen-Basiseinheiten knnen entweder Kopf-Schwanz- oder Kopf-Kopf-verknpft sein (Abb. 5-1).

CH2

CH3
CH CH2 CH2

C
C

C
C

CH3
H2C C CH CH2

Isopren

Monoterpene

2 Einheiten

C10

Sesquiterpene

3 Einheiten

C15

Diterpene

4 Einheiten

C20

Sesterpene

5 Einheiten

C25

Triterpene

6 Einheiten

C30

Tetraterpene

8 Einheiten

C40

Polyterpene

> 8 Einheiten

Isopentylen-Basiseinheit

Kopf - SchwanzAnordnung
Kopf - KopfC

C
C

Abbildung 5-1. Zur biogenetischen Isoprenregel.

Dieses Kriterium des Aufbaues des Kohlenstoffskelettes der Isoprenoide wurde ursprnglich von O. WALLACH
[1887, Chemienobelpreis 1910] aufgestellt und spter von L. RUZICKA [1922, Chemienobelpreis 1939] als
biogenetische Isoprenregel formuliert und stellt eine wertvolle Hilfe zur Konstitutionsermittlung komplexer
Terpene dar.

Etherische le und damit auch viele Terpene besitzen antimikrobielle Wirksamkeit, die fast in
allenKulturkreisen bekannt war. Sie werden zur Konservierung, fr kosmetische Prparate, als Therapeutika
und in der Parfum- und Aromenindustrie verwendet. Einige Terpene wirken als Pflanzenwachstumsregulatoren

108

5. Terpene

und sind wichtige Mediatoren der Wechselwirkung zwischen Pflanzen und Insekten. Auerdem gibt es eine
Reihe von Pheromonen, Hormonen, Juvenilhormonen, Alkaloiden, Chlorophyllen und Vitaminen mit
Isoprenoidstruktur.

Terpene und Terpenoide bilden eine heterogene Klasse von Naturstoffen, die von flchtigen,
niedermolekularen bis zu hochmolekularen, polymeren Verbindungen reicht. Unter ihnen findet man
acyclische, mono-, bi- und tri und tetracyclische und kondensierte Systeme, Kohlenwasserstoffe, Alkohole,
Ketone, Aldehyde, Epoxide, heterocyclische Verbindungen, Ether, Carbonsuren und Ester. Ihr Bauprinzip
wird am besten durch die Biosynthese [F. LYNEN, K. BLOCH, Nobelpreis 1964] verstanden; Mittelpunkt ist die
Mevalonsure, die aus 3 Moleklen AcetylCoA entsteht. Damit zhlen die Terpene zusammen mit den
Steroiden und Fettsuren zu den sich von der Essigsure ableitenden Acetogeninen [2.1.2.4]. Zwei Molekle
AcetylCoA treten zunchst zu AcetoacetylCoA zusammen, ein drittes Molekl wird durch Kondensation zum
3-Hydroxy-3-methylglutarsurederivat angefgt. Reduktive Abspaltung von CoA gibt Mevalonsure. Letztere
kann als Monolacton Mevalolacton vorliegen, das als Wachstumsfaktor aus Lactobacillus acidophilus isoliert
wurde. Zweifache Phosphorylierung von Mevalonsure gibt dasentsprechende Pyrophosphat, Decarboxylierung
und Wasserabspaltung fhrt zu Isopent-3-enylpyrophosphat IPP [aktives Isopren], das durch eine Isomerase in
das stabilere 3.3-Dimethylallylpyrophosphat DMAPP [Prenol] umgelagert wird.
O

HO
O

AcCoA
CH3C

HO

AcCoA

NADH

H 2O

- CoASH

SCoA
SCoA

AcetylCoA

HOOC

AcetoacetylCoA

SCoA

(R)-Mevalonsure

COOH

CH2

CH2
ATP
HO

CH3

HO

O P O
O

ATP

CH3
CH2

CH2

O
H2C

H2C

5-Pyrophosphomevalonsure

CH3

H2C

C
O

PP

Isopentenylpyrophosphat IPP [aktives Isopren]

P O
O

O
-

Isomerase

CH2

- H3PO 4
- CO 2

3-Phopho-5-pyrophosphomevalonsure

H3C

PP
O

5-Phosphomevalonsure
H2C

CH2OH

HOOC
O

(S)-3-Hydroxy-methylglutaryl-CoA
COOH

ATP

H
C

CH 2

PP

H3C

3,3-Dimethylallylpyrophosphat

Formel 5-1. Biosynthese von Mevalonsure und der Isopreneinheit.

3,3-Dimethylallylpyrophosphat DMAPP lt sich leicht nukleophil substituieren, als Nucleophil wirkt die
Doppel bindung des Isopentenylpyrophosphats. Durch Kopf-Schwanz -Kondensation entsteht (E)-2Geranylpyrophosphat oder (Z)-2-Nerylpyrophosphat, dessen Hydrolyse zum acyclischen Monoterpenalkohol
Geraniol bzw. Nerol fhrt.

109

O PP

5. Terpene

CH3
- PP-O-

H3C
C CH CH2

H2C

CH2 CH2

CH3
H3C

PP

C CH CH2 CH2 CH CH2 CH2 O

H3C

PP

H3C

DMAPP

IPP
CH3

CH3
- H+

Hydrolyse

H3C
C CH CH2 CH2 C

CH

CH2 O

H3C
C CH CH2 CH2 C

PP

H3C

CH

CH2 OH

H3C

Geranylpyrophosphat

Geraniol

Durch Verknpfung mit einer weiteren IPP-Einheit gelangt man zu den isomeren Farnesylpyrophosphaten,
welche die Vorstufen zu den Sesquiterpenen und zu den anderen Terpenen und Steroiden darstellen (Abb. 5-2
gibt eine Gesamtbersicht ber die Biosynthesewege der Terpenoide, die Biogenese der einzelnen
Terpenklassen werden detailliert in den entsprechenden Abschnitten beschrieben).

Abbildung 5-2. Gesamtbersicht ber die Biosynthesewege der Terpenoide.

.2 Monoterpene

Die Monoterpene bilden oft zusammen mit den Sesquiterpenen den Hauptbestandteil der etherischen le und
bedingen durch ihre Flchtigkeit oft den typischen Geruch von Pflanzen und Pflanzenlen. Ihre industrielle
Bedeutung liegt vor allem in ihrer Verwendung als Riech- bzw. Aromastoffe.

3.2.1 Geranylpyrophosphat als Stammsubstanz der Monoterpene

Das acyclische Geranylpyrophosphat bzw. das entsprechende Geranylcarbeniumion spielen die zentrale Rolle
bei der Biogenese der Monoterpene, eine Reihe von Umlagerungs- und Folgereaktionen fhrt zu acyclischen,
cyclischen und polycyclischen Verbindungen. Einfache und mehrfache Umlagerung und Substitution bzw.
Protonabstraktion fhren zu Linalool und. zu Nerol bzw. zu Myrcen. Intramolekulare Cyclisierungen fhren zu

110

5. Terpene

Kohlenwasserstoffen und Sauerstoffverbindungen der p-Menthanreihe sowie zu Derivaten des Bornylsystems,


zu Kampfer und zu Pinanderivaten.
+

+
+

5.2.2 Acyclische Monoterpene

Zu den acyclischen Monoterpenen zhlen die Kohlenwasserstoffe Myrcen und die stereoisomeren (Z)- und (E)Ocimen, Alkohole wie z.B. Geraniol, Nerol, Citronellol, Linalool und Myrcenol, die Aldehyde Geranial, Neral,
Citronellal und die Geraniumsure.
OH
CH2OH
CH2OH

Myrcen

(Z)-Ocimen

(E)-Ocimen

Cosmen

Linalool

Geraniol

COOH

CHO
CH2OH

Nerol

CHO

CH2OH

CHO

OH

Citronellol Dihydrocitronellol Myrcenol

Geranial
Citral a

Neral
Citral b

Citronellal

Geraniumsure

Formel 5-2. Strukturformeln acyclischer Monoterpene.

Myrcen [2-Methyl-6-methylen-2,7-octadien] und die Ocimene [2,6-Dimethyl-2,5,7-octatrien] werden in teils


hohen Konzentrationen in etherischen len von Gewrzpflanzen gefunden. Myrcen und (E)-Ocimen wurden in
Ocimum basilicum-len identifiziert, im l von Ocimum gratissimum aus Taiwan konnten neben 8 % Myrcen
bis zu 30 % Ocimene nachgewiesen werden. In industriellem Mastab wird Myrcen durch Pyrolyse von Pinen aus amerikanischem Terpentinl hergestellt und dient als Rohstoff fr die Riechstoffsynthese. Das
Dehydroterpen Cosmen kommt nur in wenigen Compositenlen vor.

111

5. Terpene

Der acyclische Monoterpenalkohol Linalool kommt vorwiegend als Acetat bis zu 50 % im Lavendell [Oleum
Lavendulae] vor. (-)-Linalool ist der Hauptanteil von amerikanischem Basilikum-l (~50 %) und wird aus
Rosenholzl (von Cayenne linaloe) gewonnen, das l der Korianderfrchte [Coriandrum sativum] besteht aus
60-70 % (+)-Linalool. Die erste, spter auch technisch verwertete Synthese des Linalools gelang L. RUZICKA
und V. FORNASIR [1919] durch Ethinylierung von Methylheptenon und partielle Hydrierung des gebildeten
Dehydrolinalools.
HO

OH

H2

Pd / C
H

Methylheptenon

Dehydrolinalool

Linalool

Auf einer thermischen Reaktion basiert eine technische Synthese von Linalool, ausgehend von (-)--Pinen.
Dieses wird selektiv zum cis-Pinan hydriert, aus dem sich mit Luftsauerstoff 75 % cis- und 25 % transPinanhydroperoxid bilden. Reduktion ergibt die entsprechenden Pinanole, die sich destillativ trennen lassen.
Die thermische Zersetzung von cis-Pinanol ergibt (+)-Linalool, die von trans-Pinanol liefert (-)-Linalool [G.
OHLOFF].
H

HOO

H2 / Pd

HOO

O2

H2

Radikalstarter

(-)--Pinen

cis-Pinan
HO

Pinanhydroperoxide

HO

HO

HO

cis-

Pinanole

trans

(+)-Linalool

(-)-Linalool

Surekatalysiert isomerisiert Linalool zu Geraniol und Nerol. Geraniol kommt als Hauptkomponente in
Geranium- und Rosenl vor, das geruchlich wertvollere cis-Isomere Nerol findet man z.B. im Bergamottl.
Geraniol und Nerol gehen durch Behandlung mit Suren in den monocyclischen Terpenalkohol -Terpineol
ber, ihre Reduktion fhrt zu Citronellol und schlielich zu Dihydrocitronellol. Myrcenol wurde im Hopfenl
gefunden und ist ein Grundstoff der Riechstoff- und Parfumherstellung. Citral besitzt den Geruch und
Geschmack von Zitronen und wird als synthetisches Zitronenaroma in der Parfmindustrie verwendet.
Natrliches Citral wird durch Destillation aus Lemongrasl [Cymbopogon flexuosus, bis 85 %] gewonnen,
industriell wird es durch Oxidation von Nerol hergestellt. Es ist ein wichtiger Riech- und Geschmackstoff,
Vorprodukt fr zahlreiche Riechstoffe und Schlsselbaustein der Vitamin A-Synthese. Durch Alkalien wird
Citral hydrolytisch in Acetaldehyd und 2-Methylhept-2-en-6-on gespalten, das Citral in etherischen len hufig
begleitet. Citral wurde auerdem als Markierungssubstanz in Blattschneiderameisen und im NASSANOFF-Sekret
von Honigbienen nachgewiesen. Geranial [Citral a], das in Gegenwart von Suren leicht zum aromatischen
Kohlenwasserstoff p-Cymol cyclisiert, und Neral [Citral b] sind in etherischen len vieler Citrus-Arten

112

5. Terpene

enthalten. Die (+)-Form von Citronellol und Citronellal kommt im Citronelll vor, das (-)-Citronellol im
Rosenl. Geraniumsure macht zu einem Groteil das Aroma der Scheurebe- und Traminer-Weine und
verschiedener Traubensorten aus.

Ipsdienol und das Dihydroderivat Ipsenol sind zusammen mit (+)-cis-Verbenol die aktiven Prinzipien der
Sexualpheromone verschiedener Borkenkferarten der Gattung Ips (7.2.2). (Z)- und (E)-Tageton sind die
Hauptkomponenten des etherischen ls von Tagetes glandulifera, (Z)- und (E)-Ocimenon werden ebenso in
Tagetes-len gefunden.
OH

OH

Ipsdienol

Ipsenol

Tageton

Ocimenon

Kondensation von Geranial mit Aceton ergibt das -Ionon, das mit verdnnter Sure in - und -Ionon
berfhrt werden kann. Die Ionone, die mit ihrem C13-Gerst auch als Norsesquiterpene gesehen werden
knnen, sind wegen ihres Veilchengeruches Bestandteil vieler Parfums, -Ionon, das thermodynamisch
stabilste Ionon, dient als Ausgangsprodukt fr die technische Vitamin-A-Synthese.

Aceton

H+

+
Ba(OH)2

Ionon

Geranial

Ionon

Ionon

Damascone [1-(2,6,6-Trimethylcyclohexenyl)-2-buten-1-on] sind Jonon-Isomere, von denen - und Damascon im Tee-Aroma enthalten sind. Von den mglichen Damascenonen hat -Damascenon [1-(2,6,6Trimethyl-1,3-cyclohexadienyl)-2-buten-1-on]

als

essentieller

Bestandteil

des

bulgarischen

Rosenls

[Rosenketon] fr dessen Aroma die grte Bedeutung.


O

Damascon

Damascon

Damascenon

5.2.3 Monocyclische Monoterpene

Der Grundkrper der monocyclischen Monoterpene ist das p-Menthan, die wichtigsten Verbindungen dieser
Reihe sind die Menthadien-Kohlenwasserstoffe -Terpinen, -Terpinen, Limonen, Terpinolen, - und Phellandren und das aromatische p-Cymol.
7

2
3

IUPAC: 1-Isopropyl-4-methylcyclohexan

Grundkrper der Menthadiene

8
9

pMenthan,

10

113

5. Terpene

Limonen [1,8(9)-Menthadien] ist der Hauptbestandteil der Citrusschalenle, riecht zitronenartig und besitzt als
technischer Riechstoff Bedeutung. Beide Stereoisomeren findet man in der Natur, (+)-Limonen kommt im
Kmmell (aus Carum carvi) vor, (-)-Limonen im Fichtennadell. Limonen ist eines der klassischen Beispiele
fr chirales Erkennen durch den Geruchsinn. Whrend (S)(-)-Limonen die Grundlage (bis zu 97 %) fr
Agrumenle (Parfumgrundstoffe) bildet, besitzt das (R)(+)-Limonen eine Fehlaroma-Note. Bereits 1878 gelang
BOUCHARDAT durch Erhitzen von Isopren die Darstellung von Dipenten, dem racemischen Gemisch der beiden
Limonenisomeren. Dipenten dient als Lsungsmittel und lt sich durch [4+2]-Cycloaddition von
Methylbutadien bei 300 C oder durch Dehydrierung von -Terpineol herstellen. -Terpinen wurde als
Hauptkomponente im Wasserdampfdestillat von Majoran [Majorana hortensis] identifiziert. Terpinolen [pMentha-1,4(8)-dien] wird als technisches Parfmierungsmittel zur Schuh- und Mbelpflegemittel, fr Wachse
u. dgl. verwendet.

-Terpinen

-Terpinen

Limonen

Terpinolen -Phellandren -Phellandren

p-Cymol

1,3,8-Menthatrien und 1-Methyl-4-isopropenylbenzol sind mit dem strengen und typischen Geruch von
Petersilie, Petroselinum crispum, assoziiert.

1,3,8-Menthatrien

1-Methyl-4-isopropylbenzol

Als Sauerstoffverbindungen der p-Menthanreihe kennt man die Alkohole -Terpineol, Menthol, Piperitol,
Pulegol, Dihydrocarveol und Carveol, die terpenoiden Phenole Carvacrol und Thymol, die Ketone Menthon,
Piperiton, Pulegon und Carvon und den eher seltenen Cuminaldehyd.
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH

-Terpineol

Menthol

Piperitol

Pulegol

Dihydrocarveol

Carveol
CHO

Carvacrol

OH

Menthol

Piperitol

Pulegol

Carveol

Carvacrol

Carvacrol

114

5. Terpene

-Terpineol hat einen fliederartigen Geruch, bakterizide Eigenschaften und besitzt als Zusatz in Waschmitteln
und Kosmetika und als Desinfektionsmittel groe Bedeutung fr die Kosmetikindustrie. Es kommt in
erheblicher Menge im Kardamoml (aus Elettaria cardamomum) vor. -Terpinylacetat mit seinem krautigwrzigen Geruch ist das wichtigeste Derivat. -Terpineol, Terpinylacetat und das hyazinthartig riechende Terpineol entstehen ber 1,8-Terpin [1,8-Dihydroxy-p-menthan] bei Behandlung von -Pinen mit Suren.
Synthetisches Rohterpineol [Yellow Pine Oil] aus -Pinen wird zu Desinfektionszwecken verwendet und spielt
auerdem als Flotationsmittel zur Erzaufbereitung eine Rolle.
Racemisches -Terpineol lt sich durch eine regioselektive DIELS-ALDER-Reaktion aus Acrylsuremethylester
und Isopren darstellen.

CH3MgBr

+
COOCH3

COOCH3

OH

4-Methylcyclohex-3-en1-carbonsuremethylester

()--Terpineol

Thymol und Carvacrol kommen u.a. im etherischen l des Thymians [Thymus vulgaris] und in len von
Majoran- und Origanum-Arten vor und haben als Desinfektionsmittel in der Zahnmedizin Bedeutung. Menthon
kommt zu etwa 20 % im Pfefferminzl [Oleum Menthae piperitae] vor, Piperiton neben Piperitol in
zahlreichen Eukalyptuslen vor, und (+)-Pulegon ist z.B. Hauptbestandteil des Poleils (von Mentha
pulegium). Carvon ist Hauptkomponente von Kmmell [Oleum Carvi] und dem l von Dill [Anethum
graveolens]. Whrend (R)(-)-Carvon jedoch Minzaroma besitzt, ist das (S)(+)-Carvon die Aromaleitsubstanz
des Kmmels. Cuminaldehyd ist Bestandteil des Cuminls aus dem Rmischen Kmmel, sein Geruch ist
krautig-schweiartig und erinnert an konzentriertes Curry-Aroma.

Menthol [2-Isopropenyl-5-methylcyclohexanol] kommt in freier Form und als Acetat als Hauptkomponente im
Pfefferminzl (aus Mentha piperita) vor. Es besitzt drei Chiralittszentren, und es existieren acht optisch-aktive
Isomere (= 4 Enantiomerenpaare), die Menthol, Neomenthol, Isomenthol und Neoisomenthol heien. Eine
starke geruchliche Diskriminierung wurde unter allen vier diastereomeren Mentholen gefunden, auch die
enantiomeren

Menthole

riechen

unterschiedlich.

Whrend

natrliches

(-)-(1R,3R,4S)-Menthol

den

charakteristischen Pfefferminz-Geschmack und -Geruch mit erfrischendem Khleffekt besitzt, wird das (+)Enantiomer als staubig, krautig und weniger minzig empfunden.

115

5. Terpene

H
H

CH3

e
e
3

*
H

OH

Menthol aus Pfefferminzl


[Mentha piperita]

(CH3)2CH

OH

*
CH(CH3)2
H3C

OH

CH(CH3)2

CH(CH3)2

CH3

OH

()-Menthol

CH(CH3)2

OH

H3C

()-Neomenthol

CH3

()-Isomenthol

OH

()-Neoisomenthol

(-)-Menthol besitzt Bedeutung fr die Herstellung von Zahnpasten, Mundwasser, Kaugummi, Zigaretten,
Kosmetika und pharmazeutische Prparate, der Weltverbrauch wurde fr 1988 auf 5.600 t geschtzt. Als
billiger optisch-aktiver Alkohol dient es fr Racematspaltungen. Eine weitere Bedeutung gewinnt Menthol als
Hilfsreagenz bei asymmetrischen Synthesen. So entsteht bei der asymmetrischen Aldolreaktion von (-)Menthylacetat mit Acetophenon und anschlieender Hydrolyse die -Hydroxysure bevorzugt in der (S)Konfiguration.
O

O
Et2NMgBr

MgBr
C6H5COCH3

HO

(-)-Menthylacetat

COOH
O
H

OMgBr

C6H5

O
KOH

C6H5

(S)-Form 51 %

MgBr
O

OH
COOH

Hauptprodukt
(R)-Form 2 %

Eine einfache Vollsynthese von ()-Menthol geht von m-Kresol aus. Dessen FRIEDEL -CRAFTS Alkylierung
fhrt zu Thymol, das katalytisch zu den vier Diastereomeren von Menthol hydriert wird. Das ()-Menthol kann
durch Destillation abgetrennt werden, die Trennung der beiden optischen Antipoden gelingt durch Ausfllen
durch Animpfen mit (-)-Menthylbenzoat.

H2
OH

OH

OH

m-Kresol
Thymol

Menthol

Zur Synthese von racemischem Menthol kann -Methyl-'-isopropylpimelinsurediester alkoxidkatalysiert


cyclisiert, der entstandene -Ketoester 1 verseift und zu Menthon decarboxyliert und das Keton reduziert
werden.

116

COOR

5. Terpene

COOR
RO-

COOR
O

-Methyl-'-isopropylpimelinsurediester

OH

()-Menthol

Menthon

Eine heute noch angewandte technische Synthese von (-)-Menthol geht von -Phellandren aus [G. OHLOFF].
Auerdem kann (-)-Menthol aus (+)-Citronellal durch sauer katalysierte Cyclisierung zum (-)-Isopulegol und
anschlieende Hydrierung erhalten werden.

H+
CHO
OH

(+)-Citronellol

(-)-Isopulegol

OH

(+)-Neoisopulegol

OH

OH

(+)-Isoisopulegol

OH

(+)-Neoisoisopulegol

(-)-Menthol

Pd / H2

Mit dem chiralen (S)-Rhodium-(I)-Bisdiphenylphosphinobinaphthyl-Komplex BINAP gelang R. NOYORI die


enantioselektive Isomerisierung des Allylamins 2 zum (R)-Enamin 3, dem Schlsselschritt zur stereoselektiven
Darstellung von (-)-Menthol aus Myrcen.
Ph2
P
(S)

Rh Cl

P
Ph2

(C2H5)2NH
NEt2

Farnesen

NEt2

H3O+

(R)-3
H2

ZnBr2
CHO
OH

OH

Isopulegol

(-)-Menthol

Citronellal

Eine besonders geruchsintensive Substanz aus der p-Menthan reihe ist (R)-1-p-Menthen-8-thiol, das als
Aromatrger des Grapefruitsafts mit 0.02 ppb einen der niedrigsten Geruchsschwellenwerte besitzt, der einer
Konzentration von 2 g in 100.000 t Wasser entspricht. Diastereomere 8-Mercapto-p-menthan-3-one werden im
l von Buchu-Blttern gefunden und sind wichtige Ingredienzien zur Imitation von Blaubeer-Aroma. Ascaridol
ist ein natrliches Terpen-Peroxid und kommt als Hauptbestandteil in dem als Wurmmittel verwendeten
amerikanischen Wurmsamenl [Chenopodiuml aus Chenopodium ambrosoides] vor. Es lt sich durch [4+2]Cycloaddition von Singulett-Sauerstoff aus -Terpinen gewinnen und geht durch Hydrierung in 1.8-Terpin
ber. Terpin, das auch durch Hydratisierung von -Pinen ber -Terpineol entsteht, spaltet unter
Sureeinwirkung Wasser ab unter Bildung des cyclischen Ethers 1.8-Cineol [Eukalyptol], der die
organoleptische Komponente des Eukalyptusls darstellt. Eukalyptol ist auerdem eine Sekretkomponente des

117

5. Terpene

rove beetles Stenus comma, wo es wahrscheinlich als Antisepticum fungiert. Seltener als das 1,8-Isomere wird
1,4-Cineol in Pflanzenlen gefunden.
OH
O

O
SH

SH

OH

1-p-Menthen- 8-Mercapto-p- Ascaridol


-8-thiol
-menthan-3-on

1,8-Terpin

1,8-Cineol
Eukalyptol

1,4-Cineol

Blockiert man in Neral die Carbonylfunktion durch Bildung der SCHIFF'schen Base 4, so cyclisiert es nicht wie
unter sauren Bedingungen blich zu p-Cymol, sondern es resultiert ein Gemisch aus -Cyclocitral und Cyclocitral. Aus -Cyclocitral entsteht durch Dehydrierung mit Selendioxid Safranal, das auch bei der
Hydrolyse von Pikrocrocin, dem Bitterstoff des Safrans, erhalten wird.

H+

H2O

+
N

- C6H5NH3+

-Cyclocitral

5
CHO

CHO

CHO

-Cyclocitral

CHO

H+

SeO2

Glucose-O

Pikrocrocin

Safranal

Die Wichtigkeit cyclischer Monoterpen-Ether wurde erst nach der Entdeckung des Rosenoxids und der
Strukturaufklrung der Linolooloxide erkannt. Diastereomere Rosenoxide wurden zuerst im Rosenl und
Geraniuml, und spter auch im Thoraxdrsen-Sekret des Cerambyciden-Kfers Aromia moschata [Coleoptera,
Cerambycidae] entdeckt. Das kostbare Produkt, als Basisstoff fr nahezu jedes Parfm zum Preis von 17.000 43.000 DM/kg erhltlich, lt sich "solarchemisch" durch Photooxygenierung mit Singulettsauerstoff unter
Sonnenlicht aus billigem Citronellal (ca. 300 DM/kg) herstellen. Linalooloxide kommen in pyranoider und
furanoider Form vor allem im Shiul, in verschiedenen Citruslen und im Aroma von Tee, Aprikosen, Ananas
und Weintrauben vor. Monoterpenoide Furanderivate kommen in begrenzter Zahl in Aromapflanzen vor.
Menthofuran ist in len aus der Pfefferminze zu finden, Perillen wurde aus dem etherischen l der Bltter von
Perilla citriodora als auch in der Ameise Lasius fuliginosus gefunden. Rosenfuran wurde das erste Mal aus
Rosenl isoliert, das monoterpenoide Thiophenderivat spielt im Aroma des Hopfens eine Rolle.
HO

O
S

Linalooloxide

Hopfen-Aroma

Perillen

Rosenoxid
HO

Menthofuran

Rosenfuran

118

5. Terpene

Monoterpen-Cyclopropancarbonsuren sind die Surekomponenten der Pyrethrine, natrlich vorkommender


Insektizide, die aus der in Afrika kommerziell angebauten Chrysanthemum cinerariaefolium gewonnen werden.
Die Pyrethrine sind schnell wirkende Kontaktgifte fr Insekten, die speziell auf Warmbltler wenig toxisch
wirken. Die natrlichen Pyrethrine sind Ester der (+)-trans-Chrysanthemumsure mit den Alkoholen (+)Pyrethrolon [Pyrethrin I] oder (+)-Cinerolon [Cinerin I] bzw. (+)-trans-Pyrethrinsure mit (+)-Pyrethrolon
[Pyrethrin II] oder (+)-Cinerolon [Cinerin II], wie 1924 von STAUDINGER und RUZICKA nachgewiesen wurde.
CH3

HO
H3C

CH3

H
H3C
H

R
COOH

O
R

O
H

Pyrethrin I

Chrysanthemumsure, R = CH3

Pyrethrolon, R = -CH=CH2

Pyrethrinsure, R = COOCH3

Cinerolon, R = CH3

Iridodial wird als Wehrsekret in der Ameisengattung Iridomyrmex produziert und mit Plagodial und
Chrysomelidial als Wehrsekret in Larven von Blattkfern [Chrysomelidae] gefunden.

CHO
CHO

CHO

Irodial
OH

CHO

Plagodial

CHO

Chrysomelidial

Unter den Monoterpenlactonen findet man ebenso Derivate der Iridan-Reihe. Die Konzentration von
Nepetalacton, das auch als Pheromon in Blattlausarten (7.2.6) gefunden wird, betrgt bis zu 78 % im amerikanischen Katzenminze-l aus Nepeta cataria, whrend das Epinepetalacton der Hauptbestandteil (70 %) des
etherischen ls aus Nepeta mussini ist.
H
O

H
O

H
O

Nepetalacton

Epinepetalacton

5.2.4 Bicyclische Monoterpene

Grundkrper der bicyclischen Monoterpene sind die Kohlenwasserstoffe Thujan, Caran, Pinan, Camphan,
Isobornylan, Isocamphan und Fenchan.

Thujan

Caran Pinan

Camphan

Isobornylan

Isocamphan

Fenchan

Aus der Thujangruppe kommen -Thujen und Sabinen in len vor, Thujon [3-Thujanon, 1-Isopropyl-4-methylbicyclo[0.1.3]hexan -3-on] findet sich im Salbeil und in Wermutlen (aus Artemisia absinthium) und wirkt als
Nervengift. Thujon sowie chronischer Mibrauch des aus der Wermutpflanze hergestellten Likrs oder Brannt-

119

5. Terpene

weins [Absinth] kann epileptische Krmpfe hervorrufen und zu psychischen Schden und Verfall
[Absinthismus] fhren. Todesflle bei der frheren Verwendung von Wermutkraut als Wurmmittel sind
bekannt. 3-Caren [Caren-3] kommt in verschiedenen Terpentinlen in groer Menge vor. Die bedeutendste
natrliche Quelle fr monoterpenoide Rohstoffe stellt Kiefernharz dar, dessen Jahresweltproduktion auf 1.5
Mio t geschtzt und das zu Kolophonium und Terpentinl fraktioniert wird. Die Hauptinhaltsstoffe von
Terpentinl aus Coniferen verschiedenster Provenienz sind (+)- und (-)--Pinen bzw. (-)--Pinen. (+)--Pinen
wird z.B. aus griechischem, (-)--Pinen aus spanischem Terpentinl isoliert. -Pinen dient zur Herstellung von
1,8-Cineol und Terpinylacetat und als Ausgangsmaterial bei der technischen Kampfersynthese. Nach neueren
Verfahren lt sich -Pinen technisch zu -Pinen isomerisieren. Die funktionellen Derivate der Pinene sind im
wesentlichen Verbenol, Verbenon, Pinocarveol, Myrtenol und Myrtenal.
O

-Thujen

Sabinen

3-Caren

Thujon

CH2OH

-Pinen

-Pinen

Camphen

CHO

OH

O
OH

OH

Verbenol

Verbenon

Pinocarveol

Myrtenol

Myrtenal

Borneol

Kampher

Formel 5-3. Strukturformeln bicyclischer Monoterpene.

Verbenol [2-Pinen-4-ol] kommt in Terpentin vor, die (+)-trans- und die (+)-cis-Form findet man auerdem in
den Aggregationspheromonen von Borkenkfern (7.2.2). Zusammen mit Verbenon kommt es u.a. im l von
Boswellia serrata vor. Pinocarveol wird in der linksdrehenden Form im l von Eucalyptus globulus gefunden.
Borneol und Bornylacetat sind sehr verbreitet, (+)-Borneol kann aus Campherl, (-)-Borneol aus Pinaceenl
gewonnen werden. Borneol und Isoborneol sind exo/endo-Isomere und stellen Zwischenprodukte der
technischen Kampfersynthese (Formel 3-4) dar, beide lassen sich zu Camphen dehydratisieren.

(+)-(1R,4R)-Kampfer [Campher] wurde frher als Japankampfer aus dem Holzl des ostasiatischen Kampferbaums Cinnamomum camphora gewonnen, (-)-Kampfer [Matricariakampfer] kommt im Mutterkraut- und im
Kamillenl [aus Matricaria chamomilla] vor. Das Hauptanwendungsgebiet von Kampfer liegt in der Zelluloidherstellung und Verwendung als Weichmacher fr Zelluloseester, frher wurde er als Analeptikum (Kreislaufanregungsmittel) und durchblutungsfrderndes Mittel fr Einreibungen verwendet. Da die natrlichen
Ressourcen fr Kampfer nicht ausreichen, wird er technisch gewonnen. Die entscheidenden Schritte bei der
technischen Kampfersynthese sind drei WAGNER-MEERWEIN-Umlagerungen (Formel 3-4), d.s. Umlagerungen
trigonaler Carbeniumionen in Form von Alkylwanderungen, wobei der wandernde Alkylrest Teil eines Ringes
ist.

120

CH3 CH3

H+

5. Terpene

W AGNERMEERWEIN-

Cl -

OH-

CH 3
Umlagerung
20 C

0 C, HCl

-Pinen

- Cl -

Cl

Bornylchlorid

W AGNERMEERWEIN-

- H+

W AGNERMEERWEIN-

H+
HOAc

Umlagerung

Umlagerung

Camphen

OH

O-COCH 3

CH3COO

H 2O

OH

O2

H
- CH3COOH

Isoborneol

Isobornylacetat

Kampher

Formel 5-4. Technische Synthese von racemischem Kampfer.

a-Pinen wird mit trockenem Chlorwasserstoff behandelt, wobei das entstehende Carbeniumion durch WAGNERMEERWEIN-Umlagerung in ein Carbokation bergeht, aus dem das stabile (+)-Bornylchlorid entsteht. Durch
basenkatalysierte Dehydrohalogenierung und eine weitere Umlagerungsreaktionen entsteht der racemische
Kohlenwasserstoff rac-Camphen. Addition von Essigsure gibt rac-Isobornylacetat, dessen Hydrolyse racIsoborneol ergibt, das sich zu racemischem Kampfer oxidieren lt.

Die Fenchene sind relativ selten in etherischen len nachgewiesen; sie entstehen vor allem durch Dehydratisierung der Fenchole. Der Hauptvertreter der Fenchangruppe ist Fenchon, das u.a. im Fenchel-, Thuja- und
Kmmell vorkommt. Dessen Reduktion mit Natrium und Alkohol ergibt -Fenchol, das auch im Wurzell von
Pinus palestris vorkommt. Eine ungewhnliche Bicyclo[3.2.0]heptanstruktur besitzen (-)-Filifolen aus
Artemisia filifolia und das Enantiomere, das in der australischen Pflanze Zieria Smithii gefunden wurde.
H
O

-Fenchen

-Fenchen

-Fenchen

Fenchon

OH

-Fenchol

(-)-Filifolen

5.2.5 Tricyclische Monoterpene

Das einzige in Nadelholz-len vorkommende tricyclische Monoterpen ist das Tricyclen, eine weie, kristalline
Substanz vom Schmp. 68 C. Es wird vor allem in Terpentinlen gefunden und begleitet fast immer das
Camphen des Handels.

121

5. Terpene

Tricyclen

.3 Sesquiterpene
Die Sesquiterpene bestehen aus mehr als 2.000 natrlich vorkommenden Reprsentanten und stellen die grte
Gruppe der isoprenoiden Naturstoffe. Mehr als 100 verschiedene Kohlenstoffgerste sind bekannt, und obwohl
etwa 500 Sesquiterpene in Gerchen und Aromen gefunden werden, besitzen nur etwa 20 Bedeutung als Riechund Aromastoffe.

5.3.1 Acyclische Sesquiterpene

Die C15-Sesquiterpene bestehen aus drei Isopreneinheiten und entstehen durch eine weitere Addition von
aktivem Isopren IPP an Geranylpyrophosphat GPP. Dabei entstehen (2Z,6E)-2,6- und (2E,6E)-2,6Farnesylpyrophosphat FPP als Vorstufen, aus denen u.a. die Sesquiterpenalkohole Farnesol und Nerolidol
sowie die isomeren Farnesene entstehen.
O

PP
O

PP

PP

+
Geranylpyrophosphat

IPP

Farnesylpyrophosphat FPP

Das nach Maiglckchen riechende Farnesol ist weitverbreitet in Bltenaromen sowie im Moschuskrnerl,
trgt zum "Bouquet" von Champagner bei und besitzt Juvenilhormon-Aktivitt (vgl. Kap. 8). Am hufigsten
tritt das trans-trans-Isomer auf. Bei den Bakteriochlorophyllen c, d und e bildet Farnesol anstelle von Phytol
die typische Seitenkette. Sowohl (+)- als auch (-)-Nerolidol kann aus verschiedenen etherischen len isoliert
werden. Das synthetische Gemisch der ()-cis- und ()-trans-Isomeren besitzt einen milden blumigen Geruch
und wird als Zwischenprodukt fr die von Vitamin E-Synthese (3.10.2) und Vitamin K1-Synthese (3.10.3)
verwendet. Das C11-Homoterpen (6E)-2,6-Dimethyl-2,6,8-nonatrien wird bei Verletzung von Tomatenpflanzen
durch Fragmentierung aus Nerolidol biosynthetisiert und wirkt als Lockstoff fr Raubmilben.

Whrend Farnesol, Nerolidol und der entsprechende Aldehyd Farnesal bereits seit langer Zeit als natrliche
Aromasubstanzen bekannt waren, ist die Bedeutung der Farnesene erst in neuerer Zeit erkannt worden. Farnesen, erstmals im Hopfenl gefunden, ist inzwischen aus einer Vielzahl von Aromen isoliert worden. Die
stereoisomeren (E,E)- und (Z,E)--Farnesene sind stndige Begleiter von Agrumenlen, scheinen eine wichtige
Rolle als Aromakomponenten in pfeln zu spielen und sind Attraktivstoffe fr Larven des Apfelwicklers
[Laspeyresia pommonella, Lepidoptera]. (E)--Farnesen wurde in Sekreten einiger Blattlausarten identifiziert
(7.2.6) und dient den Insekten als Alarmpheromon. Die den Farnesenen entsprechenden Sinensale kommen in
allen Citruslen vor und besitzen wegen ihrer enormen Orangengeruchsstrke einen hohen Aromawert.

122

(E)--Farnesen

5. Terpene

(Z)--Farnesen

(E)--Farnesen

O=HC

O=HC

O=H
C

(E,E,E)--Sinensal

-Sinensal

(E,E,Z)--Sinensal

5.3.2 Monocyclische Sesquiterpene

Aus Farnesylpyrophosphat entstehen durch Pyrophosphatabspaltung nicht-klassische Carbeniumionen, die


durch Cyclisierung zu monocyclischen Carbokationen mit 6-gliedriger Bisabolan-, 10-gliedriger Germacranund 11-gliedriger Humulanstruktur reagieren. Hydrid- und Methylverschiebungen, Cyclisierungen, WAGNERMEERWEIN-Umlagerungen und anschlieende Protoneliminierung oder Hydroxyladdition bilden die
verschiedenen Sesquiterpenkohlenwasserstoffe oder -alkohole.

+
+

Zu den monocyclischen Sechsring-Sesquiterpenen gehrt z.B. -Bisabolen, ein in Pflanzen weit verbreiteter
Sesquiterpenkohlenwasserstoff, der u.a. im Bergamottl und in Myrrhe, dem Gummiharz von CommophoraArten, enthalten ist. (-)--Bisabolol ist mit bis 20 % im Kamillenl enthalten und trgt zur antiphlogistischen
und spasmolytischen Wirkung der Pflanze bei, die (+)-Form kommt im Knospenl der Balsampappel vor. Die
Bisabolene gehren zusammen mit den bicyclischen Cadinen und Caryophyllenen zu den hufigsten
Sesquiterpen-Kohlenwasserstoffen.(-)-Zingiberen, (-)-Sesquiphellandren, (+)-ar-Curcumen und (-)--Bisabolen
machen zusammen 50 - 70 % von Ingwerl (aus Zingiber officinale) aus. Zingiberen wird zusammen mit
Caryophyllen und -Cadinen von Blatthaaren der Kartoffelpflanzen bei Verletzung sekretiert und wirkt
besonders toxisch auf den Kartoffelkfer (LD 7.2 g/Kfer).
OH

-Bisabolen

-Bisabolen

-Bisabolol

Zingiberen

Sesquiphellandren

ar-Curcumen

ar-Curcumen [-Curcumen] und -Curcumen wurde in den Wurzeln des Ingwergewchses Curcuma aromatica
nachgewiesen, den gleichen Strukturtyp besitzt das Lanceol. Das Eudalingerst enthalten die Elemene
vorgebildet; -Elemen kommt im Calmusl vor, -Elemen und Elemol z.B. im Zdravetzl (aus Geranium
macrorrhizum).

123

5. Terpene

OH
CH2OH

-Curcumen

-Elemen

Lanceol

-Elemen

Elemol

Die 10-gliedrigen Makrocyclen leiten sich vom Germacran ab. Das 11-gliedrige Humulen [-Caryophyllen]
kommt u.a. im Hopfenl (aus Humulus lupulus) vor und begleitet stets das bicyclische -Caryophyllen (3.3.3).
Hauptbestandteil des ls des wilden Ingwers ist das Zerumbon.
O

-Humulen

Germacran

Zerumbon

(S)(+)-Abscisinsure, [(S)-5-(1-Hydroxy-2,6,6-trimethyl-4-oxo-2-cyclo hexenyl)-3-methyl-2,4-pentadiensure],


ist ein aus Blten, Knospen, Blttern, Samen und Frchten vieler Pflanzen isoliertes monocyclisches
Sesquiterpen

mit

Jonon-Struktur

und

Phytohormon-Wirkung.

Sie

bewirkt

als

Antagonist

der

Pflanzenwuchsstoffe Blattabwurf, Blhhemmung und Fruchtabfall. Xanthoxin, strukturell verwandt mit


Abscisinsure, entsteht oxidativ aus Xanthophyllen (3.

) und ist wie diese an der Einleitung der Winterruhe

von Pflanzen [Seneszenz] beteiligt.

OH

COOH

Abscisinsure

CHO
HO

Xanthoxin

5.3.3 Bicyclische Sesquiterpene

Zu den bicyclischen Sesquiterpenen gehren u.a. das wohl hufigste C15H24-Sesquiterpen Caryophyllen, die
hufig vorkommenden Cadinene, die Sesquiterpene vom Eudesman- und Eremophilantyp, sowie die
verschiedenen Verbindungen mit Azulenstruktur. (-)-Caryophyllen [Caryophyllen] kommt im Nelken- und
Hopfenl vor und ist in Aromen weitverbreitet, seine Riechschwelle betrgt in wriger Lsung 64 ppb.
Caryophyllenoxid, das erstmals im l aus Eugenia caryophyllata entdeckt wurde und mit etwa 20 % im
etherischen l indischer Alpinia-Arten vertreten ist, begleitet oft den Kohlenwasserstoff und besitzt eine
holzige Geruchsnote. Gemeinsam mit den Betulenolen kommen sie in Birkenknospenlen vor.
H

H
H
CH2OH
O
H

(-)-Caryophyllen

Caryophyllenoxid

-Betulenol

OH

-Betulenol

124

5. Terpene

Die Cadinene und Cadinole unterscheiden sich untereinander durch die Lage der Doppelbindungen, die
Konformation der Ringverknpfungsstellen und der OH-Gruppen. Die Cadinene sind die bekanntesten und am
weitesten verbreiteten Sesquiterpene und wurden bereits 1840 aus Cubebenl isoliert. Hauptvertreter ist das Cadinen, als Cadinole seien hier -Cadinol, -Cadinol, T-Muurolol und T-Cadinol genannt. Braunalgen der
Gattung Dictyopteris enthalten in ihrem etherischen l -Cadinen und -Cadinol, als weitere Vertreter dieser
Gruppe sind bekannt das Khusol aus Vetiverl und das aromatische Calamenen. Ein dimeres Sesquiterpen vom
Cadinan-Typ ist das Gossypol aus Baumwollsaatl. Es hemmt Stoffwechselenzyme der Spermien und wirkt
daher fertilittshemmend.
OH
H

OH

-Cadinen

-Cadinen

OH

-Cadinol

-Cadinol
OHC

OH

OH

T-Muurolol
OH

CHO

H
HO

OH

HO

OH

H
CH2OH

T-Cadinol

Khusol

Calamenen

Gossypol

-Selinen ist eine Komponente des Selleriels und fr den charakteristischen Geruch des Selleries
verantwortlich. Wichtige Alkohole dieser Reihe sind die Eudesmole, von denen - und -Eudesmol in
Eukalyptuslen vorkommen. Rishitin, ebenso vom Eudesmantyp, wurde aus der Kartoffel [Solanum tuberosum]
isoliert und wirkt als pflanzlicher Abwehrstoff [Phytoalexine, vgl.

]. Chrysanthemol ist ein Metabolit aus

Chrysanthemum indicum.
HO

HO
OH

-Selinen

-Eudesmol

OH

OH

-Eudesmol

Rishitin

Chrysanthemol

Die Sesquiterpene vom Eremophilantyp gehorchen nicht der Isoprenregel (3.1). Der Kohlenwasserstoff
Eremophilen wurde in Baldrianl gefunden, Nootkaten im Kernholz der Scheinzypresse Chamaecyparis nootkatensis. Das (+)-Nootkaton, das aus Grapefruitschalen isoliert werden kann, leistet einen wichtigen Beitrag
zum spezifischen Aroma vieler Citrusarten. Es ist fr das typische Grapefruitaroma verantwortlich und noch
mit 1 ppb in Wasser detektierbar. Eng verwandt ist das aus Orangen isolierte Valencen, das wie Nootkaton als
Aromastoff in Erfrischungsgetrnken verwendet wird, und dessen Oxidation zu Nootkaton fhrt. (+)--Vetivon
kommt im Vetiverl vor und besitzt eine holzige, blumige Geruchsnote. (-)-Valeranon ist im Valerianl
vorhanden, besitzt ebenso ein nicht-isoprenoides Kohlenstoffskelett und wird als geruchlos beschrieben.

125

5. Terpene

Nootkaten

Eremophilen

(+)-Nootkaton

(+)-Valencen

(-)-Valeranon

(+)--Vetivon

Drimenol ist ein Driman-Derivat aus dem Holzl von Drimys Winteri. Driman-Dialdehyde sind Warbuganal
und Polygodial [Tadeonal] aus ostafrikanischen Bumen der Gattung Warburgia [Cannellaceae], letzteres
kommt auerdem in Polygonum hydropiper und in Nacktkiemern (Schnecken) vor. Die beiden Aldehyde
wirken als Insektenfra-Hemmstoffe und natrliche Pestizide.
HO

CH2OH

CHO
CHO
CHO

CHO

Drimenol

Walburganal

Polygodial

Azulene sind nichtbenzoide Aromaten und spielen als entzndungshemmende Substanzen medizinisch ein
gewisse Rolle. In den Pflanzen sind meist Vorstufen der Azulene [Proazulene] vorhanden, die Azulene selbst
entstehen oft erst bei der Gewinnung der etherischen le z.B. durch Destillation. Guajol ist Hauptbestandteil
des Guajakholzls und lt sich mit Schwefel zum herrlich blau gefrbten Guajazulen dehydrieren. Dieses
kommt im Geraniuml vor und wird fr pharmazeutische Zwecke synthetisch hergestellt. Chamazulen bildet
sich in der Kamille [Matricaria chamomilla] aus Matrizin (5.3.6) durch Decarboxylierung. Das violette
Vetivazulen findet man im Vetiverl. Der charakteristische Geruch von Karottensamen [Dacus carota], der an
den der Wurzeln erinnert, wurde der Gegenwart von Carotol (25 - 65 %) zugeschrieben. Velleral ist ein
hautreizender, mutagener Sesquiterpen-Metabolit aus Pilzen der Gattung Lactarius (Milchlinge) und anderer
Russulaceae (Tublinge) und wirkt auf Insekten als Frahemmstoff.
OCH3
OCH3
OH
OH

Guajol

Guajazulen

Chamazulen

Vetivazulen

Carotol

Velleral

Zwei neue Azulenoid-Kohlenwasserstoffe 7 und 8 wurden in Helychrisum acuminatum bzw. Lactarius


sanguifluus entdeckt, dimere Guaianolide wie Artenolid und Artamaloid wurden aus Artemisia absinthium
[Wermuth] bzw. A. anomala isoliert.
OH

OH
O

HO

O
OH

HO
O
O
O

OAc
O

Artamaloid

Artenolid
O

126

Die

Geruchstrger

des

ostindischen

5. Terpene

Sandelholzls

sind

die

Santalole,

neben

denen

verwandte

Kohlenwasserstoffe, Alkohole, Aldehyde und Suren enthalten sind. -Santalol und -Santalen besitzen
Bicyclo[2.2.1]heptanstruktur, whrend die -Derivate tricyclischer Natur sind.

CH2OH

-Santalol

-Santalen

Elegant lt sich (-)--Santalen durch asymmetrische DIELS-ALDER-Synthese des Allenesters 18 mit


Cyclopentadien [endo:exo = 98:2 d.e.], selektive Reduktion zu 20, Oxidation und WOLFF-KISHNER-Reduktion
darstellen.

1. H2, selektive Reduktion

2. Alkylierung

H
O
O

O
3. LiAlH4

18

19

1. PCC
CH2OH

20

2. W OLFF-KISHNERReduktion

(-)--Santalen

trans--Bergamoten ist mengenmig das bedeutendste Sesquiterpen im Bergamottl aus Citrus bergamia. Im
Holzl der Himalaya-Ceder kommen Himalachol und die Himalachene vor, Widdrol und Cuparen in
Kernholzextrakten von Widdringtonia-Arten.
OH

OH

trans--Bergamoten

Widdrol

Himachalol

Cuparen

Spirostruktur besitzen Hinesol aus Atractylisl, -Chamigren aus dem Fruchtl von Schizandra chinensis, Vetivon aus Vetiverl und Acoron, das im Kalmusl gefunden wurde.
O
O

OH

Hinesol

-Chamigren

-Vetivon

Acoron

5.3.4 Tricyclische Sesquiterpene

Der u.a. im Cubebenl vorkommende Cubebencampher besitzt ein Cadinangrundgerst, zur Eudesmanreihe
gehrt Maaliol (aus Maalil). Eremophilanderivate sind z.B. -Gurjunen [Calaren] aus Gurjunbalsaml und
Aristolon aus dem Wurzell von Aristolochia debilis.

127

5. Terpene

OH
HO

Cubebencampher

-Gurjunen
[Calaren]

Maaliol

Aristolon

-Gurjunen, Hauptbestandteil des Gurjunbalsamls, sowie das in Eukalyptuslen verbreitete Aromadendren


bilden bei der Dehydrierung Guajazulen. Unter den tricyclischen Aromadendrolen kommt Viridiflorol im
Piedmont-Pfefferminzl vor und ist fr seine charakteristische Note verantwortlich. Maaliol wurde u.a. in
Wurzeln von Baldrian Valeriana officinalis gefunden.
OH

HO

-Gurjunen

Aromadendren

Viridiflorol

Maaliol

Durch Wasserdampfdestillation von Holzabfllen von Juniperus virginiana aus der Bleistift- und Zigarrenkistenproduktion gewinnt man virginisches Cedernholzl, das ca. 80 % - und -Cedren, ferner Cedrol,
Cedrylacetat u.a. enthlt.
OH

-Cedren

-Cedren

Cedrol

-Santalol ist eine tricyclische Hauptkomponente aus ost indischem Sandelholzl aus Santalum album, (-)-Santalen ist auch ein Spurenstoff in Lavendell.

CH2OH

-Santalol

(-)--Santalen

- und -Bourbonen und das Keton 21 als Metabolit des -Bourbonens wurden als Naturstoffe mit neuem
Kohlenstoffgerst vor etwa 35 Jahren in Geraniuml entdeckt.

-Bourbonen

-Bourbonen

Keton 21

(-)-Patchoulialkohol trgt als tricyclischer Sesquiterpenalkohol gemeinsam mit (-)-Norpatchoulenol und den
sensorisch eher unbedeutenden Kohlenwasserstoffen Seychellen und - und -Patchoulen zum PatchoulilAroma (aus Pogostemon patchouli, Labiatae) bei. Das praktisch in unbeschrnkter Menge zugngliche (+)Longifolen (aus indischem Terpentinl von Pinus longifolia) stellt ein ideales Ausgangsmittel zur Herstellung
synthetischer sesquiterpenoider Riechstoffe dar.

128

5. Terpene

OH

OH

OH

-Patchoulen

(-)-Patchouli- Norpatchoulenol Seychellen


alkohol

-Patchoulen (+)-Longifolen

Complicatsure [Dehydrohirsutsure C] ist aus dem hufig auf totem Holz anzutreffenden Striegeligen
Schichtpilz [Stereum hirsutum].
H

COOH
O

Complicatsure
H

5.3.5 Norsesquiterpene

Tetracarbocyclische Struktur besitzt das Norsesquiterpen Nortetrapatchoulol aus Patchoulil. Die Vitispirane
sind eine Klasse C13-norisoprenoider Spiroether, die als Aromakomponenten in Vanille, Honig, Quitte, Weintrauben sowie Grapefruitsaft und Geraniuml nachgewiesen wurden.

OH

Norpatchoulol

Vitispiran

5.3.6 Sesquiterpenlactone

Verbindungen mit ausgeprgten biologischen und oft pharmakologischen Wirksamkeiten findet man vor allem
unter den Sesquiterpenlactonen, eine grere Anzahl von ihnen besitzt sogar Antitumoraktivitt. Die meisten
Sesquiterpenlactone besitzen eine -Methylen--lacton- oder -Methyl--lacton-Substruktur, zahlreiche
Verbindungen dieser Art werden in den Asteraceen gefunden. Diese Methyl(en)butyrolactone wie z.B. das in
Sonnenblumen [Helianthus tuberosus] vorkommende Heliangin wirken als Phytotoxine und als Allergene wie
das

Parthenin

aus

indischem

Parthenium

hysterophorus.

Die

Verbindungen

werden

auf

den

Grundkohlenwasser stofftyp bezogen mit dem Suffix -olid bezeichnet (z.B. Guajanolid, Eudesmanolid,
Pseudoguajanolid). Die meisten Sesquiterpenlactone wie z.B. Matricin, der Vorlufer von Chamazulen (3.3.3),
gehren zur Gruppe der Guajanolide, bei denen die Carboxylgruppe mit der Hydroxygruppe in 6- oder 8Stellung (6- oder 8-olid) verestert ist. 10gliedrige Ringe als Strukturmerkmal besitzen Molephantin und
Molephantinin aus Elephantus mollis. Vom gleichen Typ sind die Germacrolide Eupoformolacton A und B und
Eupatolid aus Eupatorium formosanum, die Hela-Zellen auflsen knnen, und das Helenalin aus Anaphalis
morrisonicola.

129

5. Terpene

10

R1

O
8

O-COCH3
O

12

Guajanolid O

R2

HO

HO

Matrizin

O
Heliangin
(Eudesmanolid)

Eupoformolacton A und B
O

HO
O

A: R1 = H, R2 = OAc
B: R1 = CO H

R
OH

HOCH2

CH2OH

R2 = OAc

HO
O

O
O
O

Parthenin O
Molephantin, R = H O
(Pseudoguajanolid) Molephantinin, R = CH3

Eupatolid

-Santonin wurde bereits 1930 aus Zitwerblten [Artemisia cina] isoliert und aufgrund seiner anthelmintischen
Wirkung frher zur Bekmpfung von Spulwrmern eingesetzt. Picrotoxin ist ein Gemisch zweier -Lactone und
wurde aus den Coccelskrnern, den Frchten der Meerspermaceae-Art Anamirta cocculus, isoliert. Es wirkt
stark zentralerregend und besitzt bei Schlafmittelvergiftungen als Analepticum gewisse therapeutische
Bedeutung. Eine Gruppe von Sesquiterpenen mit einer Spiro-Epoxidgruppierung sind die Trichothecene,
Pilzgifte von verschiedenen auf Getreide wachsenden Schimmelpilzen [Fungi imperfecti u.a. Fusarien].
H

O
H O

O
CO

O
O

R1

R4

R2

OH
O

CH2R3

Picrotoxin

Santonin

R5

Trichothecene

Tutin [Tutu] ist ein giftiges Sesquiterpenlacton aus Coriaria-Arten Neuseelands und Japans, das in Honig
[Gifthonig] gelangen und Vergiftungen verursachen kann. Eine doppelte Lactonstruktur besitzt Vernolepin aus
Veronica hymenolepis mit ausgeprgter Antitumor-Aktivitt.
O

OH
O

O
CO
O

O
H

OH

Tutin

Vernelopin
O

.4 Diterpene

Diterpene werden nur in den hochsiedenden Anteilen etherischer le gefunden, hufiger jedoch in Balsamen,
Extrakten und Harzen. Sie entstehen durch eine weitere Kondensation von aktivem Isopren an
Farnesyldiphosphat unter Bildung von Geranylgeranyldiphosphat, dessen Hydrolyse Geranylgeraniol ergibt.

130

5. Terpene

H2O

PP

CH2OH

Geranylgeraniol

5.4.1 Acyclische Diterpene

Der phylogenetisch sehr alte acyclische Diterpenalkohol Phytol ist verestert im Chlorophyll enthalten [WILLSTTTER].

Auerdem kommt es etherartig gebunden in Lipiden von Archaebakterien vor. Plaunotol ist ein

acyclischer Diterpendialkohol aus Croton sublyratus [Euphorbiaceae], der in der thailndischen Volksmedizin
Verwendung findet. Geranylgeraniol und Eleganonal wurden zusammen mit anderen linearen Diterpenabkmmlingen in der Braunalge Cystoseira balearica gefunden. Crocetin ist als ein Diterpen-Carotinoid (vgl.
3.7.1) die Surekomponente des Digentiobioseesters Crocin [Gardenin], dem Farbstoff des Safran [Crocus
sativus].
CH2OH
CH2OH

CH2OH

Phytol

Plaunotol

O
O
OR

CHO

RO
O

Crocetin, R = H
Crocin [Gardenin], R = Gentiobiose

Eleganonal

Furanoditerpene werden relativ hufig in Compositen gefunden, Microglossinsure aus Microglossa zeylanica
und Thymifodisure aus Baccharis thymifolia sind zwei Beispiele dafr.

HOOC

HOOC

Microglossinsure

HOOC

HOOC

Thymifodisure

5.4.2 Monocyclische Diterpene, Vitamin A

Das zweifellos wichtigste Diterpen, Vitamin A, ist fr Wachstum und Sehfhigkeit (vgl. 5.4.4) von Bedeutung.
Vitamin A1 [Axerophthol, all-trans-Retinol, allgem. Vitamin A genannt] ist ein primrer Alkohol mit 5
konjugierten Doppelbindungen, der 1931 von P. KARRER in kristalliner Form aus Heilbutt-l isoliert und die
Struktur aufgeklrt werden konnte. Vitamin A2 [3,4-Dehydroretinol] ist in Swasserfischen enthalten, besitzt
eine weitere konjugierte Doppelbindung und etwa 1/3 der Vitamin A-Aktivitt. Das konjugierte Doppelbindungssystem ist gegen Suren empfindlich. Unter sauren Bedingungen wird Vitamin A zu biologisch
inaktiven Retro-Verbindungen isomerisiert, berdies entstehen unerwnschte cis-Formen. Die Reaktion von
Vitamin A-Alkohol mit ethanolischer Salzsure fhrt unter Dehydratisierung zu Anhydrovitamin A.

131

5. Terpene

CH2OH

CH2OH

Vitamin A1, all-trans-Retinol

Vitamin A2, 3,4-Dehydroretinoll

CH2OH

Retro-Vitamin A

Anhydrovitamin A

Durch die Doppelbindungen ist Vitamin A leicht oxidierbar, die im Handel erhltlichen Vitamin A-Ester
(Acetat, Palmitat) sind stabiler. Zur Behandlung von Hauterkrankungen (Akne, Psoriasis) dienen vor allem
Vitamin-A-Sure und oral anwendbare synthetische Derivate des Retinols.
Ausgangsverbindung fr die industrielle Vitamin A-Synthese ist das -Ionon, das bei der BASF aus Isobuten
und Aceton hergestellt wird.

NaC

CH2O

OCH3

Kondensation

Ethinylierung

OH

22

Isopentenylaceton
- CO2
O

CAROLLUmlagerung

CH

H+
Cyclisierung

-Ionon
23

Pseudoionon
O

Formel 5-6. Industrielle Synthese von -Ionon.


Aus -Ionon kann nun durch Ethinylierung mit anschlieender partieller Hydrierung der Dreifachbindung oder
durch Grignardreaktion mit vinylmetallorganischen Verbindungen das Vinyl--ionol hergestellt und daraus
nach H. POMMER das quartre Phosphoniumsalz 24 erhalten werden. Behandlung mit Basen und WITTIGReaktion mit 3-Formylcrotylacetat fhrt zu Vitamin A-Acetat (Formel 5-7), die anschlieende Hydrolyse ergibt
Vitamin A-Alkohol. Jhrlich werden weltweit ca. 1.000 Tonnen Vitamin A bzw. Acetat hergestellt.
CH3

HO

CH3

CH3

C
O

HC

CH/ Base

CH H2, / part. Hydrierung

-Ionon

Ethinyl--ionol
H2 +
C PPh3

PPh3.HCl
OH

H2C

CH-Metall

Vinyl--ionol
O

Cl

1. Base
O CCH3

24

2.
O=CH

O-COCH3

Vitamin A-Acetat

Formel 5-7. Technische Darstellung von Vitamin A-Acetat.


Eine andere industriell genutzte Synthese [ISLER] geht ebenso vom -Ionon aus, das mit Chloressigester in
einer DARZENS-Reaktion zum Glycidester 25 umgesetzt wird. Anschlieende Verseifung und Decarboxylierung

132

5. Terpene

fhrt zum ,-ungesttigten Aldehyd 26, der durch Grignard-Synthese ein Diol 27 gibt, das nach partieller
Hydrierung, Acetylierung und Wasserabspaltung unter Allyl umlagerung Vitamin A-Acetat ergibt (Formel 5-8).
CH3

CH3

C
O

-Ionon

COOC2H5O

ClCH2COOEt

1. NaOH

CH=O

2. H , - CO2

DARZENS-

26

25

Reaktion

CH3
CH3
CH2OH 1. Pd / H2 Lindlar

C
BrMg-C

CH

CH2OMgBr

Vitamin A-Acetat

2. Ac2O
OH

27

3. H

Formel 5-8. Vitamin A-Acetat durch Acetylensynthese.

Industrielle Bedeutung fr die Vitamin A-Synthese besitzt auch die HORNER- (WADSWORTH-EMMONS)Olefinierung: Umsetzung von -Ionon mit dem Anion des Diethyl-(ethoxycarbonyl)-methylphosphonats 28 und
Umesterung gibt einen -Jonyliden-essigester, der reduziert wird. Die analogen Umsetzungen wie in Formel 39 und Isomerisierung mit Iod ergeben all-trans-konfiguriertes Vitamin A-Acetat.
O

1. (C2H5O)2P

CH

1. LiAlH4
2. (C6H5)3P.HBr

C
O

-Ionon

Vitamin A-Acetat

COOEt

COOEt

-Ionylidenessigester

2. Umesterung

3. NaOCH3
4.
O=CH

OAc

Formel 5-9. HORNER-Olefinierung und WITTIG-Reaktion zur Vitamin A-Synthese.

Auch grogliedrige Ringe werden unter den monocyclischen Diterpenen gefunden, ein neungliedriger Ring ist
als Strukturteil in der Dilophinsure aus der Braunalge Dilophus guineensis, ein zehngliedriger in Pachytriol
aus der Braunalge Dictyota dichotoma. Cyclisierungsreaktionen der Diterpene knnen bis zu einem 14gliedrigen Ring fhren, wie er z.B. in Cembren A aus Nadelbaumharzen und im Olibanumharz (Weihrauch)
gefunden wird.
HOOC

Pachytriol
HOOC HO

Dilophinsure

OH

Cembren A

5.4.3 Bicyclische und hhercyclische Diterpene

Zu den bicyclischen Diterpenen gehren die Verbindungen mit Labdan- und Clerodanstruktur. Beispiel fr ein
Labdanditerpen ist (-)-Sclareol aus Muskatellersalbei Salvia sclarea, dessen Chromsureoxidation zu Ambrariechstoffen fhrt. Vom gleichen Struktur typ ist das aus den Pflanzen Coelus forskholi isolierte Forskolin.
Manool stammt aus dem Holzextrakt von Dacrydium biforme, Scoparinsure A wurde aus der
paraguayanischen Droge Typycha Kuratu [Scoparia dulcis] gewonnen. Der Ester 28 wurde aus dem Schleim

133

5. Terpene

der marinen Lungenschnecke Trimusculus reticulatus erhalten und dient als Abschreckstoff gegenber
ruberischen Seesternen.
OH

O
OH

OH

CH2OH

CH2OH
O

OH
OH
OH
OAc
H

HOOC

OBz

HO

(-)-Scareol

28
Manool

Forskolin

Scoparinsure A

Die Mehrzahl der cyclischen Diterpene leiten sich vom tricyclischen Abietan und vom tetracyclischen
Giberellan ab, die durch Phosphatabspaltung und Methylgruppenwanderung bzw. WAGNER-MEERWEINUmlagerung und Ringkontraktion aus Geranylgeranylpyrophosphat entstehen.

Abietan

PP

Geranylgeranylpyrophosphat

ent-Gibberellan

Harzsuren wie die Abietinsure und Neoabietinsure besitzen tricyclische Perhydrophenanthrenstruktur und
sind Hauptbestandteile des Coniferenharzes [Colophonium]. Podocarpinsure [Podocarpsure] ist Bestandteil
des Podocarpusharzes aus dem Holz der Harzeibe [Podocarpaceae]. Die Gattung Calceolaria
[Scrophulariaceae]

enthlt

verschiedene

Pflanzen,

die

volksmedizinisch

Bedeutung

haben.

Das

Dehydroabietinal 29 wurde aus C. ascendens isoliert, 18-Oxoferruginol 30 aus dem Blattl der Konifere
Torreya nucifera [Taxadeae], 1-Oxohinokiol 31 findet man unter den Terpenoiden von Calocedrus formosana
[Cupressaceae], und Nimbidiol ist aus der Wurzelrinde des Neembaums Azadirachta indica [Meliaceae].
OH

H
HOOC

Abietinsure

Neoabietinsure

HOOC

Podocarpinsure
[Podocarpsure]

HOOC
OH

OH
OH

29
30
? 31
HOH2C

HO
O=HC

?
H

Nimbidiol

Die Renillafouline A, B und C wurden aus der gemeinen Seefeder Renilla reniformis isoliert und inhibieren die
Festsetzung von Seepocken auf Schiffsrmpfen. Vinigrol ist ein Diterpen aus dem Pilz Virgaria nigra mit
blutdrucksenkender und PAF-antagonistischer Wirkung.

134

5. Terpene

OR2
OH

OR1
OH

Renillafoulin A R1, R2 = Ac
O
B R1 = Ac, R2 = C2H5CO

O
OH
O

HO
H

C R1 = Ac, R2 = C3H7CO

O
H H

Vinigrol

Zur Gibberellangruppe gehren die tetracyclischen Gibberelline, eine Gruppe diterpenoider Phytohormone, die
u.a. die Samenkeimung und Bltenbildung frdern. Das erste wurde bereits 1926 [KUROSAWA] aus Kulturfiltraten des phytophagen Ascomyceten Fusarium moniliforme entdeckt, bisher wurden ber 60 verschiedene
Gibberelline aus Pilzen und hheren Pflanzen isoliert. Die Gibberelline lassen sich je nach Zahl der C-Atome in
C20-Gibberelline [ent-Gibberelline] und C19[ent-20-nor-Gibberelline], denen C-20 fehlt, einteilen. Am
leichtesten zugnglich ist Gibberellin A3 [Gibberellinsure], das kommerziell aus Fermentationsanstzen von F.
moniliforme gewonnen wird und wegen seines Einflusses auf das Lngenwachstum der Pflanzen uerst
interessant ist.
O

OC
HO

Gibberellin A14, GA14

H
HOOC

COOH

OH

HO
H
COOH

Gibberellin A3, GA3


Gibberellinsure

Das tricyclische Taxan-Gerst bildet die Grundstruktur verschiedener ungewhnlicher Diterpene. Taxacine
sind polyhydroxylierte Taxane aus der Eibe Taxus cuspidata und Abbauprodukte der Taxine, giftiger
Eibenalkaloide. Die Taxane, allen voran das Taxol, nehmen derzeit als Anti-Krebsmittel groes Interesse in
Anspruch. Der ergiebigste Zugang erfolgt, trotz bekannter Totalsynthesen, ber die Rinde der pazifischen oder
kalifornischen Eibe. Taxol ist ein Taxan -Diterpen aus der Rinde der pazifischen Eibe T. brevifolia, das als
Cytostatikum in die Zellteilung eingreift. Es zeigt im klinischen Test gute Therapieerfolge gegen bestimmte
Karzinome und maligne Melanome und wurde vor kurzem in den USA zur Chemotherapie zugelassen. Da der
steigende Substanzbedarf nicht mehr mit nordamerikanischen Eiben abgedeckt werden kann, wird nach neuen
Quellen wie z.B. Zellkulturen oder die kultivierbare Europische Eibe [T. baccata] gesucht. Das darin
enthaltene 10-Deacetylbaccatin II lt sich semisynthetisch in Taxol berfhren und knnte damit das Problem
der Taxolgewinnung lsen. Zahlreiche neue Taxoide wurden in verschiedenen Eibenarten gefunden, die sich
nur wenig von Taxol unterscheiden. Ausnahmen jedoch sind u.a. die Taxuspine A und B. Im Gegensatz zu
Taxol bewirken die Taxuspine, die in der japanischen Eibe T. cuspidata gefunden wurden, eine Akkumulation
von Vincistrin (14.

) in Tumorzellen und sehen daher einer mglichen therapeutischen Nutzung entgegen.

Wallifoliol ist ein neuartiges Diterpen aus der Himalaya-Eibe T. wallichania, das ein neuartiges 5/6/6/6/4Ringgerst aufweist.

135

HO

5. Terpene

R1 O

CH3COO

OH

OCOCH3

C6H5
O

O
H

OH

Taxin I

N(CH3)2

N
H

OH

HO
H
CH3COO

OH

Taxacin I R1 = OH
Taxacin II R2 = H

C6H5

O
OAc

O
OH

HO
C6H5COO

Taxol
R1 = COCH3, R2 = C6H5

HO

HO

O
C6H5COO

H
H
O
O
O CCH3

OH

HO

OH

OAc
O

OAc

OH

HO

H
OAc

O
AcO

AcO

O2CC6H5

H
H

HO
C6H5COO

OAc

Taxuspin A, 5/7/6-Gerst

Wallifoliol
5/6/6/6/4-Ringgerst

O
O
O CCH3

Taxuspin B, 6/10/6-Gerst

HO

10-Deacetylbaccatin II

Daphnetoxin ist ein giftiges Diterpenoid aus Seidelbast-Arten, das beim Menschen Kontakt-Dermatitis auslst.
Der entsprechende Cinnamylidenessigsureester ist das Mezerein.
O

C6H5
O H

O
O

O
OH

H
C

H
C

H
C

OH
OH

H
C

O
O
O

Daphnetoxin

O
OH
OH

Mezerein

OH

Cafestol oder die Quassinoide sind pentacyclische, Ginkgolide hexacyclische Diterpene.

5.4.4 Retinal - Sehvorgang

Die Stbchen und Zpfchen der Retina des menschlichen Auges, die fr Dmmerungssehen bzw. Farbsehen
verantwortlich sind, enthalten einen lichtempfindlichen Farbstoff, den roten Sehpurpur oder "orangegelbes"
Rhodopsin. Es ist ein Proteid, dessen prosthetische Gruppe Retinen1, der Vitamin A1 entsprechende Aldehyd
cis-11-Retinal, durch enzymatische Dehydrierung aus Retinol entsteht. Deshalb ist Vitamin A zur Bildung des
Sehpurpurs notwendig. Die Formylgruppe des Retinals ist mit der -Aminogruppe eines Lysins im Protein
Opsin zu einer SCHIFFschen Base verknpft.
11

+ Opsin

12

s-cis
h

HN

11-cis, 12-s-cis-Retinal-Opsin
[s fr single bond]

all-trans-Retinal-Opsin

Opsin

Bei Einwirkung von sichtbarem Licht wandelt sich die cis-11-Doppelbindung des Retinalteils im Protein zur
all-trans-Konfiguration um. Diese von Licht ausgelste Isomerisierung entspricht einer molekularen
Bewegung, bei der all-trans-Form ist die -CH=O - Gruppe 0.7 nm von der ursprnglichen Position entfernt.

136

5. Terpene

Damit verndert sie die Polarisation der Stbchenmembran, bewirkt Nervenimpulse in den Synapsen und lst
den Sehvorgang aus. Nach der Reaktion wird das all-trans-Retinal vom Protein abgelst, zum cis-11-Retinal
rckisomerisiert und nach neuerlicher Bildung der SCHIFFschen Base wieder in den Kreislauf zurckgefhrt
[WALD, HONIG und KARPLUS]. Irreversibel vernderte Retinal-Molekle werden durch Vitamin A ersetzt.
Licht h
HC

NH

roter Sehpurpur
11-cis,12-s-cis-Retinal-Opsin
11-trans-12-s-cis-Prlumi-Rhodopsin
(violett)
thermisch

11-cis,12-s-trans-Lumi-Rhodopsin
(purpurrot)

+ Opsin

thermisch

all-trans-Meta-Rhodopsin
Hydrolyse, - Opsin

Isomerase

11-cis,12-s-cis-Retinal

11-trans-Retinal

Alkohol-Dehydrogenase
NADH + H+

Alkohol-Dehydrogenase

Isomerase

11-cis-Retinol

11-trans-Retinol

Abbildung 5-3. Schema des Sehvorganges.

Die cis-trans-Isomerisierung von Rhodopsin, der essentielle Schritt beim Sehvorgang, ist eine der schnellsten
untersuchten photochemischen Reaktionen und innerhalb von 200 Femtosekunden (200 fs = 2 . 10-13 sek) abgeschlossen. Ergebnisse der Laser-Femtosekunden-Spektroskopie deuten auf einen fast barrierefreien bergang
bei der Bildung des Photoprodukts hin. Die Isomerisierung von all-trans-Retinal im Sonnenlicht fhrt
berwiegend zum 13-cis-Isomeren. Die einzelnen Retinal-Isomeren lassen sich im UV-Spektrum unterscheiden.

Die thermodynamisch stabilste Form des Retinols ist die all-trans-Form, unter den cis-Isomeren sind das 9-cis-,
das 13-cis- und das 9,13-dicis-Isomer am stabilsten.

Einfacher zu isolieren als das Rhodopsin hherer Tiere ist das des Halobacterium halobium, eine
photochemisch aktive "Purpurmembran", die zum Groteil aus Bakteriorhodopsin besteht; als Chromophor
dient all-trans- und 13-cis-Rhodopsin.

Im biologischen System gewhrleistet die Wahl des energiereicheren 11-cis-Retinal-Isomer optimale Ausbeute
bei der Photoisomerisierung. Aus der photochemisch-aktiven Membranfraktion [Purpurmembran] der auf
extremen Salzstandorten (Totes Meer, Ksten Kaliforniens, Sdafrikas und Sdaustraliens, sogar auf

137

5. Terpene

gepkeltem Fisch) lebenden Archaebakterien Halobacterium halobium lt sich das stabilere, aus 13-cisRetinal aufgebaute Bacteriorhodopsin isolieren. Durch Lichteinwirkung kommt es zur Isomerisierung zum alltrans-Rhodopsin, zum Protonentransport durch die Membran und zur Generierung eines elektrischen Potentials,
das zur Energiegewinnung in der Zelle genutzt wird. Die Lipide der Purpurmembran enthalten einen Anteil an
etherartig gebundenem Dihydrophytol (2.2.5).

Die Anpassung an hohe Bestrahlungsstrken der Sonne hat an den extremen Standorten das berleben der
Halobakterien gesichert Mehrere Photorezeptoren arbeiten zusammen, die in ihrem Aufbau dem Sehpurpur des
Menschen bzw. der Tiere verblffend hnlich sind. Bakteriorhodopsin, entdeckt von D. OESTERHELT und W.
STOECKENIUS, bildet Areale, die bis zu 50 % der Membranoberflche bedecken knnen. Nach Absorption eines
Lichtquants durchluft Bakteriorhodopsin unter Absorptionsnderung eine Reihe photochemischer und thermochemischer Zwischenstufen und kehrt ohne weitere Energie-Zufuhr in seinen Ausgangszustand zurck (Abb. 34). Bei Zimmertemperatur und Lichtsttigung wird dieser Photocyclus etwa zweihundertmal pro Sekunde
durchlaufen. Hierin besteht ein wichtiger Unterschied zum Sehpurpur Rhodopsin, das unter Aufwendung von
Stoffwechselenergie (Wirbeltier-Auge) bzw. erst durch Absorption eines weiteren Lichtquants (Insekten-Auge)
in seinen Ausgangszustand zurckgefhrt werden mu.
Bakteriorhodopsin
(570 nm)

Zwischenstufen

H+

(Cytoplasma)

Zwischenstufen

412 nmKomplex

H+

(Auenmedium)

Abbildung 5-3. Photocyclus von Bakteriorhodopsin. Nach Absorption eines Photons wird Bakteriorhodopsin
ber mehrere Zwischenstufen zum deprotonierten 412 nm-Komplex umgewandelt, der ber weitere
Zwischenstufen in den Ausgangszustand zurckfindet.

Cyanopsin ist der Sehfarbstoff der Fische und besteht aus 3,4-Dehydroretinal [3,7-Dimethyl-9t-(2,6,6-trimethylcyclohexa-1,3-dienyl)nona-2E,4E,6E,8E-tetraenal] und Opsin.

.5 Sesterpene

138

5. Terpene

Die Sesterpene sind eine kleine Gruppe von C25-Terpenen, deren erste Vertreter erstmals 1965 aus Insektenwachsen und aus niederen Pilzen isoliert wurden. Cochliobolin B [Zizamin B] und die phytotoxisch wirkenden
Ophioboline A, B, C und F, von den pflanzenpathogenen Pilzen Cochliobolus miyabeanus bzw. Helminthosporium oryzae produziert, leiten sich vom tricyclischen Grundgerst Ophiobolan ab.
H

O=CH

O=CH
OH

Cochliobolin B
[Zizanin B]

Ophiobolan

H
OH

Ophiobolin A

HO

.6 Triterpene

Die Triterpene umfassen mehrere Substanzklassen mit zahlreichen biologisch wichtigen Vertretern. Zu ihnen
gehren neben den im folgenden beschriebenen Verbindungen auch die Steroidhormone (Kap. 6.
Saponine (6.7), Steroidalkaloide (17.

), Steroid-

), D-Vitamine (6.5), Gallensuren (6.6), u.s.w. Das C-Gerst der

Triterpene entsteht im Gegensatz zur regelmigen Kopf-Schwanz-Folge bei den Diterpenen durch Kopf-KopfKondensation aus zwei Moleklen Farnesyldiphosphat und ist daher aus zwei spiegelbildlich symmetrischen
Hlften aufgebaut. Zwischenstufe ist das Prsqualendiphosphat, ein Cyclopropylmethanolderivat, das zum
Hexaenkohlenwasserstoff Squalen fhrt.
PP
H2
C

PP
Kopf-Kopf-Kondensation

H2C

- PPO -

K-K

H2C

Prsqualendiphosphat

PP

Squalen

K-K

Kopf-Kopf-Addition

Squalen wurde ursprnglich aus Leberl von Haifischen [Squalus spp.] isoliert, ist aber auch in Pflanzenlen,
Knollenbltterpilzen und Mutterkorn enthalten und tritt in geringer Konzentration weitverbreitet auf. Besondere
Bedeutung hat es als Biosynthesevorstufe von Steroiden (vgl. 4.2 Cholesterin). Durch Cycloadditionen ber das
Squalenepoxid entstehen Methylsterole wie z.B. Protosterol, die durch Methylverschiebungen von 14- in 13Stellung und 8- in 14-Stellung und gleichzeitige Hydridverschiebungen bei Tieren und Pilzen das Lanosterin
und bei hheren Pflanzen und Algen das Cycloartenol ergeben. Cycloartenol [9,19-Cyclo-24-lanosten-3-ol],
bei dem die C-19-Methylgruppe des Lanosterins einen Dreiring bilden, ist die Vorstufe vieler pflanzlicher
Steroide und wurde aus Wolfsmilchgewchsen [Euphorbiaceae] und als Nebenkomponente des Leinls isoliert.

139

5. Terpene

K-K

2,3-Squalenepoxid

Protosterol
H
HO

Squalen

24

26

20
25

12

17

11

19

27
1

14
15

7 asymmetrische Zentren
27 = 128 Isomere

HO

HO
H

Lanosterin

Cycloartenol

Formel 5-10. Schema der Biosynthese von Triterpenen und Steroiden (K-K Kopf-Kopf -Addition).

Lanosterin [5-Lanosta-8,24-dien-3-ol] kommt zusammen mit Agnosterin [Agnosterol, 5-Lanosta7,9(11),24-trien-3-ol], 24,25-Dihydrolanosterin und 24,25-Dihydroagnosterin im Wollfett der Schafe vor und
wird daraus industriell gewonnen. Das Diensystem des Agnosterins bildet sich leicht durch Luftoxidation des
Lanosterins. Durch Abspaltung der drei C-4- und C-14-Methylgruppen aus Lanosterin entsteht Cholesterin, der
direkte Biosynthese-Precursor der Steroidhormone (vgl. 5.2 Cholesterin).
24

24

24

COOH
25

25

25

11
11
11

HO

HO
H

Agnosterin

HO

24,25-Dihydrolanosterin

24,25-Dihydroagnosterin

Aus Mikroorganismen wurden zahlreiche Carbonsuren isoliert, die das Grundgerst des Lanostans bzw. C-24Methyllanostans aufweisen. Die Carboxylgruppe dieser Suren steht in 21- oder 26-Stellung, die C30-Suren
werden von Basidiomyceten, die C31-Suren von Ascomyceten produziert.

Triterpene treten im Gegensatz zu den anderen Terpenen relativ selten in der Natur auf, vor allem in Extrakten,
Harzen und Balsamen von Pflanzen. Neben den wenigen acyclischen, bicyclischen und tricyclischen Strukturen
und der tetracyclischen Lanosterol-Gruppe sind besonders pentacyclische Triterpene verbreitet, die der Ursan-,
Olean- und Lupangruppe angehren.

Lansinsure ist eine bicyclische seco-Disure, entstanden durch Spaltung der Ringe A und A' des
tetracyclischen Onocerins. (-)-Ambrein, das durch gestrte Squalen-Cyclisierung entsteht, ist als geruchloser
tricyclischer Triterpenalkohol die Hauptkomponente der Ambra, einem pathologischen Stoffwechselprodukt
des Pottwals, das als Wundverschlu bei Verletzung der Darmwand dient. Die spter ausgeschiedenen

140

5. Terpene

Kotsteine sind Luft und Licht ausgesetzt und es entstehen die fr die Ambra-spezifischen Geruchsqualitten
typischen Metaboliten 35, Ambrox, -Ambrinol, Ambraaldehyd und Alkohol 36.
HOOC

OH

Lansinsure

Ambrein

HOOC

CHO

-Ambrinol

CH2OH

OH

35

Ambrox

Ambraaldehyd

36

Eine umfangreiche Gruppe tetracyclischer Triterpene sind die meist als Glykoside vorliegenden Curcubitacine,
Bitterstoffe von Gurken- und Krbisgewchsen [Cucurbitaceae]. Einige von ihnen besitzen cytotoxische
Wirkung und inhibieren das Wachs tum gewisser Krebsformen des Menschen, Cucurbitacin B bewhrte sich in
einigen Fllen bei Brustkrebs. Manche wirken abfhrend und diuretisch, als Insektenlockstoffe sowie als
Antigibberelline. Die Cucurbitacine sind ungesttigte Lanostan-Derivate, die sich durch formale Verschiebung
der 10-stndigen C-19-Methylgruppe nach C-9 von diesen unterscheiden. Charakteristisch ist eine 11-OxoGruppe, eine 5-Doppelbindung, in der Seitenkette liegt ,-ungesttigte Carbonylgruppe vor. Mehr als 25
verschiedene Cucurbitacine sind bis 1975 isoliert worden, Cucurbitacin E [Elaterin] wurde bereits 1831 in
kristalliner Form erhalten.
HO

O
O-COCH3

O
R1

R1

H
H

OH

R4

R2

Cucurbitacine

R2

R3

OH

-O-

OH

-O-

OH

R4

Cucurbitacin

CH2OH
CH3

A
B

CH2OH

R3

Dammarene sind im Pflanzenreich weitverbreitete, oft glykosidisch gebundene tetracyclische Triterpene. Die
wichtigsten Vertreter sind der Kohlenwasserstoff Dammaradien aus Farnen und das Dammarendiol, der
Hauptinhaltsstoff des Dammarharzes, das frher ein Bestandteil der Kleber von Heftpflaster war.
R2

R3
H
H

R1 = H, R2 = H, R3 =
OH

R1 = OH, R2 = H, R3 =
1

Viele Triterpen-Glykoside bilden schumende, seifenartige wrige Lsungen, wirken hmolysierend und
werden zu den Saponinen gerechnet. Diese Triterpen-Saponine kommen vorwiegend in zweikeimblttrigen
Pflanzen [Dikotylen] vor. Wegen ihrer Carboxylgruppen werden einige auch als saure Saponine bezeichnet. Zu

141

5. Terpene

den tetracyclischen Triterpen-Saponinen gehren u.a. die sog. Ginsenoside, Wirkstoffe der aus der chinesischen
und koreanischen Volksmedizin bernommenen Ginsengwurzel [Panax ginseng]. Als Sapogenine, die Aglyka
der Saponine, findet man Protopanaxadiol und Protopanaxatriol.
R3
HO
H

R2

Sapogenine aus Ginsenosiden


aus Ginsengwurzeln

H
HO
H

Protopanaxadiol

R1 = H, R2 = OH, R3 = CH3

Protopanaxtriol

R1 = OH, R2 = CH3, R3 = OH

Durch einen bestimmten Faltungsmechanismus von Squalen kommt es zur vollstndigen Cyclisierung des
Grundkrpers unter Bildung pentacyclischer glykosidischer Triterpen-Saponine, die in zahlreichen Pflanzen
vorkommen. Dazu gehren z.B. -Amyrin mit der Grundstruktur des 5-Ursans, das in vielen Balsamen und im
Milchsaft des Lwenzahns gefunden wird. Vom gleichen Strukturtyp ist die Ursolsure, das Aglykon saurer
Saponine, die in Blttern zahlreicher Pflanzen und in Fruchtschalen vorkommt, ebenso das Bauerenol.

H
H

-Amyrin

HO
H

COOH

HO
H

Bauerenol

Ursolsure

Vom 5-Oleantyp sind -Amyrin [-Amyrenol, -Viscol], das in der Zuckerrbe, in Oliven und im Oleander
vorkommt, die in der Sholzwurzel [Radix Liquiritiae von Glycyrrhiza-Arten] enthaltene Glycyrrhetinsure
sowie die in Guajacum-Arten und in Efeu [Hedera helix] enthaltene Oleanolsure. Zum gleichen Strukturtyp
werden Germanicol und Glutinol gezhlt.
COOH

O
H

H
HO

H
HO

-Amyrin

Glycyrrhetinsure

H
HO

COOH H

HO
H

Oleanolsure

Glutinol

Eine Vielzahl glykosidischer Triterpene mit unterschiedlichen biologischen Aktivitten wird in marinen
Organismen gefunden. Die Holothurine, eine Gruppe hochtoxischer Saponine aus Seegurken [Holothurien],
bestehen aus Holothuringeninen als Aglyka, die das Grund gerst des Holostans besitzen. Charakteristische
Genine sind Holotoxin, Seychellogenin, Holothurinogenin, 22,25-Epoxyholothurinogenin und Bivittosid Cgenin. Die Holothurientoxine wurden ursprnglich als Fisch gifte isoliert, als Saponine besitzen sie

142

5. Terpene

hmolytische Aktivitt. Spter erst wurde ber deren neurotoxische, bakterizide und antimykotische Wirkung
berichtet. In vivo besitzen sie Wirkung gegen Tumorzellen, die besonderes Interesse in der Medizin erregte.
O

HO

OH
H
O
H
HO

Holostan

HO
O

Holotoxin

HO

Bivittosid C-genin
H

HO

R
OH

Seychellogenin R = H
Holothurinogenin R = OH

HO
H

22,25-Epoxyholothurinogenin

HO
H

Viele Prokaryonten enthalten das pentacyclische Triterpen Hopan, allgemein werden pentacyclische Triterpene
bakteriellen Ursprungs als Hopanoide bezeichnet. Ihre Bildung erfolgt wie die des Tetrahymanols nicht ber
Squalenepoxid, sondern durch direkte Cyclisierung von Squalen. Dadurch fehlt diesen nichtpflanzlichen
Triterpenen die 3-Hydroxygruppe. Die ersten Hopanoide wurden in Sedimenten, Mineralien und Erdl entdeckt
und als Geohopanoide bezeichnet. Es handelt sich um Verbindungen mit bis zu 35 C-Atomen und bis zu
hexacyclischer Struktur und sie galten als molekulare Fossilien. Erst spter wurden Stoffe dieser Art als
Biohopanoide in Mikroorganismen und Pflanzen gefunden, z.B. in Bakterien, Blaualgen, Farnen und Flechten.
Im

extrem

thermoacidophilen

Bakterium

Bacillus

wurde

acidocaldarius

Bakteriohopantetrol

[Tetrahydroxybacteriophan] gefunden, das in den Membranender Bakterien offenbar die Funktion der Sterine
bernimmt.
OH
H

OH

OH

H
OH
OH

Hopan

Tetrahymanol

Bakteriohopantetrol
[Tetrahydroxybacteriophan]

Der immergrne Neembaum Azadirachta indica [Meliaceae], der heilige Baum der Hindus in Indien, dient in
der indischen Volksmedizin als bewhrtes Zahnheilmittel. Eine Reihe tetranortriterpenoider Bitterstoffe mit
entzndungshemmender und adstringierender Wirkung wurde aus der Pflanze isoliert.
O
H3COOC

COOCH3

O
O
O

OCH3
O
OC
O

HO
O
O

O
H3COOC

H
OR

OCOCH3

Nimbin

H3COOC

Nimbinin

OH
H3COOC

Salanin

H3COOC

OH
O

Azadirachtin

143

5. Terpene

.7 Tetraterpene, Carotinoide

5.7.1 Aufbau und Struktur

Tetraterpene entstehen wie die Triterpene durch Kopf-Kopf-Addition zweier Diterpeneinheiten. Im


allgemeinen setzt man begrifflich Tetraterpene und Carotinoide gleich, obwohl zu letzteren auch einige
Verbindungen mit 45 - 50 C-Atomen aus nicht photosynthetisierenden Bakterien und Diterpencarotinoide
(3.4.1) gerechnet werden. Bei den Carotinoiden handelt es sich um konjugiert ungesttigte und farbige
Polyensysteme, die formal aus 8 Isopren-Einheiten bestehen und an beiden Enden durch cyclische oder
acyclische Strukturen abgegrenzt werden. Die ersten Carotinoide wurden aus Karotten isoliert
[WACKENRODER, 1831] und spter in die drei Isomeren -, - und -Carotin aufgetrennt [KUHN, LEDERER].
Ihre intensive gelbe bis rote Farbe beruht auf den zahlreichen konjugierten Doppelbindungen in den
Verbindungen. Die Wellenlnge der Absorptionsmaxima hngt von der Zahl dieser Doppelbindungen ab (Carotin: 7 konjugierte Doppelbindungen, max bei 378, 400 und 425 nm; -Carotin: 11 Doppelbindungen, max
bei 425, 456 und 482 nm), cis- und trans-Isomere lassen sich spektroskopisch unterscheiden.

Die Carotinoide werden nur in hheren Pflanzen, wo sie in den Chloroplasten und Chromoplasten vorkommen,
und Mikroorganismen biosynthetisiert. Schlsselverbindung der Biogenese ist das in hheren Pflanzen und
Pilzen aus zwei Geranylgeranyldiphosphat gebildete 15-cis-Phytoen [15-cis,7,8,11,12,7',8',11'12'-Octahydro,'-carotin] mit der zentralen Doppelbindung. Von der Mitte aus werden durch Dehydrierung ber die
Zwischenstufen cis-Phytofluen (5 konjugierte Doppelbindungen), trans-Phytofluen, -Carotin (7 konjugierte
Doppelbindungen) und Neurosporin [7,8-Dihydro-,-carotin] symmetrisch zustzlich Doppelbindungen
eingefhrt. Endpunkt dieser Dehydrierungskaskade ist das tiefrote Lycopin, der rote Farbstoff der Tomate,
Hagebutte, Wassermelone und anderer Frchte. Vom Lycopin leiten sich die Carotine und die Xanthophylle ab.
K-K

15-cis-Phytoen
K-K

Lycopin (,Carotin)
K-K Kopf-Kopf-Addition

Die Carotinoidbiosynthese wurde vor allem bei Mutanten der Schlauchpilze Neurospora, bei Purpurbakterien
Rhodopseudomonas und Grnalgen Chlorella studiert. Man hat auch Lycopersin, das im Gegensatz zum cis-15Phytoen eine zentrale Einfachbindung besitzt, frher als Schlsselverbindung der Biogenese angesehen. Gegen
diese Auffassung sprechen jedoch Befunde, wonach Lycopersin nicht in allen carotinsynthetisierenden Zellen
gefunden wurde.

144

5. Terpene

Im Unterschied zu den Carotinoiden hherer Pflanzen gibt es eine Reihe bakterieller Carotinoide, die meist
lngere Polyenketten als Strukturmerkmal aufweisen und an beiden Moleklenden polare Gruppen tragen.
Diese Verbindungen haben gerade die richtige Lnge, um eine Phospholipid-Doppelschicht zu vernieten und
fungieren mglicherweise als membranstrkende Faktoren der Bakterienmembran, hnlich den Hopanoiden und
Sterinen.
HO
OCH3

36
HO
OH

38
OH

HO
OH

HO

36

5.7.2 Mono- und bicyclische Tetraterpene

Etwa 600 verschiedene Carotinoide sind bekannt, sie gehren zu den hufigst verbreiteten natrlichen
Pigmenten. In den Granula der Chloroplasten der hheren Pflanzen liegen sie in Form von Chromoproteinen
(vgl. 11. Proteine) vor und sind durch bestimmte Lsungsmittelsysteme spezifisch extrahierbar. Die biologische
Funktion der Carotinoide in den Pflanzen beruht vor allem auf ihrer Beteiligung als Begleitpigmente an der
Photosynthese. Carotinoide sind fr die charakteristischen Farben vieler Blten, Bltter, Wurzeln und Frchte
verantwortlich. Man unterteilt sie in die reinen Kohlenwasserstoffe, Carotine, und die sauerstoffhaltigen
Xanthophylle oder Phylloxanthine . Im Tierreich finden sie sich vor allem bei niederen Meerestieren, wie z.B.
Seesternen und Crustaceen. Carotinoide kommen auch in Insekten und Vgeln (z.B. in Flamingos) vor. Die in
anderen tierischen Organismen aufgefundenen Carotinoide enthalten meist nur 4 Isopreneinheiten (Diterpene,
5.4.1).
Gewhnliches Carotin ist ein Isomerengemisch, bis heute sind 6 verschiedene Carotine bekannt, -, -, -, -, und -Carotin. Der Unterschied zwischen diesen Isomeren ergibt sich aus den beiden Enden der Polyenkette.
Die carotinspezifischen Prfixe , , , , und charakterisieren die Endgruppen, entspricht dem Iononende, dem -Iononende, einem Trimethylcyclopentanderivat, und aromatischen Moleklenden
und der Struktur mit den isolierten Enddoppelbindungen des Lycopins. Die Vorsilbe apo bedeutet, da
jenseits des bezeichneten C-Atoms das Kohlenstoffgerst durch Wasserstoffatome ersetzt wird, retro-

145

5. Terpene

Carotinoide werden Verbindungen bezeichnet, deren Polyenkette durch eine exo-cyclische Doppelbindung an
den Cyclohexanring gebunden ist.

(R)--Carotin
[,-Carotin]
-Carotin
[,'-Carotin]

-Carotin
[,-Carotin]

-Carotin
[,-Carotin]

-Carotin

-Carotin enthlt einen - und einen -Iononring als Endstruktur (,-Carotin). -Carotin, der rote Farbstoff
von Mohrrben (ca. 85 % der Carotinoide) und Bltter, aber auch in Bakterien, Pilzen und tierischen
Organismen zu finden, besteht aus zwei -Iononeinheiten. -Carotin [Provitamin A] ist ernhrungs
physiologisch wertvoll, da es im menschlichen Organismus zum essentiellen Vitamin A umgewandelt wird.
Hierzu wird es oxidativ zu Retinal (Sehpigment) gespalten. Synthetisches -Carotin ist ein wichtiger
Lebensmittelfarbstoff und dient als Tierfutterzusatz fr Hhner, wo es fr befriedigende Dotterfrbung (EigelbFarbskala) und Farbe der Hhnchenhaut sorgt.

Xantophylle oder Phylloxanthine sind sauerstoffhaltige Derivate der Carotine und bewirken als gelbe Farbstoffe
die Herbstfrbung der Bltter. Cryptoxanthin kommt in gelbem Mais, Eidotter, Paprika, Orange, Mandarine,
Papaya und Krbissen vor, Capsanthin ist der charakteristische Farbstoff des roten Paprikas [Capsicum
annuum], Begleitpigmente sind das Capsarubin und das Cryptocapsin. Zeaxanthin [(3R,3'R)-,-Carotin-3,3'diol] bewirkt hauptschlich die gelbe Farbe der Maiskrner [Zea mays], woraus es 1939 von P. KARRER isoliert
wurde. Es ist ferner in anderen Pflanzen, im Eidotter, in Krustentieren, Fischen, den Federn von
Kanarienvgeln, Pilzen, Algen und Bakterien zu finden. Verestert kommt es in Blten und Frchten, z.B. von
Krokus, Safran, Hagebutte, Paprika, Orangen, usw. vor. Das Dipalmitat Physalein ist der rote Farbstoff von
Physalis-Arten (Pfaffenhtchen, Sanddorn, Judenkirsche). Zeaxanthin wird als Lebensmittelfarbstoff
verwendet. Violaxanthin [(5R,6S,5'R,6'S)-Diepoxyzeaxanthin] ist in Grnalgen [Chlorella] und hheren
Pflanzen wie z.B. dem Stiefmtterchen Viola tricolor, in Taraxacum, Tagetes, Tulipa, Citrus u.a. enthalten und
geht bei Belichtung ber die Monoepoxid-Verbindung Antheraxanthin in Zeaxanthin ber (lichtabhngiger
Xanthophyll-Zyklus). Im Dunkeln wird Violaxanthin wieder rckgebildet. Einige Carotinoide wirken bei

146

5. Terpene

Tieren als Provitamin und werden durch Spaltung zu Vitamin A umgewandelt. Canthaxanthin wurde frher als
Brunungsmittel verwendet. Auch der rote Farbstoff der Krebse und Hummern, das Astaxanthin [(3S,3'S)-3,3'Dihydroxy-,'-carotin-1,4-dion], gehrt in diese Reihe.
OH

Lutein [,-Carotin-3,3'-diol]
[Xanthophyll, Blattgelb]
HO

Kryptoxanthin
[3-Hydroxy--carotin]
O

HO

Capsanthin [3R,3'S,5'R)-3,3'-Dihydroxy,-carotin-6'-on]
OH
OH

HO

Zeaxanthin
[3R,3'R)-,-Carotin-3,3'-diol]

OH

Violaxanthin [3S,3'S)--Carotin(5R,6S)diepoxi-3,3'-diol]

HO
O
O
O
HO

Canthaxanthin
[,-Carotin-4,4'-dion]
O

COOH OH

8'-Apo-,-carotin-8'-sure
Capsorubin

O
O

OH

Carotine lassen sich in groem Mastab industriell aus Pflanzenmaterial extrahieren oder vollsynthetisch
herstellen. -Carotin wird grotechnisch (ca. 700 t/Jahr) durch WITTIG-Reaktion von Vitamin A-Aldehyd und
Vitamin A-Phosphoniumsalz oder durch Autoxidation des entsprechenden Ylids hergestellt. Dank der
technischen Synthese von -Carotin gibt es gelbe Pigmente fr Futter- und Nahrungsmittel, die die
cancerogenen Azofarbstoffe ersetzen. Es dient ferner als Konservierungsmittel und wird pharmazeutisch als
potentieller Arzneistoff zur Krebsprvention und -therapie eingesetzt.

Tetra- bis octacyclische "Terpene" wie z.B. das Trishomotetraterpen konnten aus dem aus dem Eozn
stammenden Messelschiefer extrahiert werden und stellen Dokumente mglicher prhistorischer Biosynthesen
(Cyclasen) dar.

Trishomotetraterpen
aus Messelschiefer

.8 Polyterpene

147

5. Terpene

Polyterpene [Polyprene] sind Polymere des Isoprens [C5H8], das wichtigste natrliche Polypren ist der
Kautschuk. Naturkautschuk ist das cis-1,4-Polyisopren, das einen Polymerisationsgrad von ca. 5.000 und eine
mittlere Molmasse von etwa 350.000 besitzt. Es kommt als Emulsion im Milchsaft [Latex] mancher tropischer
Bume wie des im Amazonasbecken wildwachsenden Kautschukbaums Hevea brasiliensis [Euphorbiaceae]
vor. Kautschuk ist bei Raumtemperatur amorph, bei niedriger kristallisiert er. Mit steigender Temperatur
tendieren die Molekle zur Ausdehnung in Richtung ihrer Lngsachse. Beim Ansuern, meist durch Zusatz von
Essigsure, koaguliert der Kautschuk zu festem Gummi, der zu Kugeln oder Platten geformt und in den Handel
gebracht wird. Naturkautschuk als vielfach ungesttigte Verbindung geht die blichen Olefinreaktionen wie
Addition von Wasserstoff, Halogen und Halogenwasserstoff ein und neigt zur Autoxidation. Beim trockenen
Erhitzen wird er in Isopren und Dipenten gespalten. Durch Vakuum-Pyrolyse alter Autoreifen gelang es
kanadischen Forschern, etwa 60 % der Reifenmasse in Form flchtiger Kohlenwasserstoffe abzudestillieren.
Die kondensierte Phase, die aus aliphatischen und aromatischen Kohlenwasserstoffen bestand, enthielt als
Hauptkomponente 15 % rac-Limonen. Gegenber Licht und Luftsauerstoff ist Naturkautschuk nicht besonders
widerstandsfhig. Durch Abbau der Kette und teilweise Cyclisierung geht die Elastizitt verloren und es
entstehen harzige Produkte.

Unter Einwirkung von Chlor entsteht Chloropren oder Allopren, das auerordentlich widerstandsfhig ist und
zum Beschichten von sureempfindlichem Material und zur Herstellung von Schuhsohlen Verwendung findet.
Addition von Schwefel ( 3 %) oder schwefelhaltigen

Verbindungen und Erhitzen (140C) des zunchst

plastischen Materials fhrt zur Polymerisation und Vernetzung und macht

den

Gummi

elastisch

(Hei-

Vulkanisation).

Das trans-Isomer Guttapercha, das vor allem aus dem Milchsaft des tropischen Palaqium-Baumes
[Palaquium balata, Sapotaceae] gewonnen wird, ist ein nicht-elastisches 1,4-Polypren-Polymer mit der
Molmasse in der Grenordnung von 100.000 und wurde frher als Material fr flusurefeste Flaschen und
Behltnisse und als Isoliermaterial verwendet. Chicle ist das kautschukartige Polyterpen aus dem eingedickten
Milchsaft des Sapatillbaums [Achras sapota] und lieferte frher den Grundstoff fr die Kaugummiherstellung.
Die Sporopollenine, spezifische Wandstoffe von Pilzsporen und Pollenkrnern, zeigen einen sehr hnlichen
chemischen Aufbau wie Guttapercha.

Kautschuk

Guttapercha

Dolichol ist ein Isoprenoid-Alkohol, der Bestandteil der Lipid-Membranen von Nervenzellen ist. Eine
Erhhung des Dolichol-Gehalts ist ein Hinweis auf eine pathologische Vernderung. Dolichylphosphate sind
Phosphat-Ester langkettiger Polyisoprenoid-Alkohole und kommen praktisch in allen Membranen
eukaryotischer Zellen vor (auer denen der Mitochondrien und Plastiden) und dienen als bertrger und

148

5. Terpene

Transportmolekl von Oligosacchariden. Die Zahl der cis-Isopreneinheiten n betrgt bei hheren Eukaryonten
13 - 17.
O
O

OCH2 OH

n
18

Dolichol

Dolichylphosphat, n = 13 - 17

.9 Mikrobielle Gewinnung von Terpenen


Seit vielen Jahrzehnten wurde bereits die Fhigkeit einiger Pilzarten, terpenhaltige Riechstoffe auszuscheiden,
als taxonomisches Kriterium genutzt. Inzwischen wurden zahlreiche Mikroorganismen als Produzenten
terpenhaltiger Riechstoffe erkannt. Ceratocystis variospora ist fr Kultivierungsversuche in Fermentern
besonders geeignet und bildet Terpene aus Glucose bzw. hydrolysierter Strke. Als Hauptprodukte der
isolierten Stoffwechselprodukte wurden etwa 50 % Geraniol, 12 % Citronellol, 6 % Nerol und 1 % Linalool
identifiziert, wodurch das l dem Citronelll und Palmarosal hnelt. Eine mikrobielle Gewinnung knnte eine
Konkurrenz zur Isolierung aus hheren Pflanzen darstellen.

.10 Vitamine mit Terpenstruktur

5.10.1 Vitamin A

Vitamin A1 [Vitamin A, all-trans-Retinol, Axerophthol] und Vitamin A2 [3,4-Dehydroretinol] sind zwei primre
Diterpenalkohole (Zur Synthese und Chemismus vgl. 3.4.2, zur biologischen Wirksamkeit vgl. 18. ).

5.10.2 Vitamin E

Vitamin E [Tocopherol, Antisterilittsl, Fertilittsvitamin und Weizenkeiml] ist eine Gruppe von fettlslichen
Vitaminen, die in tierischem und pflanzlichem Gewebe verbreitet ist (vgl. 18.

). Neben dem als erstes

identifizierten a-Tocopherol mit (+)-(2R,4'R,8'R)-Konfiguration wurden spter weitere Tocopherole (, und )


mit unterschiedlichem Methyl-Substitutionsmuster im aromatischen Hydrochinonring entdeckt. a-Tocopherol
besitzt die grte biologische Aktivitt, -Tocopherol ist unwirksam. Es ist ein chirales Chromanderivat mit
einer phenolischen Hydroxylgruppe und einer Isoprenoid-Seitenkette mit drei Chiralittszentren, aufgrund der
p-Hydrochinonstruktur verhindert Vitamin E als natrliches Antioxidans die Oxidation ungesttigter
Fettsuren, fetthaltiger Nahrungsmittel und die Bildung toxischer Fettsureperoxide in den Zellen.

149

5. Terpene

HO

-Tocopherol

O
H

H
OH

HO

HO

R=
O

-Tocopherol

Synthetisches -Tocopherol erhlt man durch Reaktion von Trimethylhydrochinon mit Phytylbromid.
HO

Br-CH2

HO
ZnCl2

CH3

H
OH

H3C

C
H2

CH2CH2CHCH2

O
3

-Tocopherol

Die Oxidation von -Tocopherol fhrt zum entsprechenden Chinon oder ber Phenoxyradikale zum dimeren
Chinomethid.
O

HO
Oxidation

OH
R

oder

Aus Getreidepflanzen und vor allem aus Palml wurden seit 1960 Tocotrienole isoliert und blicherweise auch
zum Begriff Vitamin E zusammengefat. Im Unterschied zu den Tocopherolen weisen sie isolierte Doppelbindungen in der isoprenoiden Seitenkette auf und stellen mglicherweise Intermediate der TocopherolBiosynthese dar. Besonders hohe Gehalte weisen z.B. die Samenle von Weizen, Soja und Mais auf.
R1

R1

R2

R3

CH3
CH3
H
H

CH3
H
CH3
H

CH3
CH3
CH3
CH3

HO

R2

O
R3

Tocotrienole

-Tocotrienol
-Tocotrienol
-Tocotrienol
-Tocotrienol

Seit ca. 40 Jahren werden Vitamin E-Produkte fr den Humanbereich industriell aus natrlichen Quellen
hergestellt, fr die Tiernhrung wird fast ausschlielich synthetisches Vitamin E verwendet. Nach Schtzungen
werden derzeit weltweit etwa 1.000 t natrliches Vitamin E gewonnen.

5.10.3 Vitamin K

Vitamin K wird als antihmorrhagischer Faktor bezeichnet, kommt in allen Pflanzen reichlich vor und wird
auch von der Darmflora produziert. Vitamin K1 [2-Methyl -3-phytyl-1,4-naphthochinon, Phyllochinon], wurde
in grnen Pflanzen entdeckt DAM, MCKEE, KARRER, FIESER], Vitamin K2 [2-Methyl-3-difarnesyl-1,4-naphthochinon, Menachinon-6], spter auch Menachinon-7, in verdorbenem Fischmehl [DOISY]. Vitamin K enthlt

150

5. Terpene

einen 1,4-Naphthochinonring mit isoprenoider Seitenkette als Chromophor. Vitamin K2 gehrt zu den Naphthochinonen mikrobieller Herkunft, die heute als Menachinone [MK] bezeichnet werden. Die einzelnen
Menachinone unterscheiden sich nach Anzahl der Isopren-Einheiten der Seitenkette, neben Vitamin K2
[Hexaprenyl-menachinon, MK-6] werden von Mikroorganismen weitere Menachinone mit 4 - 11 IsoprenEinheiten und isolierten, trans-konfigurierten Doppelbindungen produziert. Zustzlich kommen in
Mikroorganismen 2-Desmethyl-Menachinone [DMK] und partiell hydrierte Menachinone [MK-n-H2] vor.
O

O
CH3

O
CH3

H
O

CH3

CH3

H
O

CH3

CH3

Menachinone (MK-n)
Desmethylmenachinone (DMK-n)
Vitamin K2 (MK-6), 6 Isopreneinheiten

Phyllochinon
Vitamin K1, 4 Isopreneinheiten

Phyllochinon ist ein unentbehrlicher Bestandteil des Photosyntheseprozesses bei Pflanzen, bei manchen
Mikroorganismen sind Menachinone anstelle der Ubichinone Bestandteile des Primrakzeptor-Komplexes der
Elektronentransportkette.

Die Hydrochinonform von Vitamin K1 wird durch elektrophile Substitution des 2-Methyl-1,4-dihydroxynaphthalins durch Phytol gewonnen.
OH

Phytol
+

HO
HO

OH
KHSO4

1,4-Hydrochinon
- H2O

OH

Vitamin K1 Hydrochinon

151

5. Terpene

.11 Literatur

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153

6. Steroide

6. Steroide
.1 Struktur, Vorkommen und Nomenklatur

Steroide sind Verbindungen, die das Ringsystem des Cholesterins [ = Cholesterol] besitzen und sich nach Zahl
der Doppelbindungen, Art, Zahl und Position funktioneller Gruppen, Anzahl der Methylgruppen, der Alkylseitenkette und der Konfiguration von Bindungen unterscheiden. Sie sind blicherweise fest [griech. steros =
fest], aufgrund ihrer starren Moleklgestalt besitzen sie gute Kristallisierbarkeit und fhren zur Bildung
definierter Aggregate mit anderen Moleklen oder zu oligomeren Einschluverbindungen (6.6 Gallensuren) in
Lsung. Spezifische Komplexbildung von Steroiden mit Proteinen ist vor allem fr die Hormonwirkung
mancher Steroide verantwortlich. Zahlreiche biologisch wichtige Steroidverbindungen kommen im tierischen
Organismus, in Pflanzen und Pilzen, in Membranen, als Vitamine, als Gallensuren (6.6), als Steroidsapogenine
(6.7), als herzaktive Substanzen (6.8) und Krtengifte (6.9), als mnnliche und weibliche Sexualhormone
(6.12), als Hormone der Nebennieren (6.13) und als Steroidalkaloide.

Die Struktur aller Steroide leitet sich vom Gonan bzw. Steran ab, einem perhydrierten 1,2-Cyclopentanophenanthren, in der Regel sitzen noch zwei angulre Methylgruppen (C-18, C-19) an C-10 und C-13 und eine
Seitenkette an C-17. Die Ringe werden mit A, B, C und D bezeichnet, im tetracyclischen Kohlenwasserstoff
Gonan, das in der Natur nicht vorkommt, sind die Ringe B und C und die Ringe C und D jeweils transverknpft, der entsprechende Kohlenwasserstoff mit beliebiger Stereochemie wird als Steran bezeichnet. Die
Grundgerste einiger Steroide sind in Formel 6.1 wiedergegeben.
12

17

16

9
10

14
8
A

13
11

15

H
H

A/B - trans
6
4
Steran (beliebige Stereochemie)
Gonan (B/C und C/D trans)
Perhydro-1,2-cyclopentanophenanthren

Androstan (Androgene):
R=H
Pregnan (Gestagene, NNR-Hormone): R = C2H5
Cholan (Gallensuren):
R = CH(CH3)CH2CH2CH3
Cholestan (Zoosterine):
R = CH(CH3)CH2CH2CH2CH(CH3)2
Ergostan (Mycosterine):
R = CH(CH3)CH2CH2CH(CH3)CH(CH3)2
Stigmastan (Phytosterine): R = CH(CH )CH CH CH(C H )CH(CH )
3
2
2
2 5
3 2

A/B - cis

R
H3C
H
H3C

Formel 6-1. Steroidgrundgerste.

Natrlich vorkommende Steroide weisen entweder cis- oder trans-Verknpfungen fr die Ringe A und B auf, B
und C sind stets trans-verknpft, C und D zeigen meist trans-Verknpfung. Als Bezugspunkt fr die
Bezeichnung von cis,trans-Isomeren wird die angulre Methylgruppe an C-13 gewhlt, die ebenso wie die C-

154

6. Steroide

17-Seitenkette in den natrlichen Steroiden grundstzlich im Halbraum oberhalb der Ringebene stehen;
Substituenten, die sich auf derselben Seite des Ringsystems befinden wie die C-13-Methylgruppe, also oberhalb
der Ringebene, nennt man nach L.L. Fieser -stndig, diejenigen auf der anderen Seite -stndig. Im Beispiel
5-Cholestan (der C-5-Wasserstoff ist unterhalb der Papierebene angeordnet) sind alle Ringe trans-verknpft,
die Alkylsubstituenten nehmen die -Position ein.
H3C
CH3

H3C
H3C

Bezugspunkt

CH3

-Halbraum

R
H

CH3
H3C

H
H

-Halbraum

5-Cholestanol

HO

5-Cholestanol

Je nach Verknpfung der Ringe unterscheidet man zwischen der 5-Reihe (A/B, B/C und C/D trans-verknpft)
und 5 -Reihe (A/B cis-, B/C und C/D trans-verknpft) (Tab. 4.1). Viele natrliche Steroide besitzen jedoch in
Ring A oder B Doppelbindungen und sind daher mehr oder weniger stark eingeebnet. Die 3-Hydroxygruppe ist
meist -stndig, Verbindungen mit einer 3-OH-Gruppe (z.B. Gallensuren) werden als Epi-Steroide
bezeichnet.
H3C
CH3

H3C

CH3

H
H

H
H
H

H
H

5-Reihe

5-Reihe

Da ein System anellierter Cyclohexanringe wie das der Steroide bei grtmglicher Zahl von Sessel-Konformationen thermodynamisch stabil ist, gibt es fr jede Position des Steroidgerstes eine eindeutige Beziehung
zwischen konfigurationeller ( oder ) und konformationeller (a oder e) Orientierung eines Liganden (Tab. 42).

Tabelle 6-1. Stellung der Substituenten an den Verknpfungsstellen der Ringe bei Steroiden und verschiedenen
Triterpenen (= Doppelbindung)
Verbindung

5/10 (A/B)

Protosterol, Fusidinsure u.a. Steroidantibiotika


Lanosterin
pentacyclische Triterpene
Sterole
Cholstanol
Koprostanol
Gallensuren
Steroidhormone
Steroidsapogenine
Steroidalkaloide
Cardenolide, Bufadienolide

/
/
/
=
/
/
/
=
/, / oder =
/, / oder =
/

8/9 (B/C)
/
=
/
/
/
/
/
/
/
/
/

13/14 (C/D)
/
/
=
/
/
/
/
/
/
/
/

155

6. Steroide
/
=
/
/

Usarigenin
Digitanole
Batrachotoxin
Ecdysone

/
/
/
=

/
/
/
/

Fehlende C-Atome werden durch das Prfix Nor- angegeben, z.B. 19-Nor-Steroide fr die fehlende Methylgruppe in 10-Stellung, oder A-Nor-Steroide fr Steroide mit einem fnfgliedrigen Ring A. Das Prfix Homowie z.B. D-Homo- bezeichnet Ringerweiterungen im Ring D, Seco- entsprechend Ringspaltungen wie in
Vitamin D als B-Seco-Steroid.

.2 Cholesterin

(-)-Cholesterin [Cholesterol, griech. chole = Galle, 5-Cholesten-3-ol] ist das wichtigste Steroid der
Wirbeltiere, kommt in allen Teilen des tierischen Krpers vor, konzentriert vor allem im Gehirn und
Rckenmark. Der menschliche Krper enthlt etwa 300 g Cholesterin in freier Form oder als Fettsureester, 1.4
- 3.3 g werden im menschlichen Blut gefunden. Obwohl es selbst keine nennenswerten physiologischen
Aktivitten besitzt, nimmt es als das Ausgangsmaterial fr alle brigen Steroide im tierischen Organismus eine
zentrale Stellung im Steroidstoffwechsel ein.

Cholesterin wird hauptschlich in Form tierischer Nahrungsmittel aufgenommen, aber auch im Krper
synthetisiert. Mit zunehmendem Alter tritt Strung des Cholesterinhaushalts ein, Ablagerung an
Arterienwnden fhren zur Arterienverkalkung [Arteriosklerose]. Es ist Hauptbestandteil der menschlichen
Galle, woraus es bereits 1775 von CONRADI isoliert wurde, und wird auch in Ausscheidungen der Haut
gefunden. Die meisten Gallensteine bestehen aus Cholesterin und werden auf mangelnden Cholesterinabbau in
der Leber zurckgefhrt. Cholesterin enthlt eine 3--OH-Gruppe und eine 5,6-Doppelbindung im B-Ring,
wodurch die Mglichkeit der cis/trans-Isomerie (A/B) verloren geht und der Cyclohexenring B in einer
Halbsesselform vorliegt.
H3C

CH3

H3C
CH3
H3C

H
H

HO

Die Biosynthese des Cholesterins ist mit den Namen K. BLOCH, F. LYNEN, A. ESCHENMOSER, G. POPJAK und
J.W. CORNFORTH verbunden; es konnte gezeigt werden, da alle C-Atome aus Acetat stammen. Durch KopfKopf-Dimerisierung von Farnesylpyrophosphat entsteht der all-trans-Triterpenkohlenwaserstoff Squalen und
durch Epoxidierung Squalenoxid. Cyclisierung fhrt zu tetracyclischen Methylsterolen, die noch drei Methylgruppen mehr besitzen als die Steroide (vgl. 6.6). Bei den Tieren und Pilzen tritt das Lanosterin (Steroid des

156

6. Steroide

Wollfetts) als Zwischenprodukt auf. Durch Abspaltung von Methylgruppen und eine Reihe von HydrierungsDehydrierungsschritten entsteht daraus das Cholesterin.
H3C
H3C
1. Epoxidierung
2. Cyclase
- H+

H3C
CH3
HO
H3C

Squalen C30

Lanosterin C30

CH3

3 Methylgruppen
abgespalten
D

Cholesterin C27

HO

Erst die biogenetische Isoprenregel [L. RUZICKA, 3.1] fhrte zum Verstndnis der Steroid-Biosynthese und der
Verwandschaft von Terpenen und Steroiden. Nimmt man an, da sich Squalen mit lauter (E)-konfigurierten
C=C-Bindungen zu einer Konformation wie in Abb. 6-1 faltet, dann fhrt eine kationisch initiierte,
antiperiplanar verlaufende Cyclisierung zu einer Sessel-Boot-Sessel-Boot-Konformation des resultierenden
tetracyclischen Kations. Eine Reihe von WAGNER-MEERWEIN-Umlagerungen, die zur Ausbildung des DRinges, zu einer 1,2-Hydridverschiebung, zu zwei 1,2-Methylwanderungen sowie zur Eliminierung eines
Protons fhren, geben das C-Skelett des Lanosterins.

Sessel-BootSessel-Boot
Faltung
R

Squalen

H+

- H+

Lanosterin

+
+
R
R

Abbildung 6-1. Reaktionsmechanistische Betrachtung der Squalencyclisierung zu Lanosterin.

Erst nach 80 Jahren Forschung [1932] stand die Strukturformel von Cholesterin fest [ROSENHEIM und H.
WIELAND]. Die Klrung der Stereochemie gelang durch Rntgenstrukturanalyse [D. CROWFOOT-HODGKIN,
Nobelpreis 1964], NMR-Spektroskopie und chiroptische Methoden (u.a. die Anwendung der Oktantenregel).
1951 gelang die Totalsynthese [ROBINSON und R.B. WOODWARD] von Cholesterin. Vor allem durch

157

6. Steroide

Untersuchungen am Cholesterin [DIELS, A. WINDAUS] sowie an den Gallensuren [H. WIELAND] gelang die
Aufklrung des Kohlenstoffgersts der Steroide. Die Dehydrierung von Cholesterin mit Selen bei 350 C gibt
unter Abspaltung der Methylgruppen und der Seitenkette den DIELS-Kohlenwasserstoff [frher 17-Methylcyclopenta[a]phenanthren].

DIELSscher Kohlenwasserstoff
17-Methyl-1,2-cyclopentenophenanthren

Se, 350 C

Cholesterin
HO

.3 Zoosterine - Reaktionen der Sterine

Von den im tierischen Organismus vorkommenden Zoosterinen [Zoosterole] ist bei den Wirbeltieren
[Vertebratae] sicher Cholesterin der wichtigste Vertreter. In den Faeces findet man das 5--Stereoisomere des
Cholestanols, das von Darmbakterien gebildete Koprostanol. Zoosterine werden vor allem aus Wollfett und
Fischl, auerdem aus dem Rckenmark von Rindern und Schweinen gewonnen. Wirbellose [Invertebratae]
enthalten noch weitere Sterine wie z.B. das 24-Dehydrocholesterin in betrchtlicher Menge.

H
H

H
HO

24-Dehydrocholsterin

HO

Koprostanol
H

Die Doppelbindung in 5-Stellung im Cholesterin lt sich katalytisch je nach Bedingungen zu Isomerengemischen hydrieren. Die Reduktion in saurem Medium fhrt in die 5-Reihe, 5-Verbindungen dagegen
erhlt man bei der Reduktion des ,-ungesttigten Ketons 1, das durch OPPENAUER-Oxidation von
Cholesterin entsteht. Die epimeren Alkohole Cholestanol und Koprostanol lassen sich durch Erhitzen mit Basen
isomerisieren.

OH-

H2 / Pd

H
HO

HO

HO
H

H
OPPENAUER
Oxidation

Cholestanol (5)

OH-

Raney - Ni
H2 / OH-

3epi-Cholestanol

HO

HO
H

Koprostanol (5)

3epi-Koprostanol

158

6. Steroide

In der A/B-trans-Reihe ist die 3-OH-Verbindung, in der A/B-cis-Reihe die 3-OH-Verbindung die stabilere.
Grund dafr ist die hhere Stabilitt der Verbindungen mit quatorialen Substituenten. Aus den gleichen
Grnden entstehen bei der NaBH4-Reduktion von 3-Ketosteroiden jeweils die 3-Hydroxyverbindungen mit
quatorialer Stellung der OH-Gruppe.

NaBH4
O

3-Hydroxy-Reihe (3 e)
HO
(e)

NaBH4
O

3-Hydroxy-Reihe (3 e)
HO
(e)

Die thermodynamisch weniger stabilen axialen 3-Alkohole bzw. deren Ester (2) in der A/B-trans-Serie
knnen durch Inversion der 3-Hydroxygruppe mit Diazodicarbonsureester/Triphenylphosphan und einer
Carbonsure nach MITSUNOBU dargestellt werden.
H
EtOOC

O C R
O

N
COOEt

- EtOOC-NH-NH-COOEt
+
(C6H5)3P

P(C6H5)3

O
H

- (C6H5)3P=O

O
H
R C
R

CO O

.4 Phytosterine
Phytosterine [Phytosterole] sind Sterole aus Pflanzen und Mikroorganismen, wobei solche aus niederen
Pflanzen wie Algen und Pilzen oft noch als Mycosterine bezeichnet werden. Sie besitzen die gegenber den
C27-Zoosterinen eine (Ergostan-Reihe, C28) oder zwei weitere Methylgruppen (Stigmasteran-Reihe, C29) in der
C-17-Seitenkette und meist noch weitere Doppelbindungen. (-)-Ergosterin [Ergosterol, 5,7,22-Ergosta trien-3ol, Provitamin D2] wurde erstmals aus Mutterkorn isoliert [TANRET, 1989], ist als wichtigstes Mycosterin in
vielen Algen, Pilzen, Flechten und fetten len zu finden und ist das Hauptsterin der Hefe, aus der es leicht zu
gewinnen ist. Stigmasterin [Stigmasterol, 5,22-Stigmastadien-3-ol] wurde ursprnglich aus der CalabarBohne isoliert, wird aber heute aus dem unverseifbaren Anteil von Sojal gewonnen. Sitosterine sind im
Getreide enthalten, -Sitosterin [ -Sitosterol, Stigmast-5-en-3-ol] im Weizenkeiml. Campesterin

159

6. Steroide

[Campesterol, 5-Ergosten-3-ol] kommt zusammen mit Sitosterin und Stigmasterin als eine der
Hauptkomponenten in der Sterinfraktion mehrerer Pflanzen- und Saatle vor und wurde in Mollusken
gefunden. In Algen ist neben Ergosterin noch das Fucosterin [Fucosterol, 5,24(28)-Stigmastadien-3-ol]
enthalten, das eine weitere Methylgruppe in der Seitenkette besitzt. Brassicasterin [Brassicasterol, 5,22Ergostadien-3-ol] kommt relativ hufig in der Sterinfraktion von Rapssaat- und Senfsaatl vor.

H
HO

HO

HO

-Sitosterin

Stigmasterin

Ergosterin

H
H
HO

Campesterin

HO

HO

Fucosterin

Brassicasterin

Phytosterine sind etwa mit 0.3 % in Pflanzenlen zu finden und stellen bei einer Weltproduktion von 40 Mio t
Pflanzenlen (1982) ein Rohstoffpotential von etwa 120.000 Jahrestonnen dar. Bei der Zellstoffgewinnung
nach dem Sulfitverfahren sind in den Talllen und Talllseifen abtrennbare Neutralstoffe, deren Hauptanteil bis
zu 50 % Phytosterine sind. Natrliche Phytosterine knnen selbst als Gemische als Rohstoffe fr die
Herstellung von Steroidpharmaka gentzt werden. In den siebziger Jahren wurden mikrobiologische Verfahren
entwickelt, mit denen sich die unterschiedlichen Seitenketten zu einheitlichen Endprodukten wie
Androstendion und Androstadiendion abbauen lassen.

.5 Vitamin D, Calciferol und Cholecalciferol

Vitamin D ist von der Struktur hier eigentlich kein Steroid, wird aber als Cholesterinabkmmling hier gefhrt.
Man unterscheidet das Calciferol [Vitamin D2], das den aktiven Bestandteil von Vitamin D-Prparaten darstellt,
und das Cholecalciferol [Vitamin D3, auch Ergocalciferol], das beim Menschen etwas besser wirkt als D2.
Durch UV-Licht werden 5,7-Didehydrosterine [Provitamin D] im Organismus hauptschlich in Prvitamin D
umgewandelt, das durch Erhitzen in Vitamin D bergeht. Das Provitamin des tierischen Organismus ist das 7Dehydrocholesterin [Provitamin D3, Cholesta-5,7-dien-3-ol], das in der Leber aus Cholesterin gebildet wird.
Weitere Provitamine sind pflanzliches Ergosterin und andere 5,7-Didehydrosterine. Provitamin D reichert sich
in der Fettschicht der Haut an und wird durch UV-Strahlung (Sonnenlicht) durch photochemische
elektrocyclische Ringffnung des B-Ringes in das Trien-B-Secosteroid Prvitamin D [Prcalciferole]
umgewandelt. Diese lassen sich thermisch in einer sigmatropen Umlagerung zum eigentlichen Vitamin D

160

6. Steroide

(Calciferol) berfhren. Aus 7-Dehydrocholesterin entsteht Cholecalciferol (Vitamin D3), aus Ergosterin das
Ergocalciferol (Vitamin D2). Fischle (und das, obwohl Fische eigentlich nie mit UV-Licht in Kontakt
kommen) und Eigelb sind die besten Quellen fr Vitamin D3, in geringen Mengen findet es sich in Milch und
Butter.
R

h
konrotatorische
Ringffnung

OH

60 C / Cyclohexan

Provitamin D3
7-Dehydrocholesterin
(282 nm)

HO

Prvitamin D3
Prcalciferol
(262 nm)

[1,7]-H-Shift
antarafacial

CH3

H3C

H3C

CH3

R=
H3C

Cholecalciferol
Vitamin D3

Cholecalciferol
Vitamin D3
9,10-Seco-5,7,10(19)cholestatrien-3-ol

H3C

Ergocalciferol
Vitamin D3
9,10-Seco-5,7,10(19),22ergostatetraen-3-ol

HO

Nach 25-Hydroxylierung in der Leber und 1-Hydroxylierung in der Niere entsteht ais Vitamin D3 die eigentlich
aktive Form eines Hormons, das Vitamin D-Hormon [Calcitriol, Calcitropes Hormon, 1,25-Dihydroxycholecalciferol, (1S,3R,5Z,7E)-9,10-Secocholesta-5,7,10(19) -trien-1,3,25-triol]. Dieses bindet an verschiedene
Rezeptoren und reguliert die Transkription zahlreicher Gene.

OH

1,25-Dihydroxycholecalciferol, Vitamin D-Hormon


HO

OH

.6 Gallensuren

Gallensuren sind Abbauprodukte der Steroide und besitzen in der C-17-Seitenkette eine Carboxylgruppe, die
durch Oxidation in der Leber entsteht. Zustzlich enthalten sie ein, zwei oder drei Hydroxylfunktionen in 3-, 6-,
7- und/oder 12-Position, die fast ausschlielich -konfiguriert sind. Stammkrper sind die natrlich nicht
vorkommende Cholansure (C24) und die Koprostansure (C27), sehr selten kommen noch C28-Gallensuren
vor. Die Gallensuren gehren der 5-Reihe an, d.h. die Ringe A und B sind cis-verknpft.

161

6. Steroide

COOH

COOH

H
H

Cholansure

Koprostansure

Gallensuren mit ihrem hydrophoben und dem hydrophilen Strukturteil grenzflchenaktiv und zur Mizellenbildung befhigt. Sie spielen bei der Emulgierung und Verdauung von Fetten eine Rolle und erleichtern die
Resorption vieler Arzneimittel.

Die Gallensuren werden mit der Gallenflssigkeit in den Darm abgegeben, jeder Mensch erzeugt pro Tag ca.
20 g an Gallensuren. Bei den Sugetieren kommen ausschlielich Cholansurederivate vor, in der
menschlichen Galle berwiegt die Chenodesoxycholsure [3,7-Dihydroxy-5-cholan-24-sure] neben
Cholsure [3,7,12-Trihydroxy-5-cholan-24-sure] und Desoxycholsure [3,12-Dihydroxy-5-cholan24-sure], Lithocholsure [3-Hydroxy-5-cholan-24-sure] findet man in Spuren. Cholsure und
Desoxycholsure lassen sich in greren Mengen aus Ochsengalle, Hyodesoxycholsure [3,6-Dihydroxy-5cholan-24-sure] aus Schweinegalle isolieren. Chenodesoxycholsure ist ein Hauptbestandteil der Galle von
Gnsen, Hhnern und vielen Sugetieren. Die 7-Hydroxygruppe der Ursodesoxycholsure besitzt gegenber
Chenodesoxycholsure -Konfiguration. In der Galle von Amphibien und Reptilien sind C27- und C28-Suren
enthalten. C24-Steroidcarbonsuren der 5-Reihe sind aus kalifornischem Erdl isoliert worden, so da
zumindest ein Teil des Erdls tierischen Ursprungs ist, da eine A/B-cis-Verknpfung des Steroidgersts bei
Pflanzen bisher nicht gefunden wurde.
COOH

HO

Name

Cholsure
Desoxycholsure
Lithocholsure
Chenodesoxycholsure
Hyodesoxycholsure

OH
OH
H
H
H

OH
H
H
OH
H

H
H
H
H
OH

Die eigentlichen Gallensuren liegen als Na-Salze der gepaarten oder konjugierten Gallensuren vor und
werden aus letzteren durch alkalische Hydrolyse erhalten. Sie sind sureamidartig an Glycin H2NCH2COOH als
Glykocholsure oder an Taurin H2NCH2CH2SO3H als Taurocholsure gebunden, wobei die stark sauren TauroKonjugate hufiger sind, lediglich bei einigen pflanzenfressenden Sugetieren berwiegen die GlykoKonjugate.

N
H

SO3H

COOH

O
H

Glykocholsure

N
H

O
H

Taurocholsure

162

6. Steroide

Desoxycholsure bildet mit geradkettigen Fettsuren oder mit hydrophoben Alkoholen, Estern, Ethern oder
Kohlenwasserstoffen Choleinsuren, gut kristallisierende Einschluverbindungen, die als Salze in verdnnter
Lauge unzersetzlich lslich sind. Dabei bilden jeweils 2 Desoxycholsure-Molekle einen ca. 0.7 nm langen
Kanal, fr den Einschlu von einem Molekl Palmitinsure (Lnge ca. 2.4 nm) sind 4 solche Kanalabschnitte
und somit 8 Molekle Gallensuren erforderlich. Damit fungiert die Desoxycholsure als Lsungsvermittler fr
den Transport von Stoffwechselprodukten und Fremdstoffen.

In der Galle von Fischen und Amphibien werden anstelle der konjugierten Gallensuren Schwefelsureester
von Gallenalkohlen gefunden, z.B. in der Galle von Haifischen (z.B. Scymus borealis) und anderen
Knorpelfischen das Scymnolsulfat.
OH
CH2OSO3

HO

CH2OH
H

H
HO

Scymnolsulfat
OH

.7 Steroid-Sapogenine

Zahlreiche Saponine, im allgemeinen pflanzliche Glykoside hydrophober Alkohole, die in wriger Lsung
schumen, geben bei der Hydrolyse als Sapogenin (Aglykon) Triterpenalkohole (Triterpen-Sapogenine) oder
Steroidalkohole, Steroid-Sapogenine. Zu den wenigen tierischen Steroid-Saponinen zhlen die Gifte der
Seesterne. Die neutralen Steroid-Saponine sind oral ungiftig, knnen bei parenteraler Applikation jedoch die
Erythrozytenmembran zerstren und die Blutgerinnung hemmen. Sie sind fr Fische stark toxisch, weshalb die
Eingeborenen Afrikas und Sdostasiens saponin hltige Pflanzensfte fr den Fischfang verwenden.

Charakteristisch fr die meisten Steroid-Sapogenine ist die Spirostan-Struktur mit der Spiroketal-Einheit. Die
Verbindungen gehren der 5-, 5- oder 5-Reihe an, die Methylgruppe an C-25 kann axial (25S, NormalReihe) oder equatorial (25R, Iso-Reihe) angeordnet sein. Zur 5-Reihe gehrt Diosgenin [(25R)-Spirost-5-en3-ol], das in getrockneten Wurzelknollen tropischer Schlingpflanzen wie der mexikanischen Yamswurzel
[Dioscorea] und in Solarium-Arten sowie in Trillium erectum gefunden wird. Es liegt in Dioscorea als
brechreizerzeugendes Glykosid mit zwei Moleklen Rhamnose und einem Molekl Glucose vor [Dioscin]. Das
(25S)-Diastereomere des Genins heit Yamogenin. Die kartoffelhnlichen Wurzelknollen wildwachsender
Dioscorea-Arten werden in Mexiko, China, Sdafrika und Indien gesammelt. Diosgenin wird technisch als
natrliches Ausgangsprodukt fr industrielle Partialsynthesen von in Antikonzeptionsmitteln eingesetzten
Gestagenen (6.

) gewonnen. Bis in die sechziger Jahre deckte Diosgenin als Rohstoff etwa 80 % der Welt-

163

6. Steroide

Steroidproduktion ab, von den 1986 eingesetzten 2.300 t Steroiden als Synthese-Ausgangssubstanzen entfielen
noch etwa 25 % auf Diosgenin. Je nach dem pflanzlichen Ursprung werden Diosgenin-Glykoside mit
verschiedenen Saccharidteilen gefunden:
H

Dioscin
Gracillin
Trillarin
Trillin

2 x Rhamnose, 1 x Glucose
1 x Rhamnose, 2 x Glucose
2 x Glucose
1 x Glucose
R ax
O

Dioscorea tokoro
Disocorea tokoro
Trillium erectum
Trillium erectum

25

R eq
H O

Diosgenin

HO

H
H
H

H
5

Spirostan
R ax = CH3, R eq = H Normal-Reihe (25S)
R ax = H, R eq = CH3 Iso-Reihe (25R)

Tigogenin [(25R)-5-Spirostan-3b-ol] und Digitogenin [(25R)-5-Spirostan-2,3,15-triol] sind Sapogenine


aus den Digitalisglykosiden Tigonin bzw. Digitonin aus dem Roten und Wolligen Fingerhut [Digitalis purpurea
und D. lanata]. Sarsasapogenin [(25S]-5-Spirostan-3-ol] entsteht spontan bei der Hydrolyse von Sarsaparillosid, einem Glykosid aus Wurzeln der in Mittelamerika heimischen Lianen Smilax ornata oder S.
aristolochia. Das C-25-Isomere ist das Smilagenin. In der ostafrikanischen und zentralamerikanischen
Sisalagave Agave sisalana findet man das Hecogenin.
25

25

25

25

O
O

HO
OH
HO

HO

Tigogenin
(25R)-5-Reihe

HO

HO
H

Digitogenin

Sarsasapogenin
(25S)-5-Reihe

Hecogenin
(25S)-5-Reihe

Digitonin [Digitin] besteht aus 5 Monosaccharid-Einheiten und dem Aglykon Digitogenin. Es wirkt giftig durch
Zerstrung der Erythrocyten (Hmolyse), die Aktivitt wird allerdings von Cholesterin und anderen Steroiden
mit A/B-trans-Verknpfung aufgehoben. Digitonin bildet in alkoholischer Lsung mit Steroiden mit 3konfigurierter OH-Gruppe und A/B-trans-Ringverknpfung schwerlsliche Moleklverbindungen und wird zur
quantitativen Bestimmung von Cholesterin verwendet und zur Isolierung und Reinigung von Steroiden
eingesetzt. Gitogenin [2,3-Spirostandiol, Digin] ist das Sapogenin des Digitalisglykosids Gitonin, dessen
Zuckerkomponente aus je einer Glucose und Xylose sowie zwei Moleklen Galactose besteht.

164

6. Steroide

CH2OH
O
O

OH

CH2OH
O
OH

O
HO
O

HO

OH

HO
OH
HOH2C
HO

HOH2C
O

HO

Digitogenin

O
O

Digitonin

OH

H
OH

HO

HO

OH

Gitogenin
HO

.8 Herzwirksame Glykoside, Cardenolide

6.8.1 Struktur, Vorkommen und Eigenschaften

Die herzwirksamen Glykoside besitzen starke Wirkung auf den Herzmuskel und regen in geringer Menge die
Herzttigkeit an [Cardiotonika], in greren Mengen wirken sie toxisch. Diese Substanzen kommen als
Glykoside z.B. in verschiedenen Fingerhut-Arten [Digitalis], in afrikanischen Strophanthus-Arten [Apocynaceae], in Oleander [Nerium oleander], im Frhlingsteufelsauge [Adonis vernalis] und im Maiglckchen
[Convallaria majalis] vor. hnliche Aglyka findet man in Wehrsekreten mancher Kfer [Chrysomelidae], die
aus den Futterpflanzen stammen, und interessanterweise auch als Inhaltsstoffe der Hautdrsen von Krten (4.9
Bufadienolide) sowie in der Meerzwiebel [Urginea (Scilla) maritima]. Die pharmakologische Wirkung dieser
Verbindungen ist bereits 1.500 v. Chr. erwhnt worden; sie zhlen zu den ltesten Heilmitteln, die man kennt.
Bereits seit dem Mittelalter ist die Giftigkeit des Roten Fingerhuts, Digitalis purpurea, bekannt und seit 200
Jahren wird Digitalis zur Herztherapie verwendet. Die aktiven Prinzipien afrikanischer und sdamerikanischer
Pfeilgifte besitzen ebenso Strukturen dieses Typs. Diese Steroide verbessern den Wirkungsgrad des Herzens
und werden in Form der Glykoside zur Behandlung von Herzinsuffizienz eingesetzt. Problematisch wegen der
Toxizitt ist die sehr enge therapeutische Breite, dennoch werden Herzglykosidprparate sehr hufig als
Arzneimittel verordnet.

Die Abspaltung der 3-OH-Zuckerreste gelingt durch Hydrolyse unter milden Bedingungen mit verdnnten
Suren, Alkoholzusatz beschleunigt die Reaktion deutlich. Allgemein werden Glykoside mit 2-Desoxyzuckern
leichter gespalten als solche mit 2-Hydroxyzuckern. Die Aglyka der Glykoside sind durch einen ungesttigten
Lactonring an der C-17--Position charakterisiert, der fr die Wirksamkeit erforderlich ist. Mit diesem
Strukturelement unterscheiden sich die Cardenolide von den Bufadienoliden (6.9). Cardenolide, deren
Lactonring gesttigt ist, werden als Cardanolide bezeichnet. Die Aglyka selbst sind zwar fr die
pharmakologische Wirkung verantwortlich, zeigen jedoch aufgrund der raschen Metabolisierung keine

165

6. Steroide

nennenswerte Aktivitt. Die in 3-Stellung der Steroidgenine gebundenen Zucker verzgern jedoch die
Metabolisierung und sind fr die Pharmakokinetik dieser Glykoside verantwortlich.

Die Cardenolide besitzen die Struktur des Cardanolids, Stammsubstanz ist das Digitoxigenin [3,14Dihydroxy-5-card-20(22)-enolid], das Genin verschiedener Glykoside (Tab. 6-3). In Digitoxin [Digitalin] ist
es mit einem aus drei Moleklen Digitoxose [2,6-Didesoxy-D-ribo-hexose] bestehenden Trisaccharid
glykosidisch gebunden.
O
O
O
O
17

Cardanolid

Digitoxin

1
14

Digitoxose

Digitoxose

Digitoxose

OH

O
HO

O
O

Digitoxigenin
OH

OH

OH

Digitoxin ist zusammen mit Digoxin das wichtigste therapeutisch genutzte Digitalis-Glykosid und wird allem
aus dem Roten Fingerhut Digitalis purpurea, dem Wolligen Fingerhut D. lanata, dem Grobltigen Fingerhut
D. ambigua und dem Gelben Fingerhut D. lutea [Scrophulaceae] gewonnen. Es ist tdlich giftig, die letale
Dosis TDL0 (Mensch) betrgt 175 g/kg p.o.

Digoxigenin [3,12,14-Trihydroxy-5-card-20(22)-enolid, Lanadigenin] ist das Aglykon des Digoxins und


des Lanatosids C. Es wirkt ebenfalls als tdliches Gift bei intravenser und parenteraler Applikation (TDL0
Mensch 100 g/kg p.o.).

Mit Digoxigenin gelingt eine spezifische Markierung von Nucleinsuren, Glykokonjugaten und Proteinen und
der Nachweis ber Antikrper-vermittelte Enzymreaktionen. Fr die Markierung werden z.B. Nukleinsuren
enzymatisch ber einen Spacer (Formel 6-2) mit dem Steroid verbunden.
O
O
O

O
H
C

H
C

H2 H
C N

(CH2)5

H
N

HO
CH2

HN
CH2

O
O

OH
O

LiO

P
OLi

CH2
O

O
3

HO

Formel 6-2. Digoxigenindesoxyuridintriphosphat.

166

6. Steroide

Cardenolide kommen vor allem in den Pflanzenfamilien der Scrophulariaceen, Liliaceen, Ranunculaceen,
Asclepiadaceen und Apocynaceen vor, die einzelnen Genine besitzen gegenber Digitoxigenin zustzliche
Sauerstoffunktionen. Die Hydroxygruppe in 16-Stellung kann eine Formyl- oder Acetylgruppe tragen. Allen
diesen Cardiotonika ist die cis-Verknpfung der Ringe A und B sowie C und D und eine 14-Hydroxygruppe
gemeinsam. Charakteristisch fr die glykosidisch gebundenen Zuckerreste der herzwirksamen Cardenolide ist
das hufige Auftreten seltener Desoxyzucker.

Tabelle 6.3. Herzwirksame Glykoside vom Cardenolid-Typ.


Pflanze

Genin

Glykosid

Zucker

Digitalis purpurea

Digitoxigenin
Digitoxigenin
Gitoxigenin
Digitoxigenin
Gitoxigenin
Digoxigenin
Digoxigenin
Digitoxigenin
Digitoxigenin
Oleandrigenin
Strophanthidin
Ouabagenin

Purpureaglykosid A
Digitoxin
Purpureaglykosid B
Lanatosid A
Lanatosid B
Deslanosid*
Digoxin*
Thevetin

Dig-Dig-Dig-Glc
Dig-Dig-Dig
Dig-Dig-Dig-Glc
Dig-Dig-AcDig-Glc
Dig-Dig-AcDig-Glc
Dig-Dig-Dig-Glc
Dig-Dig-Dig
The-Glc-Glc
The
Ole
Cym-Glc()-Glc()
Rha

Digitalis lanata

Thevetia neriifolia

Neriifolin
k-Strophanthosid
Ouabain
(= g-Strophanthin)
Convallaria majalis
Strophanthidin
Convallatoxin
Rha
Strophanthidin
Convallosid
Rha-Glc
Strophanthidol
Convallotoxol
Rha
Cheiranthus cheiri
Strophanthidol
Cheirotoxin
Lyx
Adonis vernalis
Adonitosigenin
Adonitoxin
Rha
Dig = Digitoxose; The = Thevetose; Ole = Oleandrose; Cym = Cymarose; Rha = Rhamnose; Lyx = Lyxose; Glc
= Glucose; * Spaltprodukt.
Nerium oleander
Strophantus komb
Strophantus gratus

Ein weiterer, wichtiger Vertreter der 5-Cardenolide ist das Gitoxigenin [3,14,16-Trihydroxy-5-card20(22)-enolid], das aus dem Digitalisglykosid Gitoxin stammt und eine Hydroxygruppe an C-16 trgt.
Verbindungen der 5-Reihe sind wenig oder kaum herzwirksam. 5-Derivate sind das Uzaragenin und das
Corotoxigenin, Genine aus Glykosiden aus der sdafrikanischen Uzarawurzel [Gomphocarpus-Art], aus Samen
von Oleander [N. oleander] und Strophantus Boivinii.
O

OH
OCH

OH
HO
H

OH

HO
HO

HO

Gitoxigenin

Uzarigenin

Corotoxigenin

167

6. Steroide

Ein therapeutisch wichtiges Glykosid ist das hauptschlich in Strophanttus komb [Apocynaceae]
vorkommende k-Strophanthosid. Durch Totalhydrolyse erhlt man das Aglykon Strophanthidin [3,5,14Trihydroxy-19-oxo-card-20(22)-enolid, Corchorin]. Auf enzymatischem Weg gelingt auch der stufenweise
Abbau der Zuckerreste zu k-Strophanthin und Cymarin [k-Strophanthinol ]. Strophanthin ist das aktive
Prinzip der Pfeilgifte aus Strophanthus-Samen, 0.07 mg bewirken bei einer 20 g schweren Maus bereits
Herzstillstand. Strophanthidin ist auerdem das Aglykon verschiedener Glykoside des Maiglckchens
Convallaria majalis. Convallatoxin ist ein Rhamnosid des Strophanthidins, Convallosid ein Glucosid des
Convallatoxins. Beide Verbindungen finden sich in Maiglckchen und werden gegen Herzinsuffizienz
verwendet.
O

k-Strophanthosid

OCH

OCH
OH

H
OH

-Glucose--Glucose-Cymarose-O

CH3

OH

OH

OH

Strophanthidin
Cymarin (k-Strophanthinol)
k-Strophanthin

Convallatoxin
OH

OH

6.8.2 Partialsynthesen von Cardenoliden

Zum Aufbau des 14-Lactonringes von Cardenoliden geht man zweckmigerweise von 14-Hydroxy-20pregnanon aus, das mit Lithiummethoxyacetylid umgesetzt wird. Saure Isomerisierung von 5 und anschlieende
Allyloxidation mit SeO2 ergeben das Cardenolidsystem 8.
O

HO

O
C

LiC

COEt

OH

OH

OEt

H+

COCH3
H

H2O
OH

14-Hydroxy20-pregnanon

OH
O
O

SeO2

OEt
O
OH

OH

Zur Partialsynthese von Digoxigenin und seinem 12-Epimeren geht man vom Desoxycholsureimidazolid 9 aus,
das durch Bestrahlung (254 nm) nach dem Iwasaki-Verfahren zum 20(22)-Methylenpregnan 10 fhrt. Die
Konfigurationsumkehr an C-3 lt sich nach Mitsunobu durchfhren. Das resultierende Monoacetat 11 wird
durch Photooxidation, Hydroperoxid-Reaktion und Reduktion mit NaI zum Allylalkohol 12 umgesetzt.

168

6. Steroide

Oxidation zu 13, Wittig-Reaktion, Umsetzung mit Singulett-Sauerstoff und anschlieende Reaktion mit
Triethylamin als Base gibt das Cardenolid 16. Nach PCC-Oxidation wird das entstandene Keton 17 durch
Belichtung in den Seco-Aldehyd 18 (NORRISCH-Typ-I-Spaltung) und damit ber den "Remote-OxidationsProze" [P. WELZEL] die 14-Hydroxygruppe eingefhrt. Es resultieren Digoxogenin und 12-Epidigoxigenin
(Formel 4-3).
HO

HO
N
CO

N
O

EtOC N

10

HO

Ph3P / HOAc

H
HO

HO

COEt

254 nm

H
HO
HO
CH2OH

1. h / O2

MnO2

CH=O

2. NaI

12

AcO

13

H
H

11
O O
H^O

HO

- +

OCH3

OCH3
1

CH3OCH-P(C6H5)3

Et3N

O2

15

14
H

HO

O
h

16

CH

PCC

17

18

HO

HO
O

1. H / H2O

2. KOH / CH3OH
HO
HO
H

Digoxigenin

HO
HO

12-Epidigoxigenin
H

Formel 6-3. Partialsynthese von Digoxigenin.

.9 Bufadienolide
Bufadienolide besitzen im Gegensatz zu den Cardenoliden als Strukturmerkmal einen zweifach ungesttigten Lactonring als C-17-Substituent und arbsorbieren aufgrund des konjugiert-ungesttigten Chromophors bei

169

6. Steroide

lngeren Wellenlngen (273 nm). Die Ringe A, B, C und D sind cis-verknpft. Sie kommen in den Hautdrsen
der Krten [Bufonidae] und in Scilla-, Bowiea- [Liliaceae] und Helleborus-Arten [Ranunculaceae] vor. Bei den
Bufadienoliden der Krten unterscheidet man die Bufogenine von Bufotoxin, deren 3-Suberylarginyl-Ester.
Beide leiten sich vom Bufalin [3,14-Dihydroxy-5,14-bufa-20,22-dienolid, Tab. 4-4] ab, die einzelnen Bufadienolide besitzen zustzliche Sauerstoffgruppen. Cinobufagin ist das Haupt-Bufadienolid der ostasiatischen
Krte Bufo bufo gargarizans, deren Haut in der chinesischen Medizin zur Behandlung der Wassersucht
eingesetzt wird. In der europischen Krte Bufo vulgaris ist vor allem Bufotalin enthalten, die aus der
brasilianischen Krte Bufo marinus isolierten Verbindungen Marinobufagin und Resibufogenin enthalten eine
14,15-Epoxygruppe. Manche Bufogenine wirken stark lokalansthetisch und wurden bereits im antiken China
zur Herztherapie und als Ansthetika verwendet. In der heutigen Medizin jedoch sind sie von pflanzlichen
Herzglykosiden verdrngt worden. Bufotoxin stellt einen Ester des Suberylarginins mit Bufogenin B dar. Die
physiologische Wirksamkeit hnelt den Bufadienoliden, bemerkenswert hingegen ist seine starke
lokalansthetische Wirkung, die ein Mehrfaches der des Cocains betrgt. Die Krtengifte lassen sich aus den
Ohrspeicheldrsen der Krten durch Ausdrcken gewinnen.
O
O

Bufotoxin
Arginin
N2H

OCOCH3

H
H
HOOC

N
H

NH

O
H

HN

HO

O
H

Bufogenin B

Korksure

Tabelle 6-4. Sauerstoffunktionen der Bufadienolide der Krten (Grundkrper = Bufalin)


Name

Substituenten in Stellung
5

14

15

Bufalin

-OH

Bufotalin

-OH

Herkunft

16
-OH

Bufo bufo gargarizans


Bufo vulgaris

Marinebufagin -OH

--O-

Bufo marinus

Resibufogenin

--O-

Bufo marinus

Cinobufagin

--O-

-OAc

Bufo bufo

HO

Bufalin

HO
H

3,14-Dihydroxy-5,14bufa-20,22-dienolid

170

6. Steroide

Die pflanzlichen Bufadienolide liegen 3-glykosidisch gebunden vor. In der Weien Meerzwiebel [Urginea
(Scilla) maritima] kommen je nach der Zuckerkomponente die Glykoside Proscillarin A, Scillaren A und
Glucoscillaren A vor. Nur durch enzymatische Hydrolyse ist das Proscillaridin-Genin Scillarenin [3,14Dihydroxy-bufa-4,20,22-trienolid] erhltlich. Die surekatalysierte Hydrolyse ergibt das Anhydroderivat
Scillaridin A. Die Meerzwiebel wurde bereits im Altertum als Arzneimittel verwendet. Das Hellebrigenin aus
der Christrose [Helleborus niger] liegt als Glykosid [Hellebrin] vor und ist identisch mit dem Bufotalidin aus
den Hautdrsen der Krten.
O

OCH

OH

OH

OH

HO
Glucose-Rhamnose-O

Hellebrin

Scillaridin A

Scillarenin

OH

.10 Withanolide

Mehr als hundert pflanzliche C28-Steroide aus Blttern von Withania-, Dunalia-, Datura- und Nicandra-Arten
[Solanaceae] werden unter dem Begriff Withanolide zusammengefat, die sich vom Stammkohlenwasserstoff
Ergostan ableiten und hnlich wie Carden olide und Bufadienolide einen fnf- oder sechsgliedrigen Lactonring
enthalten. Im Gegensatz zu den beiden Steroidgruppen, die berwiegend als Glykoside vorliegen, kommen
Withanolide jedoch in freier Form vor. Am lngsten bekannt ist Withaferin A [(22R)-4,27 -Dihydroxy-1-oxo5,6-epoxywitha-2,24-dienolid] aus Withania somnifera und Acnistus arborescens, das bakteriostatische und
tumorhemmende Wirkung besitzt. Weitere Vertreter sind Withanolid D und Withanolid E.

HO
O
O

O
H

H
O

OH

OH
O
H

HO
O

Withaferin A

Whitanolid E

Ergostan

HO

.11 Steroidalkaloide
Als Steroidalkaloide bezeichnet man stickstoffhaltige Steroide, die vorwiegend als Ester [Esteralkaloide] oder
Glykoside [Glykoalkaloide] in hheren Pflanzen, jedoch auch in einigen Tieren gefunden werden. Pflanzliche
Steroidalkaloide sind vor allem in Nachtschatten-, Lilien-, Hundsgift- und Buchsbaumgewchsen zu finden,

171

6. Steroide

tierische kommen u.a. in Amphibien vor. Einige Steroidalkaloide werden als Ausgangssubstanzen fr die
Synthese von Steroidhormonen eingesetzt. Struktur und Chemismus dieser Verbindungen werden unter den
Alkaloiden abgehandelt.

.12 Steroid-Sexualhormone
Die Sexualhormone [Keimdrsenhormone, Geschlechtshormone oder Sexagene] sind verantwortlich fr die
Ausbildung der Geschlechtsorgane, der sekundren Geschlechtsmerkmale und fr die Geschlechtsfunktionen
des tierischen und menschlichen Organismus. Die Bildung der eigentlichen Sexualhormone, der mnnlichen
Keimdrsenhormone, Androgene, bzw. der weiblichen Sexualhormone, Estrogene und Gestagene, erfolgt in
den Hoden bzw. Ovarien unter der stimulierenden Wirkung der gonadotropen Hormone [Proteohormone] des
Hypophysenvorderlappen [Biologisch aktive Proteine] und wahrscheinlich in geringem Umfang auch in der
Nebennierenrinde. Die Unterscheidung in mnnliche und weibliche Sexualhormone ist manchmal, da sie in
beiden Geschlechtern auftreten knnen. Entscheidend fr viele Funktionen ist das Verhltnis der einzelnen
Hormone zueinander.

Die Steroidhormone leiten sich strukturell vom tetracyclischen Kohlenwasserstoff Gonan (vgl. 6.1) ab, die
Biosynthese verluft von Cholesterin ausgehend unter Abbau der C-17-Seitenkette. Je nach Zahl der C-Atome
unterscheidet man die C19-Androgene (Androstanderivate), die C18-Estrogene (Estranderivate) und die C21Gestagene (Pregnanderivate). Aufgrund ihrer lipophilen Struktur knnen die Steroidhormone ber die Zellmembran in das Zellinnere eindringen und dort mit spezifischen Rezeptoren eine Genexpression,
wahrscheinlich ber die Proteinsynthese, auslsen.

6.12.1 Androgene, mnnliche Geschlechtshormone

Die Androgene [griech. andros = Mann] werden gewhnlich als mnnliche Geschlechts- oder Keimdrsenhormone bezeichnet, selbst wenn sie auch im weiblichen Organismus vorkommen. Ihrer Struktur liegt die des
5-Androstans [frher Testan] zugrunde, ein Dimethyl-perhydrocyclopenta[a]phenanthren mit jeweils transverknpften Ringen. Zu den wichtigsten Androgenen gehren Testosteron, Androsteron, Dihydrotestosteron
und das Androstendion. Sie werden im Sperma, im Blut und Harn gefunden und teils an Glucuronsuren, an
Schwefelsure oder Eiwei gebunden ausgeschieden. Testosteron [17-Hydroxyandrost-4-en-3-on] wird auf
Veranlassung der gonadotropen Hormone in den Leydigschen Zellen [Interstitialzellen] des Hodens freigesetzt
und wurde erstmals 1935 [LAQUEUR] aus Stierhoden isoliert. Fr die biologische Wirkung von Testosteron ist
die Doppelbindung an C-4 ausschlaggebend, die Wirksamkeit ist etwa 7mal besser als die von Androsteron
ohne diese Doppelbindung. Es bewirkt die Ausbildung der Geschlechtsmerkmale des Mannes, frdert die
Entwicklung der Muskulatur und des Knochenaufbaus, das Wachstum von Haaren, Stimmbndern, Penis,

172

6. Steroide

Prostata und Samenblase. Testosteron ist unerllich fr die Funktion der akzessorischen Geschlechtsdrsen
und fr die Aufrechterhaltung von Potenz und Libido. Der erwachsene Mann erzeugt ca. 7 mg Testosteron/Tag,
im Organismus der Frau werden etwa 0.3 mg/Tag produziert. Androsteron [3-Hydroxy-5-androstan-17-on]
ist das wichtigste Abbau- und Ausscheidungsprodukt des Testosterons, das 1931 als erstes Androgen aus
Mnnerharn isoliert wurde [BUTENANDT und TSCHERNING]. Der Strukturbeweis gelang RUZICKA durch
Synthese des Acetates aus Cholesterinacetat. Bei Androsteron sind Keto- und Hydroxyfunktion gegenber
Testosteron vertauscht, auerdem fehlt die Doppelbindung im A-Ring. In der Prostata wird Testosteron durch
eine Reduktase zu 5-Dihydrotestosteron, dem aktiven Androgen der Prostata, reduziert. strogene hemmen
diese 5Reduktase-Aktivitt und werden bei Prostatakarzinomen eingesetzt. Androstendion [3,17-Dioxoandrost-4-en] ist ebenfalls ein Abbauprodukt der Androgene.
O

OH

OH

H
O

HO

O
H

Testosteron

Androsteron

5a-Dihydrotestosteron

Androstendion

Androgene weisen neben der geschlechtsspezifischen auch anabole Wirksamkeit auf [anabole Steroide], d.h.
sie frdern den Eiweiaufbau, vergrern die Muskelmasse, bewirken eine Erhhung der Stickstoffretention
und werden zur Kastrationsbehandlung eingesetzt. So regenerieren sich bei kastrierten mnnlichen Nagetieren
bei Androgentherapie die Samenblschen. Als Wirksamkeitstest fr Andorgene diente frher der sog.
Hahnenkamm- oder Kapaunentest: Die Androgenzufuhr bewirkt bei kastrierten Hhnen die Vergrerung des
vorher degenerierten Kammes, einem sekundren Geschlechtsmerkmal der Tiere.

Testosteron ist oral unwirksam, intramuskulr werden meist lnger wirksame Ester appliziert. Synthetische
Abwandlungsprodukte des Testosterons werden zur Entwicklung oral wirksamer Androgene, zur Trennung von
androgen und anabol wirksamen Komponenten, zur Entwicklung von Anabolika und zur Auffindung von
Substanzen mit antiandrogener Wirkung synthetisiert.

Die meisten Anabolika, die als aufbauende Mittel zur Muskelentwicklung eingesetzt werden und stark
reduzierte androgene Wirksamkeit besitzen, leiten sich strukturell vom Testosteron ab, wie z.B. 19-Nortestosteron, Metandienon oder Stanozalol. Anabole androgene Steroide wurden als Dopingmittel erstmals 1976
verboten und stellen die Gruppe der hufigsten verwendeten Dopingmittel dar. 1984 wurde auch die
Anwendung von krpereigenem, jedoch exogen zugefhrtem Testosteron verboten. Bei den Olympischen
Spielen 1994 in Atlanta wurden massenspektrometrisch innerhalb von 17 Tagen 1.900 Routineproben von
Sportlern genommen und analysiert. Anabolika werden auerdem bei Unterernhrung und in postoperativer
Behandlung verabreicht. Verwandte mnnlicher Sexualhormone wie z.B. Cyproteron [6-Chlor-17-hydroxy1,2-cyclopropa[1,2]pregna-4,6-dien-3,20-on]

und

Cyproteronacetat

[6-Chlor-17-acetoxy-1,2-

173

6. Steroide

cyclopropa[1,2]pregna-4,6-dien-3,20-on] werden als Antiandrogene (Testosteronantagonisten) bei der


Behandlung mnnlicher Hypersexualitt bis hin zu triebgestrten Mnnern [sog. hormonelle Kastration], zur
Therapie des vorzeitigen Eintritts der Geschlechtsreife [Pubertas praecox] und bei Prostatacarcinomen
eingesetzt. Weitere Anwendungen sind die Behandlung von Seborrhoe, schweren Formen der Akne und des
Hirsutismus, der zu starken Virilisierung (Vermnnlichung) der Frau.
CO-CH3

CO-CH3

OH

O-COCH3

Cyproteron
Cl

Cyproteronacetat
Cl

Die Entdeckung, da trchtige, Ratten bei Cyproteronapplikation scheinbar nur noch weibliche Junge zur Welt
brachten, und die folgerichtige Interpretation dieses Befundes als antiandrogenen Effekt zog in der ganzen Welt
mit dieser Substanz biologische Untersuchungen an androgenabhngigen Organsystemen nach sich.

Androstenderivate wie 3-Hydroxy-5-androst-16-en und 3-Oxo-5-androst-16-en scheidet ein sexuell erregter


Eber mit seinem Speichel aus, die als Riechstoffe anregend auf das weibliche Tier wirken (Duldungspheromon,
vgl. Pheromone).

6.12.2 Estrogene, Follikelhormone, weibliche Geschlechtshormone

Estrogene [strogene, lat. oestrus = Brunst], weibliche Geschlechtshormone, werden nach ihrem Hauptbildungsort auch Follikelhormone bezeichnet. Sie sind verantwortlich fr die Entwicklung der weiblichen
Geschlechtsorgane und fr die Regulation des ersten Abschnittes des weiblichen Menstruationszyklus. Sie
regulieren die Ausschttung der gonadotropen Hormone und stimulieren die Lipidsynthese. Zu den im
menschlichen Organismus zirkulierenden Estrogenen gehren Estradiol, Estron und das Estriol, ein Stoffwechselprodukt mit nur geringer estrogener Aktivitt. Charakteristische Strukturmerkmale sind die phenolische
C-3-OH-Gruppe und der aromatische A-Ring, der das Fehlen der 10-Methylgruppe bedingt. Estradiol
[stradiol, Estra-1,3,5(10)-trien-3,17-diol], das wirksamste Estrogen, wird in den Ovarien, wahrscheinlich in
den reifenden Follikeln, und whrend der Schwangerschaft in der Plazenta produziert und lst die Proliferation
des Endometriums, der Uterus-Schleimhaut, als erste Phase der Menstruation aus. Gemeinsam mit dem
Peptidhormon Relaxin bewirken die Estrogene die Erweiterung des Geburtskanals. Estradiol wird zur
Behandlung von Menstruationsbeschwerden und zur Therapie bei klimakterischen Beschwerden verwendet,
und nach der Menopause zur Behandlung von Brustkrebs und Osteoporose. Allgemein finden Estrogene
therapeutische Anwendung bei Estrogenmangelerscheinungen der Frau, wie z.B. bei Sterilitt und Frigiditt.

174

OH

6. Steroide

OH

OH
H

HO

HO

Estradiol

HO

Estron

Estriol

Estradiol wurde 1935 aus Ovarien [DOISY] isoliert, drei Jahre vorher wurde es bereits durch Reduktion des
Estrons [SCHWENK und HILDEBRANDT, 1932] gewonnen, Estron [stron, 3-Hydroxy -estra-1,3,5(10)-trien-17on] wurde erstmals 1929 aus Schwangerenharn [BUTENANDT, DOISY] isoliert. Spurenweise kommt es wie auch
Estriol [striol, Estra-1,3,5(10) -trien-3,16,17-triol] in einigen Pflanzen vor (z.B. im Palmkernl) und wird
heute technisch durch Partialsynthese aus Diosgenin, Sitosterin u.a. Steroiden bzw. vollsynthetisch hergestellt.
Im Harn werden die Estrogene als etherunlsliche Konjugate mit Schwefelsure oder Glucuronsure (vgl. 5.
Kohlenhydrate) ausgeschieden. Estriol ist ein Abbauprodukt der eigentlichen Estrogene Estradiol und Estron
und kommt mit diesen in Ovarien, Placenta, Schwangeren-Harn und Nebennieren vor. Im Harn trchtiger
Stuten wurden auerdem strker ungesttigte strogene wie Equilin [3-Hydroxy-estra-1,3,5(10),7-tetraen-17on], Equilenin [3-Hydroxy-estra-1,3,5,7,9-pentaen-17-on] und Estra-5,7,9-trien-3-ol-17-on nachgewiesen, im
menschlichen Urin tritt Equilenin nur in pathologischen Fllen auf.
O

H
HO

H
HO

Equilin

H
HO

Equilenin

Estra-5,7,9-trien-3-ol-17-on

Die Wirkung der Estrogene ist nicht sehr spezifisch, als Voraussetzung fr estrogene Wirkung gengt wahrscheinlich die Anwesenheit von zwei Hydroxygruppen in einem bestimmten Abstand im Wirkmolekl. Der
gleiche OH-Abstand wie in Estradiol ist auch bei Nicht-Steroid-Verbindungen gegeben, so wird zur
Erleichterung

von

Hormonmangelbeschwerden,

zur

Bekmpfung

von

Prostatakrebs

und

zur

Wachstumsanregung von Rindern synthetisches Diethylstilbstrol [Stilbstrol] verwendet. Hexstrol ist die
entsprechende Verbindung mit der hydrierten Ethylenbindung, Tri-p-anisylchlorethylen [TACE] ein im letzten
Jahrzehnt eingefhrtes strogen. hnlich sind verschiedene natrlich vorkommende Stilbenderivate wie z.B.
Rhaponticin oder manche Isoflavone wie Genistein estrogen wirksam. Estrogene in Futterpflanzen werden fr
das Auftreten von Fertilittsstrungen bei Weidetieren verantwortlich gemacht. Estrogen wirksame
Verbindungen sind auch im Moor sowie in lschiefern [Ichth-Estron] enthalten.

Inzwischen kennt man eine ganze Reihe von sowohl nichtsteroiden Synthesechemikalien als auch Naturstoffen,
die estrogenhnliche Wirkung besitzen und Einflu auf das Hormonsystem ausben. Kommen solche
Verbindungen in die Nahrungskette bzw. in die Umwelt, kann es zu Schdigungen der menschlichen
Gesundheit und Vernderungen des Reproduktionsverhaltens von Tieren fhren. Viele Pestizide, Herbizide und

175

6. Steroide

Fungizide sowie Phenole besitzen unerwnschte bzw. Verdacht auf unerwnschte Estrogenwirkung. Zu den
natrlich

vorkommenden

werden

Phytoestrogenen

z.B.

Citral,

Cumestrol,

Genistein,

Quercetin,

Tetrahydrocannabiol und Luteolin gezhlt, die in einer Vielzahl von Testsystemen estrogene Wirkung zeigten.

Estrogene beeinflussen sowohl die Kurz- als auch Langzeitaktivitt des Gehirns und wirken auf Lernen und
Gedchtnis. Klinische Studien zeigten eine Korrelation zwischen verbesserter Hirnleistung und dem Estrogenspiegel im Blut. Estrogengaben knnen damit auch das Risiko einer Alzheimerschen Erkrankung senken.

Estrogene werden bei oraler Gabe schlecht resorbiert und auerdem rasch abgebaut, therapeutisch werden
daher lnger wirksame Ester des Estradiols eingesetzt. Oral gut wirksame Estrogene wurden durch Einfhrung
einer Ethinylgruppe in 17-Stellung erhalten und finden Verwendung in Ovulationshemmern (vgl. 4.12.4).
Estra-1,3,5(10)-trien-3,16,17 -triol [Epi-Estriol] wirkt als Antagonist, das 17-Estradiol [-Estradiol]
hemmt die Sekretion des Hypophysenvorderlappens. Verschieden basisch substituierte Stilben-Derivate wirken
als Antiestrogene, dazu gehren Tamoxifen, das zur Behandlung von Mammakarzinomen eingesetzt wird.
OH
C2H5
OH

OH

C2H5

C2H5
H

C2H5
HO

C2H5

HO
HO

Hexstrol

Stilbstrol

-Estradiol

Tamoxifen

(CH2)2N(CH3)2

6.12.3 Gestagene, Schwangerschaftshormone, Gelbkrperhormone

Die Gestagene, auch Schwangerschaftshormone oder Gelbkrperhormone genannt, sind die zweite Gruppe der
weiblichen Geschlechtshormone. Sie werden whrend der Schwangerschaft [Graviditt] gebildet und
verhindern einen weiteren Eisprung. Als Gestagene, die fr die Vorbereitung der Uterusschleimhaut
[Endometrium] fr die Aufnahme des befruchteten Eies verantwortlich sind und deren Abstoung verhindern,
wirken das Progesteron [Gelbkrperhormon, Luteohormon] und das Pregnenolon. Das wichtigste
Schwangerschaftshormon, Progesteron [Pregn-4-en-3,20-dion], wird nach der Ovulation vom Gelbkrper
[Corpus luteum] der Ovarien sezerniert, ein Carotin-hltiges Gewebe, das sich nach dem Eisprung bildet und
etwa 2 Wochen bis zu seiner Rckbildung arbeitet. Im Falle einer Schwangerschaft wird das Corpus luteum
jedoch erst im 4. Schwangerschaftsmonat rckgebildet und die Progesteronproduktion anschlieend von der
Placenta bernommen. Die Progesteron-Bildung wird bei der Frau durch das Peptidhormon Lutotropin
gesteuert, bei manchen Tierarten ist Prolactin beteiligt (vgl. 10.

). Progesteron wird klinisch zur Verhtung

eines Abortus eingesetzt und zur Regulation bei Zyklusstrungen. Es ist Bestandteil von Ovulationshemmern
und

findet

Anwendung

in

der

tierischen

Reproduktion

(zur

Auslsung

der

Brunst

und

zur

176

Zyklussynchronisation

in

der

Tierhaltung).

6. Steroide

Pregnenolon

[3-Hydroxy-pregn-5-en-20-on]

entsteht

biosynthetisch aus Cholesterin und ist eine Vorstufe des Progesterons und der Androgene. In der Leber wird
Progesteron zum Pregnandiol [Pregnan-3,20-diol] abgebaut, das als Glucuronid ausgeschieden wird und
whrend der Schwangerschaft aus dem Urin der Frau isoliert werden kann. Verminderte Ausscheidung kann
auf eine drohende Fehlgeburt hinweisen.
18

20

20

CO-CH3

CO-CH3

20

H
OH

19
17
17

Progesteron

HO

HO

Pregnenolon

Pregnandiol

Die Gestagene wirken nach parenteraler Applikation nur kurz und werden bei oraler Applikation nur schlecht
resorbiert, Progesteron selbst ist oral appliziert inaktiv. Durch chemische Modifizierung werden geeignete
Verbindungen erhalten, die vor allem als Kontrazeptiva (6.12.4) Verwendung finden.

6.12.4 Ovulationshemmer, Kontrazeptiva, Antibabypille

Da die Produktion der gonadotropen Hormone der Hypophyse durch die zirkulierenden Steroide beeinflut
wird, lt sich durch Estrogen- und Gestagengaben die Ausschttung bestimmter Proteohormone unterdrcken.
Wird die Hypophysenttigkeit gebremst und kein Zwischenzellstimulierendes Hormon [Interstitialzellen stimulierendes Hormon ICSH] produziert, wird die Ovulation verhindert, man kann eine Pseudoschwangerschaft
erzeugen und damit die Befruchtung verhindern [Kontrazeptiva, Antibabypille]. Zur Blockierung der Peptidhormonsynthese

in

der

Hypophyse

gesellt

sich

noch

die

Verdickung

und

Auflockerung

der

Gebrmutterschleimhaut, die zustzlich das Vordringen der Spermien und die Fruchteinbettung verhindert.

Eine acyclische Dauertherapie fhrt zur kompletten Ausschaltung der Menstruation, jedoch auch zu
unerwnschten Epithelvernderungen und zur Rckbildung von Krperschleimhuten. Daher wird
blicherweise eine cyclische Behandlung gewhlt, d.h. man gibt bzw. enzieht die Hormone in den natrlichen
Zeitabstnden des Menstruationszyklus. Beim Absetzen des Hormons kommt es damit zur Abstoung des
Endometriums und zu einer Entzugsblutung. Um innerhalb dieses knstlichen Zyklus eine ausreichende
Endometrium-Umwandlung

zu

induzieren

und

Zwischenblutungen

zu

vermeiden,

werden

meist

Kombinationsprparate aus Estrogenen und Gestagenen angewandt. "Minipillen" dagegen enthalten nur
Gestagene und mssen acyclisch stndig eingenommen werden.

Wegen ihrer raschen Metabolisierung in den Verdauungsorganen wirken diese Ovulationshemmer oral nur
uerst schwach. Eine Wirkungssteigerung und verzgerte Metabolisierung weisen die von INHOFFEN und
HOHLWEG 1938 eingefhrten 17-Ethinylderivate von Estrogenen und Gestagenen auf. 17-Ethinyl-estradiol

177

6. Steroide

bzw. dessen 3-Methylether Mestranol z.B. ist ein hochpotentes Estrogen, das bis heute der estrogene
Bestandteil von Ovulationshemmern geblieben ist. Mit 17-Ethinyl-testosteron konnte das erste oral wirksame
Gelbkrperhormon

hergestellt

werden.

Spter

gewannen

DJERASSI

und

COLTON

17-Ethinyl-19-

nortestosterone wie Norethisteron [17-Ethinyl-19-nortestosteron] und Norethisteronacetat [17-Ethinyl-19nortestosteronacetat], die als gestagene Komponenten in Ovulationshemmern klinisch verwendet wurden.
OH

OH

OH
C

CH

CH

OCOCH3
CH

H
HO

H3CO

17-Ethinylestradiol

Mestranol

CH

H
O

Norethisteron

Norethisteronacetat

Formel 6-11. Estrogen- und Gestagenkomponenten in Ovulationshemmern.

.13 Nebennierenrinden-Hormone, Corticoide, Corticosteroide, Cortine

Nebennierenrinden-Hormone [Corticoide, Corticosteroide oder Cortine] werden in der Rinde der Nebennieren
[Cortex glandulae suprarenalis, NNR], zwei erbsengroen und lebenswichtigen Organen ber den Nieren,
unter dem Einflu des adrenocorticotropen Hormons [ACTH, Corticotropin] gebildet. ber 30 verschiedene
natrliche Nebennierenrinden-Hormone wurden identifiziert, aber nur wenige zeigen ausgeprgte Hormonwirkung, unter denen sich die die wirksamen Corticoide Cortison, Cortisol, 11-Dehydrocorticosteron,
Corticosteron, Cortexolon und Cortexon befinden, die anderen sind meist Biosynthese-Zwischenstufen oder
Abbauprodukte. Corticosteron und Cortisol machen ca. 60-95 % dieser Hormone aus. Cortinmangel fhrt zur
Bronzefrbung der Haut, zu Muskelschwche und Erhhung des Harnstoffgehalts im Blut. Bei Ausfall der
Nebennieren tritt innerhalb von wenigen Tagen der Tod ein. Cortin-berfunktion ergibt bei Kindern vorzeitige
geschlechtliche Entwicklung. Bei krperlichem oder seelischem Stre ist die Ausschttung von NebennierenHormonen besonders gesteigert, wobei Adrenalin, Noradrenalin und Cortin ausgeschieden werden. Alle drei
Hormone sind lebensnotwendig, die Bildung von Cortin ist jedoch wichtiger, da es nur von den Nebennieren
abgegeben wird, whrend Adrenalin und Noradrenalin auch aus anderen Organen abgegeben werden.

Bei hohen Dosen haben die Corticoide oft andere pharmakologische Eigenschaften, und es tritt die
entzndungshemmende und antiallergische Wirkung in den Vordergrund.
Alle Corticoide sind C21-Steroide der Pregnan-Reihe, besitzen eine ,-ungesttigte Carbonylgruppe im A-Ring
und eine Ketolseitenkette in C-17. Je nach Wirkung unterscheidet man Glucocorticoide, fr die eine zustzliche
11-Sauerstoff-Funktion typisch ist, und Mineralocorticoide. Erstere steuern den Kohlenhydrat- und
Zuckerstoffwechsel, stimulieren die Glucogenese und erhhen dadurch den Blutzuckerspiegel, letztere
regulieren den Mineralstoffwechsel und Elektrolythaushalt.

178

6. Steroide

Androgen wirken die Androcorticoide, zu denen Androstendion, Adrenosteron und Testosteron (vgl. 6.12.1)
gehren, die zwar hauptschlich als Keimdrsenhormone in den Hoden, aber zum Teil auch in der
Nebennieren-Rinde gebildet werden. Weibliche Analoge sind die Estrocorticoide (Estrogene).

6.13.1 Glucocorticoide

Die Glucocorticoide sind vor allem wegen ihrer entzndungshemmenden, antiallergischen, antirheumatischen
und immunsuppressiven Wirkung von Bedeutung. Die antiinflammatorische Wirkung der Corticoide wird jetzt
in der Therapie zahlreicher Krankheiten wie z.B. Rheumaerkrankungen, Asthma, Hepatitis, Nephrose und
verschiedene Blutkrankheiten genutzt. In der Dermatologie sind lokal wirksame Corticoide bei der Behandlung
von Hautkrankheiten unentbehrlich. Physiologisch vorkommende Glucocorticoide sind Cortison, Cortisol,
Corticosteron

und

11-Dehydrocorticosteron.

Cortisol

[11,17,21-Trihydroxy-pregn-4-en-3,20-dion,

Hydrocortison] besitzt die strkste glucocorticoide Wirkung, Corticosteron [11,21-Dihydroxy-pregn-4-en3,20-dion], das in der Nebennieren-Rinde durch zweifache Hydroxylierung aus Progesteron entsteht, und 11Dehydrocorticosteron [21-Hydroxy-pregn-4-en-3,11,20-trion] zeigen bereits eine gewisse mineralocorticoide
Aktivitt. Cortison [17,21-Dihydroxypregn-4-en-3,11,20-trion] wird seit ber 40 Jahren zur Behandlung
gegen Gelenksrheumatismus [Polyarthritis] verwendet. Trotz der Nebenwirkungen lassen sich durch gezielte
Dosierung und gezielte chemische Modifikation die unerwnschten Wirkungen soweit zurckdrngen, da die
Cortisonbehandlung heute erheblich risikormer ist als frher. Es wurde 1935 erstmals von Kendall aus
tierischen Nebennierenrinden isoliert, zur Gewinnung von 0.2 g Cortison bentigte man damals die Organe von
20.000 Rindern. Die erste Totalsynthese gelang WOODWARD und SARETT [1949-1952] aus Desoxycholsure.
Spter wurde die Struktur des Cortisons vielfach synthetisch modifiziert um Antirheumatica und
Antiphlogistica zu erhalten, bei denen gleichzeitig die ungewnschte glucocorticoide und mineralocorticoide
Wirkung zurckgedrngt ist.
OC

OC

CH2OH
R

HO

CH2OH
O

R = OH: Cortisol
R = H: Corticosteron

R = OH: Cortison
R = H: 11-Dehydrocorticosteron

6.13.2 Mineralocorticoide

Den Mineralocorticoiden fehlt die C-11-Sauerstoffunktion der Glucocorticoide, sie regulieren den Wasser- und
Mineralstoffhaushalt des Organismus. Natrlich vorkommende Mineralocorticoide sind die Corticoide
Cortexon [21-Hydroxy-pregn-4-en-3,20-dion, Desoxycorticosteron, Desoxycorton] und Cortexolon [17,21Dihydroxy-pregn-4-en-3,20-dion], und als wirksamstes Mineralocorticoid das erst 1953 aus Nebennieren-

179

6. Steroide

Extrakt isolierte Aldosteron [11,21-Dihydroxy-3,20-dioxo-pregn-4-en-18-al]. Aus 1.000 kg Rindernebennieren


erhielt man 56 mg Aldosteronacetat [1953]. Aldosteron liegt als Halbacetal im Gleichgewicht mit der
tautomeren Hydroxyaldehyd-Form vor. Es beeinflut das Na+/K+-Gleichgewicht, eine Aldosteron-berfunktion
fhrt zu verstrkter Natrium- und damit Wasserretention sowie zu einer daraus resultierenden K+Ausscheidung. Aldosteronmangel hingegen fhrt zu Natriumverlust. Beim Herzinfarkt und bei Leberzirrhose
tritt erhhte Aldosteron-Ausscheidung auf; im letzteren Falle bewirkt dies eine erhhte Wasser- und
Salzretention. Aldosteron wird als Therapeutikum gegen die Addinsonsche Krankheit eingesetzt. Es wird
kompetitiv

durch

das

synthetisch

gewonnene

17-Spirolacton

Spironolacton

gehemmt,

das

bei

Hyperaldosteronismus diuretisch wirkt. Cortexonester werden als mineralocorticoide Hormone medizinisch


verwendet. Als lhmende Waffe setzen Gelbrandkfer Cortexon gegen Fische ein. Dabei verfgt ein Kfer ber
ebensoviel Cortexon, wie in den Nebennieren von 750 Rindern enthalten ist.
OH
OC

O
OC

CH2OH

OC

CH2OH

CH2OH

O=HC

O
HO
H

H
O

R = H: Cortexon
R = OH: Cortexolon

Aldosteron

S-COCH3

Spironolacton

.14 Ecdysone als Hormone in Insekten und Krebsen und als Phytoecdysteroide in Pflanzen

Ecdysone sind eine Klasse von Steroiden mit Hormonwirkung bei Insekten [Ecdysteroide]. Sie lsen bei den
Insekten Hutungsprozesse aus und sind als Verpuppungs- oder Hutungshormone fr die Entwicklung der
einzelnen Larvenstadien verantwortlich. Im Gegensatz zu den Juvenilhormonen (9.

) steuern sie sowohl die

Larven- als auch die Puppenhutung zum fertigen Insekt [Imago]. Das erste Hutungshormon -Ecdyson
[(22R)-2,3,14,22,25-Pentahydroxy-5-cholest-7-en-6 -on] wurde von A. BUTENANDT und P. KARLSON 1954
aus den Prothoraxdrsen von Puppen des Seidenspinners Bombyx mori [Bombycidae] isoliert, 25 mg konnten
aus 500 kg Puppenmaterial gewonnen werden. Charakteristisch fr die Ecdysone ist die 14-Hydroxygruppe.
Das etwa doppelt so stark wirksame -Ecdyson [20-Hydroxyecdyson, Ecdysteron] wurde ebenso aus Insekten
isoliert und ist identisch mit dem Hutungshormon der Krebse [Crustecdyson]. In ca. 1.000mal hheren
Konzentrationen wurden Ecdysone in Pflanzen [Phytoecdysteroide], vor allem in Farnen, Eiben, Eisenkraut und
Fuchsschwanzgewchsen, mit Wirkung als Insektenhormone nachgewiesen. Aus Conifere podocarpus wurde
das Ponasteron isoliert.

180

6. Steroide

OH

OH
HO

R=
OH

-Ecdyson

-Ecdyson

HO
OH

OH

HO

HO

OH
OH

HO
H

Ponasteron A
O

OH

Lemmasteron

.15 Brassinolide, Pflanzenhormone mit Steroidstruktur

1979 erschien ein Bericht ber ein pflanzliches Wachstumshormon, das aus Pollen von Raps [Brassica napus]
isoliert wurde. Die Konstitution wurde durch Rntgenstrukturanalyse geklrt und die Verbindung Brassinolid
bezeichnet. Brassinolide sind damit Pflanzenhormone mit Steroidstruktur, die in Konzentrationen von
10g/Pflanze das Pflanzenwachstum frdern. Bemerkenswert sind die 22R-Hydroxygruppe und das siebengliedrige B-Ring-Lacton, das bisher noch in keinem anderen natrlichen Steroid gefunden worden ist. Auch
hier wurden entsprechende Analoga gefunden.
R

OH

OH

HO
H
HO

R = CH3
R=H
R = C2H5

Brassinolid
28-Norbrassinolid
Brassinon

.16 Partialsynthesen, mikrobiologische Umwandlungen und Totalsynthesen von Steroiden

Whrend man die herzwirksamen Glykoside berwiegend aus pflanzlichem Material gewinnt, werden Steroidhormone heute ausschlielich partial- oder totalsynthetisch gewonnen. Viele Syntheseabwandlungsprodukte
sind aufgrund ihrer strkeren Wirkung (z.B. Corticoide), ihrer spezifischeren Wirkung (z.B. Anabolika) oder
ihrer besseren oralen Wirksamkeit (z.B. 17-Ethinylderivate) fr den therapeutischen Einsatz besser geeignet
als die natrlichen Verbindungen.

6.16.1 Partialsynthesen

Fr Partialsynthesen dienen meist billige pflanzliche Steroid-Rohstoffe als Ausgangsverbindungen, vor allem
das in groer Menge in Mexiko aus Dioscorea-Wurzeln isolierte Spiroketal Diosgenin (z.B. Formel 6-8).
Wesentlich teurer ist aus dem Rckenmark von Rindern und Schweinen oder dem Wollfett der Schafe
gewonnene Cholesterin (z.B. Formel 4-19). Ferner werden Gallensuren (z.B. Desoxycholsure, 4.8.2),
pflanzliche Saponine (6.7), das Steroidalkaloid Solasidin (aus Sojabohnen oder Zuckerrohrwachs) und die

181

6. Steroide

Phytosterine Stigmasterin (Formel 6-5) und Sitosterin (Formel 6-6) eingesetzt. Letzteres kommt auerdem in
grerer Menge im Neutralanteil des bei der Papierherstellung anfallenden Tallls vor.

Tabelle 6-5. Rohstoffquellen fr die Partialsynthese von Steroiden


Steroid

Rohstoffquelle

Diosgenin
Solasodin
Hecogenin
Stigmasterin und Sitosterin
Sarsasapogenin
Gallensuren
Cholesterin
Lanosterin
Ergosterin

Dioscorea-Arten (Mexiko)
Solanum marginatum (thiopien/Ostafrika)
Agave sisalana (Kenia)
Sojabohne, Zuckerrohrwachs und Talll
Yucca
Rindergalle
Rckenmark von Rindern, Wollfett von Schafen, Fischle
Wollfett von Schafen
Hefen

Die Seitenkette des Diosgenin lt sich nach MARKER (6.12.2.1) abbauen und fhrt zum wichtigen
Zwischenprodukt Dehydropregnenolonacetat, das sich zu Progesteron umwandeln lt. Aus Pregnenolon ist
weiters Androstenolonacetat erhltlich (Formel 4-4), ein wichtiges Zwischenprodukt fr die Synthese von C19Steroiden wie z.B. Testosteron (4.12.1.1) und der Estrogensynthese (Formel 4-7). Androstenolon ist auch durch
oxidativen Abbau von Cholesterin zugnglich.

6.16.2 Mikrobiologische Umwandlungen

Durch Mikroorganismen knnen Steroide umgewandelt werden durch


- Spaltung oder Verknpfung von CC-Bindungen, z.B. mikrobiologicher Abbau der C-17-Seitenkette des
Cholesterins zum Androstadeinon (Formel 4-10),
- Einfhrung, Verschiebung oder Hydrierung von Doppelbindungen, z.B. bei der 1,2-Dehydrierung des
Cortisons

zu Prednison

- Einfhrung oder Abspaltung, Oxidation oder Veresterung von Hydroxygruppen, z.B. 11--Hydroxylierung
von

Progesteron durch Rhizopus nigricans zur Cortisonsynthese (Formel 4-12), Hydroxylierungen in 16- (

oder ), 17- oder 21-Position (Corticoidsyntesen), sowie


- Bildung und Hydrierung von Carbonylgruppen.

Mikrobiologische Umwandlungen zeichnen sich hufig durch eine hohe Selektivitt aus und knnen in
geeigneten Fermentern in groen Mengen angesetzt werden. Zur Durchfhrung einer mikrobiologischen
Synthese wird z.B. das Ausgangssteroid in einem mit Wasser mischbaren organischen Lsungsmittel gelst und
zur Kulturlsung geeigneter Mikroorganismen zugegeben. Nach erfolgter Umwandlung wird das Steroid mit
einem organischen Lsungsmittel extrahiert. Industrielle Bedeutung haben vor allem

182

6. Steroide

- Hydroxylierungen in 11- ( oder , z.B. Formel 4-12), 16 ( oder ), 17- oder 21-Stellung (Corticoid
synthesen),
- Einfhrung einer Doppelbindung in 1-Position (1,4-Diene, Formel 4-8),
- Hydrierung einer Carbonylfunktion zur Hydroxygruppe (4.12.1.1) sowie
- Abspaltung der C-17-Seitenkette (Formel 4-9).

6.16.3 Totalsynthesen

Steigende Preise fr Rohstoffe von Partialsynthesen und Fortschritte auf dem Gebiet stereospezifischer
Synthesen bewirkten die Entwicklung einer Vielzahl von Steroidtotalsynthesen. Vor allem strogene werden
zu einem nicht unbetrchtlichen Anteil heute totalsynthetisch gewonnen. Bei diesen Totalsynthesen kann man
z.B. von Ein- oder Zweiringsystemen ausgehen und die anderen Ringelemente ankondensieren (z.B. AB
ABC ABCD), oder in einer biomimetischen Cyclisierung analog der Squalencyclisierung alle vier Ringe in
einem Reaktionsschritt aufgebaut. Im folgenden sollen exemplarisch verschiedene dieser Strategien dargestellt
werden.

Die erste Totalsynthese eines Steroids war die Synthese des Equilenins von BACHMANN [1939], ausgehend
vom Zweiringsystem AB und sukzessiver Kondensation von Ring C und D.
O

COOH
O

H3CO

H3CO

H3CO

Von 2-Methyl-cyclopenta-1,3-dion als Ring-D-Baustein geht eine Synthese von CRISPIN und WHITEHURST
sowie von HUGHES ans SMITH aus. Durch MICHAEL-Addition wird das cyclische Keton an Methylvinylketon
angelagert und in Gegenwart von L-Prolin eine asymmetrische Aldolreaktion zum CD-Ringsystem
durchgefhrt. Alkylierung und Cyclisierung fhrt zum Steroidgerst.
O

O
O

L-Prolin

H+ /

+
O

O
O
HO
O
O

C
C
A

H3CO

H3CO

Das gleiche Cyclopentadion wird in einer auf TORGOV und WINDHOLZ zurckgehenden Synthese
surekatalysiert auf einen Allylalkohol addiert (TORGOV-Reaktion), der durch Grignardreaktion aus einem 6Methoxy-1-tetralon als AB-Element entsteht. Mikrobiologische asymmetrische Reduktion bringt die richtige

183

6. Steroide

Konfiguration der natrlichen Steroide fr die Atome C-13 und C-17, Cyclisierung ein Ausgangsprodukt fr die
Darstellung von Estrogenen und 19-Nortestosteronen.
O
O

O
OH

VinylmagnesiumA

bromid
H3CO

TORGOV-

H3CO

Reaktion

H3CO

OH

OH
H

HO

H3CO

H3CO

Fr die Totalsynthese von Estrogenen ist Estradiolmethylether, der wie oberhalb aus 6-Methoxy-1-tetralon
dargestellt wird, das wichtige Zwischenprodukt mit dem Steroidskelett. Entmethylierung gibt stradiol,
OPPENAUER-Oxidation und Ethinylierung Mestranol, Entmethylierung des Estron-3-methylethers gibt Estron,
das zu Ethinylestradiol ethinyliert werden kann.
O

H+
O
H3CO

H3CO
O

OH

1. NaBH4

H2

H3CO

2. BIRCHReduktion

H3CO

Eine groartige Syntheseleistung unter schrittweisem Aufbau des Ringsystems stellt die WOODWARD-Totalsynthese dar. Diese Methode besitzt allerdings heute nur noch theoretisches Interesse. Ausgehend von der
primr entstehenden Androstan-17-carbonsure sind die meisten anderen Steroidderivate zugnglich (Formel
6-13).
Eine moderne diastereoselektive Synthese sei am Beispiel von Estron demonstriert (AB ABD ABCD).
6-Methoxy-1-tetralon wird mit Vinylmagnesiumchlorid zum Allylalkohol 63 (vgl. TORGOV-Reaktion)
umgesetzt. Unter milden Bedingungen kann der D-Ring an das AB-Ringsystem zu 64 angelagert werden.
Umsetzung mit HCl/CH3OH ergibt das Estrogenringskelett 65 als Racemat. Die katalytische Hydrierung wird
durch die 18-Methylgruppe gesteuert. Im natrlichen Estron steht C-18 -stndig (nach vorne) und das 14-HAtom -stndig

184

6. Steroide

OH

H+

LiAlH4

1. NaOH
C

2. HCl
H3CO

H3CO
O

HO

Zn
C

H3CO

H3CO
H

HCOOR

Ac2O
O

OK

O
H

HO

H
O=HC

2.

CH2=CH-CN

1. HCOOEt

Pd / SrCO3

H2

1. OsO4

2. Aceton

- HCOOH
- H2O

CH3
HN
C6H5

NC

Triton B

O
HC

HC

N
C6H5

C6H5
O
C

NaOH

1. CH3MgBr

Ac2O

HIO4
O

NaOAc

2. NaOH

HOOC
O

O
CHO

COOCH3

CHO
C

CHO
B

Piperidin /
Eisessig

COOCH3

COOCH3

HOAc
O

COOCH3
H

Diastereomerentrennung

CrO3
HO

Pt / H2

2. CH2N2

Benzol

1. Oxidation

H
O

()-Androstan17-carbonsuremethylester

Formel 6-13. Totalsynthese von ()-Androstan-17-carbonsuremethylester


(nach hinten). Die Hydrierung des 18-Produkts erlaubt nur einen Angriff an der -Seite, es entsteht die
natrliche Konfiguration in 67. Unter den verwendeten Hydrierbedingungen wird die 8,9-Doppelbindung nicht
angegriffen. Die Umsetzung mit Kalium in flssigem Ammoniak liefert durch Reduktion das thermodynamisch
stabilere trans-Produkt 68 (9, 8 im nativen Estrogen). Gleichzeitig wird das 17-Keton zum 17-Alkohol
reduziert. Oxidation mit CrO3 und Abspaltung des 3-Methylesters gibt das Estron (Formel 6-14).

185

6. Steroide

O
O

OH

HCl

H2C=C-MgCl

H3CO

H3CO

O
H3CO

63

64

6-Methoxy-1-tetralon
O

H
O

H+
- H2O

OH
H+

H3CO

H3CO

H3CO

65

H2 / Pd

66

OH

H
1. CrO3

K / NH3
H
H3CO

2.

H
NH3Cl

H3CO

67

68

H3CO

()-Estron

Formel 6-14. Diastereoselektive Estronsynthese.

Ein Aufbau des Steroidgersts in einer Stufe als biomimetische Cyclisierung in Anlehnung an die Squalencyclisierung liegt den folgenden Synthesen zugrunde. Betrachtet man als Beispiel die Cyclisierung von Squalenoxid,
kann man diesen Proze als trans-antiparallele elektrophile Addition an die olefinische Doppelbindung
auffassen. Allerdings bedingt die enzymatische Reaktion eine selektive Protonierung am Epoxid und ebenfalls
eine selektive ffnung dieses Oxirans. Nun gelang unter nichtenzymatischen Bedingungen, geeignete
Bedingungen zu finden, in denen aus all-trans-Doppelbindungen eine all-trans-Cyclisierung stattfindet. Die
Umsetzung des Tetraenacetals mit SnCl4 in Pentan ergibt ein Gemisch von zwei kristallinenen tetracyclischen
D-Homosteroid-Epimeren, die stereochemisch ausschlielich zur all-trans-Reihe gehren. Bei dieser Reaktion

bilden sich sieben Asymmetriezentren und trotzdem entstehen nur zwei von 64 mglichen Racematen.

4-all-transRacemat
H

O H
H
SnCl4

4-all-transRacemat

HO
H

O
+

O H

HO

Diese Stereoselektivitt wird nach STORK-ESCHENMOSER durch die Annahme erklrt, da die energetisch
bevorzugte Konformation im bergangszustand die Sesselkonformation ist.

186

R1 = HO

R2 = H

R2 = HO

R1 = H

6. Steroide

O
H
HO
R1
R2

Bei Cyclisierungen zu Dekalin-Derivaten konnte allgemein nachgewiesen werden, da jeweils aus einer transDoppelbindung trans-Dekalin und aus einer cis-Doppelbindung cis-Dekalin als racemische Produkte entstehen
[JOHNSON].
H
O

CHO

HCOOH

trans-Dekalin
Racemat
O

SO2

NO2
H
H
O

HCOOH

CHO

cis-Dekalin
Racemat
O

SO2

NO2
H

Mit dieser Methode gelingt z.B. die Synthese des ()-Dehydroprogesteron. Der Aufbau des Tetraengersts
startet mit der Umlagerung eines Vinylallylethers 69 zu einem ,-ungesttigten Aldehyd 70. Anlgerung von 2Propenyllithium und Angliederung von Propargylmagnesiumbromid ergibt 73. Umsetzung mit Methyllithium
zum Acetylid fhrt durch nucleophile Substitution des Bromids 75 und anschlieende Abspaltung der
Carbonylschutzgruppen zu einem Trien-diketon 77. Intramolekulare Aldolkondensation ergibt ein Tetraen 78,
das unter den Bedingungen, die oben diskutiert wurden, mit einer Lewissure zu einem Vierringsystem 79
cyclisiert werden kann. Reakton mit OsO4 zum cis-Diol und Pb(OAc)4-Spaltung zur Tetracarbonylverbindung
80 fhrt nach anschlieender Aldolcyclisierung zu rac-16-Dehydroprogesteron (Formel 6-15).

187

[3,3]sigmatrope
Umlagerung

6. Steroide

SOCl2

Li

Cl

HC C-CH2-MgBr

HO

69

70

71

73

72
O

1.
O O

CH3Li

Br

H+

O O

1. NaOH

75
CLi

74

2. CH3Li

2. Na / NH3

76
O

77

O
O
O
H
H
CHO

SnCl4

1. OsO4
H
H

CH3NO2

79

78
HO

2. Pb(OAc)4

80

H+

O
H

KOH

()-16-Dehydroprogesteron

Formel 6-15. Diastereoselektive Synthese von (')-Dehydroprogesteron.

WITTIG-Olefinierung des Phosphorans 81 mit Aldehyd 82 ergibt das Dienin 83. Nach Abspaltung der Schutzgruppen, intramolekularer Aldolkondensation und anschlieender Addition von Methyllithium resultiert das
Zwischenprodukt 86, aus dem die Darstellung von Progesteron und Androsteron mglich ist. Die Cyclisierung
erfolgt durch Abspaltung des tertiren Alkohols und nucleophilen Angriff an der Dreifachbindung mit dem
Trifluoracetatanion. Die Cyclisierung mit Trifluoressigsure ergibt eine all-trans-Konfiguration (87) unter
Ausbildung des fnfgliedrigen Ringes. Die Ozonolyse ergibt Ringspaltung im A-Ring und das 17-Keton 88, die
folgende Aldolkondensation fhrt zum rac-Androsten-3,17-dion.

188

6. Steroide

O
B|

H+

+
+
P(C6H5)3
O

O
O=HC

81

83

82

84
O
O
OCOCF3
O

C CF3
H

CH3Li

NaOH

CF3COOH
Pentan
140 C

85
HO

86

H+

87

1. O3

KOH

2. Zn / HOAc

CH3OH

O
O

()-Androsten-3,17-dion

88

Formel 6-16. Synthese von ()-Androsten-3,17-dion.

Zum Progesteron gelangt man durch Cyclisierung von 86 mit Trifluoressigsure und Ethylencarbonat 89 als
Nucleophil, wobei nach der Hydrolyse das all-trans-Produkt 90 entsteht. Das aus dem Enol resultierende 20Keton 91 weist zu 67% die thermodynamisch stabilere 17-Konfiguration auf. Ozonolyse und anschlieende
basische Cyclisierung liefert rac-Progesteron.
O

H
O

O
H

10 % K2CO3

CF3COOH
HO

H+

O
1. O3
2. Zn
3. KOH / CH3OH

H
O

()-Progesteron

Die Problematik fr die technische Anwendbarkeit dieser Synthesen ist im Auftreten von Racematen
begrndet; abgesehen vom Aufwand der Trennungsoperationen selbst ist damit immer auch der Verlust von 50
% Substanz verbunden, was die Wirtschaftlichkeit der Verfahren beeintrchtigt.

Eine der erfolgreichsten enantioselektiven Totalsynthesen ist die von (R)(+)-Norgestrel, einem Gestagen, das
als Kontrazeptivum (6.12.4) angewandt wird. In diesem Fall wird das erste chirale Zentrum durch eine stereo-

189

6. Steroide

selektive mikrobiologische Reduktion erzeugt. Ausgehend von 6-Methoxy-1-tetralon wird mit Vinylmagnesiumchlorid ber den Allylalkohol in einer MICHAEL-Reaktion mit 2-Ethylcyclopentan-1,3-dion 92 ein
Zwischenprodukt 93 erhalten, das an C-14 und C-17 zwei prochirale Zentren besitzt. Durch Reduktion der C17-Ketonfunktion mit Saccharomyces uvarum, die sowohl regio- als enantioselektiv verluft, werden C-13 und
C-17 in 94 chiral. Die nach der Acetylierung erfolgende Cyclisierung produziert keine neuen
Asymmetriezentren. Hydrierung der 14-Doppelbindung erfolgt von der sterisch weniger gehinderten -Seite,
d.h. die zwei Asymmetriezentren steuern die Einfhrung eines weiteren asymmetrisch substituierten
Kohlenstoffs in 96. Reduktion mit Lithium in Ammoniak ergibt die thermodynamisch stabilere transVerknpfung (9,8) des B/C-Ringes und BIRCH-Reduktion des aromatischen A-Ringes in 98. OPPENAUEROxidation und Angriff des Lithiumacetylids, ebenfalls von der weniger gehinderten -Seite, ergeben nach der
Spaltung des Methylvinylethers und Isomerisierung der 5(10)-Doppelbindung stereochemisch einheitlich
(R)(+)-Norgestrel (Formel 6-17).

OH

Saccharomyces
uvarum

1. Ac2O

1.
MgCl
2. NaOH
O
3.

2. TosOH

CH3O

CH3O
O

93

CH 3O

94

92
OAc

OH

OAc
Pd(CoCO3)

KOH

H2

CH3OH

Li
NH3
H

H
CH3O

CH 3O

95

CH3O

96

97

OH

LiC CH / THP
Al(iso-C3H7)3

H
CH3O

H2N

NH 2

98

99

CH3O

OH

OH
H

H+
H

(+)-Norgestrel
CH3O

100

Formel 6-17. Enantioselektive Synthese von ()-Norgestrel.

Eine andere Methode um enantiomerenreine Produkte zu erhalten, besteht in einer stereoselektiven


Cyclisierung. Hierzu mu in der Ausgangsverbindung bereits ein chirales Zentrum vorhanden sein, das die
Bildung eines weiteren steuert (Substratkontrolle). Ausgehend von Lacton 101 wird das bentigte chirale
Zwischenprodukt dargestellt. Die Umsetzung mit Vinylmagnesiumchlorid ergibt ein Vinylketon 102, das

190

6. Steroide

anschlieend mit (-)-S--Methylbenzylamin 103 zwei diastereomere Produkte 104 und 105 ergibt, die getrennt
werden knnen. Abspaltung der chiralen Hilfsgruppe aus 104 ergibt 106. Ausgehend von 106 wird das
Steroidgerst aufgebaut. Umsetzung mit 2-Methylcyclopentan-1,3-dion ergibt ber die nucleophile Substitution
des Methylethers und Eliminierung des tertiren Alkohols, die Mglichkeit der Cyclisierung durch Angriff der
Enolether-Doppelbindung am Keton in 107. Von den zwei mglichen Konformationen im bergangszustand ist
B die stabilere. In A findet eine sterische Wechselwirkung zwischen dem Keton und der Seitenkette am
chiralen Zentrum statt. Die Reaktion von B bedingt aber, da die sptere C-18-Methylgruppe nach oben, also stndig (in 108) ist. Die Reduktion von 108 mit LiAlH4 erfolgt von der sterisch weniger gehinderten -Seite
zum -Alkohol 109. Anschlieende Hydrierung erfolgt, bedingt durch die -stndige Methyl- und
Hydroxygruppe, von der -Seite zu 110. Spaltung des Vinylethers 110 und Oxidation ermglicht durch eine
intramolekulare Aldolkondensation den Aufbau des B-Ringes in 112. Erneute Hydrierung und sauer
katalysierte Abspaltung der Carbonylschutzgruppe mit anschlieender Aldolkondensation ergibt das (+)-19Norandrost-4-en-3,17-dion.

191

6. Steroide

C6 H5

O
O

MgCl
O

103

OH

H
NH2

H3C

102

101

C6H5

C6H5
H3C

H3C
H

N^H

NH

HO
O

OH

104

105

C6H5-CHO / CH3OH
NaHCO3 /
O
O

CH3O

O
O

O
HO
O

O
HOAc
/ 8h
Toluol

107

106
O

Hauptprodukt 108
H

n-Bu
OH
LiAlH4

OH
O

1. H+

Ph / H2

108

KOH
O

2. CrO3

H
R

111

110

109

O
H

O
H

O
H

Reduktion

H+ /
H

112

113
(+)-19-Norandrost-4-en-3,17-dion

Formel 6-18. Enantioselektive Cyclisierung zu (+)-Norandrost-4-en-3,17-dion.

Eine andere enantioselektive Variante des Aufbaus des C-Ringes erfolgt durch Reagenzienkontrolle mit einem
chiralen Katalysator. Die Anlagerung von 2-Methylcyclopentan-1,3-dion an das ungesttigte Keton 114 ergibt
das Triketon 115. Dieses wird unter Verwendung von L-Prolin als Hilfsreagenz zu 116 cyclisiert. Der
Mechanismus erfolgt ber ein Enamin, in dem das chirale Amin einen diastereomeren bergangszustand mit
einer bestimmten Konformation stabilisiert. Die Hydrierung von 116 wird von der Methylgruppe in -Stellung

192

6. Steroide

gesteuert. Lactonbildung und Umsetzung mit der Grignard-Verbindung 119 ergeben mit 120 ein hnliches
Zwischenprodukt, wie es auch in der vorher beschriebenen Synthese auftritt.
COOH

COOH

COOH

O
NH

NH
N

+
HOOC

OH

O
O

HOOC

HOOC

HOOC

116

115

114

OH

OH
OH
O
O
MgCl

Pd / H2

- H2O

O
HOOC

H
H

119
117

118

120

.18 Literatur

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194

7. Eicosanoide

7. Eicosanoide
7.1 Arachidonsure-Metabolismus

Mehrfach-ungesttigte Fettsuren dienen im Organismus als Vorstufen einer Vielzahl reaktiver Regulationsstoffe, die sich von der Arachidonsure, (5Z,8Z,11Z,14Z)-5,8,11,14-Eicosatetraensure (2.1.3), und wahrscheinlich auch weiteren mehrfach-ungesttigten C20-Fettsuren ableiten. Mit ihren 20 C-Atomen werden sie
als Eicosanoide zusammengefat. Arachidonsure wird auf zwei Wegen, dem Cyclooxygenase- und dem
Lipoxygenase-Weg enzymatisch metabolisiert, wobei kaskadenartig eine Reihe biologisch aktiver Metaboliten
entstehen (Abb. 6-1). Die Aufklrung von Struktur und Funktion der Eicosanoide geht im wesentlichen auf
Arbeiten von S. BERGSTRM, B. SAMUELSSON, und J.R. VANE (Medizin-Nobelpreise 1982) zurck.

Arachidonsure
Cyclooxygenase-Weg

Lipoxygenase-Weg

Endoperoxide (PGG, PGH)

Hydroperoxysuren (HPETE)

Prostaglandine (PGE, PGF)

Leukotriene (LTA-E)

Thromboxane (TXA, TXB)

Hepoxiline (A, B)

Prostacyclin (PGI)

Trioxiline (A, B)
Lipoxine (LPA, LPB)

Abbildung 7-1. Cyclooxygenase- und Lipoxygenase-Weg des Arachidonsure-Metabolismus.

Durch Cyclooxygenase entstehen cyclische Metaboliten, Primrprodukte sind die Endoperoxide, die
anschlieend enzymatisch zu Prostaglandinen, Thromboxanen bzw. Prostacyclinen umgewandelt werden.
Durch Lipoxygenasen entstehen acyclische instabile, mehrfach-ungesttigte Hydroperoxysuren, die weiter zu
Leukotrienen, Hepoxilinen, Trioxilinen und Lipoxinen metabolisiert werden. Die Prostaglandine,
Thromboxane, Prostacycline und die Leukotriene nehmen eine Mittelstellung zwischen klassischen Hormonen
und Transmittersubstanzen ein und werden als "lokale Hormone" bezeichnet wurden.

7.2 Cyclooxygenase-Weg

7.2.1 Endoperoxide als Vorstufen zu Prostaglandinen, Thromboxanen und Prostacyclinen

Bei der Bildung der Endoperoxide werden durch Cyclooxygenase [COX] zwei Molekle Sauerstoff radikalisch
unter Bildung des Endoperoxids PGG2 an Arachidonsure angelagert. Aus PGG2 entsteht durch die Peroxidase194

195

Aktivitt der Cyclooxygenase das PGH2

7. Eicosanoide

(vgl. 7.5 Biosynthese der Eicosanoide). Aspirin hemmt die

Cyclooxyxenase und mglicherweise weitere Enzyme und verhindert die Umwandlung von Arachidonsure zu
Prostaglandinen (7.2.2), Thromboxanen (7.2.3) und Leukotrienen (7.3.1)

COOH

O.

O
R

O.

OH
H

O
H

Arachidonsure
R

H+ + e-

R'

R'

.O

R
R'

R'

.
O.

R'

R''

PGG2

O-OH

PGH2

OH

Endoperoxide werden durch Wasser oder Alkohole zu den Levuglandinen [LG] zersetzt. Diese Ketoaldehyde
[LGE2, LGD2] gehen unter Wasserabspaltung in die stabileren Anhydroderivate 1 und 2 ber.
O

O
O

R'

R'

R'

+
R''
OH

HC
O

O
HC

R''

R'

R''
O

OH

R'

+
R''

HC
O

OH

HC

- H2O

R''
O

7.2.2 Prostaglandine

7.2.2.1 Vorkommen, Funktion und Struktur

Prostaglandine sind eine Familie hormonhnlicher Sbustanzen und stellen gemeinsam mit den Leukotrienen
sicher die pharmakologisch bedeutsamste Gruppe der Eicosanoide dar. Sie besitzen im tierischen Organismus
eine Reihe regulatorischer Aktivitten, ihre Entdeckung erfolgte 1935 durch den schwedischen Physiologen
U.S. VON EULER und durch GOLDBLATT als saure, lipidlsliche Substanz in der Prostatadrse und in Samenblschen von Schafen und Menschen. Prostaglandine sind nahezu ubiquitr im Gewebe und Organen von
Sugetieren in sehr geringen Konzentrationen [0.001 - 1 g/g] vorhanden, hhere Konzentration [100 - 300
g/g] erreichen sie in der Samenflssigkeit. Mit bis zu 1.5% des Trockengewichtes kommen sie in
Hornkorallen der Karibik vor und sind auch in hheren Pflanzen nachgewiesen worden.

Prostaglandine beeinflussen in geringsten Konzentrationen den Blutdruck und wirken auf die Kontraktion
glatter Muskulatur ein. Sie beeinflussen die Herzfrequenz und das Schmerzempfinden, stimulieren die
Uterusmuskulatur und frdern die Bildung von cyclischem AMP. Sie werden in der Gynkologie zur Einleitung
der Wehen und zum klinischen Schwangerschaftsabbruch eingesetzt. Die Prostaglandine E [PGE] lhmen die
Unteruskontraktion, wirken geferweiternd, lindern Bronchialasthma und dienen zur Behandlung von
Erkrankungen des peripheren Gefsystems. Prostaglandine F [PGF] hingegen stimulieren die Uteruskontraktion, erhhen den Blutdruck und bewirken Fruchtaustreibung. PGE-Analoga sind aufgrund ihres cyto-

195

196

7. Eicosanoide

protektiven Effektes zum Schutz des Magen-, Herz- Leber- und Gehirngewebes gegenber aggressiven
Agenzien interessant geworden. Durch Dimethyl-PGE2 knnen auch Leber- und Nierenzellen vor Nekrosen
geschtzt werden, wie sie z.B. durch CCl4 verursacht werden.

Prostaglandine knnen Antagonisten bestimmter Hormone sein, so wird in der Tierzucht wird PGF2 zur
Zyklus-Synchronisation bei Massentierhaltung eingesetzt und vereinfacht die knstliche Besamung. Da der
medizinische Bedarf an Prostaglandinen mengenmig gering ist, wird er auch durch Extraktion von GorgoniaKorallen [Plexaura homomalla] der Karibik, die in Symbiose mit PGA2-produzierenden Mikroorganismen
leben, abgedeckt.

Die Strukturaufklrung der Prostaglandine gelang 1962 durch Gaschromatographie, Massenspektroskopie und
Rntgenstrukturanalyse [S. BERGSTRM]. Sie lieen sich mittels Elektrophorese reinigen und PGE1 und PGF1
in kristalliner Form isolieren. Ihr Grundgerst ist das der Prostansure, einem Cyclopentanderivat mit zwei
trans-konfigurierten Seitenketten.
COOH

-Seitenkette

20

-Seitenkette

1
9

10

Prostansure

11 12

Je nach Art und Zahl der Sauerstoffunktionen sowie der Doppelbindungen unterscheidet man ber 20
verschiedene, natrliche Prostaglandine, deren Bezeichnungen sich von der Struktur des Cyclopentanringes und
der Seitenketten ableiten.
O

HO

HO
O
O

HO

PGA

PGB

PGC

PGD

HO

PGE

PGF

PGG und P GH

Die Zahl der Doppelbindungen in den Seitenketten wird durch einen Index nach der Grundbezeichnung
angegeben, so hat z.B. PGE1 eine Doppelbindung (in der -Seitenkette), PGA2 zwei Doppelbindungen in der und -Seitenkette, PGF3 drei Doppelbindungen in C-5-, C-13- und C-17-Position. Der Suffix oder bei den
PGFs gibt an, ob die Hydroxygruppe an C-9 cis- (= ) oder trans-stndig (= ) zur -Seitenkette steht.
O

HO
(CH2)6-COOH
C5H11

HO
OH

H
OH

PGA2

(CH2)3-COOH

C5H11

C5H11
HO

PGE1

HO
(CH2)3-COOH

(CH2)3-COOH

HO
OH

PGF2

OH

PGF3

Formel 7-1. Beispiele der Strukturformeln fr PGE1, PGA2, PGF2 und PGF3.
Prostaglandine E als -Hydroxyketone sind empfindlich gegenber Suren und Alkali und neigen zu
Umlagerungen zu PGA und PGB und Epimerisierungen an C-15 (3) und C-8 (4); Prostaglandine werden
allgemein rasch metabolisiert (-Oxidation, -Oxidation, PGE-9-Ketoreduktase, 613-Prostaglandin-Reduktase,
196

197

7. Eicosanoide

15-Hydroxy-Prostaglandin-Dehydrogenase), weshalb ihre Wirkung an den Ort der Biosynthese (Lokalhormone)


gebunden ist.
O

O
COOH

OH

COOH
H+, OHO

PGA2

OH-

PGB2

OH
COOH

PGE2
OH-

HO
O

OH

H
O
COOH
COOH

HO
OH

C-15-Epimer 3
HO

OH

C-8-Epimer 4

7.2.2.2 Die Biosynthese der Prostaglandine

Die ersten Stufen der Prostaglandin-Biosynthese sind die Addition von Sauerstoff an Arachidonsure und
anschlieende Cyclisierung zu den Endoperoxiden. Aus PGH entsteht durch Isomerisierung das PGE2, dessen
Reduktion zu PGF2 fhrt (vgl. 6.5).
O

HO
COOH

Isomerisierung

Reduktion

COOH

PGH2
HO

OH

PGE2

HO

OH

PGF2

7.2.3 Thromboxane

In den Blutplttchen [Thrombocyten] entstehen aus den Endoperoxiden PGG2 oder PGH2 durch die
Thromboxan-Synthetase die Thromboxane, die Acetale [TXA-Typ] oder Halbacetale [TXB-Typ] darstellen. Sie
wurden 1969 erstmals von VANE aus Tierlungen isoliert, kommen in allen Geweben vor, am besten untersucht
ist die Funktion in Thrombocyten. Das chemisch labile TXA2 bewirkt Blutplttchenaggregation, verengt die
Herzkranzgefe verengt [vasokonstriktorische Wirkung] und geht durch Hydrolyse in stabiles TXB2 ber.
HO

PGG2 oder
PGH2

ThromboxanSynthetase

COOH
O
O

COOH

H2O
HO

OH

Thromboxan A2, TXA2

O
OH

Thromboxan B2, TXB2

7.2.4 Prostacycline

197

198

7. Eicosanoide

Als weiterer Cyclooxygenase-Metabolit der Arachidonsure entsteht aus den Endoperoxiden das chemisch
instabile Prostacyclin PGI2. Es senkt den Blutdruck, entspannt die Blutgefe und verhindert die Blutplttchen
aggregation. PGI2 wird bei der Nierendialyse und bei Herz-Lungen-Operationen zur Prophylaxe gegen Blutplttchenverlust eingesetzt. Prostacyclin ist der physiologische Gegenspieler von TXA2 und erweitert die
Herzkranzgefe [vasodilatatorisch].
COOH
ProstacyclinSynthetase

PGG2 oder
PGH2
Prostacyclin PGI2
HO
OR

7.3 Lipoxygenase-Weg

7.3.1 HPETE und Leukotriene

Durch 5-, 12- oder 15-Lipoxygenasen entstehen auf dem Lipoxygenase-Weg aus Arachidonsure als Primrprodukte mehrfach ungesttigte 5-, 12- bzw. 15-Hydroperoxysuren HPETE [Hydroperoxyeicosatetraensuren]
(Abb. 6-2).
Arachidonsure
5-Lipoxygenase

12-Lipoxygenase

15-Lipoxygenase
COOH

OOH

COOH

COOH

HOO

5-Hydroperoxyeicosatetraensure
5-HPETE

OOH

12-HPETE

15-HPETE

Abbildung 7-2. Primrprodukte des Lipoxygenase-Weges.

Aus 5-HPETE entsteht das Epoxid Leukotrien A4 [LTA4] (Halbwertszeit 3.5 min), aus dem die Leukotriene B
[LTB] und Leukotriene C [LTC] gebildet werden. Abspaltung einzelner Aminosurereste von LTC fhrt zu den
Leukotrienen D [LTD] und Leukotrienen E [LTE] (Formel 7-2).

Leukotriene werden in den Leukocyten gebildet und als Mediatoren u.a. fr allergische und entzndliche
Erkrankungen mitverantwortlich gemacht. LTC4 und LTD4 entfalten eine starke spasmogene Wirkung an den
Bronchiolen von Affe und Mensch. Die Leukotriene sind etwa 1.000 mal aktiver als Histamin. Bei den nach
Stimulierung der Mastzellen freigesetzten Mediatoren [slow reacting substance of anaphylaxis SRS-A] handelt
es sich um ein Gemisch, das neben der Hauptkomponente LTD4 noch LTC4 und LTE4 enthlt.

198

199

7. Eicosanoide

O
COOH

5-HPETE

Glutathion-S-transferase

-GlutamylOH

OH

transpeptidase
COOH

COOH
C5H11

OH

R = H2C O
HC C NH

CH2

COOH

HN C CH2

CH2

CH

H2C

H2C O
H
HC C N

COOH

HC COOH
H2N

H2N

COOH

LTE4

LTD4

LTC4

NH2

CH2

Formel 7-2. Leukotrien-Genese aus 5-HPETE.

7.3.2 Hepoxiline, Trioxiline und Lipoxine

Zur Mitte der 80er Jahre sind die Hepoxiline, Trioxiline und Lipoxine bekannt geworden, die sich von 12HPETE und 15-HPETE (Abb. 7-3) ableiten. Die Hepoxiline (von: Hydroxyepoxid) sind als Mediatoren an der
Insulinwirkung beteiligt und werden in den LANGERHANSschen Inseln gebildet. Unter Einwirkung einer
Epoxid-Hydratase entstehen aus ihnen die Trihydroxyderivate Trioxiline. Die Lipoxine sind konjugierte Tetraene und regulieren die Leukocytenfunktion, Lipoxin B4 z.B. ist ein Suppressor der Killerzellen.
12-HPETE

15-HPETE
OH

OH
COOH

COOH

COOH
HO
OH

Hepoxilin A3

Hepoxilin B3

Hepoxilin A4
OH

Epoxid-Hydratase
HO

OH

COOH
OH

COOH

COOH
HO
HO

Trioxilin A3

HO

OH

HO

Trioxilin B3

OH

Lipoxilin A4

Abbildung 7-3. Produkte der 12- und 15-Lipoxygenase.

7.4 Prostanoide aus marinen Organismen

199

200

7. Eicosanoide

Clavulone sind eine ungewhnliche Familie von Prostanoiden aus der Koralle Clavularia viridis, die auf nichtradikalischem und nicht-Endoperoxid-Biosyntheseweg gebildet werden. Hybridalacton ist ein marines
Eicosanoid aus Laurencia hybrida.

AcO

AcO

H
O

H OAc

H
COOCH 3
O

OAc

Clavulon I

COOCH 3

O
O
C2H5

Clavulon II

Hybridalacton H
H

7.4 Synthese von Prostaglandinen und anderen Eicosanoiden

1967 wurde die erste Synthese eines Prostaglandins publiziert (JUST, SIMONOVICH). Das therapeutische
Potential dieser Verbindungen gab Anla zu einer Vielzahl berhmter Synthesearbeiten (z.B. E.J. COREY, R.B.
WOODWARD, etc.) und Versuchen zur Entwicklung leistungsfhiger Partial- und Totalsynthesen.

7.4.1 Enzymatische Umwandlung von Arachidonsure

Eicosanoide lassen sich in kleinem Mastab enzymatisch oder partialsynthetisch aus Arachidonsure herstellen.
a) Bei Inkubation von Arachidonsure mit Samenblschen vom Schaf, die Cyclooxygenase enthalten,
entsteht ein Gemisch aus PGG2 und PGH2, das sich chromatographisch auftrennen lt.
b) Gibt man katalytische Mengen bestimmter Metallionen zu, degradiert dieses Gemisch zu PGE2 oder
PGF2.
c) Inkubiert man gleichzeitig mit Blutplttchen-Mikrosomen, entsteht Tromboxan TXA2 neben PGD2.
d) Die Inkubation mit Rinderaorta-Mikrosomen fhrt zu Prostaglandin PGI2.

7.4.2 Partialsynthese von PGE2 und PGF2

Der partialsynthetische Zugang zu Prostaglandinen ist vom PGA2-Derivat 5 mglich, das in den GorgonienKnollen (bis zu 1.5 %) vorkommt. Epoxidierung gibt ein Gemisch der - und -10,11-Epoxide 6. Reduktive
Ringffnung mit CrII gibt den 11-Alkohol 7, dessen enzymatische Hydrolyse zu PGE2 fhrt.

200

201

7. Eicosanoide

O
O
COOCH 3

H2O2
COOCH 3
OH-

HO

CrII

O
OAc
OAc

15-O-Acetyl-PGE2-methylester 5
O

O
Esterase

COOCH 3

COOH

PGE2
HO

HO

OAc

OH

Formel 7-3. Partialsynthese von PGE2.

Ausgehend von PGE-Derivat 7 ist PGF2 durch Reduktion der Ketogruppe erhltlich. 7 wird zu 8 silyliert, das
reduzierende NaBH4 mu wegen der sperrigen -TMS-Gruppe von der -Seite angreifen, wodurch 9-Alkohol
9 entsteht. Die Abspaltung der Schutzgruppe ergibt PGF2.
O

O
COOCH 3

HO

COOCH 3

(CH3)3SiCl

NaBH4
SiMe3

OAc

OAc

15-O-Acetyl-PGE2-methylester 7
HO
COOCH 3

PGF2
SiMe3

OAc

Formel 7-4. Partialsynthese von PGF2.

7.4.3 Totalsynthesen von PGF2, PGE1 und PGE2

Von den vielen Totalsynthesen ist vor allem die von E.J. COREY hervorzuheben, die im kg-Mastab
durchfhrbar ist. DIELS-ALDER-Reaktion von Methoxymethylcyclopentadien 10 mit 2-Chloracrylnitril ergibt
die racemischen Bicycloheptene 11a und 11b. Verseifung liefert die enantiomeren Ketone 12, die nach BAYERVILLIGER-Oxidation die Lactone 13 ergeben. Die Iodlacton-Cyclisierung beginnt mit dem Angriff von Iod an
die Doppelbindung, wonach das Carboxylatanion nucleophil am Alken angreifen kann (14). Die ffnung des
Lactons zur Sure ermglicht die Racematspaltung mit (+)-Ephedrin zu 15.

201

202

7. Eicosanoide

CH3O

CH3O

CH3O
KOH
Cl
CuII

11a

NC

10

m-CPBA

12a

NC

Cl
CH3O

CH3O
CN
KOH

Cl

12b

11b
OCH3
CH3O

OCH3

I2

OCH3

I
O

(+)-Ephedrin

15

O OH

OH

O
O

13a

14

OH

In Formel 7-5 ist die gesamte Totalsynthese von PGF2 wiedergegeben. Iodlacton-Cyclisierung von 15,
Acetylierung und Dehalogenierung des entstandenen Iodacetats mit Tributylzinnhydrid fhrt zum "COREYLacton" 16. Etherspaltung und Oxidation fhrt zum "COREY-Lactonaldehyd" 17. (E)-Selektive HORNEROlefinierung von 17 mit Dimethyl-2-oxoheptylphosphonat gibt 18, Reduktion mit Zn(BH4)2 ein Gemisch der
15- und 15-Alkohole. Neuere Verfahren unter Verwendung des chiralen Aluminiumhydridreagenz (S)BINAL-H 19 ergeben fast ausschlielich das (15S)-Derivat. Abspaltung der Acetylgruppe, Schutz der 11- und
15-Hydroxygruppe als Tetrahydropyranylether (20) und milde Reduktion liefert ein Hemiacetal, dessen
WITTIG-Reaktion mit 5-Carboxypentyltriphenylphosphoran die (Z)-Doppelbindung in 21 gibt. PGF2 wird
anschlieend

durch

saure

Entschtzung

erhalten,

Oxidation

von

Schutzgruppenabspaltung fhrt zu PGE2.


O

O
COOH

1. KI / I2, KHCO3
2. Ac2O

OCH3

3. (n-C4H9)3SnH

1. BBr3
2. CrO3 / Py

17
OCH3

HO

15

CH=O
CH3COO

CH3COO

16
1.

O
Al

O
(CH3O)2P(O)-CH-CO-n-C5H11

OC2H5

19
2. K2CO3
3. Dihydropyran, H+

CH3COO

18
HO

1.(i-C4H9)2AlH
2.(C6H5)3P=CH(CH2)3COO-

COOH

DMSO
THPO

(15S)-20
THPO

THPO

THPO

21

HO

202

H3O+

COOH

Prostaglandin PGF

20

und

anschlieende

203

7. Eicosanoide

Formel 7-5. Totalsynthese von PGF2 nach E.J. COREY.

Durch asymmetrische DIELS-ALDER-Synthese konnte die COREY-Synthese erheblich verbessert werden.


Addition des 8-Phenylmenthylesters 23 an das Diensystem 22 lt vor allem das (1S)-Produkt 24 entstehen,
anschlieende Abbaureaktion und Abspaltung des chiralen Hilfsreagenz liefert das bicyclische Keton 26 als
Zwischenprodukt fr die Dialdehyd-27-synthese.
O

C6H5CH2O

*
*

H
+

AlCl3

OCH2C6H5

* *
C

22

(1S)-24

23

R*
OH

O
C6H5CH2O

C6H5CH2O

CH2

OH
CH=O

25

26

OH

Schutzgruppe

27

Von Interesse ist eine biomimetische Synthese [COREY, 1984], die von mehrfach ungesttigten Alkoholen
ausgeht.

Neue Verfahren zur Prostaglandinsynthese umgehen einen schrittweisen Aufbau des Zielmolekls durch
Kombination passend gewhlter Moleklfragmente. 1984 gelang NOYORI und SUZUKI mit der sog.
Dreikomponenten-Kopplung in einer Eintopfreaktion die beiden Seitenketten gleichzeitig in (R)-4-Hydroxy-2cyclopentenon als Cyclopentan-Synthon einzufhren. Am Cyclopent-2-enonring ist ein nucleophiler Angriff am
-C-Atom und ein elektrophiler am -C-Atom mglich, wobei sich Organokupferverbindungen als Nucleophile
und Aldehyde als elektrophile Komponenten eignen. Der optisch aktive Cyclopentenonbaustein 29 lt sich u.a.
aus D-Weinsure 28 herstellen.
O

HO
H

H3C OCH3
COOH
C
H
H3C OCH3
OH
H+
COOH

C
O

OH

OTos

OTos

NaI

1. LiAlH4
OH

2. TosCl

28
O

SCH3
LiCH
SCH3

O
O
O

SCH3

SCH3

29

R+

R-

RO

R-

HO

R+

RO

RO

203

204

7. Eicosanoide

Der Aufbau von PGE1 gelingt durch Reaktion des Enons 30 mit dem Vinylkupferreagenz 31, das aus 1-Iod-3oxy-1-octen mit Lithium und Kupferiodid hergestellt wird. Im zweiten Schritt reagiert das entstandene THPEnol mit dem Aldehydester 32 zum PGE1-Derivat 33. Die -Seitenkette in 33 ist -stndig angeordnet, da der
THP-Ether 30 des Cyclopentenons den Angriff des Kupferreagenz von der Oberseite induziert. ber den
Mesylester wird die C-7-OH-Funktion eliminiert (34), Reduktion der Doppelbindung ergibt die -stndige
Seitenkette in 35. Die THP-Schutzgruppen werden mit Essigsure und der Ester mit Schweineleberesterase zu
PGE1 gespalten (Formel 6-6).
OH
O

COOCH3

1. RLi-CuI-(n-C4H9)3P 31

CH3SO2Cl

2. RCHO 32

DMAP

THPO

THPO

THPO

30

33
O

O
Zn, CH3COOH /
(CH3)2CHOH

COOCH3

COOCH3
CH3COOH

oder (n-C4H9)3SnH /
(t-C4H9O)2

THF / H2O
THPO

THPO

THPO

THPO

34

35

COOH
COOCH3
Leberesterase

PGE1
HO

HO

OH

R =

(C4H9)3P

OH

36

CuI

RCHO = OHC

Li

31

COOCH3

32
OTHP

Formel 7-6. Totalsynthese von PGE1 mit Hilfe der Dreikomponenten-Kupplung.

Ein einfacher Zugang zu (-)-PGE2 geht von Enon 37 aus, das in einer Eintopfreaktion zu Methylester 40 fhrt.
Entschtzung und Reduktion gibt (-)-PGE2-Methylester, der enzymatisch in (-)-PGE2 bergefhrt werden kann.
O

Li

1.
OTBDMS
CuI-Bu3P, Bu3P

CO2CH3

38

- 78C, THF
TBDMSO

37

2. I

CO2CH3

OTBDMS

40

39

TDBMS = (CH3)3CSi(CH3)2-

Ein

allgemeiner

Zugang

zu

primren

Prostaglandinen

erffnet

sich

durch

die

Reaktion

des

Cyclopentenonderivats 40 mit 6-Formyl-5-hexinsure 41 und dem entsprechenden Vinylcuprat zu 42 (Formel


6-7). Die 7-Hydroxygruppe wird als Thiobenzoat reduziert, partielle Hydrierung, Entschtzung und

204

205

7. Eicosanoide

enzymatische Esterspaltung gibt PGE2. Die Reduktion des PGE2-Derivats 43 mit Diisobutylaluminiumhydrid
fhrt zu PGF-Baustein 45. Partielle Hydrierung und Abspaltung der Schutzgruppen liefern PGF2-Methylester.
R1

R2

1. RLi-CuI /
(n-C4H9)3P

R3SiO

40

COOCH3

2. RCHO
R3SiO
41

OSiR3

42

1. C6H5CSCl
DMAP

COOCH3

2. (n-C4H9)3SnH
(t-C4H9O)2

R3SiO

R1 = OH, R2 = H
R1 = H, R2 = OH

OSiR3

43

(i-C4H9)2AlH /
2,6-(t-C4H9)2-4-CH3C6H2OH

HO

H2 / Pd / BaSO4
Chinolin

COOCH3

Benzol Cyclohexan

COOCH3

44

R3SiO

R3SiO

OSiR3
(i-C4H9)2AlH /
2,6-(t-C4H9)2-4-CH3C6H2OH
HO

OSiR3

45

H2
Lindlar-Kat.

COOCH3

46
R3SiO

RCHO = OHC

OSiR3
CH3COOH / H2O / THF

(CH2)3 COOCH3
HO

R I =

COOCH3
OSiR3

SiR3 =

Si(CH3)2-t-C4H9

OH

PGF2-Methylester
OH

Formel 7-7. Totalsynthese von PGE2 und PGF2-Methylester durch Dreikomponenten-Kupplung.

Strukturell abgewandelte Prostaglandine knnen eine andere Wirkung oder eine lngere Wirkungsdauer als die
Naturprodukte besitzen. So besitzt z.B. der Methylester von Methyl-PGE2 aufgrund langsamer Metabolisierung
eine bis 100fach strkere Antifertilittswirkung als PGE2.

7.4.4 Synthese von Prostacyclinen

Ein rationeller Zugang zu Prostacyclinen ist durch intramolekulare Alkoxymerkurierung von 5,6-DidehydroPGF2-Derivat 47 zu 49 mglich. Abspaltung der Silylschutzgruppe und Hydrolyse des Methylesters ergibt
Prostacyclin PGI2. Unter den gewhlten Reduktionsbedingungen im protischen Medium verluft die Demerkurierung des Vinylquecksilber-trifluoroacetats mit NaBH4 nicht wie normalerweise radikalisch und die (5Z)Geometrie bleibt erhalten.

205

206

7. Eicosanoide

COOCH3

COOCH3

COOCH3

O
Hg(OCOCF3)2

NaBH4
OH

OH

HgO

CCF3

(C2H5)3N

CH3ONa / CH3OH

n-C5H11
n-C5H11

R3Si
O

R3SiO

5,6-Didehydro- OSiR3
PGF2 47

R3SiO

48

COOCH3

(n-C4H9)4NF

OSiR3

OH-

49

COOH

OSiR3

H
O

O
H2O / THF

PGI2
n-C5H11
HO

HO

50

HO

OH

Formel 7-8. Synthese von Prostacyclin aus einem PGF2-Derivat.

7.4.5 Synthese von Thromboxanen


Thromboxan kann ausgehend von D-Glucose synthetisiert werden. Glykosidierung und Umsetzung des Methyl-D-glucosids mit Benzoylchlorid gibt bevorzugt 2,6-Benzoylierung. Durch Mesylierung und Elimination
erhlt man den 4,5-ungesttigten Desoxyzucker 53, Abspaltung der Schutzgruppen fhrt zu Allylalkohol 54.
Letzterer wird stereospezifisch ber eine CLAISEN-Umlagerung mit dem Dimethylaminal von Acetamid ber
einen Allylvinylether durch [3,3]-sigmatrope Umlagerung in das Dimethylamid 55 berfhrt. Aus IodlactonCyclisierung und anschlieende Enthalogenisierung resultiert Lacton 57, von dem ausgehend TXB2
synthetisiert werden kann.
HOCH2

HO OH

HO

BzOCH2

52

PhCOCl / Py

HO
HO

-Methylglucosid OCH3

D-Glucose

MesO
MesO

HOCH2

CH3OH / H+

HO
HO

BzO

BzOCH2
MesCl / Py
O
HO
HO
BzO
51
OCH3

OBz

BzO
OCH3

CH3O

OH
CH3O

53

54
O

N
O
I2 / THP
OH

CH3O

55

206

OCH3
N CH
H3C
OCH3
H3C

HO

ZnCu / NaI

O
Bu3SnH

TXB2

H2O

OH
CH3O

56

OH
CH3O

57

Bz = C6H5CO

207

7. Eicosanoide

1985 gelang es W.C. STILL et al., Thromboxan A2 TXA2 ausgehend von kuflichem Thromboxan B2 zu
synthetisieren. Dazu wurde zuerst aus TXB2 ein 1,15-Macrolacton 58 hergestellt, das in die 10Bromverbindung umgewandelt werden konnte. Durch modifizierte MITSUNOBU-Cyclisierung gelingt der
Oxetan-Ringschlu (59), aus dem sich das Brom reduktiv entfernen und durch schonende Hydrolyse das Salz
bzw. die freie Sure TXA2 herleiten lie.
HO

OH
Br

Br

COOH
O

HO

OH

59

58

Thromboxan B2 TXB2

TXA2

HO

7.4.6 Leukotriensynthesen

Der aus verschiedenen Zuckerderivaten oder durch enantioselektive Synthesen zugngliche (5S)-Epoxyaldehyd
60 spielt bei der Synthese von Leukotrienen nach E.J. COREY eine zentrale Rolle.
O

HO

HO

OH

HO

OH

D-Mannitol

HO

OH

OHC

CHO
O

CHO

COOR
O

(5S)-60
OH
O

H
HO

H
HO

O
HO
OH

Zur stereochemisch einheitlichen Einrichtung des C-5 wird bei einer chemoenzymatischen Synthese von
Leukotrien B4 Bckerhefe zur Reduktion eines -Ketothioacetals eingesetzt.
OH

O
COOR

H
S

H
Bckerhefe

COOR
S

7.5 Biosynthese der Eicosanoide

207

208

7. Eicosanoide

Die Biosynthese der Prostaglandine, Prostacycline und Thromboxane ber den Cyclooxygenase-Weg (7.2) ist
in Abb. 6.4 und die der Leukotriene ber den Lipoxygenase-Weg (7.3) in Abb. 7-5 schematisch nochmals
dargestellt.
O

COOH

COOH

Arachidonsure

PGG2

OOH

O
COOH
O
OH

PGH2
COOH
O

COOH

O
O

COOH
OH

HO
OR

Thromboxan A2

HO
OH

Prostacyclin PGI2

PGE2

HO
COOH

HO

OH

PGF2

Abb. 7-4. Biosyntheseschema fr Prostaglandine, Prostacycline und Thromboxane


O

OH
COOH

O2

Arachidonsure
5-HPETE

OH

COOH

COOH
C5H11H

C5H11

LTA4

Cys Gly

LTC4
Glu

OH

OH
COOH

COOH
C5H11H

Cys Gly

LTD4

Abb. 7-5. Biosynthese der Leukotriene.

208

C5H11H

Cys

LTE4

209

7. Eicosanoide

7.6 Literatur

E.J. COREY, N.M. WEINSHENKER, T.K. SCHAAF und W. HUBER, J. Am. Chem. Soc. 91, 5675 (1969).
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Prostaglandinendoperoxiden, Thromboxanen und Prostacyclinen. Angew. Chem. 90, 360 (1978).
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H. CROWFORD, Essential fatty acids and prostaglandins. Nature 287, 388 (1980).
S.M. ROBERTS und F. SCHEIMANN, New Synthetic Routes to Prostaglandins and Thromboxanes. Academic
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B. SAMUELSSON, Von Untersuchungen biochemischer Mechanismen zu neuen biologischen Mediatoren:
Prostaglandinendoperoxide, Thromboxane und Leukotriene (Nobel-Vortrag). Angew. Chem. 95, 854
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C.N. SERHAN, M. HAMBERG UND B. SAMUELSSON, Lipoxins: Novel series of biologically active compounds
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(Nobel-Vortrag), Angew. Chemie 103, 469 (1991).
K.C.NICOLAOU, E.J. SORENSEN, Prostaglandin F2 and Prostaglandin E2, in Classics in Total Synthesis,
VCH, S. 65, Weinheim-New York-Basel-Cambridge-Tokyo (1996).

210

211

8. Juvenilhormone

8. Juvenilhormone
8.1 Struktur, Vorkommen und Bedeutung der Juvenilhormone

Die

Juvenilhormone

(Jugendhormone)

sind

glandulre

Hormone

der

Insekten,

die

deren

Larvenentwicklung steuern. Sie besitzen eine offenkettige isoprenoide Struktur und gehren als
fettlsliche Substanzen eigentlich zu den Lipoiden. Erstmals wurde 1965 in etherischen Extrakten aus
den Abdomina des mnnlichen Riesenseidenspinners Hyalophora cecropia [Lepidoptera, Saturniidae],
Juvenilhormon-Aktivitt gefunden, das aktive Prinzip isoliert und seine Struktur als die von JH-1
(=Juvenilhormon 1) vorgeschlagen [RLLER et al.]. Wenig spter ist aus dem gleichem Insekt JH-2
isoliert worden, JH-3 wurde 1973 aus einer Organkultur der Corpora allata des Tabakschwrmers
Manduca sexta [Lepidoptera, Sphingidae] isoliert. Heute sind insgesamt fnf Strukturen dieser Art (JH1, JH-2, JH-3, JH-0 und iso-JH-0) aus Insekten bekannt, die sich alle von der Farnesolsure ableiten.

COOCH3

COOCH3

JH-1
O

JH-2
O
H

COOCH3

COOCH3

JH-3
O
H

JH-0
O
H

COOCH3

H3C

iso-JH-0

COOCH3

Farnesolsure

Die Juvenilhormone werden bei den Insekten von den im Kopf befindlichen Corpora allata
ausgeschttet. Zum Unterschied zu den eigentlichen Hutungshormonen, die die Entwicklung und
Hutung bis zum Imago kontrollieren und Steroidstruktur besitzen, frdern die Juvenilhormone nur die
Larvalhutung (also Raupe Raupe), hemmen jedoch die Entwicklung der Imagines. Eine erhhte
Zufuhr in bestimmten Entwicklungsphasen bewirkt Tod oder Sterilitt.

Eine in amerikanischem Zeitungspapier und spter im Harz der amerikanischen Balsamtanne Abies
balsamea entdeckte Substanz inhibierte die Metamorphose von Pyrrhocorris apterus und wurde als ein
Sesquiterpenester, Methyltodomatuat [Juvabion, "paper factor"], identifiziert. Spter isolierten
tschechische Wissenschaftler ein Dehydrojuvabion, in der Folge wurde aus norwegischen Nadelhlzern
Juvabiol und Isojuvabiol mit JH-Aktivitt isoliert, japanische Autoren beschrieben die Identifizierung
zweier isomerer Suren vom Dihydrojuvabioltyp. Aus Ocimum basilicum wurden die beiden hochaktiven
aromatischen Juvenoide, Juvocimen I und Juvocimen II isoliert. Synthetisches Juvocimen II war im

8. Juvenilhormone

212

biologischen Test ungefhr 3000mal aktiver als natrliches JH-1. 1984 wurde aus Samen von Psoralea
cordifolia das Bakuchiol isoliert, das gegenber Dysdercus koenigii JH-Aktivitt aufwies.

Die biologische Wirkung synthetischer Juvenoide wird zur Zeit intensiv untersucht mit dem Ziel, potente
und gleichzeitig fr andere Tiere und Mensch wenig toxische Insektizide zu entwickeln.

COOCH3 HO

Juvabion

Juvabiol

COOH

COOCH3 HO

COOCH3 HO

Dehydrojuvabion

Dihydrojuvabiolsure

O
OCH3

Juvocimen I

OCH3

Juvocimen II

OCH3

Bakuchiol

8.2 Synthese von Juvenilhormonen

8.2.1 Nicht-stereoselektive Synthesen

Die erste nicht-stereoselektive Synthese, die gleichzeitig den Strukturbeweis darstellte, wurde von
DAHM, TROST und RLLER (Formel 8-1) beschrieben und beruht auf der konsequenten dreimaligen
Anwendung der HORNER-Reaktion (= WADSWORTH-EMMONS-Reaktion) mit jeweils anschlieender
chromatographischer Trennung der geometrischen Isomeren. Die Synthese ergibt alle der mglichen
Stereoisomeren des JH-1, das (2E,6E,10Z)-Isomere war identisch mit natrlichem JH-1.

213

O
(CH3O)2PCH2COOCH3

8. Juvenilhormone

COOCH3

37%

1. NaOCH3
2. NaOH
3. H+

1. LiAlH4
2. PBr3

Frakt. Destillation
O

CH2-Br

COOCH3

17%

O
O
COOCH3
O
1. (CH3O)2PCH2COOCH3

30%
O

2. LC - Trennung

1. LiAlH4
2. PBr3

COOCH3
39%

COOCH3
CH2-Br

COOCH3

30%
O
1. (CH3O)2PCH2COOCH3
COOCH3
O

2. LC - Trennung
18%
COOCH3
Cl

COOOH

COOCH3
40%

+
COOCH3

JH-1

18%

Formel 8-1. Synthese von JH-1 nach DAHM, TROST und RLLER.

Andere nicht-stereoselektive Synthesen bedienten sich der JULIA-Synthese und der WITTIGCarbonylolefinierung von Phosphoniumyliden zum Aufbau einzelner Doppelbindungen. Die Alkylierung
von Acetyliden, partielle Hydrierung und Isomerentrennung mittels Sulenchromatographie und
fraktionierter Destillation fhren bei der Synthese der Hoffman-LaRoche zu allen Stereoisomeren von
()-JH (Formel 8-2).

1. HC

CH / NaNH2 / NH3
CH

2. Lindlar-Katalysator

PBr 3

1. COOCH3

CH2
Br

2. NaOH

OH

OH
1.
O
(Z/E)

OH

2. Fraktionierte
Destillation

1. HC
O

CH / NaNH2

2. Lindlar-Katalysator

3. H+

Formel 8-2. ()-JH-1 Darstellung nach Hoffman-LaRoche.

OH

8. Juvenilhormone

214

Lithium-dimethylcuprat (CH3)2CuLi reagiert mit allylischen Acetaten und Allylchloriden unter


Verdrngung der Acetoxy- bzw. Chloridgruppe und Allylumlagerung zu (E)-trisubstituierten Olefinen.
Ausgehend von Farnesolderivaten wurden verschiedene Stereoisomere von ()-JH-1 erhalten.

8.2.2 Stereoselektive Synthesen

Auf die Strukturaufklrung der JHs folgte eine groe Zahl von Synthesen, die vor allem die mgliche
Anwendung von Juvenilhormonen und Juvenilhormon-Mimiks [Juvenoide] als Agrochemikalien und
Pflanzenschutzmittel zum Ziel hatten. Es handelte sich hauptschlich um Methoden zur stereoselektiven
Darstellung trisubstituierter Olefine und chiraler Epoxide mit eindeutiger Stereochemie. Die
Notwendigkeit stereoselektiver Synthesen wird bei der Bewertung der biologischen Aktivitten der
einzelnen Stereoisomeren von JH-1 ersichtlich. Das natrlich vorkommende (2E,6E,10Z)-JH-1 zeigt die
hchste Wirksamkeit bei Injektion in Mehlwurm-Puppen [Tenebrio molitor].

Zur stereoselektiven Darstellung des jeweils dreifach-substituierten Olefingersts dienten wie in 8.2.1
wiederum Acetylensynthesen, Alkylierung mit OrganokupferReagenzien, JULIA-Umlagerung, WITTIGOlefinierung und HORNER-Reaktion. Zustzlich diente u.a. die Geometrie-Vorgabe der Endprodukte
durch cyclische Synthesevorstufen.

8.2.3 Darstellung der Enantiomeren chiraler Juvenilhormone

Die Darstellung chiraler Epoxide und damit auch der Juvenilhormone war fr die Bestimmung der
absoluten Konfiguration des Naturstoffes und zur Bewertung der Wirksamkeit der einzelnen
Enantiomeren wichtig. 1970 gelang die Isolierung von 1.4 mg JH-1 aus C. hyalophora und durch
Aufnahme der ORD-Spektren die Drehwertbestimmung fr das Naturprodukt. Mittels theoretischer
Betrachtungen und anschlieender stereoselektiver Synthesen wurde die Konfiguration mit (10R,11S)
vorgeschlagen und 1971 besttigt. Diese erste Synthese von optisch einheitlichem JH-1 bediente sich der
Racemattrennung

von

-Chlor--methylbuttersure

durch

TLC-Trennung

ihrer

1-(1-

Naphthyl)ethylamide und Umwandlung in die chiralen -Chlordimethylketale. Folgereaktionen aus dem


(R)(+)-Ketal und eine weitere chromatographische Trennung einer diastereomeren Zwischenstufe fhrten
zu (10R,11S)(+)-JH-1, das identisch mit dem Naturprodukt war.

Sowohl optisch reiner (S)(-)- als auch (R)(+)-10,11-Dihydroxyfarnesolsuremethylester lassen sich durch
Metabolismus entsprechender (')-Epoxyderivate durch die Pilze Helminthosporium sativum bzw.
Colletotrichum nicotianae gewinnen. Beide Ester knnen durch eine Reihe von Folgereaktionen jeweils
in optischen Reinheiten bis zu 90% in die Enantiomeren von JH-3 umgewandelt werden.

215

8. Juvenilhormone

8.3 Biologische Wirksamkeit und Verwendung im Pflanzenschutz

Das (+)-Isomere von JH-3 Ethylester wurde bei Seidenspinner-Larven [Bombyx mori, Lepidoptera,
Bombycidae] getestet und erwies sich etwa 50mal aktiver als das (-)-Isomere, wobei die geringe
Wirksamkeit des nicht-natrlichen Isomeren vielleicht auf Verunreinigungen mit dem aktiven Isomeren
zurckzufhren ist. Bei Anwendung von synthetischem Juvenilhormon und JH-Mimiks fand man
auerdem beim Seidenspinner eine Verlngerung des Larvenlebens und damit einen begleitenden
Anstieg der Akkumulation von Seidenprotein. Man zchtet daher heute B. mori nicht auf
Maulbeerblttern, sondern auf synthetischer Dit unter oraler Applikation von JH-Mimiks, und erhlt bei
0.3 g/Larve dieser Verbindungen 20-30% mehr Seide.

Die insektizide Wirkung vieler Juvenoide wurde vor allem gegen den Reisstengelbohrer Chilo
suppressalis [Lepidoptera] und den Moskito Culex pipiens getestet, wobei sie jedoch meist keine
besondere Insektizidwirkung zeigten. So hat z.B. der synthetische Insektenwuchsregulator ZR-515
(Altosid, Zoecon Corp.) einen ID50 auf Larven des Gelbfiebermoskitos Aedes aegypti [Diptera] von
0.00014 ppm, whrend ()-JH-1 nur 0.15 ppm Wirkung zeigte.

8.4 Literatur

H. RLLER und J.S. BJERKE, Life Science 4, 1617 (1965).


H. RLLER, K.H. DAHM, C.C. SWEELY und B.M. TROST, Angew. Chem. Intern. Ed. Engl. 6,
179 (1967).
H. RLLER und K.H. DAHM, Recent Progress in Hormone Research 24, 651 (1968).
A.S. MEYER, E. HANZMANN, H.A. SCHNEIDERMAN, L.I. GILBERT und M. BOYETTE, Arch.
Biochem. Biophys. 137, 190 (1970).
B.M. TROST, Accounts Chem. Res. 3, 120 (1970).
A.S. MEYER und E. HANZMANN, Biochem. Biophys. Res. Commun. 41, 891 (1970).
K. MORI, Mitt. Schweiz. Entomol. Ges. 44, 17 (1971).
J.J. MENN und M. BEROZA (Hrsg.), Insect Juvenile Hormones, Academic Press, New York und
London (1972).
C.A. HENRICK, G.B. STAAL und J.B. SIDDALL, J. Agric. Food Chem. 21, 354 (1973).
K. SLAMA, M. ROMANUK und F. :ORM (Hrsg.), Insect Hormones and Bioanalogues, SpringerVerlag, Wien, New York (1974).
K. MORI, T. TAKIGAWA, Y. MANABE, M. TOMINAGA, M. MATSUI, K. KIGUCHI, H. AKAI und
T. OHTAKI, The Effect of Molecular Chain Length on Biological Activity of Juvenile Hormone
Analogs, Agr. Biol. Chem. 39, 259 (1975).
G.B. STAAL, Ann. Rev. Entomol. 20, 417 (1975).

216

8. Juvenilhormone

K. MORI, Synthetic Chemistry of Insect Pheromones and Juvenile Hormones, in Recent Developments
in the Chemistry of Natural Carbon Compounds (R. BOGANR, V. BRUCKNER und CS.
SZANTAY, Hrsg.), Vol. IX, Akadmiai Kiad, Publishing House of the Hungarian Academy of
Sciences, Budapest (1979).

9. Pheromone

217

9. Pheromone
9.1 Pheromone - intraspezifische Signalstoffe

In der Natur werden Informationen hufig durch chemische Substanzen, Signalstoffe auch Botenstoffe, engl.:
semiochemicals, griech.: semeon = Zeichen, Signal] bermittelt. Die durch diese Stoffe gesteuerten Wechselbeziehungen reichen vom subzellulren Bereich ber das mehrzellige Individuum bis zur komplex zusammengesetzten Bioznose. Dabei knnen chemische Signale innerhalb des produzierenden Organismus wirken (z.B.
Hormone), oder aber zwischen Individuen verschiedener Arten (interspezifisch = zwischenartlich) oder derselben Art (intraspezifisch = innerartlich).

Interspezifische Signalstoffe nennt man Kairomone, wenn die

Empfngerart daraus einen Vorteil erlangt. Erfhrt jedoch der Signalsender gegenber dem Empfnger einen
Vorteil, zhlen diese Stoffe zur Kategorie der Allomone. Pheromone [griech.: pherein = tragen, hormon =
anregen] hingegen sind Signalstoffe zwischen Individuen einer Art (Abb. 7-1). Sie werden von einem Tier oder
einer Pflanze ber ein Medium abgegeben, wirken auf ein Empfngerindividuum der gleichen Art ein und rufen
beim Partner eine Kette genetisch festgelegter Verhaltensweisen oder physiologischer Reaktionen hervor.

Pheromone stellen ein phyllogenetisch altes Kommunikationsmittel dar. Sie werden in Protozoen, Arthropoden,
in hheren Tieren wie Fischen, Kriechtieren und Sugetieren gefunden und auch bei der Gattung Mensch
diskutiert. Vor allem in der Klasse Insekten [Hexapoda] sind Pheromone weit verbreitet und dienen u.a. zur
Erkennung und Auffindung des Geschlechtspartners und zur Steuerung des Kopulationsvorganges, zur Aggregation und Rekrutierung, zur Markierung von Nest- und Futterpltzen, zum Auslsen von Wehr- und Alarmverhalten, zur Steuerung der Populationsdichte, zur Regulierung des Sozial- und Kastenwesens soziallebender
Insekten und als Eiablagestimulantien. Dementsprechend werden sie als Sexuallockstoffe, Sexualpheromone,
Aggregationspheromone, Rekrutierungspheromone, Spurpheromone, Territorialmarkierungsstoffe, Alarmpheromone und Wehrsekrete, Kniginnensubstanzen, Kastenerkennungsstoffe, Eiablagepheromone, etc. bezeichnet.

Signalstoffe
Botenstoffe
semiochemicals
intraspezifische Botenstoffe

Pheromone
physiologisch
verhaltensauslsendes
wirksame
Signal
Verbindung

Primer

Releaser

interspezifische Botenstoffe

Allelochemicals
vorteilhaft fr vorteilhaft fr
den Sender den Empfnger

Allomone

Abb. 9-1. Pheromone als Signalstoffe und Kommunikationsmittel in der Natur.

Kairomone

9. Pheromone

218

Pheromone sind vielfach biogenetische Abkmmlinge von Fettsuren (z.B. die langkettigen Ester-, Alkoholoder Aldehydpheromone bei Schmetterlingen), knnen jedoch auch als Vorstufen mit der Nahrung aufgenommen werden. Sie gehren fast ausschlielich zu den sensorisch wirkenden Releaserpheromonen, die eine
unmittelbare Verhaltensauslsung im Empfngerindividuum bewirken, whrend die Primerpheromone eine
langandauernde, physiologische nderung im Empfnger stimulieren.

9.2 Chemische Strukturen von Insektenpheromonen

9.2.1 Sexuallockstoffe von Schmetterlingen [Lepidoptera]

Weibliche Schmetterlinge und Motten [Lepidoptera] verwenden zur Anlockung ihrer arteigenen Mnnchen
Sexuallockstoffe. Das erste in seiner Struktur aufgeklrte Sexualpheromon war Bombykol [(10E,12Z)-10,12Hexadecadienol], der Lockstoff des weiblichen Seidenspinners Bombyx mori, der von A. BUTENANDT in
20jhriger Arbeit aus ber 500.000 Weibchen in seiner Struktur aufgeklrt wurde [1959]. Mehr als 100
verschiedene Sexuallockstoffe, vorwiegend aliphatische geradkettige Alkohole, deren Acetate, Aldehyde, einige
Ketone, Kohlenwasserstoffe und Epoxyverbindungen wurden inzwischen in ber 220 verschiedenen Arten
identifiziert (Stand 1986) und deren Struktur aufgeklrt (Formel 9-1). Die Artenvielfalt der Ordnung
Lepidoptera fhrt zwangsweise dazu, da Schmetterlinge Substanzgemische mit definierter Zusammensetzung
[Pheromonkomplexe] als Pheromone verwenden, um deren Artspezifitt zu gewhrleisten und Kreuzattraktion
mit Fremdarten zu vermeiden.
OCOCH3

OCOCH3

OCOCH3

CHO

OCOCH3

CH2OH

10

OH

11

12
O

Formel 9-1. Beispiele einiger Komponenten der Sexuallockstoffe weiblicher Schmetterlinge [Lepidoptera]:
1 Saateule Agrotis segetum, 2 Trichoplusia ni, 3 Seidenspinner Bombyx mori, 4 Apfelwickler Laspeyresia
pomonella, 5 Isia isabella, 6 Schwammspinner Lymantria dispar, 7 Kohleule Mamestra brassicae, 8 , 9
Antheraea pernyi, 10 Orgya pseudotsugata, 11 Frostspanner Operophtera brumata, 12 Boarmia selenaria.

9. Pheromone

219

9.2.2 Pheromone der Kfer (Coleoptera)

Die Pheromone der Kfer [Coleoptera], der grten Insektenordnung, sind eine strukturell inhomogene
Verbindungsklasse. Die Sexualpheromone der Kfer knnen sowohl von Weibchen als auch von den Mnnchen
produziert werden. Vor allem bei Borkenkfern [Scolytidae] sind die Aggregationspheromone und art- und
geschlechtsspezifischen Lockstoffe eingehend untersucht. Man findet darunter hufig terpenoide Verbindungen,
die Umwandlungsprodukte von aus der Nahrung stammenden Terpenen sein knnen. Formel 9-2 zeigt die
chemischen Strukturen einiger Kferpheromone und deren Produzenten.
OH

17

O
C
O

13

OH

14

19

15
O

O
COOCH3

OH
H
OH

COC2H5

16

23
20

18
H
H

28
22
CHO
COOH
HO

21
H

24
O

29

25

O
O

26
H

27

HO

Formel 9-2. Chemische Strukturen einiger Kferpheromone, produzierende Art und Familie: 13 Lasioderma
serricorne [Anobiidae], 14 Stegium paniceum [Anob.], 15 Rhyzoperta dominica [Bostrichidae], 16
Acanthoscelides obtectus [Bruchidae], 17 Hylotrupes bajulus [Cerambycidae], 18 Diabrotica virgifera
[Chrysomelidae], 19 und 20 Anthonomus grandis [Curculionidae], 21 Anthrenus flavipes [Dermestidae], 22
Trogoderma granarium [Derm.], 23 Costelytra zealandica [Scarabaeidae], 24 Popillia japonica [Scar.], 25
Dendroctonus brevicomis [Scolytidae], 26 Kupferstecher Pityogenes chalcographus [Scol.], 27 Ips cribricollis
[Scol.], 28 Buchdrucker Ips typographus [Scol.], 29 Ips pini [Scol.].

9.2.3 Pheromone der Ameisen, Bienen, Wespen und Hummeln (Hautflgler)

Zu den Hautflglern [Hymenoptera] gehren u.a. die artenreiche Familie der Ameisen, der Bienen, Wespen und
Hummeln. Viele Insekten aus dieser Ordnung sind soziallebend und staatenbildend und verwenden zur
Aufrechterhaltung ihrer Sozialordnung Signalstoffe und Pheromone.

Die Ameisen [Formicidae] gehren in vielen Lndern zu den wichtigsten Herbivoren und Granivoren und
konkurrieren mit anderen Tieren um Pflanzen und Frchte. Sie stellen in den meisten terrestrischen Lebensrumen die wesentlichen Ruber anderer Insekten und Invertebraten dar. Ihre Sozialorganisation erfordert ein
komplexes und effektives Kommunikationssystem, das vorwiegend aus chemischen Signalen besteht. In einer

9. Pheromone

220

Vielzahl von Drsen produzieren Arbeiterinnen Signalstoffe, mit denen sie Artgenossen ber Futterquellen,
drohende Gefahren, ber neue Nestpltze und Territorien, die soziale Rangordnung und die Erkennung von
Nestgenossen informieren.

Spurfolgeverhalten wird u.a. durch artspezifische Duftspuren ausgelst. 4-Methylpyrrol-2-carbonsuremethylester ist als erste Spursubstanz aus der Giftdrse der Blattschneiderameise Atta texana isoliert worden. 2,5Dimethylpyrazin ist das Spurpheromon von Tetramorium caespitum, 3-Ethyl-2,5-dimethylpyrazin das von
Manica rubida, Atta rubropilosa, A. sexdens und einer Myrmica-Art. 6-Methylsalicylsuremethylester ist das
Pheromon von Tetromorium impurum.
OH

N
H

COOCH3

COOCH3

4-Methylpyrrol2,5-Dimethylpyrazin 3-Ethyl-2,56-Methylsalicylsure2-carbonsuremethylester
dimethylpyrazin
methylester

(3R,4S)-4-Methyl-3-heptanol wurde in Leptogenys diminuta nachgewiesen. Der Sesquiterpenaldehyd Faranal


[7,11-Dimethyltrideca-6,10-dienal] ist das Spurpheromon der Pharaoameise Monomorium pharaonis, (Z,Z,Z)Allofarnesen, (Z,E)- und (E,E)--Farnesen, (Z,E)- und (Z,Z)-Homofarnesen wurden als Pheromone der
Feuerameise Solenopsis invicta identifiziert.
OH
CH=O

4-Methyl-3heptanol

Faranal
(Z,Z,Z)-Allofarnesen

(E,E)-!-Farnesen

(Z,E)-Homofarnesen

(Z,E)-!-Farnesen

(Z,Z)-Homofarnesen

Dihydroisocumarine wurden 1992 von BESTMANN et al. als neue Klasse von spuraktiven Substanzen im
Enddarm mehrerer Arten der Unterfamilie Formicinae identifiziert. Unterschiedliche Gemische von 3,4-Dihydro-8-hydroxy-3-methylisocumarin [Mellein],

3,4-Dihydro-8-hydroxy-3,7-dimethylisocumarin 30, 3,4-Di-

hydro-8-hydroxy-3,5,7-trimethylisocumarin 31 und 3,4-Dihydro-3-ethyl-8-hydroxy-7-methylisocumarin 32


wurden in der roten Waldameise Formica rufa, der schwarzen Raubameise F. fusca, der blutroten Waldameise
F. sanguinea und der schwarzen Gartenameise Lasius niger nachgewiesen. Das 2,3-Dihydro-3,5-dihydroxy-6methyl-4H-pyran-4-on 33 ist das Spurpheromon der glnzend-schwarzen Holzameise L. fuliginosus.

9. Pheromone

221

O
O

O
OH

HO
OH

OH

Mellein

OH

30

OH

31

O
33

32

(S)(+)-4-Methyl-3-heptanon ist das Alarmpheromon der Blattschneiderameise Atta texana und lst Alarmverhalten aus. Dendrolasin [3-(4,8-Dimethylnona-1,3-dienyl)-furan] ist der aus Lasius fuliginosus isolierte
Alarmstoff, der auch in Pflanzen vorkommt. 34 ist ein Wehrsekret aus Iridomyrmex-Arten, (-)-Invictolid ist das
Kniginnenpheromon der Feuerameise Solenopsis invicta.
O
O

CH3
O

OH

Alarmpheromon
von Atta texana

34

Dendrolasin

Invictolid

Zu den Hautflglern gehren weltweit etwa 16.000 Wespen- und 20.000 Bienenarten, deren Sozialverhalten
vom solitren Insekt bishin zum komplexen Kastensystem der Honigbienen reicht. Die Knigin der Honigbiene
Apis mellifera produziert (E)-9-Oxodec-2-ensure als Kniginnensubstanz, einem Distanzlockstoff fr Drohnen
whrend des Hochzeitsfluges, die als Primerpheromon (7.1) gleichzeitig die Entwicklung der Ovarien der
Arbeiterinnen unterdrckt. Bienenarbeiterinnen produzieren (E)-10-Hydroxydec-2-ensure als Bestandteil des
Weiselzellensaftes [Gelee royale]. Isopentylacetat wird als Hauptkomponente des Alarmpheromon-Cocktails
aller vier Apis-Arten sekretiert. Das Nassanoff-Sekret ["Sterzelduft"] von A. mellifera enthlt u.a. Citral,
Geraniol, Nerol, Farnesol, Geranium- und Nerolsure. cis-2-Methyl-5-hexanolid wurde in den Holzbienen
Xylocopa hirutissima nachgewiesen.
O
COOH HO

COOH

CO-CH 3
O

(E)-9-Oxodec-2-ensure
Kniginnensubstanz der
Honigbiene Apis mellifera

10-Hydroxy-(E)-2-decensure
Gelee royale

CH=O

Isopentylacetat
Alarmpheromon
von Apis mellifera

Citral
O

COOH

CH2OH

Nerol

COOH

CH2OH

Geraniol

Nerolsure

Geraniumsure

2-Methyl5-hexanolid

Die sdamerikanische staatenbildende Biene Lestrimelitta limao holt sich Nektar und Pollen aus den Nestern
verwandter Bienenarten. Dazu geben die Ruber whrend der Attacke groe Mengen an Citral ab, das die
eigenen Genossen stimuliert, ihre Opfer durch dieses Pheromonberangebot hingegen verwirrt und wehrlos
macht.

9. Pheromone

222

Erstaunlich wenig ist ber die Alarmpheromonzusammensetzung von Wespen bekannt. Bei Vespula vulgaris
sind N-3-Methylbutylacetamid sowie Isovaleraldehyd die wirksamen Komponenten, im Gift der zu den
Faltwespen gehrenden Hornisse Vespa crabro konnte bislang nur 2-Methyl-3-buten-2-ol als wirksame
Alarmsubstanz nachgewiesen werden.
O

OH
CH=O

N
H

N-3-Methylbutylacetamid Isovaleraldehyd
aus Vespula vulgaris

2-Methyl-3-buten-2-ol aus
der Hornisse Vespa crabro

9.2.4 Fliegenpheromone

Fr ber 20 Fliegenarten [Diptera] wurden Pheromone identifiziert und deren Struktur aufgeklrt. In vielen
Fllen handelt es sich um langkettige, gesttigte oder olefinische Kohlenwasserstoffe, die erst bei Kontakt mit
dem Informationspartner wirksam werden. Aus der Cuticula weiblicher Hausfliegen [Musca domestica] wurde
Muscalure [(Z)-9-Tricosen] als Pheromon identifiziert (Formel 7-3). Einfach-ungesttigte Kohlenwasserstoffe
mit ungeradzahliger C-Zahl , Kettenlngen von C23 bis C33 und Doppelbindungen in 5-, 9-, 11-, 13- und 14Position wurden im Epidermisgewebe anderer Musciden-Arten nachgewiesen. Die Weibchen der Tsetsefliegen
verwenden dimethyl- und trimethylverzweigte Kohlenwasserstoffe mit Kettenlngen C35 und C37 als
Kontaktpheromone, die Arrestant-Wirkung auf die Mnnchen besitzen, die Kontaktzeit mit dem Geschlechtspartner verlngern und Kopulationsversuche induzieren. Nur das meso-Isomere des Dimethylpentatriacontans
ist aktiv. Bei den Fruchtfliegen findet man Spiroketale als Pheromone, 2-Methyl-6-vinylpyrazin (Formel 7-3) ist
das Sexpheromon der Mnnchen der Papaya-Fruchtfliege Toxotrypana curvicauda. n-Heptadecan ist ein
Attraktivstoff weiblicher Pilzfliegen Lycoriella mali, Heptacosadien induziert das Balzverhalten der Taufliege
Drosophila melanogaster. Hexanal wurde in mnnlichen Fleischfliegen Sarcophaga bullata nachgewiesen und
wirkt auf Entfernungen bis 45 cm attraktiv. (5R,6S)-6-Acetoxy-5-hexanolid wirkt als Eiablagepheromon der
Moskitos Culex pipiens fatigans. Die Weibchen der Kirschenfruchtfliege Ceratitis cerassi kennzeichnen die von
ihnen besetzten Kirschen mit einem -Glucosid und halten damit Artgenossinen ab, ihre Eier an gleicher Stelle
abzulegen. 3-Methyl--himachalen sowie 9-Methylgermacren B werden von Mnnchen verschiedener
brasilianischer Sandfliegen Lutzomyia longipalpis als Pheromon produziert.

9. Pheromone

223

Muscalure aus Hausfliege Musca domestica

Pheromone der Papaya-Fruchtfliege


Olivenfruchtfliege

OAc
O

C10H21

Eiablagepheromon der Weibchen


der Moskitos Culex pipiens fatigans

Tsetsefliegen-Pheromone

Taufliege Drosophila melanogaster


H
O
O

b-Glucosid
SO3H
N
H

OH
Eiablagepheromon
der Kirschenfruchtfliege Ceratitis cerassi

3-Methyl-himachalen

9-Methylgermacren B

aus Lutzomyia longipalpis

Formel 9-3. Pheromone einiger Fliegen-Arten.

Die Weibchen der kleineren pine sawfly Microdiprion pallipes locken mit (1S,2S,6S,10R)- und (1S,2R,6R,10R)1,2,6,10-Tetramethyldodecylpropanoat die arteigenen Mnnchen.

OCOC2H5
(1S,2S,6S,10R)
(1S,2R,6R,10R)
Tetramethyldocecylpropionat

OCOC2H5

9.2.5. Termitenpheromone

Termiten [Isoptera] sind eine vorwiegend in den Tropen vorkommende Ordnung sozialer, meist flgelloser und
blinder Insekten. hnlich wie die Ameisen verstndigen sich Termiten durch chemische Signalstoffe. TermitenSoldaten verfgen ber ein spezifisches Alarmsekret sowie ber ein erstaunliches Potential chemischer Waffen,
die auf den Gegner, meist Ameisen, geschmiert, verspritzt oder injiziert werden. Man findet u.a. klebrige
Mischungen von Terpenen, langkettige Alkane und Alkene (C21 - C35), oder Kontaktgifte auf der Basis von
Nitroalkenen, Vinylketonen, Ketoaldehyden, etc. Als Hauptkomponente des Spurpheromons der Termite Reticulitermes flavipes wurde (3Z,6Z,8E)-3,6,8-Dodecatrien-1-ol beschrieben, das auch bei anderen subterran
lebenden Termitenarten Spurfolgeverhalten auslst. Das macrocyclische Diterpen (E,E,E)-Neocembren ist das
Spurpheromon mehrerer Nasutitermes-Arten.

OH

3,6,8-Dodecatrienol aus Reticulitermes flavipes

(E,E,E)-Neocembren

9. Pheromone

224

9.2.6 Pheromone von Insekten aus anderen Ordnungen

Weibchen bestimmter Blattlaus-Arten [Homoptera] bedienen sich zur sexuellen Reproduktion eines Sexualpheromons aus den Hinterbeinen, aus der Platterbsen-Blattlaus Megoura viviae [Aphididae] wurden Nepetalacton und Nepetalactol als die aktiven Pheromonkomponenten identifiziert. - und -Pinen dienen der gleichen
Art als Alarmpheromon, (E)--, (Z,E)-- und (E,E)--Farnesen wurden in Sekreten der grnen Pfirsichblattlaus
Myzus persica als Alarmpheromon nachgewiesen, Germacren A in der Zierlaus Therioaphis maculata. Die
Honigtau-verbreitenden Schmierluse Pseudococcus comstocki und Planococcus citri [Pseudococcinidae]
verwenden das Acetat des 2,6-Dimethyl-1,5-heptadien-3-ols bzw. 2,2-Dimethyl-3-isopropenyl-cyclobutylmethanol als Sexualpheromon (Formel 7-4).
OH

Nepetalacton

!-Pinen

Nepetalactol

"-Pinen

(E)-"-Farnesen

CH2OH
O-COCH3

Schmierlauspheromone

Germacren A

Formel 9-4. Pheromone einiger Blattlaus-, Zierlaus- und Schmierlaus-Arten.

Aus der der Deutschen Schabe Blatella germanica [Blattidae] wurden die Kontaktpheromone 3,11-Dimethylnonacosan-2-on und 29-Hydroxy-3,11-dimethylnonacosan-2-on isoliert, die erwachsene Mnnchen zum
Balzverhalten anregen. Das Sexualpheromon der weiblichen Amerikanischen Schabe Periplaneta americana
wurde vor mehr als 20 Jahren als Gemisch der Sesquiterpene Periplanon A und Periplanon B identifiziert [C.J.
PERSOONS, 1976] und die Strukturen von C.W. STILL und M.A. ADAMS als Germacrenderivate besttigt. Die
ursprngliche Struktur von Periplanon A wurde 1986 [H. HAUPTMANN] berichtigt und durch Synthese und
Biotests besttigt. Das Sexualpheromon der mnnlichen Grnen Stinkwanze Nezara viridula [Pentatomidae] ist
(Z)-(1'S,3'R,4'S)-(-)-2-(3',4'-Epoxy-4'-methylcyclohexyl)-6-methylhepta-2,5-dien, das attraktiv auf Weibchen
wirkt.
O

O
OH

Kontaktpheromone der
Deutschen Schabe
Blatella germanica
O

O
O

Periplanon A

Periplanon B

aus Periplaneta americana

Pheromon der Stinkwanze


Nezara viridula

9. Pheromone

225

9.3 Arachnidenpheromone

Auch die Spinnentiere [Arachnidaea] verwenden Pheromone zur chemischen Kommunikation. So wurde
Lardolure [1,3,5,7-Tetramethyldecylformiat] 1982 als das Aggregationspheromon der Milbe Lardoglyphus
konoi, einem Vorratsschdling, isoliert und durch Synthese die (1R,3R,5R,7R)-Konfiguration zugewiesen. Der
Faltersexuallockstoff (Z)-9-Tetradecenylacetat wird von sdamerikanischen Bolaspinnen produziert und als
Allomon eingesetzt. Sie locken damit Falter "unter Vorspiegelung falscher Tatsachen" in ihre Nhe, um sie
dann mit Hilfe eines gezielt geschleuderten Klebefadens zur Strecke zu bringen.
COCH3
O

O-CHO

(Z)-9-Tetradecenylacetat, Allomon
sdafrikanischer Bolaspinnen

Lardolure, Aggregationspheromon
von Lardoglyphus konoi

9.4 Gametenlockstoffe - Algenpheromone

Reife weibliche Gameten [Geschlechtszellen] zahlreicher Algen geben bei der geschlechtlichen Vermehrung
Kohlenwasserstoffe als Lockstoffe [Gamon] in das Wasser ab, die mnnliche Gameten chemotaktisch anlocken.
Als solche sind die Verbindungen gleichzeitig Regulationsstoffe niederer Pflanzen (18.2.1). Die von den Eiern
von Fucus serratus sekretierte und die Spermien anlockende Substanz Fucoserraten ist (3E,5Z)-1,3,5-Octatrien.
Spermatozoen von F. vesiculosus antworten maximal auf Fucoserraten und (3Z,5Z)-1,3,5-Octatrien. Ectocarpen
[6-(1-Butenyl)-1,4-cycloheptadien] ist ein Inhaltsstoff von Seegras [Dictyopteris] sowie der weibliche Sexuallockstoff der Braunalge Ectocarpus siliculosus. In Phaeosporales findet man ebenso Ectocarpen, in
Desmorestia zustzlich Desmaresten und Viridien; Multifiden und Aucanten sind Inhaltsstoffe der Braunalge
Cutleria multifida. Dabei ist (+)-Multifiden noch in einer Konzentration von 6.10-12 M wirksam, das
Enantiomere hingegen um mehrere Zehnerpotenzen weniger. Im etherischen l der Braunalge Dictopteris
phagiogramma ist das strukturell verwandte Dictopteren enthalten. Das Sesquiterpen Sirenin wird vom Flagellatenpilz Allomyces gebildet. Chemische Signalstoffe von Algen wurden in Deutschland vor allem von L.
JAENICKE und Mitarb. untersucht.

Fucoserraten

Ectocarpen

Desmaresten

Desmaresten

Formel 9-5. Gametenlockstoffe von Algen und niederen Pflanzen.

Multifiden

9. Pheromone

226

9.5 Sugetierpheromone

Am besten sind Sugetier-Signalstoffe bei Nutztieren wie Schwein, Rind, Schaf und Ziege untersucht.
Auerdem sind Pheromone bei einer Reihe von Wildtieren, z.B. Antilopen, beschrieben, vergleichende
Untersuchungen beim Gorilla sind bekannt. Biologisch sind Pheromone bei hheren Tieren eher von geringer
Bedeutung, da deren Sinnesorgane fr visuelle und akkustische Reize besser entwickelt sind als bei niederen
Tieren und sich diese Reize auch schneller ausbreiten. Dennoch spielen Pheromone vor allem bei systematisch
hheren Tieren mit weitgehend saisonal gebundenem Fortpflanzungsverhalten bei der Fortpflanzung eine Rolle.
Pheromone, die von Tarsaldrsen von Antilopen abgegeben werden, haben Alarmwirkung.
Bekannt als Pheromone sind 16-Steroide wie Androstenon und Androstenol beim mnnlichen Schwein und
Mensch. Bei Anwendung des als "Dosen-Eber" bezeichneten Pheromonprparates in der Veterinrmedizin und
Tierzucht kommt es zustzlich bei der Sau zur Freisetzung von Ocytocin zur Kontraktion von Eileiter und
Uterus und die Trchtigkeitsrate kann erhht werden. Bei dem im menschlichen Achselschwei nachgewiesenen Steroid handelt es sich um eine endogene Substanz und keinesfalls um ein mikrobielles Abbauprodukt. Selbst wenn menschliche Pheromone in der Evolution konserviert blieben, ist fraglich, ob sie heute
noch eine biologische Bedeutung besitzen. Offensichtlich hat die Pheromonwahrnehmung auch eine genetische
Basis, die mit dem Histokompatibilittskomplex [MHC, LHA] in Zusammenhang steht.

O
H

Androstenon
3-Oxo-5-androst-16-en

HO
H

Androstenol
3-Hydroxy-5-androst-16-en

2-sec-Butyl-4,5-dihydrothiazol und 3,4-Dehydro-exo-brevicomin wurden aus dem Urin der mnnlichen


Hausmaus Mus musculus isoliert und bewirken Anlockung und Estrussynchronisation bei Museweibchen.

N
S

2-sec-Butyl-4,5-dihydrothiazol

O
O

3,4-Dehydro-exo-brevicomin

9.6 Emission, Perzeption und biologische Wirksamkeit von Pheromonen

Sendeorgane der Insektenpheromone sind meist pheromonproduzierende Drsen, die sich durch eine groe
morphologische und histologische Vielfalt auszeichnen. Sie variieren von einfachen einzelligen Strukturen bis
zu komplexen Aggregaten mit Reservoir. Modifikationen der Intersegmentalmembran zwischen dem 8. und 9.
Abdomensegment findet man bei weiblichen Schmetterlingen als Pheromondrsen. Bei Ameisen ist eine
Anzahl exokriner Drsen wie Rektalampulle, Enddarm, Giftdrse, Tarsaldrse, Dufourdrse, Tergaldrsen,

227

9. Pheromone

Mandibeldrse, Pavan'sche Drse, Tibialdrse, Sternal- und Pygidialdrse der Ort der Synthese bzw. Emission
der verschiedenen Pheromone. In den Tarsaldrsen von Honigbienen wird das foot print-Pheromon produziert,
das mit den Fen der Bienen zur Markierung von Nest und Futterquellen ausgebracht wird. Im Stachelrinnenpolster der Apis-Arten wird das Alarmpheromon sekretiert. Das Sekret der NASSANOFF-Drse [Sterzelduft]
enthlt einen Lockstoff fr Arbeiterinnen und wird beim Schwrmen eingesetzt. Das Pheromon der weiblichen
Hausfliege wurde in der Cuticula identifiziert, weitere einfach-ungesttigte Kohlenwasserstoffe wurden im
Epidermisgewebe anderer Musciden-Arten nachgewiesen.

Spezielle olfaktorische Zellen, die bei den Insekten meist in den Antennen sitzen, stellen die Empfngerseite
dieses Kommunikationssystems dar. In diesen Sinneszellen findet man spezifische Rezeptoren, die mit
Pheromonen reagieren und zur Auslsung eines elektrischen Potentials und damit zu einem Sinnesreiz fhren.
Diese Rezeptorreaktion lt sich mittels Kapillarelektroden elektrophysiologisch ableiten (Abb. 7-2) und der
Reiz quantifizieren [Elektroantennogramm EAG, Elektrosensillogramm ESG]. Bei Insektenarten, die Sexualpheromone verwenden, findet man oft einen aufflligen Antennendimorphismus zwischen Mnnchen und
Weibchen.
Elektroden

Duftquelle
Pheromon

Luft

Elektroden
Computer

Verstrker Recorder

Abb. 9-2. Schematische Darstellung einer Elektroantennogramm-Meanordnung.

Sexuallockstoffe sind fr das Auffinden der Geschlechtspartner vorallem fr die in der Dunkelheit fliegenden
Schmetterlinge und Motten von vitaler Bedeutung. Die whrend der Lockzeit [calling] von den ruhenden
Weibchen abgegebenen Sexpheromone werden ber Entfernungen von mehreren hundert Metern von den
anfliegenden Mnnchen gerochen. Zur Ortung der Weibchen ist leichter Wind erforderlich, der im Gegenwindanflug die Geruchsorientierung ermglicht. Die Pheromonmenge in der Drse eines Falterweibchens betrgt im
Schnitt einige bis wenige hundert Nanogramm (1 ng = 10-9 g). Zur Abgrenzung der einzelnen
Schmetterlingsarten ist aufgrund der geringen Strukturvarianz der Falterlockstoffe der Einsatz definierter
Substanz- und Isomerengemische, sog. Pheromonkomplexe, erforderlich. Einzelne Komponenten knnen dabei
Inhibitoren fr verwandte Arten darstellen oder gleichzeitig die Funktion eines Allomons (vgl. 9.3 und Abb. 91) erfllen.

Eine groe Zahl von Kferpheromonen ist chiral, meist trgt nur ein bestimmtes Enantiomer oder ein definiertes
Verhltnis der optischen Antipoden die biologische Wirksamkeit. Prinzipiell knnen die anderen Stereoformen
zur Wirksamkeit beitragen, synergistisch wirken, unwirksam sein oder als Inhibitor fungieren. exo-Brevicomin

9. Pheromone

228

25 ist eine Komponente des Sexuallockstoffs des weiblichen Borkenkfers Dendroctonus brevicomis, die
physiologische Aktivitt ist allein an die (1R,5S,7R)-Konfiguration gebunden. Frontalin als Aggregationspheromon von Kiefernborkenkfern sorgt fr eine effektive Besiedlung eines als Brutsttte ausgesuchten
Baumes, indem es das optimale Geschlechterverhltnis steuert. Aus Mnnchen von Dendroctonus brevicomis
wurde reines (1S,5R)-(-)-Frontalin (67 in Formel 7-10) identifiziert, die Weibchen des in Amerika beheimateten
D. frontalis [southern pine beetle] hingegen produzieren eine 85:15-Mischung des (S)-1- und des (R)-1Enantiomer. Bei dem Kommunikationssystem koniferenbefallender Borkenkfer wird vor allem auch die
Beziehung Insekt-Wirtspflanze deutlich. Borkenkfer sind beim Einbohren in Wirtsbume den Dmpfen
toxischer Monoterpene, die im Harz der Bume vorkommen und einen Teil deren Verteidigungssystems
darstellen, ausgesetzt. Mit der Atmung werden diese Stoffe nun von den Kfern aufgenommen und zu
Lockstoffen metabolisiert, mit denen Artgenossen zur gemeinsamen Attacke stimuliert werden. Das aus
weiblichen Tieren des Japan-Kfers Popillia japonica isolierte Sexualpheromon ist (R,Z)-5-(1-Decenyl)dihydro-2(3H)-furanon 24, die Zugabe von nur 1 % des (S,Z)-Isomer setzt bereits drastisch die Aktivitt der
(R,Z)-Verbindung herab.

Spurfolgeverhalten bei Ameisen wird blicherweise durch artspezifische Duftspuren ausgelst, es sind jedoch
auch koloniespezifische und individuenspezifische Wegmarkierungen nachgewiesen worden. Die Spursubstanz
aus der Giftdrse der Blattschneiderameise Atta texana wirkt noch in der unsagbar kleinen Konzentration von
80 fg/cm Spur (1 fg = 10-15 g); 1 mg dieses Pheromons wrde eine aktive Spur ergeben, die dreimal um den Erdball reicht. Von den vier stereoisomeren Formen des Leptogenys diminuta-Pheromons 4-Methyl-3-heptanol ist
nur das (3R,4S)-Isomere spuraktiv (Abb. 7-3) und wirkt noch in einer Grenzkonzentration von etwa 50 fg/cm
Spur.

3S,4S

3R,4S

3S,4R

R
S

OH

4-Methyl-3-heptanol

Leptogenys diminuta
Formicidae: Ponerinae
3R,4S

3R,4R

3R,4S

Abb. 9-3. Spurfolgetest von L. diminuta mit verschiedenen diastereomeren 4-Methyl-3-heptanolen.

Soziale Insekten wie Ameisen, Bienen und Wespen setzen artspezifische Alarmstoffe zur Verteidigung ihrer
Kolonien und zur Alarmierung der Nestgenossinnen ein. Solche Alarmpheromone mssen kurzzeitig eingesetzt
werden und sind daher meist leichtflchtige Substanzen. (S)-(+)-4-Methyl-3-heptanon, das Alarmpheromon von
Atta texana, lst bis zur Entfernung von ca. 5 cm vom Auftragungsort am Boden Alarmverhalten aus. In etwas
grerer Entfernung wirkt es hingegen attraktiv. Undecan in Kombination mit Ameisensure lsen bei
afrikanischen Weberameisen Massenangriffsverhalten aus. Sklaventreiberameisen der Gattung Formica

229

9. Pheromone

besitzen in ihren Dufourdrsen groe Mengen C10 - C16-Acetate, die whrend der Raubzge die
sklavenraubenden Insekten ["slavemaker"] erregen und anlocken.

Whrend die europischen Rassen der Honigbiene Apis mellifera vergleichsweise friedlich sind, liegt die
Hemmschwelle fr das Auslsen von aggressivem Verhalten durch Alarmstoffe bei den afrikanischen
Unterarten deutlich niedriger. Wespen versprhen ihre Alarmpheromone mit dem Gift und markieren damit
chemisch einen Aggressor. Interessant ist, da Wespen (und wahrscheinlich auch Bienen) auch auf artfremde
Geruchstoffe aggressiv reagieren. Die Wirksamkeit der Alarmpheromone von Bienen und Wespen kann auer
durch aufwendige quantitative Verhaltenstests auch kalorimetrisch durch Messung der Stoffwechselrate, hervorgerufen durch gesteigerte lokomotorische Aktivitt, bestimmt werden.

Das in mnnlichen Fleischfliegen Sarcophaga bullata nachgewiesene Hexanal wirkt auf Entfernungen bis 45
cm attraktiv.

9.7 Synthese von Insektenpheromonen

Sowohl die Aufklrung der vielfltigen Strukturen der Insektenpheromone als auch die Prfung der
biologischen Wirksamkeit und Erstellung von Struktur-Aktivittsbeziehungen gaben Anla zur Erarbeitung
einer Flle neuer prparativer Methoden und vorallem zur Entwicklung neuer stereoselektiver Synthesen. Die
Verhaltensdiskriminierung durch Isomere und Diastereomere konnte oft erst durch Synthese und Bioassays
aufgezeigt werden. Ebenso war der Einsatz von Pheromonen als nichttoxische und umweltfreundliche
Pflanzenschutzmittel (vgl. 7.8) Triebfeder fr die Entwicklung einer Flle von Darstellungsmethoden fr diese
Naturstoffe. Beispielhaft sollen hier nur einige nach nach strukturellen Gesichtspunkten geordnete
Synthesewege skizziert werden.

9.7.1 Synthese von "nicht-cyclischen" Pheromonen

Unter den "nicht-cyclischen" Insektenpheromonen findet man lineare und verzweigte, gesttigte und
ungesttigte Verbindungen, Kohlenwasserstoffe und substituierte Verbindungen. Verzweigungen und
Substituenten knnen zu Chiralitt fhren.

Der klassische Fall fr achirale, "nicht-cyclische" Pheromone sind die Sexuallockstoffe der Schmetterlinge und
Motten. Zur Darstellung der meisten mono- und bisolefinischen Falterpheromone findet die Acetylensynthese
sowie die WITTIG-Reaktion Anwendung. Die Mglichkeit der Alkylierung terminaler Acetylene und der
selektiven partiellen Hydrierung gibt einen allgemeinen Zugang sowohl zu (Z)- als auch (E)-monoungesttigten
Alkenolen, Alkenalen und Alkenylacetaten. (Z)-Alkene erhlt man dabei durch partielle katalytische Hydrierung
dreifach-ungesttigter Vorstufen, Alkene mit (E)-Konfiguration durch homogene partielle Hydrierung. Formel

9. Pheromone

230

7-6 zeigt die Darstellung von (Z)- und (E)-9-Dodecenylacetat [Z-9-DDA und E-9-DDA], hufig vorkommende
Pheromonkomponenten von Tortriciden [Wickler] und Noctuiden [Eulenfalter].
HBr
HO

(CH2)8 OH

CH2CH3C

Br

(CH2)8 OH

(CH2)8 OTHP

CLi

AcCl/HOA c
CH2CH3C

Br

Na/NH3

(CH2)8 OCOCH3

H3CH2C

H
C

H
C

(CH2)8 Cl

H2-Katalysator
oder P2-Nickel

CH3CH2

H
C

H
C

AcCl/AcOH

CH3CH2 C
H

(CH2)8 OCOCH3

H
C

OH-

CH3CH2

H
C

H
C

OH-

CH3CH2 C
H

(CH2)8 OH

H
C

PCC

CH3CH2

H
C

H
C

(CH2)8 OCOCH3

(CH2)8 OH

PCC

CH3CH2 C
H

(CH2)7 CH=O

H
C

(CH2)7 CH=O

Formel 9-6. Darstellung von (Z)- und (E)-9-Dodecenylacetat, -Dodecenol und -Dodecenal durch
Acetylensynthese.

Die (Z)-selektive WITTIG-Olefinierung von Aldehyden mit basischen Yliden unter "lithiumsalzfreien"
Bedingungen eignet sich speziell zur Darstellung von (Z)-Schmetterlingspheromonen.
NaN[Si(CH3)3]2
CH3(CH2)n

CH2

P(C6H5)3

Br

O=CH
CH3(CH2)n

CH

(CH2)m COOCH3

P(C6H5)3
- O=P(C6H5)3

CH3(CH2)n

H
C

H
C

CH3(CH2)n

H
C

H
C

LiAlH4
(CH2)m COOCH3

CH3(CH2)n

H
C

H
C

CH3(CH2)n

H
C

H
C

Ac2O/Py
(CH2)m CH2OH
PCC

1. OH(CH2)m CH2O COCH3

(CH2)m CH=O

2. PCC

Formel 9-7. (Z)-Pheromone durch stereoselektive WITTIG-Reaktion

Codlemone [(8E,10E)-8,10-Dodecadien-1-ol 4], ist das Weibchen-Sexpheromon des Apfelwicklers Laspeyresia


pomonella [Tortricidae], einem weltweit auftretenden Apfelschdling. Mit Sorbinsure 35 als Ausgangsmaterial
ist bereits die (E,E)-Konfiguration des Zielmolekls vorgegeben, die Kupplungsreaktion mit dem GRIGNARDReagenz 36 und Abspaltung der THP-Schutzgruppe fhrt in wenigen Stufen zu Codlemone 4.

9. Pheromone

231

H3C

H
C

C
H

H
C

1. Reduktion
C
H

H3C

COOH

H
C

2. Acetylierung

H
C C
H

BrMg
C
H

(CH2)6 OTHP

36

CH2 OCOCH3
CuCl2/Li2CuCl4

Sorbinsure 35

H3C

H
C

C
H

H
C

H3O+
C
H

H
C

H 3C

CH2 (CH2)6 OTHP


H 2O

C
H

H
C

C
H

(CH2)7 OH

Codlemone (Codlelure) 4

37

Die "methylenunterbrochenen" (homokonjugierten) (Z)-Doppelbindungen mehrfach-ungesttigter Fettsuren


wie Linol- und Linolensure (Kap. 2.2) besitzen die gleichen relativen Konfigurationen wie die
Polyenkohlenwasserstoffpheromone einiger Geometriden-, Arctiiden- und Noctuidenarten [Lepidoptera]. Diese
lassen sich durch gemischte KOLBE-Elektrolyse der genannten Suren mit kurzkettigen Carbonsuren gewinnen.
(3Z,6Z,9Z)-3,6,9-Heneicosatrien 38 ist u.a. eine Komponente des Weibchenpheromons des Bluttrpfchens
Thyria jacobeae [Arctiidae] und entsteht durch Coelektrolyse von Linolensure mit Valeriansure.
1. NaOH
2. H3C

(CH2)3

COO

, e

(CH2)7-COOH
- CO2

38

Linolensure

Unter den Signalstoffen der Schmetterlinge finden sich auch einige chirale Oxirane, die aufgrund ihrer
langkettigen Strukturen hier ebenso als "nicht-cyclisch" abgehandelt werden. Disparlure [(+)-(7R,8S)-7,8Epoxy-2-methyloctadecan 6] ist der Sexuallockstoff des Schwammspinners Lymantria dispar [Lymantriidae],
einem gefhrlichen Forstschdling. Von den beiden Enantiomeren besitzt nur das (+)-Disparlure biologische
Aktivitt. Eine von K. MORI's Synthesen geht von Weinsure 39 als chirales Synthon aus, andere Autoren
verwenden Zucker oder Zuckerderivate als Ausgangsverbindungen.
CH2-OTos
COOH
(CH3)2CH(CH2)4

CH2
H

OH

9 Stufen

[(CH3)2CH(CH2)2]2CuLi
H

HO

CH

OCH3

OCH3

CH
CH2 COOCH3

H3CO

HO

COOH
CH2

(2S,3S)-Weinsure 39
COOCH3

(CH3)2CH(CH2)4
BCl3

HO
CH

(CH2)4CH(CH3)2

O
O
O
(CH2)6CH3

CH
ThpO

(CH2)9CH3

HO

(+)-(7R,8S)-Disparlure 6

Eine weitere Mglichkeit der Einfhrung der beiden Stereozentren in die Epoxidstruktur 6 bietet die asymmetrische Epoxidierung [SHARPLESS-Oxidation, 1980] eines geeigneten (Z)-Allylalkohols 40 mit D-(-)Weinsurediethylester [(-)-DET, 41]. Durch die Titan-katalysierte Reaktion werden in hoher optischer Ausbeute
gleichzeitig zwei chirale Zentren aufgebaut.

9. Pheromone

232

C10H19

C10H19

(CH3)3C-OOH, Ti(O-iPr)4

O
OH

(-)-DET 41

OH

(+)-Disparlure 6

9.7.2 Synthesen bicyclischer Ketalpheromone

Bicyclische Ketale findet man hauptschlich als Sexual- und Aggregationspheromone von Kfern. Sie sind alle
chiral und besitzen zumindest zwei Chiralittszentren. Das bicyclische (1R,5S,7R)-exo-Brevicomin 24 ist die
aktive Komponente des Sexuallockstoffs des weiblichen Borkenkfers Dendroctonus brevicomis. Ausgehend
vom (2S,3R)-(-)-Weinsurediethylester 53 erhlt man durch Methylierung, Reduktion, Tosylierung und
Substitution durch Cyanid das Dinitril 54. Verseifung und nachfolgende Umsetzung mit Thionylchlorid ergibt
den Dimethylester 55. Selektive Verseifung einer Esterfunktion liefert eine Carbonsure, die mit B2H6 zum
Alkohol 56 reduziert werden kann. Die Ethylgruppe im Brevicomin wird nun durch Tosylierung und Reduktion
zu aufgebaut, wobei gleichzeitig der Methylester zu 57 reduziert wird. Durch Substitution mit LiBr besitzt man
nun ein Alkylierungsreagenz 58, welches mit Acetessigester 59 zu 60 umgesetzt, verseift und decarboxyliert
werden kann. Als Produkt wird ein Methylketon erhalten, welches ber die zwei Hydroxylgruppen das
bicyclische Ketal bilden kann. Durch Abspaltung der Methylgruppen, Chrom-Oxidation zum Formylester und
Hydrolyse erfolgt die Ketalbildung zu 24.
H2C

COOC2H5
HO

H3CO

OH

OCH3

CN
H

1. MeOH / HCl

OCH3

2. SOCl2 / MeOH

H
H3COOC
COOCH3
H3CO

H2C

COOC2H5

CN

H
H3COOC

OH
H3CO

OH
H3CO

1. TosCl
Br
H3CO

2. LiBr
H

OCH3

OCH3

OCH3

O
EtOOC

OCH3
O

OEt

H
O
NaH

O
H3CO

(+)-exo-Brevicomin
24

Formel 7-9. Synthese von (+)-exo-Brevicomin.

Frontalin [1,5-Dimethyl-6,8-dioxabicyclo[3.2.1]octan, 67] wurde 1969 aus ber 6.500 Hinterenden des
mnnlichen D. brevicomis extrahiert und identifiziert und dient als zweite chirale bicyclische Komponente
diesen und anderen Dendroctonus-Arten als Pheromon. Die biologische Aktivitt wird der (1S,5R)-(-)-Form
zugeschrieben. Ausgehend vom furanosiden Bisketal 61, das aus D-Glucose erhalten wird, selektiver
Abspaltung einer Schutzgruppe, Periodatspaltung und Reduktion erhlt man 62. Die Einfhrung einer
Schutzgruppe am primren Alkohol durch Benzylierung ergibt, nach Spaltung des Acetals und anschlieender

9. Pheromone

233

Reduktion, das Triol 63. Isopropylidierung der ,-Hydroxygruppen, die Spaltung des Benzylethers (64) und
Periodatspaltung fhren zum Aldehyd 65 (Formel 7-10), welcher die beiden Stereozentren aufweist, die im
Frontalin bentigt werden. WITTIG-Reaktion zu 66 olefiniert, anschlieende Hydrierung und sauer katalysierte
Deacetalisierung liefert (1S,5R)-(-)-Frontalin 67.

O
O

D-Glucose
O

HO

OO

62

61

C6H5CH2O

OH
OH
OH

HO

HIO4

O
OH
O

64

63

O
CHO

H 3C

O
CH

OO

OH
OH

P(C6H5)3

67

(1S,5R)-(-)-Frontalin
O

65

66

Formel 9-10. Synthese von (-)-Frontalin, einer Pheromonkomponente von D. frontalis.

9.7.3 Lactone als Pheromone


Chirale Lactone bilden die Grundstrukturen einiger Kfer-, Bienen-, Fliegen- und Ameisenpheromone. Das Lacton Japonilure [(-)-(4R,5Z)-5-Tetradecen-4-olid, 24] ist das Pheromon des Kfers Popillia japonica (9.2.2
und 9.6), als -Lactone werden 2-Methyl-5-hexanolid als Sexuallockstoff bei den Bienen Xylocopa hirsutissima
(7.2.3) und die beiden Enantiomeren (+)-(5R,6S)- und (-)-(5S,6R)-erythro-6-Acetoxy-5-hexadecanolid als
Hauptkomponenten des Eiablagepheromons der weiblichen Moskitos Culex pipiens gefunden.

(-)-Invictolid [(2R,4R,5S,6R)-2,4,6-trimethyl-5-nonanolid] ist das Kniginnen-Pheromon der Feuerameise


Solenopsis invicta und wurde auerdem krzlich mit unbekannter Konfiguration als Spurpheromon in einer
Camponotus-Art entdeckt. WAKAMATSU et al. (Formel 7-12) gingen vom Levoglucosantosylat 73 aus, das aus
Strke erhltlich ist und leicht in das 3,4-Epoxyderivat 74 umgewandelt werden kann. Die anschlieende
GRIGNARD-Reaktion und basische Behandlung gibt formal eine Verschiebung der Epoxygruppe in die 2,3Position (75), eine zweite GRIGNARD-Reaktion, Hydrierung und PCC-Oxidation liefert Pyranon 76. LiAlH4Reduktion ergibt eine Inversion an C-3 (gegenber 74), Reaktion mit 1,3-Propandithiol das entsprechende
Dithianderivat 77. Nach einer Reihe von Folgeschritten erhlt man Aldehyd 78, dessen Carbonyl-Olefinierung
und Hydrierung zu einem 3:1-Gemisch des gewnschten (-)-Invictolids 80 mit dem C-2-Epimeren fhrt (Formel
9-12).

9. Pheromone

234
O
OH
O

O
MeONa
MeOH

MgBr
1.

O
2. NaH

OTos

OTos OTos

73

O
1. MeMgCl, THF

CuI
2. H2 / Pd
O

74

75
OH

OH
OH

1. LiAlH4
2. Hs-(CH2)3-SH, BF3

76

3. PCC

OH

1. Ac2O
2. Raney - Ni

3. LiAlH4
4. Pb(OAc)4

77

78

OH
H2 / Pd-C
CO2Et

79

(-)-Invictolid 80 + C-2-Epimer

Formel 9-12. Synthese von (-)-Invictolid, dem Kniginnen-Pheromon der Feuerameise Solenopsis invicta.

9.7.4 Spiroverbindungen als Pheromone

Etwa 20 Verbindungen mit Dioxa-Spirostruktur findet man unter den Insektenpheromonen. Dabei handelt es
sich um intramolekulare Vollketale, die beiden Sauerstoffatome gehren jeweils verschiedenen fnf- oder
sechsgliedrigen Ringen an. In einigen Fllen bildet das zentrale Ketal-C-Atom das einzige Chiralittszentrum,
zustzliche Zentren knnen durch Alkylsubstituenten dazukommen. Die Verbindungen gehren fnf verschiedenen bicyclischen Systemen an und kommen meist als Diastereomeren gemische in den Insekten vor. Als
ein "Bouquet" aller Anomeren wurde Chalcogran im Kupferstecher Pityogenes chalcographus nachgewiesen.
1,7-Dioxaspiro[5.5]undecane sind Hauptkomponenten des Pheromonkomplexes der Olivenfliege Dacus oleae,
die entsprechenden 2,8-dimethylsubstituierten Vertreter wurden im Pheromonbouquet der Andrena wilkellaBienen nachgewiesen.

Die beiden (+)-(S)- und (-)-(R)-1,7-Dioxaspiro[5.5]undecane 87 der Olivenfliege besitzen C2-Symmetrie, die
Chiralitt wird nur durch die Spiroringverknpfung bewirkt. REDLICH und FRANCKE verwendeten das aus DGlucose als chiral pool erhltliche deoxygenierte Zuckerderivat 81 als Startmaterial. Hydrolyse und PeriodatSpaltung gibt 2,4-Dideoxy-D-glycero-pentopyranose 82, Thioacetalisierung und Acetonidbildung 83. Kettenverlngerung nach COREY-SEEBACH und Desulfurierung, Schutzgruppenabspaltung und Spiroketalisierung
ergibt ein Diastereomerengemisch aus 85 und 86, das sich chromatographisch trennen lt. Die beiden
Diastereomeren knnen durch Tosylat-Eliminierung und anschlieende katalytische Hydrierung in das (+)-(S)bzw. das (-)-(R)-Isomere 87 berfhrt werden.

9. Pheromone

235
CH 2OH
S

H2C

OTHP

1. HCl
O

1. HS-(CH 2)3-SH
OH

2. NaIO4

Cl
O

2. Aceton

OH

82

81

83

OTHP
S
O

CuCl2, CuO

OH

O
HO

Aceton

85

86
1. TosCl, Py

84

2. Al2O3, Et2O
3. H2/ Pd-C, NEt 3
O

O
O

(+)-(S)-87

(-)-(R)-87

Formel 9-13. Synthese des Olivenfliegenpheromons 1,7-Dioxaspiro[5.5]undecan.

9.8 Insektenpheromone im Pflanzenschutz

Mit den synthetischen Insektenpheromonen besitzt man Verbindungen, mit denen das Verhalten von
Schadinsekten manipuliert werden kann. Man kann sie an bestimmte Stellen oder in Fallen locken und sie dort
gezielt bekmpfen oder vernichten. Vor allem verschiedene Schmetterlingsarten, die als Schdlinge kologische
Bedeutung haben, knnen mit synthetischen Sexuallockstoffen bekmpft werden. Die Aggregationspheromone
der Borkenkfer wiederum sind heute ein wichtiges Werkzeug im Waldschutz. Da die Pheromone im
allgemeinen nichttoxische Verbindungen darstellen, kann mit ihrem alternativen Einsatz als Pflanzenschutzmittel die Umweltbelastung durch toxische Insektizide reduziert werden. Dazu sind im Prinzip drei Techniken
denkbar:
-

Beim Monitoring sind ber ein bestimmtes Areal verteilte, mit synthetischem Duftstoff bekderte

Insektenfallen geeignet, die Populationsentwicklung eines Schdlings zu berwachen und den Einsatz von
Insektiziden im Hinblick auf Ort, Zeit und Menge zu optimieren.
- Bei der Verwirrungstechnik werden z.B. Schmetterlingsmnnchen durch ein berangebot an synthetischen
Weibchenpheromone verwirrt, ihre Orientierung gestrt und die Partnerfindung unterbunden. Diese Methode
hat sich vor allem zum Schutz von Baumwolle und im Weinbau bewhrt.
- Massenfang: Synthetische Lockstoffe werden z.B. im Forstschutz erfolgreich zum Massenfang, also zur
mglichst vollstndigen Entfernung einer ganzen Generation in Befallsarealen, von Borkenkfern in baumstammhnlichen Fallen angewendet.

236

9. Pheromone

9.9 Literatur

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Insects, Westview Press, Boulder, Col. (1998).

238

10. Aminosuren

10. Aminosuren

10.1 Aminosuren - amphoteres Verhalten - isoelektrischer Punkt

Aminosuren sind Carbonsuren mit einer Aminofunktion, Aminocarbonsuren, wobei in der Natur
speziell die -Aminosuren als Bausteine der natrlichen Proteine eine Rolle spielen. Aminosuren sind
bifunktionelle kristalline Verbindungen, die oberhalb 200C, teils unter Zersetzung, schmelzen. Sie
zeigen amphoteres Verhalten [griech. amphoteros = beidseitig], die Aminofunktion als Protonenakzeptor
und die Carboxylgruppe als Donator knnen jeweils ein Proton aufnehmen bzw. abgeben. Damit haben
sie sowohl basischen als auch sauren Charakter und knnen ein Betain, ein zwitterionisches, inneres Salz
bilden. Von daher erklren sich die physikalischen Eigenschaften wie hoch schmelzend, gut
kristallisierbar, gut wasserlslich und schwerlslich in organischen Lsungsmitteln.
NH3
R

CH

+ H+

Aminosure
in saurer Lsung
pH = 11

NH3

NH2

- H+
COOH

CH

COOH

CH

NH2

- H+
R

COO

CH

COO

+ H+

in neutraler Lsung
pH = 7

in alkalischer Lsung
pH = 1

In saurer Lsung wandern protonierte Aminosuren im elektrischen Feld zur Kathode, im basischen als
Anionen zur Anode (Elektrophorese, 1.2.3 und Abb. 1-7). Das Gleichgewicht zwischen ungeladener
Aminosure und Betain liegt in neutraler wriger Lsung weitgehend auf der Seite des Zwitterions.
Daraus folgt, da sich Aminosuren gut in Wasser lsen, jedoch unlslich in Ether und Benzol sind, wo
normalerweise Amine und Carbonsuren gut lslich sind.
Die einfachste Aminosure ist Glycin, -Aminoessigsure, die in wriger Lsung in vier Formen
vorliegen kann. Die Eigenschaften ndern sich mit dem pH-Wert, whrend das Verhltnis zwischen
Neutralmolekl und Betain pH-unabhngig ist. Beim Isolelektrischen Punkt IP findet keine Wanderung im
elektrischen Feld statt, gleichzeitig resultiert ein Minimum der Lslichkeit in Wasser. Der IP ist meist
verschieden vom Neutralpunkt pH = 7 und strukturabhngig, gegeben durch das Verhltnis der Surebzw. Base-Dissoziationskonstanten KS und KB.

10.2 Kreislauf des Stickstoffs

Alle Aminosuren und Proteine haben letzten Endes ihren Ursprung in Pflanzen und Bakterien, da der
tierische Organismus nicht imstande ist, bestimmte essentielle Aminosuren aus anorganischen Stickstoffverbindungen aufzubauen. So wandeln Mikroorganismen wie Nitritbakterien und Nitratbakerien

239

H3N CH2COOH
pH 11
9
7
5
3
1

10. Aminosuren

2 quiv.
Base

H2NCH2COOp Ka1
pH = 9.6

Isoelektrischer
Punkt IP, pH = 6.0
pKa2
pH = 2.4

1.0

Mol

2.0

NaOH

Abb. 10-1. Titrationskurve von Glycinhydrochlorid.

im Boden Ammoniak in Nitrit bzw. Nitrit zu Nitrat um, und Nitrite und Nitrate werden von Pflanzen zu
Aminosuren und Proteine umgesetzt. Andere Bodenbakterien wandeln organischen Stickstoff in NH3
um. Gewisse Bakterien im Verein mit Pflanzen knnen atmosphrischen Stickstoff in Aminosuren berfhren. Die Symbiose Rhizobium/Leguminose (z.B. Sojabohne, Klee, Luzerne) ist fr die Landwirtschaft
besonders wichtig, doch tragen auch Blaualgen (Cyanobakterien) erheblich zur biolobischen StickstoffFixierung in Reisfeldern (allein oder in Symbiose mit dem Algenfarn Azolla) bei. Einige Bodenorganismen knnen auf nicht symbiontischem Wege Stickstoff in Ammoniumionen umwandeln, andere
sind imstande, Nitrit und Nitrat zu Stickstoff und Ammoniak zu reduzieren.
Nitrition

N2 zur Luft

Bodenorganismen

Nitrosomonas

Clostridium
N2 (Luft)
+ Kohlenhydrate Azotobacter

Nitrobacter

Nitration

Bodenorganismen

-Aminosuren

niedermolekulare
organ. Stickstoffverbindungen
tierische und mikrobiologische Organismen

Proteine

Abb. 10-2. Kreislauf des Stickstoffs.

Rhizobium auf
Leguminosen

N2 (Luft)

240

10. Aminosuren

10.3 Einteilung und Nomenklatur der Aminosuren

Die proteinogenen Aminosuren bilden die Grundbausteine der Proteine. Aminosuren mit nur einer
NH2- und COOH-Gruppe bezeichnet man als neutrale Aminosuren, Diaminocarbonsuren, deren
isoelektrischer Punkt im Basischen liegt, entsprechend als basische Aminosuren. Saure Aminosuren
sind solche mit zwei Carboxylfunktionen, ihr isoelektrischer Punkt liegt im Sauren. Aminosuren mit
weiteren funktionellen Gruppen werden hufig als funktionelle Aminosuren bezeichnet. Essentielle
Aminosuren mssen ber die Nahrung zugefhrt werden (Tab. 10-1).

Die meisten Aminosuren haben Trivialnamen, zur Kurzbezeichnung dienen nach Empfehlungen der
IUPAC/IUB Drei-Buchstaben-Symbole (1 Gro- und zwei Kleinbuchstaben, vgl. Tab. 10-1). Hhere
Homologe der verbreitetsten Aminosuren werden als Homo- (z.B. Homoserin, Hse), niedrigere als Nor(z.B. Norleucin, Nle) bezeichnet. Zur Bezeichnung von unverzweigten Aminosuren ohne eingefhrten
Trivialnamen beginnt das Drei-Buchstaben-Symbol mit A fr Monoaminosuren und A2 fr
Diaminosuren. Es folgt der auf zwei Buchstaben abgekrzte Name der entsprechenden Carbonsure
(z.B. A2pm3 fr 2,2'-Diaminopimelinsure, 2,6-Diaminoheptandisure).

10.3.1 Proteinogene Aminosuren

20 Aminosuren sind im genetischen Code verankert und bilden als proteinogene Aminosuren die
Grundbausteine der Proteine. Darber hinaus werden noch einige seltene Aminosuren in Proteinen
gefunden bzw. nachtrglich proteinogene in den Proteinen modifiziert. Mit Ausnahme von Glycin sind
alle proteinogenen Aminosuren chiral und linksdrehend. Von den zwei mglichen Enantiomeren trifft
man in den Proteinen nur solche mit L-Konfiguration [relative Konfiguration] an. In der FISCHERProjektion (5.2.1), bei der die C-Kette senkrecht und das C-Atom mit der niedrigsten Positionsnummer
oben steht, ist die Aminogruppe der L-Aminosuren links, die der D-Aminosuren rechts angeordnet
(Formel 10-1). Dabei entspricht die L-Konfiguration der (S)-Konfiguration nach CAHN-INGOLD-PRELOG
[CIP-Regeln, absolute Konfiguration], ausgenommen L-Cystein, das aufgrund der Priorittsregeln der
(R)-Konfiguration entspricht. Isoleucin und Threonin besitzen ein weiteres Chiralittszentrum und
kommen natrlich hauptschlich nur als ein Diastereomer, (2S,3S)-Isoleucin und (2S,3R)-Threonin, vor.
COOH

COOH
H2 N

H
R

L-Aminosure

NH2
R

D-Aminosure

Formel 10-1. Fischerprojektion von L- und D-Aminosuren

241

10. Aminosuren

L-Aminosuren racemisieren, wobei die Racemisierungsgeschwindigkeit von der Temperatur, vom pH-

Wert und anderen Faktoren (z.B. Anwesenheit von Metallionen) abhngt. Die Racemisierung erfolgt auch
in fester Form. Die Tatsache der optischen Aktivitt natrlicher Aminosuren erlaubt eine Altersbestimmung von Fossilien und Datierung archologischer Funde. Mit dem Tod eines Lebewesens wird
die Racemisierung der enthaltenen Aminosuren in Gang gesetzt. Die Bestimmung der Abnahme der
optischen Drehung erlaubt damit eine Altersbestimmung von Fossilien, bzw. bei bekanntem Alter die
Ermittlung der durchschnittlichen Temperatur. Im Tiefseebereich, wo Fundstcke bei konstanter
Temperatur gelagert bleiben, ist die Methode relativ sicher. Die Altersbestimmung anhand des
Racemisierungsgrades der Aminosuren kann auch dann eingesetzt werden, wenn das Material fr eine
Altersbestimmung mithilfe der Carbon-Methode (C14-Methode) zu alt ist (>40.000 Jahre).

CH C

O
H2N

OH

H2N

CH C

H2N

OH

Glycin

CH C OH H2N

CH C OH H2N

CH C OH

CH2

CH OH

CH2

OH

SH

CH3

CH2

Serin

Cystein

Threonin

CH2

CH3

H2N

CH C OH

Alanin

S
CH3

O
H2N

CH C

OH

H2N

CH C

O
OH H2N

CH C

OH H2N

CH CH3

CH2

CH CH3

CH3

CH CH3

CH2

CH3

CH3

Leucin

Isoleucin

Valin

CH C

O
OH

H2N

CH2

CH C

OH

Methionin

CH2

O
C

OH

HN
O
H2N

Phenylalanin
O

CH C OH
CH2
CH2
CH2

NH

NH2

Prolin

Tyrosin
H2N

H2N

CH C OH
CH2

H2N

CH2

CH2

CH2

CH C OH

CH C

H2N

OH

NH2

Asparaginsure

OH

CH2

C O

CH2

NH

OH

CH C

O
NH2

H2N

CH C

CH2

CH2

CH2

CH2

C O

OH

NH2

OH

Asparagin

NH2

O
O

Arginin

Lysin

H2N

CH C

OH

CH2

Glutaminsure
H2N

CH C

Glutamin

OH

CH2

HN

N
NH

Tryptophan

Histidin

Formel 10-2. Strukturformeln der proteinogenen Aminosuren.

Glycin [Gly, 2-Aminoessigsure, frher Glycokoll, griech. glykos = s und kolla = Leim] wurde 1820
als erste Aminosure aus Gelatine-Leim [BRACONNT] durch Hydrolyse isoliert. L-Alanin [Ala, 2-Aminopropionsure] kommt in fast allen Proteinen vor, Naturseide enthlt etwa 25 % L-Alanin. Valin [Val, 2Amino-3-methylbuttersure] kommt in nahezu allen Proteinen vor und ist fr die Funktion des NervenMuskelapparats wichtig. Bei unzureichender Valin-Versorgung beobachtet man berempfindlichkeit und
Bewegungsstrungen. Lysin [Lys, 2,6-Diaminohexansure] wurde aus Caseinhydrolysat isoliert und ist
bereits 1914 als Wachstumsfaktor bei Sugetieren erkannt worden [Th.B. OSBORNE, L. MENDEL], beim
Fehlen resultiert Zwergwuchs. Es wird grotechnisch aus Caprolactam gewonnen und hat aufgrund seiner

242

10. Aminosuren
Essentiellitt heute eine Schlsselstellung in der Nahrungsmittel- und Futtermittelindustrie. L-Arginin

[Arg, 2-Amino-5-guanidinovaleriansure] soll den Ammoniakspiegel im Blut senken und wird bei
Leberkoma empfohlen. Der Name Asparaginsure [Asp, Aspartinsure, 2-Aminobernsteinsure] leitet
sich vom Spargel [Asparagus officinalis] ab. Asparagin [Asn] ist das Sureamid der Asparaginsure. Das
Mononatriumsalz der Glutaminsure [Glu, 2-Aminoglutarsure] wirkt geschmackverstrkend, steigert die
geistige Leistungsfhigkeit und wird als Geschmacksverstrker fr Speisen eingesetzt. Glutamin [Gln] ist
das Monosureamid der Glutaminsure, wurde aus Weizenkleber [lat. glutinum = Leim] isoliert und
schmeckt je nach Konfiguration bitter oder s.
O
H2NOC
H2N

O
OH

HO

bitter
(S)-Glutamin

CONH2
NH2

s
(R)-Glutamin

Phenylalanin [Phe, 2-Amino-3-phenylpropionsure] ist der Ausgangsstoff fr die Bildung der Nebennierenrindenhormone L-Adrenalin und L-Noradrenalin und des Schilddrsenhormons Thyroxin und wird
zu dem fr die Hautbrunung verantwortlichen Melanin abgebaut. Daher fhrt Phenylalaninmangel zu
Strungen der Schilddrsen- und Nebennierenrindenfunktion, zu Blutunterdruck und Pigmentmangel.
Etwa 2/3 des Phenylalaninbedarfs kann beim Menschen allerdings durch das Oxidationsprodukt Tyrosin
abgedeckt werden. Fehlt im Stoffwechsel die Tyrosinase [Phenylalaninoxygenase], die Phenylalanin in
Tyrosin umwandelt, kommt es zur Phenylketonurie. Dabei entsteht aus Phenylalanin die Phenylbrenztraubensure, die im Harn ausgeschieden wird. Dies ist eine genetisch bedingte Erbkrankheit bei
Neugeborenen (ca. jedes 10.000. Neugeborene in Deutschland), die zu irreparablen Gehirnschden fhrt,
wenn die Babys nicht rechtzeitig auf phenylalaninarme Kost umgestellt werden. Heute lassen sich
Stoffwechselbedingungen und der Phenylalanin- und Tyrosinspiegel mit ein bis zwei Tropfen Blut mittels
Isotopenverdnnung

und

Massenspektrometrie

in

krzester

Zeit

bestimmen,

so

dass

die

Ernhrungskontrolle von Neugeborenen und Phenylketonuriepatienten erheblich verbessert wurde.


Wegen der Blockierung der Tyrosinase geht die Phenylketonurie mit Pigmentmangel einher. Tyrosin
[Tyr, 3-(4-Hydroxyphenyl)-alanin, 2-Amino-3-(4-hydroxyphenyl)propionsure] wurde 1845 von LIEBIG
durch Kalischmelze von Kse [griech. tyros] erhalten. Es ist besonders reichlich in Seidenfibroin, Papain,
Casein, aber auch in Korallen enthalten. Das am Aufbau der Insectencuticula beteiligte Resilin enthlt
Querbrcken aus Tyrosin-Dimeren und -Trimeren. Durch Hydroxylierung von Tyrosin entsteht L-Dopa
[Dioxyphenylalanin], die Vorstufe zur Biosynthese des Neurotransmitters Dopamin, der Nebennierenund Schilddrsenhormone und Melanin.

243

10. Aminosuren
COOH

COOH

COOH

Oxygenase
NH2

NH2

NH2

HO

Melanin

HO

Tyr

Phe

OH

3,4-Dioxyphenylalanin, Dopa
COOH
bei Phenylketonurie
O

Phenylbrenztraubensure

Serin [lat. sericum = Seide] wurde 1865 durch CRAMER im Seidenhydrolysat entdeckt. L-Cystein wurde
1810 in Harnstein [griech. kystis = Harnblase] entdeckt und kommt als Baustein in Haaren, Federn, Huf,
Nagel, Wolle und in der Hornsubstanz der Haut vor (Keratine). Es ist oft in Enzymen am Katalysemechanismus beteiligt. Cystein ist die zentrale Verbindung des Schwefel-Stoffwechsels, viele SchwefelDerivate leiten sich von ihm ab. Cystin ist das Oxidationsprodukt des Cysteins und bewirkt durch
Disulfidbrcken die Vernetzung von Peptidketten. Die kovalente Bindung zwischen verschiedenen
Peptidkettenabschnitten wirkt stabilisierend auf die Raumstruktur der Protein-Makromolekle. Cystin
kommt in zahlreichen Pflanzen vor und ist hauptschlich in Keratinen enthalten. Die essentielle
Aminosure Methionin lt sich biologisch durch Serin und Cystein gewinnen, so da ein Groteil des
Methioninbedarfs durch Cystein gedeckt werden kann.

Auf der Vernetzung von Peptidketten durch Disulfidbrcken beruht das Prinzip der Dauerwelle
(Kaltwelle). Die Cysteinbrcken des Keratins (11.

), die die Struktur des Haars bestimmen, werden

durch Salze der Thioglykolsure, der Thiomilchsure, oder durch Glycerinmonothioglykolat reduziert.
Bei der Reduktion geht die Struktur des Haares verloren, es quillt und ist mechanisch verformbar. Nach
dem Formen wird mit Wasser gesplt und anschlieend mit Oxidationsmitteln wie H2O2 und anderen
Peroxo-Verbindungen und die Disulfidbrcken zurckgebildet (fixiert).
H
CH(NH2)COOH

HS-CH2-COOH

H2 C

H
C

COOH

2
-

HOOC-CH2-S-S-CH2-COOH

HS

NH2

CH(NH2)COOH

H
H

Das Decarboxylierungsprodukt des Cysteins, Cysteamin [2-Aminoethanthiol], ist Bestandteil von


Coenzym A und wird aufgrund seiner Radikalfnger-Eigenschaften als Strahlenschutzstoff eingesetzt.
Tryptophan [2-Amino-3-(indol-3-yl)-propionsure, -Aminoindol-3-propionsure] ist die seltenste
Aminosure unter den Nahrungsproteinen und wird in der Leber rasch oxidativ unter Ringspaltung des
Pyrrolrings zu N-Formylkynurenin abgebaut. Es ist fr die Bildung des Augenpigments erforderlich, sein
Fehlen bedingt Haarausfall und Star. Die essentielle Aminosure Histidin ist fr die Bildung des
Blutfarbstoffs sowie verschiedener Nucleinsuren notwendig, ihr Fehlen bedingt Anmie. Auerdem ist

244

10. Aminosuren

sie wichtig beim Auftreten von Allergien. Dabei wird Histidin decarboxyliert und Histamin in Freiheit
gesetzt (Antihistaminika = Antiallergiemittel).
O

NH2
N
COOH

N
H

CHO

N-Formylkynurenin

H2
C CH2
N
H

NH2

Histamin

Tab. 10-1. Proteinogene Aminosuren, Trivialnamen, Nomenklatur, Kurzbezeichnung


(e = essentiell, ne = nicht essentiell)
Trivialname

Nomenklatur

Dreibuchstabenbezeichnung

Einbuchstabenbezeichnung

essentiell/
nicht essentiell

Neutrale Aminosuren
Glycin
Aminoessigsure
frher auch Glycocoll
Alanin
2-Aminopropionsure
Valin
2-Amino-3-methylbuttersure
Leucin
2-Amino-4-methylvaleriansure
Isoleucin
2-Amino-3-methylvaleriansure

Gly

ne

Ala
Val
Leu
Ile

A
V
L
I

ne
e
e
e

2,6-Diaminohexansure
Lys
2-Amino-5-guanidinovaleriansure Arg

K
R

e
e

2-Aminobutandisure
2-Aminobernsteinsure
2-Amino-3-aminocarbonylpropionsure
2-Aminopentandisure
2-Aminoglutarsure
2-Amino-4-aminocarbonylbuttersure

Asp

ne

Asn
oder Asp-NH2
Glu

ne

ne

Gln
oder Glu-NH2

ne

Phe
Tyr

F
Y

e
e

Ser
Thr
Cys
(Cys)2
Met
Pro
Trp
His

S
T
C

ne
e
ne

M
P
W
H

e
ne
e
e

Basische Aminosuren
Lysin
Arginin
Saure Aminosuren
Asparaginsure
Aspartinsure
Asparagin
Glutaminsure
Glutamin

Funktionelle Aminosuren
Phenylalanin
Tyrosin
Serin
Threonin
Cystein
Cystin
Methionin
Prolin
Tryptophan
Histidin

2-Amino-3-phenylpropionsure
2-Amino-3-(4-hydroxyphenyl)propionsure
2-Amino-3-hydroxypropionsure
2-Amino-3-hydroxybuttersure
2-Amino-3-mercaptopropionsure
2-Amino-4-methylthiobuttersure
2-Carboxypyrrolidin

Freies Histidin wird von verschiedenen Pflanzenarten als Gegengift gegen Schwermetalle gebildet und
ermglicht ihnen das berleben im Schadstoffmilieu exponierter Standorte. Alyssum lesbiacum z.B.
produziert es proportional zum Nickelgehalt der Nhrlsung bis zu mehreren Grenordnungen ber den
Normalgehalt und komplexiert damit das Metall.

245

10. Aminosuren

Der Tagesbedarf der essentiellen Aminosuren Isoleucin, Leucin, Lysin, Methionin, Phenylalanin,
Threonin, Tryptophan und Valin betrgt zwischen 0.2 - 1.2 g/kg Krpergewicht. Im Nahrungsprotein
(Fleisch, Fisch, Eier, Milch, Mehl) sind etwa 1 - 7 g essentielle Aminosuren/100 g Protein enthalten. Bei
Mangel essentieller Aminosuren in der Nahrung lassen sich mehr Stickstoffverbindungen in Harn und
Fces nachweisen, was bedeutet, da Krperproteine schneller abgebaut als synthetisiert werden.

Zum Nachweis der Essentiellitt von Aminosuren kann man die Alge Spirulina platensis in einer reinen
13

CO2-Atmosphre als einzige Kohlenstoffquelle wachsen lassen und sie anschlieend an Hhner
verfttern. Sowohl in den gelegten Eiern als auch im Gewebe der Tiere findet man, da sie entweder a)
das vollstndig markierte Moleklgerst intakt enthalten (z.B. Phenylalanin), bzw. b) die unterschiedliche
13

C-Verteilung fr einen Abbau der markierten Algen-Aminosuren und de novo-Synthese spricht. Damit
konnte gezeigt werden, da Prolin zumindest fr Hhner als essentiell einzustufen ist.

10.3.2 Nichtproteinogene und seltene Aminosuren

Neben den 20 genetisch festgelegten proteinogenen Aminosuren, die zu den Bausteinen der Proteine
gehren, konnten in Pflanzen und Mikroorganismen ber 500 weitere, seltenere Aminosuren
nachgewiesen werden, die als nicht-proteinogene Aminosuren bezeichnet werden. Unter diese Definition
fallen auch die D-Formen vieler proteinogener -Aminosuren. Oft sind die bergnge flieend, wenn es
sich um Hydroxylierungs- oder Methylierungsprodukte entsprechender proteingebundener Aminosuren
oder Homologe handelt (z.B. Ornithin, Hydroxyprolin), die ebenso in Proteinen gefunden werden.

Eine Auswahl nicht-proteinogener Aminosuren ist Tab. 10-2 zu entnehmen. D-Alanin ist als Bestandteil
der Teichonsuren (

) ein Baustein von Bakterienzellwnden, -Alanin [3-Aminopropionsure] ist

eine der wenigen natrlichen -Aminosuren und Bestandteil der Panthotensure (


), der Dipeptide Anserin und Carnosin und des Mureins (

), des Coenzym A (

) der Bakterienzellwand. -Aminobutter-

sure [GABA] kommt in Hefen und Bakterien vor, findet sich in relativ hohen Konzentrationen im
Gehirn und ist an neuronalen Vorgngen beteiligt. Diaminopimelinsure [A2pm3, 2,6-Diaminoheptandisure] ist ebenso ein wichtiger Bestandteil der Bakterienzellwnde und biogenetischer Vorlufer von
Lysin in Pflanzen und Bakterien.

Viele D-Aminosuren [(R)-konfiguriert] sind Bestandteile wichtiger biologischer Substanzen wie


Antibiotika, Toxine (z.B. die Toxine des Knollenbltterpilzes) und anderer Naturstoffe. Der grte Teil
dieser Verbindungsklasse stammt aus hheren Pflanzen, weitere Quellen sind u.a. Bakterien, Pilze und
verschiedene Tiere. Einige D-Aminosuren wirken als Aminosure-Antagonisten (vergl. Azaserin und DCycloserin).

246

10. Aminosuren

L-3,5-Dijodtyrosin [3-(4-Hydroxy-3,5-diiodophenyl)alanin, Iodgorgosure] und L-Thyroxin [3,3',5,5'-

Tetraiod-L-thyrosin] sind Derivate des Tyrosins und als Schilddrsenhormone [Thyroidhormone] zum
Groteil gebunden an Thyreoglobulin. Diiodtyrosin ist auerdem im Skelett von Gorgonien (Korallen),
Schwmmen, u. dgl. nachzuweisen. Es entsteht aus 3-Iod-L-tyrosin und ist Vorstufe der Biosynthese der
Thyroidhormone Thyroxin und 3,5,3'-Triiod-L-thyrosin. Letztere greifen regulativ in den Energiestoffwechsel ein und senken bei Schilddrsen-berfunktion den gesteigerten Grundumsatz.

L-Dopamin, das Decarboxylierungsprodukt des Dihydroxyphenylalanins [Dopa], wirkt als Sympatho-

mimetikum und ist ein Zwischenprodukt der Adrenalin-Biosynthese.

In hheren Pflanzen werden ungewhnliche Aminosuren vor allem in Zeiten besonderer Stoffwechselaktivitt gefunden. Zahlreiche nicht-proteinogene Aminosuren wurden aus Pflanzen der Familie der
Fabaceen isoliert. Einige dieser seltenen Aminosuren der hheren Pflanzen wirken toxisch. Dazu
gehren das aus Canavalia-Arten isolierte und im Klee vorkommende Canavanin, das insektizid und
antifungisch wirkt, das aus Mimosa-Arten isolierte Mimosin und das in Sapindaceen vorkommende
2Methylencyclopropylglycin.

1-Aminocyclopropan-1-carbonsure [ACC] ist der biogenetische Precursor des als Reifungshormon in


Pflanzen vorkommenden Ethylen und wurde proteingebunden in Preiselbeeren und spter auch in anderen
Frchten entdeckt.

247

10. Aminosuren

Tab. 10-2. Ausgewhlte Beispiele fr nicht-proteinogene Aminosuren


Name

Struktur

Vorkommen

COOH

D-Alanin

H2N

-Alanin

H2N

Teichonsuren

Pantothensure

COOH

-Aminobuttersure

H2N

COOH

Bakterien

COOH

HOOC

L,L-Diaminopimelinsure

Bakterienzellwnde
NH 2

NH 2
I

3,5-Diiodthyrosin
Iodgorgosure

Thyroxin

NH 2
H2
C CH COOH

HO
I

HO

NH 2
H2
C CH COOH

O
I

NH 2
H2
C CH COOH

HO

NH 2
H2 H2
H
N O C C CH COOH

H2N

L-Canavanin

Thyreoglobulin

HO

L-Dopa

Thyreoglobulin
Gorgonien

Klee

NH
HO

Mimosin

NH 2
H2
N C CH COOH

aus Mimosa-Arten

NH 2

-Methylencyclopropylglycin

COOH

aus unreifen Frchten


von Blighia sapida

COOH

aus unreifen Frchten


von Blighia sapida

Hypoglycin A
NH 2
NH 2

1-Aminocyclopropan1-carbonsure ACC

aus Preiselberren und


anderen Frchten

COOH
COOH
N

Azirinomycin

Streptomyces aureus

L-Azaserin

N N

COOH
O

aus Streptomyceten

NH 2

H
N
COOH

Azetidin-2-carbonsure
H
N

Sarkosin

in hheren Pflanzen

COOH

Actinomyceten

Betanin
N

COOH

O
P

COOH

Phosphinothrycin

Streptomyceten

OH
NH 2
NH 2

D-Cycloserin

Streptomyceten

O
N
H

__________________________________________________________________________________

Nicotinamin aus Nicotiana tybycum wirkt aufgrund seiner groen Tendenz zur Eisenkomplexierung als
Neutralisationsfaktor in Tomatenmutanten. Bestatin, [(2S,3R)-(3-Amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl)-Lleucin], ist ein von Streptomyces olivoreticuli produziertes Dipeptid, das als Proteaseinhibitor und
Immunmodulator wirkt. Selenocystein, das Selenanaloge der Thioaminosure Cystein, wurde

248

10. Aminosuren

ursprnglich als Selenkomponente eines bakteriellen Enzyms entdeckt und ist heute als Bestandteil von
mehreren Enzymsystemen nachgewiesen. Als eigentliche Selenoproteine werden nur solche Proteine
bezeichnet, deren Selenkomponente sequenzspezifisch, d.h. durch DNS-Codierung, aufgebaut werden
und nicht durch Substitution im Schwefelstoffwechsel.

Tab. 10-3. Weitere Beispiele nicht-proteinogener und seltener Aminosuren


Name

Struktur

Vorkommen

COOH

COOH

N
H

Nicotinamin

NH 2

Nicotiana tabacum

COOH
H
H2C C COOH

Selenocystein

Glycin-Reduktase

HSe NH 2
NH 2
COOH

Selenocystathionin

Streptomyceten

Se

HOOC

NH 2
NH 2 O

COOH

Bestatin
N
H
OH
NH 2

Baustein der
-Lactamantibiotika

Thiovalin
COOH
SH

H H
S

H2N

Aminopenicillansure

Strukturteil der
Penicilline

N
O

COOH
O

Alliin

NH 2

Knoblauch

S
COOH
O

Propenylcysteinsulfoxid

NH 2

Kchenzwiebel

S
COOH

_____________________________________________________________________________________

Das S-Allylcysteinsulfoxid Alliin ist ein Inhaltsstoff des Knoblauchs und der Zwiebel und wird durch das
Enzym Alliinase in das antibiotisch wirksame Diallylthiosulfinat Allicin gespalten. Wasserdampfdestillation bildet daraus das Diallyldisulfid als Hauptbestandteil des Knoblauchls. Aus dem isomeren S(1-Propenyl)-L-cysteinsulfoxid entsteht bei Verletzung des Gewebes in der Zwiebel durch Einwirken der
Alliinase das zu Trnen reizende Propanthial-S-oxid. In verschiedenen tierischen und pflanzlichen Zellen
entsteht aus L-Arginin durch molekularen Sauerstoff L-Citrullin und Stickstoffmonoxid NO, das je nach
Syntheseort physiologisch bis pathophysiologisch wirken kann.
O

NH2

Diallyldisulfid

Allicin
NH2

HN
NH

Alliin

S
COOH

H2N

NH2

HON

(CH2)3 CH COOH

NH

NH

(CH2)4 COOH

H2N

H2N
L-Arginin

(CH2)3 CH COOH

N-Hydroxy-L-arginin

L-Citrullin

249

10. Aminosuren

Die Tricholomsure [-Amino-3-oxo-5-isoxazolidinessigsure] ist ein Aromastoff aus dem Ritterling


Tricholoma muscarium, Connatin kommt im Weien Rasling [Lyophyllum connatum] vor. Da
aliphatische Azoverbindungen mutagen sind, ist vor diesem Pilzgenu zu warnen. Die Aminosure
Coprin aus dem Faltentintling [Coprinus atramentarius] ist fr dessen Giftigkeit in Zusammenhang mit
Alkoholgenu verantwortlich.
O

NH2

O
HOOC HC

COOH

NH
N

HO

H
N
COOH

NH2
O

Tricholomsure

OH

NH2

Connatin

Coprin

10.3 Analyse von Aminosuren

10.3.1 Charakterisierung von Aminosuren

Die klassische Farbreaktion zur Charakterisierung von Aminosuren ist die Ninhydrinreaktion zur
Anfrbung von Chromatogrammen oder chromatographischen Fraktionen. Zwei Molekle Ninhydrin, das
Hydrat des Indan-1,2,3-trions, reagieren mit Aminosuren entsprechend Formel 9-3 zu einer intensiv
blau-violett gefrbten (max = 570 nm) indigoiden Verbindung, die die quantitative photometrische
Bestimmung erlaubt und fr die qualitative und quantitative Analyse Anwendung findet. Die
Ninhydrinreaktion gelingt selbst mit Spuren von Aminosuren, allerdings auch mit Aminen und
Ammoniak. Prolin und Hydroxyprolin mit ihren sekundren Aminogruppen geben einen gelben Farbstoff,
ebenso besitzt - bei Umsetzung in stark saurer Lsung - das Reaktionsprodukt von Tryptophan eine
andere Struktur.

250

10. Aminosuren
O

O
H2O

OH

O
OH

Indan-1,2,3-trion

Ninhydrin

O
R

OH
H2N

CH COOH

-Aminosure

OH

- H2O

- CO2

COOH

O
O

H
O

H2O

N
- RCH=O
O

- H+

NH2
O

Formel 10-3. Ninhydrinreaktion zum qualitativen und quantitativen Aminosurenachweis.

Eine Flle neuerer Farb- oder Fluoreszenzreagenzien wurde zur Derivatisierung von Aminosuren
entwickelt, die aufgrund einer ausgeprgten UV-Absorption oder Fluoreszenz der Produkte zu hherer
Nachweisempfindlichkeit fhren. o-Phthaldialdehyd [OPA] reagiert in Kombination mit 2-Mercaptoethanol mit Aminosuren zu Isoindolderivaten, Fluorescamin zu einem Pyrrolinon. Dansylchlorid [1-Dimethylaminonaphthalin-5-sulfonylchlorid] und Dabsylchlorid [4-(Dimethylamino)azobenzol-4-sulfonylchlorid] liefert mit Aminosuren stark fluoreszierende Sulfonamidderivate. Als weitere Fluoreszenzreagenzien fr Aminosuren sind 4-Fluor-7-nitro-benzofurazan [7-Fluoro-4-nitro-2-oxy-1,3-diazol,
NBD] und 9-Fluorenylmethyl-carbonylchlorid [FMOC-Cl] genannt, das Fluorenaminosurederivate
erzeugt, die sowohl fluoreszieren als auch im UV absorbieren. Whrend mit der OPA-Methode sich nur
primre Aminosuren derivatisieren lassen, reagiert FMOC-Cl mit primren und sekundren und lt sich
auch leicht in Analyseautomaten verwenden. Reaktionen von Aminosuren mit Phenylisothiocyanat
[PITC] gibt Phenylthiocarbamylderivate (vgl. EDMAN-Abbau von Proteinen, 11. ).

251

10. Aminosuren

CH2 CH2 OH

CHO
HS

CH2 CH2 OH

H2N

CHO

o-Phthaldialdehyd OPA

O
+ H2N

R
O

OH
COOH

Fluorescamin

O
N

+ H2N
O

CHR

COOH

Dansylchlorid

Cl

S
NH

O
CHR

COOH

NH2
N

SO2Cl

+ H2N

CHR

COOH

CHR

COOH

SO2 CH

Dabsylchlorid

O2N
O2N

H2N

HN

N
N

CHR

COOH

N
O

7-Fluor-4-nitrofurazan NBD

+ H2N

R
O

O
H2C O
H2C O

NH R

Cl

9-Fluorenylmethoxycarbonylchlorid FMOC-Cl
R1

O
N

S
R1

H
N

N
R2

+ HN
R

Phenylisothiocyanat PITC

Formel 10-4. Derivatisierung von Aminosuren durch Farb- und Fluoreszenzreagenzien.

10.3.2 Trennung und Bestimmung von Aminosuren

Aminosuren knnen mit Hilfe der Elektrophorese (1.

) getrennt werden, wie in Abb. 10-3 dargestellt

ist. Hier ist der Elektrolyt auf pH = 9.7 gepuffert, von den aufgetragenen Aminosuren bleibt Lysin (IP =

COOH

252

10. Aminosuren

9.7) an der Startlinie. Dagegen tragen die Substanzen 2, 3 und 4 bei pH = 9.7 eine negative Ladung und
wandern zum Pluspol.

Abb. 10-4. Schematische Darstellung der Elektrophorese.

Chromatographisch lassen sich Aminosuren an Cellulose oder Kieselgel, Papierchromatographie [PC]


oder Dnnschichtchromatographie [DC], trennen und qualitativ bestimmen. Eine gaschromatographische
Trennung und Bestimmung ist aufgrund der Nichtflchtigkeit von Aminosuren erst nach Derivatisierung
mglich.

Hochauflsende Flssigchromatographie [HPLC] unter Verwendung von Umkehrphasen [reversedphase] ist heute als Standardprozedur fr die Trennung von Aminosuren etabliert. Eine hhere Detektierbarkeit gegenber der Detektion im UV/Vis-Bereich und Verbesserung der Analysenzeiten wird durch
Derivatisierung mit fluoreszierenden oder UV-absorbierenden Gruppen (Vorsulen- und NachsulenDerivatisierung) erreicht. Chirale Phasen wie z.B. auf Kieselgel kovalent gebundene Cyclodextrine (vgl.
1.

) sind hervorragend geeignet zur Auftrennung in die optischen Antipoden und Analyse derivatisierter

D,L-Aminosuren.

Abb. 10-3. Chromatogramm der Hydrolyseprodukte des Peptidantibiotikums Gramicidin S (nach H.


GODEL, P. SEITZ und M. VERHOEF, HP-Analytical Div.).

10.4. Synthesen

Aminosuren werden heute in groem Mastab industriell produziert. Der Start fr die industrielle
Aminosuresynthese geht auf die Entdeckung der L-Glutaminsure im Seetangextrakt [1908], einem
traditionellen japanischen Suppenbestandteil, zurck. Bereits ein Jahr spter wurde das Mononatrium-LGlutamat als Gewrzmittel eingefhrt. Alle proteinogenen Aminosuren besitzen heute industrielles
Interesse. Der jhrliche Umsatz betrgt mehr als 1 Milliarde US-$, davon entfallen mehr als 25.000 t
Produktionsmengen auf Glutaminsure, 25.000 t auf Lysin, und auf Methionin ber 1,000.000 t.

Aminosuren werden in letzter Zeit zunehmend zu Nahrungs- und Futtermitteln zugesetzt und als
Additiva fr Kosmetika, synthetische Polymeren und Detergenzien eingesetzt. Wirkstoffe in Pflanzenschutzmitteln und vor allem eine Reihe von Pharmawirkstoffen werden ausgehend von -Aminosuren
hergestellt. Medizinisch dienen Gemische von Aminosuren u.a. zur Bereitung von Infusionen zur knstlichen Ernhrung und besitzen als Chemotherapeutika Bedeutung. N-Acetyl-Cystein wirkt als
Mukolytikum und erleichtert die Entfernung des Schleims aus den Bronchien bei Erkltungen. Methionin
und Lysin finden in der Tierproduktion Anwendung. Whrend fr die tierische und menschliche

253

10. Aminosuren

Ernhrung natrliche L-Aminosuren bentigt werden, werden bei Methionin L- und D-Formen gleichermaen verwendet. Weitere Anwendung finden Natriumacylglutamat als Seife und Poly--glutamat als
Beschichtungsmaterial von Kunstleder-Folien.

10.4.1 Aminosuren aus Proteinhydrolysaten

Die Gewinnung von Aminosuren aus Proteinhydrolysaten lohnt sich dann, wenn ein leicht zu
beschaffendes Protein besonders reich an der entsprechenden Aminosure ist und/oder die Aminosure
sich besonders leicht isolieren lt. Aufgrund ihrer Schwerlslichkeiten lassen sich Glutaminsure, Cystin
und Tyrosin aus Proteinhydrolysaten gewinnen, reines Threonin (etwa 160 t/Jahr) und Tyrosin (ca. 50 t)
z.B. aus Eiwei-Hydrolysaten. Aus Gelatinehydrolysat wird vor allem Hydroxyprolin isoliert.

10.4.2 Racemische Aminosuresynthese

Durch Totalsynthese werden Glycin, die racemischen sowie die L-Aminosuren Alanin, Methionin,
Phenylalanin, Serin, Tryptophan und Tyrosin in betrchtlicher Menge produziert. Im Unterschied zu den
aus Proteinhydrolysaten oder durch mikrobielle Verfahren gewonnen Aminosuren fallen bei Totalsynthesen Racemate an, so da sich oft eine Racematspaltung anschlieen mu. Wo Wirtschaftlichkeit
eine hohe Prioritt besitzt, ist die Rckfhrung des anderen Enantiomeren in den Proze unerllich.
-Aminosuren erhlt man direkt durch nucleophile Substitution des Halogens von -Halogencarbonsuren, wie man sie durch HELL-VOLHARDT-ZELINSKY-Reaktion ber die Surehalogenide erhlt, mit
Ammoniak.
O
R

Br2 / P

OH

NH3
R

CH2 C

CH
Br

R
Br

CH

R
OH

Br

CH
NH2

C
O

NH4

Racemisches Prolin lt sich durch Sureamid-Abbau und Bromierung aus Adipinsure herstellen.
H2
C NH2

H2
C COOH
H2SO4 / HN3

H2C
H2C

SCHMIDT-Abbau
C COOH
H2

Adipinsure

H2C

H2C
C COOH
H2

Br2 / P

HELL-VOLHARDTZELINSKY-Reaktion

H2
C NH2
H 2C

OH-

NH

H 2C
CH
Br

COOH

COOH

()-Prolin

An die Natur angelehnt ist die reduktive Aminierung von -Ketosuren. Die katalytische Hydrierung des
Ketimins mit Wasserstoff/Platin kann in Gegenwart von NH3 als "Eintopfverfahren" durchgefhrt
werden.

254

10. Aminosuren

NH

NH2

H2 / Pt

NH3
COOH

COOH

COOH

()-Alanin

Brenztraubensure

-Aminosuren lassen sich durch Addition von NH3 an ,-ungesttigte Carbonsuren darstellen.
NH2
NH3
COOH

COOH

()-Aminobuttersure

Ein klassisches Verfahren ist die Phthalimidomalonestersynthese, eine Modifikation der GABRIELSynthese. Durch Alkylierung des Malonesters 3 mit Alkylhalogenid R-Hal entsteht ber 4 jede
gewnschte Aminosurestruktur 5. So wird aus Isobutylchlorid als Alkylierungsreagenz Leucin
hergestellt, Lysin entsteht bei Verwendung von 1,4-Dibrombutan.
O

O
COOC2H5

COOC2H5

Br CH

1. RO-

N CH
2. RHal
COOC2H5

COOC2H5

Phthalimidkalium

Brommalonsureester

O
COOC2H5
N

COOH

H2O / H+

COOC2H5

COOH
+

CH

CO2

2 EtOH

COOH

NH2

Bei der Acylaminomalonat-Synthese ist der N-Acetylaminomalonester 8 die Schlsselsubstanz, der wie
bei der Malonestersynthese alkyliert werden kann. Hydrolyse des Alkylierungsprodukts 9 ergibt
racemische -Aminosuren 5.
COOEt

COOEt

COOEt

COOEt
H2 / Ni

HONO
ON

Ac2O

H2N

COOEt

COOEt

Malonsureester

H
N
COOEt

COOEt

N-Acetylaminomalonsureester
8

6
H3O+,

COOEt
1. NaOEt
EtOOC

CH3CO

2. R-Br

COOH

- CO2
HN

NH2

COCH3

hnlich der Cyanhydrinsynthese ist die STRECKER-Synthese, wobei von einem der Aminosure-Seitenkette R entsprechenden Aldehyd R-CH=O 10 ausgegangen wird. Durch Umsetzung mit einem Gemisch
aus Blausure und Ammoniak entstehnt ein -Aminonitril 11, dessen Hydrolyse zur -Aminosure 5
fhrt.
R
H

10

NH2

HCN

NH3
C

NH2

NH

O
R

C
H

H2O

COOH

11

255

10. Aminosuren

Synthetisch besonders ntzlich sind Hydantoine, die aus -Aminonitrilen und Kohlendioxid bzw. aus
Aminosuren und Kaliumcyanat entstehen. Als Harnstoffderivate knnen sie unter milden Bedingungen
zu Aminosuren hydrolysiert werden, was die Ausbeute der industriellen STRECKER-Synthese
betrchtlich erhht. Zur Darstellung der wirtschaftlich bedeutsamen Glutaminsure wird aus Acrylnitril
durch Hydroformylierung -Cyanopropionaldehyd 12 hergestellt. Mittels STRECKER-Synthese und
anschlieender CO2-Addition entsteht daraus ein Hydantoinderivat 13, dessen schonende Hydrolyse ()Glutaminsure ergibt.
O
HN
CO / H2

NH2

1. HCN / NH3

NaOH

NH

CN

CN

Co(CO)5

Acrylnitril

NC

2. CO2

HOOC

12

13

COOH

()-Glutaminsure

Die Umsetzung des obigen Cyanoaldehyds 12 zum Hydantoin 14 und anschlieende Reduktion fhrt
wiederum zu einem Aldehyd 15; die weitere Umsetzung mit Phenylhydrazin 16, anschlieende
Umlagerung [FISCHER'sche Indolsynthese] und Hydrolyse des Hydantoins 18 wird bei der industriellen
Synthese von Tryptophan angewendet.
O

O=HC

NC
CN

NH NH2
1. H2 / Ni

HCN
(NH4)2CO3

HN

HN

NH

NH

2. H2O

16

12
14

15

O
O

O
HN

NH

H+

OH
HN

H2O

HN

NH

O
H

17

NH

N
H

18

()-Tryptophan

Methionin wird in einer "Eintopfreaktion" durch Addition von Methylmercaptan an Acrolein und
Umsetzung mit Blausure und Ammoniumcarbonat ber ein Hydantoinderivat 20 erhalten. Da der
Nhrwert von (R)-Methionin erstaunlicherweise gleich hoch ist wie der der (S)-Form, wird nach der
kommerziellen Synthese blicherweise keine Racematspaltung durchgefhrt.
O

CH 3S
O

CH 3SH

CH 3S

Acrolein

19

HCN
(NH 4)2CO3

CH 3S
HN

NH
O

COOH
NH 2

()-Methionin

Thiomethylethyl-hydantoin 20

Threonin entsteht durch Addition von Methanol und Brom an trans-Crotonsure und nachfolgender
nucleophiler Substitution des Broms in 21 mit Ammoniak und anschlieender Hydrolyse. Dabei entsteht
ein Gemisch aller vier Stereoisomeren.

256

OCH3
CH3OH
Br2

COOH

10. Aminosuren

OCH3
NH3

CON(Et)2

Br

trans-Crotonsure

CON(Et)2

Br

21

OCH3

OCH3

COOH

22

H3O+

COOH
NH2

NH2

23

()-Threonin

Die ERLENMEYER-Synthese als Variante der PERKIN-Reaktion geht von Benzoylglycin [Hippursure] aus,
das durch Dehydratisierung ein Azlacton 24 [4H-oxazol-5-on] gibt. Die KNOEVENAGEL-Kondensation
mit Benzaldehyd 25, Hydrierung zu 27 und anschlieende Hydrolyse fhrt zu ()-Phenylalanin.
O

O
H2C
HN

O
OH

- H2O

H2C

OH

Ac2O

H2C

OH

CO

CH=O

C
O

25

C
C6H5

C6H5

C6H5

Azlacton 24

N-Benzoylglycin [Hippursure]
H
C6H5

O
C

CH2 C

C6H5

H2 / Kat.

CH2 CH

OH-

26

NH2

C6H5

27

C6H5

COOH

H2O

()-Phenylalanin

Analog entsteht aus Benzaldehyd 25 mit Hydantoin 28 das entsprechende Benzylidenhydantoin 29 und
konsequenterweise wieder Phenylalanin.
O
H2C

25

OH-

H2 / Pd

()-Phenylalanin

NH

HN

H2O
NH

HN

NH

HN

O
O

Hydantoin 28

30

29

Nach I. UGI lassen sich Isonitrile, Ketone, sekundre Amine und Carbonsuren in der sog.
Vierkomponenten-Reaktion, die aus der PASSERINI-Reaktion entwickelt wurde, zu -Dialkylaminosuren
umsetzen. Mehrkomponentenreaktionen dieser Art finden u.a. in der Kombinatorischen Synthese (
) Anwendung.
R2
1

C
R3

R4
O +

NH + R6
R5

R1

R2

COOH

C
R6

C
R3

R4

R2

R4

H2O

C
R5

HO

C
R3

N
R5

10.4.3 Enantioselektive Synthesen von Aminosuren

Zur enantioselektiven Synthese bietet sich zuweilen die Modifikation leicht verfgbarer natrlicher
Aminosuren an, ohne das Chiralittszentrum zu verndern. Als Beispiel soll die Partialsynthese des
Enzymhemmers L-Vinylglycin 33 aus L-Methionin durch Pyrolyse des N-geschtzten Sulfoxides 31
dienen.

257

10. Aminosuren

6N HCl,

COOMe
S

148C / 3 Torr

COOMe

H
H

NH CO

NH CO

COOH
H

CH2 C6H5

NH3.HCl

CH2 C6H5

32

31

33

Bei Synthesen, die zugleich das Chiralittszentrum aufbauen, unterscheidet man enantiodifferenzierende
und diastereodifferenzierende Synthesen. Im Fall der enantiodifferenzierenden Synthese wird
Asymmetrie im prochiralen Edukt von einem externen optisch aktiven Hilfsreagenz induziert, fr den
zweiten Fall ist entweder bereits ein Stereozentrum vorhanden oder es wird ein optisch aktives Hilfsreagenz im Edukt "eingebaut" und bewirkt intern asymmetrische Induktion. Das Hilfsreagenz wird nachtrglich wieder abgespalten. Bei beiden Methoden werden die Unterschiede in den freien Aktivierungsenergien (G*) diastereotoper bergangszustnde ausgentzt.
Zur Gruppe mit enantiodifferenzierenden Reaktionen zhlt die asymmetrische Hydrierung prochiraler Aminoacrylsurederivate mit Hilfe lslicher Rh-Katalysatoren [z.B. Wilkinson-Katalysator] mit optisch
aktiven Diphosphinliganden. Eines der ersten chiralen Diphopshine war das von H.B. KAGAN entwickelte
DIOP, weitere Verbesserungen stellten DIPAMP und BINAP dar. DIPAMP wird im Monsanto-Proze
zur Darstellung von L-Dopa verwendet (85% ee).
OCH3

OCH3

OCH3
Ph

PPh3

HO

HO
H2

PPh2
Rh-DIPAMP

OCH3
PPh2

PPh3
Ph

AcHN

DIOP

BINAP

DIPAMP

N-Acetyl-Acrylsure
Ph2P

NH-Ac

AcHN

COOH

N-Acetyl-Dopa

PPh2

NH-Ac
H2

Rh

R
(R)-Komplex
H

COOH

COOH

C
H2

COOH

R = H, 85% ee

P
C6H5
C6H5

W ILKINSON-Katalysator

Zur diastereodifferenzierenden Gruppe gehrt u.a. eine asymmetrische Strecker-Synthese, wie am


Beispiel der Darstellung von (S)-Phenylglycin gezeigt wurde. Benzaldehyd, Cyanwasserstoff und ein
chirales Amin als Hilfsreagenz, ein Nebenprodukt der Chloramphenicol-Synthese, ergeben ein Gemisch
diastereomerer -Aminonitrile, die miteinander im Gleichgewicht stehen. Unter geeigneten Reaktionsbedingungen kristallisiert nur das (S)-Enantiomer aus, dessen Verseifung und oxidativer Abbau optisch
reines L-Phenylglycin ergibt.

258

10. Aminosuren

Bislactimether [3,6-Dihydro-2,5-dimethoxypyrazine] entstehen durch Kondensation zweier Aminosuren


zum Diketopiperazin 39 und O-Alkylierung (z.B. mit Trimethyloxoniumtetrafluoroborat). Sie lassen sich
mit Basen mono-deprotonieren (40) und mit hoher Diastereoselektivitt mit einem Elektrophil R-X zu 41
alkylieren [U. SCHLLKOPF]. Der Angriff des Elektrophils erfolgt von der sterisch weniger gehinderten
Unterseite, die Oberseite wird durch den Alkylsubstituenten des verbleibenden Chiralittszentrums abgeschirmt. Die nachfolgende Hydrolyse ergibt zwei Aminosuren, von denen die neugebildete formal den
-Wasserstoff der originren Aminosure durch einen Alkylrest ersetzt hat. Die Konfiguration der
gewnschten Aminosure ist von der Stereochemie der Bislactimether abhngig.
H
H

O
H2N

OCH3

OH

OH

(CH3)3O+BF4-

HN

- H2O

N
N

NH
NH2

CH3O
H

H
L-Alanin

OCH3

CH3O

LDA

40

39

41
H

OH
OCH3
N

H , H2O

R-X

N
CH3O

L-Alanin

H2N

NH2
HO

Alkylalanin R = CH2Ph (93% de)

42

Viele Reaktionen zur Darstellung von chiralen -Aminosuren sind letztlich Derivatisierungen von
Glycin oder Glycinderivaten in -Position, andere sind Homologisierungen von Serin-Templaten in der
-Stellung, die elektrophile Aminierung von Enolaten, die asymmetrische STRECKER-Synthese und die
asymmetrische Hydrierung von Dehydroaminosuren.

10.4.4 Biotechnologische Verfahren zur Aminosuresynthese

Die meisten Aminosuren werden mikrobiologisch mit Wildtypen und Mutanten von Mikroorganismen
durch Fermentation gewonnen. Daneben werden Aminosuren auch mit Hilfe immobilisierter Mikroorganismen (z.B. L-Aspartinsure in Japan), ganzer Zellen oder isolierter mikrobieller Enzyme
produziert.

In einem fermentativen Verfahren werden z.B. Mutanten von Mikroorganismen eingesetzt, die ein
gewisses berproduktionspotential besitzen und aus einer C-Quelle (z.B. Glucose) und einer N-Quelle in
Ausbeuten bis zu 60 g/l Aminosuren produzieren. Fr die Herstellung von (-)-Glutaminsure wird z.B.
Corynebacterium glutamicum und Brevibacterium flavum verwendet.

Unter Verwendung intakter Zellen oder isolierter oder an polymere Trger gebundener Enzyme kann man
bei enantiodifferenzierenden Reaktionen einen hohen Enantiomerenberschu erzielen. Die Umsetzung
von Indol, Brenztraubensure und Ammoniak mit -Tyrosinase/Pyridoxalphosphat liefert L-Tryptophan.

259

10. Aminosuren

O
OH
COOH

+
O

Enzym

Brenztraubensure

N
H

PLP
+

NH3

Indol

H2N

N
H
L-Tryptophan

Alanin wird aus Fumarsure gebildet. Unter Verwendung einer Zellsuspension von E. coli und durch die
in ihr enthaltene Aspartase wird Asparaginsure erzeugt. Durch Einwirkung von Aspartat-Decarboxylase wird durch Decarboxylierung L-Alanin erhalten.

10.5 Racematspaltung

Bei vielen Totalsynthesen und industriellen Prozessen fallen racemische Aminosuren an, die eine
anschlieende Racematspaltung erfordern. Vor allem von der pharmazeutischen Industrie wird heute eine
hchstmgliche Enantiomerenreinheit gefordert, um mgliche inhibitorische Effekte oder Nebenwirkungen durch "biologisch-falsche" Enantiomere bei therapeutischen Anwendungen auszuschlieen.

Im gnstigsten Fllen gelingt die Racematspaltung bereits durch Kristallisation, so gelingt die Herstellung von (S)-Glutaminsure durch Animpfen der bersttigten wrigen Lsung mit (S)-Glutaminsurekristallen. Die zurckbleibende (R)-Sure aus den Mutterlaugen wird racemisiert und wieder in den
Proze zurckgefhrt. Andernfalls mssen Trennungen von diastereomeren Derivaten oder kinetische
Racematspaltungen durchgefhrt werden oder enzymatische oder chromatographische Methoden mit
chiralen Sorbenzien angewandt.

Als diastereomere Salze zur Racematspaltung haben sich die Salze der freien Aminosuren mit optisch
aktiven Suren wie z.B. Camphersure, Weinsure und die der acylierten Aminosuren mit optisch
aktiven Basen wie z.B. Brucin oder Strychnin bewhrt. Grotechnisch wird Lysin aus dem bei der Kunstfaserproduktion anfallendem Caprolactam 73 gewonnen. Zur Racematspaltung wird das -Aminocaprolactam 76, das als Zwischenstufe auftritt, mit einem Mol (S)-Pyrrolidin-Carbonsure 77 versetzt, worauf
das (S,S)-Salz 78 ausfllt und mit Natronlauge zu (S)-Lysin hydrolysiert wird.

CO-Cl
H
N

260
O

CO-Cl

10. Aminosuren
O

N
HNO3 / H2SO4

COCl2

H2 / Raney-Ni
NO2

75

74

73

H
H
N

COOH
N
H

OH-

(S)-Lysin
H2N

NH2

77

76

N
H

COO

78

Vollstndige Enantiomerentrennung von (R)- und (S)-Aminosuren gelingt mittels optisch aktiver
Kronenether [CRAM], die mit Aminosuren Komplexbildung eingehen, und Verteilung in einem Zweiphasen-System mit anschlieender Extraktion, die die Reindarstellung optisch-einheitlicher Aminosuren
erlaubt.

Unter den enzymatischen Methoden hat vor allem der Einsatz von Aminoacylasen Bedeutung erlangt, die
Racemate acylierter Aminosuren stereospezifisch hydrolysieren.
R1

Aminoacylase

CO

NH

CH

COOH

R1

COOH + NH2 CH

COOH

In einem industriellen Proze wird eine trgerfixierte Aminoacylase [E.C.3.5.1.14] zur stereospezifischen
Hydrolyse einer N-Acetyl-L-Aminosure zu Aminosure und Acetat ausgenutzt. Die N-Acetyl-D-Aminosure im racemischen Gemisch wird nicht hydrolysiert und kann in den Proze rckgefhrt werden. Da
die freie L-Aminosure relativ leicht von der acetylierten abgetrennt werden kann, bietet die
enzymatische Hydrolyse eine elegante Methode zur Racematspaltung bei Aminosuren. Die Acylase
stammt aus Nieren oder Aspergillus oryzae. Nach diesem Verfahren werden industriell L-Methionin, LPhenylalanin, L-Valin und L-Alanin produziert. Ein kontinuierlicher Proze (Abb. 10-4) kann auch mit
lslichen Enzymen erreicht werden, wenn eine geeignete Ultrafiltrationsmembran verwendet wird, die
das Enzym physikalisch am Verlassen des Reaktionsraumes hindert.

Abb. 10-4. Kontinuierliche Produktion von L-Aminosuren mit immobilisierter Aminoacylase. Im


Ansatzbehlter wird die N-Acetyl-D,L-aminosure gelst und auf pH 7 eingestellt. Die Lsung wird ber
ein Filter und einen Wrmeaustauscher in den Reaktor gepumpt, der als Festbett in einer Sule
ausgebildet ist. Nach dem Verlassen des Reaktors wird die gebildete kristalline L-Aminosure in einem
Kristallisator und Separator abgetrennt. Die lsliche Acetyl-D-aminosure wird wieder racemisiert und in
den Proze rckgefhrt.

10.6 Reaktionen von Aminosuren

10.6.1 Reaktion der Amino- und der Carboxylgruppen

261

10. Aminosuren

Die freie Aminogruppe reagiert mit Sureanhydriden oder Surechloriden bei Basenzugabe unter Bildung
des Acylamids, unter drastischen Reaktionsbedingungen kommt es jedoch zur Azlactonbildung.
H2
C

O
(CH 3CO) 2O

(CH3CO) 2O
H2 N

H3 C

CH2 COOH

HN

CH2 COOH

- H2 O

oder
CH3COCl

O
H3C

Azlacton

Aminosuren lassen sich, wenn das N-lone pair der Aminogruppe durch Acetylierung oder Salzbildung
blockiert ist, mit Alkoholen oder mit 2,2-Dimethoxypropan verestern. In Gegenwart von HCl entstehen
die stabilen protonierten Aminosureester. Im Unterschied zu diesen Hydrochloriden sind die freien
Aminosureester oft nicht stabil.
O

O
1. SOCl2

NaOH
H3N

H3C

CH2 COO

C HN

CH2 COOH

H3C

(CH3CO)2O

CH2 COO

CH2 COOCH3

CH3OH

trock. HCl
H3N

C HN

2. CH3OH

H3N

CH2 COOH
HCl

(Gas)
1. HCl (aqu.)
H3N

OCH3

CH2 COO

H3N

CH2 COOCH3

2.
OCH3

An der Aminogruppe geschtzte Alkylester knnen in die entsprechenden Hydrazide und Azide
umgesetzt werden. Azide, Anhydride, aktivierte Ester und in sehr begrenztem Umfang auch Halogenide
N-geschtzter Aminosuren werden als aktivierte Carboxylderivate bei der Peptidsynthese (11.

eingesetzt.
O
CH

NH2

HONO
X HN

OC2H5

O
H2N

X HN

CH

X HN

C
NH

NH2

CH
R

C
N3

X = Schutzgruppe

Die Reduktion von Aminosuren durch Lithiumborhydrid in nicht-wrigem Medium fhrt zu primren
Alkoholen.
R

R
LiBH4
H 2N

CH

H2N

COOH

CH

CH2OH

Die Aminogruppe von Aminosuren reagiert mit Aldehyden zu Azomethinen [SCHIFFsche Basen]. Im
Unterschied zu Aminen sind Azomethine kaum basisch und werden durch Suren leicht wieder in ihre
Ausgangskomponenten gespalten. Als SCHIFFsche Basen sind zahlreiche Verbindungen nativ an die Aminogruppe des Lysins von Proteinen gebunden (z.B. Retinal, Pyridoxal).
NH2
R

CH

COOH
- H2O
COOH

O=CH-R'
+ H2O

CH

CH

R'

262

10. Aminosuren

Die -Aminomethylgruppe von Lysin wird leicht durch Sauerstoff zur Aldehydgruppe ["Lysinaldehyd",
Allysin] oxidiert. Lysin bzw. das Oxidationsprodukt Lysinaldehyd kann aldolartige Verknpfungen von
Polypeptidstrngen bewirken, SCHIFFsche Base-Kondensation mit weiteren Lysin-Proteinstrngen geben
vielfach quervernetzte Proteine ("Elastine") und sind als Zwischenprodukte an der Biosynthese der
Kollagenfasern beteiligt.
NH2

NH2
O2, H2O
H2N

O=CH

Lysinaldehyd
COOH

COOH
- NH3

Wesentlich instabiler als die Kondensationsprodukte der Amine mit Aldehyden sind die Reaktionsprodukte mit 1,2-Diketonen, die unter Abspaltung der Carboxylgruppe der Aminosure ablaufen. Ein
Spezialfall ist die Ninhydrinreaktion (10.3.1).

Mit Cyanat reagieren Aminosuren zu Carbamylderivaten.


NH2
R

CH

COOH

H+

CNO-

COOH

CH

NH

NH2

Das C-2-Asymmetriezentrum von Aminosuren ist relativ labil, daher racemisieren sie beim Erhitzen in
alkalischem Medium und in starken Suren (vgl. Altersbestimmung von Fossilien, 10.1). Besonders leicht
racemisieren funktionelle Aminosuren am -Kohlenstoff (z.B. Serin, Cystein). Die Carbanionen der bei
Peptidsynthesen hufig verwendeten N-Alkoxycarbonylaminosuren sind dagegen durch Mesomerie
stabilisiert und deren Racemisierung erschwert.

Die Anwesenheit der nucleophilen Aminogruppe neben einer Carbonylgruppe gibt Anla fr zahlreiche
Cyclisierungen, durch Angriff an der Carbonylgruppe von Aminosureestern werden 2,5-Diketopiperazine gebildet. Letztere reagieren nicht mit Ninhydrin, einige natrlich vorkommende Diketopiperazine
besitzen antibiotische Wirkung.
R1

H
N

N
H

H2N

CH

COOR
- 2 R2-OH

R1

R1

2,5-Diketopiperazine, Dioxopiperazine

Ein intramolekularer Angriff der -stndigen Aminogruppe Peptid-endstndiger Glutaminsureester an


der eigenen -Carbonylgruppe fhrt zu Derivaten des Pyrrolid-5-carbonsure-2-ons [Pyroglutaminsure,
Pyr]. Solche Peptid-endstndige Pyroglutaminsureester werden in verschiedenen Hormonen gefunden.
H2C
R

CH2

CH

NH2 O

Peptid
O

R = Alkyl

N
H

CO

Peptid

Pyrrolid-5-carbonsure-2-on, Pyr,

Glu

Durch intramolekulare Cyclisierung von N-Benzyloxycarbonylaminosurehalogeniden entstehen 5substituierte Oxazolidin-2,4-dione, die nach ihrem Entdecker LEUCHsche Anhydride bezeichnet werden.

263

CH
HN

Cl
C O

10. Aminosuren
R

O
HN

CH2

Oxazolidin-2,4-dion
LEUCHsches Anhydrid

Durch besonders reaktionsfhige aromatische Verbindungen lassen sich Aminosuren N-arylieren. Eine
besondere Bedeutung hat die Umsetzung mit 2,4-Dinitrofluorbenzol als Grundlage der Endgruppenbestimmung von Proteinen nach SANGER. Die Arylierung mit 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsure [HABEEB]
oder Naphtho-1,2-chinon-4-sulfonsure [Aminosurereagenz nach FOLIN] erfolgt ber die Bildung von
MEISENHEIMER-Komplexen unter Abspaltung von Hydrogensulfit.

O2N

H2 N

COR2

CH

O2N

- HF

HN

CH

COR2

NO2

NO2

SANGER -Reagenz
NO2

NO2
O2N

SO3Na

H2 N

COR2

CH

O2N

HN

CH

- NaHSO3

R1

COR2

R
NO2

NO2

OH

O
+

H2N

COR2

CH

- NaHSO3

R1

SO3Na

CH

COR2

Acetyliert man Aminosuren in kochendem Pyridin, so fhrt dies unter spontaner Decarboxylierung zu
racemischen -Aminoketonen.
Pyridin,
R

CH

COOH

CH

COCH3

Ac2O
- CO2

H2N

COCH3

NH2

optisch aktiv

racemisch

Ebenso fhrt das Erhitzen in hochsiedenden Lsungsmitteln oder Bromierung mit N-Bromsuccinimid
NBS zur Decarboxylierung. Die entstehenden -Bromamine sind instabil und reagieren weiter zu
Aldehyden und Nitrilen.

CH

COOH

NBS
R

CH

CH2 NH2

CH

- CO2

NH2
COOH

- CO2

NH2

CH

NH

CH

Br

NH2

Nitrosierung und Zersetzung der entstandenen Diazoverbindungen mit Wasser fhrt zu -Hydroxycarbonsuren [VAN SLYKE-Bestimmung].
OH

NH2
R

CH

1. HNO2
R

COOH
2. H2O

CH

COOH

264

10. Aminosuren

Setzt man Aminosuren mit Anhydriden um, so entstehen Azlactone, deren -Wasserstoff unter Konfigurationserhalt substituiert werden kann.
H
H

O
R

COOH

H3C

NH2
Br

H3C

Azlacton

OR1 O
R1-OH

CH3

Br2

OR1

H2O

- CH3COOH

COOH

NH2
H3C

H3C

Chlorameisensureester geben mit aktivierten -Aminosuren cyclische Anhydride, die mit Wasser zu
Polyaminosuren reagieren.
H

H
25C

COCl

Cl

CH2 C6H5

COCl
- C6H5CH2Cl

NH2
H

H2N

COO

CH2 C6H5

H2O (Spuren)

HN

NH2

[CHR CO

NH]n COOH

Polyaminosure

- CO2

, , , - und -Aminosuren unterscheiden sich charakteristisch in ihrem Verhalten beim


Erwrmen: -Aminosuren geben Diketopiperazine, -Aminosuren eliminieren NH3, - und -Aminosuren cyclisieren zu - und -Lactamen, die -Suren polymerisieren.

H
C

H R
N

H
COCl

2,4-Diketopiperazine

H
NH2

H
C

CH2 COOH

N
R H

H
C

COOH

CH

- NH3

NH2
R
R

H
C

(CH2)n

(CH2)n

Lactame
n = 2,3

COOH
HN

NH2

H2N

(CH2)5

COOH

O
H

H
N

(CH2)5 C

O
NH

(CH2)5 C

OH
x

Polyamid, Perlon

10.7 Zur Biochemie der Aminosuren

10.7.1 Biosynthesen

265

10. Aminosuren

Nur Mikroorganismen und Pflanzen knnen sich alle bentigten Aminosuren selbst synthetisieren, Tiere
knnen einige, essentielle Aminosuren, nicht synthetisieren, wie mit Ftterungsversuchen gezeigt
werden konnte (Kap. 10.1). Beim Menschen und bei den meisten untersuchten Tieren sind dies die
Aminosuren Valin, Leucin, Isoleucin, Threonin, Methionin, Lysin, Phenylalanin und Tryptophan. Bei
Insekten und Fischen sind daneben noch Arginin und Histidin essentiell.
Die -Aminogruppe kann durch reduktive Aminierung in 2-Oxosuren eingefhrt werden, NH4+ dient
dabei als Stickstoffquelle, bei bestimmten Mikroorganismen auch Luftstickstoff (Kap. 10.1.1). Aus Ketoglutarsure entsteht mit NH4+ durch NADPH-Reduktion L-Glutamat.
OOC

COO

NH4 +
NADPH

OOC

COO
NH2
L-Glutamat

-Ketoglutarat

In Gegenwart von Pyridoxalphosphat-hltigen [PLP] Enzymen und L-Glutaminsure als Aminodonor


wird Stickstoff durch Transaminierung auf -Ketosuren bertragen.

OOC

COO

COO

PLP

Pyruvat

OOC

COO

COO

+
NH2
L-Glutamat

NH2
L-Alanin

Ketoglutarsure

Das C-Gerst der Aminosuren stammt vor allem von Komponenten des Citronensurecyclus wie z.B. 2Ketoglutarsure, Oxalessigsure, Fumarsure oder Produkten des Kohlenhydratstoffwechsels (Phosphoglycerinsure, Phosphoenolpyruvat, Erythrose-4-phosphat oder Ribose-5-phosphat).

Viele Aminosuren haben hnliche Biosynthesewege. So entstehen Glutaminsure, Aspartinsure und


Alanin durch reduktive Aminierung oder Transaminierung aus den entsprechenden 2-Ketocarbonsuren.
Dieser Biosyntheseweg trifft auch fr Valin, Leucin und Isoleucin zu. Whrend der Biosynthese der entsprechenden 2-Oxosuren tritt jedoch eine Alkylwanderung ein. Glutaminsure und Asparaginsure
dienen als Ausgangsprodukte fr die Synthesen weiterer Aminosuren, Prolin z.B. entsteht durch
Reduktion der Glutaminsure zur Glutaminaldehydsure, die unter Dehydratisierung zu 1-Pyrrolidein-5carbonsure cyclisiert. Anschlieende Reduktion der Doppelbindung liefert Prolin.
L-Serin wird aus 3-Phosphoglycerat durch Oxidation der -Hydroxygruppe, Transaminierung mit
Glutamat und PLP und Hydrolyse aufgebaut.

Die aromatischen Aminosuren Phenylalanin, Tyrosin und Tryptophan entstehen auf dem ShikimisureWeg. Die Biosynthese des Histidins geht aus von 1-(5-Phosphoribosyl)-adenosinmonophosphat. Das C-2-

266

10. Aminosuren

Atom und das N-1-Atom des Imidazolringes stammen vom Purinylrest, alle anderen C-Atome von der
Ribose.

10.7.2 Biochemische Klassifizierung der Aminosuren

Aminosuren lassen sich nach den Abbauprodukten im Stoffwechsel in glucoplastische und


ketoplastische Aminosuren unterteilen. Glucoplastische Aminosuren knnen zu C4-Dicarbonsuren
oder Brenztraubensure abgebaut und im Kohlenhydrat umgewandelt werden, die ketoplastischen werden
zu Ketonkrpern, speziell zu Acetessigsure, abgebaut.

Biogenetische unterscheidet man mehrere Gruppen:


a) die Serinfamilie mit Serin, Glycin und Cystein. Sie stammen biogenetisch aus aus dem C3-Krper
Triosephosphat, und entstehen ber 3-Hydroxypyruvat durch Transaminierung.
b) die Ketoglutarat- oder auch Glutarat-Familie aus dem Ketoglutarat des Tricarbonsure zyklus mit den
Mitgliedern Glutaminsure, Prolin, Ornithin.
c) Valin, Leucin und Alanin stammen aus Pyruvat und Oxalacetat und zhlen zur Pyruvat-Familie.
d) Zur Shikimat-Familie zhlen die aromatischen Aminosuren Tyrosin, Phenylalanin und Tryptophan,
die auf dem Shikimisure-Weg ber Chinasure und Shikimisure enstehen.

10.8 Literatur

J.P. GREENSTEIN und M. WINITZ, Chemistry of the Amino Acids (1961).


H.B. VICKERY, The History of the Discovery of the Amino Acids, Advances Protein Chem. 26, 81
(1972).
B. WEINSTEIN (Hrsg.), Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, Vol. 2 und
3, Dekker, New York (1974).
K. LBKE, E. SCHRDER und G. KLOSS, Chemie und Biochemie der Aminosuren, Peptide und
Proteine, I und II, Thieme-Verlag, Stuttgart (1975).
J.L. BADA und R.A. SCHROEDER, Amino Acid Racemization Reactions and their Geochemical
Implication, Naturwissenschaften 62, 71 (1975).
E.A. BELL, "Uncommon" Amino Acids in Plants, FEBS Letters 64, 39 (1976).
Y. YZUMI und A. TAI (Hrsg.), Stereodifferentiating reactions, Academic Press, New York (1977).
Y. IZUMI, I. CHIBATA und T. HOH, Herstellung und Verwendung von Aminosuren, Angew. Chem.
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B. UNTERHALT, Toxische Aminosuren und Proteine in Pflanzen, Dtsch. Apoth. Ztg. 120, 1093 (1980).
H.D. JAKUBKE und H. JESCHKEIT, Aminosuren - Peptide - Proteine, Akademie-Verlag, Berlin
(1982).

267

10. Aminosuren

I. WAGNER und H. MUSSO, Neue natrliche Aminosuren, Angew. Chem. 95, 827 (1983).
B. HOPPE und J. MARTENS, Aminosuren - Produktion und Entdeckung, Chemie in uns. Zeit 18 73
(1984).
Laboratory Methodology in Biochemistry: Amino Acid Analysis and Protein Sequencing, CRC
Handbook
J. THEN, A. DOGHERTY, H. NEATHERWAY, R. MARQUARDT, H.-M. DEGER, H. VOELSKOW,
G. WHNER und P. PRVE, Production of phenylalanin from phenylpyruvate using resting cells of
E. coli, Biotechnology Letters 9, 680 (1987).
W.L. CODY und V.J. HRUBY, Unnatural amino acids: Synthesis and biological significance, Acta Univ.
Palacki. Olomouc. Fac. Med. 116, 495 (1987).
M.J.O. DONNELL, a-Amino acid synthesis, Tetrahedron 44, 5253 (1988).
J.H. ALTENBACH, Asymmetrische Synthesen von a-Aminosuren, Nachr. Chem. Techn. Lab. 36,
999 (1988).
R.M. WILLIAMS (Hrsg.), Synthesis of Optically Active -Aminoacids, (1. Aufl.), Pergamon
Press, Oxford (1989).
H.J. GAIS und H. HEMMERLE, Asymmetrische Synthesen mit Enzymen, Chemie in unserer Zeit
29, 239 (1990).
B. MICHOV, Elektrophorese. Theorie und Praxis. W. deGruyter, Berlin, New York (1995).
J. JONES, Synthese von Aminosuren und Peptiden. Basistext Chemie 6, VCH
Verlagsgesellschaft, Weilheim (1995).

268

11. Proteine

11. Peptide, Proteine, Eiweistoffe


Peptide und Proteine gehren zu den Grundbausteinen des Lebens. Betrachtet man die Nukleinsuren
(Kap. 13) als den Konstruktionsplan, so sind die Proteine das Material, das zur Realisierung der
Bauanleitung dient. Sie erfllen Funktionen als Strukturelemente, als Enzyme fr Stoffwechselvorgnge,
als Rezeptoren und Hormone sowie inter- und intrazellulre Signalstoffe. Viele Wirkstoffe wie Immunoglobuline, Antibiotika, tierische und pflanzliche Toxine, etc., sind Peptide bzw. Proteine. Sie sind die
Hauptbestandteile der Biomasse in den Zellen und machen zusammen mit den Nucleinsuren mehr als
2/3 der Trockenmasse der Zelle aus.

11.1 Peptidbindung, Bauprinzip und Nomenklatur

10.1.1 Peptidbindung und Bauprinzip


Peptide zeichnen sich durch wiederholte, amidartige Verknpfung der -Aminogruppe einer Aminosure
mit der Carboxylgruppe einer anderen Aminosure aus. Das "Rckgrat" der so entstandenen Peptidkette
bildet damit die sich wiederholende Gruppierung -NH-CO-CHR-. Die -Aminogruppe der ersten Aminosure (N-terminale Aminosure) und die Carboxylgruppe der letzten Aminosure (C-terminale Aminosure) liegen in freier Form vor.
R

H2N CH C

1
H R O H

N C C
H

R2 O H R3 O
C
H

R
H
N

C N C C
H

CH

COOH

Formel 11-1. Verknpfung von Aminosuren durch Peptidbindung.

Die Peptidbindung als N-substituierte Sureamidbindung ist stark resonanzstabilisiert. Die Mesomerie
bedingt einen partiellen Doppelbindungscharakter (etwa 40 %) der Amidbindung, der Abstand zwischen
dem C- und dem N-Atom betrgt 0.132 nm (vgl. 0.125 nm der C=N-Doppelbindung gegenber 0.147 nm
einer CN-Einfachbindung). Die C=O-Doppelbindung besitzt damit auch 40 % Einfachbindungscharakter. Als Konsequenz ist die CN-Bindung der Amidgruppe in Peptiden relativ starr und nicht frei
drehbar. Die trans-Form ist im allgemeinen um 8 kJ/mol stabiler als die cis-Form, Ausnahme machen
Peptidbindungen, die von N-substituierten Aminosuren (Prolin, Hydroxyprolin) ausgehen. Die beiden
Formen der Amidgruppe lassen sich mit Hilfe der IR-Spektroskopie unterscheiden (Tab. 11-1).

268

269

11. Proteine

Bei homodeten cyclischen Peptiden mit kleiner Ringstruktur mu zumindest ein Teil der Peptidbindungen
in der cis-Form vorliegen. Bei cyclischen Dipeptiden [2,5-Dioxopiperazine] liegen alle Peptidbindungen
in der cis-Form vor, cyclische Tetrapeptide enthalten zwei cis- und zwei trans-Peptidgruppen.

Tabelle 11-1. IR-Banden cis- und trans-stndiger Amdigruppen

cis-CO-NH
trans-.CO-NH

NH-Valenzschwingung
3180 ... 3195
3350

Amidbanden
I
1670 ... 1690
ca. 1650

II
1440 ... 1455
ca. 1550

III
1305 ... 1345

An der Bildung natrlich vorkommender Peptide und Proteine sind die 20 durch den genetischen Code
programmierten proteinogenen Aminosuren beteiligt. Die unterschiedlichen Reste R bedingen die
Variabilitt der Peptide und Proteine; bei einer Peptidkette aus 100 Aminosuren ergeben sich bereits
20100 Mglichkeiten der Verknpfung.

10.1.2 Nomenklatur

Nach der Zahl der Aminosurebausteine werden Peptide als Dipeptid, Tripeptid, Tetrapeptid, etc.
bezeichnet, kleinere Einheiten mit 2-10 Aminosure-Einheiten als Oligopeptide, 10-100 Einheiten als
Polypeptide, die Grenzen sind jedoch flieend. Daran schlieen sich

die Proteine an (Molmassen

>10.000).

Peptide, die nur von Aminosuren gebildet werden, heien homomere Peptide. Heteromere Peptide sind
aus Aminosuren und Pseudoaminosuren aufgebaut. Zu ihnen gehren z.B. die Depsipeptide (Kap. 18.
), die alternierend amidartig und esterartig verknpfte Aminosuren und Hydroxycarbonsuren enthalten.
Cyclische Depsipeptide werden auch als Peptolide bezeichnet. Nach Art der Bindungen in den Peptiden
werden auerdem homodete und heterodete Peptide unterschieden. Homodete Peptide enthalten nur
Amidbindungen, heterodete Peptide daneben auch andere Bindungen, wie z.B. Disulfidbrcken.

Lineare Peptide sind unverzweigt, verzweigtkettige Peptide knnen durch Reaktionen der Seitenketten
gebildet werden. Innerhalb der cyclischen Peptide (Formel 10-2) unterscheidet man teilcyclische und
mono-, bi- bis polycyclische Peptide, Peptide, deren Aminosure-Ketten zum Ring geschlossen sind, oder
solche, die ber Disulfid-Brcken zum Ring geschlossen sind wie z.B. Insulin und Oxytocin (10.6.8).
Hufig enthalten Cyclopeptide ungewhnliche Aminosuren, optische Antipoden der normalen proteinogenen L-Aminosuren oder wie die Peptolide Hydroxycarbonsuren. Von Mikroorganismen ausgeschiedene Cyclopeptide haben oft antibiotische Wirkung (Actinomycine, Gramicidine, Polymyxine,

269

270

11. Proteine

Tyrocidine, etc., Kap. 10.6.8). Viele Cyclopeptid-Alkaloide sind starke Gifte (Amanitin, Phalloidin,
10.6.6.4). Ein polycyclisches Peptid-Enzym ist die Ribonuclease S (Kap. 11. ).
Gramicidin S
monocyclisch

Val Orn Leu D-Phe Pro Val Orn Leu D-Phe Pro
NH2

Bacitracin
teilcyclisch
homodethomomer

S
O

Leu D-Glu Ile Lys D-Orn Ile D-Phe His Asp D-Asp NH2

Oxytocin
teilcyclisch
heterodetthomomer

H Cys Tyr Ile Gln Asn Cys Pro Leu Gly NH2

Formel 11-2. Beispiele zur Bezeichnung cyclischer Peptide.

Die Peptide werden fortlaufend nach ihren Aminosurenkomponenten, beginnend bei der aminoterminalen (N-terminalen) Sure, benannt. Die Reihenfolge der Aminosuren im Peptid heit die
Sequenz.
Serin
H2N

Glycin

H
N
N
H

N-Terminus

Tyrosin

O
C

HOH2C

C
O

Alanin

O
C

Leucin
H
N

N
H
CH2
[C6H4]-OH

COOH

C-Terminus

C
O

CH2
CH(CH3)2

Serylglycyltyrosylalanylleucin
[Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu]

Synthetisch sind Polymere zugnglich, die nur aus einer oder wenigen Aminosuren aufgebaut sind. Als
Homopolymere bezeichnet man Polymere einer einzigen Aminosure. Copolymere enthalten zwei oder
mehrere polymere Grundbausteine.

11.2 Einteilung, Ampholytcharakter, Lslichkeit, Hydratation

11.2.1 Einteilung der Proteine

Proteine werden aufgrund ihrer Strukturtyps eingeteilt in die faserartigen Skleroproteine (10.7) und die
kugelfrmigen oder ellipsoiden Sphroproteine. Skleroproteine sind als Gerstsubstanzen im tierischen
Organismus bekannt. Hierzu zhlen die Kollagene (11.7.1) als Bestandteil des Sttz- und Bindegewebes.
Das Seidenfibroin (10.7.4) ist die Gerstsubstanz der Naturseide, nahe verwandt sind die -Keratine
(10.7.2), unlsliche Strukturproteine der Haare, Hufe, Horn, Schuppen, Federn, usw. Auch das Fibrin der
Blutgerinnung (10.7.5) besitzt -Keratinstruktur. Zu den Sphroproteinen zhlen die Albumine (

),

einfache Proteine, die in Krperflssigkeit und Pflanzenbestandteilen vorkommen. Sie sind nieder-

270

271

11. Proteine

molekular und meist gut kristallisierbar. Die sphrischen Globuline ( ) sind hhermolekular und lassen
sich in eine -, - und -Globulinfraktion auftrennen. Daneben unterscheidet man noch eine kleinere
Gruppe von pflanzlichen Proteinen, die Prolamine, Gluteline und Gliadine, die zusammen das Eiwei des
Getreides bilden.

Sitzen am Protein noch artfremde Gruppen [prosthetische Gruppen], so spricht man von zusammengesetzten oder konjugierten Proteinen oder Proteiden. Die prosthetische Gruppe kann kovalent an die
Seitenketten der Aminosuren, heteropolar oder koordinativ gebunden sein. So enthalten z.B. enthalten
Chromoproteide wie das Hmoglobin (

), der Farbstoff der roten Blutkrperchen, einen Porphyrin-

farbstoff als prosthetische Gruppe. Zu den Nucleoproteiden zhlen die stark basischen Protamine und die
Histone. Glykoproteide sind zusammengesetzt aus Eiweikomponente und einem Zucker, Lipoproteide
bestehen aus einem Lipidderivat und einem Protein. Das Proteom ist die Gesamtheit der Proteine, die zu
einem bestimmten Zeitpunkt in einem Organismus oder einer Zelle vorhanden sind. Es liefert zustzliche
Information ber die Entwicklung des Organismus und das funktionale Zusammenspiel der Gene.

11.2.2 Ampholytcharakter, Lslichkeit und Hydratation

Die Ladung eines Proteins wird durch dessen Gehalt an sauren und basischen Gruppen und den pH-Wert
der Lsung bestimmt, die Iminogruppe NH selbst neigt von pH 0 bis pH 14 nur geringfgig zur
Ionisation und Protonierung. Proteine besitzen daher ebenso wie die Aminosuren einen isoelektrischen
Punkt pI, bei dem sie im elektrischen Feld nicht wandern und ihre Lslichkeit in Wasser am geringsten
ist, und wirken als Ampholyte. Der isoelektrische Punkt der Proteine kann betrchtlich schwanken. Sie
wirken wie die Aminosuren als Puffer und lassen sich elektrophoretisch trennen.

Tabelle 11-2. Isoelektrischer Punkt [pI] einiger Proteine


Protein
Thymohiston
Serumalbumin
1-Globulin (Mensch)
Fibrinogen
Keratin
Gelatine
Insulin
Pepsin

pI
10.8
4.7 - 4.9
5.8
5.5 - 5.8
3.7 - 5.0
4.7 - 5.0
5.35
ca. 1.0

Die Proteine werden nach ihrer Lslichkeit in Albumine, Globuline und Histone eingeteilt (Tab. 10-3).
Albumine sind leicht wasserlslich, ihre Molmasse betrgt etwa 70.000. Globuline sind wasserunlslich,
gehen aber in verdnnten Salzlsungen, wie z.B. physiologischer Kochsalzlsung, und in verdnnten

271

272

11. Proteine

Suren und Laugen in Lsung. Durch einen hohen Arginin-Gehalt reagieren Histone basisch und sind mit
verdnnten Suren extrahierbar; durch Alkohole werden sie ausgefllt. Sie finden sich an Nucleinsuren
gebunden vor allem in den Zellkernen der roten und weien Blutkrperchen. Prolamine sind in Wasser
und Alkohol unlslich, jedoch lslich in 80 proz. Alkohol. Die Gluteline sind in verdnnten Laugen
lslich.

Die Lslichkeit eines Proteins wird durch den pH-Wert und die Salzkonzentration bestimmt. Die Lslichkeit globulrer Proteine erhht sich mit steigender Salzkonzentration bis zu einem Optimum [Einsalzeffekt], bei weiterer Erhhung der Salzkonzentration setzt die Lslichkeit wieder herab [Aussalzeffekt].

Die Polypeptidketten der Proteine sind in ihrer natrlichen wrigen Umgebung so angeordnet, dass die
polaren Aminosuren an der Oberflche sitzen (vgl. Tertirstruktur, Kap. 10.3.3). Die polaren Gruppen,
darunter vor allem die ionogenen, treten in Wechselbeziehungen mit dem Wasser, wobei jede Aminosure durchschnittlich 3 Molekle Wasser bindet. Die inneren (hydrophoben) Aminosuren sind im
allgemeinen nicht hydratisiert (solvatisiert). Es bilden sich verschiedene Hydratschichten um das Proteinmolekl, deren Wasser unterschiedlich gebunden ist. Dieses gebundene Wasser unterscheidet sich in
seinen thermodynamischen Eigenschaften von dem normalen "freien" Wasser der Umgebung. Die unterschiedliche Beweglichkeit des gebundenen und des "freien" Wassers lt sich anhand der Relaxationszeiten NMR-spektroskopisch verfolgen. Man rechnet durchschnittlich mit einer Hydrathlle von 0.2 bis
0.6 g Wasser pro g Protein. Diese Hydrathlle bleibt auch im kristallinen Zustand erhalten. Durch hohe
Salz- oder Wasserstoffionen-Konzentration wird die Hydrathlle teilweise abgebaut, da die Elektrolyte
selbst Wasser binden. Es kommt zum Ausfllen der Proteine infolge Aggregation [Aussalzeffekt]. Auch
die durch Ionenbeziehungen zusammengehaltenen Nucleoproteine enthalten nur wenig Wasser.

11.3 Strukturen der Polypeptide und Proteine

Bei den Polypeptiden und Proteinen werden mehrere Strukturebenen unterschieden. Unter Primrstruktur
wird die Sequenz der Aminosuren in der Peptidkette verstanden. Diese Definition schliet andere
kovalente Bindungen oder Wechselwirkungen als die Amidbindung aus. Die Mikrokonformation
bestimmter Teile der Polypeptidkette wird als Sekundrstruktur bezeichnet. Die Sekundrstruktur ist die
lokale rumliche Anordnung der Polypeptidhauptkette und beschreibt die geordneten Bereiche der Peptidkette, z.B. helikale, nichthelikale sowie Faltblattstrukturen. Die Definition erfat nicht die Konformationen der Seitenketten und Wechselwirkungen mit anderen Segmenten. Daneben knnen Peptide auch
ungeordnet als statistisches Knuel [random coil] vorliegen. Unter Tertirstruktur wird die Makrokonformation der gesamten Polypeptidkette verstanden. Sie umfat die gesamte rumliche Anordnung

272

273

11. Proteine

unter Bercksichtigung der Seitenketten der Aminosuren. Durch Bildung von Assoziaten aus mehreren
Untereinheiten selbstndiger Peptide kommt es zur Ausbildung der Quartrstruktur eines Proteins. Sie
beschreibt die gegenseitige rumliche Anordnung dieser Untereinheiten zueinander.

11.3.1 Primrstruktur

Die Primrstruktur beschreibt ausschlielich die Sequenz der Aminosuren und wird durch Angabe der
N- und C-terminalen Aminosure eindeutig bestimmt. Die Reihenfolge der Aminosuren steuert die
Faltung der Peptidkette, die die korrekte, aktive Konformation ergibt. Fr die Aufklrung der
Primrstruktur eines Proteins [Sequenzanalyse] sind, abhngig von der Zusammensetzung, folgende
Schritte erforderlich:
1.

Isolierung eines homogenen Proteins mit anschlieender Molmassenbestimmung und Aminosureanalyse.

2.

Gegebenenfalls ist die Spaltung in Einzelketten und deren Isolierung erforderlich, die Reduktion
von Disulfidbrcken, Blockierung der Mercaptogruppen mit nachfolgender neuerlicher Aminosureanalyse und Endgruppenbestimmung.

3.

Selektive Spaltung der Ketten, Isolierung der Fragmente mit anschlieender Aminosureanalyse,
Endgruppenbestimmung und abschlieender Sequenzbestimmung.

11.3.2 Sekundrstruktur

Die Sekundrstruktur beschreibt die sterische Anordnung der Aminosuren in der Peptidkette und ist
aufgrund des partiellen Doppelbindungscharakters der planaren CONH-Bindung letztendlich eine Folge
der Primrstruktur. Die CC- und die NC-Bindung hingegen knnen im wesentlichen frei um ihre
Achse rotieren, und diese Drehbarkeit ermglicht eine Vielzahl von Konformationen einer Peptidkette.
Bei einem Protein mit 170 Aminosuren sind damit Konformationen in der Grenordnung von 1080
mglich. Der Rotationswinkel um die CC-Bindung wird mit als Torsionswinkel N-C-C-N mit , der
um die NC-Bindung mit und der um die NCO-Bindung mit bezeichnet. und sind 0, wenn die
beiden planaren Amidgruppen in einer Ebene liegen.
C1a
CH
OH

OH

CH

C2

C3a

N
H

273

274

11. Proteine

Aus sterischen Grnden ist nicht jede beliebige Konformation und Winkeleinstellung erlaubt, es gibt
vielmehr energetisch bevorzugte Konformationen. Darberhinaus knnen durch nichtkovalente
Bindungen, insbesondere Wasserstoffbrcken, bestimmte Anordnungen stabilisiert werden.

Aus Rntgenuntersuchungen und Modellbetrachtungen entwickelten L. PAULING und E.J. COREY das
Faltblatt und die Helix als geordnete Sekundrstrukturen mit maximaler Stabilisierung durch Wasserstoffbrcken. In manchen Proteinen liegen etwa 75 % der Aminosuren in Form einer dieser Sekundrstrukturen vor.

RAMACHANDRAN (Nobelpreis 19

) et al. haben alle mglichen Konformationen eines Peptids

durchgerechnet. Diese RAMACHANDRAN-Diagramme (Abb. 10-1), die durch Auftragen von gegen
erhalten werden, lassen Bereiche erkennen, in denen unter Bercksichtigung noch tolerierbarer Abstnde
zwischen nicht miteinander verbundenen Atomen sich die wichtigsten geordneten Strukturen befinden.

III

(C) []

II

IV

VI

(N-C) []
Abb. 10-1. RAMACHANDRAN-,-Diagramm

Aufgrund ihrer Struktur werden Proteine in globulre (kugelfrmige) und fibrillre (fadenfrmige)
eingeteilt. Bei globulren Proteinen werden vor allem -Helixstruktur und Faltblattstruktur gefunden. In
ihrer reinen Form treten die Sekundrstrukturen nur bei den fibrillren Proteinen auf, deren wichtigste

274

275

11. Proteine

Vertreter die Skleroproteine (Kap. 11.7) sind. Tab.11-5 informiert ber die vorherrschenden
Sekundrstrukturen einiger globulrer Proteine.

Tabelle 11-5. Vorherrschende Sekundrstrukturen einiger globulrer Proteine (nach SCHULZ)


Sekundrstruktur
berwiegend -Helix
berwiegend antiparalleles Faltblatt
Zentrales, meist paralleles Faltblatt
mit umgebenden Helices
Keine Bevorzugung bestimmter
Sekundrstrukturen

Proteine
Myoglobin, Hmoglobine, Hmerythrin, Bacteriorhodopsin
Immunoglobulin, Superoxid-Dismutase, Concanavalin,
Pralbumin, Chymotrypsin, Bacteriochlorophyll-Protein
Malat-Dehydrogenase, Lactat-Dehydrogenase, AdenylatKinase, Phosphoglycerat-Kinase, Triosephosphat-Isomerase,
Carboxypeptidase, Enzyme der Glycolyse
Ribonucleasen, Lysozym, Ferredoxin

Nur eine einzige Wasserstoffbrcke wird von der Haarnadelbiegung gebildet, wodurch Knickstellen
meist an der Oberflche der Proteine entstehen.
O

R
HC

R
N

CH

HN

Haarnadelbiegung

C O
R HC

O
N
H

CH
R

Vollstndige Analysen der rumlichen Struktur sind ausschlielich rntgenographisch an kristallinen


Proteinen mglich. Relativ genaue Hinweise auf das Vorliegen bestimmter Sekundrstrukturen in
gelsten Proteinen lassen sich jedoch auch durch chiroptische Methoden gewinnen. Groe Anstrengungen
werden zur Zeit unternommen, mit Hilfe statistischer Methoden in Computerprogrammen aus der
Kenntnis der Aminosuresequenz bzw. der jeweiligen benachbarten Aminosuren die Sekundrstruktur
vorauszusagen. Diese und durch Hinzuziehen weiterer physikalischer Daten verbesserter Methoden haben
sich jedoch nur als relativ treffsicher bei der Voraussage von Helixstrukturen erwiesen.

11.3.2.1 Faltblattstrukturen

275

276

11. Proteine

Bei der Faltblattstruktur [pleated sheet, -Konformation, Abb. 11-2] werden die Polypeptidketten durch
senkrecht zu den Ketten stehende Wasserstoffbrcken zusammengehalten, die Winkel und besitzen
entgegengesetzte Vorzeichen (Tab.10-4). Die aus der Faltblattebene herausragenden lipophilen Reste R
ben zustzlich eine Anziehungskraft aufeinander aus. Bemerkenswert ist die Tatsache, dass solche
Aminosuren bevorzugt Faltblattstrukturen ausbilden, die eine geringe Tendenz zur Helixbildung zeigen
(Gly, Ser, Asp). Die Strukturen knnen innerhalb einer Kette oder auch zwischen verschiedenen
Polypeptidketten ausgebildet werden.

R H
C

R H
H
C

R
H
C

H
H
C
N

O R

C
H

R
H
O

N
CH

N
CH
O

CH

CH

N
CH

H
O R

CH

Wasserstoffbrcke R
R

O R

C
H

CO

C
N

C
H

C
H

HN

C
N

H
O

CH

CH

C
H

O
R

Abb. 11-2. -Faltblattstruktur von Proteinen aufgrund von Wasserstoffbrcken.

Die Ketten knnen parallel oder antiparallel nebeneinander angeordnet sein (Abb.11-3). Faltblattstrukturen sind im allgemeinen nicht flach, sondern rechtsgngig verdrillt.

276

277

C
C O
H N

C
O C
N H

C
C O
H N

H N
C O
C
N H
O

C
C O
H N
C
O C
N H
C

H N

C O

C O
C

H N

11. Proteine

b C
C O
H
N
C
C
O
N H
C
C
O
H N
C

C
C O
N
C

C
C O

N
C

N H
C

C
H

O
N

O
C

Abb. 11-3. Parallele (a) und antiparallele (b) Faltblattstruktur (nach PAULING und COREY).
11.3.2.2 Helixstrukturen
Die Spiralstruktur der Helix kommt dadurch zustande, dass die Winkel und das gleiche Vorzeichen
und fr jedes C-Atom bei einem Helixtyp jeweils den gleichen Wert besitzen. Eine Helix wird durch die
Zahl nr charakterisiert, wobei n die Zahl der Aminosureeinheiten pro Spiralengang und r die Anzahl der
Atome des durch die Wasserstoffbrcke gebildeten Ringes ist. Die intrachenaren Wasserstoffbrcken
werden z.B. zwischen der 1. und 3. [3,010-Helix], 1. und 4. [3,613-Helix] oder 1. und 5. Peptidbindung
[4,416-Helix] ausgebildet. Die Hhe h der Spirale pro Windung ergibt sich aus n . d, dem Anstieg der
Spirale pro Aminosurerest. Diese Steighhe pro Windung betrgt bei der 3,613-Helix 0.54 nm.
R

C
R

N
C

H
R

R
10

H
C

80

C
O

O
C

2
1

N
R

Abb. 11-4. a) Rechtsgngige Helix.

b) Aufsicht auf eine linksgngige -Helix.

! C -Atome, die Striche zwischen ihnen stellen

die Peptidbindung dar;


R Seitenketten; ! Achse der Spirale

277

278

11. Proteine

Eine Helix kann sowohl von Peptiden aus L- oder von solchen aus D-Aminosuren gebildet werden, nicht
dagegen von Peptiden, die sowohl D- und L-Aminosuren enthalten. Die Seitenketten R der Aminosuren
stehen radial zur Achse der Schraube. Eine Helix kann rechts- oder linksgngig sein, Parameter der Helix sind in Tab. 11-4 angegeben. Am verbreitetsten ist die linksgngige -Helix.
Die -Helix ist die energetisch-stabilste Sekundrstruktur, wie von PAULING und COREY postuliert
wurde. Die linksgngige -Helix dreht aufwrts im Uhrzeigersinn, beendet nach jeweils 3.6 AminosureEinheiten eine Windung und besitzt eine "Ganghhe" von 5.4 A. Rechts- und Linksschraube sind
zueinander Enantiomere. Eine vom Beobachter weg rechtsgngige Helix wird nach CAHN-INGOLDPRELOG als P-Helix (P fr Plus) bezeichnet und besitzt P-Konfiguration, die vom Beobachter weg
linksgngige Helixschraube entsprechend als M-Helix (M fr Minus) mit M-Konfiguration.
Die Tendenz zur -Helixbildung hngt wesentlich von der Aminosuren-Zusammensetzung und Sequenz ab. Nach SCHERAGA lassen sich Aminosuren in
helixbildende (Val, Gln, Ile, Ala, Trp, Met, Leu, Glu),
indifferente (Lys, Tyr, Asp, Thr, Arg, Cys, Phe) und
helixbrechende Aminosuren (Gly, Ser, Pro, Asn)
einteilen. Eine Sonderstellung sowohl in der -Helix- als auch der Faltblattstruktur nehmen Prolin und
Hydroxyprolin ein, die als sekundre Amine Abweichungen von der Idealkonformation induzieren und
die Helix-Struktur durch einen Knick in der Peptidkette unterbrechen. Die Tendenz zur Helizitt lt sich
am besten an Polyaminosuren, die nur aus einer Aminosure bestehen, studieren. Polyalanin bildet bei
pH = 7 in wriger Lsung spontan eine Helix aus, bei Polylysin entstehen hingegen Zufallsstrukturen, die
erst bei pH = 12, wenn die Seitenketten ungeladen sind, spontan Helixbildung geben. Aus Polyisoleucin
entsteht aufgrund sterischer Hinderung keine Helix, ebenso nicht aus Polyprolin. Unter der Peptiden
besitzen Myosin 90 %, Hmoglobin 60 % und Albumin und Serumprotein 40 % helikale Anordnung.

In den fibrillren Proteinen der Kollagengruppe sind die Polypeptidketten in Form einer Tripelhelix
angeordnet. Damit zeigen Kollagene eine charakteristisches Rntgenbeugungsmuster, eine Helix aus drei
Polypeptidstrngen nach Art eines Seiles verdrillt (-Struktur nach RICK und CRICK). Dieser Helixtyp
gehrt wie die Doppelhelices der Nucleinsuren zu den mehrstrngigen oder Superhelices. Bei der
Tripelhelix winden sich drei linksgngige Polypeptidketten um eine gemeinsame Achse und bilden eine
rechtsgngige Superhelix (Abb. 10-5). Die Tripelhelix hnelt ihren Parametern der Polyprolin-Helix (vgl.
Tab. 10-4). Wie bei der einstrngigen Helix ragen die Seitenketten der Aminosuren der Tripelhelix nach

278

279

11. Proteine

auen. Aus Abb. 11-5 ist auerdem ersichtlich, dass fr die Aminosure im Inneren der Tripelhelix (jede
3. Position der Kollagen-Tripelhelix) kein Platz fr Seitenketten ist. Diese Position mu also von Glycin
(R = H) eingenommen werden. Entsprechend enthlt auch das Kollagen ca. 33 % Glycin.

R
R
R
R

A
HH

R
B

H
HH

R
HH

R
C
R
R
R

! zentrale Achse der Tripelhelix


A, B, C Achsen der Einzelhelices
! C-Atome, die Striche zwischen ihnen stellen
die Peptidbindungen dar
R Seitenketten der Aminosuren, H fr Glycin

279

280

11. Proteine

Abb. 11-5. Aufsicht auf eine Tripelhelix (Kollagen).

11.3.3 Tertirstruktur

Die native, biologisch aktive dreidimensionale Struktur und Anordnung einer Peptidkette im Raum
bezeichnet man als Tertirstruktur. Nur durch die Ausbildung einer spezifischen Raumstruktur erreicht
die Natur die hohe Przision, mit der unterschiedliche biologische Funktionen der Proteine ablaufen.
Daher ist fr das Verstndnis der Proteinwirkungsweise neben der Kenntnis der Primr- und Sekundrstruktur auch die der Tertirstruktur von zentraler Bedeutung. Nach thermodynamischen berlegungen
soll die dreidimensionale Struktur eines nativen globulren Proteins im physiologischen Milieu die
Konformation des gesamten Systems mit der niedrigsten Freien Energie sein [ANFINSEN]. Die durch
Faltung der Peptidkette gebildete dreidimensionale Struktur eines Proteins wird von der Summe der
Wechselwirkungen der Aminosurereste determiniert. Damit charakterisiert die Primrstruktur die
Tertirstruktur vorallem durch Zwnge der Freiheiten der Drehung, die rigide planare Struktur der Peptidbindung, die erlaubten Winkel der CC- und CN-Bindungen aufeinander folgender Reste. Als stabilisierende Faktoren gibt es:
a) H-Brcken zwischen Peptidgruppen wie fr die Sekundrstruktur,
b)

H-Brcken zwischen den Seitenketten der Aminosuren,

c) Dipolkrfte zwischen polaren Gruppen und positiven und negativen Ionengruppen wie CO2- und
NH3+ und
d) VAN-DER-WAALS-Krfte zwischen den unpolaren Seitenketten und hydrophobe Wechselwirkungen
H
N
C

H
C
C

H
C

H
C

CH2

CH2
C
O 3 O
2
S
H
NH3
CH2 (CH2)4
N
CH
CH
S

1
C
C
O

Abb. 11-6. Tertirstruktur mit Wechselwirkungen zwischen Peptidketten: 1 Wasserstoffbrcke, 2


Disulfidbindung zwischen Cysteinresten, 3 Ionenbeziehung zwischen Asparagin- und Lysin-Seitenkette,
4 hydrophobe Wechselwirkung zwischen einem Valin- und Isoleucinrest.

Nach ihrer ueren Gestalt lassen sich die Proteine in fibrillre (faserfrmige) und globulre (kugel- oder
ellipsoidfrmige) Proteine aufteilen. Die fibrillren Proteine weisen einen hohen und meist einheitlichen
280

281

11. Proteine

Ordnungsgrad auf, sind dadurch meist schwer lslich und dienen vor allem im tierischen Organismus als
Strukturbildner. Die meisten Proteine, darunter alle Enzyme, gehren hingegen zu den globulren
Proteinen. Whrend Faserproteine relativ einfache Strukturen besitzen, sind globulre Proteine weit
komplizierter aufgebaut. Mit Kernresonanzspektroskopie und Rntgenstrukturdaten wird die Tertirstruktur von Polypeptidketten aufgeklrt. Die Analyse globulrer Proteine ist jedoch schwieriger als die
der Faserproteine. Frher wurde aus physikalischen Parametern wie der Viskositt, der Sedimentationsgeschwindigkeit und der Diffusion auf die Gestalt globulrer Proteine geschlossen. Ein wichtige Methode
zur Bestimmung der Figur von Proteinen ist die Methode der Molekular-Relaxation nach elektrischer
Polarisierung oder die Bestimmung der nderung optischer Eigenschaften wie z.B. der Doppelbrechung
in strmendem Medium. Sehr gute Aussagen erhlt man auch durch die Elektronenmikroskopie oder
durch Licht- oder Rntgenbeugung.

Die Polypeptidketten der globulren Proteine werden sich in wriger Lsung so anordnen, dass
mglichst viel Wechselbeziehungen zwischen den hydrophoben Aminosureresten eingegangen werden
knnen. Die groen apolaren Gruppen der Aminosuren Valin, Leucin, Isoleucin, Prolin und Phenylalanin werden sich also bevorzugt im Inneren des Molekls, die polaren Gruppen aber auen anordnen.
Bei den meisten globulren Proteinen haben etwa 40 % der Aminosurereste hydrophobe Seitenketten.
Bei den globulren Proteinen erfolgt also zunchst eine intramolekulare Stabiliserung durch Faltung der
Peptidkette. Wegen der heterogenen Aminosuresequenz knnen Abschnitte mit geordneten Strukturen
[Supersekundrstrukturen] und solche mit ungeordneten Strukturen abwechseln.

Das erste globulre Protein, das in seiner Struktur durch Rntgenstrukturanalyse aufgeklrt wurde, war
das Myoglobin [PERUTZ und KENDREW, 1959]. Myoglobin enthlt 8 Helixbereiche, die mit Grobuchstaben (A - H, Abb. 10-7) bezeichnet werden. Eine bestimmte Aminosure in diesem Bereich wird mit
einem Index angegeben, z.B. His F8 als Ligand der prosthetischen Gruppe. Die einzelnen Helixbereiche
werden entweder durch einen Knick an einer Aminosure oder durch nichthelikale Bereiche abgetrennt.
Die prosthetische Porphin-Gruppe ist zwischen zwei Helixbereichen eingebaut (E und F). In diese
"Hmtasche" ragen besonders viel hydrophobe Aminosurereste. Einzelne, krzere Helixbereiche
entsprechen in ihren Parametern nicht mehr denen einer reinen -Helix. In anderen globulren Proteinen
wie z.B. den Immunoglobulinen finden sich dagegen kaum helikale Bereiche.
D
C
B
E
G
Porphin

281
H2N
COOH
H

282

11. Proteine

Abb. 11-7. Schematische Darstellung der Tertirstruktur des Myoglobin mit helikalen (fett) und nichthelikalen Abschnitten und Bezeichnung der helikalen Bereiche.

Ein sehr gut mit Rntgenstrukturanalyse untersuchtes Protein ist die Carboxypeptidase A, ein Zn-haltiges
Metalloprotein. Charakteristisch fr dieses globulre Protein ist, da Helixstrukturen an der Oberflche
und ein greres Faltblatt aus 8 Elementen im Inneren des Molekls ausgebildet werden. Auch andere
Enzyme wie Lysozym oder Ribonuclease enthalten solche Faltblattstrukturen.

Bei greren Proteinen mit Ketten aus mehr als 150 Aminosuren kann es innerhalb der Ketten noch zur
Ausbildung von Domnen kommen. Darunter versteht man bestimmte Bereiche innerhalb der Peptidkette
mit autonomer Sekundrstruktur und spezifischen Funktionen (vgl. Immunoglobuline, 10.6.2).

11.3.4 Quartrstruktur

Manche globulren Proteine sind oligomer und bestehen aus zwei oder mehr getrennten Untereinheiten
[subunits], das bedeutet, die native Konformation eines globulren Proteins kann sich weiter durch
Zusammenlagern mehrerer Molekle sowie Metallionen oder prosthetische Gruppen stabilisieren. Die
Assoziation unter Ausbildung der Quartrstruktur kann durch Zusammenlagerung von gleichen oder aber
in ihrer Gre bzw. Funktion verschiedenen Proteinmoleklen eintreten. Proteine mit ungleichen
Untereinheiten werden als heteropolymere, solche aus gleichen, meist geradzahligen Untereinheiten als
homopolymere Proteine bezeichnet. Dazu gehren vor allem die allosterischen Enzyme, daneben aber
auch verschiedene aus Haptomer- und Effektomerprotein bestehende Toxine (vgl. 11.6.3). Hmoglobin
war das erste Protein, dessen komplette Tertir- und Quartrstruktur exakt aufgeklrt wurde [

].

Im allgemeinen bestehen alle Proteine mit einer Molmasse ber 100.000 aus mehreren Untereinheiten,
deren Anzahl zwischen 2 und ber 2.000 (z.B. Tabakmosaikvirus-Protein: 2.130) schwanken kann. Durch
geeignete Dissoziationsbedingungen lt sich hufig die Quartrstruktur ohne Zerstrung der Tertirstruktur abbauen.

Die isolierten Untereinheiten sind meist biologisch inaktiv, knnen aber durch Rekombination meist
wieder spontan zur biologisch aktiven Quartrstruktur assoziieren. Es sind zahlreiche Beispiele bekannt,
dass auch Untereinheiten verschiedenener Oligomerer zu biologisch aktiven Hybriden vereinigt werden
knnen (vgl. Enzymchimre, 11. ).

282

283

11. Proteine

11.4 Denaturierung, Spaltung der Peptidbindung

11.4.1 Denaturierung

Unter Denaturierung versteht man den reversiblen oder irreversiblen Abbau der nativen Struktur eines
Proteins, also vor allem der Tertir- und Quartrstruktur. Bei irreversiblem Abbau erfolgt oftmals auch
der der Sekundrstruktur. Denaturierung ist an einer Vernderung der biologischen Aktivitt, der
optischen Eigenschaften, der Lslichkeit (Koagulation) sowie des hydrodynamischen Verhaltens
erkennbar. Sie kann physikalisch durch Erhitzen oder chemisch durch nderung des pH-Wertes, Zusatz
von organischen Lsungsmitteln, Zugabe von Harnstoff, Guanidin oder Detergenzien erfolgen (z.B.
Natriumdodecylsulfat

SDS,

Cetyltrimethylammoniumbromid

CTAB,

oder

nichtionische

Polyoxyethylenether POE). Bei der reversiblen Denaturierung werden nicht-kovalente Bindungen gelst,
bei der irreversiblen Denaturierung zustzlich auch kovalente Bindungen wie Disulfidbrcken. Durch die
Lsung nicht-kovalenter Bindungen denaturieren globulre Proteine mehr oder weniger zu ungefalteten
Zufalls-Konformationen [random coil-Struktur]. Manche knnen jedoch ihre ursprngliche native
Konformation wieder zurckgewinnen, da die Tertirstruktur die thermodynamisch stabilste
Konformation darstellt. Die Aufspaltung aller Disulfidbrcken bedingt die Zerstrung der Tertirstruktur.
Doch selbst nach totaler Denaturierung besitzt die Kette aufgrund ihrer Sequenz noch immer die
Information der originren Tertirstruktur, als Folge knnen selbst bei der Oxidation mehrerer mglicher
Mercaptogruppen zu Disulfidbrcken auch immer die "richtigen" oxidiert werden.

Proteine als Molekularchaperons ["Protein-Anstandsdamen"] helfen, am Ribosom neusynthetisierte


Polypeptidketten in die biologisch funktionelle Konformation zu bringen. Das am besten untersuchte
Chaperon-System ist das GroE-System der Prokaryonten. Das Tetradecamer GroEL bindet an die
ungefaltete Proteinkette und bewirkt ordnungsgemes Falten des Peptid-Substrats. Als Hilfsagenzien
dienen ATP, Mg2+- und K+-Ionen und in manchen Fllen ein Co-Chaperon wie z.B. das Heptamer GroES.

Durch Aggregation der denaturierten Proteinmolekle kann Hitzekoagulation irreversibel werden, z.B.
kann das Erhitzen bestimmter wasserlslicher Eiweistoffe unlsliche Derivate ergeben. Der bei der
reversiblen Denaturierung globulrer Proteine auftretende Phasenbergang von einer geordneten in eine
weniger geordnete Struktur lt sich durch Verfolgen spektroskopischer Parameter, sowie der Viskositt,

283

284

11. Proteine

der spezifischen Wrme oder anderer physikalischer Parameter beobachten.


120
% der Gesamtnderung

100
80

Durch Vernderung des pH-Wertes ausgelste


sprunghafte nderung der reduzierten Viskositt
und der molaren Elliptizitt bei 220 nm eines
Proteins (Nuclease)

60
40
20
0
2

pH

Abb. 11-8. Vernderung der Viskositt und Elliptizitt der Nuclease (nach SCHLECHTER, EPSTEIN und
ANFINSEN)

11.4.2 Spaltung der Peptidbindung

11.4.2.1 Nicht-enzymatische Methoden

Die Amidgruppe ist gegenber Alkali relativ stabil, lngeres Erhitzen z.B. mit Ba(OH)2-Lsung im
Autoklaven fhrt jedoch zu vollstndig racemisierten Aminosuren. Wesentlich grere Bedeutung
besitzt die surekatalysierte Hydrolyse. Die einzelnen Peptidbindungen unterscheiden sich etwas
hinsichtlich ihrer Stabilitt in Abhngigkeit der Reste R der beteiligten Aminosuren. Zuerst werden
Bindungen gespalten, an denen Asparaginsure, Asparagin, Serin oder Threonin

beteiligt sind, am

schwersten lassen sich dagegen die Amidbindungen von Isoleucin, Leucin oder Valin spalten. Daher lt
sich surekatalysierte Hydrolyse partiell, wenn auch recht unspezifisch durchfhren. Man kann die
Bedingungen jedoch so auswhlen, dass hauptschlich Oligopeptidbruchstcke entstehen. Bei surekatalysierter Hydrolyse von Proteinen wird Tryptophan meist zerstrt, eine Totalhydrolyse lt sich mit
halbkonz. Salzsure bei 105 C erreichen.

Fr eine selektive hydrolytische Spaltung der Peptide wurden spezielle Methoden entwickelt (Abb. 10-9).
So wird durch Bromcyan BrCN im sauren Milieu bei Raumtemperatur die Peptidbindung spezifisch
hinter Methionin spezifisch gespalten (Formel 10-3). Bei hherer Temperatur reagiert in hnlicher Weise
auch Iodacetamid ICH2CONH2. Durch oxidative Bromierung mittels N-Bromsuccinimid [NBS] lassen

H-Ala-Gly-Lys-Asp-Arg-Leu-Tyr-Ser-Met-Lys-Val-Asp-Phe-Ile-Gly-OH

pH 2
Br-CN
N Bromsuccinimid

284

285

11. Proteine

sich Peptidbindungen hinter Tryptophan und deutlich langsamer hinter Tyrosin und Histidin spalten.
Primr erfolgt der elektrophile Angriff des Broms am Indol, anschlieend erfolgt auch hier die Hydrolyse
ber eine durch Cyclisierung entstandene Iminoverbindung.

Abb. 11-9. Beispiele fr selektive hydrolytische Spaltungen eines Polypeptids.

11.4.2.2 Enzymatische Spaltungen

Proteasen [Peptidasen] sind hydrolytisch wirkende Enzyme, die enzymatische Spaltung der
Peptidbindungen kann entweder vom Ende der Kette [Exopeptidasen, N-terminales Ende mit Aminopeptidasen, C-terminales Ende mit Carboxypeptidasen] oder selektiv im Inneren des Peptids [Endopeptidasen] erfolgen. Die Exopeptidasen haben Bedeutung fr die schrittweise Spaltung eines Peptids,
der Abbau durch Endopeptidasen fhrt zu Bruchstcken. Pepsin, Papain und Subtilisin sind relativ
unspezifische Endopeptidasen, zum selektiven Abbau der Proteine dienen vor allem Trypsin,
Chymotrypsin sowie das bakterielle Thermolysin.

H-Ala-Gly-Lys-Asp-Arg-Leu-Tyr-Ser-Met-Lys-Val-Asp-Phe-Ile-Gly-OH

Trypsin
Chymotrypsin
Thermolysin

Abb. 11-10. Beispiele fr selektive enzymatische Spaltungen eines Polypeptids.

Trypsin (aus Schweinepankreas) spaltet C-terminal ausschlielich nach den basischen Aminosuren
Lysin und Arginin, whrend durch Chymotrypsin vorzugsweise die Peptidbindungen nach den
aromatischen Aminosuren Tyrosin, Tryptophan und Phenylalanin, daneben aber auch nach Leucin und
anderen Aminosuren gespalten werden. Thermolysin spaltet die Amidbindungen von Leucin und
Isoleucin.

11.5 Strukturaufklrung von Peptiden und Proteinen

Wegen des komplexen Aufbaus der Proteine sind die Methoden, die zu ihrer Strukturaufklrung fhren,
unterschiedlich. blicherweise wird die Strukturaufklrung in drei Stufen durchgefhrt: Zunchst erfolgt
die Reindarstellung des Peptids oder Proteins, anschlieend wird die Aminosuresequenz durch

285

286

11. Proteine

proteinchemische Untersuchungen oder massenspektrometrisch bestimmt. Auf physikochemischem Weg


wird seine Sekundrstruktur ermittelt, und schlielich die Tertirstruktur und gegebenenfalls die
Quartrstruktur bestimmt, bei der vor allem physikalische Methoden angewendet werden.

11.5.1 Sequenzanalyse von Peptiden - Primrstruktur

Die direkte Sequenzanalyse oder Sequenzierung eines Proteins bedeutet die Ermittlung der
Primrstruktur, also der Sequenz der einzelnen Aminosure-Bausteine in der Polypeptidkette. Die erste
vollstndige Aufklrung der Primrstruktur eines Proteins gelang F. SANGER [1953], der nach 10jhriger
Arbeit mit Hilfe der DNP-Methode [11.5.2.1] die Primrstruktur des Rinderinsulins angeben konnte. Die
Sequenzanalyse erfolgt durch wiederholte Endgruppenbestimmung der bei der Hydrolyse anfallenden
Oligopeptide, deren Sequenzen sich gegenseitig berlappten. Die Gesamtsequenz ergibt sich durch
mosaikartiges Zusammensetzen der erhaltenen Informationen.

10.5.1.1 Identifizierung der N-terminalen Aminosure


Zur Identifizierung der N-terminalen Aminosure setzt man deren nucleophile -stndige Aminogruppe
zu leicht identifizierbaren Arylderivaten um. Bei der von SANGER [1945] entwickelten DinitrophenylMethode [DNP-Methode] wird die endstndige Aminosure mit 2,4-Dinitrofluorbenzol unter milden
Bedingungen in einer nucleophilen, aromatischen Substitutionsreaktion in das entsprechende DNPDerivat berfhrt. Letzteres ist etherlslich und kann nach vollstndiger Hydrolyse des Peptids aufgrund
der gelben Farbe detektiert und chromatographisch identifiziert werden. Dabei werden natrlich auch
Derivate von Diaminocarbonsuren gebildet, die gleichzeitig abgetrennt und identifiziert werden.
H
F

N
O2N

R1 O

NO2

CH C

R2
H
N

O
NaHCO3

CH C

H
R1

R2

R1

C
H

O2N

H
N

CH

H
N

H
CH

NO2

O2N

COOH + alle weiteren


Aminosuren

NO2

Formel 11-5. DNP-Methode nach SANGER.

Eine gegenber der SANGER-Methode erhhte Empfindlichkeit bei der Detektion kann mit der DansylMethode [GRAY und HARTLEY, 1963] erreicht werden. Umsetzung des Peptids mit Dansylchlorid [1-

286

287

11. Proteine

Dimethylaminonaphthalin-5-sulfonylchlorid] und anschlieende Hydrolyse der Peptidgruppen fhrt zu


Dansyl-Aminosuren, die bereits in geringsten Konzentrationen fluoreszieren. hnlich ist die Umsetzung
mit Dabsylchlorid [Dimethylaminoazobenzolsulfonylchlorid] oder mit 9-Fluorenylmethylchloroformiat
zu Fluorenaminosurederivaten [FMOC], die Derivate zur sensitiven Fluoreszenz- oder UV-Detektion
von Aminosuren ergeben (Strukturen und Formeln vgl. 9.3.1).

11.5.1.2 Bestimmung der C-terminalen Aminosure

Das wichtigste chemische Verfahren zur Bestimmung der C-terminalen Endgruppe ist die Umsetzung mit
wasserfreiem Hydrazin nach AKABORI. Alle Amidbindungen in der Kette werden zu Surehydraziden
gespalten, allein die freie Carboxylgruppe der C-terminalen Aminosure reagiert wegen Salzbildung nicht
mit Hydrazin und bleibt als freie Aminosure erhalten. Die abschlieende Behandlung mit SANGERReagenz gibt eine DNP-Aminosure und sonst DNP-Aminosurehydrazide, die sich aufgrund
unterschiedlicher therlslichkeiten trennen lassen. Durch Umsetzung mit Benzaldehyd knnen die
Surehydrazide auch als SCHIFFsche Basen abgetrennt werden.
R
NH CH

O
C

R
H
N CH

R1

R1
H
N CH COOH

O
C

Hydrolyse
NH2

CH COOH +

(n + 1) H2N CH

CO NH-NH2

H2N

NH2

H2N

NH2
R1

SANGER-Reagenz
O2N

N
H

CH

R
COOH + O2N

NO2

CH C

NH-NH2

NO2

oder Benzaldehyd
H
C

N
H

CH

NHN

H
C

Formel 11-6. Bestimmung der C-terminalen Aminosure nach AKABORI.

10.5.1.3 Direkte Sequenzanalyse - EDMANN-Verfahren

1950 verffentlichte PEHR EDMAN das Grundprinzip des nach ihm benannten schrittweisen Abbaus eines
Peptides zur Sequenzanalyse. Beim EDMAN-Abbau wird die N-terminale Aminosure mit Phenylisothiocyanat [PITC] zu einem Phenylthioharnstoff-Derivat [PTC-Peptid] umgesetzt. Dieses cyclisiert zu
einem 2-Anilino-4H-thiazolin-5-on-Derivat [ATZ-Aminosure] unter gleichzeitiger Spaltung der nchsten
Amidgruppierung. Das dabei anfallende Restpeptid bleibt unversehrt und wird einem neuerlichen
Abbauzyklus unterzogen. In wrigem Milieu wird das instabile Thiazolinon-Derivat ber eine
287

288

11. Proteine

offenkettige Phenylthiocarbamoylaminosure zu einem stabileren Phenylthiohydantoin 3-Phenyl-2thioimidazolin-4-on [PTH-Aminosure] isomerisiert (Formel 10-7). Dadurch wird die Peptidkette mit
jedem Reaktionszyklus um eine Aminosure verkrzt, die abgespaltenen Aminosurederivate werden
blicherweise mittels Dnnschichtchromatographie, Gaschromatographie, Massenspektroskopie oder
HPLC identifiziert.

Formel 11-7. EDMAN-Abbau von Peptiden.


R1 O
C6H5

S + H2N

Isothiocyanat

R2
H
N

C6H5

H
N

O
H
N

H
C

H
N

CH
2

H
HCl - Gas
org. Lsungsmittel

R
R
Thioharnstoffderivat
PTC-Peptid
H

C6H5

C6H5

H
N

S
Thiazolinon

R2

N R1

verd. HCl
+

H2N

N R1

C
S

2
H R

C
O

ATZ-Aminosure

H
N

N
H

H
Thiazolidinderivat

restliche Kette bleibt intakt

H2O
R1
C6H5

H
N

H
N

H
C

R1

C COOH
N

C6H5

3-Phenyl-2-thioimidazolin-4-on

Phenylthiohydantoin
C
H
PTH-Aminosure

Phenylthiocarbamoylaminosure

Durch die Einfhrung der HPLC knnen bis zu 5 pmol Peptid bei geeigneter UV-Detektion nachgewiesen
werden. Die gesamte Reaktionsfolge des EDMAN-Abbaus wird heute automatisch im Peptid-Analysator
durchgefhrt (11.5.4).

Zur Aminosureanalyse im Picomolbereich bedient man sich neben der EDMAN-Methode weiterer
Abbaureagenzien, deren Vorteile oft in einer besseren Separierbarkeit bzw. Detektierbarkeit der Produkte
liegen. Solche sind z.B. 4-(Dimethylamino)azobenzol-4'-isothiocyanat [DABITC], ein farbiges Derivatisierungsreagenz, das rotgefrbte Aminosure-Derivate gibt, die selbst in unterem Picomolbereich visuell
sichtbar sind und zur Aminosurecharakterisierung mittels Dnnschichtchromatographie verwendet
werden. Andere Reagenzien sind Diphenylindonylisothiocyanat [ITC] oder vor allem ortho-Phthaldialdehyd [OPA] in Gegenwart von 2-Thioethanol. Dansylaminoisothiocyanat bildet fluoreszierende
Derivate und kann eine enorme Steigerung der Empfindlichkeit bei der Detektion bedeuten.

288

289

11. Proteine

Abb. 10-11. Typisches Chromatogramm einer Aminosure-Analyse mit OPA-Derivatisierung und


Fluoreszenz-Detektion.

11.6.4 Automatisierte Proteinsequenzierung

PEHR EDMAN legte den Grundstein zur Konstruktion eines automatischen Sequenators, der vor mehr als
30 Jahren zusammen mit G. BEGG in Form eines Flssigphasen-Sequenzers [Sequenators] realisiert
wurde. Alle Reagenzien werden dabei in flssiger Form dosiert. Dadurch konnte Substanzbedarf und
Zeitaufwand fr eine Sequenzanalyse wesentlich reduziert werden. Ein dnner Proteinfilm in einem
rotierenden Glaszylinder stellt die Reaktionsoberflche dar, auf der nach Zugabe der flssigen Agenzien
die EDMAN -Reaktion abluft. Nach der Abspaltung der ATZ-Aminosure wurde sie mit Lsungsmittel
extrahiert, gesammelt, mit methanolischer HCl umgesetzt und die erhaltene PTH-Aminosure
dnnschicht- oder gaschromatographisch identifiziert. Spter konnte die Sensitivitt durch Einsatz der
HPLC bei der PTH-Aminosureanalyse stark erhht werden. Die Konvertierung zu den PTHAminosuren erfolgte jedoch noch manuell und wurde erst durch die Entwicklung des sog. Converters
verbessert. In Automaten dieser Art konnten bis zu 70 Aminosuren in einem Sequenzlauf vom NTerminus aus identifiziert werden.

Entscheidend fr die Anzahl der mglichen Abbauschritte ist die maximal erreichbare Ausbeute pro
Schritt. Bei einer durchschnittlichen Ausbeute von 98 % konnten EDMAN und BEGG vom Myoglobin des
Buckelwales die Sequenz der ersten 60 Aminosuren aufklren. Die Ausbeuten werden jedoch progressiv
mit fortschreitendem Abbau geringer, so dass lngere Peptidketten vorher selektiv chemisch oder
enzymatisch gespalten werden mssen. In der Regel werden Proteinsequenzen von maximal 20 - 40
Aminosuren analysiert. Aus den sich ber lappenden Partialsequenzen mu dann auf die Gesamtsequenz

289

290

11. Proteine

des Peptides geschlossen werden. Fr die Ermittlung der Sequenz einer Kette des IgM aus 576
Aminosuren muten dazu fast 600 Peptidfragmente untersucht werden.

In den frhen siebziger Jahren wurde ein Sequenzier-Automat nach dem Konzept eines FestphasenProteinsequenzers [R.A. LAURSEN, 1971] entwickelt. Solcher besitzt als Reaktionsgef fr die EDMAN Reaktion eine mit einem speziellen Gelmaterial gefllte Reaktorsule, an dem das Protein kovalent
gebunden ist und mit den Abbaureagenzien und Lsungsmitteln durchsplt wird. Obwohl dieser
Sequenatortyp gegen ber dem ersten aufgrund der kovalenten Proteinanbindung einen geringeren
Auswaschfehler ergibt, konnte er sich nicht als Standard durchsetzen.

Bei den Gasphasen-Proteinsequenzern, einer neuen Generation von Sequenatoren, werden flchtige
Basen (z.B. Triethylamin), welche die Kupplung des Phenylisothiocyanats an den N-Terminus
katalysieren, und flchtige Suren (Trifluoressigsure TFA) zur Katalyse der Abspaltungsreaktionen
gasfrmig in die Reaktionskammer eingeleitet. Die Probe wird auf einem kleinen Glasfaserfilter
appliziert. Dieser 1981 kommerziell auf den Markt gebrachte Sequenatortyp lste innerhalb weniger Jahre
alle Sequenatoren frherer Art in proteinchemischen Laboratorien ab und erlaubte erstmals Sequenzbestimmungen von Proteinen im Bereich von 100 pmol. Heute lassen sich mit den modernsten Maschinen
sowohl Gasphasen- als auch Pulsed-Liquid-Phase-Sequenzierungen, bei denen als Weiterentwicklung die
Trifluoressigsure (TFA) flssig [pulsed-liquid] zugegeben wird, im untersten Picomolmastab durchfhren [Mikrosequenzierung]. Es konnten noch PTH-Aminosuren in Mengen von 200 Femtomol
nachgewiesen werden. Schlielich wurde auch der letzte Schritt des Prozesses, nmlich die
Identifizierung, simultan durch on-line-Anschlu einer HPLC-Anlage automatisiert. Die in jedem Schritt
abgespaltene Aminosure wird z.B. in ein UV-detektierbares Derivat berfhrt und mittels HPLC
abgetrennt und detektiert. ber die Retentionszeit lt sich eine Zuordnung zur entsprechenden
Aminosure treffen. Da der Abbau nicht zu 100 % erfolgt, wird in den jeweils folgenden Abbauschritten
die Interpretation des Chromatogramms von Schritt zu Schritt schwerer. Moderne Auswertesysteme
bercksichtigen jedoch diesen unvollstndigen Abbau, Auswertungen von mehr als 60 Abbauzyklen sind
heute mit grter Sicherheit mglich geworden.

Proteinanalytische Mikromethoden sind vor allem dort unverzichtbar, wo nur kleinste Mengen an
Substanz identifizert werden, z.B. bei der Untersuchung von Virusprotein und Proteinen, die an der
Genregulierung beteiligt sind.

11.6.5 Massenspektrometrische Sequenzanalyse

290

291

11. Proteine

Eine Alternative zur klassischen Peptidsequenzierung ist die massenspektrometrische Sequenzanalyse. Da


zur konventionellen EI- und CI-Massenspektroskopie (1. ) flchtige Derivate bentigt werden, setzt man
die Peptide durch Derivatisierung zu flchtigen Verbindungen um. Die Aufklrung der Sequenz erfolgt
anhand charakteristischer Sequenzionen (Formel 10-8), die allerdings neben zahlreichen anderen Ionen
anfallen. Durch Reduktion der Carbonylgruppen zu CH2- bzw. CD2-Gruppen vereinfachen sich die
Spektren weiter.
R1
H2N

CH

R2

O
C

H
N

R1

O
Fluoracetylierung
F3C

CH COOH

H
N

Veresterung

CH C

H
N

S1

S4
S2 +

R1
Deuterierung (LiAlD4)
F3C
Silylierung

H
CD2 N CH
S'1+

R2

CH

OCH3

S3 +

R2
H
CD2 N

CH

CD2

OSi(CH3)3

S'2+

Formel 11-8. Flchtige Peptidderivate fr die massenspektrometrische Sequenzanalyse.

Da grere Peptide zu viele Fragmentionen liefern, werden Polypeptide zuvor durch Hydrolyse in
mglichst viele verschiedene Oligopeptide gespalten, deren Trennung zweckmig nach Derivatisierung
durch Gaschromatographie erfolgt. Die Gesamtsequenz des Polypeptids lt sich dann nach dem
"Domino"-Prinzip aus den ermittelten Sequenzen der kurzen Oligopeptide zusammensetzen.
Trp-Ile
Trp-Ile-Thr
Ile-Thr-Lys
Thr-Lys
Thr-Lys-Glu
Kombination von Gaschromatographie und
Lys-Glu
Massenspektroskopie aus den Partialsequenzen
Glu-Glu
sich berlappender Oligopeptide
Glu-Glu-Tyr
Glu-Tyr
Glu-Tyr-Asp
Tyr-Asp
Tyr-Asp-Glu
Tyr-Asp-Glu-Ala
Asp-Glu
Asp-Glu-Ala
Glu-Ala
Ala-Gly-Pro
Gly-Pro
Pro-Ser
Ser-Ile
Ser-Ile-Val
Ser-Ile-Val-His
Ile-Val
Arg-Lys
Lys-AEtCys
Lys-AEtCys
Lys-AEtCys-Phe
291

292

11. Proteine

AEtCys-Phe
Trp-Ile-Thr-Lys-Glu-Glu-Tyr-Asp-Glu-Ala-Gly-Pro-Ser-Ile-Val-His-Arg-Lys-AetCys-Phe

Abb. 11-13. Ermittlung der Sequenz des C-terminalen Eicosapeptids von Actin (nach NAU, KELLEY und
BIEMANN).

Mit MS/MS-Experimenten und DADI-Massenspektrometrie [direct analysis of daughter ions], die den
Nachweis der konsekutiven Bildung von Moleklfragmenten erlauben, kann die Strukturanalyse
periodisch aufgebauter organischer Molekle erfolgen. Durch die Registrierung von Tochterionen lt
sich bei kleineren Oligopeptiden aus dem DADI-Spektrum direkt die Sequenz ableiten.

O
H
N

O
H
N

N
H
O

O
H
N

N
H
O

CF3

M+ 638
593
582
565
536
508
465
437
357
314
286

Abb. 11-14. Auswertung des DADI-Spektrums eines Hexapeptid-Derivates (nach U. SCHLUNEGGER).

Durch weiche Ionisierung wie im Falle von FAB [fast atom bombardment] wird aus dem Massenspektrum von Oligopeptiden auer den Quasimoleklionen wenig weitere Strukturinformation durch
Fragmentierung erhalten. Durch stoinduzierte Fragmentierung des (M+H)+-Ions ist jedoch auch die
Sequenzanalyse mglich. (Abb. 10-15 zeigt das Tochterionenspektrum des (M+H)+-Ions des Tetrapeptids
Met-Arg-Phe-Ala).

292

293

11. Proteine

Abb. 10-15. Tochterionenspektrum des (M+H)+-Ions m/z = 524 des Tetrapeptids Met-Arg-Phe-Ala (nach
R. SCHUBERT).

Durch Elektrospray- [ESI] oder MALDI-Ionisierung [matrix assisted laser desorption ionisation] lassen
sich auch Moleklionen hhermolekularer Peptide mit Massen bis zu 100.000 Da nachweisen. Da
aufgrund der schonenden Ionisierung bzw. Desorption Ionen-Fragmentierungsprozesse unterdrckt
werden, mu durch Stoaktivierung [post source decay], also Fragmentinduktion "hinter der Ionenquelle", erst ein Zerfallsspektrum generiert und damit Strukturaussagen ermglicht werden. Auch die
mehrfach-geladenen intakten Moleklionen aus einer ESI-Quelle lasssen sich zum Zerfall anregen und
MS/MS-Spektren registrieren. Bei greren Peptiden fhrt die Leitersequenzierung unter Ausntzung der
EDMAN-Chemie zum Erfolg. Es werden Peptidleitern synthetisiert, ein Satz von Peptiden, die jeweils um
eine Aminosure verkrzt sind. Aus den Massendifferenzen lt sich die Proteinsequenz bestimmen.

10.5.6 Spaltung von Disulfidbrcken

In vielen Peptiden sind jeweils zwei Cystein-Molekle ber eine Disulfidbrcke zu Cystin verknpft. Die
Spaltung solcher S-S-Brcken kann reduktiv oder oxidativ erfolgen. Zur reduktiven Spaltung verwendet
man Mercaptoethanol oder Thioglykolsuresalze. Die Reaktion ist reversibel, durch Oxidation mit
Luftsauerstoff werden die Disulfidbrcken wiederhergestellt (vgl. Dauerwelle, 9.1.2). Die bei der
Reduktion entstandenen SH-Gruppen lassen sich mit Jodessigsure zu R-S-CH2-COOH fixieren. Die
oxidative Spaltung mit Perameisensure fhrt zu Sulfonsuren.
NH

NH

CH CO NH
CH2
S
S
CH2
CH CO NH

NH
HCOOH

CH CO
CH2
SO3H

NH

NH

SO3H
CH2
CH CO

NH

11.6.7 Proteinfragmentierung, Sequenzstrategien

293

294

11. Proteine

Relativ kurze Peptide knnen in der Regel leicht mit HPLC gereinigt und direkt durchsequenziert werden.
Lngere Polypeptide mssen hingegen fragmentiert und die entstandenen Peptidmischungen getrennt
werden. In der Sequenzanalyse werden mit Peptidasen oder surekatalysiert kleine Bruchstcke
hergestellt [statistische Spaltung] und miteinander kombiniert. Ob spezifisch spaltende Enzyme oder
chemische Spaltung mit Bromcyan oder verdnnten Suren verwendet werden sollen, wird vom
jeweiligen Protein und der Trennbarkeit der entstehenden Peptidfragmente diktiert. Inzwischen sind
jedoch auch die Methoden der Sequenzanalyse von Desoxyribonucleinsuren so weit perfektioniert, dass
es bei lngeren Proteinen zur Ermittlung der Primrstruktur hufig einfacher ist, das entsprechende
Strukturgen des Proteins zu isolieren, dessen Nucleotidsequenz zu ermitteln und daraus die
Aminosuresequenz des Proteins abzuleiten. Auf diese Weise wurde z.B. die Primrstruktur der
Interferone bestimmt.

Vielfltige Anwendungen findet die Proteinsequenzierung dennoch noch immer bei der Herstellung neuer
Proteine in der Pharmakologie und Biotechnologie. Sie ist unverzichtbar fr viele moderne Projekte der
Biologie, Biochemie und Medizin. Im "Atlas of Protein Sequences" werden seit 1966 jhrlich die
aufgeklrten Primrstrukturen von Proteinen verffentlicht. Das bisher grte in seiner Primrstruktur
aufgeklrte globulre Protein ist ein monoklonales IfM-Immunoglobulin mit einer Molmasse von 935.000
[HILSCHMANN].

11.6 Biologisch aktive Peptide und Proteine

Proteine haben eine Vielzahl lebenswichtiger Aufgaben zu erfllen. Als Biokatalysatoren [Enzyme, Kap.
11] katalysieren sie Synthese und Aufbau von Zellbestandteilen, als Struktur und Funktionselemente sind
sie wesentlicher Bestandteil aller Zellen, der Membranen, des Sttz-, Muskel- und Bindegewebes. Als
Regulationsstoffe stimulieren sie wichtige Reaktionsablufe und spielen eine wesentliche Rolle bei der
Zelldifferenzierung. Zahlreiche Proteine und Peptide spielen eine Rolle bei der Genkontrolle und bei
neurobiologischen Prozessen. G-Proteine sind fr die Signaltransduktion verantwortlich. Die Immunoglobuline dienen bei Wirbeltieren zur Abwehr krperfremder Stoffe. Unter den immunologisch
wirksamen Proteinen besitzen die Antikrper eine groe therapeutische und diagnostische Bedeutung.
Bestimmte Proteine ermglichen den Transport und die Speicherung von Metallen oder Sauerstoff.
Strukturgebundene Membranproteine dienen fr den aktiven Transport durch biologische Membranen.
Bestimmte Peptide knnen Krankheitserreger sein oder ben eine toxische Wirkung auf andere
Organismen aus. Zu letzteren zhlen verschiedene tierische, mikrobielle oder pflanzliche Toxine.

11.6.1 Neuropeptide
294

295

11. Proteine

Proctolin ist ein aus fnf Aminosuren bestehendes Neuropeptid (Neurotransmitter) aus Insekten, das
z.B. bei der Schabe Periplaneta americana das Verdauungssystem und verschiedene Muskelsysteme
anregt, aber auch bei anderen Wirbellosen und sogar Sugetieren Wirkung zeigt.
Arg Tyr Leu Pro Thr

Proctolin aus der SchabePeriplaneta americana

Ein pheromonproduzierendes Neuropeptid [pheromone producing biologically active neuropeptide,


PBAN] wird bei Insekten in den Corpora allata produziert und bewirkt die Produktion und Ausschttung
von Sexualpheromonen.

11.6.2 Immunoglobuline

Immunitt ist die spezifische Antwort des Krpers auf das Eindringen krperfremder Substanzen, ein
Bestandteil ist die Produktion von Antikrpern. Die Substanzen, die die Immunantwort auslsen,
bezeichnet man als Antigene. Antigene sind krperfremde, natrliche oder synthetische Makromolekle,
vor allem Proteine und Polysaccharide sowie Oberflchenstrukturen von krperfremden Partikeln. Sie
lsen in vivo eine Immunantwort aus, deren Bestandteil die Produktion von Antikrpern ist. Die
erforderliche Mindestmolmasse zur Antigenaktivitt hngt stark von der Struktur ab. Synthetische
Polypeptide mit einer Molmasse > 4 - 5.000 wirken schon immunogen.

Es lt sich jedoch auch eine Immunantwort gegen niedermolekulare Verbindungen auslsen, wenn diese
an ein Makromolekl gebunden sind. Diese meist kovalent gebundenen niedermolekularen Verbindungen
bezeichnet man als Haptene. Sowohl gegen die Antigene als auch die freien Haptene werden im
Organismus spezifisch reagierende lsliche Proteine, die Antikrper [humorale Immunantwort] oder aber
spezifisch reagierende Zellen mit plasmamembranbestndigen Antikrpern, die sog. sensibilisierten
Lymphozyten [zellulre Immunantwort], gebildet.

Die Immunoglobuline sind spezifische, krpereigene Abwehrproteine, die als Antikrper bezeichnet und
von bestimmten Lymphozyten nach Kontakt mit Antigenen gebildet werden. Die Gruppen des Antigenmolekls, die die spezifische Bindung an die Antikrper- oder antikrperhnlichen Strukturen an der
Oberflche der Lymphozyten bewirken, bezeichnet man als determinante Gruppen.

Die Immunoglobuline sind Glykoproteine mit einer Molmasse ber 150.000, die glykosidische Bindung
wird mit Heteropolysacchariden eingegangen. Sie kann z.B. N-glykosidisch an Asparagin oder
glykosidisch zu Serin oder Threonin erfolgen. Der Proteinanteil gehrt zur Gruppe der sphrischen
295

296

11. Proteine

Globuline, die Immunoglobuline werden in der elektrophoretisch abtrennbaren -Globulinfraktion


gefunden.

Erste Hinweise auf die Struktur der Immunoglobuline konnten durch selektive Spaltung erzielt werden.
1958 konnten RODNEY und PORTER das Immunoglobulin G [IgG] enzymatisch mit Papain in zwei
Fragmente spalten, die im Molverhltnis 1:2 anfielen. Das eine Fragment war kristallisierbar (Fc), das
andere noch antigen-binden (Fab). EDELMAN gelang eine Spaltung des IgG durch Reduktion der
Disulfidbrcken in Gegenwart denaturierender Agentien wie Harnstoff. Bei dieser reduktiven Spaltung
wurden zwei schwere (heavy) und zwei leichte (light) Ketten (L- und H-Ketten) gebildet.

Durch Vergleich der Primrstruktur der Immunoglobulinketten von Wirbeltieren wurde wahrscheinlich
gemacht, dass die -Kette (Tab. 10-7) vor etwa 400 Millionen Jahren entstanden ist. Die -Kette soll vor
etwa 300 Millionen Jahren, die -Kette vor etwa 200 Millionen Jahren von der -Kette abgegrenzt
worden sein.

Immunoglobuline besitzen in ihrer antigenbindenden Region Y-frmige Gestalt. Im Unterschied zu den


brigen Immunoglobulinen liegt das IgM der Suger als Pentamer (Abb. 10-17), das niederer Tiere
(Fische) als Tetramer vor.

Zwischen den einzelnen Immunoglobulinklassen gibt es weitere Unterschiede in ihren biochemischen


Eigenschaften. Lediglich das IgG ist in der Lage, die Placentaschranke zu passieren. Das IgM, das
phylogenetisch lteste Immunoglobulin, ist fr die frhe Immunantwort verantwortlich. IgA kommt in
Sekreten (z.B. Trnenflssigkeit, Speichel) vor und schtzt dort lokal vor Infektionen. Das IgE spielt als
Reagin eine besondere Rolle bei allergischen Erkrankungen.

11.6.3 Lectine

Lectine sind krpereigene Proteine, jedoch sonst vorwiegend pflanzlicher Herkunft, die spezifisch
bestimmte Kohlenhydrate binden knnen (Tab. 11-8), aber weder Enzyme noch Antikrper sind. Da sie
auch an Zellen mit Glykokonjugaten wie z.B. Erythrozyten zu heften und sie zu agglutinieren vermgen,
wurden Lectine [lat. leggere = auswhlen] frher auch als Phytoagglutinine oder Hmagglutinine
bezeichnet. Die meisten Lectine sind Glykoproteine mit ein oder meist mehreren Polypeptidketten,
charakteristisch ist der hohe Anteil an Aspartinsure, Asparagin, Serin und Threonin. Einige Lectine
enthalten Metallionen. Lectine wurden ursprnglich in Pflanzen entdeckt, sind jedoch in allen lebenden
Organismen weit verbreitet (Tab. 10-8). So kommen agglutinierende Proteine auch in Pilzen, Schnecken,
296

297

11. Proteine

Fischeiern, Amphibien und anderen Tieren vor. 1985 sind Lectine in menschlichen Tumoren
nachgewiesen worden.

Tabelle 11-8. Spezifitt und Herkunft einiger Lectine


Zuckerspezifitt
-D-Man, -D-Glc
(GlcNAc)

Blutgruppenspezifitt (S. )

-L-Fuc

-D-Gal

-D-Gal
-D-GalNAc

B
A

-Neu
L-Rha

Herkunft des Lectins


Canavalia ensiformis* (Schwert- oder Madagaskarbohne)
Pisum sativum (Erbse)
Lens culinaris (Linse)
Tetragonolobus purpureus (Spargelerbse)
Ulex europeus (Stechginster)
Ricinus communis
Phaseolus vulgaris (Gartenbohne)
Arachis hypogaea (Erdnuss)
Bandeiraea simplicifolia
Glycine max (Sojabohne)
Phaseolus lunatus (Limabohne)
Helix pomatia (Weinbergschnecke)
Dolichos biflorus (Helmbohne)
Limulus polyphemus (Pfeilschwanzkrebs)
Streptomyces 27 S5

* Name des Lectins: Concanavalin A

In hheren Pflanzen sind Hunderte von Lectinen gefunden worden, lectinhaltig sind viele Fabaceen wie
Bohne, Erbse, Linse, Erdnuss, Sojabohne oder Paternostererbse, wo sie vor allem in den Samen lokalisiert
sind. Die Molmasse, der molekulare Aufbau und die Spezifitt gegenber Zuckern der LeguminosenLectine knnen sich erheblich unterscheiden, jedoch sind ihre Aminosuresequenzen weitgehend
homolog. Selbst zwischen taxonomisch entfernt stehenden Familien findem man Homologien, so ist das
Ricin homolog mit dem Trichosanthin, dem in der chinesischen Volksmedizin eingesetzten Wirkstoff aus
dem Krbisgewchs Trichosanthus kirilowii. Ausserdem ist Ricin mit dem Schleimpilz-Lectin Discoidin
homolog.

Das erste Lectin, dessen Sequenz und rumliche Struktur aufgeklrt werden konnte, ist das
kohlenhydratfreie Samenprotein Concanavalin A [Con A] aus der Schwert- oder Madagaskarbohne
[Canavalia ensiformis, jack bean]. Unter physiologischen Bedingungen existiert das Metalloprotein
Concanavalin A als Tetramer, bei einem pH < 6 vorzugsweise als Dimer. Jede Untereinheit besteht aus
237 Aminosuren und enthlt je ein Mn2+-, Ca2+-Ion und eine bindende Stelle fr Kohlenhydrate.
Aufgrund seiner Affinitt zu bestimmten Oligosacchariden kann Concanavalin als Hilfsmittel zum
Nachweis dieser Kohlenhydrate und zur Affinittschromatographie eingesetzt werden.

297

298

11. Proteine

Am lngsten bekannt ist das toxische Glykoprotein Ricin, das bereits 1888 [H. STILLMARK] aus RicinusSamen [Ricinus communis] isoliert werden konnte. Es besteht aus zwei Ketten (A-Kette: Molmasse
30.000, B-Kette: Molmasse 35.000), die ber eine Disulfidbrcke miteinander verbunden sind. Die als
Haptomer bezeichnete Untereinheit B ist fr die Anlagerung an bestimmte galactosehaltige Glykosidreste
an der Zelloberflche verantwortlich. Dadurch wird es der Untereinheit A [Effektomer] ermglicht, in die
Zelle einzudringen und dort die Proteinbiosynthese zu inhibieren. Neben dem toxischen Ricin ist im
Ricinussamen noch das hnlich gebaute, aber untoxische Ricinus-Agglutinin RCA I enthalten.

Die Lectine besitzen eine groe Bedeutung fr die Untersuchung dynamischer Prozesse der Zelloberflche. Durch die Bindung der Lectine an die Lymphozytenoberflche werden Mitose und Inmunoglobulinproduktion induziert. Bakterien heften sich ber ihre Lectine an Wirtszellen an. Lectinvermittelte
Adhsion scheint auch bei der Symbiosenlenkung bei Mikroorganismen und Pflanzen eine Rolle zu
spielen. Auch die Wurzelknllchenbildung zur N2-Fixierung bei Leguminosen luft unter Beteiligung von
Lectinen ab.

Von einigen Autoren werden die Lectine als Speicherprotein angesehen, es ist jedoch auch denkbar, dass
sie berhaupt keine Funktion besitzen, da auch lectinfreie Varianten existieren. Viele Lectine sind fr
hhere Organismen toxisch, auch die Gartenbohne Phaseolus vulgaris ist in rohem Zustand giftig.

11.6.4 Ca-Bindende Proteine

In Zusammenhang mit der Rolle der intrazellulren Calciumionen als "second messenger" wurden Cabindende Proteine [intrazellulre Ca-Rezeptoren] interessant. Die wichtigsten Ca-bindenden Proteine
sind das Calmodulin in den nicht-muskulren Geweben und das Proponin C in der quergestreiften
Muskulatur.

Calmodulin reguliert die Aktivitt zahlreicher Enzyme (Kinasen, Phosphatasen). Aus Rinderhirn
isoliertes Calmodulin enthlt 148 Aminosuren, davon ca. 1/3 saure Aminosuren (Aspartin-, Glutaminsure). Bemerkenswert ist das Vorkommen der seltenen Aminosure Trimethyllysin, die terminale
Aminogruppe ist acetyliert. Die Flexibilitt wird durch Disulfidbrcken nicht eingeschrnkt. Calmodulin
enthlt 4 Ca-bindende Domnen, die Ca-Bindung fhrt zu Vernderungen der rumlichen Struktur.
Hinsichtlich der Struktur (ca. 50% Homologie) und Ca-Bindungsvermgen ist das Troponin C dem
Calmodulin nahe verwandt.

11.6.5 Proteine als Krankheitserreger - Prionen


298

299

11. Proteine

Erst im vorigen Jahrzehnt wurde postuliert, dass gewisse schon lange bekannte Gehirnerkrankungen wie
z.B. die fr Schafe und Ziegen tdliche Scrapie-Krankheit und das Creutzfeldt-Jakob-Syndrom [CDJ] des
Menschen nicht durch die blichen Krankheitserreger, also Viren, Bakterien und Parasiten, sondern durch
proteinartige Erreger, sog. Prionen [proteinaceous infectious particle], verursacht werden. Auch die
Britische Rinderseuche BSE [bovine spongiforme Enzephalopathie] wird etwas spter als PrionenKrankheit klassifiziert. Mageblich zur Formulierung dieses neuen Erregertyps waren die fr ein Virus
untypische, besonders lange Inkubationszeit ["slow virus"], die Kleinheit des Objekts, die eine
elektronenmikroskopische Entdeckung verhinderte ["subviral"], das Unterbleiben einer Immunantwort
und die ausgesprochene Unempfindlichkeit gegenber chemischer und physikalischer Beeinflussung.

S.B. PRUSINER [Nobelpreis 1997] et al. fanden 1991 als Hauptkomponente des Erregerproteins die
vernderte Form eines natrlichen zellulren Proteins PRP-C [Prionprotein - zellulre Form] mit dem
Molekulargewicht 33.000 - 35.000. Mit der Kenntnis der Gensequenz konnte nachgewiesen werden, dass
jeder Organismus das Prion-Protein in der ungefhrlichen zellulren Form produziert. Chemische Unterschiede in der Aminosuresequenz konnten nicht gefunden werden, gleich ob das Material aus einem
infizierten oder gesunden Organismus stammte. Man geht davon aus, dass das in der zellulren, lslichen
PRP-C-Form im Organismus produzierte Protein im Erreger in der unlslichen sog. Scrapie-Form PRPSc akkumuliert wird. Die Umwandlung von PRP-C- zur PRP-Sc-Form wird durch Konformations- und
Sekundrstrukturnderung und Aggregation zu Oligomeren bewirkt. So besitzt PRP-C 45 % -Helixstruktur und praktisch keine Faltblattstruktur, das abnormale PRP-SC hingegen 45 % Faltblatt- und nur
noch 30 % -Helixstruktur. Die infektise PRP-Sc-Form kann mit einem natrlichen PRP-C dimerisieren
und nachfolgend der zellulren PRP-C-Form ihre eigene Form aufzwingen und so in einem katalytischen
Zyklus die infektisen Partikel vermehren. Diese Reproduktion Protein Protein verletzt damit das
zentrale Dogma der Molekularbiologie, wonach Nucleinsuren als Matrizen fr die Replikation
unerllich sind. Im Falle der Prionen-Erkrankungen knnte ein einziges Molekl fr die erblichen und
die spontanen Formen der Krankheiten verantwortlich sein.

10.6.6 Protein- und Peptidtoxine

Eine Vielzahl natrlicher Toxine besitzt Peptidstruktur. Dazu zhlen Schlangengifte, Gifte von Weichtieren, Skorpionen, Insektengifte, Toxine mancher Giftpilzarten und bakterielle Toxine. Im folgenden
sollen nur einige "klassische" Gifte abgehandelt werden, detaillierte Darstellungen verschiedener
Pflanzen- und Tiergifte sind im Kap. 15.(Alkaloide) zu finden.

299

300

11. Proteine

11.6.6.1 Schlangengifte

Die Schlangengifte enthalten neben Enzymen Peptide, die meistens aus etwa 60 bis 75 Aminosuren
bestehen und deren Peptidketten gefaltet und durch Cysteinbrcken fixiert sind. Sie weisen neurotoxische
und cardiotoxische Wirkungen auf. Die hnlichkeit der Sequenz der Neurotoxine und Cardiotoxine lt
vermuten, dass sich beide Gruppen aus einem gemeinsamen Vorlufer-Protein entwickelt haben.
Chemisch verwandt mit den Cardiotoxinen der Schlangen sind die Gifte der Skorpione. Neben den
spezifischen Toxinen sind in den Rohgiften Enzyme enthalten, z.B. Phospholipasen, Peptidasen,
Proteasen. Auch sie wirken stark giftig, indem sie zu Blutdruckabfall, Strung der Blutgerinnung oder zur
Zerstrung von Blutgefen fhren.

Die giftigeren Neurotoxine werden je nach ihrem Angriffsort in postsynaptische (Angriff an der postsynaptischen Membran am Acetylcholin-Rezeptor, -Typ) und prsynaptische Neurotoxine (Angriff an
der prsynaptischen Membran, -Typ) unterteilt. Besonders gut sind die Neurotoxine des -Typs untersucht, zu denen die Toxine der Giftnattern [Elapidae] gehren. Bei diesen Toxinen, die einen Nterminalen Isoleucin- oder Methionin-Rest enthalten, werden aufgrund von Unterschieden in der
chemischen Struktur wiederum zwei Typen (I und II) unterschieden [TU, YANG]. Neurorotoxine vom Typ
I sind Polypeptide der Molmasse 6.700 bis 7.000, die 61 - 62 Aminosuren mit 4 Disulfidbrcken
enthalten. Neurotoxine vom Typ II besitzen eine Molmasse > 7.800. Sie bestehen aus 71 - 74 Aminosuren mit 5 Disulfidbrcken. In einer australischen Giftnatter wurde daneben noch ein Neurotoxin
gefunden, das aus 119 Aminosuren aufgebaut ist. Seeschlangen [Hydropheidae] enthalten nur Neurotoxine vom Typ II. Die Peptidgifte der Ottern [Viperidae] und Nattern [Colubridae] besitzen hhere
Molmassen (16.000 - 21.000).

Neurotoxine der Typen I und II verschiedener Tierspezies und verschiedener geographischer Herkunft
hneln sich sehr in ihrer Struktur. Obwohl beim Typ II zwei zustzliche Cysteinreste vorhanden sind, ist
die Lage der anderen Cysteinreste bei Vertretern beider Typen nahezu identisch.
Die -Neurotoxine besitzen grere Molmassen (20.000 - 22.000) als die -Neurotoxine. N-terminal
befindet sich ein Aspartinsure- oder Asparagin-Rest.
Die uerst giftige Giftnatter Bungarus ulticinctus [Elapidae] produziert sowohl ein - als auch ein Neurotoxin [- und b-Bungarotoxin]. -Bungarotoxin, dessen Primrstruktur in Abb. 10-18
wiedergegeben ist, lagert sich an den Acetylcholin-Rezeptor an und hemmt die neuromuskulre
bertragung des Nervenimpulses.
300

301

11. Proteine

Abb. 10-18. Primrstruktur des -Bungaratoxins aus der Giftnatter Bungarus ultinctus.
Abb. 10-19 und Abb. 10-20 zeigt die Sequenz des Cobratoxins und des -Toxins aus Naja nivea.

Abb. 10-19. Struktur des Cobratoxins.


Abb. 11-20. Struktur des -Toxins aus Naja nivea.

Der Hauptbestandteil des Giftes von Klapperschlangen [Crotalidae] ist der Polypeptid-Komplex Crotoxin
mit einem MG von ca. 30.000. Als eigentliche Neurotoxine des Crotoxins betrachtet man das Crotactin
(enzymfrei) und das Crotamin, ein Polypeptid vom MG 10.000 - 15.000. Die Vergiftung fhrt lokal zu
Schmerzen, Rtung und Nekrose, systemische Folgen sind Mdigkeit, Kollaps und Schock bis zum Tod.

Erabutoxine sind tdlich giftige Polypeptid-Neurotoxine der Seeschlange Laticauda semifasciata mit
jeweils 62 Aminosureeinheiten.

11.6.6.2 Toxine der Kegelschnecken

Conotoxine sind Peptidgifte aus Kegelschnecken [Conidae] tropischer und subtropischer Meere. Die
Schnecken stechen zum Beutefang mit Hilfe harpunenartiger Giftzhnchen, die mit Neurotoxinen beladen
sind. Die Stiche sind sehr schmerzhaft, gefolgt von Taubheit, in schweren Fllen tritt Muskellhmung ein.
Todesflle beim Menschen infolge Herzversagen sind fr Conus geographus, C. textile und C. tulipa
bekannt. Bei den Conotoxinen kennt man ber 10 verschiedene Verbindungen mit 13 bis 27 Aminosuren.

H Glu Cys Cys Asn Pro Ala Cys Gly Arg His Tyr Ser Cys NH2

Conotoxin G1

11.6.6.3 Bienengift

Das Bienengift enthlt verschiedene Enzyme [Hyaluronidase, Phospholipase A] sowie als Hauptbestandteil das basische Polypeptid Melittin. Am C-terminalen Ende sind vier von fnf basischen
Aminosuren positioniert, und die meisten Aminosuren mit hydrophoben Seitenketten sind zentral bzw.

301

302

11. Proteine

am N-terminalen Ende lokalisiert. Durch diese ungleichmige Verteilung der Aminosuren besitzt
Melittin den Charakter einer oberflchenaktiven Verbindung, die Erythrozyten hmolysieren kann.

Abb. 11-21. Primrstruktur des Bienengiftes Melittin.

11.6.6.4 Peptidtoxine als Pilzgifte

Bei den Giften des Grnen Knollenbltterpilzes Amanita phalloides handelt es sich um bicyclische Heptapeptide [Phallotoxine] bzw. Octapeptide [Amatoxine], die sich hinsichtlich ihrer biologischen Wirkung
und ihrer chemischen Struktur unterschieden.

Die Phallotoxine wirken bereits nach relativ kurzer Zeit, die Gruppe der Amatoxine wirkt erst nach
einigen Tagen. Zu letzteren gehrt auch die toxischste Verbindung, das -Amanitin. -Amanitin dringt in
die Leberzellen ein und hemmt dort die DNS-abhngige RNS-Polymerase. Amatoxine und Phallotoxine
sind kochfest und recht stabil, sie werden auch durch Trocknen der Pilze nicht zerstrt und gehen nicht in
das Kochwasser ber. Ein sehr wirkungsvoller Test zum Erkennen Amatoxin-haltiger Pilze ist der
WIELANDsche Zeitungstest. Dabei wird Pilzsaft auf eine unbedruckte Stelle einer Zeitung gebracht und
mit Salzsure befeuchtet. In Gegenwart von wenigen Mikrogramm Amatoxin erscheint nach 5 bis 10
Minuten ein blauer Farbfleck, der das Produkt einer Farbreaktion von Komponenten aus dem Fichtenholzlignin des Papiers und dem Indolanteil der Pilzgifte darstellt.

Fr die Giftwirkung essentiell ist eine Sulfidbrcke, die durch Kupplung der Mercaptogruppe eines
Cysteins mit dem Indolrest des Tryptophans gebildet wird. Bei den Amatoxinen ist das S-Atom zum
Sulfoxid oxidiert. Wesentlich fr die Wirkung der Amatoxine ist die Anwesenheit von -hydroxyliertem
Isoleucin. Amanullin z.B. ist ungiftig.

302

303
O

H
H3C C

H
N

H
C

H
H
N

N
H

H2C

S
H
CH N

HC
H
C

R1

Name

R1

H
N

CH3

CH3

R3

Phalloidin

CH(OH) CH2OH
CH3

CH3

CH3

Phallisin

CH(OH) CH2OH
CH3
CH(OH) CH2OH
CH3

CH3

CH3

Phallicidin

R2

CHR1 CH2R2
O
H H
C
CH C N C

R3

CH(OH) CH3
CH3

O HC OH
Phallotoxine

R2

Phalloin
NH

OC

C
N

H2
C

H2C

NH

11. Proteine

COOH CH(CH3)2

H3C CH
HN

NH
CH3

O S
N
O C

C O

CH2

H2C

CO

H
N

CH2

O
C CH

H
N

CH

H
N

H2C

HC CH
OH
CH3
O C

N
H

COR
Amatoxine

C
O

CH2

Name

R1

R2

R3

-Amanitin
-Amanitin

OH
OH

NH2
OH

-Amanitin

OH

OH
OH
H

NH2

Amanullin

NH2

NH

Formel 11-8. Phallotoxine und Amatoxine der Knollenbltterpilze.

Aus den Pilzen wurden, insbesondere durch die Arbeitsgruppen H. und TH. WIELAND, zahlreiche Giftstoffe, biologisch inerte Cyclopeptide und das gegen das Gift Phalloidin wirkende Cyclodecapeptid
Antamanid isoliert.

O H2C
C N CH
N
H
C O
H H
N C C N
O CH2

H2C

O
C N CH C N CH C N
H
H
O C O
H H
H H
C C N C C N C N
O CH2 O
O

Die Virotoxine stellen neben Phallotoxinen und Amatoxinen eine weitere Giftklasse der Knollenbltterpilze dar. Es sind monocyclische Heptapeptide mit dem Haupttoxin Viroisin.
O
C
H3C

H
N

H2
C

CH2OH
H
N

H
C

CH

NH

HN

H2
C

C R1
OH

2
CH R

C O
HO
HO

O
N

O
CH

H
N

CH2OH

C
H3C

C
H
C

O
NH

Viroisin

CHOH

303

304

11. Proteine

Den Peptidtoxinen des Grnen Knollenbltterpilzes hneln die Gifte der Schleierlinge [Gattung
Cortinarius], die frher als Speisepilze galten. Vertreter dieser Gifte sind die Cortinarine A, B und C.

11.6.6.5 Peptidtoxine aus hheren Pflanzen, Thionine

Mit Viscotoxin wird das toxische Prinzip aus Misteln [Viscum album] bezeichnet. Es zhlt zu den
Thioninen, stark basischen pflanzlichen Polypeptiden, und besteht aus fnf basischen Polypeptiden mit
einem MG von ca. 5.000.
O
Phe N
H

CH

Val

CH2

Lys R

Orn

S
Gly

N
H
Thr

Leu
CH2
NH He
C
H

11.6.6.6 Bakterielle Toxine

Die bakteriellen Toxine werden in Endo- und Exotoxine eingeteilt. Die Endotoxine entfalten ihre toxische
Wirkung erst nach dem Absterben oder durch Autolyse (z.B. im Darm) der Bakterien. Bei den
klassischen Endotoxinen handelt es sich um Lipopolysaccharide (Kap.

). Im Unterschied zu den

Endotoxinen werden die Exotoxine [auch Enterotoxine oder Ektotoxine] von den Bakterien in die
Umgebung abgegeben. Hierbei handelt es sich um toxische Proteine, die vor allem von gram-positiven
Bakterien produziert werden und meist die Darmwand angreifen. Hufig entstehen die eigentlichen
Toxine erst nach der Einwirkung proteolytischer Enzyme auf Protoxine, wie z.B. bei den hochtoxischen
Botulinustoxinen von Clostridium botulinum. Weitere prominente Vertreter sind u.a. das Tetanustoxin,
das Diphtherietoxin sowie die Enterotoxine (25.000 - 30.000 Da) von Staphylococcus aureus.

Das Tetanustoxin [Tetanospasmin] wird von dem grampositiven Stbchenbakterium Clostridium tetani
gebildet und verursacht den Wundstarrkrampf [Tetanus]. Dieses Toxin, das zweitstrkste bakterielle Gift,
ist ein Protein mit 150.000 Da und besteht aus zwei Untereinheiten, von denen sich eine an die Zellmembran bindet und die andere die eigentliche Toxinwirkung entfaltet.

Das Diphtherietoxin mit MG = 62.000 Da wird vom Diphtherie-Erreger Corynebacterium diphtheriae


produziert und besteht aus nur einer Polypeptidkette mit 535 Aminosuren, die durch proteolytische
Enzyme leicht in zwei Fragmente A und B gespalten wird. Das Fragment B bindet an einen Rezeptor in

304

305

11. Proteine

der Zelloberflche und sorgt fr das Eindringen des Fragments A in das Cytoplasma. Das Diphtherietoxin
hemmt die Proteinsynthese in der Zelle.

Eine interessante Struktur besitzt das Cholera-Enterotoxin. Das Protein (84.000 Da) besteht aus drei
verschiedenen Peptidketten (, , ) und weist die Zusammensetzung n (fr n = 4 bis 6) auf. Die
Peptidketten und sind ber eine Disulfidbrcke zur Untereinheit A verbunden, die b-Ketten nichtkovalent zur Untereinheit B. Die Zusammensetzung der Untereinheit B hngt von pH-Wert, von der
Ionenstrke oder der Temperatur ab. Fr die Auslsung der Cholera-Symptome ist die -Kette verantwortlich. Die Untereinheit B ist das Haptomer. Die Bindung des Choleratoxins erfolgt auch an
Rezeptoren verschiedener Glykoprotein-Hormone, wahrscheinlich weil die -Kette des CholeraEnterotoxins (103 Aminosuren) bei den ersten 42 N-terminalen Aminosuren Gemeinsamkeiten mit der
-Kette dieser Hormone aufweist.

Durch Behandlung der Exotoxine mit Formaldehyd geht die toxische, nicht aber die immunogene
Wirkung verloren. Derartige Toxoide werden deshalb als Impfstoffe eingesetzt. Auf antibiotisch wirkende
mikrobielle Peptide (Peptidantibiotika) wird in Kap. eingegangen.

11.6.6.7 Cyclopeptide und Cyclopeptolide aus niederen Meerestieren

Manteltiere [Tunicata], die einzigen Tiere, die Cellulose aufbauen (fr den Mantel) und Schwermetalle
akkumulieren knnen, produzieren eine Reihe ungewhnlicher Cyclopeptide und Cyclopeptolide mit oft
cytostatischer Wirkung. Hufigleben sie mit Algen in Symbiosen, so dass der eigentliche Produzent der
biologisch aktiven Inhaltsstoffe nicht entschieden werden kann. Viele dieser Cyclopeptide enthalten
anormale optisch-aktive Thiazolin- und Oxazolin-Aminosuren. 1982 wurden die Struktur des Dolastin 3
[G.R. PETTIT] aus dem Manteltier Dolabella auricularia publiziert, und 5 Jahre spter durch
Vertuaschung zweier Aminosuren korrigiert. Die cytostatischen Eigenschaften der Syntheseprodukte
erwiesen sich als weniger aktiv als ursprnglich berichtet. Weitere Vertreter dieser klasse wurden spter
aus dem Manteltier Lissoclinum patella isoliert. Die Didemnine A und B wurden aus dem Tunicat
Trididemnum solidum isoliert, wovon Didemnin B exzellente cytostatische Eigenschaften besitzt.

305

306

11. Proteine

O
Val

Leu

Pro

NH2

S
NH

N
H

NH

HN
R

Dolastin 3
N
O
OH

O
N

HN

O
O

NH

O
Ulicyclamid

NH
N
H

CH3O

O
O

R = H-(R)-MeLeu

Didemnin A

N
R = H-Lac-Pro-(R)-MeLeu Didemnin B

11.6.7 Plasmaproteine

Plasmaproteine sind ein Gemisch von ber 100 Proteinen, die zu etwa 7 - 8 % im Blutplasma
vorkommen. Unter den Plasmaproteinen des Menschen finden sich Albumine, Transferrin, Globuline,
Lipoproteine, Enzyme und die an der Blutgerinnung beteiligten Proteine. Plasmaproteine sind
berwiegend Glykoproteine, ihre Zusammensetzung bzw. Konzentration ist oft klinisch-diagnostisch von
Bedeutung. Plasmaprotein-Prparate haben auch Eingang in die therapeutische Praxis gefunden. Die
Entfernung des Fibrinogens und Prothrombins aus den Plasmaproteinen liefert die Serumproteine.

11.6.8 Peptidhormone, Regulations- und Wirkstoffe

Viele Oligopeptide besitzen als Hormone und Regulatoren biochemischer und biologischer Prozesse
groe Bedeutung. In einem Teil des Zwischenhirns [Hypothalamus] wurden die ersten Neurohormone
entdeckt, die im tierischen und menschlichen Organismus als Hypothalamushormone aufgrund ihrer
biologischen Relevanz erwhnenswert sind. Sie steuern die Freisetzung der Hormone des
Hypophysenvorderlappens [HVL], welche wiederum die Produktion der Geschlechtshormone (5.

regulieren. Man unterscheidet die freisetzenden Liberine [RH, RF] und die inhibierenden Statine [IR, IF].
Die Konzentration dieser Peptidhormone ist uerst gering (ng-Bereich), zur Isolierung des ersten SchafsLH-RH muten die Zwischenhirne von 300.000 Schlachttieren aufgearbeitet werden.

Ein Beispiel fr diese Neurohormone ist das Tripeptid Thyroliberin aus Glu, His und Pro. Dabei liegt die
N-terminale Glutaminsure als Pyroglutaminsure [Pyrrolid-2-on-5-carbonsure] und das C-terminale
Prolin als Amid vor. Gonadoliberin [Gn-RH] ist ein Decapeptid, das ebenfalls keine N-terminale Amino-

306

307

11. Proteine

und C-terminale Carboxylgruppe besitzt. Bei Gn-RH-Mangel setzt die gonadotrope Hypophysenttigkeit
aus, was zu Strrungen der Fortpflanzungsfhigkeit fhrt.
HH
N
O

N
H

O CONH2
N
HN
Thyroliberin
N

Somatotropin [Wachstumshormon, somatotropes Hormon STH, human growth hormone HGH] frdert
das Knochenwachstum und den Proteinaufbau (anabole Wirkung) und wird heute gentechnologisch hergestellt. Prolactin [PRL, Luteotropin, Luteotropes Hormon, LTH, Mammotropes Hormon] ist ein bei
manchen Tieren gefundenes Peptidhormon aus dem Hypophysen-Vorderlappen, das im weiblichen
Organismus, nach vorhergegangener Konzeption, die Milch-Sekretion anregt, die Gewebevermehrung der
Brustdrsen und die Progesteronproduktion stimuliert. Die Aminosuresequenz des LTH beim Menschen
und anderen Sugern ist bekannt, das Schaf-Prolactin (MG 22.500) besteht aus 199 Aminosuren und drei
Disulfidbrcken.

Corticotropin [Adrenocorticotropes Hormon, ACTH] regt die Nebennieren zur Produktion und Sekretion
der Corticoide an, ist ein stark basisches Polypeptid und besteht aus 39 Aminosuren. Melanotropin
[Melanozyten-stiumulierendes Hormon, MSH] wird bei Tieren im Hypophysen-Mittellappen gebildet und
reguliert die Pigmentbildung der Haut. Von Bedeutung fr die biologische Wirkung des Corticotropins
sind die basischen Aminosuren in den Positionen 15 bis 18 (Lys-Lys-Arg-Arg), Speziesunterschiede
treten in den Positionen 25 bis 33 auf (Formel 11-9). Fr die biologische Aktivitt ist nur ein Teil des
Molekls erforderlich, sie tritt bereits vom N-terminalen Tridecapeptid an auf und steigt mit wachsender
Peptidkette.

Zwei verschiedene Melanotropine werden im Hypophysenmittellappen gebildet, a-Melanotropin ist ein


Tridecapeptid, Speziesunterschiede wurden nicht gefunden. Beim b-Melanotropin wurden sowohl
Speziesunterschiede in der Kettenlnge (Mensch: 22, Schwein: 18 Aminosuren) als auch in der Sequenz
gefunden.
Asn Gly Ala Glu Asp Glu Ser Ala Glu

Mensch

Asn Gly Ala Glu Asp Glu Leu Ala Glu

Schwein

Asp Gly Ala Ala Ala Asp Ser Ala Gln


Ala Gly Glu Asp Asp Glu Ala Ser Gln

Rind
Schaf

Formel 11-10. Speziesunterschiede des Corticotropins.

307

308

11. Proteine

Im Hypothalamus gebildet und im Hypophysenhinterlappen freigesetzt werden beim Menschen die


Cyclopeptide Oxytocin und Vasopressin, die man ebenso als Neurohormone bezeichnen kann. Beide
gehren zu einer Nonapeptidfamilie, deren Vertreter von allen Wirbeltierklassen gebildet werden.
Oxytocin bewirkt am Sugetier whrend der Geburt die Kontraktion der Uterusmuskulatur und stimuliert
als Stillhormon gleichzeitig die Mammamuskulatur zur Milchejektion. Die Funktion beim Mann bzw.
mnnlichen Tier ist nicht bekannt. Vasopressin wird durch den Blutkreislauf zu den Nieren transportiert,
wo es seine hormonelle Wirkung entfaltet. Es unterscheidet sich vom Oxytocin nur in den Aminosuren
der Position 3 und 8. Es besitzt antidiuretische Wirkung [frher Adiuretin] Wirkung, die auf einer
Steigerung der Rckresorption von Wasser in den Nieren beruht und zur Konzentrierung des Harn fhrt.
Fr diese Wirkung auf den Wasser- und Elektrolythaushalt ist eine basische Aminosure (Arg oder Lys)
in 8-Stellung notwendig. In hohen Dosen steigert es den Blutdruck.
H

H
Cys Tyr

Cys Tyr
Leu

Gln

S
Cys Asn

Phe

S
Oxytocin

Pro Leu Gly NH2

Gln
Cys Asn

Vasopressin

Pro Lys Gly NH2

Endorphine [endogene Morphine] sind kurzkettige Peptide, die an Schmerzrezeptoren des Zentralnervensystems ZNS angreifen [Opioide], und auf der Suche nach den krpereigenen Liganden fr den tierischen
Opiatrezeptor entdeckt wurden. Sugetiere werden ohne Zweifel ohne Morphin geboren, besitzen aber
dafr spezifische Rezeptoren. Man unterscheidet drei Kategorien dieser Peptide, die pentapeptidischen
Enkaphaline, die Endorphine (von denen das lngste -Endorphin aus 31 Aminosuren besteht) und die
Dynorphine. Die ersten aus Hirnen von Sugern isolierten waren die Enkephaline Methionin-Enkephalin
[Met-Enkephalin] und Leucin-Enkephalin [Leu-Enkephalin, KOSTERLITZ und HUGHES, 1975]. Eine
Vielzahl anderer Opioidpeptide sind seitdem charakterisiert worden. Offensichtlich ist fr die Wirkung
von Enkaphalinanalogen die phenolische OH-Gruppe des Tyrosins essentiell. Dieses Phnomen wird
auch mit Morphin und seinen Analogen beobachtet. Ende der 70er Jahre waren ebenso bereits mehrere
spezifische Opiatrezeptoren bekannt (-Opiatrezeptor, -Rezeptor, -Rezeptor) und dafr auch endogene
Liganden isoliert wie z.B. das Dynorphin fr den -Rezeptor.

308

309

11. Proteine

In den Langerhans'schen Inseln der Bauchspeicheldrse [Pankreas] wird in den -Zellen Glucagon
gebildet und in den -Zellen Insulin (vgl.

), beide werden jedoch auch aus Hypothalamus-Neuronen

sekretiert. Schweineglucagon ist ein lineares Polypeptid aus 29 Aminosuren, das die Gluconeogenese
und den Blutzuckerspiegel steigert, whrend Insulin ihn senkt. Insulin besteht aus zwei Ketten, wovon die
A-Kette aus 21, die B-Kette aus 30 Aminosuren besteht (Molekulargewicht von menschlichem Insulin
M = 5.743). Die beiden Peptidketten sind ber zwei Disulfidbrcken miteinander verbunden.
NH2

NH2

NH2

H2N

His Ser Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser Arg Arg Ala Glu Asp Phe Val Glu Trp Leu Met Asp Thr
1

10

15

20

25

29

Schweineglucag
H2N

A-Kette

NH2

NH2

NH2

Gly Ile Val Glu Glu Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Glu Leu Glu Asp Try Cys Asp
1

10

15

20

S
S

menschliches Ins

B-Kette

Phe Val Asp Glu His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arf Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys
5

10

15

20

25

Formel 11-11. Glucagon aus Schwein und menschliches Insulin.

Die von den Zellen nach aussen abgegebenen Proteine werden meist unmittelbar nach der Biosynthese
durch ein sog. Protein-Processing enzymatisch verkrzt, wobei im ersten Schritt aus Prpro-Proteinen
(z.B. Prprohormonen) durch Abspaltung von Extensionspeptiden (Signalpeptide, bestehen aus ca. 20
Aminosuren) die meist noch biologisch unwirksamen Proproteine (z.B. Prohormone) gebildet werden,
aus denen durch weitere Verkrzung die eigentlich funktionsfhigen Proteine entstehen. Biosynthetisch
entsteht Insulin durch enzymatische Abspaltung einer Schleife aus Proinsulin.

Carnosin [-Alanyl-histidin] ist ein Dipeptid, das im Muskel vorkommt und dessen Bedeutung noch nicht
eindeutig geklrt ist. Glutathion spielt als Coenzym in biologischen Redox-Systemen eine wichtige Rolle.
N
SH

H3N

N
H

O
N
H

OH
O

Carnosin -Alanylhistidin

O
H
N

HO

OH

N
H
NH2

OH
Glutathion

11.6.8 Peptidantibiotika

309

310

Peptidantibiotika (vgl. 17.

11. Proteine

) unterscheiden sich von den meisten anderen Peptiden in ihrer Struktur.

Viele sind cyclisch aufgebaut oder enthalten seltene nichtproteinogene Aminosuren. Die meisten Peptidantibiotika werden in Bakterien, aber auch in Streptomyceten gefunden.

Typische Vertreter cyclischer Peptidantibiotika sind die von Bacillus brevis produzierten cyclischen
Peptide Gramicidin S und Tyrocidin A [

], weitere Beispiele sind in 17. zu finden.

L-Val

L-Orn

L-Leu

D-Phe

L-Pro

L-Val

L-Orn

L-Leu

D-Phe

L-Pro

D-Phe

L-Leu

L-Orn

L-Val

L-Tyr

L-Glu

L-Asp

D-Phe L-Phe

Gramicidin S

L-Pro

Tyrocidin A

Depsipeptide sind Metaboliten aus Bakterien und Pilzen, die sich alternierend aus Aminosuren und
Hydroxycarbonsuren aufbauen und meist cyclische Struktur besitzen.

10.6.9 G-Proteine

M. RODBELL und A.G. GILMAN [Medizin-Nobelpreis 1994] konnten das G-Protein, ein GTP-bindendes,
regulatorisches Protein, das G-Protein, isolieren, das eine fehlende Komponente an der intrazellulren
Wirkung des extrazellulren Adrenalin-Hormonsignals darstellte. Mehrere Grundtypen von G-Proteinen
[Gs, Gi, GP, Go, Transducin, ras-Proteine] sind bekannt. Sie sind nicht nur an der Freisetzung von
cAMP, sondern auch an der Produktion anderer sekundrer Signalstoffe beteiligt. Bakterielle
Infektionskrankheiten wie Cholera und Keuchhusten sind mit chemischen Vernderungen von GProteinen verbunden, auch Erbkrankheiten sind bekannt, die mit defekten G-Proteinen einhergehen.

11.7 Skleroproteine

Die Skleroproteine oder Gersteiweie gehren zu den fibrillren Proteinen und haben vor allem im
tierischen Organismus Schutz- und Sttzfunktionen zu erfllen. Die bevorzugte Ausrichtung in der
Lngsrichtung (Faserbildung) bedingt die groe mechanische Festigkeit und geringe Lslichkeit. In
vielen Fllen sind die Polypeptidketten durch Disulfidbrcken (Keratine), Amidgruppen der Seitenketten
(Fibrin) oder verschiedene Strukturen, die von Lysinresten ausgehen (Formel 10-10), quervernetzt. Die
typischen Skleroproteine (Kollagengruppe, Keratine) sind enzymatisch sehr schwer abbaubar. Die
meisten weichen in ihrer Aminosurezusammensetzung auch deutlich von der anderer Proteine ab. So
kann das Keratin der Haare bis zu 20 % Cystein (Keratin der Haare) enthalten, Kollagen ist besonders
310

311

11. Proteine

reich an Glycin (27 %), Prolin (15 %) und Hydroxyprolin (14 %), und das Fibroin der Seide besteht
hauptschlich aus Glycin, Alanin und Serin.

Nach der vorherrschenden Sekundrstruktur bzw. ihren rntgenographischen Identittsperioden werden


die Skleroproteine in drei Gruppen eingeteilt:
Identittsperiode

Sekundrstruktur

Kollagen-Gruppe

0.28 - 0.29 nm

Tripelhelix

-Keratin, Myosin, Fibrinogen, Epidermitin

0.51 - 0.54 nm

-Helix, z.T. als Superhelix

-Keratin, Seiden-.Fibroin

0.65 - 0.70 nm

Faltblattstruktur

10.7.1 Kollagengruppe

Kollagen und das hnlich aufgebaute Elastin sind neben verschiedenen Proteoglykanen (vgl. Kap.

) die

Grundbausteine des tierischen Bindegewebes. Das faserartige Kollagen ist in Haut, Knochen, Knorpeln,
Sehnen und Bindegewebe enthalten und die im menschlichen und tierischen Organismus am hufigste
vorkommende Proteinklasse. Allen 17 bekannten Kollagentypen ist ein tripelhelicaler Aufbau
gemeinsam. Drei Polypeptidketten, von denen mindestens zwei identisch sind, bilden eine Tripelhelix in
Form eines starren Seils (Abb. 10-5). Die Lnge der Tripelhelix sowie Art und Lage nichthelicaler
Bereiche variieren zwischen den einzelnen Kollagentypen, hufig wiederkehrende Sequenzen sind -(GlyAS-Pro)n- und -(Gly-AS-4Hyp)n-.

Kollagen wird durch Erwrmen mit Wasser denaturiert und ist dann enzymatisch abbaubar. Lngeres
Kochen oder chemisch-thermische Verfahren bewirken die Bildung von Gelatine. Dies ist ein als
Nahrungsmittel ungeeignetes Protein, da die essentiellen Aminosuren fehlen. Gelatine bildet in Konzentrationen ber 0.4 % ein Gel, das durch die Ausbildung lokaler Tripelhelix-Strukturen [junction zones]
zustande kommt und beim Erwrmen in eine viskose Lsung bergeht. Gelatinehaltige Produkte kommen
als kalorienreduzierte Nahrungsmittel in den Handel und als Bindemittel in Lebensmittel. Gelatine
verleiht z.B. Gummibrchen den spezifischen Biss. Sie wird als geschmacksneutrales Hllmaterial fr
Pharmaka vewendet, in der Photographie diente Gelatine als Matrix fr lichtempfindliche Silbersalze.

11.7.2 Keratine

Die Keratine stellen bei den Wirbeltieren die Gerstsubstanz der Haare, Wolle, Hrner, Ngel und Federn
dar. Man unterscheidet Keratine vom - und -Typ, die des -Typs liegen vorwiegend als Helices, 311

312

11. Proteine

Keratine hingegen in Faltblattstrukturen vor. Beide Typen knnen ineinander bergehen. Das Dehnen des
Haares z.B. bewirkt einen bergang von -Keratin -Keratin). Zu den auch als harte Keratine
bezeichneten -Keratinen gehren vor allem die Keratine der Ngel, Federn und Schuppen.
Zu den -Keratinen gehrt das Keratin der Wolle. Die aus a-Helices gebildeten Fasern sind bis auf ihre
doppelte Lnge ausdehnbar und ungewhnlich elastisch, reissen aber relativ rasch. Mehrere -Helices des
Wollkeratins bilden eine Protofibrille. Aus (9+2) solcher Protofibrillen sind dann die Mikrofibrillen
zusammengesetzt, von denen wiederum viele eine Makrofibrille bilden (Abb. 10-24).

11.7.3 Fibrillre Proteine der Muskelzellen

Die Myofibrillen der Muskelzellen enthalten in Wasser unlsliche Proteine, die sich aufgrund
unterschiedlicher Lslichkeit in Salzlsungen in Myosin, Actin und Tropomyosin auftrennen lassen.

Myosin ist ein fibrillres Protein mit einem Molgewicht von ca. 500 kDa, das aus, zwei schweren (200
kDa) und vier leichten Polypeptidketten (ca. 20 kDa) besteht. Die schweren Ketten bilden eine Superhelix
in Form eines langen -helikalen Stabes und zwei kugelfrmige Kpfe, an die jeweils zwei
unterschiedliche leichte Ketten gebunden sind. Es handelt sich um die lngsten bekannten
Poplypeptidketten, zusammen mit Actin bewirkt Myosin die Kontraktion der Muskeln.

Actin ist das zweite wichtige Muskelprotein und ein in der Natur weit verbreitetes Proteine. Es kommt
aber auch in fast allen eukaryotischen Nichtmuskelzellen vor, macht dort bis zu 10 % der lslichen
Proteine aus und ist an Bewegungsvorgngen und der Stabilisierung zellulrer Strukturen beteiligt.
Darber hinaus konnte Actin in pflanzlichen Zellen und in Prokaryoten nachgewiesen werden. Es besteht
aus einer Polypeptidkette mit 375 Aminosuren (MG 42 kDa). Die Aminosure-Sequenzen verschiedener
Actine stimmen weitgehend miteinander berein. Actin kann als monomeres G-Actin (globulres Actin)
und als filamentres F-Actin (fibrillres oder fdiges Actin in Gestalt einer langen Spirale) vorliegen.
Monomeres G-Actin (MG = 42.000 Da) polymerisiert zum F-Actin, welches einen Komplex mit dem
Myosin eingeht [Actomyosin]. Im Muskel bildet Actin die dnnen Filamente, die gemeinsam mit den
dicken Myosin-Filamenten die Muskelkontraktion bewirken.

Actomyosin, der Komplex aus Actin und Myosin, ist das eigentlich kontraktile Protein des Muskels. In
Gegenwart von ATP tritt eine Verkrzung der Actomyosin-Fden ein. Im entspannten Zustand ist die
Bildung des Actomyosins und damit der ATP-Verbrauch durch Regulatorproteine gehemmt, die sich bei

312

313

11. Proteine

quergestreifter [Troponin C, Calmodulin] und glatter Muskulatur [Caldesmon, Calmodulin] in


Zusammensetzung, Lokalisation und Wirkungsmechanismus unterscheiden.

11.7.4 Seiden-Fibroin

Die typischen Vertreter der Skleroproteine in der Faltblattstruktur sind die Seidenfibroine. Der kristalline
Teil des Seidenfibroins besteht aus sich wiederholenden Hexapeptideinheiten der Struktur -(Glu-Ser-GlyAla-Gly-Ala)n-, die eine antiparallele Faltblattstruktur ausbilden. Die Abstnde zwischen den Schichten
betragen 0.57 bzw. 0.35 nm, je nachdem, ob die Glycin- oder Alanin- bzw. Serinreste zusammenliegen
(Abb. 10-25). Durch die Faltblattstruktur sind die Seiden sehr reifest, aber nur wenig dehnbar. Einzelne
Seiden unterscheiden sich in der Gre ihrer kristallinen Bereiche. Bei der bekannten Seide des
Maulbeerseidenspinners [Bombyx mori] liegen etwa 60 % des Proteins in der Faltblattstruktur vor.
CH2R CH2R CH2R CH2R

H H H H H H H H

CH2R CH2R CH2R CH2R


CH2R CH2R CH2R CH2R

Abb. 10-25. Faltblattstruktur des Seidenfibroins.

11.7.5 Fibrinogen-Fibrin, Blutgerinnung und Fibrinolyse

Fibrinogen ist ein lsliches Protein der Molmasse 340.000 und wird aus drei Paaren nicht identischer
Polypeptidketten gebildet. Im Verlauf der Blutgerinnung wird das zu 3 - 4 % im Blutplasma enthaltene
Fibrinogen in das unlsliche polymere Proteingel Fibrin durch das Thrombin [Fibrinogenase, eine SerinProtease], umgewandelt. Der erste Schritt ist die Verkrzung zweier Polypeptidketten des Fibrinogens
unter Abspaltung der Fibrinopeptide A und B. Die Fibrinopeptide bestehen bei den niederen Wirbeltieren
aus 40 - 45 Aminosuren und bei den Sugern aus 13 - 21 Aminosuren.

313

314

Frisch

entstandenes

Fibrin

ist

praktisch

unlslich.

11. Proteine

Die

Fibrinmonomeren

werden

durch

Wasserstoffbindungen zu Fibrinfasern zusammengehalten, die einen hohen Grad an a-Helixstrukturen


enthalten.

Die letzte Phase der Blutgerinnung ist die Quervernetzung der Fibrinomonomeren durch den aktiven
Faktor XIII (= XIIIa). Der Faktor XIIIa ist eine Aminoacyltransferase, die die Bildung einer
Amidbindung aus der -Aminogruppe eines Lysinrestes und der Amidgruppe eines Glutaminrestes unter
Abspaltung von Ammoniak katalysiert.
NH CH CO

NH CH CO

(CH2)4

(CH2)4
NH2
NH2

NH

Faktor XIIIa
- NH3

CO
(CH2)4

(CH2)4

NH CH CO

NH CH CO

Bei der Fibrinolyse wird das Fibrin durch die Protease Plasmin enzymatisch zu Polypeptiden und
Aminosuren abgebaut.

10.8 Konjugierte Proteine - Proteide

Einige Proteine enthalten nicht-aminosureartige Bausteine, die fr die biologische Aktivitt dieser
Proteine essentiell sind. Bei diesen Strukturuntereinheiten, die kovalent oder nicht-kovalent gebunden
vorliegen, kann es sich um Phosphorsure, um Kohlenhydrate, ein komplex gebundenes Metallatom,
Nucleinsuren, Lipide oder verschiedene Chromophore handeln. Solche Proteine werden als konjugierte
Proteine oder Proteide bezeichnet (Tab. 11-9).

Tab. 11-9. Konjugierte Proteine oder Proteide


Gruppe

Nichtprotein-

Bindung

Bestandteil
Phosphoproteine Phosphorsure

kovalent an Hydroxy-, Carboxyl- Kap.


oder Imidazolreste

Metalloproteine

Metall

Ionenbeziehungen,

Kap.

Komplexbindung
Glycoproteine

Kohlenhydrate

N- oder O-glykosidisch

Kap.

Nucleoproteine

Nucleinsuren

Ionenbeziehungen

S.

314

315

Lipoproteine

Lipide

Chromoproteine verschiedene

11. Proteine

nicht-kovalent

Kap.

verschieden

Sehpigmente (S. ), Flavoproteine

Chromophore

(S.

), Hmoglobine (S.

),

Cytochrome (S. ), Carotinoide (S.


), Phycobiliproteine (S. )

11.8.1 Phosphoproteine

Zahlreiche Proteine, Glykoproteine als auch Lipoproteine enthalten kovalent gebundene Phosphorsure
oder Pyrophosphorsure. Es lassen sich drei Bindungstypen unterschieden,
- eine esterartige Bindung von Phosphorsure oder Pyrophosphorsure an Hydroxygruppen,
insbesondere des Serins,
- eine amidartige Bindung der Phosphorsure an die Imidazolreste des Histidins sowie
- die gemischte Anhydridbildung zwischen Phosphorsure und der Carboxylgruppen von
Aminodicarbonsuren.
O

O
N
O

OH

CH

CO

OH

CH2

CH2 OH
NH

NH

CH

CH2
CO

NH

CH

CO

Das wichtigste esterartig an Serin gebundene Phosphoprotein ist das Casein der Milch. Bei den Caseinen
(-, - und -Casein) handelt es sich eigentlich um Phosphoglykoproteine Die Bindungen sind relativ
leicht spaltbar, Serinester werden im Alkalischen unter -Eliminierung gespalten. Im Hhnereiwei
kommt vor allem Ovalbumin und Phosvitin, ebenfalls ein Phosphoglykoprotein vor. Es enthlt mehrere
(Ser-P)n-Sequenzen (n < 8).

11.8.2 Metalloproteine

Zahlreiche Proteine, darunter viele Enzyme (vgl. Kap. 12.

) enthalten komplexartig gebundene Metalle,

die fr die biologische Aktivitt essentiell sind (Tab. 11-10). Viele dieser Metalloproteine haben
ungewhnliche physikalische Eigenschaften (Elektronenspektren, magnetische Eigenschaften), die auf
auergewhnliche Bindungslngen und -winkel zurckgefhrt werden (vgl. Abb. 11-27). Die essentielle
Rolle der Metalle fr die biologische Aktivitt vieler Proteine kann u.a. auch auf einer Beeinflussung der
Sekundr- oder Tertir- bzw. Quartrstruktur der Proteine beruhen.
315

316

11. Proteine

Als Liganden der komplexbildenden Metalle wirken z.B. die Mercaptogruppe des Cysteins, der
Imidazolrest des Histidins oder Carboxyl- und Aminogruppen sowie nicht-proteinartige Komponenten
wie Porphinderivate (Kap.

) oder sog. "labiler" Schwefel. Ferredoxine sind Proteine mit einer geraden

Anzahl von Eisen und "labilen" Schwefelatomen (2, 4, 6 oder 8 Atome). Sie dienen in Pflanzen und
Bakterien als Elektronenbertrger, z.B. bei der Stickstoffixierung oder der Photosynthese (S.

) und

sind wahrscheinlich phylogenetisch sehr alte Strukturen. Die Ferredoxine haben ein niedriges RedoxPotential und geben ein charakteristisches EPR-Spektrum. Sie werden nach der Anzahl der Eisenatome
pro Cluster in 2-, 3-, 4-Eisen-Cluster-Proteine eingeteilt (vgl. Strukturen a, b und c). Die biologische
Aktivitt wird durch die Reduktion des Fe(III)- zu einem Fe(II)-Atom erklrt. Bei den Fe4S4-Ferredoxinen
liegt die (-Cys-S-Fe)4S4-Gruppe cubanartig vor (c).
R

S
Fe

S
Fe

Fe
S

S S

S S

S
S

Fe
R
a 2-Eisen-Cluster

b 3-Eisen-Cluster

Fe

Fe

Fe

Fe
Fe SS

R S
c 4-Eisen-Cluster

10-19

Zu den elektronenbertragenden Metalloproteinen gehren die "blauen" Kupferproteine Azurine, darunter


das Plastocyanin (S.

), und die mikrobiellen Rubretoxine (Abb. 10-27). Eine besondere Bedeutung

haben Metalloproteine als Sauerstoffbertrger [Oxidoreduktasen, Kap. Enzyme], so z.B. die


verschiedenen Fe-, Mo- und Mn-haltigen Enzyme (Tab. 10-10). Andere Metalloproteine dienen als
Speicher- und Transportformen fr bestimmte Metalle, wie das Ferritin und Hmosiderin als
Speicherformen fr Eisen.

Tab. 10-10. Metalloproteine und ihre biologische Funktion


Metall

Metalloprotein

Funktion

Fe

Hm-Proteine:

O2-Transport

Hmoglobin, Myoglobin
Peroxidasen, Cytochrome, Cytochrom-Oxidase

Enzyme

Nicht-Hm-Proteine:

O2-Transport bei Invertebraten

Hmerythrin
Ferretin, Hmosiderin

Fe-Speicher

Transferrin

Fe-Transport

Ferrodoxin

Elektronenbertrger

Nitrogenase

Enzym (N2-Fixierung)

316

317
Cu

Zn

11. Proteine

Hmocyanin, Cytocyanin

O2-Transport bei Invertebraten

Caeruloplasmin, Hepatocuprein

Cu-Transprot und -Speicher

Superoxid-Dismutase (Cuprein)

Enzym

Plastocyanin

Elektronenbertrger in Pflanzen

Azurin

Elektronenbertrger in Bakterien

Tyrosinase

Enzym (Phenoloxidase)

Lysin-Oxidase

Enzym (fhrt zu Quervernetzung von Kollagen)

Carboxypeptidase, Thermolysin, Carboanhydrase,

Enzyme

Alkohol-Dehydrogenase, PhosphoglyceraldehydDehydrogenase,
Co

Vitamin B12-enthaltende Enzyme (Kap. )

Enzym

-Hydroxybutyrat-Dehydrogenase
Mo

Nitrogenase (auch Fe), Nitrat-Reduktase, Xanthin-

Enzym

Oxidase, Aldehyd-Oxidase
Mn

Enzym

Photosyntheseenzym, Malat-Enzym, IsocitratDehydrogenase


Concanavalin A (auch Ca)

Lectin

Fr Organismen ist es lebenswichtig, toxische Schwermetallionen oder Schwermetallberschuss


abzufhren. Pflanzen lsen diese Aufgabe u.a., indem sie sog. Phytochelatine bilden, spezielle Peptide,
die zahlreiche Metallionen komplexieren knnen. Phytochelatine enthalten 2- bis 11mal die -Glutamylcysteinyl-Sequenz der Stammverbindung Glutathion.
a)
SH
H
N

O
H
H N

COOH

N
H
COOH

b)

Cd
O

S
n

Cd
S

Cd

Cd
S

n = 2 -22
a) Cadmiumkomplex von Phytochelatin-2 undb) Phytochelatin-3
= Carboxylatgruppen

Chromoproteine besitzen farbige Strukturelemente, dazu gehren vor allem Hmoglobin (

) und

Myoglobin ( ).

11.7.6 Lipoproteine

Lipid-Protein-Wechselwirkungen spielen eine besondere Rolle in den Lipoproteinen der biologischen


Membranen (Kap. 2. ). Membrangebundene Enzyme sind hufig nur bei Anwesenheit von Lipiden
317

318

11. Proteine

biologisch aktiv. Die durch Detergentien, Lipasen oder organischen Lsungsmitteln von den Lipiden
befreiten Enzyme zeigen oft keine Aktivitt mehr, knnen aber durch Zugabe von Lipiden wieder
aktiviert werden. Die Membranlipide sind also gewissermaen essentielle Cofaktoren dieser Enzyme.
Wahrscheinlich bewirken Lipide die Ausbildung einer bestimmten, fr die biologische Aktivitt
erforderliche rumliche Struktur dieser Proteine. Fr eine bestimmte membrangebundene (Ca2+-Mg2+)ATPase wurde z.B. eine Abhngigkeit der biologischen Aktivitt vom Phasenbergang der gebundenen
Phospholipide festgestellt.

Ein wichtiger Risikofaktor zur Entstehung der Artherosklerose ist die Hyperlipidmie, eine zu hohe
Lipidenkonzentration (Triacylglycerine und Cholesterin) im Blut. Diese Lipide sind im Blutplasma an
bestimmte Proteine gebunden. Die Plasma-Lipoproteine dienen zum Transport der Lipide und sind trotz
des hohen Lipidgehalts in Wasser lslich. Es wird angenommen, dass die weniger polaren Lipide
(Triacylglycerine, Cholesterinester) einen inneren, hydrophoben Bereich mit Teilen des Proteins bilden,
whrend die hydrophileren Bereiche des Proteins oder hydrophile Gruppierungen der Lipide an der
Oberflche angeordnet sind. Die menschlichen Plasma-Lipoproteine sind in 5 Hauptklassen aufgeteilt, in
Chylomicron, very-low-density-Lipoproteine, low-density-Lipoproteine, high-density-Lipoproteine und
very-high-density-Lipoproteine. Jede dieser Klassen stellt ein heterogenes, polydisperses System dar.

11.7.7 Glykoproteine - Nucleoproteine - Protamine

Glykoproteine enthalten Kohlenhydratbestandteile, die Hypophysenvorderlappenhormone Thyrotropin


und Gonadotropin. Die postsynaptische Organisation der Muskelzelle hinsichtlich Dichte und
Zusammensetzung der Acetylcholinrezeptoren wird durch das 200 kDa groe Glykoprotein Argin
organisiert, das das Motoneuron ausschttet, nachdem es mit der Muskelzelle Kontakt aufgenommen hat.

Nucleoproteine enthalten Nucleinsuren und sind Zellmembranbausteine. Proteinbestandteile sind die


Histone.

Protamine finden sich u.a. im Sperma verschiedener Fischarten, sind stark basisch, da sie bis zu 90 %
Arginin enthalten. Sie sind einfache Proteine des Zellkerns und mit Desoxyribonucleinsuren assoziiert.

11.8 Peptidsynthesen

11.8.2 Allgemeines

318

319

11. Proteine

Synthetische Peptide sind wichtige Werkzeuge der Biowissenschaften und besitzen Bedeutung in der
Immunologie. Struktur-.Aktivittsbeziehungen und die chemische Modifizierung (10.9.11) biologisch
aktiver Peptide stellen weitere Anwendungsgebiete dar.

Die Totalsynthese von Peptiden ist die wiederholte Verknpfung der a-Aminogruppe einer Aminosure
mit der Carboxylfunktion einer anderen Aminosure unter Bildung der Peptidbindung. Partialsynthese
bedeutet die synthetische Vernderung und chemische Modifizierung bereits bestehender Proteine. Bei
der Protein-Semisynthese (10.9.9) geht man von natrlichen Proteinen bzw. Proteinfragmenten aus, die
durch Kettenverlngerung oder Verknpfung zu neuen Proteinen umgewandelt werden. Durch
Kombinatorische Synthese (10.9.8) lassen sich ganze Bibliotheken von Peptiden synthetisieren und fr
Wirkstoff-Screenings einsetzen. Getrennt von diesen chemischen Methoden sind Synthesen anzusehen,
die auf Prinzipien der Molekularbiologie beruhen.

Die Bildung der Amidfunktion erfolgt durch den nucleophilen Angriff der Aminogruppe einer
Aminosure mit dem C-Atom der Carboxylgruppe einer zweiten Aminosure. Erschwerend ist, dass
jeweils zwei Amino- bzw. Carboxylgruppen in den Reaktanden vorliegen, von denen nur je eine an der
Reaktion beteiligt sein darf. Ausserdem muss die Carboxylgruppe fr den Angriff eines Nucleophils
durch geeignete Substituenten aktiviert werden. Dies fhrte zur Entwicklung spezieller Schutzgruppenund Verknpfungstechniken fr die Peptidsynthese.
H R2

H R1
X

N C CO

H N C COO

X
Y

H R2

N C C

N C COO

Schutzgruppe fr die Aminogruppe

Aktivierende Gruppe
Z

H R1 O

Peptidbindung

Schutzgruppe fr die Carboxylgruppe

Im allgemeinen erfolgt die Synthese eines Peptids durch a) Einfhrung entsprechender Schutzgruppen in
die Aminosurebausteine, b) Aktivierung der Carboxylatgruppe, c) Kupplungsreaktion sowie d)
abschlieende Abspaltung der Schutzgruppen.

11.8.3 Schutzgruppen

Um die Reihenfolge der Verknpfung der Aminosuren eindeutig zu determinieren, mssen alle unbeteiligten funktionellen Substituenten durch geeignete Schutzgruppen blockiert werden. Diese Schutzgruppen mssen

319

320

11. Proteine

sowohl unter den Bedingungen der Entstehung der Amidbindung als auch der Aktivierung der
Carboxylgruppe erhalten bleiben,

leicht und selektiv wieder abgespalten werden knnen und

die Racemisierung der Aminosuren sowohl bei der Bildung als auch unter den Bedingungen der
Peptidsynthese weitgehendst ausschlieen.

Das lteste Verfahren von E. FISCHER [Nobelpreis 1902] erlaubte die schrittweise Kondensation von
Aminosuren durch Kupplung von Aminosurehalogeniden mit Aminosureestern zu einem Octapeptid.

NH3 C COCl + NH2 C COOR

Br

NH3 C CO NH C COOR

C COBr + NH2 C COOH

Br

C CO NH C COOH

NH2 C CO NH C COOH

(oder Peptide)

Als "Schutzgruppe" wurde die Aminofunktion der ersten Aminosure protoniert und damit gegen einen
elektrophilen Angriff geschtzt ist.

11.9.2.1 Schutzgruppen fr die Aminofunktion

Die von BERGMANN und ZERVAS 1932 eingefhrte Benzyloxycarbonylgruppe (frher Carbobenzoxygruppe, Cbz, CbO oder Z) ist die gebruchlichste Schutzgruppe fr die Aminofunktion. Ihre Anbindung
erfolgt durch Umsetzen der Aminkomponente mit Benzylchloroformiat oder durch Umsetzung des
Natriumsalzes der Aminosure mit Cbz-N-Hydroxysuccinimid.
O
CH2 O C Cl

O
O
CH2 O C O N
O
Cbz-N-Hydroxysuccinimid

NH2 C CO Y

NH2 C COONa

O
CH2 O C NH C CO Y

O
CH2 O C NH C COOH

Cbz-geschtzte Aminosure

Die Benzyloxycarbonylgruppe kann als Urethan relativ leicht wieder abgespalten werden. Unter
alkalischen Bedingungen, wie sie z.B. fr die Entfernung von Ester-Carboxylschutzgruppen erforderlich
sind, sind die Urethane stabil. Besondere Bedeutung hat die surekatalysierte Hydrolyse mit HBr oder die
Entschtzung durch katalytische Hydrierung mit Pd/H2. Bei Cystein wird, um eine KatalysatorVergiftung zu vermeiden, Na/NH3 oder Triethylsilan Et3SiH/PdCl2 als Reduktionsmittel eingesetzt.

320

321

11. Proteine

O
CH2 O C

NH R

HBr / CH3COOH

H2 / Pd
- H2N-R

- H2N-R

CH3

CH2 Br

CO2

CO2

Noch leichter als die Benzyloxycarbonylgruppe ist die tert-Butyloxycarbonylgruppe [Boc oder tBoc]
durch surekatalysierte Hydrolyse abspaltbar. Zu ihrer Anbringung wird die Aminogruppe einer
Aminosure mit t-Butyloxycarbonylazid umgesetzt, bzw. der entsprechende Pentachlorphenylester, das
Fluorid oder der N-Hydroxysuccinimidester oder die Natriumsalze der Aminosuren mit 1-Boc-4dimethylaminopyridiniumchlorid. Die Boc-Gruppe kann bereits unter Bedingungen abgespalten werden,
unter denen die Cbz-Gruppe noch erhalten bleibt. Auf diese Weise kann z.B. Cbz an der permanent zu
schtzenden e-Aminogruppe des Lysins verbleiben, whrend Boc als temporre Schutzgruppe nach
jedem Reaktionsschritt von den Aminogruppen entfernt werden kann. Beide Alkyloxycarbonylgruppen
haben den Vorteil, dass praktisch keine Racemisierung auftritt.
O
O
O C N3

R1

H2N

COOR
O

- HN3

+
R1

COOR2

Weitere Urethanschutzgruppen sind die Cyan-tert-butyloxycarbonyl- [CyOC] und die 3,5-Dimethoxybenzyloxycarbonyl-Gruppe [DIMOZ], die sich bei Bestrahlung mit UV-Licht abspalten lt. Eine
hnliche photolabile Schutzgruppe wre die Nitroveratryloxycarbonyl-Gruppe [NVOC]. Ein NAcylderivat stellt die von WEYGAND [1952] eingefhrte Trifluoracetylgruppe [Tfac] dar, die sich infolge
des starken -I-Effektes der Fluoratome unter sehr schonenden Bedingungen auch im Alkalischen
abspalten lt, ebenso der Phthaloylrest [Phth], der durch Umsetzen mit N-Ethoxycarbonylphthalimid
entsteht. Die Schutzgruppe kann durch Hydrazinolyse in Chloressigsure entfernt werden. Durch
schwache Suren wie z.B. Trifluoressigsure lassen sich Biphenylisopropyloxycarbonyl- [Bpoc] und die
Dimethoxydimethylbenzyloxycarbonylgruppe
methyloxycarbonylgruppe

[Fmoc]

[Ddz],

abspalten.

Die

durch

schwache

Basen

Lslichkeitseigenschaften

die
der

9-Fluorenyl3-(3-Pyridyl)-

allyloxycarbonylgruppe [PALOC] erlauben es, Peptidverknpfungen sowohl in organischen Medien als


auch in Wasser durchzufhren. Mit Zn und Eisessig lt sich der Trichlorethoxycarbonylrest [TClOC]
ablsen. Die p-Toluolsulfonylgruppe [Tosylgruppe, Tos] ist leicht durch Umsetzen der Aminkomponente
mit p-Toluolsulfonsurechlorid einzufhren, sie lt sich allerdings schwer wieder entfernen (Natrium in
flssigem Ammoniak, DU VIGNEAUD, 1937) und dient hchstens zum Schutz der -Aminogruppe des
Lysins. Der 2-Nitrophenylsulfenyl-Rest [NPS] kann - neben der 2,4-Dinitrophenylsulfenyl-Gruppe
321

322

11. Proteine

[DNPS] - mit den Spaltreagenzien Thiophenol, Thioglykolsure und Mercaptoethanol selektiv


abgespalten werden. Die 4-Methoxy-2,3,6-trimethylbenzolsulfonyl- [Mtr] und die 2,2,5,7,8-Pentamethylchroman-6-sulfonylgruppe [Pmc] dient vorwiegend zum Schutz von Arginin (Tab. 10-11 gibt die
chemische Struktur der Amino-Schutzgruppe, das eingesetzte Reagenz und die Spaltbedingungen).

OCH3

SO2

SO2

Mtr

Pmc

N-Carboxyaminosureanhydride [Oxazolidindione, LEUCHSsche Anhydride] entstehen aus den Surechloriden der N-Alkoxycarbonylaminosuren bzw. bei der Umsetzung von Aminosuren mit Phosgen.
Sie besitzen sowohl eine geschtzte Aminogruppe als auch eine aktivierte Carboxylgruppe. N-Carbonsureanhydride wurden von LEUCHS bereits zur Synthese von Polyaminosuren eingefhrt und von
HIRSCHMANN in grerem Umfang zur Synthese der Fragmente der Ribonuclease eingesetzt [1967].
O
O

R CH
Cl

HN

- Ph-CH2-Cl

HN

+ COCl2
- 2 HCl

C O CH2 Ph

R CH
NH2

OH

11.9.2.2 Schutzgruppen fr die Carboxylfunktion

Die Hauptaufgabe dieser Schutzgruppen besteht eigentlichen darin, durch Substitution die
Ammoniumsalzbildung an der Carboxylgruppe durch die zweite Aminosure zu verhindern. Als
einfachste "Schutzgruppe" kann daher schon die Bildung des Carboxylatanions angesehen werden.

Als Sureschutzgruppen kommen nur Substituenten in Frage, die nicht zu einer Aktivierung der
Carboxylgruppe fhren und gleichzeitig auch wieder leicht abgespalten werden knnen. Praktische
Bedeutung haben daher nur verschiedene Ester wie z.B. t-Butylester, Benzylester und andere. Die tertButylgruppe wird durch sauer katalysierte Hydrolyse, die Benzylgruppe durch katalytische Hydrierung
abgespalten. 4-Nitrobenzylester bieten den Vorteil leichter Kristallisierbarkeit. Auch 4-Methoxybenzylester finden in der Peptidchemie Anwendung.
H

CH2

R C COOH +
NH2

H O
R C C O C(CH3)3

H3C

CH3

H O
H2O/H

H
NH2

R C C OH
NH2 + (CH ) COH
3 3

322

323

11. Proteine

Tab. 11-11. Schutzgruppen fr die Aminofunktion


Name

Abk.

Struktur

Abspaltung

O
Benzyloxycarbonyl,
Carbobenzoxy

Cbz, Z, CbO

t-Butyloxycarbonyl

Cbz, Z, CbO

Dimethoxybenzyloxycarbonyl

DIMOZ

CH2 O

NH

Katalytische Hydrierung,
HF, HBr/Eisessig, Na/NH3 fl.

O
(CH3)3C O
CH 3O

CF3COOH/CHCl3,
HBr/AcOH, HF/H2O

NH
O

CH2 O

UV-Licht/H2O
NH

CH 3O
O

NC
Cyan-t-butyloxy
carbonyl

CyOC

Trifluoracetyl

Tfac, TFA

NH

K2CO3/H2O,
Triethylamin

NH

NH3 /H2O, HCl/H2O,


NaBH 4/CH3OH

O
O

O
F3 C

O
O

Phthaloyl

2-Biphenyl-4-isopropoxycarbonyl

Phth

N2H 4/H2O, N2H4/ClCH2COOH,


HBr/AcOH

N
O
CH3 O
C O C NH
CH3

Bpoc

milde surekatalysierte
Hydrolyse, ClCH2COOH/CH2Cl2

CH3O
3,5-Dimethoxyphenylisopropoxycarbonyl

CH3 O
C O C NH
CH3

Ddz

milde surekatalysierte
Hydrolyse

CH3O
O
H2C O C NH

Fluorenyl-9-methyloxycarbonyl

Fmoc, FMOC

3-(3-Pyridiyl)allyloxycarbonyl

PALOC

Trichlorethoxycarbonyl

TClOC

N
O
Cl3C CH2 O C NH

p-Toluolsulfonyl

Tos

H 3C

O
C
O

NH

O
S NH
O

milde alkalische
Hydrolyse,
fl. NH 3, Ethanolamin,
Morpholin
Pd(0)-katalysierte Allylbertragung auf
Nucleophile
Zn/HOAc, Zn/CH3OH
Na/fl. NH3

NO2
2-Nitrophenylsulfenyl

NPS

2,4-Dinitrophenylsulfenyl

DNPS

S NH
NO2
O2N

S NH

HCl/C2H5OH, Raney Nickel


Thiophenyl,
HSCH2COOH
HSCH2CH2COOH

Unter den Bedingungen der Peptidsynthese drfen die Carboxyschutzgruppen nicht zu einer Acylierung
fhren, da es sonst zu unerwnschten Nebenreaktionen (Selbstkondensation) kommt. Bei der backing-offMethode [10.9.4] werden Carboxyschutzgruppen eingesetzt, die unter den Bedingungen der Kupplungsreaktion (z.B. mittels der Methode der gemischten Anhydride) nicht acylierend wirken, aber unter
anderen Bedingungen unmittelbar oder nach chemischer Umwandlung mit Aminogruppen reagieren
knnen. So lt sich z.B. ein Cbz- oder Boc-geschtzter Hydrazidrest nach Abspaltung der Schutzgruppe
in einen sehr reaktiven Azidrest umwandeln.

323

324
X

(AS)n CO NH NH Cbz (Boc)

11. Proteine

(AS)n CO NH NH2

(AS)n CO N3

11.9.2.3 Schutz funktioneller Gruppen der Seitenketten

Diese Schutzgruppen sollen meist einen permanenten Schutz whrend der gesamten Peptidsynthese
gewhren. Die stark basische Guanidingruppe des Arginins lt sich bereits durch Protonierung schtzen.
Der basische Charakter der Gruppe kann durch berfhrung in die Nitroguanidinogruppe reduziert
werden, die Abspaltung erfolgt hydrogenolytisch, durch Zn/H+ oder durch elektrolytische Reduktion.
N

NH
HN

C
NH

oder

HN

NO2

C
NH2

NO2

Von besonderer Bedeutung ist der Schutz der stark nucleophilen und leicht zu oxidierenden Mercaptogruppe des Cysteins. Schutzgruppe der Wahl ist die Benzylthiogruppe [DE VIGNEAUD, 1930], die durch
Natrium in flssigem Ammoniak abgespalten werden kann. Diese drastische Methode fhrt jedoch auch
zu teilweiser Aufspaltung der Peptidbindungen. Insbesondere durch die Probleme, die durch die Synthese
polycyclischer heterodeter Peptide (Insulinsynthese, Abb. ) auftraten, wurden ber 40 Schutzgruppen fr
die Mercaptogruppe in die Peptidsynthese eingefhrt, so die Trityl-, Benzhydryl-, Benzoyl- oder
Acetamidomethylgruppe -S-CH2-NH-CO-CH3. Die Tritylgruppe lt sich mit H+/Hg2+/I2 wieder

NH2

NH2

HOOC CH

CH2 SH

abspalten.

Die

Cl

gebruchliche

HOOC CH

CH2 S

2,2-Diethoxycarbonylethylgruppe

[DCE]

wird

ber

den

Methylenmalonsurediethylester eingefhrt und lt sich mit verdnntem Alkali wieder abspalten.


Weitere Schutzgruppen sind die 1-Phenylcyclohexyl- [PCH] und die Ethylmercaptogruppe (SEt).

Die Methylthiogruppe des Methionins wird mit H2O2 zum Sulfoxid oxidiert und zur Wiederherstellung
letzteres mit Thioessigsure reduziert. Zum Schutz der -Aminogruppe des Lysins acyliert man mit 1Isopropyl-isobutylchloroformiat und spaltet den entstandenen Kohlensureester wieder mit HF/Anisol.
Die zweite Carboxylgruppe von Asparaginsure wird zweckmigerweise als t-Butylester geschtzt,
Serin wird blicherweise mit Benzylbromid zum Benzylether umgesetzt.

Zur Blockierung der Imidazolgruppe und der Iminogruppe des Histidins werden neben dem Benzylrest
die

2,2,2-Trifluor-1-benzyloxycarbonylaminoethyl-

[Z-TFA]

und

die

2,2,2-Trifluor-1-tert324

325

11. Proteine

butyloxycarbonylaminoethylgruppe [BOC-TFA] verwendet. Die Amidfunktion des Asparagins und


Glutamins kann durch die 2,4-Dimethoxybenzyl- [DMB] und die 2,4,6-Trimethoxybenzylgruppe [TMB]
vor unerwnschten Reaktionen bewahrt werden.

10.9.3 Aktivierung der Carboxylgruppe, Knpfung der Peptidbindung

Bei der Peptidverknpfung kommt es hufig durch die als Zwischenstufen auftretenden N-Acylaminosuren zur Azlactonbildung und damit zur Racemisierung. Im Azlacton [Oxazolon] ist das -H-Atom
acid, durch Deprotonierung entsteht ein planares aromatisches 6-System, das bei Reprotonierung zu
racemischen Produkten fhrt.
H

- H

- HX
N

R
H

+ H
N

R1

R1

R1

R1

- H

+ H

Unter den Methoden, die eine racemisierungsarme Aktivierung der Carboxylgruppe und Knpfung der
Peptidbindung ermglichen, hat sich besonders der Einsatz von Aziden, Imidazolen, aktivierten Estern,
gemischten Anhydriden und die Carbodiimid-Methode bewhrt.

10.9.3.1 Azid-Technik

Die Azid-Technik [CURTIUS, 1902] ist wohl die lteste Methode einer racemisierungsarmen Peptidsynthese. Carbonylazide zeigen eine geringe Tendenz zur Racemisierung und sind leicht ber die
Hydrazide und Reaktion mit salpetriger Sure erhltlich. Da mit wachsender Kettenlnge des Peptids die
Umsetzungsgeschwindigkeit des Esters mit dem Hydrazin immer geringer wird, wird in solchen Fllen
oft mit dem backing-off-Verfahren [10.9.2.2] gearbeitet.
R

NH2 NH2
HN

HONO
HN

OCH3

NH

HN

NH2

N3

HNH
Knpfung der neuen Peptidbindung
CH

Nachteilig ist, dass Sureazide thermisch nicht sehr stabil sind und zur CURTIUS-Umlagerung neigen.
Unter Abspaltung von N2 zum Nitren lagern sie sich leicht zu Isocyanaten um, die wiederum mit
Aminosuren reagieren.
O
R

O
N

C O

- N2

325

326

11. Proteine

11.9.3.2 Imidazol-Methode

Die Umsetzung einer N-geschtzten Aminosure mit N,N-Carbonyldiimidazol fhrt zu einem


Carbonsureimidazolid, das in seiner Reaktivitt den Surechloriden hnelt. Das Imidazolid regiert mit
einem Aminosureester zum Dipeptid.
O

O
O
- CO2

C
+

OH

- Imidazol
HN

Cbz

HN

N,N-Carbonyldiimidazol

Cbz
Imidazolid

NH2
O

H2
C

C
O

C
O

N
H

H2
C

OH

Pd, H2

N
H

HN

NH2

Cbz

L-Ala-L-Ala

11.9.3.3 Aktivierte Ester

Die Reaktivitt der Carbonylgruppe einer Estergruppierung lt sich durch elektronenziehende bzw.
leicht polarisierbare Gruppen in der Alkohol- bzw. Phenolkomponente des Esters erhhen. Solcherart
aktivierte Ester knnen durch Aminolyse leicht in die entsprechenden Sureamide berfhrt werden.
Diese Kupplungsmethode wurde mit den Thiophenylestern durch TH. WIELAND 1951 in die Peptidsynthese eingefhrt. Bedeutung in der Peptidsynthese haben neben S- und Se-Arylestern verschiedene OArylester (z.B. 4-Nitrophenyl- oder Pentachlorphenylester), O-Alkylester (Cyanomethylester) oder
Hydroxylaminderivate (N-Hydroxysuccinimidester) erlangt.

11.9.3.4 Gemischte Anhydride

Gemischte Anhydride aus geschtzten Aminosuren oder Peptiden und Kohlensurehalbestern lassen sich
durch Umsetzen von Aminosuren mit Chlorameisensureester darstellen. Der Angriff der Aminogruppe
einer zweiten, N-geschtzten Aminosure erfolgt an dem C-Atom des Anhydrids, das die geringste
Elektronendichte besitzt und sterisch am wenigsten gehindert ist. Der Vorteil dieser sowohl bei der
Peptidsynthese als auch bei der Modifizierung von Proteinen hufig angewandten Methode [WIELAND,
BOISSONNAS, VAUGHAN] ist die Bildung von leicht abtrennbaren Nebenprodukten (CO2 und Ethanol).
R1 O

R1
HN

COOH

Cl

P(OC2H5)2

HN

OEt
O

P
OEt

326

327

11. Proteine

hnlich reagiert ein gemischtes Anhydrid aus der entsprechenden Aminosure und Phosphorigsurediethylester.
R1
HN

O
+

COOH

Cl

NtBu3
HN

OC2H5

R1 O

C OEt

C O
H2N

R2

Als "intramolekulare" gemischte Anhydride sind die N-Carboxyaminosureanhydride

[NCA,

LEUCHSsche Anhydride] aufzufassen, die aus Aminosure und Phosgen dargestellt werden. Durch
Zugabe von NCA zur wssrigen Lsung eines Salzes einer Aminosure lsst sich durch aminolytische
Ringffnung und Decarboxylierung eine Kettenverlngerung um eine Aminosure-Einheit erreichen.
hnliche Bedeutung haben die S-analogen N-Thiocarboxyaminosureanhydride [Thiazolidin-dione-(2,5),
NTA] und die 2-Acetonyliden-oxazolidin-5-one.
R2
HN
R1
O
H2N

R2 O

CH COO

HN

HN

CH COO

R
O

HN
O

HC

R1

O NTA

HN
O

O Acetonylidenoxazolidinon

11.9.3.5 Carbodiimid-Methode

Bei der Carbodiimid-Methode [SHEENAN und HESS 1955] bildet sich aus Dicyclohexylcarbodiimid
[DCC, DCHCD] und einer N-Acylaminosure ein reaktionsfhiger O-Acylisoharnstoff. Der reagiert
entweder direkt mit einer zweiten Aminkomponente oder zunchst mit einem weiteren Molekl
Carbonsure unter Bildung eines symmetrischen Anhydrids, das dann mit einem Amin zum Amid
reagiert. Als Nebenprodukt wird der entsprechende Harnstoff gebildet, der sich oft schwer abtrennen lt.
Unerwnscht ist die Umlagerung des O-Acylisoharnstoffs zum Acylharnstoff, der nicht mehr acylierend
wirkt.

327

328

11. Proteine

O
1

R
O
O

R1 O

N
H

Boc

HN

HC

HN

H
N

O
O-Acylisoharnstoff

DCHCD

O
H
N

unerwnscht
C

N
O

O
R1

HC

Boc

NH

R1

C
O

HC

Boc

NH

Acylharnstoff

O
H
N

CH

Boc

NH

NH R

H
N

R1

CH

Boc

NH

O
2

Anhydrid

Harnstoff

Fr Umsetzungen in wssrigen Lsungsmitteln werden wasserlsliche Carbodiimide wie N-CyclohexylN'-[2-(N-methylmorpholino)ethyl]carbodiimid-p-toluolsulfonat

oder

N-Ethyl-N'-(3-dimethylamino-

propyl)carbodiimid-hydrochlorid verwendet.

R1

R1, R2 =

R2

Dicyclohexylcarbodiimid
H3C

R2 =

R =

H2C

H2C

N-Cyclohexyl-N'-[2-(N-methylmorpholino)N

Tos
ethyl]carbodiimid-p-toluolsulfonat

R1 =

C2 H 5

R2 =

N-Ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)H2C

H2C

H2C

NH(CH 3)2

Cl
carbodiimid hydrochlorid

11.9.3.6 Weitere Kupplungsreagenzien

Weitere Kupplungsreagenzien, die die Carboxyl-Komponente durch Bildung einer Zwischenverbindung


aktivieren, sind z.B. Ethoxyacetylen 1, die Imine Dimethylaminophenylacetylen 2 und Dimethylaminotert-butylacetylen 3, sowie Diphenyl-N-p-tolylketimin 4. Von WOODWARD et al. stammen die beiden
Isoxazoliumsalze 5 und 6, die sich in der Peptidchemie bewhrt haben.

328

329
HC

C O

11. Proteine

C2H5

SO3

O
C

N
N
O

4
N

C2H5

Auch Carbonyl-diimidazol 7, Thionyldiimidazol 8 und Carbonyl-di-1,2,4-triazol 9 eignen sich gut als


Kondensationsreagenzien.

N
N

11.9.3.7 O-Acylierte Hydroxylamine

Esterartige

Produkte

aminogeschtzter

Aminosuren

mit

N-Hydroxyphthalimid

10,

N-

Hydroxysuccinimid 11, N-Hydroxyglutaramid 12 und N-Hydroxypiperidin 13 werden mit Erfolg in der


Peptidsynthese zur Kupplung verwendet. Neueren Datums ist der Einsatz von N-Hydroxybenzotriazol 14,
3-Hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazin 15 oder 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol 16 als Additiva
gemeinsam mit Dicyclohexylcarboimid oder aktiven Estern zur Peptidkupplung.
O

OH

N
N OH

N OH

OH

OH

N
N

N
O
10

O
11

12

OH
13

14

N
OH

15

16

11.9.4 Taktik und Strategie

Unter der Taktik der Peptidsynthese versteht man die Auswahl der optimalen Schutzgruppen und
Kupplungsmethoden. Dabei dienen temporre Schutzgruppen zum vorbergehenden Schutz einer Amino- bzw. Carboxylgruppe und mssen nach jedem Kupplungsschritt wieder selektiv entfernt werden.
Daneben gibt es permanente Schutzgruppen, die funktionelle Gruppen whrend der ganzen
Peptidsynthese blockieren und erst am Ende entfernt werden. Dies mu unter Bedingungen mglich sein,
die eine Racemisierung oder Spaltung der Peptidbindung ausschlieen. So knnen z.B. surelabile
Gruppen als temporre Schutzgruppen fr die -Aminogruppe und surestabile Gruppen fr den
permanenten Schutz von -Aminogruppen eingesetzt werden. Bei der Orthogonaltechnik werden
Schutzgruppen eingesetzt, die selektiv unter jeweils anderen Bedingungen (z.B. durch milde

329

330

11. Proteine

surekatalysierte oder alkalische Hydrolyse, durch milde Reduktion oder photolytisch) abgespalten
werden knnen.

Unter den fr die Peptidsynthese entwickelten Stragien kann man zunchst zwischen einem stufenweisen
Aufbau der Peptidkette und einer Fragmentkondensation nach stufenweisem Aufbau dieser Fragmente
unterscheiden.
Stufenweise Synthese
A
A-B
A-B-C
A-B-C-D
A-B-C-D-E
A-B-C-D-E-F

Fragmentkondensation
A-B + C-D-E-F-G
oder
A-B-C + D-E-F-G
oder
A-B-C-D + E-F-G
.....

A-B-C-D-E-F-G

Oligopeptid

Die Synthese erfolgt dabei im Unterschied zur Biosynthese fast ausschlielich vom C-terminalen Ende
her. Die Synthese kann in homogener (konventionelle Synthese) oder in heterogener Phase
(Festphasensynthese, z.B. MERRIFIELD-Strategie) durchgefhrt werden. Eine bersicht ber die
wichtigsten Strategien gibt die Tab. 10.12. Die Abb. 10-27 zeigt in einer gebruchlichen schematischen
Darstellung a) eine stufenweise Synthese und b) eine Fragmentkondensation am Beispiel der Synthese
des Peptidhormons Oxytocin.
NH2

a)
H
Bzl

OEt
OEt
NH2

Bzl = Benzyl
Cbz = Benzyloxycarbonyl
Np= 4-NitrophenylBenzyl

NH2
Bzl

NH2
Bzl

NH2
Bzl

H
OBzl

Bzl

OBzl

Bzl

H
Bzl

NH2
NH2

Cbz

NH2

b)
Bzl

Cbz
Bzl

Cbz
Bzl

ONp
OMe H
ONp
NHNH 2H

Bzl
NHNH 2H
Bzl

NH2
NH2

Bzl

Cbz

NH2

Abb. 11-27. Schematische Darstellung a) einer stufenweisen Synthese (nach BODANSZKY und DU
VIGNEAUD) und b) einer Synthese durch Fragmentkondensation nach der Variante 3 + (3 + 3) (nach
BOISSONAS) des geschtzten acyclischen Oxytocin.

330

331

11. Proteine

Tab. 11-12. Wichtigste Strategien zur Synthese von Peptiden (nach WNSCH)

Strategie

Charakteristika

Vorteile

Nachteile

1. Konventionelle Synthese mit globaler Schutzgruppentechnik


1.1 BODANSZKYStufenweiser Aufbau Eindeutiger
Verlauf
der Sehr aufwendig, nicht automatiStrategie
Synthese, Mglichkeit der sierbar, durch Schutzgruppen VerReinigung nach jedem Schritt. ringerung der Lslichkeit mit steigender Peptidkette.
1.2 SCHWYZERFragmentwie 1.1
wie 1.1, gnstige Gesamtausbeute
WNSCH-Strategie Kondensation
2. Konventionelle Synthese mit Minimum an Schutzgruppen
FragmentBessere Lslichkeit der Frag- Nicht so nebenproduktfrei wie nach
2.1 HIRSCHMANNStrategie
kondensation
mente als nach 1., wie 1.1
1., Beschrnkung auf AzidMethode
3. Synthese unter Einsatz polymerer Trger
3.1 MERRIFIELDVerwendung
unls- Abtrennung des wachsenden Da Ausbeute < 100 % Bildung von
durch
Filtration, Fehl- und Rumpfsequenzen ohne
Technik
licher Trger (solid Peptids
Mglichkeit der Reinigung,
phase), stufenweiser dadurch automatisierbar
Probleme bei Spaltung vom Trger
Aufbau oder Fragment-kondensation
3.2 BAYERVerwendung
hoch- Im Unterschied zu 3.1 Umsetz- wie 3.1
Strategie
molekularer lslicher ung in homogener Phase,
Trger (liquid phase) Trennung durch Ultrafiltration
oder Kristallisation
4. Synthese unter Einsatz polymerer Reagenzien
KATCHALSKI-WIELAND-FRANKELPhysikalische Abtrennung des Grenzen
aufgrund
sterischer
Strategie
Peptids wie bei 3., Mglichkeit Hinderung
der Reinigung des Peptids wie
bei 1.1

11.9.4.1 Globale Schutzgruppentechnik

Bei der konventionellen Synthese nach der globalen Schutzgruppentechnik wird ein mglichst
umfassender Schutz [Maximalschutztaktik] angestrebt, um Nebenreaktionen an den funktionellen
Gruppen der Seitenketten einzuschrnken. Dabei treten mit steigender Kettenlnge der Peptide Probleme
aufgrund verringerter Lslichkeit und vermehrter Raumbeanspruchung auf. Aus diesem Grunde ist auch
die Gesamtausbeute nach der Fragmentkondensation hher als nach der stufenweisen Synthese. Die
Grenzen liegen beim stufenweisen Aufbau bei 20 - 30 Aminsuren und bei der Fragmentkondensation bei
40 - 50 Aminosuren. Bei der stufenweisen Synthese kommt erschwerend hinzu, dass die analytisch
erfabaren Unterschiede zwischen den einzelnen Peptidzwischenstufen mit steigender Kettenlnge immer
geringer werden. Die schrittweise Methode wird daher vor allem zur Synthese der fr die Fragment
kondensation erforderlichen Partialsequenzen herangezogen.

11.9.4.2 Minimum an Schutzgruppen


331

332

11. Proteine

HIRSCHMANN hat die Taktik des minimalen Schutzes der funktionellen Gruppen der Seitenketten
entwickelt, durch die die Lslichkeit der Fragmente erhht werden sollte. Es gelang nach dieser Methode
Ribonuclease S durch Fragmentkondensation (Abb. 10-28) zu synthetisieren.
Ala

Ala

Lys

Phe

Gln

His

Met

Asp

Ser

Ser

Thr

Ser

Ala

Ala

Ser

Ala
Ser
Thr
Glu

Gln

Thr

Asn

Cys

Tyr Gln Ser Tyr

Ser Thr Met Ser Ile


Ser

Lys
Gly

Asn

Lys

Cys

Thr

Asn

Asp

Tyr

Cys

Cys

Arg

Asn

Ala
Ala
Gln
Val
Asp

Val Cys Ser Gln Lys Asn Val

Gln
Glu

Ala

Cys

Glu

Val

Gly

Ala

Ile

Leu
Ser

Ile

Ser
Ser
Ala

His Lys Asn

Gln

Thr

Trh

Ala

Cys

Asn

Pro

Cys

Arg

Asp

Tyr

Lys

Met
Lys
Ser
Arg
Asn

Glu
His

Met

Thr

Gly

Val

Phe

Thr

Asp

Val

Pro

Lys

Lys

Thr

Leu

Abb. 11-28. Von HIRSCHMANN ausgewhlte Fragmente zur Synthese der Rinderpankreas-Ribonuclease S
(vgl. Abb. 10.30).

Die Synthese der Fragmente erfolgte weitgehend unter Einsatz der Aminosure-N-Carboxy-Anhydride
sowie der N-Hydroxysuccinimid-Ester. Die Verknpfung der Fragmente erfolgte nach der Azid-Methode.
Geschtzt wurden lediglich die -Aminogruppe des Lysins und die Mercaptogruppe des Cysteins. Der
sparsame Einsatz der Schutzgruppen und die Beschrnkung auf die Azid-Methode bieten allerdings die
Mglichkeit fr strende Nebenreaktionen.

Der Nachteil der konventionellen Methode besteht darin, dass nach jedem Syntheseschritt eine
aufwendige Abtrennung des Reaktionsprodukts von Ausgangs- und Nebenprodukten erfolgen mu und
sich die Synthese nicht automatisieren lt. Diese Probleme lassen sich umgehen, wenn der Aufbau des
Peptides an einem hochmolekularen unlslichen (10.9.4.2) oder lslichen (10.9.4.3) Trger vorgenommen
wird.

11.9.4.2 MERRIFIELD-Methode, Festphasensynthese

Die Festphasensynthese [solid phase method] wurde 1963 von MERRIFIELD [Nobelpreis 1984] in die
Peptidsynthese eingefhrt. Nach der MERRIFIELD-Technik wird zuerst die am Stickstoff geschtzte C332

333

11. Proteine

terminale Aminosure kovalent an einen unlslichen Trger gebunden. Nach Abspaltung der NSchutzgruppe wird schrittweise in heterogener Phase die nchste Aminosure gekuppelt. Die Kupplung
erfolgt gewhnlich mit Carbodiimid oder nach der Methode der aktivierten Ester. Nach jedem
Syntheseschritt wird das am Trger gebundene Peptidprodukt durch Filtrieren abgetrennt und gewaschen.
Zum Abschlu wird das Endprodukt durch Behandlung mit HBr in Trifluoressigsure vom Trger gelst.

Als klassischer Trger dient mit Divinylbenzol quervernetztes Polystyrol, zunehmend werden heute
Harze auf der Basis von Polyethylenglycol verwendet, die Reaktionsbedingungen erlauben, unter denen
Polystyrol nicht stabil ist. Das Harz wird chlormethyliert; die Bindung der Aminosure an den so
aktivierten Trger erfolgt durch lngeres Erhitzen mit der Acylaminosure in Gegenwart von
Triethylamin. Weitere Ankergruppen fr die Anbindung der ersten Aminosure an den Trger wurden
entwickelt, die vor allem ein vorzeitiges Ablsen des Peptids von Trger whrend der Abspaltung der
Schutzgruppen ausschlieen sollen.

Die einzelnen Reaktionsschritte sind


1. Anhngen der Aminosure am Harz
2. Ablsen der Schutzgruppe und Blockierung der NH2-Gruppe der nchsten Aminosure
3. Kondensation mittels Dicyclohexylcarbodiimid DCHCD
4. Neuerliche Entfernung der Schutzgruppe
5. Kondensieren der nchsten BOC-Aminosuren mit DCHCD
Der letzte Schritt ist das Ablsen des Peptids vom Harz.

MERRIFIELD hatte zuerst das Nonapeptid Bradykinin in 85 % Ausbeute und 27 Stunden synthetisiert, fr
die beiden Ketten des Insulins, die A-Kette (21 Aminosuren) und die B-Kette (30 Aminosuren) wurden
8 bzw. 11 Tage bentigt. 1969 gelang mit einem Syntheseautomaten innerhalb weniger Wochen in 18 %
Ausbeute die Totalsynthese des Enzyms Ribonuclease (124 Aminosuren und 369 chemische
Reaktionen).

Ein Vorteil dieser Methode basiert auf der Mglichkeit der automatischen Synthesefhrung, indem man
den Trger auf einem Filter vorlegt und die anzuknpfende Aminosure und die einzelnen Reagenzien
computergesteuert hinzufgt. Ein Nachteil liegt in der komplizierten Aufreinigung des synthetischen
Peptids. Bei nicht 100 %iger Umsetzung oder nicht vollstndigen Entschtzungs-Reaktionen kommt es
zur Bildung von Rumpf- und Fehlsequenzen. Die Gesamtausbeute hngt stark von der Einzelausbeute
nach jedem Reaktionsschritt ab, bei langen Peptidketten liefert die Festphasensynthese infolge
Fehlsequenzen keine sehr sauberen Produkte. Sie wird daher meist zur Synthese von Oligopeptiden
333

334

11. Proteine

eingesetzt, fr die nicht zu hohe Anforderungen an die Reinheit gestellt werden. Mit modernen
Peptidsynthesizern gelingt bei Kupplungsraten von 99 % und mehr pro Synthesestufe eine akzeptable
Verknpfung von bis zu 50 Aminosuren.

11.9.4.3 Flssigphasensynthese, Liquid-Phase-Methode

Im Unterschied zur Festphasen-Synthese werden bei der Flssigphasensynthese [liquid phase method]
lsliche hoch molekulare Trger eingesetzt [SEMJAKIN, BAYER]. Meist wurde mit Polyethylenglycolen
als Trger gearbeitet, an deren endstndigen Hydroxygruppen die Carboxylgruppe der C-terminalen
Aminosure gebunden wird. Die restlichen Hydroxygruppen des Polymers knnen blockiert werden. Zur
Kupplung wird meist Dicyclohexylcarbodiimid eingesetzt, die Entfernung berschssiger Komponenten
erfolgt durch Ultrafiltration oder Kristallisation des Polymer-Peptidesters. Anstelle der polymeren Trger
fr das aufzubauende Peptid wurden in die Peptidsynthese auch unlsliche polymere Reagenzien in Form
von Polymer-Estern oder Polymer-Carbodiimiden eingefhrt.
H2N

CH

Polymer

Polymer-Ester, Y = O, S

Polymer

Polymer-Carbodiimid

Ala Ala Lys Phe Gln His Met AspSer Ser Thr Ser Ala
Ala
Ala
Ser
Thr Asn Cys Tyr Gln Ser Tyr Ser Thr Met
Thr
Gln
Ser
Ser
Gly
Gly Asn Lys Cys
Ile
Ser
Ala
Lys
Thr Asn
Val
Asp Tyr
Val Cys Ser Gln Lys Asn
Ala
Cys Cys
Gln
Ala Cys Glu Gly
Arg Asn
Val
Val
Glu Gln
Asp
Ile
Thr Met
Ala
His
Gly Met
Leu Lys
Lys
Ser
Asn
Ser
Ser
Ala Gln Thr Thr Ala Cys Asn Pro Tyr Lys
Ser
Glu
Arg
His
Val Phe Thr Val Pro Lys Cys Arg Asp Lys Thr Leu Asn

Abb. 11-30. Struktur der Rinderpankreas-Ribonuclease.

Die reduktive Spaltung dieser 4 Disulfidbrcken unter vlliger Denaturierung des Enzyms und die
anschlieende Oxidation ergaben ein regenieriertes Produkt mit voller Aktivitt. Das bedeutet, dass von
den theoretisch mglichen 105 Paarungsmglichkeiten der 8 Mercaptogruppen zu den 4 Disulfidbrcken
nur eine realisiert wird.
334

335

11. Proteine

Im Unterschied zur Ribonuclease besteht Insulin aus zwei Ketten, die ber zwei Disulfidbrcken
miteinander verbunden sind. Die A-Kette enthlt zustzlich noch eine weitere Disulfidbrcke. In diesem
Falle erfolgt die Oxidation der 6 Mercaptogruppen statistisch. Neben Insulinisomeren mit falscher
Stellung der Disulfidbrcken entstehen intramolekulare Disulfide der A sowie der B-Kette (Abb. 10-30).
7

A
6

11

20

A
6

19

20

A
7

19

19

11

20

20

19

19

7
11

19

11

A
7

19

20

11

20
7

19

20

19

20

11
6

11

19

20

19

11
6

11

20

6
7

11

20
7

11
7

11

7
6

11

20
11

20

20
19

11

20
7

19

Abb. 11-30. Produkte der Oxidation einer quimolaren Mischung der A- und B-Kette des Insulins (nach
KLOSTERMEYER und HUMBEL). Das eingerahmte Produkt stellt das natrliche Insulin dar.

10.9.6 Synthese von Polyaminosuren und sequentiellen Polypeptiden

Fr viele Untersuchungen sind einfacher zu synthetisierende homo- oder copolymere Aminosuren


erforderlich, die z.B. als Modellantigene oder Modellverbindungen fr physikalisch-chemische Studien
dienen.
(AS)n (AS1n, AS2n) (AS1-AS2-AS3)n homo- und copolymere Aminosuren
Die gebruchlichste Methode zur Darstellung von Homopolymeren ist die Polykondensation von NCarboxyaminosure-Anhydriden. Die Reaktion wird durch Alkohole oder Amine eingeleitet. Durch
Polykondensation verschiedener Aminosure-N-carbonsure-Anhydride entstehen Copolymere mit einer
statistischen Verteilung der Aminosuren. Allerdings hngt die Verteilung von der Reaktivitt der
eingesetzten Anhydride ab.
R
R
HN

CH

CO
HN

OC

CH

CO

n CO2

335

336

11. Proteine

Eine Polykondensation der freien Aminosuren durch Erhitzen fhrt zu proteinhnlichen Verbindungen
(Proteinoide). Erste Sequenzpolymere wurden bereits von E. FISCHER

durch Kondensation von

Tripeptid-alkylestern erhalten.

11.9.8 Kombinatorische Peptidsynthese

Eine der innovativsten Entwicklungen der letzten Jahre ist die Kombinatorische Synthese, die eine
drastische Verkrzung der Entwicklungszeiten fr neue Wirkstoffkanditaten darstellt. Gegenber dem
frheren beraus langsamen und kostenintensiven rationalen Planen, Synthetisieren und Austesten
einzelner Abkmmlinge von Leitstrukturen versucht man heute, eine groe Anzahl potentieller
Screeningsubstanzen gleichzeitig darzustellen und fr die Selektion der aktiven Komponenten als
Verbindungsbibliothek zur Verfgung zu stellen. Das Synthesekonzept sieht multiple Parallelsynthese
oder Kombinatorische Synthese vor und bedarf einer rumlichen Kompartimentierung und zeitlichen
Trennung der einzelnen Reaktionen, die durch mitsynthetisierte Codierung fr den spteren Bioassay
festgehalten bzw. bekannt sein mu. Kombinatorische Synthesen lassen sich auf Mikrotiterplatten
durchfhren und damit Bibliotheken mit 100 bis zu Tausenden von Verbindungen herstellen, whrend
Gemische an Trgern in Form von Polymerkgelchen oder polymeren Matrizenfeldern bis zu einer
Million Verbindungen umfassen knnen. Da in den Anfngen der kombinatorischen Synthese im
wesentlichen Festphasensynthesen eingesetzt wurden, ist verstndlicherweise gerade die Peptidsynthese
(neben der Polynucleotidsynthese) eine Domne der Kombinatorischen Chemie.

Anfang der 90er Jahre wurde ein Verfahren eingefhrt, bei dem der Trger nach jedem Reaktionsschritt
gemischt und fr die Folgeumsetzungen wieder auf die einzelnen Reaktionsgefe verteilt wird (Mix and
split-Verfahren, Abb. 12- ).

Die Parallelsynthese tausender Substanzen und die Durchfhrung verschiedenster Testverfahren auf
biologische Aktivitt erfordert die Enwicklung neuer Syntheseroboter, die die bertragung einzelner
Synthesevorgnge auf eine Vielzahl von Reaktionsrumen und eigenstndiger Syntheseschritte erlauben.

336

337

11. Proteine

Abbildung 11- . "Mix-and-split"-Verfahren zur Herstellung komplexer Gemische. Im Beispiel werden in 9


Umsetzungen (A-I) 27 Verbindungen in drei Produktgemischen von je neun Komponenten synthetisiert.

10.9.9 Proteinsemisynthese

Unter Proteinsemisynthese versteht man die enzymatische oder chemische Insertion oder Excision kleiner
Peptidfragmente in oder aus bereits vorliegendem Protein. Dadurch kann z.B. eine nderung des aktiven
337

338

11. Proteine

Zentrums eines Enzyms oder eines Enzyminhibitors ermglicht werden und zu Verbindungen mit neuen
und anderen biologischen Eigenschaften fhren.

10.9.10 Biotechnologische Verfahren zur Peptidsynthese - Proteindesign

Im Mittelpunkt des Interesses steht heute die gentechnologische Expression von menschlichem Protein
durch Bakterien wie z.B. Escherichia coli, durch Hefezellen oder anderen Mikroorganismen, in die ein
menschliches Genom eingeschleust wurde [Clonierung]. Seit mehreren Jahren wird menschliches Insulin
gentechnologisch aus E. coli hergestellt und ist damit billiger und unbegrenzt verfgbar im Vergleich zu
Schweine- oder Rinderinsulin. Auerdem bringt ein solcherart produzierter Wirkstoff weniger
Applikationsprobleme

als

tierischen

Ersatzprodukte.

Plasminogen-Aktivator

ist

ein

weiterer,

gentechnologisch hergestellter Eiweistoff und mglicherweise ein wichtiges Medikament gegen


Durchblutungsstrungen. Auch menschliches Interferon, ein Protein des Immunsystems, wird heute aus
E. coli oder Hefe produziert und kann Bedeutung als potentielles Medikament in der Behandlung von
Krebs- und Viruserkrankungen oder Erkrankungen des Immunsystems erlangen. Weitere Beispiele sind
Enzyme, Impfstoffe und andere ntzliche Proteine.

Das gezielte Verndern von krpereigenen Proteinen mit dem Ziel, mageschneiderte Pharmaproteine mit
verbesserten Eigenschaften gegenber den natrlichen Proteinen zu erzeugen, ist Aufgabe des
Proteindesign. Hufig haben krpereigene Proteine Eigenschaften wie geringe Lslichkeit oder Stabilitt,
die bei einem Pharmawirkstoff unerwnscht sind. Mit der Information aus der Genomsequenzierung und
der Strukturaufklrung von Proteinen sowie den Fortschritten der Computertechnologie zur Analyse und
Visualisierung von biologischer Information ist es nun mglich, die spteren Eigenschaften solcher
vernderter neuer Proteine vorherzusagen.

11.9.11 Chemische Modifizierung von Proteinen

Unter der chemischen Modifizierung versteht man Reaktionen bzw. Derivatisierung an den Seitenketten
der Aminosuren von Proteinen, durch die die physikochemischen Parameter und biologischen
Eigenschaften der Proteine verndert werden. Natrlich vorkommende chemisch modifizierte Proteine
entstehen z.B. durch Bindung von Cofaktoren an Proteine und liegen in verschiedenen konjugierten
Proteinen (Kap. 10.) vor. Durch den Einbau nichtnativer und ungewhnlicher Aminosuren knnen
Peptide mit vielfltigen biologischen Eigenschaften konstruiert werden.

338

339

11. Proteine

Reaktionen an basischen (Aminogruppen) oder sauren (Carboxylgruppen) Aminosureresten fhren zu


Vernderungen der Ladung des Molekls. Dies bedingt wiederum meist eine Verminderung der
Lslichkeit und die Beeinflussung der Konformation und Aggregationsneigung des Proteins. Solche
Ladungsvernderungen treten z.B. bei Acylierung der besonders reaktionsfhigen -Aminogruppe der
Lysinreste auf. Die entstehenden Amide sind im Unterschied zu den Aminen nicht mehr basisch. Diese
Reaktionen (Acylierungen, Alkylierungen) sind jedoch wenig spezifisch, mit den gleichen Reagenzien
reagieren meist auch OH- und SH-Gruppen (In Tab. 10-13 sind einige Beispiele fr die Umsetzung von
Rohproteinen angefhrt). Eine reversible Blockierung der -Aminogruppe des Lysins kann durch
Umsetzen mit Maleinsureanhydrid erfolgen.
O

H2N

pH > 5

COOH

pH < 4

CO

R
NH

Durch Umsetzen mit Bernsteinsureanhydrid lassen sich die basischen Aminogruppen in saure
Carboxylgruppen umwandeln.

- H
Protein NH3

Protein NH2

O
Protein NH CO

CH2 CH2 COOH

- H
Protein NH CO

CH2 CH2 COOH

Die kovalente Bindung von Verbindungen mit besonderen physikalischen Eigenschaften (z.B.
Fluoreszenz beim Dansylrest, Radioaktivitt bei bestimmten Iodisotopen, Messungen bei Resten mit
Radikalcharakter wie bei stabilen N-Oxiden) ermglicht den Einsatz besonderer physikalischer
Untersuchungsmethoden, die bei nicht-modifizierten Proteinen nicht anwendbar wren (Label-Technik,
S.

).

Eine nderung der biologischen Eigenschaften kann die Vernderung der Immunogenitt von
Pharmaproteinen darstellen. Bei Applikation eines nicht-krpereigenen Proteins wird dieses als
Fremdsubstanz (vgl. S.

) vom menschlichen Abwehrsystem erkannt, Antikrper ausgebildet und eine

Immunreaktion ausgelst. Die Verhinderung der Immunreaktion bei der Behandlung mit Asparaginase
(z.B. bei Leukmie) wird durch Bildung eines Makromolekl-Protein-Konjugates erreicht. Die
Umsetzung des Proteins mit Monomethoxypolyethylenglykol (CH3OPEG, Molekulargewicht 5.000)
ergibt ein Konjugat, welches eine hohe Antitumoraktivitt zeigt, ohne mit Anti-Asparginase-Antikrpern
zu reagieren. Weiters wird keine Bildung neuer Antikrper induziert. Die Halbwertszeit dieses
339

340

11. Proteine

Konjugates ist in vivo etwa 20mal grer als die des Originalproteins. Zur Verknpfung wird 2,4,6Trichlortriazin verwendet. Zwei Chloratome werden durch das Polymer substituiert, ber das dritte
Chloratom erfolgt die Bindung der Asparaginase (In Tab. 10-14 sind beispielhaft Reaktionen fr die
Darstellung von Proteinkonjugaten beschrieben).

Anwendung finden Kopplungsreaktionen auch in der Herstellung von radioaktiv markierten


monoklonalen Antikrpern (Antikrper und Komplex eines radioaktiven Metalls) bzw. von
Toxinkonjugaten (Antikrper und Toxin). Da monoklonale Antikrper gegen Tumorzellen spezifisch an
diese binden, ergeben sich selektive Methoden mit markierten Antikrpern fr die Diagnose bzw. mit
Toxinantikrpern zur Therapie.

Weiterhin werden Enzyme an polymere Trger gekoppelt. Solcherart immobilisierte, trgergebundene


Enzyme besitzen immer noch ihre katalytische Aktivitt und knnen nach der Reaktion einfach abfiltriert
werden.

340

341

11. Proteine

Tab. 10-13. Modifizierung von Proteinen

Reagenz
O
R

Angriffspunkt

Derivat
O

O
O

Protein NH2

Protein NH

C R
O

Protein OH

Protein O

C R
O

Protein SH

Protein S

C R
O

Protein NH2

Protein NH

CH2 CH2 COOH

O
O

N
Protein C

Protein COOH
N

NH CH2 COOH

+ NH2 CH2 COOEi

Protein CH2 NH

HN

NH

NH

NH2
N

O
H2C
O

H3C

Protein

N
N

O
Protein NH2

Protein NH

CH3

NO2

NO2

Protein OH

Protein O

C CH3
O

Protein SH

Protein S

Protein SH

Protein S

CH3

NO2

O
POCl3

Protein NH2

Protein NH

OH

OH
O
Protein OH

Protein O

OH

OH
O
Protein S

OH

O
OH
O
N CH2 CH3

Protein SH

Protein S
N

CH2 CH3

O
O

341

342

11. Proteine

Tab. 11-14. Kopplungsmethoden zur Herstellung von Proteinkonjugaten (Prot = Protein, X =


Makromolekle oder andere zu koppelnde Gruppen, PEG = Polyethylenglykol).
OPEGOCH3

Cl

N
Prot

CH3O

PEG OH

Cl

OPEGOCH3

N
Cl

H
N

NH2
Prot

N
OPEGOCH3

Cl
Prot

OPEGOCH3

Prot
Prot
O

O
O

OH

NaIO4

HO

O R

NH2

NaBH4

X
OH

NH
NH

NH2

HC

O
Prot

(CH2)3 CH

H2N

Prot

(CH2)3 CH

CH2 CH2 S

HC

O
O
Prot

OH

NHR

O
X

R
Prot

NH2

C O

Prot

Prot

NH

NH

NR
O
O
Prot

NH2

CH2 CH2 S

S
N

O
X

Prot

NH

CH2 CH2 S

SH

In zahlreichen Fllen wird das Protein nur als makromolekularer Trger fr biologisch aktive
Verbindungen wie Pharmaka oder Haptene bentigt. Grundlegende Erkenntnisse in der Immunologie
konnten z.B. mit Hilfe von DNP-Proteinen (vgl. S.

) gewonnen werden.

In den letzten Jahren haben immunologische Methoden eine immer grere Bedeutung fr die
quantitative Bestimmung krpereigener (z.B. Hormone) und krperfremder (Pharmaka) Stoffe erlangt.
Der Radioimmunoassay gehrt zu den empfindlichsten Bestimmungsmethoden in Krperflssigkeiten.
Fr die Bestimmung werden Antikrper gegen die zu erfassenden Verbindungen bentigt, die aufgrund
der meist zu niedrigen Molmasse dieser Verbindungen (S.

) nur durch vorherige kovalente Bindung an

ein Protein ausgebildet werden. Als Methoden fr die Bindung der niedermolekularen Substanzen an das
Protein kommen besonders das Gemischte-Anhydrid-Verfahren (S.
(S.

) sowie das Carbodiimid-Verfahren

) zum Einsatz. In vielen Fllen mu das Hormon oder Pharmakon erst in ein reaktionsfhiges

Derivat umgewandelt werden (vgl. Abb. 11-15).

342

343

11. Proteine

OH
O
C

CH2 O

O
O
Cl
HOOC

CH2 O

OH

R; NR3

N
O

3-(O-Carboxymethyloxim) des Testosterons


Protein

NH2
Protein HN

CH2 O

Abb. 11-15. Kovalente Bindung von Testosteron an Protein-Trger wie Serumalbumin.

Besondere Einsatzgebiete erffnen bifunktionelle Reagenzien, die intra- und intermolekular reaktive
Gruppen der Aminosuren miteinander verbinden knnen. Der Einsatz solcher Reagenzien kann die
Tertirstruktur stabilisieren, Hinweise auf den Abstand zwischen den reaktiven Gruppen oder Modelle fr
das Studium von Protein-Protein-Wechselwirkungen liefern. Ein seit langem eingesetztes bifunktionelles
Reagens ist der Glutaraldehyd, der zu Quervernetzungen fhrt. Glutaraldehyd liegt im Sauren als Polymer
des cyclischen Halbacetals, im Neutralen in der polymeren Form vor, die durch Aldolreaktion gebildet
wird. Aldehydgruppen von 55 knnen mit Aminogruppen des Proteins SCHIFFsche Basen bilden.
H
OHC

CHO
HO

CHO

HO

OH

CHO

CHO

H2N
H2C

(CH2)2 CH

(CH2)2 CH

(CH2)2 CHO

CH

Protein
HC

Protein

(CH2)2

11.10 Molekulargewicht von Proteinen.

Die Molekulargewichte von Proteinen schwanken zwischen wenigen Tausend Daltons fr Oligopeptide
(ca. 100 Da/Aminosure), oberhalb von 10.000 Da fr aus 100 - 150 Aminosuren zusammengesetzte
Peptide und liegen bei mehreren Millionen fr aus mehreren Untereinheiten zusammengesetze Proteine.
So besitzt menschliches Insulin ein Molekulargewicht von 5.743 Da, das Enzym Ribonuklease eines von
13.500 Da. Die Verdauungsfermente Trypsin und Pepsin haben ein MG von 24.500 Da bzw. 35.000 Da,
das aus 4 Untereinheiten zusammengesetzte Hmoglobin, das Atmungsprotein in den roten
Blutkrperchen, eines von 64.500. Die Lactat-Dehydrogenase besitzt ein Molekulargewicht von 150.000,
M-Globulin ein solches von 900.000 Da. Eines der Spitzen-Molekulargewichte mit 41,000.000 besitzt der
Tabakmosaikvirus, ein Pflanzenvirus, der die Infektion von Tabak- und Tomatenpflanzen bewirkt.

343

344

Eine

der

klassischen

11. Proteine

Molekulargewichtsbestimmungen

beruht

auf

der

Bestimmung

der

Sedimentationsgeschwindigkeit in der Ultrazentrifuge und Berechnung aufgrund der Zentifugengleichung


nach SVEDBERG. Die Gerte arbeiten bei etwa 60.000 UpM und erreichen einige 100.000 g
Erdbeschleunigung, die Sedimentation wird mit optischen Methoden bestimmt. Eine andere Methode zur
Molekulargewichtsbestimmung von Moleklen mit 10.000 600.000 Da ist die Streulicht-Messung
[TYNDALL-Effekt]. Andere Techniken sind die Messung der Diffusionsgeschwindigkeit und Vermessung
im Elektronenmikroskop. Aufgrund der Strukturkenntnis aus Rntgenstrukturanalysen ergibt sich
natrlich automatisch auch das Molekulargewicht. Voraussetzung ist natrlich eine kristalline AnalysenProbe und eine gengend hohe Auflsung. So stand z.B. bei der Strukturaufklrung von Myoglobin zuerst
nur Auflsung von 6 zur Verfgung, die nur die Strukturbestimmung der Peptidkette erlaubte. Sptere
Aufnahmen mit Auflsungen von 2 erlaubten bereits die Erkennung einzelner Aminosuren und
Wassermolekle.

Peptide kleinerer bis mittlerer Molekulargewichte lassen sich mittels Massenspektroskopie ermitteln.
Whrend konservative EI-Ionisation das Verdampfen des Analyten erfordert und daher nur fr sehr kleine
und derivatisierte Oligopeptide geeignet ist, sind neue Ionisier- und Trenntechniken gut bis sehr gut zur
Molgewichtsbestimmung

von

Peptiden

geeignet.

Mit

weicher

FAB-Ionisation

lassen

sich

Quasimoleklionen (M+H)

bis zur Gre m/z ~ einiger Tausend generieren und mittels

Sektorfeldgerten zur genauen Massenbestimmung hochauflsen. Die Kopplung LC-MS/MS erlaubt die
Molekulargewichtsbestimmung von Peptiden mit hoher Massengenauigkeit. Neben der Molekulargewichtsbestimmung gelingt mit LC-MS/MS die Zahl der Cysteineinheiten, der Disulfidbrcken und
freien SH-Gruppen in einem Protein festzulegen. Mit TOF-Spektrometern lassen sich Moleklmassen
ber 100.000 Da bestimmen, wenn eine fr Peptide geeignete Ionisationstechnik gewhlt wird. ESIIonisation erfolgt in einem Lsungsmittelplasma und ergibt nach Desolvatisierung vielfach geladene
Moleklionen. Da im Spektrometer das Masse/Ladungsverhltnis m/z gemessen wird, kann bei mehrfachgeladenen Moleklionen auch das Molgewicht bestimmt werden, wenn es weit auerhalb des
Mebereichs des Instrumentes liegt. Mit dieser Technik wurde das Molekulargewicht von Proteinen bis
zu 200.000 Da mit hoher Genauigkeit bestimmt.

Bei Biomoleklen erhebt sich oft die Frage nach dem eigentlichen Molekulargewicht, da viele Proteine in
der nativen und biologisch aktiven Form aus mehreren Untereinheiten bestehen und damit Dimere,
Trimere, etc., darstellen.

344

345

11. Proteine

11.11 Literatur

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347

VITAMINE

348

12. Vitamine
Vitamine sind Stoffe, die im Krper eines Tieres oder Menschen nicht hergestellt werden knnen,
aber lebenswichtig sind und mit der Nahrung dem Krper zugefhrt werden mssen. Dieser
Definition entsprechen auch Verbindungen, die man den Vitaminen nicht zurechnet, etwa essentielle
Fettsuren oder Aminosuren. Im Gegensatz zu diesen werden Vitamine in einer viel kleineren
Maximaldosis aufgenommen, hchstens 100 mg pro Tag. Meist gengen wenige mg oder g, um die
Verwertung der Nahrung zu regulieren.
Viele Vitamine haben den Charakter von Coenzymen, d.h. sie sind an Eiwei gebunden. Manche
Vitamine sind artspezifisch. Viele Tiere knnen z.B. Vitamin C selbst herstellen, der Mensch ist auf
die Zufuhr von auen angewiesen, er ist also in dieser Hinsicht eine "Defektmutante". Tierversuche
sind daher nicht unbedingt geeignet, den Vitamincharakter einer Verbindung festzulegen. Die
meisten Vitamine werden in der Regel von Pflanzen synthetisiert und unverndert verwertet.
Ausnahmen sind das Vitamin A, das im tierischen und menschlichen Organismus aus Provitamin A,
-Carotin, entsteht, das Vitamin D, das aus Steroidvorstufen durch Lichteinwirkung gebildet wird,
die Vitamine B12 und K2, die nur von Mikroorganismen hergestellt werden knnen.
Geschichte
Um die Jahrhundertwende wurde die Beobachtung gemacht, da einseitig mit Proteinen, Fetten und
Kohlehydraten sowie Mineralstoffen ernhrte Tiere anormales Wachstum zeigen. Dieser negative
Effekt lie sich durch Zugabe geringer Mengen an Milch beseitigen. Die aktive Fraktion lie sich mit
Alkohol extrahieren und in eine fettlsliche Komponente A und eine wasserlsliche B teilen. Nach
diesem Schema teilt man noch heute die Vitamine in zwei Gruppen ein - fettlsliche und
wasserlsliche.
Die fettlsliche Komponente fand man spter auch in Butter und Lebertran. Man erkannte, da das
Fehlen dieses fettlslichen Faktors A Nachtblindheit zur Folge hat. Der in der wasserlslichen
Fraktion vorhandene Faktor B wurde auch in Reiskleie entdeckt. Er war fhig, die Beriberikrankheit
(Schwche, deme, Mdigkeit) zu heilen. Als man feststellte, da der Faktor B ein Amin ist, wurde
er "Vitamin" genannt, um zu kennzeichnen, da der Stoff ein zum Leben (vita) ntiges Amin ist. Diese
Bezeichnung gab der ganzen Stoffklasse den Namen, obwohl die meisten Vitamine keinen
Basencharakter zeigen.
Bald fand man, da der wrige Anteil des Milchextraktes mehrere Wirkkomponenten enthlt, so da
man zur Unterscheidung den B-Vitaminkomplex in B1, B2 usw. unterteilen mute. berdies fhrte
man neue Buchstaben ein. A blieb als Bezeichnung fr das Vitamin A. Der nchste Faktor (in
Fruchtsften enthalten) erhielt den Buchstaben C, weil der Buchstabe B schon vergeben war. Durch
Vitamin C wird Skorbut geheilt.
Die fettlslichen Komponenten des Extraktes von Milch enthielten neben Vitamin A den
antirachitischen Faktor D. Zwei weitere fettlsliche Faktoren wurden E (notwendig fr die
Fortpflanzung von Ratten) und K (wichtig fr die Blutgerinnung) genannt. Hierbei bersprang man
allerdings Buchstaben, weil man mit K die Funktion des Faktors, das Koagulieren des Blutes,
ausdrcken wollte.

VITAMINE

349

Da es schwierig ist, Mangelerscheinungen an Versuchstieren experimentell festzustellen, ging man


spter auf die Untersuchung von Bakterienkulturen ber. So fand man 1939, da die Pantothensure,
wie wir heute wissen, ein Bestandteil von Coenzym A (CoA), ein zum Leben essentieller Faktor ist.
Die Frage nach der Funktion der Vitamine wurde erst beantwortet, als man erkannte, da viele von
ihnen als prosthetische Gruppen von Enzymen fungieren knnen. Diese Erkenntnis kam, als man
fand, da Lactoflavin (1937), Vitamin B2, ein Coenzym ist. hnlich erwies sich Nikotinsure als
Bestandteil von NADH oder Biotin als Cocarboxylase.
Die Entwicklung der Vitaminchemie von ihrer Entdeckung bis zur Strukturaufklrung des letzten
Vitamins - B12 - vollzog sich in einem Zeitraum von 100 Jahren. Vor etwa 100 Jahren, 1897, wurde
als erstes Vitamin B1 entdeckt, 1941, vor etwa 60 Jahren, wurde als letztes Vitamin, die Folsure
gefunden. Die Struktur der Folsure wurde 1946 geklrt, die des Vitamins B12 erst 1956. Allerdings
beginnt man erst heute die Wichtigkeit der Funktion mancher Vitamine, z.B. von Vitamin E, zu
erfassen. Die Vitaminchemie ist also noch nicht ganz abgeschlossen.
Fettlsliche Vitamine
Zu den fettlslichen Vitaminen zhlen die Vitamine A, D, E und K. Sie alle sind wenig polar und
haben ausgeprgte Kohlenwasserstoff-hnlichkeit. Diese Vitamine, aber auch das wasserlsliche
Vitamin C, zeichnen sich gegenber allen anderen dadurch aus, da sie zur Entfaltung ihrer
Wirksamkeit nicht der Einbindung in Eiweimolekle (wie die brigen Vitamine) bedrfen.
Vitamine A und D wurden bereits besprochen.
Vitamin E
Ratten verlieren bei einseitiger Ernhrung ihre Fortpflanzungsfhigkeit, obwohl die Faktoren A,B,C
und D vorhanden sind. Vitamin-E-Mangel ruft bei Affen Anmie hervor, bei Hhnern
Muskeldistrophie. Im allgemeinen fhrt aber Vitamin-E-Mangel nicht direkt zum Tod.
Besonders angereichert ist der Faktor E in Weizenkeimlingsl, in 100 g dieses ls findet man 260
mg Vitamin E, er ist aber auch in Blattgemse und lsaaten, sowie in Milch und Fett in relativ groer
Menge enthalten. In tierischen Organen ist Vitamin E vor allem in der Milz und in der Hypophyse
vertreten.
Strukturaufklrung:
Die Anreicherung des Faktors E aus Weizenkeiml erfolgte mit Hilfe biologischer Teste und dauerte
10 Jahre. Man erhielt schlielich mehrere Reinstoffe mit Vitamin- E-Wirkung, die sich durch Zahl
und Stellung von Methylgruppen am aromatischen Ring unterscheiden und mit den Indices , und
bezeichnet werden. Die Faktoren wurden Tokopherole genannt (tokos = Niederkunft, Pherein =
gebren). -Tokopherol trgt drei Methylgruppen im Benzolring, -Tokopherol unterscheidet sich
von -Tokopherol nur durch Fehlen einer Methyl-Gruppe in Stellung 7. Inzwischen sind noch sechs
weitere Tokopherole bekannt geworden, die 0 bis drei Methylgruppen im Benzolring tragen. Dazu
gibt es E-Vitamine, in denen in der Seitenkette die fr Terpene blichen Doppelbindungen erhalten
geblieben sind. Wichtig fr die Isolierung war die Erkenntnis, da Tokopherole eine OH-Gruppe
enthalten. Man isolierte sie durch Zugabe von Isocyansure, die mit Alkoholen oder Phenolen
Allophanate bildet:

VITAMINE

350

Allophanate kristallisieren sehr gut, whrend die Tokopherole selbst blagelbe le


sind. Bei der thermischen Zersetzung von -Tokopherol entstand Tetramethylhydrochinon.
Durch Oxidation von -Tocopherol mit FeCl3 wurde ein Chinon erhalten, das unter Wasserabspaltung
reagierte. Das Wasserabspaltungsprodukt wurde ozonisiert. Als Reaktionsprodukt entstand dabei
das Keton:

Das gleiche Keton war schon frher bei der Ozonolyse von Phytol erhalten worden. Andererseits
entstand bei der Chromsureoxidation ein Lacton, das 21 C-Atome enthielt:
Diese Abbauergebnisse legten unter Bercksichtigung der Bruttoformel nahe,
da -Tocopherol die Struktur eines Chromans haben knnte:

VITAMINE

351

Synthese von Vitamin E


Die Synthese bewies die
Struktur. Sie erfolgte aus dem
Hydrochinonderivat 1 und
Phytylbromid, das im Zuge
einer Friedel-Crafts-Reaktion in Gegenwart von ZnCl2
das Hydrochinonderivat in
-Stellung alkyliert, worauf
nach Protonanlagerung an die
Doppelbindung das gebildete
Kation mit dem phenolischen
Sauerstoff in Nachbarschaft
unter Ringschlu reagiert.
Das Hydrochinonderivat 1 ist nur
ber Umwege erhltlich. Bei einem
Verfahren geht man von 3,5-Dimethylphenol 2 aus, das man einer
Mannich-Reaktion unterwirft
(Phenole reagieren nach Mannich).
Dieses Mannich-Produkt 3 kann
durch katalytische Hydrierung in
2,3,5-Trimethylphenol 4 berfhrt
werden. Wenn 4 mit diazotierter
Sulfanilsure kuppelt, erhlt man
einen Azofarbstoff 5, der zum
Amin 6 reduziert und weiter zum
Chinon 7 oxidiert werden kann,
aus dem man schlielich das
Hydrochinon 1 erhlt.
Biogenese
Vitamin E wird in der Natur aus Homogentisinsure und Phytyldiphosphat aufgebaut.
Homogentisinsure 9 entsteht aus Prephensure ber 4-Hydroxy-phenylbrenztraubensure 8. 9
reagiert mit dem Phytyldiphosphat 10. Dieses wird aus Geranylgeranioldiphosphat durch
Partialhydrierung gebildet. Es erfolgt dann Decarboxylierung zu 11. In der Folge wird der Aromat
in Stellung 6 methyliert und danach wird der Chromanring gebildet. Aus -Tocopherol wird das Tocopherol durch erneute Methylierung (Stellung 2 und 4) mit S-Adenosylmethionin gebildet.

VITAMINE

352

Wirkung
Man setzt Tocopherole als Antioxidantien Nahrungsmitteln zu. Vitamin E schtzt ungesttigte Fette
vor Oxidation unter Bildung von Hydroperoxiden, it man viel ungesttigte Fettsuren, braucht man
mehr Vitamin E als bei Ernhrung mit gesttigten Fettsuren: Bei der biologischen Oxidation von
Vitamin E wird der Heterocyclus unter Chinonbildung geffnet:

Die ntige Tagesdosis wird mit 1 mg, an anderer Stelle mit 10-30 mg, angegeben. Aus diesen
Angaben sieht man am besten, wie wenig man ber die tatschliche Funktion wei. Man nimmt an,
da zur Hemmung der Peroxidbildung etwa 0.6 mg Vitamin E pro g ungesttigter Fettsure bentigt
werden. Dieser Wert liegt weit ber der angegebenen Tagesdosis von 1 mg.
Vitamin K
1929 wurde ein antihmorrhagischer Faktor in
grnen Pflanzen entdeckt, der die Blutgerinnungszeit verlngert. Vitamin K besteht wie Vitamin E
aus mehreren Verbindungen: Die Isomeren
unterscheiden sich durch den Bau der Seitenkette. Vitamin K ist sehr licht- und alkaliempfindlich.
Vitamin K1 hat eine vier Isopreneinheiten umfassende Seitenkette, whrend Vitamin K2 eine aus 35
C-Atomen bestehende isoprenoide Kette besitzt, in der noch alle Doppelbindungen enthalten sind.
Es wird unter Mitwirkung von Darmbakterien in K1 umgebaut. Der Ersatz der Methyl- gegen eine
Ethylgruppe in K1 desaktiviert die Substanz vllig, jedoch nicht der Verlust der ganzen Seitenkette.
Strukturaufklrung
Zur Ermittlung der Struktur der Seitenkette wurde Vitamin K1 in sein Dihydrodiacetat berfhrt und
dieses dann einer Ozonolyse unterworfen. Hierbei erhielt man das gleiche Keton, das man auch durch
Ozonolyse von Phytol erhlt, womit die Struktur der Seitenkette festlag. Der bei der Reaktion
entstehende Aldehyd gab Auskunft ber die Struktur des Aromaten.

VITAMINE

Synthese
Schlsselprodukt zur Synthese von Vitamin K1 ist
das Menadion 5, dieses entsteht durch Oxidation
aus Menadiol 4, 4 erhlt man aus dem Diamin 3,
das seinerseits aus 2-Methyl-1-naphthylamin 1
ber das 2-Methyl-4-nitro-1-naphthylamin 2
zugnglich ist. Menadion fehlt noch die Seitenkette,
die durch Umsatz mit Phytol unter BF3 Katalyse
eingebaut werden kann, zeigt aber bereits volle
Vitamin K1-Wirksamkeit.

Biosynthese
Die Biosynthese des Vitamins K ist noch nicht in
allen Stufen geklrt. Eine Vorstufe des aromatischen Teils des Molekls ist die Shikimisure 6,
die wahrscheinlich ber die Chorisminsure 7 2Succinylbenzoesure 8 bildet. Daraus knnte dann
die 1,4-Naphthohydrochinon-2-carbonsure durch
Ringschlu entstehen. Whrend es ber den Aufbau
des Aromaten nur Vermutungen gibt, wei man,
da die Seitenkette des Vitamin K1 ber Geranylgeranioldiphosphat zum Phytyldiphosphat erfolgt.
Dann tritt Kondensation mit dem Aromaten ein,
Oxidation und Methylierung des Aromaten finden
als letzte Schritte statt.
Menadion wird wahrscheinlich durch Darmbakterien in Vitamin K1 berfhrt.

353

VITAMINE

354

Wirkung
Vitamin-K-Mangel bedingt eine verlngerte Blutgerinnungszeit, weil vier Eiweikomponenten, die
fr die Blutgerinnung wichtig sind, nicht mehr im ausreichenden Ma gebildet werden - Vitamin K
ist also fr die Bildung dieser Eiweimolekle wichtig. Es sind dies der Faktor II (Prothrombin), VII
(Proconvertin), IX (Christmasfaktor) und X (Stuartfaktor).

Mit Hilfe von Vitamin K werden Glutaminsurereste im Prothrombin, aber auch in anderen
Eiweikomponenten carboxyliert. Blutgerinnung erfordert nicht nur die Gegenwart von Eiweimoleklen, sondern auch von Sauerstoff und KHCO3.
Prothrombin enthlt am Carbonylende 10 Glutaminsurereste, deren
Carboxylierung zur Bildung des aktiven Prothrombins ntig ist.
Vitamin K liegt dabei in der reduzierten Form vor, die Rckoxidation
verluft ber das Vitamin K-Epoxid. In diesen Mechanismus knnen
Cumarine und andere Stoffe strend eingreifen.
Die Hemmung der Blutgerinnung kann durch Cumarine erreicht
werden. Hemmstoffe fr Blutgerinnung sind auch Biscumarol und
das Marcumar. Letzteres wird zur Verhinderung einer Thrombose
eingesetzt. Mit Vitamin K-Gabe kann man auch Cumarin-Vergiftungen
entgegenwirken.
100 g Blumenkohl enthalten etwa 1.3 g an Vitamin K, das entspricht
in etwa dem tglichen Bedarf. An anderer Stelle wird ein Bedarf von
70-140 g angegeben. Daraus ist ersichtlich, da man noch zu wenig
ber das Vitamin wei.
Vitamin Q
Nahe verwandt zum Vitamin K sind die in Pflanzen, Mikroorganismen und Tieren vorkommenden
Ubichinone und Plastochinone, die als Elektronenbertrger in der Biochemie (in der Atmungskette)
eine Rolle spielen und ubiquitr (Name) in Zellen vorkommen. Sie sind keine Vitamine, da auch der
tierische Organismus diese Faktoren herzustellen vermag. Die Ubichinone werden je nach Zahl der
Isoprenseitenkette in Kurzform mit Qn bezeichnet, Q 9 ist also ein Ubichinon mit 9 Isoprenresten.
Plastochinone sind hnlich gebaut,
sie tragen statt der Methoxygruppen
Methylgruppen. Plastochinone
werden mit dem Buchstaben PQ
abgekrzt.

VITAMINE

355

Wasserlsliche Vitamine
Wasserlsliche Vitamine sind mit Ausnahme des Vitamin C ausschlielich an Eiwei gebunden, sie
fungieren als prostetische Gruppen von Enzymen und sind nur in Gemeinschaft mit diesen wirksam.
Die meisten von ihnen enthalten ein heterocyclisches Ringsystem.
Vitamin B1
Schon 1630 beschrieb der Arzt BONITUS die in Java auftretende Beri-Beri-Krankheit: Beri-Beri
bedeutet in der Sprache der Einheimischen "Schaf": Patienten, die von Beri-Beri befallen wurden,
schritten wie ein Schaf steif mit schlotternden Knien herum. Es ist ein Krperzittern, das durch
Nervenstrungen bewirkt wird. Daher heit die Krankheit auch Polyneuritis (Polyneuritis hat also
Strungen im Bewegungsablauf zur Folge).
Der Arzt EIJKMAN, der die Beri-Beri-Krankheit in Indonesien studierte, fand um die Jahrhundertwende,
da in Gefngnissen, in denen die Insassen mit geschltem Reis ernhrt wurden, die Beri-BeriKrankheit etwa dreihundertmal hufiger auftrat als in Gefngnissen, in denen die Insassen ungeschlten
Reis bekamen. Daraufhin wurden Versuche an Hhnern gestartet. Mit geschltem Reis geftterte
Hhner zeigten eine der Beri-Beri-Krankheit entsprechende Polyneuritis. EIJKMAN schlo daraus, da
der Faktor, der die Beri-Beri-Krankheit verhindert, in Reiskleie enthalten ist.
In der wasserlslichen B-Fraktion, die auch aus Milch isoliert wurde, ist der gleiche Stoff enthalten,
der im Silberhutchen des Reises angereichert ist. Man fand diesen Faktor auch in der Hefe. Diese
wasserlsliche B-Fraktion aus Milch lie sich in thermolabile und thermostabile Fraktionen unterteilen.
Die thermolabile B1-Fraktion enthielt den Anti-Beri-Beri-Faktor.
5 bis 10 t Reishutchen - das ist die Menge, die man brauchte, um die Struktur zu bestimmen enthalten etwa 40 g des Faktors, davon sind etwa 20-25% gewinnbar.
Das Vitamin B1 wird auch Aneurin - in Erinnerung an den Namen Antineuritisvitamin - oder zufolge
seines Schwefelgehaltes - auch Thiamin genannt.
Strukturaufklrung
Das Vitamin B1 ist eine salzartige Verbindung. B1
enthlt einen Thiazolidinring, der ber den Stickstoff
mit einem Pyrimidinring, der in Stellung 4 eine
Aminogruppe und in Stellung 2 eine Methylgruppe
trgt, verknpft ist.
In der Natur liegt hauptschlich das Diphosphat (die OH-Gruppe ist mit Diphosphat verestert) vor.
Die Verbindung lt sich mit Na2SO3 beim Erhitzen spalten:
Der Pyrimidinkrper 1 lie sich mit Na/NH3 zu einem 2,5-Dimethyl-4-aminopyrimidin 2 entschwefeln.
Die Struktur von 2 ergab sich durch Vergleich mit einem Syntheseprodukt.
Der Thiazolteil 3 des Molekls konnte mit HNO3 zu einer ebenfalls synthetisch zugnglichen
Thiazolcarbonsure 4 oxidiert werden, der negative Ausfall einer Iodoformreaktion zeigte, da die
C2-Seitenkette am Heterocyclus nicht als -CH(OH)-CH3 vorliegt.

VITAMINE

356

Die Verknpfung von Pyrimidin und Thiazolring


ergab sich durch Reduktion des Vitamin B1 mit Na
in flssigem Ammoniak. Es entstand bei dieser
Reaktion das Pyrimidinderivat 5.
Aufgrund dieser Abbauversuche wurde Vitamin B1
die oben angegebene Struktur zugeordnet.
Synthese
Der Pyrimidinteil des Molekls wird durch Umsatz
von Acetamidin mit Ethoxymethylenmalodinitril in
Gegenwart von Natriumethylat aufgebaut. Das
entstehende Pyrimidinnitril kann durch Druckhydrierung mit Raney-Nickel zum 4-Amino-5aminomethyl-2-methylpyrimidin hydriert werden.
Im entstandenen Pyrimidin kann die an die CH2Gruppe gebundene NH2-Gruppe mit HNO2 gegen
OH und diese Gruppe durch HBr-Behandlung gegen
Br ausgetauscht werden:

Alternativ kann man bei der Synthese des Pyrimidinringes von einem formylierten -Ethoxypropionsureester ausgehen. Dieser wird durch Formylierung von -Ethoxypropionsureester erhalten,
der wieder durch Ethanolanlagerung an Acrylester darstellbar ist.
Zur Darstellung des Thiazolteiles von Vitamin B1 setzt man zunchst Natriumacetessigester mit
Ethylenoxid um. Dabei reagiert das Ethylenoxid unter Ringffnung, der gebildete Hydroxyester ist
nicht isolierbar, weil er gleich einen Lactonring bildet:

VITAMINE

357

Mittels SOCl2 (Thionylchlorid) ist der zwischen


den Carbonylgruppen stehende Wasserstoff
durch Halogen austauschbar. Bei Surebehandlung ffnet sich der Lactonring und es
erfolgt (-Ketosure) Decarboxylierung.
Durch Umsatz der erhaltenen -Oxo-Halogenverbindung mit Thioformamid entsteht das
Thiazol.
Dieses wird mit der Pyrimidinkomponente von
Vitamin B1 kondensiert.

Vitamin B1 ist die Wirkgruppe der Co-Carboxylase-2. Diese hat unter anderem die Aufgabe,
-Ketosuren, z.B. Brenztraubensure, zu decarboxylieren, damit in Folge CoA hergestellt werden
kann. Der Wasserstoff in Position 2 des Thiazolringes ist unter Bildung eines Anions abspaltbar. Das
Anion reagiert mit Brenztraubensure zu "aktiver Brenztraubensure". Das entstandene
Kondensationsprodukt erleidet Decarboxylierung, so da aktiver Acetaldehyd entsteht.

Der Wasserstoff an dem C-Atom, das die sekundre OH-Gruppe trgt, ist im aktiven Acetaldehyd
durch die benachbarte Doppelbindung aktiviert und daher abspaltbar:

VITAMINE

358

Das so gebildete Produkt kann mit


Brenztraubensure reagieren:
Durch Zerfall der Zwischenverbindung
entsteht wieder das Anion des Ausgangsmolekls und eine -Ketosure,
die durch Decarboxylierung ein Acyloin
liefert.

Andererseits dient aktiver Acetaldehyd


auch dazu, Acetylreste zu liefern. Im
Zuge einer Redoxreaktiven mit Liponsure wird auf diese der Acylrest zu
bertragen.

Wirkung
Viele Erkrankungen des Nervensystems werden durch Mangel