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Physiologie: Forschungsmethoden

Ausschalten definierter Hirnareale:


hier geht man davon aus, dass die betroffenen Hirnareale eine bestimmte Funktion hatten, die
die Versuchstiere nach dem Ausschalten der Region nicht mehr ausfhren knnen.
Es gibt die experimentelle Ablation, bei der Hirnteile zerstrt oder entfernt werden und die
Lsion, bei der die betreffende Struktur nur verletzt, geschdigt oder gestrt, aber nicht
komplett zerstrt wird. Lsionen knnen auf vielerlei Art erzeugt werden. z. B. durch
Einfrieren des Gewebes, durch Absaugen mit einer Vakuumpumpe, Zerstrung des Gewebes
durch Hitze, durch Vergiftung oder zeitweiliges Lhmen durch ein Lokalansthetikum.
Die Interpretationen anhand von Lsionen sind aber kritisch zu betrachten, denn sie sind nicht
immer eindeutig, wenn eine Hirnregion bspw. mehrere Funktionen hat (Bsp: Nagetier, das
seine Jungen nicht mehr pflegte, S. 4)
Das vorbergehende Ausschalten durch einfrieren erfolgt durch eine Klte- Schleife. Diese
wird in den Kopf des Tieres eingefhrt, wobei khlende Flssigkeit durch sie hindurch
zirkuliert.
Bei der excitatorischen Lsion werden Neuronen durch eine excitatorische Aminosure
zerstrt.
Stereotaktische Chirurgie zur zielgenauen Positionierung von Kanlen oder Elektroden:
Um Kanlen und Elektroden zielgenau positionieren zu knnen, muss ein Arzt wissen, wo
welche Hirnregion beim Patienten liegt. Hierzu wird ein sogenannter stereotaktischer Atlas
benutzt, welcher Zeichnungen und Fotografien von allen Hirnregionen enthlt. Da Gehirne
individuell leicht unterschiedlich sind, orientiert sich ein Arzt am Bregma (dort, wo beide
Hirnhlften zusammengewachsen sind) eines Patienten. Bei Gehirnoperationen werden die
Kpfe der Patienten auerdem in einem stereotaktischen Apparat fixiert, damit man przise
arbeiten kann und der Kopf sich nicht bewegt.
Die stereotaktische Radio- oder Strahlentherapie:
Bei dieser Therapie, die hufig bei Krebs angewandt wird, wird in einem kleinen Gebiet eine
sehr hohe Konzentration an Strahlen positioniert, die das Gewebe zerstrt. Die Strahlenquelle
kann extern sein oder in das Gewebe eingebracht werden. Je nach Gre des Gewebes nimmt
man unterschiedliche Isotopen.
Histologische Methoden:
Histologie ist die Wissenschaft des biologischen Gewebes, es werden kleine Gewebeproben
eingefrbt und unter dem Mikroskop untersucht.
Zunchst mssen Proben des neuronalen Gewebes in ein Fixativ (Formalin) eingelegt, um die
Zerstrung durch autolytische Enzyme zu verhindern. Zuvor wird das Gewebe einer Perfusion
unterzogen, bei der das Blut durch eine verdnnte Salzlsung ersetzt wird. Zur Untersuchung
werden winzige Feinschnitte vorgenommen, zuvor wird die Probe jedoch tiefgefroren oder
durch wachsartige Substanzen stabilisiert.
Um die zu untersuchenden Strukturen sichtbar zu machen, werden sie eingefrbt, wobei
unterschiedliche Zellstrukturen unterschiedliche Frbemittel aufnehmen. Die Wahl des
Frbemittels erfolgt also nach der Art des zu untersuchenden Gewebes.
Mikroskopie:
Die Vergrerung herkmmlicher Mikroskope ist auf das 1500 fache begrenzt, weshalb oft
Elektrodenmikroskope oder Elektrodenrastermikroskope verwendet werden.

Anterograde Markierung:
Um herauszufinden welche Verbindungen zwischen efferenten Axonen (vom Gehirn zum
Rckenmark bzw. zu Muskeln etc.) und anderen Hirnzellen bestehen, werden Proteine in die
Nhe der zu untersuchenden Axone injiziert, von deren Dendriten aufgenommen und breiten
sich im Zellkrper und den Axonen aus.
Retrograde Markierung:
Dies ist die umgekehrte Methode: man injiziert die Proteine in die Nhe afferenter (zum
Gehirn hin) Neuronen und kann so quasi rckwrts (nicht vom Gehirn zu den Neuronen,
sondern den umgekehrten Weg) herausfinden, woher der Input kam.
Untersuchungen am lebenden menschlichen Gehirn:
Unterschiede im Erleben und Verhalten der Menschen nach Unfllen oder Schdigungen kann
heutzutage mittels bildgebender Verfahren untersucht werden, um herauszufinden, welche
Hirnregionen betroffen sind.
Die zwei wichtigsten Verfahren sind:
Computertomografie (CT): auch CT- Schnitttechnik: dies ist ein Rntgenverfahren,
mit dessen Hilfe am Ende ein dreidimensionales Bild des menschlichen Gehirns
konstruierbar ist. Eine kreisfrmige Apparatur umfhrt den Kopf und die den Kopf
durchdringenden Rntgenstrahlen werden an der anderen Seite wieder aufgefangen, so
entstehen viele einzelne horizontale Schnitte des Gehirns. Allerdings ist die
Strahlenbelastung hoch und die Schnitte sind nur auf horizontaler Ebene mglich.
Magnetresonanztomografie (MRT): hier erfolgt die Bilderstellung aufgrund eines
starken Magnetfeldes, dass bewirkt, dass sich die Wasserstoffatome im Gewebe in
einer bestimmten Weise ausrichten und so die Molekle eine Resonanz erzeugen, die
gemessen und in ein Bild umgewandelt werden kann. Diese Methode erzeugt
detailliertere Bilder als das CT.
Registrierung der Aktivitt einzelner Zellen mit Hilfe von Elektroden:
Mit Mikroelektroden wird die Aktivitt einzelner Zellen erfasst. Diese knnen zur
einmaligen Messung eingefhrt oder durch eine stereotaktische Operation dauerhaft
implantiert werden (bei Tieren).
Mit Makroelektroden wird die Aktivitt von tausenden oder Millionen von Neuronen in der
Umgebung der Elektrode gemessen, also ganze Hirnareale. In seltenen Fllen knnen sie auch
beim Menschen fr lngere Zeit implantiert werden.
Elektroenzephalografie:
Mit dem EEG wird die Summe der Aktivitten vieler Zellen ber die Kopfhaut gemessen.
Durch ihre spezielle rumliche Anordnung addieren sich die von den einzelnen Neuronen
erzeugten Strme so, dass sie Spannungsschwankungen auf der Kopfhaut bewirken. Werden
die Schwankungen direkt von der Hirnoberflche abgeleitet, spricht man vom
Elektrocortigogramm. Um die Schwankungen visuell darstellen zu knnen (auf Papier oder
einem PC) braucht man empfindliche Messverstrker.
Magnetencephalografie:
Hier werden Bilder durch das Erfassen der magnetischen Felder der Neuronen erzeugt.
So kann festgestellt werden, wenn Neuronen gemeinsam feuern.

Positronenemissionstomographie (PET):
Radioaktive Glucose wird in die Blutbahn injiziert. Beim zerfallen der Molekle werden
Positronen frei. Ein Computer ermittelt, welche Hirnregionen die Positronen aufgenommen
haben und erzeugt so Bilder. Die Teilchen gellten als unschdlich. Bei Aktivitt im Gehirn,
die unter Verbrauch von Glucose stattfindet, ist in den betreffenden Regionen eine erhhte
Konzentration der Positronen zu sehen (z.B. beim Ballen der Faust).
Funktionelle Kernspintomographie (fMRT):
Dieses Verfahren beruht auf einem hnlichen Prinzip wie das MRT. Gemessen wird die
Verteilung von Eisenmoleklen im Gehirn, wobei dort mehr Eisen ist, wo das Gehirn
beansprucht wird, da Eisenmolekle Sauerstoff binden und aktivere Gehirnareale mehr
Sauerstoff bentigen, als weniger aktive.
Stimulation neuronaler Aktivitt:
Neuronen knnen durch elektrische oder chemische Reize stimuliert werden. Die elektrische
Reizung ist immer inadquat und kann die natrliche Reizung einer Zelle nicht imitieren.
Chemische Reizung erfolgt ber Kanlen, durch die chemische Substanzen ins Gehirn
injiziert werden. Sie ist aufwendiger als die elektrische Reizung, aktiviert aber Zellkrper und
nicht Axone, was ein Vorteil ist. Bei der transkranialen magnetischen Stimulation wir der
Kortex durch magnetische Felder stimuliert, die von Drahtspulen, die auf dem Schdel
angebracht werden, emitiert werden.