Diagnostik
hautnah
https://doi.org/10.1007/s12326-023-00554-5
Angenommen: 6. Februar 2023
© Der/die Autor(en) 2023
Schon seit den frühen 1960er Jahren wer-
den Immunfluoreszenzuntersuchungen
zur Erforschung von Hauterkrankun-
gen eingesetzt. Wegweisend waren hier
z. B. der Nachweis von bandförmigen
IgG-Ablagerungen an der dermoepi-
dermalen Junktionszone bei Patienten
mit Lupus erythematodes von Burnham
et al. 1963 [1], oder der Nachweis von
zirkulierenden Autoantikörpern, die
Keratinozyten binden, durch Beutner
und Jordon beim Pemphigus 1964 [2].
Seit damals haben sich diese Methoden
weiterentwickelt und sind zu einem inte-
Abb. 1 8 Schematische Repräsentation der direkten Immunfluoreszenzmethode (a) und der indirekten Immunfluores-
zenz (b)
Wolfgang Bauer
Universitätsklinik für Dermatologie, Medizinische Universität Wien, Wien, Österreich
Immunfluoreszenz-
untersuchungen in der
Dermatologie
gralen Bestandteil der dermatologischen
Routinediagnostik geworden.
Methode
Unter Immunfluoreszenz versteht man
die Verwendung von Fluoreszenzfarb-
stoff-konjugierten Antikörpern zur De-
tektion von Zielantigenen. Als Fluoro-
chrom wird meistens FITC (Fluorescei-
nisothiocyanat) angewendet, das nach
Anregung mit blauem Licht (Absorp-
tionsmaximum bei 495 nm) im grünen
Farbspektrum (Emissionsmaximum bei
519 nm) emittiert.
Bei der direkten Immunfluoreszenz
(DIF) werden gewebsgebundene An-
tigene (in einer Hautprobe) detektiert
(. Abb. 1a). Etabliert hat sich in der
Routinediagnostik der Einsatz von An-
tikörpern gegen humanes IgG, IgM,
IgA, den Komplementfaktor C3 sowie
gegen Fibrinogen. Bei der indirekten Im-
munfluoreszenz (IIF) werden im Serum
zirkulierende Autoantikörper gesucht.
Dafür werden verschiedene Substrate
in Form von z. B. Gewebeschnitten ver-
hautnah
 Diagnostik
Tab. 1 Übersicht: AIBD vom Pemphigustyp. (Nach [3, 7])
Zielantigen
Pemphigus Dsg3
vulgaris Dsg1, Dsc1-3, u.a.
Pemphigus Dsg1, Plakoglobin
foliaceus
Pemphigus Dsg1
erythematosus
IgA Pemphigus Dsc1, Dsg3
Paraneoplasti- Dsg3, Env, Periplak., Desmo-
scher Pemphi- plakin I/II, Plectin, BP230, Dsg1,
gus u. a.
Dsg3 Desmoglein 3, Dsg1 Desmoglein 1, Dsc Desmocollin, Env Envoplakin, Periplak Periplakin, RHB Rattenharnblase
wendet, die diese Autoantikörper gut
binden können, d. h. das Zielantigen
dieser Autoantikörper in hohem Maße
exprimieren. Häufig verwendet werden
Affenösophagus, Meerschweinchenöso-
phagus, Rattenharnblase sowie humane
Haut oder auch mit einem bestimmten
Zielantigen transfizierte Zelllinien. Nach
Verdünnung des Patientenserums wird
dieses mit dem Substrat inkubiert und
etwaige gebundene Autoantikörper in
einem zweiten Schritt mit einem FITC-
markierten antihumanen IgG- oder auch
IgA-Antikörper markiert (. Abb. 1b).
»reszenzuntersuchung
Bei der direkten Immunfluo-
werden
gewebsgebundene Antigene in
einer Hautprobe detektiert
Ergänzt wird die indirekte Immunfluo-
reszenz häufig durch weitere Methoden
zum Nachweis von Autoantikörpern, wie
z. B. einem ELISA oder Western Blot.
Biopsie
Die Wahl einer geeigneten Biopsiestel-
le für die DIF ist ein wesentlicher Fak-
tor für den Erfolg der Untersuchung [3,
4]. Bei AIBD (autoimmun-blasenbilden-
den Dermatosen) liegt diese periläsio-
nal in gesund erscheinender Haut, bis
zu 1 cm neben einer vorhandenen Blase,
da es im Bereich der Blase aufgrund des
inflammatorischen Milieus durch Pro-
teasen von Leukozyten zu einem Ab-
hautnah
DIF-Muster Sensitivität IIF
DIF
IgG, C3: ICS 90–100 % Affenösophagus
IgG, C3: ICS 90–100 % Meerschweinchen-
ösophagus
IgG, C3: ICS + – –
BMZ gr
IgA: ICS 83–100 % Affenösophagus
Dsc-transfizierte
Zellen
In 50 % neg. 27–70 % RHB
IgG, C3: ICS
± BMZ lin
bau der Antikörperablagerungen und so-
mit zu falsch-negativen Befunden kom-
men kann. Zudem riskiert eine läsiona-
le Biopsie das Abschwimmen und somit
den Verlust des Blasendaches, was eine
Beurteilung ebenfalls unmöglich macht.
Bei allen anderen Indikationen sollte die
Hautprobe läsional aus einer möglichst
rezenten Veränderung entnommen wer-
den. Für einen Lupusbandtest hingegen
wird gesunde Haut an einer nicht-UV-
exponierten Stelle, z. B. gluteal, entnom-
men.
Die Hautprobe muss für den Nachweis
der gewebsgebundenen Autoantikörper
bzw. einer Komplementaktivierung na-
tiv (in 0,9 % Kochsalzlösung oder einem
Zellkulturmedium) ins Labor gebracht
werden. Falls dies nicht innerhalb von
24–48 h möglich sein sollte, kann ein spe-
zielles Transportmedium (Michel’s Medi-
um, eine gepufferte Ammoniumsulfatlö-
sung) verwendet werden, das eine Stabi-
lisierung von Antigen-Antikörperkom-
plexen im Gewebe für bis zu fünf Ta-
ge ermöglicht [5]. Alternativ könnte die
Probe auch sofort eingefroren transpor-
tiert werden, eine im Alltag allerdings oft
unpraktische Lösung. Eine akzidentelle
Fixierung in herkömmlichen Formalde-
hydlösungen würde aufgrund der Kreuz-
vernetzung von Proteinen zu einem Ver-
lust von Epitopen und damit der Reakti-
vität innerhalb von Minuten führen [6].
Üblicherweise werden 5-μM-Gefrier-
schnitte von der Biopsie angefertigt und
mit einer definierten Anzahl an Fluoro-
chrom-markierten Antikörpern gefärbt.
Dabei haben sich Antikörper zum Nach-
Sensitivität ELISA Sensitivität
IIF ELISA
95 % Anti- 97 %
Dsg3
95 % Anti- 96 %
Dsg1
– – –
50 % – –
100 %
66–86 % Anti- 82–100 %
Env
weis von IgG, IgA, IgM, Komplementfak-
tor C3 und Fibrinogen (F) als Standard
etabliert [7, 8].
Diagnosealgorithmus/
Beurteilung
Beurteilt werden der Ort der Ablage-
rungen, die Art der Ablagerungen (wel-
ches Immunglobulin, Komplement, F),
die Intensität der Färbung und damit
extrapoliert die Zahl der Ablagerungen
und das Muster. Exkludiert werden un-
spezifische Färbungen sowie Autofluo-
reszenz des Gewebes. Das Ergebnis der
DIF-Untersuchung sollte immer in Zu-
sammenschau mit dem klinischen Bild
sowie der histopathologischen Untersu-
chung betrachtetwerden. Gegebenenfalls
können serologische Methoden wie die
IIF die Untersuchung unterstützen [9].
Erkrankungen der Pemphigus-
gruppe
Erkrankungen der Pemphigusgruppe
sind durch das Auftreten von Auto-
antikörpern gegen desmosomale Ad-
häsionsproteine von Keratinozyten ge-
kennzeichnet (. Tab. 1; [4, 10]). Durch
den Verlust dieser Zell-Zell-Kontakte
kommt es zu einer intraepidermalen
Spaltbildung in Haut und hautnahen
Schleimhäuten, die Art der Erkran-
kung wird dabei wesentlich durch das
Zielantigen mitbestimmt. Beim Pem-
phigus vulgaris sind dies Desmoglein 3
(DSG3), beim mukokutanen Pemphigus
Dsg3 und Desmoglein 1 (DSG1), beim

Pemphigus foliaceus nur DSG1. Gewe-
begebundene Autoantikörper lassen sich
in der DIF, abhängig im Wesentlichen
nur von der korrekten Biopsieentnahme,
in nahezu 100 % aller Fälle nachweisen,
dadurch stellt sie den Goldstandard in
der Diagnose dar.
Gemäß der Verteilung der Antige-
ne führt dies in der DIF zu einer An-
färbung der Zellmembranen der Kerati-
nozyten, dem sogenannten Interzellular-
muster („intercellular space“, ICS-Mus-
ter). Nachdem DSG3 vor allem in den ba-
salen Keratinozyten, DSG1 hingegen in
höheren Lagen der Epidermis exprimiert
wird, kann diese Verteilung in manchen
Fällen auch in der DIF beobachtet wer-
den (. Abb. 2). Alleine aus der DIF lässt
sich die Diagnose des Subtyps des Pem-
phigus allerdings nicht verlässlich stellen.
Hierfür sind serologische Untersuchun-
gen unerlässlich, wobei als Substrat für
die IIF insbesondere Affen- und Meer-
schweinchenösophagus verwendet wer-
den. Sowohl DSG1- als auch DSG3-Auto-
antikörper können auch verlässlich mit-
tels ELISA nachgewiesen werden, wobei
die Titer mit der Krankheitsaktivität kor-
relieren.
»die Alleine aus der DIF lässt sich
Diagnose des Subtyps des
Pemphigus nicht verlässlich
stellen
Der Pemphigus erythematosus als loka-
lisierte Variante des Pemphigus foliaceus
tritt bevorzugt im Gesicht und Dekolle-
teebereich auf. Hier wurden in der DIF
neben dem ICS-Muster zusätzlich gra-
nuläre Ablagerungen von IgG und C3
an der Basalmembranzone (BMZ), wie
sie auch beim Lupus erythematodes vor-
kommen, beschrieben, wobei dies aber
nur bei einem kleinen Teil der Patienten
tatsächlich der Fall ist.
Der IgA-Pemphigus ist durch Auto-
antikörper vom IgA-Subtyp gegen ein
weiteres desmosomales Adhäsionsprote-
in, Desmocollin 1 (DSC1), gekennzeich-
net. Bei der subkorneal-pustulösen Va-
riante finden sich diese Ablagerungen in
der DIF nur in den oberflächlichen Epi-
dermisschichten (. Abb. 3), bei der intra-
Zusammenfassung · Abstract
hautnah https://doi.org/10.1007/s12326-023-00554-5
© Der/die Autor(en) 2023
W. Bauer
Immunfluoreszenzuntersuchungen in der Dermatologie
Zusammenfassung
Immunfluoreszenzoptische Untersuchungen
haben seit langer Zeit einen fixen Stellenwert
in der dermatologischen Diagnostik. Sie
sind unerlässlich für die Diagnose von
blasenbildenden Autoimmunerkrankungen
und liefern wertvolle diagnostische Hinweise
in der Beurteilung von Kollagenosen,
Vaskulitiden und lichenoiden Erkrankungen
sowie in der orientierenden Beurteilung
angeborener, blasenbildender Erkrankungen.
Mithilfe der direkten Immunfluoreszenz-
untersuchung werden in einer Biopsie
vorhandene Ablagerungen von Antigen-
Antikörperkomplexen nachgewiesen, bei
Immunofluorescence Examinations in Dermatology
Abstract
Immunofluorescence examinations have
been important in the diagnosis of cutaneous
diseases for a long time. They are essential
for the diagnosis of autoimmune blistering
diseases and provide valuable diagnostic
information in the assessment of connective
tissue diseases, vasculitis and lichenoid
diseases as well as in the preliminary
assessment of congenital blistering diseases.
Deposits of antigen-antibody complexes
present in a skin biopsy are detected with
the help of direct immunofluorescence
epidermalen neutrophilen IgA-Derma-
tose im Bereich der gesamten Epidermis.
Aufgrund des IgA-Isotyps sind diese Au-
toantikörper mithilfe bisher erhältlicher,
routinemäßig durchgeführter ELISA, die
ausschließlich IgG-Antikörper detektie-
ren, nicht nachweisbar. Die IIF am Affen-
ösophagus ist in nur ca. 50 % aller Fälle
positiv. Die DIF bleibt hier die verläss-
lichste Nachweismethode.
Eine Sonderstellung nimmt auch der
paraneoplastische Pemphigus (PNP) ein.
Bei ihm lassen sich Autoantikörper ge-
gen eine Vielzahl von epidermalen Struk-
turproteinen nachweisen, insbesondere
auchgegenPlakine, die diagnostischweg-
weisend sind und sich gut in der IIF
an der Rattenharnblase (die besonders
reich an Plakinen ist; . Abb. 4) oder ei-
nem ELISA nachweisen. Nachdem auch
indirekten Methoden wird das Serum
von Patienten auf das Vorhandensein von
Autoantikörpern untersucht. Ein wesentlicher
limitierender Faktor in der Qualität dieser
Untersuchungen ist die korrekte Entnahme
sowie der Transport der Hautbiopsie ins
Labor.
Schlüsselwörter
Direkte Immunfluoreszenz · Indirekte Immun-
fluoreszenz · Salt-split-skin-Untersuchung ·
Blasenbildende Autoimmunerkrankungen ·
Kollagenosen
examination, while the serum of patients is
tested for the presence of autoantibodies
using indirect methods. A significant limiting
factor in the quality of these examinations is
the correct sampling and transport of the skin
biopsy to the laboratory.
Keywords
Direct immunofluorescence · Indirect immu-
nofluorescence · Salt split skin examination ·
Autoimmune bullous diseases · Connective
tissue diseases
Autoantikörper gegen hemidesmosoma-
le Proteine (BP230) auftreten, kann in der
DIF nicht nur ein ICS-Muster, sondern
auch ein lineares Muster mit IgG und C3
an der BMZ positiv sein. In bis zu 50 %
aller Fälle kann die DIF beim PNP aber
negativ sein.
Erkrankungen der Pemphigoid-
gruppe
Allen Pemphigoiderkrankungen ge-
meinsam ist das Auftreten von Au-
toantikörpern gegen hemidesmosomale
Proteine, die die Keratinozyten mit ih-
rer Basalmembran verbinden (. Tab. 2;
[4, 11]). Entsprechend ähnlich ist das
Muster der Ablagerungen in der DIF:
praktisch immer zeigen sich IgG und
C3 linear an der BMZ (. Abb. 5). Der
hautnah
 Diagnostik

Abb. 2 8 ICS-Muster bei AIBDvom Pemphigustyp. Beim mukokutanen Pemphigus ist aufgrund der Abb. 3 8 Sehr oberflächliches, subkorneales
Autoantikörper gegen DSG3 und DSG1 in allen Schichten der Epidermis ein ICS-Muster erkennbar. ICS-Muster mit Anti-IgA beim IgA-Pemphigus
DSG1 wird vor allem in den höheren Epidermisschichten exprimiert, daher kann das ICS-Muster beim vom Typ der subkornealen Pustulose
PF auf diese beschränkt sein. Die BMZist in Gelb skizziert. (a) Pemphigus vulgaris, (b) Pemphigus folia-
ceus

Abb. 4 8 Positives Ergebnis einer IIFan der Rat-
tenharnblase beim paraneoplastischen Pem-
phigus
positive prädiktive Wert der DIF ist
nahezu 100 %, der negative prädiktive
Wert liegt bei ca. 90 %, aufgrund von
z. B. inkorrekt durchgeführten Biopsien.
Damit ist die DIF auch bei den Pem-
phigoiderkrankungen der Goldstandard
der Diagnose.
nur bei Vorhandensein von Antikörpern
gegen Kollagen Typ VII, d. h. bei der
Epidermolysis bullosa acquisita (EBA),
dem bullösen Lupus erythematodes und
manchmal beim vernarbenden Pemphi-
goid, bei allen anderen Erkrankungen
zeigt sich ein n-Muster [12].
Beim Lichen planus pemphigoides
können zusätzliche Merkmale des Lichen
planus vorhanden sein, insbesondere ein
bandförmiges Fibrinogen an der BMZ.
Beim bullösen LE können gleichzeitig
Charakteristika des LE in der DIF sicht-
bar sein, vor allem granulär-bandförmige
Ablagerungen von IgM und C3 entlang
der Junktionszone. Beim Pemphigoid
gestationis (PG) kann das lineare IgG-
Signal sehr schwach sein oder fehlen,
C3 ist aber stets deutlich positiv. Man
führt dies auf niedere Titer einerseits,
andererseits auf die gute Komplement-
fixierung der Autoantikörper zurück.
Subtypen. Diese ist aber durch die Salt-
split-skin(SSS)-Untersuchung möglich.
Durch Inkubation einer gesunden hu-
manen Hautprobe mit 1M-NaCl-Lösung
wird ein artifizieller Spalt in der Lami-
na lucida der Basalmembran induziert.
BP180, BP230 und α6β4 Integrin finden
sich am Blasendach des Spaltes, während
Kollagen VII, Laminin 332 und Laminin
γ1 am Blasenboden bleiben. Eine IIF mit
Patientenserum auf diesem Substrat er-
laubt daher eine grobe weitere Einteilung
der Pemphigoide (. Abb. 6). Zusätzlich
können Autoantikörper gegen rekombi-
nante Fragmente von BP180, BP230 und
Kollagen VII mittels ELISA gemessen
werden. Hierbei ist zu beachten, dass die
derzeit kommerziell erhältlichen BP180-
ELISA-Systeme nur Antikörper gegen
die immundominante Domäne NC16A
des BP180-Proteins detektieren können.
Ein mittlerweile aufgrund der Verfüg-

»Goldstandard
Die DIF ist bei AIBD der
der Diagnose
Eine weitere Differenzierung der Subty-
pen lässt sich einerseits anhand des Mus-
ters des linearen Signals, andererseits an-
hand eventuell vorhandener zusätzlicher
Ablagerungen treffen. Verlässlich ist dies
aber vor allem durch Bestimmung der
im Serum zirkulierenden Autoantikör-
per mittels IIF und ELISA möglich.
Bei stärkerer Vergrößerung (600 ×)
kann das lineare Signal an der BMZ
zwei verschieden gewellte Muster auf-
weisen: Beim n-Muster sind die Wellen
oben geschlossen, beim u-Muster nach
oben offen. Das u-Muster findet sich
Bei der linearen IgA-Dermatose findet
sich überwiegend IgA an der BMZ; dies
kann auch beim Schleimhautmemphi-
goid („mucous membrane pemphigoid“,
MMP) oder der EBA der Fall sein.
Die IIF am Affenösophagus ist bei
Pemphigoiderkrankungen nicht so sen-
sitiv wie bei Pemphiguserkrankungen,
vor allem aufgrund von Unterschie-
den zwischen dem BP180-Protein bei
Affen und Menschen. Anti-BP230-Au-
toantikörper hingegen können am Af-
fenösophagus gut detektiert werden,
korrelieren aber nicht mit der Krank-
heitsaktivität. Zusätzlich erlauben weder
die IIF am Affenösophagus noch auf
normaler humaner Haut eine weitere
Differenzierung zwischen Pemphigoid
barkeit von ELISA seltener durchgeführ-
ter Test ist der Komplementbindungstest
(auch Herpes gestationis [HG-] Test) zur
Abklärung eines Pemphigoid gestationis.
Eine herkömmliche IIF an der SSS ist
beim PG oft negativ bzw. nur schwach
positiv. Man macht sich die gute Kom-
plementfixierung der gebundenen Auto-
antikörper zunutze und amplifiziert das
Signal einer IIF an der SSS durch Zu-
setzen von Komplement und einer an-
schließendenDetektionmittels anti-C3c-
FITC-markierten Antikörpern. Auf die-
se Weise lässt sich die Sensitivität der IIF
beim PG auf 90 % steigern.
Die Diagnose eines MMP kann sich
schwieriger gestalten, da die DIF bei rein
okulärem Befall in bis zu 50 % aller Fälle

hautnah
 Tab. 2 Übersicht: AIBD vom Pemphigustyp. (Nach [3, 7])
Zielantigen DIF-Muster: lin. an Sensi- Zusätzliches IIF Sensi- ELISA Sensitivität
BMZ tivität Muster tivität ELISA
DIF IIF
Bullöses Pem- BP180 (NC16A), C3>IgG>IgA,IgE> 98–100 % n-Muster Affenöso- 70 % BP180 80–90 %
phigoid BP230 IgM phagus 90 % (NC16A) 50–60 %
SSS BP230
Pemphigoid BP180 (NC16A), C3 (100 %)>>IgG –100 % für n-Muster SSS 25 % BP180 90 %
gestationis BP230 (25 %) C3 HG-Test 90 % (NC16A) 5–10 %
BP230
LAD LAD-1, BP230 IgA (100 %) >>IgG, 79–100 % n-Muster SSS 15–63 % – (IB) –
C3, IgM
MMP BP180, L332, C3, IgG>>>IgA,IgM C3 86 % n-Muster SSS – BP180 –
a6b4, BP230 L332 (NC16A)
Anti-p200/Lg1 Laminin g1/p200 C3, IgG – n-Muster SSS – – (IB) –
Pemphigoid
Lichen planus BP180 (NC16A), C3, IgG – n-Muster SSS – BP180 –
pemphigoides BP230 (NC16A)
Vernarbendes Koll VII, BP180, C3, IgG – n-/u-Muster SSS – Koll VII –
Pemphigoid L332, BP230
EBA Koll VII C3, IgG (70 %) 100 % u-Muster SSS 50–100 % Koll VII 90 % (in ca.
IgA (30 %), IgM 10 % IgA!)
(20 %)
Bullöser LE Koll VII oder IgG (40 %) – gr. an BMZ: IgA/M, SSS – Koll VII –
BP180, BP230, IgA, IgM, C3 (70 %) C3
L332 n-/u-Muster
IB Immunoblot

negativ ist. Bei gleichzeitigem Schleim-
haut- und Hautbefall steigt die Sensiti-
vität deutlich. Im Zweifelsfall kann es
hier also erforderlich sein, mehrere Bi-
opsien zu entnehmen. Serologisch lassen
sich in 30–70 % Autoantikörper gegen
BP180 nachweisen (in der Hälfte aller
Fälle nicht gegen die NC16A-Domäne),
am zweithäufigsten gegen Laminin 332.
Für den Nachweis letzterer ist eine IIF
mit transfizierten Zellen mit einer Sensi-
tivität von 84 % kommerziell verfügbar.
Das Vorhandensein dieser Autoantikör-
per sollte bei jedem MMP dringend über-
prüft werden, da sie in 20–30 % aller Fälle
mit einem soliden Malignom assoziiert
sind und somit eine Tumorsuche emp-
fohlen ist.
Dermatitis herpetiformis
Duhring
Auch bei der DHD muss die Biopsie pe-
riläsional entnommen werden, am sensi-
tivsten ist sie im Glutealbereich. Es zeigen
sich charakteristische granuläre IgA-Ab-
lagerungen im Bereich der Papillenspit-
zen, seltener auch entlang der gesamten
BMZ (. Abb. 7). Mittels IIF am Affen-
ösophagus lassen sich antiendomysiale
Autoantikörper im Serum nachweisen.
Zusätzlich können mittels ELISA auch di-
rekt Autoantikörper vom IgA-Typ gegen
die epidermale Transglutaminase nach-
gewiesen werden.
Kollagenosen
Die DIF kann insbesondere beim Lupus
zur Bestätigung der Diagnose bzw. zur
Abgrenzung von histopathologisch ähn-
lichen Erkrankungen (z. B. polymorphe
Lichtdermatose) hilfreich sein.
»zur Die DIF kann beim Lupus
Bestätigung der Diagnose
hilfreich sein
Nur selten können verschiedene Arten
von Kollagenosen mithilfe der DIF tat-
sächlich unterschieden werden, vor allem
da die Muster der Ablagerungen ähnlich
sind.
Lupus erythematodes
Beim Lupus erythematodes (LE) kön-
nen sich folgende Muster in der DIF
identifizieren lassen: (1) Immunglobu-
line (insbesondere IgG und IgM) sowie
C3 granulär bandförmig an der BMZ
(. Abb. 8); (2) „cytoid bodies“ (CB) mit
Anti-IgA- oder -IgM; (3) Immunglo-
buline, C3 und F in den superfiziellen
Gefäßen; (4) IgG in den Keratinozy-
tenkernen (insbesondere bei Vorlie-
gen von Anti-U1RNP-Autoantikörpern;
. Abb. 8); (5) Fibrin bandförmig an der
BMZ.
Dabei ist die Wahrscheinlichkeit ei-
ner positiven DIF abhängig von der Art
des Lupus und am höchsten für den
akuten kutanen (50–100 %), am gerings-
ten für den diskoiden (60–94 %). Außer-
dem finden sich Ablagerungen häufiger
in läsionaler Haut sowie in lichtexpo-
nierten Arealen. Hier ist darauf zu ach-
ten, dass auch in gesunder, lichtexponier-
ter Haut granuläre Ablagerungen von C3
oder auch IgM an der BMZ zu beobach-
ten sein können, meistens allerdings in
wesentlich schwächerer Form. Zusätzli-

hautnah
 Diagnostik

Abb. 5 8 Die DIF bei AIBD vom Pemphigoidtyp

zeigt lineare Ablagerungen von C3 und IgG an
der BMZ
Abb. 6 8 Salt-split-skin-Untersuchung: In (a) haben die im Patientenserum vorhandenen Autoanti-
körper an den Blasenboden gebunden, in (b) ans Blasendach. Am Blasenboden verbleiben nach Spalt-
induktion: Laminin 332, Laminin γ1 und Kollagen VII; am Blasendach finden sich BP180, BP230 und
α6β4 Integrin

Abb. 7 8 Die DIF bei der DHD zeigt granuläre

Ablagerungen von IgA insbesondere in den Pa-
pillenspitzen

Abb. 8 8 DIF bei LE: (a) IgG feingranulär in epidermalen Nuclei und schwach granulär an BMZ. (b) IgM
granulär-bandförmig an der BMZ

che von den oben genannten Kriterien
sind daher bei der Beurteilung wichtig.
Ein vor allem noch vor der Verfügbar-
keit von Nachweismethoden für ENAs
verwendeter Test zur Diagnose eines sys-
temischen LE ist der sogenannte Lupus-
bandtest. An einer nichtläsionalen, nicht-
UV-exponierten Hautbiopsie lassen sich
im positiven Fall granulär-bandförmige
Ablagerungen von IgM nachweisen.
Der positive prädiktive Wert einer DIF
beim LE beträgt nur 64 %, vor allem auf-
grund der variablen Resultate abhängig
von der Art der kutanen Beteiligung.
Der negative prädiktive Wert hingegen
erreicht Werte bis zu 98 % [13].
Eine systemische oder lokale immun-
suppressive Therapie kann dabei die
Wahrscheinlichkeit einer positiven DIF-
Untersuchung deutlich reduzieren [14].
„Mixed connective tissue disease“
(MCTD)
Das sensitivste Kriterium für eine MCTD
in der DIF ist der Nachweis von ANAs an
den Zellkernen der Keratinozyten. Hier
findet sich in IgG ein feingranuläres, ge-
sprenkeltes („speckled“) Muster in den
Kernen, bedingt durch Autoantikörper
gegen U1RNP, bei nahezu allen Patien-
ten (. Abb. 8; [15]). Ablagerungen an der
Junktionszone hingegen sind sehr selten.
Dermatomyositis
Die DIF ist bei der Dermatomyositis nicht
diagnostisch, und in nur circa 50 % al-
ler Fälle positiv. Es können sich Ablage-
rungen wie beim LE zeigen, wobei die
Intensität in der Regel deutlich geringer
ist.
Vaskulitis
Die DIF kann hilfreich sein in der Dia-
gnose einer immunkomplexmediierten
Vaskulitis, insbesondere auch der Pur-
pura Schoenlein-Henoch (PSH), erfolgt
aber vor allem in Zusammenschau von
Klinik und Histologie. So ist eine positive
DIF nicht beweisend für eine Vaskulitis,
und eine negative schließt sie nicht aus.
Dies ist vor allem durch falsch-negati-
ve Resultate bei Biopsie älterer Herde zu
begründen, und in möglichen falsch-po-
sitiven bei Biopsie von weit distal an den
Unterschenkeln oder Füßen gelegenen
Läsionen. Aus diesem Grund sollte bei
Verdacht auf eine Vaskulitis eine mög-
lichst proximal gelegene und möglichst
rezent (< 24 h) aufgetretene Hautverän-
derung biopsiert werden.
Im positiven Fall zeigen sich bei der
PSH feingranuläre Ablagerungen von
IgA (manchmal mit IgM) und C3 so-
wie dick und diffus von Fibrinogen an
den postkapillären Venolen des oberen

hautnah
Abb. 9 8 Purpura Schoenlein-Henoch: In der DIF zeigt sich C3 (a) und IgA (b) feingranulär, (c) F dicker an den Gefäßen des
oberen dermalen Plexus
Abb. 10 8 DIF bei Lichen planus: (a) F dick bandförmig und „shaggy“ an der BMZ; (b) traubenförmig
angeordnete „cytoid bodies“ mit Anti-IgM
Gefäßplexus (. Abb. 9). Bei anderen
Immunkomplexvaskulitiden findet sich,
statt IgA, IgG und IgM [16, 17].
Lichen planus
Insbesondere zur differenzialdiagnosti-
schen Abklärung von mukosalen erosi-
ven Veränderungen kann eine DIF sehr
hilfreich sein. Die auch histologisch beim
Lichen planus vorhandenen dyskerato-
tischen Keratinozyten können als soge-
nannte „cytoid bodies“ meistens mit An-
ti-IgA oder -IgM als homogen angefärb-
te Körper sichtbar sein, typischerweise
dicht gelagert in Traubenform (dies kann
ein differenzialdiagnostischer Hinweis zu
anderen Erkrankungen sein, bei denen
ebenfalls CB auftreten).
Daneben stellt sich die Interphasen-
dermatitis durch eine kräftige Anfärbung
der dermoepidermalen Junktionszo-
ne mit Fibrinogen dar, in Form von
bandförmigen Ablagerungen mit häufig
auch zotteligen, netzförmigen („shaggy“)
Ausläufern in die Dermis (. Abb. 10).
Nachdem diese Veränderungen bei ver-
schiedenen Erkrankungen mit Interpha-
sendermatitis auftreten können sind sie
nicht spezifisch, aber charakteristisch
für den Lichen planus, und können so
z. B. auch im Rahmen eines lichenoiden
Arzneimittelexanthems oder einer liche-
noiden GvHD zu beobachten sein. Zu
beachten ist, dass einzelne „cytoid bo-
dies“ auch in gesunder Haut vorkommen
können.
Porphyrien
Bei der Porphyria cutanea tarda, der Por-
pyhria variegata, der erythropoietischen
Protporphyrie, aber auch bei der Pseudo-
porphyrie finden sich einerseits an den
Gefäßen dicke, homogene Ablagerungen
von IgG, manchmal auch IgA und C3.
Daneben zeigen sich an der BMZ gra-
nuläre Ablagerungen von IgM und C3
sowie IgG und eventuell IgA schwach
bandförmig.
Erythema multiforme
In seltenen Fällen kann die DIF beim
bullösen EM zur Abgrenzung gegenüber
AIBD hilfreich sein, es finden sich hier
häufig C3, F und selten IgM an den Ge-
fäßen sowie C3 und F an der BMZ, au-
ßerdem „cytoid bodies“ [18, 19].
Epidermolysis bullosa
hereditaria
Die DIF ist insbesondere aufgrund ihrer
raschen und einfachen Durchführbarkeit
die Methode der Wahl zur orientieren-
den Diagnostik der hereditären Epider-
molysis bullosa [20]. Es wird eine Biopsie
von einer nicht-UV-exponierten Stelle
am Rand einer Blase entnommen, wobei
ein kleiner Anteil der Blase idealerweise
mitgetroffen wird. So kann auch die Hö-
he der Spaltbildung mitbeurteilt werden.
Mit Antikörpern gegen möglicherwei-
se betroffene Strukturproteine wird ein
Antigen-Mapping durchgeführt und das
Färbeverhalten mit Normalhaut vergli-
chen. Die Anwesenheit oder das Fehlen,
die verminderte oder veränderte Expres-
sion von Proteinen wird dabei beurteilt.
Die DIF kann auf diese Weise erste Re-
sultate bis zum Eintreffen molekularer
Untersuchungsergebnisse liefern.
Schlussfolgerung
Obwohl die DIF eine in ihren Grundzü-
gen sehr alte Untersuchungstechnik ist,
stellt sie nach wie vor den Goldstandard
in der Diagnose einer AIBD dar. Bei zahl-
reichen weiteren Erkrankungen kann sie
wichtige differenzialdiagnostische Hin-
hautnah
 Diagnostik
weise geben. Die wichtigsten Grundmus-
ter sind:
4 das ICS-Muster mit IgG/C3 bei
Pemphiguserkrankungen,
4 lineare IgG/C3-Ablagerungen an der
BMZ bei Pemphigoiderkrankungen,
4 granulär-bandförmige Ablagerungen
von Immunglobulinen und Kom-
plement an der BMZ, v. a. beim LE,
seltener bei anderen Kollagenosen,
4 Immunglobulin- und Komplemen-
tablagerungen an den Gefäßen bei
Vaskulitis,
4 dickes bandförmiges Fibrinogen an
der BMZ sowie „cytoid bodies“ bei
lichenoiden Erkrankungen.
Das Ergebnis einer DIF-Untersuchung
sollte immer im klinischen und histopa-
thologischen Kontext beurteilt werden.
Korrespondenzadresse
Dr. Wolfgang Bauer
Universitätsklinik für Dermatologie,
Medizinische Universität Wien
Währinger Gürtel 18–20, 1090 Wien, Österreich
wolfgang.bauer@meduniwien.ac.at
Funding. Open access funding provided by Medical
University of Vienna.
Einhaltung ethischer Richtlinien
Interessenkonflikt. W. Bauer gibt an, dass kein
Interessenkonflikt besteht.
Für diesen Beitrag wurden von den Autor/-innen
keine Studien an Menschen oder Tieren durchgeführt.
Für die aufgeführten Studien gelten die jeweils dort
angegebenen ethischen Richtlinien.
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die oben aufgeführten Weiterverwendungen des Ma-
terials die Einwilligung des jeweiligen Rechteinhabers
einzuholen.
hautnah
Weitere Details zur Lizenz entnehmen Sie bitte der 19. Bushkell LL, Mackel SE, Jordon RE (1980) Erythema
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