Immuno
Wo entstehen Antikörper?
Beschreibe die Struktur eines
Antikörpers.
Wie wird die variable
Genregion konstruiert?
Welche Gensegmente tragen
zur Codierung der CDR3-
Region bei?
Was macht die CDR3-Region
besonders?
Welchen Zweck erfüllen die
AK, die auf der Oberfläche der
B-Zellen präsentiert werden?
Wie werden aus
membranständigen lösliche
AK?
Wie kann die AID sekundäre
Diversität erzeugen?
Wie werden bei den variablen
Regionen (V) der
Immunglobuline bessere
Antigenbindungen
ermöglicht?
Was sind Isotypen bei AK?
Vorlesung Antikörper
- Naive B-Zellen entstehen im Knochenmark, reifen dort
aus und werden selektioniert, präsentieren Antikörper an
ihrer Oberfläche
- Naive B-Zellen deren Antikörper an Zelloberflächen
Antigene binden, werden aussortiert
- B-Zelle, deren Antikörper an fremdes Antigen binden,
werden aktiviert
 Differenzieren sich in Plasma-Zellen und Gedächtniszellen
2 Teile:
- Fab: Antigenerkennung durch 6 CDR-Regionen
(complementary determining region) (variable Region)
- Fc: Effektorfunktionen, Rekrutierung von Zellen
(konstante Region)
- Bestehen aus 2 heavy chains und 2 light chains
Aus Gensegmenten V-J für die leichte und V-D-J Rearrangierungen
für die schwere
V: variable
D: diversity
J: joining
C: constant
D- und J-Gene
Ist die Region mit der höchsten Diversität.
Jede B-Zelle trägt „ihren“ AK als Antigenrezeptor (B-Zell-Rezeptor)
auf der Oberfläche.
- ITAMs senden Signale an Cytoplasma  Produktion von
AK
- Immunoreceptor Tyrosine based Activation Motifs
Wenn B-Zelle aktiviert wird und zur Plasmazelle ausdifferenziert,
fängt sie an durch „Wegsplicen“ des Transmembranteils des B-Zell
Rezeptors lösliche AK zu produzieren.
Activation-Induced cytidine Deaminase
- Bindet Cytosin  macht es zu Uridin
- Punktmutation  induzierte Diversität
durch somatische Hypermutation
 Immer mehr Punktmutationen
Jeder B-Zell Klon kann sein spezifisches VDJ-Exon der schweren
Ketten mit verschiedenen konstanten Teilen rearrangieren.
1
Immuno
Welche verschiedenen AK-
Isotypen gibt es?
Was ist der Unterschied
zwischen linearen und
diskontinuierlichen Epitopen?
Ist die AK-Bindung reversibel?
Was ist der häufigste AK?
Wie kann IgG der Mutter dem
Fetus dienen?
Beschreibe den aktiven
Transportmechanismus von
IgG.
Wo findet sich IgA?
Wie wird IgA transportiert?
Wie wirken AK?
Vorlesung Antikörper
IgG, IgD und IgE als einzelne AK.
IgM: Pentamer
IgA: Dimer
Bei linearen Epitopen sind die Aminosäuren, an die der AK bindet
in der Polypeptidkette nebeneinander angeordnet.
Diskontinuierliche Epitope bestehen aus AS, die sich in
verschiedenen Teilen der Polypeptidkette befinden.
Ja
IgG
Serumkonzentration: 10mg/ml
FcRn: spezieller Rezeptor für IgG-Fc-Teile
 Transportiert IgG über Plazenta zum Fetus
- Monozyte oder Endothelzelle nehmen IgGs auf
(Endozytose)
- Es bildet sich ein saures Endosom
- Im acidified Endosom binden FcRn (neonatal Fc-Rezeptor)
die IgGs
- Sortierungskomplex
- Nicht gebundene IgG werden recycelt
- Gebundene IgG gelangen in Plazenta (Exocytose)
Im GI-Trakt + in der Muttermilch
folglich auch im Fetus
Aktiver Transport über die Endothelbarriere im Darm
- Wird von IgA-sekretierender Zelle gebildet
- Bindet Rezeptor an basolateraler Seite der Epithelzellen
- Endozytose
- Transport durch die Epithelzelle und Release auf apikaler
Seite
1. Neutralisierung
- eines „Bindungsantigens“ auf der mikrobiellen
Oberfläche (Bakterium kann nicht mehr an Zelle binden)
- von (meist bakteriellen) Toxinen (können nicht mehr an
Zelle binden)
2. Aktivierung des Komplementsystems
- 1 IgM oder verschiedene IgG-AK aktivieren eine Kaskade
von Interaktionen
- C1q bindet ein IgM oder mind. 2 IgG
- Gebundenes C1q aktiviert C1r  bis hin zur C3
Konvertase
- Vollstreckungsphase: assembly zum C5 Konvertase
- Bildung des Membrane attack complex (MAC), eine Pore
in der Membra des Pathogens
3. Über Fc-Rezeptoren auf immunologischen Effektorzellen
- AK binden target Zelle
- Fc-Rezeptoren an NK-Zellen erkennen gebundene AK
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Immuno
Wieso werden nicht die ganze
Zeit NK-Zellen von AK
aktiviert?
Wie werden durch die
„hybridoma technology“
monoklonale AK hergestellt?
Wie werden durch „Phage
display“ monoklonale AK
hergestellt?
Was ist der Vorteil der Phage
display Methode gegenüber
der hybridoma technology?
Welche Arten rekombinanter
AK gibt es?
Welches Problem erfolgt bei
einer Therapie mit Mouse
hybridoma AK?
Zwischen welchen Arten von
AK unterscheiden man bei der
Nomenklatur der
monoklonalen AK?
Welche drei Möglichkeiten der
AK-Therapie von
Tumorerkrankungen gibt es?
Vorlesung Antikörper
- Signal an NK-Zelle  killt die target Zelle Apoptose
(Antibody dependent cellular cytotoxicity)
Oder andersrum
- AK bindet Bakterium
- AK bindet Fc-Rezeptor auf Oberfläche von Makrophage
- Phagozytose  Lyse
Effektorfunktion von AK ist selektiv.
 Die meisten Fc-Rezeptoren werden nur durch mehrere,
zellgebundene Fc-Teile aktiviert.
- Zellen, die AK produzieren werden mit Antigen A
immunisiert
- Diese Zellen werden mit immortalen Myelom-Zellen
fusioniert
- Transfer in HAT-Medium
- Immortale Hybridomas proliferieren
- Nicht fusionierte Zellen sterben
- Selektion auf das Hybridoma, welches AK A herstellt
- Klonierung
- Gene, die für variable Region des AK codieren, werden
isoliert
- Variable Region wird mit Phagen coat protein fusioniert
- Klonierung verschiedener variabler Regionen
- Mix von Phagen displays
- Selektion der Phage auf spezifischen Antigenen
Man verwendet humane variable Regionen statt Maus-Zellen
Mouse hybridoma
- Maus AK
- Chimeric (humanes IgG und variable Region der Maus)
- Humanized (framework: human, variable Region aus
Maus CDRs)
Human hybridoma
- Transgenic mouse human hybridoma
Immunogenicity
Patient reagiert auf Maus-AK mit Immunreaktion
- Mouse monoclonal
- Chimeric monoclonal
- Humanized/ CDR-grafted monoclonal
- Phage display synthetic monoclonal
- Fully human/ transgenic human monoclonal
Fc-Verstärkung
- AK bindet Tumorzelle
- NK-Zellen mit Fc-Rezeptoren werden aktiviert + töten
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Immuno Vorlesung Antikörper

Tumorzelle
Immunotoxine
- AK gepaart mit Toxin
- AK-Toxin Konjugat bindet Tumorzelle
- Konjugat tötet Tumorzelle
Radio-Immunkonjugate
- AK gepaart mit Radionuklid
- Radioaktiver AK bindet Tumorzelle
- Tötet Tumorzelle und umliegende Zellen

Welche dieser Methoden ist Fc-Verstärkung ist selektiv.

die selektivste? - AK bindet spezifisch
- Effektorfunktion ist selektiv

Erkläre wie spezifische AK Antigen + Patientenserum + Komplement (C)

durch eine
Komplementbindungsreaktion
serologisch nachgewiesen
werden können.
- Wenn AK im Serum vorhanden, bindet dieses an C
(Komplementbildung). Der an C gebundene AK bindet
sein Antigen
 Kein freies Komplement
 Keine Hämolyse
 Test positiv
- Wenn AK nicht vorhanden, so bleibt C frei und an das
hämolytische System binden
 Freies Komplement
 Hämolyse
 Test negativ